專(zhuān)利名稱(chēng)：一種海帶寡糖及其制備方法和它的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物農(nóng)藥領(lǐng)域，特別涉及一種海帶寡糖及其制備方法和它在制備防治 植物病害藥物方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
生物農(nóng)藥是以生物體為原料而制成的一類(lèi)農(nóng)藥。它的特點(diǎn)是安全可靠，不污染環(huán) 境，對(duì)人畜不產(chǎn)生公害，而且原料易獲得，生產(chǎn)成本低，是當(dāng)前農(nóng)作物病蟲(chóng)害防治中具有廣 闊發(fā)展前景的一種農(nóng)藥。法國(guó)國(guó)家科研中心與法國(guó)海洋研究所通力合作，從被稱(chēng)為“昆布” 的海洋生物中獲得了“昆布素”，并以其為主要原料成功研制出一種新型農(nóng)藥-“I0DUS40” 植物疫苗。該產(chǎn)品的問(wèn)世打破了化學(xué)農(nóng)藥在農(nóng)藥市場(chǎng)上的壟斷地位。該農(nóng)藥具有生物降解 性、無(wú)毒，能事先引起農(nóng)作物的生物防御反應(yīng)，提高農(nóng)作物的“免疫力”和抗病能力，使農(nóng)作 物能時(shí)刻做好準(zhǔn)備，頂住病蟲(chóng)的“襲擊”。因此，從某種角度講，“I0DUS40”是一種植物疫苗。 據(jù)開(kāi)發(fā)公司Go e mar估計(jì)，“I0DUS40”可使全法國(guó)化學(xué)農(nóng)藥使用量降低25%，即3000噸殺 蟲(chóng)劑，這會(huì)大大降低環(huán)境污染程度，使法國(guó)向綠色生態(tài)農(nóng)業(yè)更進(jìn)一步?，F(xiàn)在，“I0DUS40”已 獲得法國(guó)農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的使用許可證。海帶多糖作為生物農(nóng)藥，在2009年3月29日，美國(guó)環(huán)保署官方網(wǎng)站上公告，文件 編號(hào)=File Symbol :83941_R，文件中提到擬批準(zhǔn)登記法國(guó)LaboratoiresGo e mar公司的 (Saint-Malo)生物農(nóng)藥，VacciPlant (海帶多糖3. 5% )，用于防控一系列水果和蔬菜的真 菌與細(xì)菌病害。VacciPlant充當(dāng)疾病抵抗活化劑的角色。美環(huán)保署稱(chēng)，海帶多糖是一種自 然產(chǎn)生的低聚糖，無(wú)毒性且食用后不對(duì)人體造成傷害，無(wú)需進(jìn)行殘留研究。生物農(nóng)藥同化學(xué)農(nóng)藥相比更適合在有害生物綜合防治策略中應(yīng)用。因?yàn)樯镛r(nóng)藥 一般在環(huán)境中較易降解，可降低對(duì)環(huán)境的污染，其中的不少品種具有靶標(biāo)專(zhuān)一的選擇性，使 用后對(duì)人畜和非靶標(biāo)生物相對(duì)安全。某些生物農(nóng)藥的作用方式是非毒殺性的，比化學(xué)合成 農(nóng)藥的作用更為廣泛。因此，不斷尋找農(nóng)作物病蟲(chóng)害防治效果更好的生物農(nóng)藥是非常必要 的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種海帶寡糖。本發(fā)明的第二個(gè)目的在于提供上述海帶寡糖的制備方法。本發(fā)明的第三個(gè)目的在于提供上述海帶寡糖在制備防治植物病害藥物方面的應(yīng)用。一種海帶寡糖，該海帶寡糖是以海帶多糖為原料，經(jīng)自由基降解法、酸解法、堿解 法、鹽解法、酶解法、超聲波降解法或Y-射線(xiàn)降解法降解而得到的寡糖混合物；所述海帶 寡糖為白色粉末，針狀晶體，聚合度為2-30，分子量為342Da-8000Da，21g/L海帶寡糖水溶 液的旋光度為-11. 9° -12. 1°。上述海帶寡糖的制備方法，具體技術(shù)方案為首先采用自由基降解法、酸解法、堿
4解法、鹽解法、酶解法、超聲波降解法或Y-射線(xiàn)降解法將海帶多糖降解，然后減壓蒸餾濃 縮降解后的溶液至原體積的三分之一，再向濃縮后的溶液中加入其三倍體積的乙醇，混勻 后結(jié)晶、真空干燥，從而得到海帶寡糖；所述自由基降解法是將海帶多糖水溶液加熱至20-90°C，然后向其中緩慢加入相 當(dāng)于海帶多糖質(zhì)量0. 1-5%的引發(fā)劑，降解0. 1-24小時(shí)；所述酸解法是在20-100°C條件下，將海帶多糖加入到0. Ι-llmol/L鹽酸水溶液 中；或?qū)⑵浼尤氲?. l-14mol/L硝酸水溶液中；或?qū)⑵浼尤氲?. l-14mol/L磷酸水溶液中； 或?qū)⑵浼尤氲?. l-17mol/L硫酸水溶液中，降解0. 1_24小時(shí)，其中海帶多糖與酸的摩爾比 小于1/100，零除外；所述堿解法是在20-80°C條件下，向海帶多糖水溶液中加入0. 01-0. lmol/L氫氧 化鈉或氫氧化鉀溶液，降解0. 1-24小時(shí)，其中海帶多糖與氫氧化鈉或氫氧化鉀的摩爾比小 于1/100，零除外；所述鹽解法是在20-80°C條件下，將海帶多糖加入到0.醋酸溶液，然后再 加入0. l-4mol/L亞硝酸鈉溶液，降解0. 1_24小時(shí)，其中，海帶多糖與醋酸的摩爾比小于 1/100，零除外，海帶多糖與亞硝酸鈉的摩爾比小于1/100，零除外；所述酶解法是在10-60°C條件下，將海帶多糖水溶液pH值調(diào)節(jié)為2-6.8，然后向 其中加入酶，其中酶與海帶多糖的質(zhì)量比為0.1-10 100，所述酶為昆布多糖酶，巖藻多糖 酶，幾丁質(zhì)酶，纖維素酶，溶菌酶，脂肪酶，殼聚糖酶，果膠酶，菠蘿蛋白酶和木瓜蛋白酶中的 一種或多種，降解0. 1-24小時(shí)后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH值至6. 5-7. 5 ；所述超聲波降解法是在10_60°C條件下，將海帶多糖水溶液采用振幅0. 1-0. 5cm、 脈沖I-IOs的超聲波處理l_60min ；所述Y-射線(xiàn)降解法是在10-60°C條件下，向海帶多糖水溶液中加入過(guò)氧化氫水 溶液，其中海帶多糖與過(guò)氧化氫的質(zhì)量比小于1/100，零除外，采用、射線(xiàn)輻照，輻照劑量 10-400kGy,降解 0. 1-24 小時(shí)。所述自由基降解法中的引發(fā)劑為過(guò)氧化氫，或當(dāng)量比為1 2 1的氧化劑與還 原劑的混合物，其中，所述氧化劑為過(guò)氧化氫或過(guò)硫酸鉀，所述還原劑為硫代硫酸鈉、亞硫 酸鈉或硫酸亞鐵。所述海帶多糖水溶液的濃度為0. 001-0. lg/mL。一種包含上述海帶寡糖的農(nóng)藥制劑，該制劑是濃度為0. 001-0. lg/mL的海帶寡糖 的水溶液，將該制劑用水稀釋200倍后，可直接噴于病害植物上。所述海帶寡糖在制備防治植物病害藥物方面的應(yīng)用，其中植物病害為真菌、細(xì)菌 或病毒感染，比如，小麥葉銹病，小麥赤霉病，小麥粒線(xiàn)蟲(chóng)病，水稻稻瘟病，水稻細(xì)菌性褐條 病，高粱大斑病，高粱堅(jiān)黑穗病，玉米大斑病，玉米細(xì)菌性條紋病，向日葵莂當(dāng)，向日葵褐斑 病，大麥條紋病，水果潰瘍病，水果炭疽病，煙草花葉病毒病，煙草猝倒病，黃瓜病毒病，黃瓜 細(xì)菌性角斑病，瓜類(lèi)枯萎病，棉花枯萎病，棉花細(xì)菌性角斑病，番茄晚疫病，茄科蔬菜青枯 病，馬鈴薯早疫病，花生青枯病，花生根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病等。植物可以為糧食植物、經(jīng)濟(jì)作物、蔬菜、 果樹(shù)等多種植物。所述的原料海帶多糖的核心結(jié)構(gòu)是以α或—3或6)-D_葡萄糖為主鏈，含 有少量α或—6或3)糖苷鍵支鏈的葡萄糖、甘露糖與半乳糖單元，部分羥基被硫酸酯化和磷酸酯化。本發(fā)明的有益效果本發(fā)明的海帶寡糖是以海帶多糖為原料，通過(guò)特定方法降解 而成的理化性質(zhì)更優(yōu)的海帶寡糖，制備方法快速，簡(jiǎn)便，產(chǎn)率高；該海帶寡糖對(duì)細(xì)菌或真菌 的防治功效要優(yōu)于海帶多糖。
具體實(shí)施例方式下面以實(shí)例來(lái)具體說(shuō)明本發(fā)明的產(chǎn)品，制備及其在農(nóng)作物上防治病害上的效果。 以下實(shí)施例中所用原料海帶多糖購(gòu)自上海億欣生物科技有限公司，多糖含量為95 %，均重 分子量為172000Da。實(shí)施例1自由基降解法制備海帶寡糖及應(yīng)用(1)制備將0. 01g/mL的海帶多糖水溶液加熱至60°C，然后向其中緩慢加入相當(dāng)于海帶多 糖質(zhì)量的1.5%的引發(fā)劑過(guò)氧化氫，降解4小時(shí)，然后減壓蒸餾濃縮降解后的溶液至原體 積三分之一，再向加入濃縮液中加入其三倍體積的乙醇，結(jié)晶并真空干燥，得到固體海帶 寡糖，產(chǎn)率為89%，純度為95%。該寡糖為白色粉末，針狀晶體，聚合度為18，分子量為 3078Da，21g/L海帶寡糖水溶液的旋光度為-12. 1°。(2)應(yīng)用A、將上述方法得到的海帶寡糖配制成0.02g/mL的海帶寡糖水溶液，然后將
0.02g/mL的海帶寡糖水溶液用水稀釋200倍后噴灑到已被灰霉病菌輕度感染的45厘米高 的西紅柿的葉子上，對(duì)照組為3. 5wt%海帶多糖溶液稀釋200倍，同時(shí)設(shè)定空白對(duì)照組清 水。三天后通過(guò)計(jì)量實(shí)驗(yàn)組與空白對(duì)照組的病斑面積之比，確定防治病的效果。結(jié)果見(jiàn)表1。表1實(shí)施例1所得海帶寡糖抗西紅柿灰霉病的結(jié)果 由表1可見(jiàn)，同海帶多糖水溶液相比，海帶寡糖水溶液在防治西紅柿灰霉病的效 果上更好，同時(shí)可以得知達(dá)到相同的處理效果，海帶寡糖的使用濃度要低于海帶多糖。B、將上述0. 02g/mL的海帶寡糖水溶液用水稀釋200倍后噴灑到已被黃萎菌輕度 感染的棉花的葉子上，對(duì)照組仍為3. 5wt%海帶多糖溶液稀釋200倍，同時(shí)設(shè)定空白對(duì)照組 清水。三天后通過(guò)計(jì)量實(shí)驗(yàn)組與空白對(duì)照組的病斑面積之比，確定防治病的效果。結(jié)果見(jiàn) 表2。表2實(shí)施例1所得海帶寡糖抗棉花黃萎菌病的結(jié)果
6 由表2可見(jiàn)，同海帶多糖水溶液相比，海帶寡糖水溶液在防治棉花黃萎菌病的效 果上更好，同時(shí)可以得知達(dá)到相同的處理效果，海帶寡糖的使用濃度要低于海帶多糖。C、將上述0. 02g/mL的海帶寡糖水溶液用水稀釋200倍后直接噴灑到已被炭疽病 菌輕度感染的辣椒的葉子上，對(duì)照處理為3. 5wt%海帶多糖水溶液稀釋200倍，空白對(duì)照組 為只噴清水。三天后通過(guò)計(jì)量實(shí)驗(yàn)組與空白對(duì)照組的病斑面積之比，確定防治病的效果。結(jié) 果見(jiàn)表3。表3實(shí)施例1所得海帶寡糖抗辣椒炭疽病的結(jié)果 由表3可見(jiàn)，同海帶多糖水溶液相比，海帶寡糖水溶液在防治辣椒炭疽病菌的效 果上更好，同時(shí)可以得知達(dá)到相同的處理效果，海帶寡糖的使用濃度要低于海帶多糖。實(shí)施例2酸解法制備海帶寡糖及應(yīng)用(1)制備在80°C條件下，將1. 3g海帶多糖加入到40mL 0. 2mol/L鹽酸水溶液中，降解16 小時(shí)，然后減壓蒸餾濃縮降解后的溶液至原體積三分之一，再向加入濃縮液中加入其三 倍體積的乙醇，結(jié)晶并真空干燥，得到固體海帶寡糖，產(chǎn)率為90%，純度為95%。該寡糖 為白色粉末，針狀晶體，聚合度為10，分子量為1710Da，，21g/L海帶寡糖水溶液的旋光度 為-11. 9°。(2)應(yīng)用將上述海帶寡糖配制成0. 02g/mL的水溶液，再用水稀釋200倍后用于被黃萎菌輕 度感染的棉花的葉子上，兩組對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)置同實(shí)施例1，得到的結(jié)果見(jiàn)表4。表4實(shí)施例2所得海帶寡糖抗棉花黃萎菌病的結(jié)果 由表4可見(jiàn)，同海帶多糖水溶液相比，本實(shí)施例得到的海帶寡糖水溶液在防治棉 花黃萎菌病的效果上更好，同時(shí)可以得知達(dá)到相同的處理效果，海帶寡糖的使用濃度要低 于海帶多糖。實(shí)施例3堿解法制備海帶寡糖及應(yīng)用(1)制備所述堿解法是在60°C條件下，向IOmL的0. lg/mL的海帶多糖水溶液中加入IOOmL 0. 05mol/L氫氧化鈉溶液，降解20小時(shí)，然后減壓蒸餾濃縮降解后的溶液至原體積三分之 一，再向加入濃縮液中加入其三倍體積的乙醇，結(jié)晶并真空干燥，得到固體海帶寡糖，產(chǎn)率 為91 %，純度為94%。該寡糖為白色粉末，針狀晶體，聚合度為15，分子量為2820Da，21g/L 海帶寡糖水溶液的旋光度為-12.0°。(2)應(yīng)用將上述海帶寡糖配制成0. 02g/mL的水溶液，再用水稀釋200倍后用于被炭疽病菌 輕度感染的辣椒的葉子上，兩組對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)置同實(shí)施例1，得到的結(jié)果見(jiàn)表5。表5實(shí)施例3所得海帶寡糖抗辣椒炭疽病的結(jié)果 由表5可見(jiàn)，同海帶多糖水溶液相比，該實(shí)施例得到的海帶寡糖水溶液在防治辣 椒炭疽病菌的效果上更好，同時(shí)可以得知達(dá)到相同的處理效果，海帶寡糖的使用濃度要低 于海帶多糖。實(shí)施例4鹽解法制備海帶寡糖及應(yīng)用(1)制備在70°C條件下，將1.2g海帶多糖加入到IOOmL 0. 6wt %醋酸溶液，然后再加入 IOOmL 0. lmol/L亞硝酸鈉溶液，降解18小時(shí)，然后減壓蒸餾濃縮降解后的溶液至原體積三 分之一，再向加入濃縮液中加入其三倍體積的乙醇，結(jié)晶并真空干燥，得到固體海帶寡糖， 產(chǎn)率為90. 3%，純度為93%。該寡糖為白色粉末，針狀晶體，聚合度為12，分子量為2108Da，
821g/L海帶寡糖水溶液的旋光度為-12. 1°。(2)應(yīng)用將上述海帶寡糖配制0. 02g/mL的水溶液，再用水稀釋200倍后用于被灰霉病菌輕 度感染的西紅柿的葉子上，兩組對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)置同實(shí)施例1，得到的結(jié)果見(jiàn)表6。表6實(shí)施例4所得海帶寡糖抗西紅柿灰霉病的結(jié)果 由表6可見(jiàn)，同海帶多糖水溶液相比，該實(shí)施例得到的海帶寡糖水溶液在防治西 紅柿灰霉病的效果上更好，同時(shí)可以得知達(dá)到相同的處理效果，海帶寡糖的使用濃度要低 于海帶多糖。實(shí)施例5酶解法制備海帶寡糖及應(yīng)用(1)制備在37°C條件下，將0.01g/mL海帶多糖水溶液pH值調(diào)節(jié)為5，然后按1 1的質(zhì)量 比加入果膠酶和昆布多糖酶，其中酶的總量與海帶多糖的質(zhì)量比為1 100，降解16小時(shí)后 用氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH值至7. 0，然后減壓蒸餾濃縮降解后的溶液至原體積三分之一，再向加 入濃縮液中加入其三倍體積的乙醇，結(jié)晶并真空干燥，得到固體海帶寡糖，產(chǎn)率為90%，純 度為95 %。該寡糖為白色粉末，針狀晶體，聚合度為23，分子量為5624Da，21g/L海帶寡糖 水溶液的旋光度為-12.0°。(2)應(yīng)用將上述海帶寡糖配制成0. 02g/mL的水溶液，再用水稀釋200倍后用于被灰霉病菌 輕度感染的西紅柿的葉子上，兩組對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)置同實(shí)施例1，得到的結(jié)果見(jiàn)表7。表7實(shí)施例5所得海帶寡糖抗西紅柿灰霉病的結(jié)果 由表7可見(jiàn)，同海帶多糖水溶液相比，該實(shí)施例得到的海帶寡糖水溶液在防治西 紅柿灰霉病的效果上更好，同時(shí)可以得知達(dá)到相同的處理效果，海帶寡糖的使用濃度要低于海帶多糖。實(shí)施例6超聲波降解法制備海帶寡糖及應(yīng)用(1)制備在40°C條件下，將0. 05g/mL海帶多糖水溶液采用振幅0. 3cm、脈沖5s的超聲波 處理30min，然后減壓蒸餾濃縮處理后的溶液至原體積三分之一，再向加入濃縮液中加入 其三倍體積的乙醇，結(jié)晶并真空干燥，得到固體海帶寡糖，產(chǎn)率為89%，純度為96%。該寡 糖為白色粉末，針狀晶體，聚合度為24，分子量為5931Da，21g/L海帶寡糖水溶液的旋光度 為-11. 9°。(2)應(yīng)用將上述海帶寡糖配制成0. 02g/mL的水溶液，再用水稀釋200倍后用于被炭疽病菌 輕度感染的辣椒的葉子上，兩組對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)置同實(shí)施例1，得到的結(jié)果見(jiàn)表8。表8實(shí)施例6所得海帶寡糖抗辣椒炭疽病的結(jié)果 由表8可見(jiàn)，同海帶多糖水溶液相比，該實(shí)施例得到的海帶寡糖水溶液在防治辣 椒炭疽病菌的效果上更好，同時(shí)可以得知達(dá)到相同的處理效果，海帶寡糖的使用濃度要低 于海帶多糖。實(shí)施例7 Y _射線(xiàn)降解法制備海帶寡糖及應(yīng)用(1)制備在40°C條件下，向0. 005g/mL海帶多糖水溶液中加入過(guò)氧化氫水溶液，其中海帶 多糖與過(guò)氧化氫的質(zhì)量比為1 200，采用Y射線(xiàn)輻照，輻照劑量80kGy，降解2小時(shí)，然 后減壓蒸餾濃縮降解后的溶液至原體積三分之一，再向加入濃縮液中加入其三倍體積的乙 醇，結(jié)晶并真空干燥，得到固體海帶寡糖，產(chǎn)率為91%，純度為93%。該寡糖為白色粉末，針 狀晶體，聚合度為28，分子量為7159Da，21g/L海帶寡糖水溶液的旋光度為-12. 1°。(2)應(yīng)用將上述海帶寡糖配制成0. 02g/mL的水溶液，再用水稀釋200倍后用于被黃萎菌輕 度感染的棉花的葉子上，兩組對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)置同實(shí)施例1，得到的結(jié)果見(jiàn)表9。表9實(shí)施例7所得海帶寡糖抗棉花黃萎菌病的結(jié)果 由表9可見(jiàn)，同海帶多糖水溶液相比，本實(shí)施例得到的海帶寡糖水溶液在防治棉 花黃萎菌病的效果上更好，同時(shí)可以得知達(dá)到相同的處理效果，海帶寡糖的使用濃度要低 于海帶多糖。
權(quán)利要求
一種海帶寡糖，其特征在于，該海帶寡糖是以海帶多糖為原料，經(jīng)自由基降解法、酸解法、堿解法、鹽解法、酶解法、超聲波降解法或γ 射線(xiàn)降解法降解而得到的寡糖混合物；所述海帶寡糖為白色粉末，針狀晶體，聚合度為2～30，分子量為342Da～8000Da，21g/L海帶寡糖水溶液的旋光度為 11.9°～ 12.1°；所述自由基降解法是將海帶多糖水溶液加熱至20 90℃，然后向其中緩慢加入相當(dāng)于海帶多糖質(zhì)量0.1 5％的引發(fā)劑，降解0.1 24小時(shí)；所述酸解法是在20 100℃條件下，將海帶多糖加入到0.1 11mol/L鹽酸水溶液中；或?qū)⑵浼尤氲?.1 14mol/L硝酸水溶液中；或?qū)⑵浼尤氲?.1 14mol/L磷酸水溶液中；或?qū)⑵浼尤氲?.1 17mol/L硫酸水溶液中，降解0.1 24小時(shí)，其中海帶多糖與酸的摩爾比小于1/100，零除外；所述堿解法是在20 80℃條件下，向海帶多糖水溶液中加入0.01 0.1mol/L氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液，降解0.1 24小時(shí)，其中海帶多糖與氫氧化鈉或氫氧化鉀的摩爾比小于1/100，零除外；所述鹽解法是在20 80℃條件下，將海帶多糖加入到0.1 1wt％醋酸溶液，然后再加入0.1 4mol/L亞硝酸鈉溶液，降解0.1 24小時(shí)，其中，海帶多糖與醋酸的摩爾比小于1/100，零除外，海帶多糖與亞硝酸鈉的摩爾比小于1/100，零除外；所述酶解法是在10 60℃條件下，將海帶多糖水溶液pH值調(diào)節(jié)為2 6.8，然后向其中加入酶，其中酶與海帶多糖的質(zhì)量比為0.1 10∶100，所述酶為昆布多糖酶，巖藻多糖酶，幾丁質(zhì)酶，纖維素酶，溶菌酶，脂肪酶，殼聚糖酶，果膠酶，菠蘿蛋白酶和木瓜蛋白酶中的一種或多種，降解0.1 24小時(shí)后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至6.5 7.5；所述超聲波降解法是在10 60℃條件下，將海帶多糖水溶液采用振幅0.1 0.5cm、脈沖1 10s的超聲波處理1 60min；所述γ 射線(xiàn)降解法是在10 60℃條件下，向海帶多糖水溶液中加入過(guò)氧化氫水溶液，其中海帶多糖與過(guò)氧化氫的質(zhì)量比小于1/100，零除外，采用γ射線(xiàn)輻照，輻照劑量10 400kGy，降解0.1 24小時(shí)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海帶寡糖，其特征在于，所述自由基降解法中的引發(fā)劑為過(guò) 氧化氫，或當(dāng)量比為1 2 1的氧化劑與還原劑的混合物，其中，所述氧化劑為過(guò)氧化氫 或過(guò)硫酸鉀，所述還原劑為硫代硫酸鈉、亞硫酸鈉或硫酸亞鐵。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海帶寡糖，其特征在于，所述海帶多糖水溶液的濃度為 0.001-0. lg/mL。
4.一種海帶寡糖的制備方法，其特征在于，首先采用自由基降解法、酸解法、堿解法、鹽 解法、酶解法、超聲波降解法或Y “射線(xiàn)降解法將海帶多糖降解，然后減壓蒸餾濃縮降解后 的溶液至原體積的三分之一，再向濃縮后的溶液中加入其三倍體積的乙醇，混勻后結(jié)晶、真 空干燥，從而得到海帶寡糖；所述自由基降解法是將海帶多糖水溶液加熱至20-90°C，然后向其中緩慢加入相當(dāng)于 海帶多糖質(zhì)量0. 1-5%的引發(fā)劑，降解0. 1-24小時(shí)；所述酸解法是在20-100°C條件下，將海帶多糖加入到0. Ι-llmol/L鹽酸水溶液中；或 將其加入到0. l-14mol/L硝酸水溶液中；或?qū)⑵浼尤氲?. l-14mol/L磷酸水溶液中；或?qū)?其加入到0. l-17mol/L硫酸水溶液中，降解0. 1-24小時(shí)，其中海帶多糖與酸的摩爾比小于1/100，零除外；所述堿解法是在20-80°C條件下，向海帶多糖水溶液中加入0. 01-0. lmol/L氫氧化鈉 或氫氧化鉀溶液，降解0. 1-24小時(shí)，其中海帶多糖與氫氧化鈉或氫氧化鉀的摩爾比小于 1/100，零除外；所述鹽解法是在20-80°C條件下，將海帶多糖加入到0. 1_1襯％醋酸溶液，然后再加入 0. l-4mol/L亞硝酸鈉溶液，降解0. 1-24小時(shí)，其中，海帶多糖與醋酸的摩爾比小于1/100， 零除外，海帶多糖與亞硝酸鈉的摩爾比小于1/100，零除外；所述酶解法是在10-60°C條件下，將海帶多糖水溶液PH值調(diào)節(jié)為2-6. 8，然后向其中加 入酶，其中酶與海帶多糖的質(zhì)量比為0.1-10 100，所述酶為昆布多糖酶，巖藻多糖酶，幾 丁質(zhì)酶，纖維素酶，溶菌酶，脂肪酶，殼聚糖酶，果膠酶，菠蘿蛋白酶和木瓜蛋白酶中的一種 或多種，降解0. 1-24小時(shí)后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至6. 5-7. 5 ；所述超聲波降解法是在10-60°C條件下，將海帶多糖水溶液采用振幅0. 1-0. 5cm、脈沖 Is-IOs的超聲波處理l_60min ；所述Y-射線(xiàn)降解法是在10-60°C條件下，向海帶多糖水溶液中加入過(guò)氧化氫水溶 液，其中海帶多糖與過(guò)氧化氫的質(zhì)量比小于1/100，零除外，采用γ射線(xiàn)輻照，輻照劑量 10-400kGy,降解 0. 1-24 小時(shí)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的海帶寡糖的制備方法，其特征在于，所述自由基降解法中的 引發(fā)劑為過(guò)氧化氫，或當(dāng)量比為1 2 1的氧化劑與還原劑的混合物，其中，所述氧化劑 為過(guò)氧化氫或過(guò)硫酸鉀，所述還原劑為硫代硫酸鈉、亞硫酸鈉或硫酸亞鐵。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的海帶寡糖的制備方法，其特征在于，所述海帶多糖水溶液的 濃度為 0. 001-0. lg/mL。
7.一種包含權(quán)利要求1所述海帶寡糖的農(nóng)藥制劑，其特征在于，該制劑是濃度為 0. 001-0. lg/mL的海帶寡糖的水溶液。
8.權(quán)利要求1所述海帶寡糖在制備防治植物病害藥物方面的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述植物病害為真菌、細(xì)菌或病毒感染。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種屬于生物農(nóng)藥領(lǐng)域的海帶寡糖及其制備方法。該海帶寡糖是以海帶多糖為原料，經(jīng)自由基降解、酸解法、堿解法、鹽解法、酶解法、超聲波降解法或γ-射線(xiàn)降解法降解而得到的多種寡糖的混合物，所述海帶寡糖的聚合度為2～30，分子量為342Da～8000Da，21g/L海帶寡糖水溶液的旋光度為-11.9°～-12.1°。本發(fā)明還公開(kāi)了該海帶寡糖在制備防治植物病害藥物方面的應(yīng)用。該制備方法快速，簡(jiǎn)便，產(chǎn)率高，而且得到的海帶寡糖對(duì)植物病害的防治功效要優(yōu)于海帶多糖。
文檔編號(hào)C08B37/00GK101891904SQ20101021349
公開(kāi)日2010年11月24日 申請(qǐng)日期2010年6月23日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月23日
發(fā)明者寧君, 梅向東 申請(qǐng)人:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所