專(zhuān)利名稱(chēng)：甲基丙烯酸—乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物的用途，具體地說(shuō)涉及甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物在堿性樣品前處理中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著現(xiàn)代分離分析技術(shù)所面對(duì)的分析對(duì)象越來(lái)越復(fù)雜，待分析物的含量越來(lái)越低，樣品的前處理技術(shù)在樣品分析技術(shù)中所占的地位也越來(lái)越重要。各種各樣的前處理技術(shù)與相應(yīng)的吸附材料層出不窮，其共同目的在于可對(duì)樣品中的待分析物進(jìn)行最大程度的富集并同時(shí)除去樣品基底的干擾。
在人們感興趣與關(guān)注的生物樣品、環(huán)境樣品等的分析中，堿性樣品占很大比例。如毒品和興奮劑藥物大部分為堿性物質(zhì)，而殺蟲(chóng)劑和許多臨床上使用的藥物亦為堿性物質(zhì)。對(duì)于此類(lèi)堿性物質(zhì)的分析，由于它們大多存在于復(fù)雜的基質(zhì)中(如尿樣，血樣)，且含量較低，直接的分析較為困難，一般須經(jīng)過(guò)前處理的富集和除雜后方可進(jìn)行定性定量分析。已有的樣品前處理分析方法包括傳統(tǒng)的液液萃取，從70年代末80年代初發(fā)展起來(lái)的固相萃取，以及90年代發(fā)展起來(lái)的固相微萃取等等。對(duì)于后兩種技術(shù)而言，所用的富集材料則主要為可用于中性、酸性和堿性的通用型材料，如十八烷基鍵合硅膠材料，苯乙烯類(lèi)聚合物，聚二甲基硅氧烷等等，缺乏相應(yīng)的針對(duì)性和選擇性。
甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物，其結(jié)構(gòu)式為 甲基丙烯酸與乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯在高分子材料領(lǐng)域有著較為廣泛的應(yīng)用，它可以作為pH敏感的智能材料，應(yīng)用于藥物釋放、酶固定化、化學(xué)傳感器等。該聚合物也較多地應(yīng)用于分子印記聚合物的合成領(lǐng)域，它們分別是最為常見(jiàn)的單體與交聯(lián)劑。但此類(lèi)聚合物作為非印記聚合物材料的性能卻沒(méi)有引起重視。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明就是針對(duì)上述問(wèn)題提供甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物的一種新用途。
本發(fā)明提供的技術(shù)方案是甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物在樣品前處理中的應(yīng)用。
上述甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物可采用文獻(xiàn)報(bào)道的方法或下述方法制備以甲基丙烯酸為單體，乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑，以甲苯和十二醇為致孔劑，偶氮二異丁腈為引發(fā)劑，通過(guò)熱引發(fā)聚合反應(yīng)得到甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物材料。本發(fā)明的具體操作條件為單體甲基丙烯酸(MAA)1mmol交聯(lián)劑乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)4mmol致孔劑甲苯200mg，十二醇1.6g引發(fā)劑偶氮二異丁腈(AIBN)8mg室溫下混合攪拌均勻，通氮?dú)獬?min，灌入密封容器或經(jīng)乙烯基改性石英毛細(xì)管(兩端封口)中，60℃引發(fā)反應(yīng)16h。
于密封容器反應(yīng)得到的聚合物材料，取出后磨碎成粉末狀，以甲醇洗滌除去甲苯和十二醇，浮選取一定粒徑大小的顆粒(如30～50微米)，裝填入固相萃取小柱內(nèi)使用。
于毛細(xì)管內(nèi)得到的整體柱材料以甲醇去除致孔劑后使用。
本發(fā)明以甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物為吸附介質(zhì)，可針對(duì)生物和環(huán)境樣品中的堿性物質(zhì)進(jìn)行高效的富集，可用于環(huán)境監(jiān)測(cè)、毒品興奮劑檢測(cè)、農(nóng)殘檢測(cè)等多個(gè)應(yīng)用領(lǐng)域。具有很好的針對(duì)性和選擇性。特別是應(yīng)用于聯(lián)用技術(shù)(固相萃取/固相微萃取與氣相色譜/液相色譜聯(lián)用)后，可用于樣品的常規(guī)、快速、高通量分析。
甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物具有疏水性的骨架結(jié)構(gòu)和羧酸基的酸性功能團(tuán)，它作為一類(lèi)針對(duì)堿性樣品的吸附介質(zhì)具有很大的潛力。除此之外，此類(lèi)聚合物還有成本低廉，合成方法簡(jiǎn)單、條件溫和，對(duì)于蛋白質(zhì)較為友好等特點(diǎn)，都使得它滿足成為針對(duì)堿性樣品分析的通用型吸附介質(zhì)的基本要求，可以用于生物、醫(yī)藥、毒品與興奮劑分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)等各個(gè)領(lǐng)域。


圖1為本發(fā)明實(shí)施例1中5μg/mL尿樣固相微萃取色譜圖；圖2為實(shí)施例1中5μg/mL尿樣20μL直接進(jìn)樣色譜圖圖3為實(shí)施例1中吸毒嫌疑犯尿樣固相微萃取色譜圖；圖4為本發(fā)明實(shí)施例2中1μg/mL血清樣品固相微萃取色譜圖；圖5為本發(fā)明實(shí)施例2中1μg/mL樣品直接進(jìn)樣(5μL)色譜圖。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物毛細(xì)管整體柱用于管內(nèi)固相微萃取-液相色譜聯(lián)用技術(shù)分析尿樣中的氯胺酮甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物毛細(xì)管整體柱制備取250微米內(nèi)徑的石英毛細(xì)管20cm，經(jīng)1mol/L氫氧化鈉和1mol/L鹽酸活化后，通氮?dú)?60℃烘干。冷卻后灌入(γ-甲基丙烯酰)丙基三甲氧基硅烷的甲醇溶液，40℃反應(yīng)12h。以甲醇洗去未反應(yīng)物后，以氮?dú)獯蹈擅?xì)管。取甲基丙烯酸50mg，乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯430mg，甲苯110mg，十二醇0.8g，AIBN 4mg，混合后攪拌均勻，通氮?dú)?min，以注射器灌入毛細(xì)管中，兩端以硅橡膠封口。于烘箱中60℃反應(yīng)16h。以甲醇洗去致孔劑與未反應(yīng)物。
毛細(xì)管固相微萃取-液相色譜聯(lián)用技術(shù)分析尿樣中的氯胺酮萃取條件以甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物毛細(xì)管整體柱為萃取毛細(xì)管，經(jīng)甲醇、磷酸鹽緩沖液依次活化，樣品溶液萃取流速控制為0.04mL/min，萃取時(shí)間為10min，萃取后以磷酸鹽緩沖液洗滌毛細(xì)管，再以流動(dòng)相控制流速0.02mL/min直接解吸5min至分析柱。
液相色譜分析條件以15mm×4.6mm i.d.Kromasil ODS柱為分析柱，流動(dòng)相為0.05mol/L醋酸銨緩沖液(pH4.5)與甲醇以70∶30(體積比)混合，流速1mL/min，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為223nm。
尿樣分析取健康人尿樣離心取上清液使用，加入體積比1∶1磷酸鹽緩沖溶液(pH6.0)作為樣品基底。將氯胺酮標(biāo)液加入上述樣品中，得到濃度為0.05μg/mL～10μg/mL的一系列工作曲線測(cè)試溶液。經(jīng)萃取后，以峰面積對(duì)濃度作圖得到工作曲線，線性相關(guān)系數(shù)為0.9999，檢測(cè)限為6.4ng/mL，相比于直接進(jìn)樣方法得到的檢測(cè)限189.5ng/mL提高了19.74倍。附圖1為5μg/mL尿樣固相微萃取色譜圖，附圖2為5μg/mL尿樣20μL直接進(jìn)樣色譜圖，圖中峰1為氯胺酮。方法日內(nèi)RSD為0.9％，日間RSD為1.6％。
實(shí)際尿樣分析吸毒嫌疑犯尿樣同樣方法處理后，測(cè)得其尿樣中含有氯胺酮1.88μg/mL，見(jiàn)附圖3，峰1為氯胺酮。
實(shí)施例2甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物毛細(xì)管整體柱用于管內(nèi)固相微萃取-液相色譜聯(lián)用技術(shù)分析血清中的可可堿、茶堿和咖啡因甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物毛細(xì)管整體柱制備同實(shí)施例1管內(nèi)固相微萃取-液相色譜聯(lián)用技術(shù)分析血清中的可可堿、茶堿和咖啡因萃取條件以甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物毛細(xì)管整體柱為萃取毛細(xì)管，經(jīng)甲醇、磷酸鹽緩沖液依次活化，樣品溶液萃取流速控制為0.04mL/min，萃取時(shí)間為6min，萃取后以磷酸鹽緩沖液洗滌毛細(xì)管，再以流動(dòng)相控制流速0.02mL/min直接解吸5min至分析柱。
液相色譜分析條件以15mm×4.6mm i.d.Kromasil ODS柱為分析柱，流動(dòng)相為0.05mol/L醋酸銨緩沖液(pH4.5)與甲醇以70∶30(體積比)混合，流速1mL/min，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm。
血清樣品分析取健康人血清離心取上清液使用，按體積比1∶5加入磷酸鹽緩沖溶液調(diào)節(jié)pH到3.0。將可可堿、茶堿和咖啡因標(biāo)液加入上述樣品中，得到濃度為0.05μg/mL～2μg/mL的一系列工作曲線測(cè)試溶液。經(jīng)萃取后，以峰面積對(duì)濃度作圖得到工作曲線，線性相關(guān)系數(shù)依次為0.9990，0.9998和0.9990。檢測(cè)限為12.0，8.0和6.5ng/mL。方法日內(nèi)偏差RSD為1.9，1.2和2.9％，日間偏差RSD為2.8，2.4和1.4％。附圖4為血清樣品的固相微萃取圖，附圖5為直接進(jìn)樣的色譜圖，圖中峰1為可可堿，峰2為茶堿，峰3為咖啡因。
萃取毛細(xì)管柱的可重復(fù)使用性血清樣品萃取完后，以磷酸鹽緩沖溶液清洗毛細(xì)管即可再次使用，萃取效率無(wú)降低。反復(fù)使用毛細(xì)管壓力未發(fā)現(xiàn)升高。這些現(xiàn)象表明該方法可用于實(shí)際樣品分析，毛細(xì)管可重復(fù)使用使分析成本降低。
權(quán)利要求
1.甲基丙烯酸-乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物在堿性樣品前處理中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及甲基丙烯酸－乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物在堿性樣品前處理中的應(yīng)用。本發(fā)明以甲基丙烯酸－乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合物為吸附介質(zhì)，可針對(duì)生物和環(huán)境樣品中的堿性物質(zhì)進(jìn)行高效的富集，可用于環(huán)境監(jiān)測(cè)、毒品興奮劑檢測(cè)、農(nóng)殘檢測(cè)等多個(gè)應(yīng)用領(lǐng)域。具有很好的針對(duì)性和選擇性。特別是應(yīng)用于聯(lián)用技術(shù)(固相萃取/固相微萃取與氣相色譜/液相色譜聯(lián)用)后，可用于樣品的常規(guī)、快速、高通量分析。
文檔編號(hào)C08F20/10GK1594373SQ200410013388
公開(kāi)日2005年3月16日 申請(qǐng)日期2004年6月29日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月29日
發(fā)明者馮鈺锜, 范毅, 達(dá)世祿 申請(qǐng)人:武漢大學(xué)