專利名稱：人中性粒細胞彈性蛋白酶抑制劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及可用作絲氨酸蛋白酶抑制劑的取代噁二唑、噻二唑和三唑類胨，所述絲氨酸蛋白酶包括人中性粒細胞彈性蛋白酶，也稱為人白細胞彈性蛋白酶。
背景技術：
人中性粒細胞彈性蛋白酶(HNE)是一種對多種免疫刺激產(chǎn)生反應的多形核白細胞(PMN)所分泌的蛋白水解酶。HNE的釋放及其細胞外的蛋白水解活性受精確地調節(jié)，并且是PMN的正常、有益的功能。在正常環(huán)境下，HNE的降解能力受相對較高的α1-蛋白酶抑制劑(α1-PI)血漿濃度的調節(jié)。然而，受刺激的PMN急劇產(chǎn)生活性氧代謝物，其中的一些(例如次氯酸)可以氧化α1-PI上重要的蛋氨酸殘基。已經(jīng)證實，氧化的α1-PI作為HNE抑制劑的能力有限，據(jù)推測該蛋白酶/抗蛋白酶平衡的改變可以使HNE在局部及受控的環(huán)境中產(chǎn)生其降解功能。
盡管存在著蛋白酶/抗蛋白酶活性的平衡，但許多人類疾病狀態(tài)的發(fā)病機理與該控制機制的破壞有關。據(jù)推測，HNE活性的失調是造成成人呼吸窘迫綜合征、膿毒性休克和多器官衰竭的因素。一系列研究也證實PMN及中性粒細胞彈性蛋白酶與心肌缺血-再灌損傷有關。α1-PI水平低于正常的人群發(fā)生肺氣腫的可能性增加。HNE介導的過程涉及其它疾病，例如關節(jié)炎、牙周病、腎小球腎炎、皮炎、牛皮癬、膽囊纖維化、慢性支氣管炎、動脈粥樣硬化、早老性癡呆、器官移植、角膜潰瘍以及噁性腫瘤的侵襲。
目前需要一種有效的HNE抑制劑來作為治療和/或預防彈性蛋白酶介導的疾病的治療和預防用藥物。
發(fā)明概述本發(fā)明的主要目的是提供可用作絲氨酸蛋白酶抑制劑的新化合物，所述絲氨酸蛋白酶包括人中性粒細胞彈性蛋白酶。這些化合物的特征在于它們與HNE相比具有較低的分子量、高的效能和選擇性?？捎盟鼈冇行У仡A防、緩解或治療以蛋白酶降解結締組織為特征的人類疾病。
本發(fā)明的新化合物的結構可用如下結構式(A)表示
其中Z是含羰基的基團，優(yōu)選為含氨基-羰基的基團；基團X和Y彼此獨立的是O、S或N，條件是X和Y中至少有一個是N；R1是烷基、鹵代烷基、烯基、鹵代烯基、炔基、苯基、苯基烯基、苯基烷基或雜芳基。一般地，Z是
或其它任何不影響化合物抑制絲氨酸蛋白酶活性的相當?shù)暮驶鶊F；R2是取代或未取代的烷基、烷氧基、烷硫基、苯基或環(huán)烷基，并且R3是含羰基的基團；或Z是其它任何不影響化合物抑制絲氨酸蛋白酶活性的相當?shù)暮驶鶊F。
本發(fā)明還涉及用于制備結構式(A)化合物的中間體，這些中間體由如下結構式(B)表示
其中，T是可以使游離胺質子化的強酸，X、Y、R1和R2如上所定義。
附圖概述

圖1-3說明本發(fā)明化合物的合成。具體地講，圖1說明1-[(N-羥基)甲酰亞氨基氨基]-1-乙酰氧基-2-芐氧羰基氨基-3-(S)-甲基-丁烷的合成；圖2說明1-[3-[5-取代]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷的合成；圖3說明(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-取代]-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的合成；圖4說明底物和酶亞位點的結合。
發(fā)明詳述如上所述，本發(fā)明涉及取代的雜環(huán)化合物，經(jīng)證實該化合物具有抗人彈性蛋白酶(HLE)〔也稱為人中性粒細胞彈性蛋白酶(HNE)〕的活性。
本發(fā)明的新化合物的結構可用如下結構式(A)表示
其中Z是含羰基的基團，優(yōu)選為含氨基-羰基的基團；基團X和Y彼此獨立的是O、S或N，條件是X和Y中至少有一個是N；R1是烷基、鹵代烷基、烯基、鹵代烯基、炔基、苯基、苯基烯基、苯基烷基或雜芳基。一般地，Z是
或其它任何不影響化合物抑制絲氨酸蛋白酶活性的相當?shù)暮驶鶊F；R2是取代或未取代的烷基、烷氧基、烷硫基、苯基或環(huán)烷基，并且R3是含羰基的基團；或Z是其它任何不影響化合物抑制絲氨酸蛋白酶活性的相當?shù)暮驶鶊F。
本發(fā)明還涉及用于制備結構式(A)化合物的中間體，這些中間體由如下結構式(B)表示
其中，T是可以使游離胺質子化的強酸，X、Y、R1和R2如上所定義。
本發(fā)明的化合物可以進一步描述為如下所示的由(1，2，4)或(1，3，4)噻-或噁二唑或三唑取代的假肽
其中的R3如上所定義，此外，R1是直鏈或支鏈的烷基、烯基、鹵代烯基、炔基；由鹵素、氰基、硝基、鹵代烷基、氨基、氨基烷基、二烷基氨基、烷基、烯基、炔基、烷氧基、鹵代烷氧基、羧基、羰基烷氧基(carboalkoxy)、烷基氨基甲?；?、芳基氨基甲?；?、烷硫基或直鏈或支鏈的鹵代烷硫基基團選擇性取代的苯基、苯基烯基或苯基烷基；雜芳基、雜芳烷基或雜芳烯基，其中的雜芳基為含有一或兩個任意組合形式的雜原子(例如氧、硫或氮)的五或六元單環(huán)，并且該環(huán)被鹵素、氰基、硝基、鹵代烷基、氨基、氨基烷基、二烷基氨基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、鹵代烷氧基、羧基、羰基烷氧基、烷基氨基甲酰基、芳基氨基甲?；?、烷硫基或直鏈或支鏈的鹵代烷硫基基團選擇性地取代。
X和Y彼此獨立地選自被如下基團選擇性取代的氧、硫或氮直鏈或支鏈的烷基、烯基、炔基；由鹵素、氰基、硝基、鹵代烷基、氨基、氨基烷基、二烷基氨基、烷基、烯基、炔基、烷氧基、鹵代烷氧基、羧基、羰基烷氧基、烷基氨甲?；⒎蓟跫柞；?、烷硫基或直鏈或支鏈的鹵代烷硫基基團選擇性取代的苯基、苯基烷基或苯基烯基；雜芳基、雜芳烷基或雜芳烯基，其中的雜芳基為含有一或兩個任意組合形式的雜原子(例如氧、硫或氮)的五或六元單環(huán)，并且該環(huán)被鹵素、氰基、硝基、鹵代烷基、氨基、氨基烷基、二烷基氨基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、鹵代烷氧基、羧基、羰基烷氧基、烷基氨甲?；⒎蓟跫柞；?、烷硫基或直鏈或支鏈的鹵代烷硫基基團選擇性地取代，用以維持該五元芳香雜環(huán)，條件是X和Y中至少有一個是氮。還優(yōu)選當X或Y是取代的氮時，另一個是未取代的氮。
R2是直鏈或支鏈的烷基、烷硫基、烷基硫代烷基、烷氧基、環(huán)烷基、烷基環(huán)烷基、由末端胍、鹵素、氰基、硝基、羥基、鹵代烷基、烷硫基、胍、烷基胍、二烷基胍或脒選擇性取代的苯基或苯基烷基。
在本發(fā)明特別優(yōu)選的實施方案中，R3是如下式I的結構
R1是選擇性取代的苯基烯基、苯基烷基、雜芳基烷基或雜芳基烯基；Y和X選自選擇性取代的N、S和O，條件是X或Y是N；并且R2是2-丙基、芐基、3-胍基或4-脒基芐基。
優(yōu)選的R2取代基包括異丙基、芐基、3-胍基和4-脒基芐基。
根據(jù)本發(fā)明的另一個實施方案，R1是選擇性取代的苯基烷基；Y是O；X是N；并且R2是2-丙基。
R1取代基優(yōu)選選自如下基團三氟甲基、甲基、二氟甲基、2，6-二氟芐基、芐基、2-苯乙基、3-甲氧基芐基、3-苯基丙基、3-三氟甲基芐基、2-甲氧基芐基、2-三氟甲基苯基氯甲基、3-噻吩基甲基、苯乙烯基、4-三氟甲基苯乙烯基、4-甲氧基苯乙烯基、4-甲氧基芐基或苯基。
在此所用的術語“選擇性取代”的意思是當取代時，為單取代至全部取代。
在此所用的術語“烷基”指C1-C15烷基，但優(yōu)選C1-C7。
在此所用的術語“烯基”指C1-C15烯基，但優(yōu)選C1-C7。
在此所用的術語“炔基”指C1-C15炔基，但優(yōu)選C1-C7。
在此所用的術語“芳基”與“苯基”是同義詞，除非另外說明它是選擇性取代的。
已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的噁二唑是絲氨酸蛋白酶人中性粒細胞彈性蛋白酶(HNE)的強效抑制劑。這些化合物被認為是可逆的抑制劑，它們可能會與活性位點的絲氨酸殘基形成過渡態(tài)中間體。這些噁二唑的特征在于，它們與HNE相比具有低的分子量和高的選擇性、以及在生理條件下的穩(wěn)定性。因此，這些化合物可用于預防、緩解和/或治療由與HNE存在有關的降解效應所介導的疾病。它們的用途非常重要，因為它們涉及各種的人體內(nèi)治療，并且還可用作體外的診斷工具。
如上所述，R3還可以是使化合物具有口服活性的基團。使化合物具有口服活性的技術是本領域已知的。例如，R3可以選自下述的式II-VI結構式II
其中X1是N或CH；X2是如下結構式的基團
或，
其中W是H或直鏈或支鏈的烷基；X3是Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Met、或Nle，或N-甲基衍生物、或一個鍵；并且X4是選自如下組成的氨基酸脯氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、環(huán)己基丙氨酸、在硫上選擇性地帶有如下取代基的半胱氨酸直鏈或支鏈的烷基、烯基、或被鹵素、氰基、硝基、鹵代烷基、氨基、氨基烷基、二烷基氨基、烷基、烷氧基、鹵代烷基、羧基、羰基烷氧基、烷基羧酰胺基、芳基羧酰胺基、烷硫基、直鏈或支鏈的鹵代烷硫基基團選擇性取代的苯基；苯丙氨酸、二氫吲哚-2-羧酸、被如下基團選擇性地取代的四氫異喹啉-2-羧酸直鏈或支鏈的烷基、烯基、鹵代烷基、炔基，鹵素、氰基、硝基、鹵代烷基、氨基、氨基烷基、二烷基氨基、烷氧基、鹵代烷氧基、羰基、羰基烷氧基、烷基羧酰胺基、芳基羧基酰胺基、烷硫基、或直鏈或支鏈的鹵代烷硫基基團；色氨酸、纈氨酸、正纈氨酸、正亮氨酸、八氫吲哚-2-羧酸、被H、烷基羧基或芳基羧基選擇性地取代的賴氨酸、在氮上選擇性地帶有如下取代基的甘氨酸氫、烷基、環(huán)烷基、苯基、二環(huán)烷基、雜芳基、烯基、炔基、環(huán)烷基烷基、二環(huán)烷基烷基、烷氧基烷基、烷基硫代烷基、烷氨基烷基、稠合的芳基-環(huán)烷基烷基、稠合的雜芳基環(huán)烷基、二烷氨基烷基、羧基烷基或烷氧羰基烷基。
R3還可以是結構式III，
結構式IV
或結構式V
其中Z2和Z5是選擇性取代的烷基、芳基或芳烷基；Z3是選擇性取代的烷基、環(huán)烷基、烯基、芳基、芳烷基、脂肪族雜環(huán)或芳香族雜環(huán)；Z4和Z6是氫或甲基；A是選自如下組成的基團
并且n是0、1或2；此外，R3還可以是如下結構式所表示的結構式VI
其中G是氮或碳；J1和J2彼此獨立地被氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、烷芳基或烷基雜芳基取代，并且J3選自氫、烷基?；?、芳基酰基、或烷芳基?；⑼榛?SO2-、芳基-SO2-、烷芳基-SO2-、雜環(huán)-SO2-、烷基-NH-SO2-、芳基-NH-SO2-、烷芳基-NH-SO2-、或雜環(huán)-NH-SO2-。當G是碳時，則該碳原子可以被氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、烷芳基或烷基雜芳基取代。
本發(fā)明的另一個重要實施方案是提供如下結構式(B)的新中間體
其中，T是可以使游離胺質子化的強酸，并且X、Y、R1和R2如上所定義。
合成上述R3部分的方法記載于EPA 0529568 A1(結構式II)；美國專利5055450(結構式III-V)；EPA 0528633；Warner等，藥物化學雜志373090-3099(1994)；Damewood等，藥物化學雜志373303-3312(1994)；Bernstein等，藥物化學雜志373313-3326(1994)(結構式VI)。
本發(fā)明的化合物不限于用于抑制人彈性蛋白酶。彈性蛋白酶是一類被稱為絲氨酸蛋白酶中的一員。這類酶還包括，例如糜蛋白酶、組織蛋白酶G、胰蛋白酶和凝血酶。這些蛋白酶均含有一個由絲氨酸-195、組氨酸-57和天冬氨酸-102(糜蛋白酶位次編排系統(tǒng))組成的催化三聯(lián)。存在于這些氨基酸殘基之間的精確的氫鍵網(wǎng)使絲氨酸-195的羥基可以和酰胺底物的羰基形成一個四面體中間體。該中間體的分解導致游離胺和?；说拿傅尼尫拧Ｔ陔S后的步驟中，新形成的酯水解釋放出天然酶和羧酸。正是該羧基部分促成了酶的特異性。在羧基部分是肽的例子中，氨基酸的α-取代基主要負責酶的特異性。用由Schechter和Berger提出的公認的亞位點命名方法〔生物化學與生物物理學研究通訊，27；157(1967)和生物化學與生物物理學研究通訊，32；898(1968))〕，將底物上發(fā)生斷裂的氨基酸殘基定義為P1…Pn朝向N-末端和P1…Pn朝向C-末端。因此，易斷裂的鍵是肽亞位點上P1和P1殘基之間的鍵。一個相似的命名方法用于含有結合袋的酶的氨基酸殘基，該結合底物可容納底物上的亞位點。其不同之處在于酶的結合底物用S1…Sn表示，而不向底物那樣用P1…Pn表示(圖4)。
圖4定義絲氨酸蛋白酶特異性的P1殘基的特征是熟知的(參見表1)。依據(jù)P1殘基的差別可以將蛋白酶分成三個亞類彈性蛋白酶、胃促胰酶和類胰蛋白酶。彈性蛋白酶優(yōu)選小的脂肪族殘基(如纈氨酸)，而胃促胰酶和類胰蛋白酶分別優(yōu)選大的芳香族疏水性殘基和帶正電荷的殘基。
另一個不屬于這些類別的蛋白酶是脯氨?；逆渻?nèi)切酶。定義特異性的P1殘基是脯氨酸。該酶與早老性癡呆患者的記憶喪失有關。最近發(fā)現(xiàn)由α-酮雜環(huán)組成的抑制劑可以抑制脯氨?；逆渻?nèi)切酶；Tsutsumi等，藥物化學雜志，373492-3502(1994)。依此類推，由結構式I定義的α-酮雜環(huán)也可以引起酶P區(qū)內(nèi)結合的增加。表1.定義蛋白酶特異性的P1特征蛋白酶 代表 P1彈性蛋白酶 人中性粒細胞 小的脂肪族殘基彈性蛋白酶胃促胰酶α-糜蛋白酶， 芳香族或大的組織蛋白酶G 疏水性殘基類胰蛋白酶 凝血酶、胰蛋白酶、脲激酶、帶正電荷的殘基血漿Killikrein、血漿酶原致活酶、血漿酶其它脯氨酰基肽鏈內(nèi)切酶脯氨酸由于底物的特異性主要由P1殘基定義，因此本發(fā)明涉及P1-Pn的修飾，特別是由1，3，4-噁二唑、1，2，4-噁二唑、1，3，4-噻二唑、1，2，4-噻二唑、1-取代和4-取代的1，2，4-三唑組成的α-取代的酮雜環(huán)。通過改變α-取代基和雜環(huán)上的取代基，可以使這些化合物的特異性針對所需的蛋白酶(例如小的脂肪族基團用于針對彈性蛋白酶)。
這些化合物治療各種疾病的效力可以通過本領域公知的科學方法進行測定。以下為HNE介導的疾病的例子-對于急性呼吸窘迫綜合征，可以使用根據(jù)人中性粒細胞彈性蛋白酶(HNE)模型〔AARD141227-677(1990)〕或內(nèi)毒素介導的小豬急性肺損傷模型〔AARD142782-788(1990)〕的方法；-在缺血/再灌注中，可以使用根據(jù)狗再灌注損傷模型的方法〔臨床調查雜志，81624-629(1988)〕。
本發(fā)明還提供含有文中結構式所表示化合物的藥物組合物以及合成該化合物的方法，包括生產(chǎn)本發(fā)明的化合物所用中間體的合成方法。
本發(fā)明的化合物優(yōu)選制成適當?shù)乃幬镏苿┑男问剑缬糜诳诜o藥的片劑、膠囊或酏劑，或用于胃腸外給藥的無菌溶液或懸浮液。它們可以以5至500mg每位患者的劑量范圍向需要治療的患者(人和動物)進行多次給藥，從而達到5至2000mg每位患者的每日劑量。所述劑量可以依據(jù)疾病的嚴重程度、患者的體重以及其它因素而改變。
可以通過將10至500mg的化合物或其混合物或其生理可接受的鹽與生理可接受的溶媒、載體、賦性劑、粘合劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、矯味劑等配制成公認的藥學實踐所要求的單位劑量形式將化合物配制成藥物組合物。這些組合物或制劑中的活性成分的含量為可以達到指定范圍內(nèi)的合適劑量的活性成分量。
可摻入片劑、膠囊等的輔料的例子是粘合劑，例如黃蓍膠、阿拉伯膠、玉米淀粉或明膠；賦性劑，例如微晶纖維素；崩解劑，例如玉米淀粉、預膠化淀粉、藻酸等；潤滑劑，例如硬脂酸鎂；甜味劑，例如蔗糖、乳糖或糖精；矯味劑，例如薄荷、冬青油或櫻桃油。當劑量單位形式是膠囊時，除以上類型的物質外，它還可以含有液體載體如脂肪油。還可以含有其它各種材料如包衣劑或可以改善劑量單位外觀的物質。例如，片劑可以用紫膠、糖或二者的混合物進行包衣。糖漿或酏劑可以含有活性化合物、甜味劑(如蔗糖)、防腐劑(如對羥基苯甲酸甲酯和丙酯)、染料和矯味劑(例如櫻桃香精或橙香精)。
用于注射的無菌組合物的配制可以根據(jù)常規(guī)的藥學實踐，通過將活性物質溶于或懸浮于溶媒(例如注射用水；天然植物油，如蓖麻油、可可油、花生油、棉籽油等；或合成的脂溶媒，如油酸乙酯等)中來進行。可隨需要加入緩沖劑、防腐劑、抗氧劑等。含有本發(fā)明化合物的藥物組合物還可以進行局部給藥。這可以通過簡單地制備給藥化合物的溶液來完成，優(yōu)選使用已知可促進透皮吸收的溶劑，例如乙醇或二甲基亞砜(DMSO)，溶液中可含或不含其它的賦性劑。局部給藥優(yōu)選用貼劑來實現(xiàn)，該貼劑可以是藥庫或多孔膜的形式，或者是固體基質的形式。
在美國專利號3742951、3742951、3797494、3996934和4031894中記載了一些合適的透皮裝置。這些裝置一般含有裱被層(構成裝置的一個表面)、能滲透活性成分的粘附層(構成裝置的另一個表面)和至少一個位于兩層表面之間的含活性成分的藥庫?；蛘?，可以將活性成分包含在多個遍布于可滲透粘附層的微囊中。在各種情況中，均是可滲透活性成分的粘附層與使用者的皮膚或粘膜接觸。如果活性成分是通過皮膚吸收，活性成分以控制的、預先確定的流量向使用者釋放。在微囊的情況中，包封劑也可以起到膜的功能。
在另一種透皮給藥裝置中，本發(fā)明的化合物、藥物活性化合物包含于基質中，并可從基質中以所需的逐漸的、恒定的和控制的速率釋放。該基質可以通過擴散或微孔穿透的形式釋放化合物。該釋放是速控的。這種不需要膜的系統(tǒng)記載于美國專利3921636。在這些系統(tǒng)中，至少有兩種類型的釋放是可行的。當是無孔基質時，以擴散的形式釋放。藥物有效成分溶于基質并在基質中擴散。當藥物有效成分通過液相在基質的孔中轉運時，以微孔穿透的形式釋放。
盡管通過具體所實施方案對本發(fā)明進行了描述，但應當理解，對其進行進一步的改變是可行的，并且本申請包括根據(jù)本發(fā)明的原理對發(fā)明進行的各種改變、應用或修改，還包括根據(jù)本發(fā)明所屬現(xiàn)有技術領域內(nèi)已知或常規(guī)的實踐，從本發(fā)明公開所進行的改變，而且所述改變適用于前述的基本特征，并在所附權利要求的范圍內(nèi)。
實施例本發(fā)明的化合物、其鹽、以及它們的中間體可以按照文中所述或通過化學領域內(nèi)已知的各種方法進行制備或生產(chǎn)。例如，本文所述方法中的最后一步需要將仲醇氧化成結構式I中的酮。這種從醇向酮的轉變可以通過用N-氯琥珀酰亞胺(NCS)和甲硫醚處理并隨后用堿處理的方法來實現(xiàn)。然而，可進行類似轉變的其它方法也是已知的，其中的兩個例子包括用二甲基亞砜和草酰氯處理并隨后用堿處理，和用1，1，1-三乙酰氧基-1，-二氫-1，2-benziodoxol-3(1H)-酮(Dess-Martin s Periodinane)處理。也可使用其它合適的方法，例如有機化學中的氧化反應〔Milos Hudlicky，ACSMonograph 186(1990)〕中所記載的方法。
再例如，通過適當?shù)倪x擇手性氨基醇可引入R2基團，其中的氨基醇是購買到的或是通過本領域技術人員熟知的方法通過還原天然或非天然的氨基酸得到的。將氨基醇選擇性進行保護，使醇可以轉變?yōu)橄鄳娜?。通過另一種方法，氨基保護的醛可以通過還原酰胺的方法制得，其中的酰胺是從所需的氮保護的氨基酸和N，O-二甲基羥胺制得，參見Winreb，四面體通訊，223815(1981)。隨后將醛與2-甲基-2-羥基丙腈反應得到氨基保護的氰醇(參見圖I)。該氰醇還可以通過常規(guī)方法用氰化鈉或氰化鉀制備。另外，也可使用三甲基甲硅烷基氰化物，通過用酸處理O-三甲基硅烷基氰醇中間體完成醛的相同轉變。下一步是保護氰醇的醇，并隨后用羥胺將腈轉變?yōu)轷０冯?。對于該中間體，可以通過酰胺肟胺與活潑R1羧酸的反應在雜環(huán)上引入R1基團?？梢愿鶕?jù)對R1基團進行適當活化的需要將該羧酸通過酰氯或酰氟、酸酐或活潑酯的方式進行活化?？梢詫⑸傻腘-酰化的酰胺肟分離，或將其在升高的溫度下進行環(huán)化反應。如果對N-?；孽０冯窟M行了分離，則可以對其進行鑒定，并隨后在分離的步驟中將其環(huán)化成1，2，4-噁二唑(參見圖II)。
依此類推，1，2，4-三唑可以通過N-取代的肼與上述的腈反應制得。在將每一個可反應的氮?；螅玫降闹虚g體在形成1，2，4-噁二唑所需的相似條件下反應生成1，3，5-三取代-1，2，4-三唑(結構式I，Y＝取代的N并且X＝N)。
如圖III所示，將醇和胺用本領域技術人員公知的方法脫保護，然后將得到的胺與所需的R3羧酸偶聯(lián)。如上所述，最后一步是將仲醇轉變?yōu)橥?。該氧化反應可以通過多種方法來完成，其中之一是將NCS和甲硫醚與仲醇反應得到的中間體用堿處理。通過該方法可以得到酮并且保持鄰近的R2基團的立體化學。
提供以下實施例僅是為了說明本發(fā)明，而并非想以任何方式進行限定i)所給的溫度為攝氏度(℃)；室溫從17℃至26℃；ii)色譜按照Still所述(有機化學雜志，432923(1978))用ICN硅膠(60A)進行，薄層色譜用預先涂布硅膠60 F254(25mm)板進行(EMScience)；iii)NMR化學位移用百萬分之(ppm)表示，對1H為相對于四甲基硅烷(TMS，0.00ppm)，對13C為相對于氘代氯仿(CDCl3，77.00ppm)；1H數(shù)據(jù)中用于峰形的縮寫如下s-單峰；d-兩重峰；t-三重峰；q-四重峰；m-多重峰；br-寬峰；iv)反應過程通過TLC進行監(jiān)測，用UV和/或用KMnO4水溶液染色作為檢測方法，給出的產(chǎn)率和反應時間為示例性的，不應理解為最佳值；v)溶劑的蒸發(fā)用旋轉蒸發(fā)儀在壓力范圍在5和35mm Hg的減壓條件下進行；水浴的溫度在17和50℃之間；vi)化學符號具有本領域技術人員所熟悉的標準意義，例如，使用了以下符號mmol(毫摩爾)、mol(摩爾)、mL(毫升)、L(升)、mg(毫克)、g(克)、min(分鐘)、h(小時)、TLC(薄層色譜)、Rf(TLC上化合物移動的距離和溶劑移動距離的比值)、RP-HPLC(反相高壓液相色譜)、RT(室溫)。實施例I-合成方法(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-三氟甲基芐基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺氮氣氛圍下，向0℃、攪拌下的0.68g(5.1mmol)N-氯琥珀酰亞胺和15mL干燥甲苯的混合物中加入0.53mL(7.3mmol)甲硫醚(DMS)。加入DMS后有白色沉淀形成。30分鐘后，將形成的懸浮液用四氯化碳干冰浴冷卻至-25℃。滴加(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-三氟甲基芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺(0.84g，1.27mmol)的20mL干燥甲苯溶液。將形成的混合物在-25℃下攪拌3小時，然后加入0.75mL(5.4mmol)三乙胺。15分鐘后，移走冷卻浴并用TLC監(jiān)測反應；硅膠；乙酸乙酯∶己烷(4∶1)。1小時后，將混合物用乙酸乙酯稀釋并用NaHCO3(飽和)、鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥。將得到的殘余物通過柱色譜純化；硅膠，乙酸乙酯∶己烷(1∶1至7∶3)，得到純度為91.7％的半固體。將該物質進一步通過RP-HPLC純化(恒溶劑成分，CH3CN∶H2O(3∶2))，冷凍干燥后得到白色固體狀標題化合物；TLC∶Rf＝0.69，乙酸乙酯∶己烷(4∶1)。
1H NMR(CDCl3)δ
；1.80-2.20(m，4H)；2.25-2.50(m，2H)，3.54-3.70(m，1H)，3.70-3.83(m，1H)；4.30-4.40(m，1H)，4.38(S，2H)；4.63(dd，J1＝2.7Hz，J2＝7.1Hz，1H)；5.11(ABq，J＝12.3Hz，2H)，5.29(dd，J1＝5.0Hz，J2＝7.3Hz，1H)，5.60 d，J＝9.1Hz，1H)；7.30-7.40(m，5H)，7.45-7.64(m，6H).
13C NMR(CDCl3)δ517.24，17.59，19.46，19.81，25.12，27.08，30.26，31.43，32.69，47.78，57.49，59.70，61.53，66.96，123.73(q，J＝272Hz)，124.93(q，J＝3.7Hz)，125.85(q，J＝3.8Hz)，128.01，128.13，128.51，129.63，131.48(q，J＝32.6Hz)，132.44，133.41，136.27，156.42，164.87，171.10，172.29，178.65，189.89.
IR(沉積法)3429.2，3299.0，2968.5，1719.2，1680.3，1632.1cm-1.C33H38N5O6F3％C％H％N％F理論值60.275.8210.658.67實測值60.046.0310.608.08中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-三氟甲基芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a.N-芐氧羰基-L-纈氨醇氮氣氛圍下，向冷卻至0℃的攪拌中的纈氨醇(13.96g，0.14mol)和三乙胺(18.87mL，0.14mol)的250mL干燥二氯甲烷溶液中于20分鐘內(nèi)滴加19.3mL(0.14mol)氯甲酸芐酯。升至室溫過夜，然后將混合物用二氯甲烷(100mL)稀釋并用1N HCl(2次)、鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥。將得到的混合物過濾并蒸發(fā)，得30.70g(95.6％)白色固體狀的N-芐氧羰基-纈氨醇Rf＝0.27(硅膠；1∶1己烷∶乙酸乙酯)。不經(jīng)純化直接使用。
b.N-芐氧羰基-L-纈氨醛氮氣氛圍下，向攪拌中的N-芐氧羰基-L-纈氨醇(8.80g，0.037mol)和三乙胺(30.00g，41.3mL，0.30mol)的100mL二甲基亞砜溶液中通過滴液漏斗滴加三氧化硫吡啶配合物(20.62g，0.130mol)的二甲基亞砜(100mL)溶液。用冰水浴維持反應混合物的溫度，在加料過程中低于室溫。30分鐘后，移走冷卻浴并使反應液在2小時內(nèi)升溫至室溫。將形成的棕色溶液用冷的2N HCl酸化至大約pH2，然后用醚(3×150mL)提取。將合并的有機層用鹽水洗滌，干燥(無水硫酸鎂)并蒸發(fā)得到7.40g黃色油狀的N-芐氧羰基-L-纈氨醛(84.8％)。得到的物質可不經(jīng)純化直接使用，也可用柱色譜進一步純化(硅膠；9∶1己烷∶乙酸乙酯)。
1H NMR(CDCl3)δ0.95(d，J＝7.0Hz，3H)，1.04(d，J＝7.0Hz，3H)，2.20-2.40(m，1H)，4.34(dd，J1＝4.1，J2＝7.4Hz，1H)，5.12(s，2H)，5.37(brs，1H)，7.34(s，5H)，9.65(s，1H).
c.3-(S)-[(芐氧羰基)氨基]-2-羥基-4-甲基戊腈向含有N-芐氧羰基-L-纈氨醛(22.2g，0.094mol)和三乙胺(5.81g，8.0mL，0.057mol)的二氯甲烷(500mL)溶液中加入2-甲基-2-羥基丙腈(24.23g，26.0mL，0.2847mol)。將反應液在室溫下攪拌過夜，然后減壓濃縮。殘余物溶于醚并用鹽水洗滌(3次)。減壓蒸除溶劑并通過柱色譜純化(硅膠；1∶2丙酮∶己烷)，得到21.38g(86.6％)淺黃色油狀的3-(S)-[(芐氧羰基)氨基]-2-羥基-4-甲基戊腈；TLC Rf＝0.33(硅膠；1∶2丙酮∶己烷)。
1H NMR(CDCl3)δ0.92-1.05(m，6H)，[1.80-2.0(m)，2.10-2.30(m)，1H]，[3.45-3.55(m)，3.70-3.80(m)，1H]，4.65(m，1H)，[5.14(s)，5.15(s)，2H]，5.35(d，J＝4.8Hz，1H)，7.36(s，5H).
d.3-(S)-[(芐氧羰基)氨基]-2-乙酰氧基-4-甲基戊腈室溫下，向含有3-(S)-[(芐氧羰基)氨基]-2-羥基-4-甲基戊腈(32.0g，0.12mol)和吡啶(59mL)的溶液中滴加乙酸酐(73.6g，68mL，0.72mol)。3小時后將反應液用乙酸乙酯稀釋并用水洗滌。分出有機層，干燥(無水硫酸鎂)并蒸發(fā)。殘余物通過柱色譜純化(硅膠；1∶1己烷∶乙酸乙酯)得到33.08g(94.0％)黃色粘稠油狀的3-(S)-[(芐氧羰基)氨基]-2-乙酰氧基-4-甲基戊腈；TLC Rf＝0.70(硅膠，1∶1己烷∶乙酸乙酯)。
1H NMR(CDCl3)δ0.95-1.09(m，6H)，1.82-2.20(m，1H)，[2.06(s)，2.09(s)，3H]，3.86-4.04(m，1H)，[4.90(d，J＝8.5 Hz)，4.93(d，J＝9.7 Hz)，1H]，[5.12(s)，5.14(s)，5.15(s)，5.16(s)，2H]，[5.48(d，J＝4.9Hz)，5.58(d，J＝4.0Hz)，1H]，7.36(s，5H).e.1-[(N-羥基)甲酰亞氨基氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷將3-(S)-[(芐氧羰基)氨基]-2-乙酰氧基-4-甲基戊腈(33.0g，0.11mol)、鹽酸羥胺(9.90g，0.14mol)和乙酸鈉(13.2g，0.16mol)在乙醇(330mL)水(66mL)混合物中的溶液于氮氣氛圍下加熱回流3小時。將反應混合物濃縮，用乙酸乙酯稀釋并用水洗滌。將有機層干燥(無水硫酸鎂)、蒸發(fā)并通過柱色譜純化，得22.5g(58.2％)黃色泡沫狀的1-[(N-羥基)甲酰亞氨基氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷。通過RP-HPLC(C18，2∶3乙腈∶含有0.1％TFA的水，恒溶劑成分)。合并純凈的餾分并蒸發(fā)。殘余物溶于乙酸乙酯、用稀的碳酸氫鈉洗滌，干燥(無水硫酸鎂)并蒸發(fā)。將得到的殘余物溶于干燥的乙醚，在氮氣氛圍下冷卻至-78℃并加入1.1當量的4.0N HCl二氧六環(huán)溶液。過濾收集形成的白色固體并干燥。C16H24N305Cl％C％H ％N理論值51.416.4711.24實測值51.306.4011.17f 3-三氟甲基苯乙酰氯向10.00g(48.96mmol)3-三氟甲基苯乙酸的30mL干燥二氯甲烷溶液中于2分鐘內(nèi)加入6.4mL(9.33g，73.44mmol)草酰氯。加入兩滴DMF(有氣體溢出)并將反應液在室溫下攪拌2小時(氣體溢出停止)。將反應液混合物蒸發(fā)(40℃，抽氣泵真空)得到黃色油狀的(3-三氟甲基)苯乙酰氯，10.74g(98.5％)。該產(chǎn)物不經(jīng)純化直接使用。
IR(純品)1796.8cm-1C＝O(酰氯)。g 1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(3-三氟甲基苯乙?；?-氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷氮氣氛圍下，向1-[(N-羥基)甲酰亞氨基氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷(6.74g，20mmol)中加入40mL干燥甲苯和25mL氯仿。將溶液用冰鹽浴冷卻并加入4.2mL(30mmol)三乙胺。5分鐘后，于10分鐘內(nèi)滴加溶于2 5mL氯仿的3-三氟甲基苯乙酰氯(4.67g，21.0mmol)。將反應混合物升至室溫并放置過夜。用TLC(硅膠；乙酸乙酯∶己烷，1∶1)測定反應終點。用KMnO4水溶液顯色，酰胺肟可以在室溫下顯色而產(chǎn)物則需要加熱。將混合物減壓蒸發(fā)并將殘余物通過柱色譜純化(硅膠；乙酸乙酯∶己烷，50∶50至70∶30)，得4.08g(40％)米色固體狀1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(3-三氟甲基苯乙?；?-氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷。
1H NMR(CDCl3)δ
；1.82-2.00(m，1H)，[1.95(s)；2.09(s)；3H]；3.80-3.98(m，1H)；[3.80(s)，3.85(s)，2H]，4.80-5.20(m，5H)，5.41(t，J＝6.5Hz，1H)；7.30-7.40(m，5H)；7.40-7.60(m，4H).h. 1-[3-[5-(3-三氟甲基芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基基-3-甲基-丁烷氮氣氛圍下，向1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(3-三氟甲基苯乙酰基)-氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷(4.08g，7.8mmol)中加入干燥甲苯(100mL)并加熱回流60小時。將混合物冷卻至室溫并蒸發(fā)得到油狀物。將得到的物質通過柱色譜純化(硅膠；乙酸乙酯∶己烷，50∶50至60∶40)，得3.62g(91.8％)油狀的1-[3-[5-(3-三氟甲基芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷。
1H NMR(CDCl3)δ
；[1.54-1.68(m)；1.73-1.87(m)，1H]；[2.05(s)；2.14(s)；3H]；4.00-4.20(m，1H)，[4.24(s)，4.31(s)；2H]；[4.99(s)，5.09(s)，2H]；[5.03(d，J＝10.5Hz)，5.37(d，J＝10.5Hz)；1H]，[6.08(d，J＝1.8Hz)，6.10(d，J＝4.4Hz)，1H]，7.28-7.62(m，9H).i.1-[3-[5-(3-三氟甲基芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇向1-[3-[5-(3-三氟甲基芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷(3.62g，7.16mmol)中加入70mL甲醇并攪拌至形成均相(10分鐘)。向形成的溶液中加入碳酸鉀(1.19g，8.59mmol)在20mL水中的溶液。通過TLC監(jiān)測反應(硅膠；乙酸乙酯∶己烷，7∶3)。45分鐘后，將反應液用乙酸乙酯稀釋并用水洗滌(2次)。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸除溶劑。殘余物通過柱色譜純化(硅膠；乙酸乙酯∶己烷，50∶50至60∶40)，得2.54g(74.1％)1-[3-[5-(3-三氟甲基芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇。
1H NMR(CDCl3)δ
；[1.61-1.75(m)；1.91-2.05(m)；1H]；[3.42(d，J＝7.8Hz)，3.60(d，J＝6.4Hz)；1H]；[3.75-3.85(m)，3.94-4.04(m)，1H]；[4.22(s)，4.26(s)；2H]；4.95-5.10(m，3H)；[5.24(d，J＝9.4Hz)，5.27(d，J＝9.9 Hz)，1H]；7.20-7.60(m，9H).j. 1-[3-[5-(3-三氟甲基芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽將胺、1-[3-[5-(3-三氟甲基芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇在室溫下溶于20mL三氟乙酸。溶解后，立即將混合物在冰浴中冷卻并加入茴香硫醚。將得到的混合物升至室溫并放置過夜，然后蒸發(fā)得到油狀物。將該油狀物溶于50mL干燥的乙醚(0℃)并加入1.5當量的HCl二氧六環(huán)溶液形成固體。使懸浮液沉降并傾去乙醚。加入另一部分乙醚(50mL)并將其傾掉，以除去殘余的茴香硫醚。所得固體緩慢地變成油狀，將油在真空下(≈1mmHg)干燥5小時得到0.96g(49.4％)1-[3-[5-(3-三氟甲基芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽。
1H NMR(CDCl3)δ0.98-1.50(m，6H)；1.86-2.06(m，1H)；3.58-3.80(m，1H)；4.20-4.40(m，2H)，[5.25(d，J＝8.0Hz)，5.37(d，J＝3.4Hz)，1H]，6.60-7.20(brs，1H)，7.20-7.70(m，4H)，7.90-8.20(brs，3H).k. (芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-三氟甲基芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺將Cbz-Val-Pro-OH(1.09g，2.83mmol)在30mL干燥DMF中的溶液在冰鹽浴中冷卻。攪拌下，向該混合物中依次加入HOBt(0.45g，3.34mmol)和EDCI(0.52g，2.70mmol)。攪拌30分鐘后，滴加1-[3-[5-(3-三氟甲基芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽(0.94g，2.57mmol)在20mLDMF中的溶液，隨后加入N-甲基嗎啉(0.39g，3.85mmol)并將反應液在0℃下攪拌過夜。將混合物用乙酸乙酯(250mL≈)稀釋并用飽和NaHCO3(2次)、5％KHSO4和鹽水洗滌，有機層用無水硫酸鎂干燥。將混合物過濾并減壓蒸除溶劑。殘余物經(jīng)柱色譜純化(硅膠；乙酸乙酯∶己烷，60∶40至75∶25)得到白色泡沫狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-三氟甲基芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺固體；0.88g(51.9％)。
1H NMR(CDCl3)δ0.75-1.15(m，12H)；1.70-2.30(m，5.5H)，2.40-2.65(m，0.5H)；3.45-3.60(m，1H)；3.61-5.85(m，1H)，3.90-4.05(m，1H)；4.10-4.65(m，2H)；[4.23(s)，4.30(s)，2H]；4.75-5.15(m，3H)；5.30-5.85(m，1H)；[6.91(d，J＝9.2Hz)，7.08(d，J＝9.5Hz)，1H]；7.15-7.80(m，9H)；[8.02(d，J＝8.6Hz)，8.38(d，J＝8.6Hz)，1H]；實施例II(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(2-苯乙基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物用與實施例I所述相似的氧化方法制備，不同的是使用(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(2-苯乙基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺作為醇；經(jīng)RP-HPLC(恒溶劑成分，CH3CN∶H2O，3∶2)得到白色固體狀的分析樣品；1H NMR(CDCl3)δ
；1.80-2.20(m，4H)；2.22-2.40(m，2H)；3.18-3.36(m，5H)；3.57- 3.69(m，1H)；3.70-3.86(m，1H)；4.36(dd，J1＝6.6Hz；J2＝9.0 Hz ；1H)；4.63(dd，J1＝2.9Hz，J2＝8.2Hz，1H)；5.10(ABq，J＝12.4Hz，2H)；5.32(dd，J1＝4.9Hz，J2＝7.6Hz，1H)；5.66(d，J＝9.1Hz，1H)；7.18-7.40(m，10H)；7.45(d，J＝7.40Hz，1H)
13C NMR(CDCl3)δ17.24，17.59，19.45，19.76，25.11，27.23，28.41，30.41，31.44，32.39，47.76，57.52，59.76，61.49，66.93，126.82，127.99，128.09，128.17，128.48，128.73，136.32，138.88，156.44，164.74，171.09，172.20，180.62，190.18IR(沉積法)3298.4，2964.8，1719.1，1683.9，1630.6，1525.7，1452.9，1230.4cm-1.C33H41N5O6％C％H ％N理論值65.656.8511.60實測值65.506.6811.61中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(2-苯乙基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a.苯基丙酰氯向3-苯基丙酸(15.00g，0.15mol)和50mL無水二氯甲烷的混合物中于5分鐘內(nèi)加入10.9mL(0.15mol)草酰氯。將該混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物蒸發(fā)(40℃，抽氣泵真空)得到油狀物，將其蒸餾(bp0.9mmHg74-75℃)后得到15.14g(89.9％)無色澄清液體狀產(chǎn)物。
IR(純品)1790.4cm-1。b.1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(3-苯基丙?；?-氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基3-甲基-丁烷該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法制備，不同的是用3-苯基丙基氯作為酰氯；得米色固體，49.1％。
1H NMR(CDCl3)δ
；1.82-1.96(m，1H)；[1.91(s)，2.06(s)，3H]；2.66-2.80(m，2H)；2.92-3.04(m，2H)；3.82-3.94(m，1H)；4.76-5.42(m，6H)，7.10-7.50(m，10H).
c.1-[3-[5-(2-苯乙基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧基氨基-3-甲基-丁烷該化合物按照實施例I所述的環(huán)化反應用1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(3-苯基丙酰基)-氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲-丁烷制備；得油狀物(產(chǎn)率86.7％)。
1H(CDCl3)δ
；[1.28-1.44(m)；1.68-1.84(m)；1H]；[2.05(s)，2.12(s)；3H]；3.04-3.28(m，4H)；3.98-4.10(m，1H)；[5.04(s)，5.13(s)；2H]；5.02-5.06(m，1H)；5.41(d，J＝10.1Hz；1H)；[6.06(d，J＝3.5Hz)；6.09(d，J＝7.8Hz)；1H]；7.12-7.46(m，10H].
d.1-[3-[5-(2-苯乙基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇該化合物用實施例I的水解條件由1-[3-[5-(2-苯乙基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備；得油狀物(產(chǎn)率76.7％)。
1H(CDCl3)δ
；[1.38-1.52(m)，1.91-2.03(m)，1H]；3.02-3.26(m，5H)；[3.76-3.86(m)，3.88-4.00(m)1H]；4.92-5.28(m，4H)，7.15-7.50(m，10H).
e.1-[3-[5-(2-苯乙基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法用1-[3-[5-(2-苯乙基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇制備；得重油(產(chǎn)率81.3％)；1H(CDCl3)δ[1.03(d，J＝6.9Hz)；1.05(d，J＝6.9Hz)；1.09(d，J＝6.9Hz)；6H]；[1.76-1.87(m)，1.87-2.01(m)，1H]；3.02-3.30(m，5H)；[3.62-3.73(m)，3.73-3.83(m)，1H]；[5.28(d，J＝9.0Hz)；5.44(d，J＝3.5Hz)；1H]；6.74-7.06(brs，1H)；7.10-7.42(m，5H)；8.00-8.20(2brs，3H).
f.(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(2-苯乙基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物通過與實施例I所述相似的偶聯(lián)方法用1-[3-[5-(2-苯乙基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇的鹽酸鹽制備，得白色固體狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(2-苯乙基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺(產(chǎn)率46.8％)。
1H(CDCl3)δ0.70-1.14(m，12H)；1.50-2.60(m，6H)；2.90-3.30(m，3H)；3.50-4.90(m，5H)；4.90-5.30(m，9H)；5.40-5.75(m，1H)；6.75-7.65(m，10H).實施例III(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(2-甲氧芐基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物用與實施例I所述相似的氧化方法制備，不同的是使用(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(2-甲氧芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺作為醇；Rf＝0.74(硅膠；4∶1乙酸乙酯∶己烷)。經(jīng)RP-HPLC(恒溶劑成分，CH3CN∶H2O，3∶2)得到白色固體狀的分析樣品；TLC，Rf＝0.74，乙酸乙酯∶己烷(4∶1)。
1H NMR(CDCl3)δ
；1.80-2.20(m，4H)；2.20-2.45(m，2H)； 3.55-3.80(m，1H)；3.70-3.80(m，1H)；3.80(s，3H)，4.35(s，2H)，4.35(dd，J1＝6.8Hz；J2＝9.1Hz；1H)；4.62(dd，J1＝2.6Hz，J2＝7.8Hz，1H)；5.10(ABq，J＝12.4Hz，2H)；5.33(dd，J1＝5.0Hz，J2＝7.6Hz，1H)； 5.61(d，J＝9.2Hz，1H)；6.87-7.00(m，2H)；7.20-7.50(m，7H).
13C NMR(CDCl3)δ17.12，17.55，19.47，19.81，25.12，27.26，27.82，30.42，31.41，47.75，55.41，57.46，59.77，61.37，66.93，110.67，120.74，127.99，128.10，128.49，129.40，130.60，136.27，156.41，157.22，164.73，171.03，172.14，180.17，190.20.
IR(沉積法)3305.5，2965.4，1716.6，1682.7，1633.5cm-1.C33H41N5O7％C％H ％N理論值63.966.6711.30實測值 63.786.4911.19中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(2-甲氧芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a.2-甲氧基苯乙酰氯向2-甲氧基苯乙酸(10.00g，0.060mol)和40mL無水二氯甲烷的混合物中于5分鐘內(nèi)加入7.88mL(0.090mol)草酰氯。將該混合物反應過夜。將混合物蒸發(fā)(40℃，抽氣泵真空)得到油狀物，該油狀物不經(jīng)純化直接使用；10.89g(98.0％)無色澄清液體。
IR(純品)1803.5cm-1。
b.1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(2-甲氧芐基)-氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法制備，不同的是用2-甲氧基苯乙酰氯作為酰氯；得米色固體，32.1％。
1H NMR(CDCl3)δ
；1.82-2.20(m，1H)；[1.91(s)，2.06(s)，3H]；[3.73(s)，3.75(s)，3.79(s)，3.81(s)，3H]；3.80-3.98(m，1H)；4.84-5.46(m，6H)，6.82-6.88(m，2H)；7.90-7.40(m，9H).
c.1-[3-[5-(2-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物按照實施例I所述的環(huán)化反應用1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(2-甲氧芐基)-氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備；得油狀物(產(chǎn)率86.7％)。
1H(CDCl3)δ
；[1.45-1.60(m)；1.70-1.82(m)；1H]；[2.02(s)，2.11(s)，3H]；[3.76(s)，3.77(s)，3H]；4.00-4.18(m，1H)；[4.18(s)，4.23(s)，2H]；4.99-5.14(m，2.5H)；5.59(d，J＝10.0Hz，0.5H)；[6.07(d，J＝3.5Hz)；6.12(d，J＝4.7Hz)，1H]；6.84-6.98(m，2H)；7.16-7.40(m，7H).
d.1-[3-[5-(2-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇該化合物用實施例I的水解條件由1-[3-[5-(2-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備；得油狀物(產(chǎn)率76.7％)。
1H(CDCl3)δ
； [1.52-1.66(m)；1.90-2.30(m)；1H]；[3.12(d，J＝8.2Hz)，3.43(d，J＝5.9Hz)，1H]；[3.75(s)，3.7 6 (s)，3H]；[3.76-3.86(m)，3.90-4.00(m)，1H]；[4.1 8(s)，4.20(s)；2H]；4.96-5.05(m)，5.09(ABq，J＝12.1Hz，2H)；[5.19(d，J＝9.8Hz)；5.40(d，J＝10.7Hz)；1H]；6.80-7.00(m，2H)；7.15-7.45(m，7H).
e.1-[3-[5-(2-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法用1-[3-[5-(2-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇制備；得重油(產(chǎn)率81.3％)；1H(CDCl3)δ
；1.84-2.00(m，1H)；3.58-3.68(m，1H)；[3.71(s)，3.72(s)，3H]；[4.16(s)，4.20(s)，2H]；[5.20(d，J＝8.0Hz)，5.30(d，J＝3.4Hz)，1H]；6.80-6.92(m，2H)；7.10-7.45(m，2H)；7.90-8.20(2brs，3H).
f.(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(2-甲氧芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物通過與實施例I所述相似的偶聯(lián)方法用1-[3-[5-(2-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇的鹽酸鹽制備，得白色固體狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(2-甲氧芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺(產(chǎn)率46.8％)。
1H(CDCl3)δ0.80-1.60(m，12H)；1.60-2.20(m，6H)；3.50-4.70(m，12H)；4.95-5.25(m，3H)；6.80-7.00(m，2H)，7.10-7.50(m，7H).實施例IV(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(三氟甲基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物用與實施例I所述相似的氧化方法制備，不同的是使用(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(三氟甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺作為醇；Rf＝0.64(硅膠；1∶1乙酸乙酯∶己烷)。用柱色譜(硅膠；1∶1乙酸乙酯∶己烷)進行純化，得白色固體(51.7％產(chǎn)率)。
1H NMR(CDCl3)δ 0.82-0.87(2d overlapping，6H)；0.90(d，J＝6.9Hz，3H)；0.96(d，J＝6.9Hz，3H)；1.60-2.10(m，5H)；2.25-2.45(m，1H)；3.45-3.60(m，1H)；3.65-3.80(m，1H)；4.00(t，J＝8.3Hz，1H)，4.43(dd，J1＝4.8Hz，J2＝8.3Hz，1H)，4.81(t，J＝6.0Hz；1H)；5.01(ABq，J＝13.1Hz，2H)；7.25-7.45(bs，6H)；8.62(d，J＝6.5Hz，1H).
13C NMR(CDCl3)δ 17.51，18.41，18.88，19.56，24.45，28.60，29.01，29.74，47.03，57.81，58.61，61.71，65.37，127.62，127.75，128.31，137.06，156.16，164.32，170.04，172.17，188.17.
IR(沉積法)3431，3296，3024，2970，2878，1717，1684，1630cm-1.C26H32N5O6F3％C％H ％N理論值55.025.6812.34實測值54.765.5512.18中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(三氟甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a.1-[3-[5-(三氟甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷氮氣氛圍下，將10.0g(29.64mmol)1-[(N-羥基)甲酰亞氨基氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基基-3-甲基-丁烷和12.4mL(87.79mmol)三氟乙酸酐在180mL干燥甲苯中的溶液加熱至90℃。通過TLC監(jiān)測反應(硅膠；乙酸乙酯∶己烷，1∶1)。20分鐘后減壓蒸除溶劑，殘余物通過柱色譜純化(硅膠；乙酸乙酯∶己烷，1∶1)，得6.35g(51.6％)淺黃色的粘稠油狀產(chǎn)物。
1H(CDCl3)δ0.95-1.10(m，6H)；1.70-1.90(m；1H)；[2.09(s)，2.16(s)，3H]；[3.94-4.06(m)，4.08-4.20(m)1H]；[5.01(s)，5.08(s)；2H]；4.95-5.15(m，1H)；[6.08(d，J＝6.2Hz)；6.13(d，J＝2.7Hz)；1H]；7.20-7.50(m，5H).
b.1-[3-[5-(三氟甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇該化合物用實施例I的水解條件由中間體1-[3-[5-(三氟甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備，得油狀物(產(chǎn)率72.7％)。
1H(CDCl3)δ
；[3.63(d，J＝8.0Hz)，3.73(d，J＝7.1Hz，1H]；[3.66-3.76(m)，3.93-4.03(m)，1H]；4.95-5.24(m，3H)，7.26-7.45(m，5H).
e.1-[3-[5-(三氟甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法用1-[3-[5-(三氟甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇制備；得重
1H(DMSO-d6)δ0.80-1.15(m，6H)，1.85-2.15(m，1H)；3.25-3.35(m，1H)；5.10-5.25(brs，1H)；[8.10(brs)8.15(brs)，3H].
f.(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(三氟甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物通過與實施例I所述相似的偶聯(lián)方法用1-[3-[5-(三氟甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇的鹽酸鹽制備，得白色固體狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(三氟甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺(產(chǎn)率63.1％)；Rf＝0.54，3∶2乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ0.80-1.20(m，6H)；1.80-2.60(m，6H)；3.50-4.70(m，6H)；4.90-5.30(m，3H)；5.40-5.75(m，1H)；6.85-7.20(m，1H)，7.25-7.40(m，5H).實施例V(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(甲基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物用與實施例I所述相似的氧化方法制備，不同的是使用(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺作為醇；Rf＝0.42(硅膠；5∶95，甲醇∶二氯甲烷)。通過硅膠柱色譜(5∶95，甲醇∶二氯甲烷)進行純化，得白色固體(產(chǎn)率57.2％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ
；1.80-2.25(m，4H)；2.25-2.45(m，2H)；2.68(s，3H)；3.55(dd，J1＝5.6Hz，J2＝15.8Hz，1H)；3.71(dd，J1＝7.1Hz，J2＝6.0Hz，1H)；4.01(t，J＝8.3Hz，1H)；4.47(dd，J1＝4.3Hz，J2＝7.9Hz，1H)；4.92(t，J＝6.1Hz，1H)；5.01(ABq，J＝12.6Hz，2H)；7.35(s，5H)；7.40(d，J＝7.0Hz，1H)；7.44(d，J＝8.0Hz，1H).
13C NMR(CDCl3)δ12.12，17.14，17.56，19.26，19.62，24.95，27.22，30.26，31.27，47.62，57.44，59.52，61.27，66.72，127.88，127.94，128.35，136.21，156.37，164.74，171.13，171.99，178.01，190.07.C26H35N5O6·0.5H2O％C％H ％N理論值59.766.9413.40實測值59.986.6913.16中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a.1-[3-[5-(甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物用與實施例IV所述相似的環(huán)化方法制備，不同之處在于使用了乙酸酐，得油狀物(66.9％產(chǎn)率)。
1H(CDCl3)δ0.94(d，J＝6.7Hz)，0.99(d，J＝6.7Hz)，1.00(d，J＝6.7Hz)1.03(d，J＝6.7Hz)，6H)；[1.44-1.66(m)，1.72-1.86(m)，1H]；[2.11(s)，2.12(s)，3H]；[2.53(s)，2.60(s)，3H]；3.95-4.15(m，1H)，5.04(ABq，J＝12.2Hz，2H)，5.04-5.14(m，1H)；[6.05(d，J＝3.4Hz)；6.11(d，J＝4.9Hz)，1H]；7.28-7.40(m，5H).
b.1-[3-[5-(甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇該化合物用實施例I的水解條件由中間體1-[3-[5-(甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備，得油狀物(產(chǎn)率93.2％)。
1H(CDCl3)δ
；[3.09(d，J＝8.2Hz)，3.31(d，J＝5.8Hz)，1H]；[3.72-3.86(m)，3.90-4.01(m)，1H]；4.97-5.20(m，3.5H)，5.35(brd，J＝9.9Hz，0.5H)；7.25-7.45(m，5H).
e.1-[3-[5-(甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法用1-[3-[5-(甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇制備；得重油(產(chǎn)率87.3％)；1H(DMSO-d6)δ
；1.70-1.86(m，1H)；2.62(s，3H)；3.15-3.35(m，1H)；4.85-5.05(m，1H)；7.90-8.10(brs，3H).
f.(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物通過與實施例I所述相似的偶聯(lián)方法用1-[3-[5-(甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇的鹽酸鹽制備，得白色固體狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺(產(chǎn)率44.9％)；Rf＝0.74，9∶1二氯甲烷∶甲醇。
1H(CDCl3)δ 0.80-1.20(m，12H)；1.70-2.25(m，6H)；[2.52(s)；2.59(s)，3H]；3.50-3.85(m，2H)；3.90-4.45(m，3H)；4.45-4.65(m，1H)；[4.69(d，J＝8.1Hz)，4.87(d，J＝11.9Hz)，1H]；4.96-5.16(m，2H)；[5.64(d，J＝9.0Hz)，5.85(d，J＝9.0Hz)，1H]；[6.91(d，J＝9.2Hz)，7.14(d，J＝9.3Hz ，1H]，7.34(brs，5H).實施例VI(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(二氟甲基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物用與實施例I所述相似的氧化方法制備，不同的是使用(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(二氟甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺作為醇；Rf＝0.48(硅膠；3∶2，乙酸乙酯∶己烷)。通過硅膠柱色譜(1∶1，乙酸乙酯∶己烷)進行純化，得白色固體(產(chǎn)率49.2％)。
1H NMR(CDCl3)δ0.93(d，J＝7.0Hz，3H)；0.96(d，J＝7.0Hz，3H)；1.01(d，J＝7.0Hz，3H)，1.03(d，J＝7.0Hz)，1.80-2.20(m，4H)；2.25-2.45(m，2H)；3.55-3.65(m，1H)，3.65-3.85(m，1H)，4.35(t，J＝7.0Hz，1H)；4.64(d，J＝6.0Hz，1H)；5.01(ABq，J＝12.2Hz，2H)；5.21(t，J＝5.6Hz，1H)，5.52(d，J＝9.4Hz，1H)，6.88(t，J＝51.7Hz，1H)，7.36(s，5H)，7.62(d，J＝6.5Hz，1H).
13C NMR(CDCl3)δ17.54，17.63，19.47，19.77，25.16，26.81，30.07，31.46，47.85，57.54，59.59，61.96，67.03，105.31(t，J＝195Hz)，128.04，128.18，128.54，136.27，156.42，164.71，171.17，172.53，188.78.
IR(沉積法)3430，3304，3027，2969，2878，1717，1682，1630cm-1.C26H33N5O6％C％H ％N理論值56.286.0512.74實測值56.815.9712.62中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(二氟甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a.1-[3-[5-(二甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物用與實施例IV所述相似的環(huán)化方法制備，不同之處在于使用了二氟乙酸酐，得油狀物(36.0％產(chǎn)率)。
1H(CDCl3)δ
；1.58-1.92(m；1H)，[2.10(s)，2.15(s)，3H]；3.90-4.20(m，1H)；4.95-5.25(m，3H)，[5.94(t，J＝53.2Hz，5.97(t，J＝53.2Hz)，1H]，[6.12(d，J＝5.2Hz，6.25(d，J＝5.0Hz)，1H)；7.30-7.45(m，5H).
b.1-[3-[5-(二氟甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇該化合物用實施例I的水解條件由中間體1-[3-[5-(二氟甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備，得油狀物(產(chǎn)率70.1％)。
1H(CDCl3)δ
；[1.62-1.86(m)，1.98-2.14(m)，1H]；[3.25(d，J＝6.6Hz)，3.60(d，J＝6.7Hz)，1H]；[3.97(ddd，J1＝5.3Hz，J2＝7.9Hz，J3＝9.8Hz)，4.31(ddd，J1＝5.5Hz，J2＝7.8Hz，J3＝9.7Hz)，1H]；[5.03(s)，5.10(s)，2H]；4.98-5.22(m，2H)；[5.94(t，J＝54.3Hz)，6.72(t，J＝54.3Hz)，1H]；7.27-7.40(m，5H).
e.1-[3-[5-(二氟甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法用1-[3-[5-(二氟甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇制備；得重油(產(chǎn)率81.8％)；1H(DMSO-d6)δ
；1.80-2.00(m，1H)；3.20-3.35(m，1H)；[5.08(t，J＝5.9Hz)，5.15(t，J＝4.8Hz)，1H]；[7.30(t，J＝53Hz)，7.55(t，J＝53Hz)，1H]，8.05(brs，3H).
f.(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(二氟甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物通過與實施例I所述相似的偶聯(lián)方法用1-[3-[5-(二氟甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇的鹽酸鹽制備，得白色固體狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(二氟甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺(產(chǎn)率47.1％)；Rf＝0.27，65％乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ0.84-1.18(m，12H)；[1.78-2.20(m)，2.20-2.32(m)，6H]；3.50-3.65(m，1H)；3.66-3.92(m，1H)；4.11-4.71(m，4H)；5.00-5.15(m，2.5H)；5.17(dd，J1＝7.4Hz， J2＝7.8Hz，0.5H)；[5.49(bd，J＝9.3Hz)，5.64(d，J＝8.8Hz)，1H]；[6.77(t，J＝52.1Hz)，6.80(t，J＝5 2.1Hz)，1H)；[6.88(d，J＝8.7Hz)，7.12(d，J＝8.5Hz)，1H]；7.30-7.45(m，5H).實施例VII(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(芐基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物用與實施例I所述相似的氧化方法制備，不同的是使用(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺作為醇；Rf＝0.30(硅膠；3∶2，乙酸乙酯∶己烷)。該物質通過硅膠柱色譜(3∶2，乙酸乙酯∶己烷)進行純化，得白色固體，59.7％產(chǎn)率。
1H NMR(CDCl3)δ
；1.80-2.20(m，4H)；2.20-2.45(m，2H)；3.55-3.70(m，1H)；3.75-3.85(m，1H)；4.30(s，2H)，4.30-4.40(m，1H)，4.61(dd，J1＝2.4Hz；J2＝7.7Hz；1H)；5.09(ABq，J＝12.0Hz，2H)；5.30(dd，J1＝5.1Hz，J2＝7.1Hz，1H)；5.60(d，J＝9.3Hz，1H)；7.25-7.50(m，11H)13C NMR(CDCl3)δ17.07，17.59，19.29，19.69，24.97，27.26，30.19，31.27，32.82，47.64，57.46，59.56，61.31，66.75，127.75，127.90，127.96，128.37，128.86，128.91，132.47，136.24，156.39，164.71，171.14，172.02，179.44，189.97.
IR(沉積法)3429，3027，3013，2969，1721，1683，1635，1574，1509，1436cm-1.C32H39N5O6·0.5H2O％C ％H％N理論值64.206.7311.70實測值64.006.7711.62中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a. 1-[3-[5-(芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物用與實施例IV所述相似的環(huán)化方法制備，不同之處在于使用了苯乙酸酐，得到的油不經(jīng)純化直接使用；TLC Rf＝0.77，硅膠；乙酸乙酯∶己烷(3∶2)。
b.1-[3-[5-(芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇該化合物用實施例I的水解條件由中間體1-[3-[5-(芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備，得油狀物(產(chǎn)率47.0％)；TLC Rf＝0.47，硅膠；乙酸乙酯∶己烷(1∶1)。
1H(CDCl3)δ
；[1.56-1.72(m)；1.92-2.20(m)；1H]；[3.00-3.08(bd)，3.22-3.30(m)，1H]；3.74-3.86(m，0.5H)；3.90-4.00(m，0.5H)；[4.18(s)，4.21(s)；2H]；4.94-5.32(m，4H )；7.20-7.50(m，10H).
c.1-[3-[5-(芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法用1-[3-[5-(芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇制備；得重油(產(chǎn)率74.9％)；1H(CDCl3)δ
；1.80-2.10(m，1H)；3.60-3.80(m，1H)；4.10-4.28(m，2H)；[5.24(d，J＝8.3Hz)，5.35(d，J＝2.6Hz)，1H]；6.10-6.60(bs，1H)；7.10-7.45(m，5H)；8.17(brs，3H).
f.(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物通過與實施例I所述相似的偶聯(lián)方法用1-[3-[5-(芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇的鹽酸鹽制備，得白色固體狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺(產(chǎn)率74.7％)；TLC Rf＝0.10，硅膠；乙酸乙酯∶己烷(3∶2)。
1H(CDCl3)δ0.70-1.20(m，12H)；[1.65-2.20(m)，2.45-2.60(m)，6H)]；3.42-3.60(m，1H)；3.62-3.75(m，1H)；3.85-4.02(m，1H)；4.10-4.65(m，4 H)；4.71-5.15(m，3H)；5.30-5.65(m，1H)；[5.79(d，J＝9.2Hz)，6.85(d，J＝8.5Hz)，1H)；[7.03(d，J＝9.8Hz)，7.70(brd)，1H]；7.20-7.45(m，10H).實施例VIII(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-甲氧芐基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物用與實施例I所述相似的氧化方法制備，不同的是使用(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-甲氧芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺作為醇；Rf＝0.60(硅膠；4∶1，乙酸乙酯∶己烷)。經(jīng)RP-HPLC(恒溶劑成分，CH3CN∶H2O，60∶40)得到白色固體狀的分析樣品。
1H NMR(CDCl3)δ
；1.85-2.20(m，4H)；2.20-2.40(m，2H)；3.55-3.70(m，1H)；3.70-3.85(m，1H)；3.80(s，3H)，4.28(s，2H)，4.35(dd，J1＝6.9Hz；J2＝8.8Hz；1H)；4.62(dd，J1＝2.6Hz，J2＝7.8Hz，1H)；5.10(ABq，J＝12.4Hz，2H)；5.31(dd，J1＝4.9Hz，J2＝7.5Hz，1H)；5.59(d，J＝9.0Hz，1H)；6.80-7.00(m，3H)；7.20-7.45(m，7H).
13C NMR(CDCl3)δ17.14，17.60，19.46，19.84，25.12，27.28，30.36，31.38，32.99，47.83，55.28，57.34，59.85，61.48，66.99，113.43，114.66，121.25，128.00，128.14，128.51，130.09，133.88，136.25，156.45，160.00，164.76，171.07，172.35，179.49，189.99.
IR(沉積法)3303.2，2965.8，1720.2，1682.0，1632.0cm-1.C33H41N5O7·0.5H2O％C ％H ％N理論值63.04 6.7311.14實測值63.05 6.8911.06中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-甲氧芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a.3-甲氧基苯乙酰氯該酰氯用與制備實施例I的酰氯相同的方式制備，并且不經(jīng)純化直接使用。
b.1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(3-甲氧芐基)-氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法制備，不同的是用3-甲氧基苯乙酰氯作為酰氯；得米色固體，65.3％。
1H NMR(CDCl3)δ
；1.80-2.15(m，1H)；[1.91(s)，2.06(s)，3H]；3.60-3.95(m，1H)；[3.70(s)，3.74(s)，3.78(s)，3.79(s)，3H]；4.70-5.30(m，7H)，[5.38(d，J＝7.0Hz)，5.41(d，J＝6.3Hz)，1H]；6.78-6.92(m，3H)；7.18-7.40(m，6H).
c.1-[3-[5-(3-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物以與實施例I所述的環(huán)化反應相同的方式，用1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(3-甲氧芐基)氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備；得油狀物(產(chǎn)率77.2％)。
1H(CDCl3)δ
；[1.52-1.64(m)；1.72-1.85(m)；1H]；[2.05(s)，2.14(s)，3H]；3.80(s，3H)；4.00-41.5(m，1H)；[4.17(s)，4.22(s)，2H]；4.95-5.15(m，2H)；5.04(d，J＝11.2Hz，0.5H)；5.47(d，J＝10.7Hz，0.5H)；[6.10(d，J＝5.5Hz)；6.12(d，J＝7.3Hz)，1H]；6.80-6.93(m，3H)；7.22-7.41(m，6H).
d.1-[3-[5-(3-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇該化合物用實施例I的水解條件由1-[3-[5-(3-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備；得油狀物(產(chǎn)率83.6％)。
1H(CDCl3)δ
；[1.59-1.72(m)；1.92-2.06(m)；1H ]；[3.02(d，J＝8.1Hz)，3.21(d，J＝5.7Hz)，1H]；[3.79(s)，3.80(s)，3H]；[3.76-3.86(m)，3.92-4.02(m)，1H]；[4.17(s)，4.20(s)；2H]；4.98-5.10(m，1.5H)；[5.01(ABq，J＝12.5Hz)，5.11(ABq，J＝12.1Hz)，2H]；5.28(d，J＝10.4Hz，0.5H)；6.80-6.91(m，3H)；7.22-7.40(m，6H).
e.1-[3-[5-(3-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法用1-[3-[5-(3-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇制備；得重油(產(chǎn)率90.7％)。
1H(CDCl3)δ0.80-1.12(m，6H)；[1.84-1.96(m)；1.96-2.10(m)，1H]；3.60-3.75(m，1H)；[3.74(s)，3.76(s)，3H]；4.05-4.30(m，2H)；[5.26(d，J＝8.4Hz)，5.35(d，J＝3.1Hz)，1H]；6.76-6.90(m，3H)；7.16-7.22(m，1H)；8.08-8.25(2brs，3H).
f.(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-甲氧芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物通過與實施例I所述相似的偶聯(lián)方法用1-[3-[5-(3-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇的鹽酸鹽制備，得白色固體狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-苯乙基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺(產(chǎn)率50.8％)。
1H(CDCl3)δ0.76-1.12(m，12H)；1.65-2.25(m，6H)；3.45-3.80(m，2H)；3.77(s，3H)；3.85-4.05(m，0.5H)；[4.10(s)，4.18(s)，2H]，4.15-4.65(m，3H)；4.75-5.15(m，2.5H)；[5.70(d，J＝9.1Hz)，5.71(d，J＝8.9Hz)，0.5H]；6.11(d，J＝9.1Hz，0.5H]；6.75-7.00(m，3.5H)，7.15-7.45(m，7.5H).實施例IX(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(2，6-二氟芐基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物用與實施例I所述相似的氧化方法制備，不同的是使用(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(2，6-二氟芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺作為醇；Rf＝0.24(硅膠；1∶1，乙酸乙酯∶己烷)。將該物質通過硅膠柱色譜(1∶1，乙酸乙酯∶己烷)純化得白色固體，49.2％產(chǎn)率。
1H NMR(CDCl3)δ
；1.80-2.20(m，4H)；2.20-2.45(m，2H)；3.55-3.65(m，1H)；3.65-3.80(m， 1H)；4.25-4.45(m，1H)；4.37(s，2H)，4.61(dd，J1＝2.5Hz；J2＝7.8Hz ；1H)；5.09(ABq，J＝12.2Hz，2H)；5.28(dd，J1＝4.9Hz，J2＝7.3Hz，1H)；5.53(d，J＝9.3Hz，1H)；6.95(t，J＝8.5Hz，1H)；7.29-7.40(m，8H).
13C NMR(CDCl3)δ17.85，17.56，19.45，19.79，20.39，25.11，27.18，30.31，31.42，47.74，57.47，59.71，61.46，66.92，111.50 (dd，J1＝7.0Hz，J2＝25.0Hz)，128.00，128.10，128.48，130.11(t，J＝10.3Hz)，136.28，156.41，161.30(dd，J1＝7.2Hz，J2＝249.8Hz)，164.86，171.07，172.16，177.90，189.90.
IR(沉積法)3430，3028，1717，1684，1629，1577，C32H37N5O6F2·0.5H2O％C％H ％N理論值60.566.0311.03實測值60.536.1510.90中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(2，6-二氟芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a.1-[3-[5-(2，6-二氟芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物用與實施例IV所述相似的環(huán)化方法制備，不同的是使用了2，6-二氟苯乙酸酐，得黃色油狀物；TLC Rf＝0.58，硅膠；乙酸乙酯∶己烷(1∶1)。
1H(CDCl3)δ0.90-1.01(m，6H)；1.50-2.00(m，1H)，[2.05(s)，2.10(s)，3H]；[3.76(s)，3.86(s)，2H]；3.95-4.15(m，1H)；4.95-5.20(m，2.5H)；5.40-5.50(brd，0.5H)；6.00-6.15(brs，1H)；6.86-6.93(m，3H)；7.25-7.36(m，5H).
b.1-[3-[5-(2，6-二氟芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇該化合物用實施例I的水解條件由1-[3-[5-(2，6-二氟芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備，得油狀物(產(chǎn)率49.8％)，TLC Rf＝0.47，硅膠；乙酸乙酯∶己烷(1∶1)。
1H(CDCl3)δ
；1.50-1.70(m，0.5H)；1.80-2.05(m，0.5H)；[3.07(d，J＝8.1Hz)，3.32(d，J＝6.2Hz)，1H]；[3.70-3.82(m)，3.90-3.98(m)，1H]；[4.25(s)，4.28(s)；2H]；4.98-5.15(m，3.5H)；5.27(d，J＝9.9Hz，0.5H)；6.89-6.95(m，2H)；7.20-7.38(m，6H).
c.1-[3-[5-(2，6-二氟芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法用1-[3-[5-(2，6-二氟芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇制備；得重油(產(chǎn)率90.5％)。
1H(DMSO-d6)δ0.90-1.02(m，6H)；1.70-1.95(m，1H)；3.10-3.35(m，1H)；4.38(s，2H)；4.80-4.95(m，0.5H)；5.00-5.10(m，0.5H)；7.00-7.50(m，3H)；8.01(brs，3H).
d.(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(2，6-二氟芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物通過與實施例I所述相似的偶聯(lián)方法用1-[3-[5-(2，6-二氟芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇的鹽酸鹽制備，得白色固體狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(2，6-二氟芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺(產(chǎn)率68.4％)；TLCRf＝0.17，硅膠；乙酸乙酯∶己烷(3∶2)。
1H(CDCl3)δ0.80-1.10(m，12H)；[1.70-2.20(m，5.7H)，2.45-2.55(m，0.3H]；3.50-3.65(m，1H)；3.66-3.80(m，1H)；3.85-3.94(m，1H)；4.05-4.66(m，4H)；[4.80(d，J＝8.3Hz)，4.88(d，J＝12.0Hz)，1H]；4.98-5.13(m，2H)；[5.62(d，J＝9.3Hz)，5.73(d，J＝9.2Hz)，1H]；6.03(d，J＝9.3Hz，0.5H)；6.83-6.97(m，1H)；7.17-7.35(m，8H)；7.72(d，J＝9.9Hz，0.5H).實施例X(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(反-苯乙烯基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物用與實施例I所述相似的氧化方法制備，不同的是使用了(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(反-苯乙烯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺；Rf＝0.25(硅膠；1∶1，乙酸乙酯∶己烷)。將該物質通過硅膠柱色譜(1∶1，乙酸乙酯∶己烷)純化得白色固體。
1H NMR (CDCl3)δ
；1.80-2.25(m，4H)；2.25-2.45(m，2H)；3.55-3.70(m，1H)；3.76(dd，J1＝6.0Hz，J2＝8.3Hz，1H)；4.36(dd，J1＝6.6Hz，J2＝8.8Hz，1H)；4.65(dd，J1＝2.5Hz，J2＝8.0Hz，1H)；5.1(ABq，J＝12.3Hz，2H)；5.36(dd，J1＝5.1Hz，J2＝7.2Hz，1H)；5.55(d，J＝9.2Hz，1H)；7.04(d，J＝16.4Hz，1H)；7.30-7.70(m，11H)；7.98(d，J＝16.4Hz，1H).
13C NMR(CDCl3)δ17.30，17.57，19.51，19.85，25.15，27.19，30.48，31.46，47.78，57.48，59.78，61.53，66.96，109.11，128.02，128.15，128.51，129.14，131.03，133.97，136.29，143.00，144.65，156.43，165.08，171.04，172.22，176.73，190.35.
IR(沉積法)3429，3028，1717，1682，1641，1580，1509，1437cm-1.C33H39N5O6·H2O％C％H ％N理論值63.966.6711.30實測值64.406.4111.29中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(反-苯乙烯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a.1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(反-肉桂酰基)氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法制備，不同的是用反-肉桂酰氯作為酰氯；48.1％；TLC Rf＝0.42和0.31(非對映體)，3∶2乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)d
；[1.95(s)，2.10(s)，3H]；1.90-2.02(m，1H)；3.90-4.04(m，1H)；4.89-5.31(m，5H)；[5.47(d，J＝7.0Hz)，5.48(d，J＝6.8Hz)，1H]；[6.52(d，J＝16.0Hz)，6.56(d，J＝16.0Hz)，1H]；7.28-7.55(m，10H)；[7.79(d，J＝16.0Hz)，7.80(d，J＝16.0Hz)，1H].
b.1-[3-[5-(反-苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物用與實施例IV所述相似的環(huán)化方法制備，不同的是使用了1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(反-肉桂基)氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷；得粘稠油狀物(產(chǎn)率77.3％)，TLC Rf＝0.74和0.68(非對映體)，硅膠， 3∶2乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ
；[1.54-1.66(m)，1.74-1.88(m)，1H]；[2.06(s)，2.14(s)，3H]；4.04-4.20(m，1H )；4.98-5.20(m，2.5H)；5.57(d，J＝10.5Hz，0.5Hz)；[6.11(d，J＝3.6Hz)，6.16(d，J＝4.9Hz)，1H]；[6.96(d，J＝16.4Hz)，7.00(d，J＝16.4Hz)，1H]；7.28-7.61(m，10H)；[7.80(d，J＝16.4Hz)，7.84(d，J＝16.4Hz)，1H].
c.1-[3-[5-(反-苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇該化合物用實施例I的水解條件由中間體1-[3-[5-(反-苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備，得油狀物(產(chǎn)率92.0％)，TLC Rf＝0.61，硅膠，乙酸乙酯∶己烷(1∶1)。
1H(CDCl3)δ
；[1.60-1.80(m)，1.95-2.15(m)，1H]；[3.23(d，J＝8.1Hz)，3.47(d，J＝6.0Hz)，1H]；[3.80-3.95(m)，3.95-4.10(m)，1H]；5.00-5.42(m，3.5H)；5.40(d，J＝10.3Hz，0.5Hz)；[6.95(d，J＝16.4Hz)，6.98(d，J＝16.4Hz)，1H]；7.28-7.62(m，10H)；[7.80(d，J＝16.4Hz)，7.82(d，J＝16.4Hz)，1H].
d.1-[3-[5-(反-苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法用1-[3-[5-(反-苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇制備；得黃色固體(產(chǎn)率73.0％)。
1H(CDCl3)δ[1.04(d，J＝6.7Hz)，1.13(d，J＝6.7Hz)，1.15(d，J＝6.7Hz)，1.19(d，J＝6.7Hz)，6H]；1.85-2.20(m，1H)；3.55-3.70(m，1H)；[5.26(d，J＝7.2Hz)，5.41(d，J＝3.6Hz)，1H]；6.45(brs，1H)；[7.00(d，J＝16.4Hz)，7.03(d，J＝16.4Hz)，1H]；7.20-7.70(m，5H)；[7.83(d，J＝16.4Hz)，7.91(d，J＝16.4Hz)，1H]，8.43(bs，3H)e.(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(反-苯乙烯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物通過與實施例I所述相似的偶聯(lián)方法用1-[3-[5-(反-苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇的鹽酸鹽制備，得白色固體狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(反-苯乙烯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺(產(chǎn)率66.5％)；TLC Rf＝0.34和0.27(非對映體)，硅膠，7∶3乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ0.87-1.10(m，12H)；1.65-2.65(m，6H)；3.50-3.85(m，2H)；3.90-4.95(m，4H)；5.00-5.20(m，2H)；[5.39(d，J＝8.9 Hz)，5.42(d，J＝8.9Hz)，5.60(d，J＝9.2Hz)，5.82(d，J＝9.2Hz)，1H]；6.91-7.81(m，14H).實施例XI(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(反-4-三氟甲基苯乙烯基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物用與實施例I所述相似的氧化方法制備，不同的是使用了(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(反-4-三氟甲基苯乙烯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-甲基丙基]-L-脯氨酰胺；TLC Rf＝0.49(3∶2，乙酸乙酯∶己烷)。將該物質通過硅膠柱色譜純化(3∶2，乙酸乙酯∶己烷)得白色固體。
1H NMR(CDCl3)δ
；1.80-2.25(m，4H)；2.25-2.50(m，2H)；3.55-3.70(m，1H)；3.70-3.85(m，1H)；4.36(dd，J1＝7.3Hz，J2＝9.2Hz，1H)；4.66(dd，J1＝2.2Hz，J2＝7.7Hz，1H)；5.10(ABq，J＝12.5Hz，2H)；5.34(dd，J1＝5.5Hz，J2＝5.5Hz，1H)；5.52(d，J＝8.9Hz，1H)；7.13(d，J＝16.4Hz，1H)；7.30-7.45(m，4H)；7.48(d，J＝7.1Hz，1H)；7.71(s，5H)；7.98(d，J＝16.4Hz，1H).
13C NMR(CDCl3)δ17.35，17.59，19.49，19.83，25.15，27.12，30.42，31.45，47.79，57.50，59.73，61.57，66.96，111.58，126.10，126.15，128.02，128.14，128.27，128.52，132.63，136.28，137.20，142.67，156.43，165.14，171.10，172.29，176.08，190.19.
IR(沉積法)3430，3026，1719，1681，1641，1510，1509cm-1.C34H38N5O6F3％C％H ％N理論值60.985.7210.46實測值60.885.7410.50
中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(反-4-三氟甲基苯乙烯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a.1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(反-4-三氟甲基肉桂?；?氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法制備，不同的是用反-4-三氟甲基肉桂酰氯作為酰氯；78.6％；TLC Rf＝0.58和0.45(非對映體)，3∶2乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ
；[1.96(s)，2.10(s)，3H]；1.80-2.10(m，1H)；3.85-4.10(m，1H)；4.95-5.30(m，5H)；[5.46(d，J＝7.1Hz)，5.47(d，J＝6.8Hz)，1H]；[6.60(d，J＝16.0Hz)，6.64(d，J＝16.0Hz)，1H]；7.24-7.42(m，4H)；7.55-7.70(m，5H)；[7.78(d，J＝16.0Hz)，7.79(d，J＝16.0Hz)，1H].
b.1-[3-[5-(反-4-三氟甲基苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物用與實施例IV所述相似的環(huán)化方法制備，不同的是使用了1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(反-4-三氟甲基肉桂酰基)氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷；得黃色固體(產(chǎn)率72.6％)，TLCRf＝0.90，硅膠，1∶1乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ
；[1.54-1.66(m)，1.74-1.88(m)，1H]；[2.07(s)，2.15(s)，3H]；4.04-4.20(m，1H)；[5.03(s)，5.13(s)，2H]；[5.07(d，J＝10.4Hz)，5.48(d，J＝10.4Hz)，1H]；[6.11(d，J＝3.5Hz)，6.16(d，J＝5.1Hz)，1H]；[7.02(d，J＝16.4Hz)，7.07(d，J＝16.4Hz)，1H]；7.20-745(m，4H)；7.65-7.75(m，5H)；[7.81(d，J＝16.4Hz)，7.84(d，J＝16.4Hz)，1H].
c.1-[3-[5-(反-4-三氟甲基苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇該化合物用實施例I的水解條件由中間體1-[3-[5-(反-4-三氟甲基苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備，得黃色固體(產(chǎn)率84.1％)，TLC Rf＝0.62，硅膠，乙酸乙酯∶己烷(1∶1)。
1H(CDCl3)δ
；[1.60-1.80(m)，1.95-2.15(m)，1H]；[3.42(d，J＝8.0Hz)，3.61(d，J＝6.0Hz)，1H]；[3.80-3.95(m)，3.95-4.10(m)，1H]；5.00-5.42(m，3H)；[5.38(d，J＝10.3Hz)，5.27(d，J＝9.5Hz)，1H][7.03(d，J＝16.4Hz)，7.06(d，J＝16.4Hz)，1H]；7.20-7.45(m，4H)；7.65-7.75(m，5H)；[7.80(d，J＝16.4Hz)，7.83(d，J＝16.4Hz)，1H].
d. 1-[3-[5-(反-4-三氟甲基苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法用1-[3-[5-(反-4-三氟甲基苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇制備；得白色固體(產(chǎn)率63.2％)。
1H(CDCl3)δ[1.04(d，J＝6.6Hz)，1.30-1.75(m)，1.17(d，J＝6.6Hz)，6H]；1.85-2.20(m，1H)；3.55-3.70(m，1H)；[5.26(d，J＝7.3Hz)，5.44(brd)，1H]；6.60(brs，1H)；[7.17(d，J＝16.4Hz)，7.10(d，J＝16.4Hz)，1H]；[7.28(d，J＝6.5Hz)，7.37(d，J＝8.3)，1H]；7.55-7.75(m，3H)；[7.85(d，J＝16.4Hz)，7.96(d，J＝16.4Hz)，1H]；8.43(brs，3H).
e.(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(反-4-三氟甲基苯乙烯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物通過與實施例I所述相似的偶聯(lián)方法用1-[3-[5-(反-4-三氟甲基苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇的鹽酸鹽制備，得黃色固體狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(反-4-三氟甲基苯乙烯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺(產(chǎn)率87.5％)；TLC Rf＝0.38和0.29(非對映體)，硅膠，7∶3乙酸乙酯∶己烷1H(CDCl3)δ0.84-1.14(m，12H)；1.65-2.65(m，6H)；3.50-3.85(m，2H)；3.902-4.90(m，4H)；5.00-5.20(m，2H)；[5.56(d，J＝9.2Hz)，5.88(d，J＝9.2Hz)，1H]；[6.92-7.38(m)，7.63-7.88(m)，13H).實施例XII(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(反-4-甲氧基苯乙烯基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物用與實施例I所述相似的氧化方法制備，不同的是使用了(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(反-4-甲氧基苯乙烯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺；TLC Rf＝0.38(3∶2，乙酸乙酯∶己烷)。將該物質通過硅膠柱色譜純化(3∶2，乙酸乙酯∶己烷)得白色固體。
1H NMR(CDCl3)δ0.90(d，J＝6.8Hz)；0.97(d，J＝6.8Hz)；1.03(d，J＝6.8Hz)，1.05(d，J＝6.8Hz)，12H]；1.90-2.48(m，6H)；3.60-3.70(m，1H)；3.74-3.84(m，1H)；3.74-3.84( m，1H)；3.87(s，3H)；4.35(dd，J1＝7.0Hz，J2＝9.2Hz，1H)；4.62(dd，J1＝2.8Hz，J2＝7.1Hz，1H)；5.10(ABq，J＝12.2Hz，2H)；5.39(dd，J1＝4.9 Hz，J2＝7.8Hz，1H)；5.67(d，J＝8.9Hz，1H)；6.90(d，J＝16.4Hz，1H)；6.96(d，J＝8.8Hz，1H)；7.25(d，J＝9.0Hz，1H)；7.35(s，5H)；7.56(d，J＝8.8Hz，2H)；7.93(d，J＝16.4Hz，1H).
13C NMR(CDCl3)δ17.10，17.67，19.42，19.82，25.12，27.60，30.63，31.30，47.94，55.47，57.66，60.11，61.49，67.04，106.44，114.62，126.72，127.96，128.15，128.52，12 9.97，144.41，156.53，162.04，164.90，171.12，172.53，177.20，190.36.
IR(沉積法)3429，3031，2968，1718，1682，1638，1604，1512cm-1.C34H41N5067·2H2O％C％H ％N理論值61.166.7910.49實測值61.596.3810.02
中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(反-4-甲氧基苯乙烯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a.1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(反-4-甲氧基肉桂酰基)氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法制備，不同的是用反-4-甲氧基肉桂酰氯作為酰氯；57.5％；TLC Rf＝0.47和0.36(非對映體)，3∶2乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ
；[1.95(s)，2.10(s)，3H]；1.88-2.25(m，1H)；3.84(s，3H)；3.90-4.10(m，1H)；4.90-5.33(m，5H)；[5.47(d，J＝7.1Hz)，5.49(d，J＝6.8Hz)，1H]；[6.39(d，J＝15.9Hz)，6.43(d，J＝15.9Hz)，1H]；6.91(d，J＝8.7Hz，2H)；7.25-7.40(m，4H)；7.49(d，J＝8.7Hz，1H)；7.50(d，J＝8.7Hz，1H)；[7.44(d，J＝15.9Hz)，7.75(d，J＝15.9Hz)，1H].
b.1-[3-[5-(反-4-甲氧基苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物用與實施例IV所述相似的環(huán)化方法制備，不同的是使用了1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(反-4-甲氧基肉桂?；?氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷；得黃色固體(產(chǎn)率53.4％)，TLC Rf＝0.74和0.68(非對映體)，硅膠，1∶1乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ
；[1.50 1.68(m)，1.74-1.90(m)，1H]；[2.05(s)，2.14(s)，3H]；[3.85(s)，3.86(s)，3H]；4.04-4.16(m，1H)；[4.99-5.18(m)，5.63(d，J＝10.6 Hz)，3 H]；[6.11(d，J＝3.8Hz)，6.16(d，J＝4.9Hz)，1H]；[6.81(d，J＝16.3Hz)，6.85(d，J＝16.3Hz)，1H]；[6.94(d，J＝7.5Hz，2H)；6.95(d，J＝7.5Hz，2H]；7.24-7.40(m，4H)；7.48-7.56(m，2H)；[7.74(d，J＝16.4Hz)，7.77(d，J＝16.4Hz)，1H].
c.1-[3-[5-(反-4-甲氧基苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇該化合物用實施例I的水解條件由中間體1-[3-[5-(反-4-甲氧基苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備，(產(chǎn)率85.2％)，TLC Rf＝0.61，硅膠，乙酸乙酯∶己烷(3∶2)。
1H(CDCl3)δ
；[1.55-1.75(m)，1.95-2.15(m)，1H]；[3.21(d，J＝8.1Hz)，3.47(d，J＝5.4Hz)，1H]；3.86(s，3H)；3.80-4.10(m，1H)；5.00-5.20(m，3H)；[5.22(d，J＝9.8Hz)，5.43(d，J＝10.0Hz)，1H][6.80(d，J＝16.4Hz)，6.83(d，J＝16.4Hz)，1H]；6.91-6.99(m，2H)，[7.22-7.44(m)，7.46-7.60(m)，7H]；[7.74(d，J＝16.4Hz)，7.76(d，J＝16.4Hz)，1H].
d.1-[3-[5-(反-4-甲氧基苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法用1-[3-[5-(反-4-甲氧基苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇制備；(產(chǎn)率93.2％)。
1H(CDCl3)δ[1.03(d，J＝6.9Hz)，1.12(d，J＝6.9Hz)，1.14(d，J＝6.6Hz)，6H]；1.88-2.12(m，1H)；3.56-3.68(m，1H)；[3.83(s)，3.84(s)，3H]；[5.24(d，J＝7.1Hz)，5.40(d，J＝3.7Hz)，1H]；[6.83(d，J＝16.2Hz)，6.87(d，J＝17.0Hz)，1H]；[6.91(d，J＝6.8Hz)，6.92(d，J＝7.0Hz)，2H]；[7.51(d，J＝8.3Hz)，7.53(d，J＝7.0Hz)，2H]；[7.75(d，J＝16.3Hz)，7.83(d，J＝16.4Hz)，1H]；8.42(brs，3H).
e.(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(反-4-甲氧基苯乙烯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物通過與實施例I所述相似的偶聯(lián)方法用1-[3-[5-(反-4-甲氧基苯乙烯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇的鹽酸鹽制備，得黃色固體狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(反-4-甲氧基苯乙烯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-甲基丙基]-L-脯氨酰胺(產(chǎn)率87.5％)；TLC Rf＝0.25，硅膠，7∶3乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ0.84-1.14(m，12H)；[1.60-2.22(m)，2.48-2.60(m)，6H]；3.46-3.64(m，1H)；3.66(m，1H)；[3.86(s)，3.87(s)，3H]；3.92-4.90(m，4H)；5.02-5.18(m，2H)；[5.36-5.64(m)，5.95(d，J＝9.5Hz)，1H]；[6.77(d，J＝16.4Hz)，6.80(d，J＝16.4Hz)，1H]； 6.88-7.10(m，2H)，7.12-7.60(m，9H)；[7.72(d，J＝16.4Hz)，7.73(d，J＝16.4Hz)，1H].實施例XIII(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-噻吩甲基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物用與實施例I所述相似的氧化方法制備，不同的是使用(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-噻吩甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺作為醇。將該物質通過硅膠柱色譜純化(7∶3，乙酸乙酯∶己烷)；將其通過RP-HPLC(恒溶劑成分，CH3CN∶H2O，60∶40)進一步純化，冷凍干燥后得到白色固體狀的標題化合物；TLC Rf＝0.51，硅膠，7∶3乙酸乙酯∶己烷。
1H NMR(CDCl3)δ
；1.84-2.20(m，4H)；2.20-2.40(m，2H)；3.56-3.70(m，1H)；3.72-3.82(m，1H)；4.35(s，2H)，4.28-4.42(m，1H)，4.62(dd，J1＝2.8Hz；J2＝7.8Hz；1H)；5.10(ABq，J＝12.4Hz，2H)；5.31(dd，J1＝4.8Hz，J2＝7.3Hz，1H)；5.61(d，J＝8.9Hz，1H)；7.08(d，J＝5.0Hz，1H)；7.25(s，1H)；7.30-7.44(m，7H).
13C NMR(CDCl3)δ17.12，17.61，19.39，19.78，25.07，27.29，27.67，30.31，31.34，47.79，57.53，59.77，61.44，66.93，123.71，126.70，127.85，127.96，128.09，128.47，131.78，136.22，156.44，164.75，171.13，172.28，179.08，189.95.
IR(沉積法)3429，3026，2968，1718，1683，1635，1577，1437cm-1.C32H39N5O6·1H2O％C ％H ％N理論值58.716.41 11.41實測值59.066.03 11.31
中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-噻吩甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a.1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(3-噻吩甲基)-氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物按照與實施例I所述相似的方法制備，不同的是用3-噻吩基乙酰氯作為酰氯；得淺黃色固體(產(chǎn)率81.0％)；TLC Rf＝0.49和0.38(非對映體)，硅膠，3∶2乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ
；[1.80-2.00(m)，2.04-2.18(m)，1H]；[1.92(s)，2.08(s)，3H]；[3.76(s)，3.80(s)，2H]；3.84-3.85(m，1H)；4.80-5.26(m，5H)；5.40(t，J＝7.0Hz，1H)；[7.02-7.10(m)，7.14-7.20(m)，1H]；7.28-7.40(m，8H).
b.1-[3-[5-(3-噻吩甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物用與實施例I所述相似的環(huán)化方法，用1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(3-噻吩乙?；?氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備；得棕色油(產(chǎn)率87.3％)；TLC Rf＝0.75，硅膠，3∶2乙酸乙酯∶己烷1H(CDCl3)δ
；[1.52-1.70(m)，1.72-1.81(m)，1H]；[2.04(s)，2.13(s)，3H]；4.00-4.18(m，1H)；[4.21(s)，4.26(s)，2H]；[4.90-5.18(m)，5.44(d，J＝10.4Hz，3H]；[6.08(d，J＝2.4Hz，6.10(d，J＝5.0Hz，1H]；[7.02-7.08(m)，7.15-7.24(m)，1H]；7.26-7.40(m，7H).
c.1-[3-[5-(3-噻吩甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇該化合物用實施例I的水解條件由1-[3-[5-(3-噻吩甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備；得油狀物(產(chǎn)率84.7％)；TLC Rf＝0.51，硅膠，3∶2乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ
；[1.62-1.80(m)；1.90-2.04(m)；1H]；[3.18(d，J＝8.1Hz)，3.37(d，J＝6.1Hz)，1H]；3.74-3.84(m)，3.90-4.02(m)，1H]；[4.20(s)，4.24(s)；2H]；[4.94-5.19(m)，5.27(d，J＝10.4Hz)，4H][7.03(t，J＝4.4Hz)，7.15-7.22(m)，1H]；7.27-7.42(m，7H).
d.1-[3-[5-(3-噻吩甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽該化合物按照與實施例I所述基本相同的方法用1-[3-[5-(3-噻吩甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基基-3-甲基-丁-1-醇制備；得重油(產(chǎn)率95.8％)。
1H(CDCl3)δ[1.02(d，J＝6.7Hz)；1.05(d，J＝6.7Hz)；6H]；1.84-2.02(m，1H)；3.60- 3.80(m，1H)；[4.22(s)，4.27(s)，2H]；[5.25(d，J＝8.0Hz)，5.36(d，J＝3.6Hz)，1H]；[7.00(d，J＝5.0Hz)，7.03(d，J＝5.0Hz)，1H]；7.12-7.40(m，3H)，8.07(brs，3H).
f.(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-噻吩甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物通過與實施例I所述相似的偶聯(lián)方法用1-[3-[5-(3-噻吩甲基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇的鹽酸鹽制備，得固體狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-噻吩甲基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺(產(chǎn)率54.5％)；TLC Rf＝0.06，硅膠，7∶3乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ0.80-1.15(m，12H)；[1.70-2.20(m)，2.44-2.56(m)，6H]；3.50-3.60(m，1H)；3.64-3.80(m，1H)；3.90-4.04(m，1H)；4.06-4.90(m，5H)；5.00-5.20(m，3H)；[5.30-5.40(m)，5.55-5.67(m)，1H]；6.02(d，J＝9.3Hz，0.5H)，6.84-7.08(m，2H)；7.15-7.40(m，7H)；7.68(brd，0.5H).實施例XIV(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(4-甲氧芐基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物用與實施例I所述相似的氧化方法制備，不同的是使用(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(4-甲氧芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺作為醇。將該物質首先通過柱色譜純化(硅膠；3∶2乙酸乙酯∶己烷)，然后通過RP-HPLC(恒溶劑成分，CH3CN∶H2O，60∶40)進一步純化得到白色固體狀的分析樣品；Rf＝0.36(硅膠，3∶2，乙酸乙酯∶己烷)。
1H NMR(CDCl3)δ
；1.80-2.20(m，4H)；2.24-2.40(m，2H)；3.55-3.65(m，1H)；3.67-3.78(m，1H)；3.80(s，3H)，4.24(s，2H)，4.35(dd，J1＝6.4Hz；J2＝9.1Hz；1H)；4.62(dd，J1＝2.6Hz，J2＝7.6Hz，1H)；5.10(ABq，J＝12.2Hz，2H)；5.30(dd，J1＝5.2Hz，J2＝7.5Hz，1H)；5.49(d，J＝9.2Hz，1H)；6.88(dJ＝8.7Hz，2H)；7.26(d，J＝8.7Hz，2H)；7.36(s，5H)；7.38d，J＝8.8Hz，1H).
13C NMR(CDCl3)δ17.18，17.54，19.51，19.86，25.15，27.12，30.33，31.44，32.18，47.77，55.31，57.46，59.75，61.46，66.97，111.44，114.45，124.51，12 8.01，128.14，128.52，130.12，156.40，158.91，159.25，171.00，172.24，179.90，190.05.
IR(沉積法)3432，3036，2969，1717，1687，1633，1620，1514cm-1.C33H41N5O7％C ％H ％N理論值63.96 6.67 11.30實測值63.71 6.79 11.59中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(4-甲氧芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a.4-甲氧基苯乙酰氯該酰氯用與制備實施例I的酰氯相同的方式制備，并且不經(jīng)純化直接使用。
b.1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(4-甲氧芐基)-氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物按照與實施例I所述基本相同的方法制備，不同的是用4-甲氧基苯乙酰氯作為酰氯；得米色固體，39.1％；TLC Rf＝0.51和0.43(非對映體)，硅膠，7∶3乙酸乙酯∶己烷。
1H NMR(CDCl3)δ
；[1.91(s)，2.07(s)，3H]；1.80-2.20(m，1H)；[3.66(s)，3.70(s)，2H]；[3.78(s)，3.79(s)，3H]；3.80-3.95(m，1H)；[4.80-5.24，5.34-5.44(m)，5H]；[6.83(d，J＝6.2Hz)，6.86(d，J＝6.1Hz)；2H]；[7.15-7.25(m)，7.18-7.40(m)，3H].
c.1-[3-[5-(4-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物以與實施例I所述環(huán)化方法相似的方式用1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(4-甲氧芐基)-氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備；得油狀物(產(chǎn)率77.2％)，Rf＝0.76，硅膠，3∶2乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ
；[1.50-1.64(m)，1.71-1.84(m)，1H]；[2.03(s)，2.18(s)，3H]；[3.77(s)，3.78(s)，3H]；3.96-4.22(m，3H)；[4.84-5.18(m)，5.47(d，J＝10.4Hz)，3H]；[6.08(d，J＝5.3Hz)，6.10(d，J＝7.0Hz)，1H]；6.80-6.92(m，2H)；7.16-7.42(m，7H).
d.1-[3-[5-(4-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇該化合物用實施例I的水解條件由1-[3-[5-(4-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備；得油狀物(產(chǎn)率90.5％)，Rf＝0.58，硅膠，3∶2乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ
；[1.58-1.70(m)；1.82-2.04(m)；1H]；[3.09(d，J＝8.1Hz)，3.29(d，J＝5.6Hz)，1H]；[3.77(s)，3.78(s)，3H]；3.90-4.02(m，1H)；[4.12(s)，4.15(s)；2H]；[4.90-5.18(m)，5.28(d，J＝10.0Hz)，4H]；[6.84(d，J＝8.9Hz)，6.86(d，J＝8.7Hz)，2H]；[7.20(d，J＝8.5Hz)，7.22(d，J＝8.7Hz)，2H]；7.28-7.39(m，5H).
e.1-[3-[5-(4-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法用1-[3-[5-(4-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇制備；得重油(產(chǎn)率66.9％)。
1H(CDCl3)δ1.00(d，J＝6.7Hz，3H)；1.04(d，J＝6.7Hz，3H)；1.86-2.00(m，1H)；3.56-3.94(m，1H)；[3.73(s)，3.76(s)，3H]；[4.10(s)，4.16(s)，2H]；[5.22(d，J＝7.8Hz)，5.31(d，J＝3.3Hz)，1H]；[6.81(d，J＝8.6Hz)，6.82(d，J＝8.6)，2H]；[7.15(d，J＝8.6Hz)，7.19(d，J＝8.6Hz)，2H]；8.03(brd，3H).
f.(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(4-甲氧芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物通過與實施例I所述相似的偶聯(lián)方法用1-[3-[5-(4-甲氧芐基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇的鹽酸鹽制備，得白色固體狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(4-甲氧芐基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺(產(chǎn)率50.8％)；Rf＝0.35，硅膠，4∶1乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ0.77-1.12(m，12H)；[1.70-2.20(m)，2.46-2.58(m)，6H)；3.46-3.74(m，2H)；[3.76(s)，3.78(s)，3H]；3.88-4.90(m，6H)；5.00-5.20(m，2H)；[5.53(d，J＝9.3Hz)，5.64(d，J＝9.4Hz)，1H]；5.93(d，J＝9.4Hz，0.5H)；6.76-6.90(m，2H)；7.08-7.44(m，8H)；7.72(brd，0.5H).實施例XV(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(苯基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物用與實施例I所述相似的氧化方法制備，不同的是使用(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(苯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺作為醇。用柱色譜進行純化(硅膠；1∶1至7∶3乙酸乙酯∶己烷)，然后通過RP-HPLC(恒溶劑成分，CH3CN∶H2O，60∶40)純化，冷凍干燥后得到白色固體狀的分析樣品；TLC Rf＝0.42，乙酸乙酯∶己烷(7∶3)。
1H NMR(CDCl3)δ
；1.80-2.25(m，4H)；2.25-2.50(m，2H)；3.55-3.70(m，1H)；3.70-3.85(m，1H)；4.30-4.45(m，1H)，4.60-4.75(m，1H)；5.12(ABq，J＝12.4Hz，2H)；5.37-5.44(m，1H)，5.57(d，J＝9.6Hz，1H)，7.25-7.70(m，10H)，8.62(d，J＝8.5Hz，1H).
13C NMR(CDCl3)δ17.32，17.59，19.51，19.86，25.16，27.23，30.49，31.46，47.81，57.51，59.82，61.61，66.98，123.26，128.02，128.14，129.27，133.53，136.28，156.44，165.33，171.09，172.27，177.17，190.36.C31H37N5O6·0.5H2O％C ％H ％N理論值63.68 6.55 11.98實測值63.51 6.45 11.71中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(苯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a.1-[3-[5-(苯基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物用與實施例IV相似的方法制備，不同之處在于使用的是苯甲酸酐；得到粘稠的油狀產(chǎn)物(產(chǎn)率75.6％)。
1H(CDCl3)δ
；[1.56-1.70(m)，1.76-1.90(m)，1H)；[2.06(s)，2.15(s)，3H]；4.10-4.21(m，1H)；4.96-5.20(m，2.5H)；5.61(d，J＝10.0Hz，0.5H)；[6.16(d，J＝3.5Hz)，6.21(d，J＝4.9Hz)，1H]；7.25-7.45(m，4H)；7.45-7.70(m，4H)；8.05-8.20(m，2H).
b.1-[3-[5-(苯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇該化合物用實施例I的水解條件由中間體1-[3-[5-(苯基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備；得油狀物(產(chǎn)率53.3％)，TLC∶Rf＝0.47和0.33(非對映體)，乙酸乙酯∶己烷(1∶1)。
1H(CDCl3)δ
；[1.71-1.8 5(m)，1.94-2.09(m)，1H]；3.87-3.98(m，0.5H)；4.03-4.16(m，0.5H)，4.96-5.22(m，3.5H)，5.62(d，J＝9.3Hz，0.5H)；7.10-7.35(m，4H)，7.35-7.65(m，4H)；7.95-8.15(m，2H).
c.1-[3-[5-(苯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法用1-[3-[5-(苯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇制備；得重油(產(chǎn)率54.7％)；1H(CDCl3)δ1.00-1.35(m，6H)；1.85-2.15(m，1H)；3.75-3.90(m，0.5H)，3.90-4.05(m，0.5H)；[5.40(d，J＝8.9Hz)，5.57(d，J＝2.6Hz)，1H]；7.30-7.60(m，3H)；7.95(d，J＝8.0Hz，1H)；8.09(d，J＝7.7Hz，1H)； 8.17(brs，3H).
d.(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(苯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物通過與實施例I所述相似的偶聯(lián)方法用1-[3-[5-(苯基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇的鹽酸鹽制備，得白色固體狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(苯基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺(產(chǎn)率7 7.2％)；Rf＝0.41，4∶1乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ0.80-1.20(m，12H)；1.65-2.65(m，6H)；3.45-3.85(m，2H)；3.90-4.05(m，0.5H)；4.05-4.65(m，3H)；4.70-5.20(m，3.5H)；[5.21(t，J＝9.7 Hz)，5.38(d，J＝9.2Hz)，1H]；7.14(d，J＝9.5Hz，0.5H)；7.30- 7.64(m，9.5H)，[8.10(d，J＝8.0Hz)，8.19(d，J＝8.0Hz)，1H].實施例XVI(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-苯基丙基)-1，2，4-噁二唑基]羰基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物用與實施例I所述相似的氧化方法制備，不同的是使用(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-苯基丙基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺作為醇；經(jīng)RP-HPLC(恒溶劑成分，CH3CN∶H2O，60∶40)得到白色固體狀的分析樣品；TLC Rf＝0.29，3∶2乙酸乙酯∶己烷。
1H NMR(CDCl3)δ
；1.82-2.40(m，6H)；2.20(p，J＝7.6Hz，2H)；2.74(t，J＝7.6Hz，2H)；2.96(t，7.6Hz，2H)；3.58-3.68(m，1H)；3.70-3.82(m，1H)；4.36(dd，J1＝6.8 Hz；J2＝9.0Hz；1H)；4.60-4.63(m，1H)；5.10(ABq，J＝12.3Hz，2H)；5.34(dd，J＝4.9Hz，J2＝9.0Hz，1H)；5.75(d，J＝9.1Hz，1H)；7.15-7.40(m，10H)；7.48(d，J＝7.4 Hz，1H)
23C NMR(CDCl3)δ17.17，17.59，19.40，19.77，25.07，27.78，27.26，27.76，30.35，31.39，34.81，47.73，57.51，59.71，61.41，66.88，126.26，127.96，128.06，128.41，128.44，128.50，136.29，140.23，156.43，164.71，171.13，172.14，181.27，190.17.
IR(沉積法)3297.6，2966.0，1718.9，1680.6，1632.4cm-1C34H42N5O6％C％H ％N理論值 66.117.0211.34實測值 65.877.2511.27中間體(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-苯基丙基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺的制備如下a.4-苯基丁酰氯該酰氯用與實施例II所述相似的方法制備，不同之處在于使用的是4-苯基丁酸，得到的產(chǎn)物不經(jīng)純化直接使用。
b.1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(4-苯基丁?；?氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物按照與實施例I所述基本相同的方法制備，不同的是用4-苯基丁酰氯作為酰氯；得白色固體，34.1％；TLC Rf＝0.41和0.33(非對映體)，1∶1乙酸乙酯∶己烷。
1H NMR(CDCl3)δ
；[1.94(s)，2.09(s)，3H]；1.84-2.12(m，3H)；2.36-2.47(m，2H)；2.64-2.73(m，2H)；3.84-3.96(m，1H)；4.76-5.24(m，5H)；5.30-5.45(m，1H)；7.14-7.40(m，10H).
c.1-[3-[5-(3-苯基丙基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷該化合物用實施例I所述的環(huán)化方法由1-[(N-羥基)甲酰亞氨-N-(3-苯基丙?；?-氨基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備；得油狀物(產(chǎn)率85.7％)，TLC Rf＝0.63和0.60(非對映體)，1∶1乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ
；[1.50-1.62(m)；1.72-1.86(m)；1H]；[2.05(s)，2.13(s)；3H]；2.04-2.20(m，2H)；2.70(q，J＝7.7Hz，2H)；[2.84(t，J＝7.7Hz)，2.90(t，J＝7.7Hz)，2H]；4.00-4.13(m，1H)；[5.00(s)，5.11(s)；2H]；[5.05(d，J＝10.4Hz)，5.50(d，J＝10.6 Hz)；1H]；[6.08(d，J＝3.3Hz)；6.11(d，J＝5.0Hz)；1H]；7.16-7.40(m，10H).
d.1-[3-[5-(3-苯基丙基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇該化合物用實施例I的水解條件由1-[3-[5-(3-苯基丙基)]-1，2，4-噁二唑基]-1-乙酰氧基-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁烷制備；得油狀物(產(chǎn)率76.7％)，TLC Rf＝0.44，1∶1乙酸乙酯∶己烷。
1H(CDCl3)δ
；[1.55-1.75(m)，1.90-2.15(m)，1H]；2.13(p，J＝7.3Hz，2H)；2.69(q，J＝7.3Hz，2H)；[2.84(t，J＝7.3Hz)，2.87(t，J＝7.3Hz)，2H]；[3.22(d，J＝8.0Hz)，3.46(d，J＝6.0Hz)，1H]；[3.76-3.86(m)，3.92-4.02(m)，1H]；4.96-5.18(m，3H)；[5.21(d，J＝9.5Hz)，5.35(d，J＝10.0Hz)，1H]；7.14-7.40(m，10H).
e.1-[3-[5-(3-苯基丙基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇鹽酸鹽該化合物按照與實施例I所述基本相似的方法用1-[3-[5-(3-苯基丙基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-芐氧羰基氨基-3-甲基-丁-1-醇制備；得重油(產(chǎn)率29.1％)。
1H(CDCl3)δ1.10-1.80(m，6H)；1.80-2.05(m，1H)；2.00-2.20(m，2H)；2.68(q，J＝7.3Hz，2H)；2.77-2.92(m，2H)；[5.26(d，J＝8.8Hz)，5.42(d，J＝3.0Hz)，1H]；7.11-7.33(m，5H)；8.10-8.23(m，3H).
f.(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-苯基丙基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺該化合物通過與實施例I所述相似的偶聯(lián)方法用1-[3-[5-(3-苯基丙基)]-1，2，4-噁二唑基]-2-(S)-氨基-3-甲基-丁-1-醇的鹽酸鹽制備，得白色泡沫狀的(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-[1-[3-[5-(3-苯基丙基)-1，2，4-噁二唑基]羥甲基]-2-(S)-甲基丙基]-L-脯氨酰胺固體(產(chǎn)率60.3％)。
1H(CDCl3)δ0.80-1.15(m，12H)；1.70-2.30(m，8H)；2.55-2.75(m，2H)；2.75-3.00(m，2H)；<p>根據(jù)本發(fā)明的另一個實施方案，R1是選擇性取代的苯基烷基；Y是O；X是N；并且R2是2-丙基。
R1取代基優(yōu)選選自如下基團三氟甲基、甲基、二氟甲基、2，6-二氟芐基、芐基、2-苯乙基、3-甲氧基芐基、3-苯基丙基、3-三氟甲基芐基、2-甲氧基芐基、2-三氟甲基苯基氯甲基、3-噻吩基甲基、苯乙烯基、4-三氟甲基苯乙烯基、4-甲氧基苯乙烯基、4-甲氧基芐基或苯基。
在此所用的術語“選擇性取代”的意思是當取代時，為單取代至全部取代。
在此所用的術語“烷基”指C1-C15烷基，但優(yōu)選C1-C7。
在此所用的術語“烯基”指C1-C15烯基，但優(yōu)選C1-C7。
在此所用的術語“炔基”指C1-C15炔基，但優(yōu)選C1-C7。
在此所用的術語“芳基”與“苯基”是同義詞，除非另外說明它是選擇性取代的。
已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的噁二唑是絲氨酸蛋白酶人中性粒細胞彈性蛋白酶(HNE)的強效抑制劑。這些化合物被認為是可逆的抑制劑，它們可能會與活性位點的絲氨酸殘基形成過渡態(tài)中間體。這些噁二唑的特征在于，它們與HNE相比具有低的分子量和高的選擇性、以及在生理條件下的穩(wěn)定性。因此，這些化合物可用于預防、緩解和/或治療由與HNE存在有關的降解效應所介導的疾病。它們的用途非常重要，因為它們涉及各種的人體內(nèi)治療，并且還可用作體外的診斷工具。
如上所述，R3還可以是使化合物具有口服活性的基團。使化合物具有口服活性的技術是本領域已知的。例如，R3可以選自下述的式II-VI結構式II
其中X1是N或CH；X2是如下結構式的基團HCl溶液使蛋白質沉淀(每份樣品加三份溶液)。將樣品離心(14000rpm下15-20分鐘)并用反相HPLC進行分析，使用梯度為18-90％的乙腈/0.1％TFA溶液。實施例XIX-Ki值將酶加入到硝基N-酰苯胺底物和抑制劑的混合物中。氨基分解的速率迅速下降到穩(wěn)態(tài)水平(Vs)。用HP-5482二極管排列分光光度計在400-410nm監(jiān)測從底物釋放的硝基苯胺。通過非線性回歸分析程序(ENZFITTER，Elsevier-Biosoft)用如下方程計算出Kiapp值Vs＝V0/(1+[I]/Kiapp)Kiapp＝Ki(1+[S]/Km)其中[I]和[S]分別是抑制劑和底物的濃度，V0和Vs分別是不含或含有抑制劑時的氨基分解速率，Kiapp和Ki分別是表觀和真實抑制常數(shù)，而km是米氏常數(shù)。抑制分析在0.05M磷酸鈉、0.1M NaCl、0.005％Triton X-100、5％DMSO，pH 7.6的緩沖液中進行。顯色底物為MeOSuc-Lys(pic)-Ala-Pro-Val-pNA和MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-pNA。
序列表(1)一般資料(i)申請人CORTECH，INC.(ii)發(fā)明名稱用作(絲氨酸蛋白酶)人中性粒細胞彈性蛋白酶抑制劑的取代雜環(huán)化合物(iii)序列數(shù)4(iv)通訊地址(A)姓名Schwegman，Lundberg&amp;Woessner(B)街道3500 IDS中心(C)城市Minneapolis(D)州Minnestoa(E)國家美國(F)郵政編碼(ZIP)55402(G)電話612-339-0331(H)傳真612-339-3061(v)計算機可讀形式(A)媒體類型軟盤(B)計算機IBM PC兼容機(C)操作系統(tǒng)PC-DOS/MS-DOS(D)軟件Patent In Release#1.0，版本#1.30(EPO)(vi)目前的申請資料(A)申請數(shù)量未知(B)申請日1995年11月17日(C)分類(vii)代理人資料(A)姓名John E.Burke(B)登記號35,836(C)文檔/案卷號392.013WO1(2)SEQ ID NO1的資料(i)序列特征
(A)長度6個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型單鏈(D)拓撲結構線性(ii)分子類型肽(xi)序列描述SEQ ID NO1Xaa Ala Ala Pro Leu Xaa1 5(2)SEQ ID NO2的資料(i)序列特征(A)長度6個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型單鏈(D)拓撲結構線性(ii)分子類型肽(xi)序列描述SEQ ID NO2Xaa Ala Ala Pro Phe Xaa1 5(2)SEQ ID NO3的資料(i)序列特征(A)長度6個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型單鏈(D)拓撲結構線性(ii)分子類型肽(xi)序列描述SEQ ID NO3Xaa Lys Ala Pro Val Xaa1 5(2)SEQ ID NO4的資料(i)序列特征
(A)長度6個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型單鏈(D)拓撲結構線性(ii)分子類型肽(xi)序列描述SEQ ID NO4Xaa Ala Ala Pro Val Xaa1 權利要求
1.能夠抑制絲氨酸蛋白酶的下式化合物
其中Z是含氨基-羰基的基團并且雜環(huán)的碳與Z的羰基直接相連；R1和R4彼此獨立地選自直鏈或支鏈的烷基、烯基、鹵代烷基、鹵代烯基、炔基；由鹵素、氰基、硝基、鹵代烷基、氨基、氨基烷基、二烷基氨基、烷基、烯基、炔基、烷氧基、鹵代烷氧基、羧基、羰基烷氧基、烷基氨甲?；⒎蓟跫柞；⑼榱蚧蛑辨溁蛑ф湹柠u代烷硫基基團選擇性取代的苯基、苯基烯基或苯基烷基；雜芳基、雜芳烷基或雜芳烯基，其中的雜芳基為含有一或兩個以任意組合形式選自氧、硫或氮的雜原子的五或六元單環(huán)，并且該環(huán)被鹵素、氰基、硝基、鹵代烷基、氨基、氨基烷基、二烷基氨基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、鹵代烷氧基、羧基、羰基烷氧基、烷基氨甲?；⒎蓟跫柞；⑼榱蚧蛑辨溁蛑ф湹柠u代烷硫基基團選擇性地取代；并且X和Y是O或S。
2.根據(jù)權利要求1的可以抑制絲氨酸蛋白酶的化合物，其中Z是
R3是含羰基的基團；并且R2是直鏈或支鏈的烷基、烷硫基、烷基硫代烷基、環(huán)烷基、烷基環(huán)烷基、由鹵素、氰基、硝基、羥基、鹵代烷基、烷硫基、末端胍、胍、烷基胍、二烷基胍或脒選擇性取代的苯基或苯基烷基。
3.根據(jù)權利要求2的化合物，其中R3是
4.根據(jù)權利要求3的化合物，其中R2是2-丙基、芐基、3-胍基或4-脒基芐基。
5.根據(jù)權利要求4的下式化合物
其中R1是選擇性取代的苯基烷基；并且R2是2-丙基。
6.根據(jù)權利要求4的化合物，其中R1是三氟甲基、甲基、二氟甲基、2，6-二氟芐基、芐基、3-噻吩基甲基、苯乙烯基、4-三氟甲基苯乙烯基、4-甲氧基苯乙烯基、4-甲氧基芐基、苯基、2-苯乙基、3-甲氧基芐基、3-苯基丙基、3-三氟甲基芐基、2-甲氧基芐基或2-三氟甲基苯基氯甲基。
7.根據(jù)權利要求5的化合物，其中R1是3-三氟甲基芐基或3-甲氧基芐基。
8.根據(jù)權利要求2的化合物，其中R3是使所述化合物具有口服活性的基團，該R3基團選自
其中X1是N或CH；X2選自如下結構式的基團
其中W是H或直鏈或支鏈的烷基；X3是Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Met或Nle，或N-甲基衍生物、或一個鍵；并且X4是如下組成的氨基酸．脯氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、環(huán)己基丙氨酸；在硫上選擇性地帶有如下取代基的半胱氨酸直鏈或支鏈的烷基、烯基、或被鹵素、氰基、硝基、鹵代烷基、氨基、氨基烷基、二烷基氨基、烷基、烷氧基、鹵代烷基、羧基、羰基烷氧基、烷基氨甲?；⒎蓟跫柞；?、烷硫基、直鏈或支鏈的鹵代烷硫基基團選擇性取代的苯基；苯丙氨酸、二氫吲哚-2-羧酸；被如下基團選擇性地取代的四氫異喹啉-2-羧酸直鏈或支鏈的烷基、烯基、鹵代烷基、炔基、鹵素、氰基、硝基、鹵代烷基、氨基、氨基烷基、二烷基氨基、烷氧基、鹵代烷氧基、羰基、羰基烷氧基、烷基氨甲酰基、芳基氧甲?；⑼榱蚧?、或直鏈或支鏈的鹵代烷硫基基團；色氨酸、纈氨酸、正纈氨酸、正亮氨酸、八氫吲哚-2-羧酸、被烷基羧基或芳基羧基選擇性地取代的賴氨酸、在氮上選擇性地帶有如下取代基甘氨酸烷基、環(huán)烷基、苯基、二環(huán)烷基、雜芳基、烯基、炔基、環(huán)烷基烷基、二環(huán)烷基烷基、烷氧基烷基、烷基硫代烷基、烷氨基烷基、稠合的芳基-環(huán)烷基烷基、稠合的雜芳基環(huán)烷基、二烷氨基烷基、羧基烷基或烷氧羰基烷基；或R3是
或
其中Z2和Z5是選擇性取代的烷基、芳基或芳烷基；Z3是選擇性取代的烷基、環(huán)烷基、烯基、芳基、芳烷基、脂肪族雜環(huán)或芳香族雜環(huán)；Z4和Z6是氫或甲基；并且A是選自如下組成的基團
并且n是0、1或2；或R3是
其中G是氮或被氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基或烷基雜芳基選擇性取代的碳；J1和J2彼此獨立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基或烷基芳基；并且J3選自氫、烷基?；?、芳基?；?、芳烷基?；⑼榛?SO2-、芳基-SO2-、烷芳基-SO2-、雜環(huán)-SO2-、烷基-NH-SO2-、芳基-NH-SO2-、烷芳基-NH-SO2-、或雜環(huán)-NH-SO2-。
9.抑制中性粒細胞彈性蛋白酶的方法，包括向需要抑制的宿主給予有效量的權利要求2的化合物。
10.治療急性呼吸疾病的方法，包括向需要治療的宿主給予有效量的權利要求2的化合物。
11.治療心肌缺血-再灌注損傷的方法，包括向需要治療的宿主給予有效量的權利要求2的化合物。
12.含有權利要求1的化合物和可藥用載體的藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及可用作絲氨酸蛋白酶抑制劑的取代噁二唑、噻二唑和三唑類胨,所述絲氨酸蛋白酶包括人中性粒細胞彈性蛋白酶,也稱為人白細胞彈性蛋白酶。
文檔編號C07K5/078GK1170414SQ95196952
公開日1998年1月14日 申請日期1995年11月17日 優(yōu)先權日1994年11月21日
發(fā)明者A·吉爾克斯, L·W·斯普魯斯 申請人:科爾特奇公司