專(zhuān)利名稱(chēng)：N-烷基肽螯合劑、它們與放射性核素的金屬配合物、它們的制備方法及含有這些化合物的 ...的制作方法
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本發(fā)明涉及N-烷基肽螯合劑、它們與放射性核素的金屬配合物，它們的制備方法及含有這些化合物的放射性藥物。
本發(fā)明還涉及含有所說(shuō)的從與金屬的配合物形式存在的螯合物的放射性藥物，和它們的診斷藥盒，其中所含的螯合物既可以是非配合形式的也可以是通過(guò)加入锝或錸離子而配合形式的，和將這些制劑用于診斷和藥用目的。
放射性標(biāo)記物質(zhì)主要用于醫(yī)學(xué)診斷中以檢測(cè)內(nèi)部器官的畸形和功能性變化或體內(nèi)病理過(guò)程的變化。給病人服用一種組合物，例如，一種含有放射性物質(zhì)的注射溶液。通過(guò)使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)器(例如，一種γ-照相機(jī)記錄放射出的放射線(xiàn)就能得到器官的影像、病理過(guò)程和它們?cè)隗w內(nèi)的變化；當(dāng)在器官或血管中濃度特別高時(shí)，它們可被用于治療目的。
近年來(lái)對(duì)于能與所謂的支持分子(例如，類(lèi)固醇、抗體、類(lèi)脂、蛋白激素，等)偶聯(lián)并按照“藥物靶向”原理起作用的特異性放射標(biāo)記化合物的需要已經(jīng)有所增長(zhǎng)。對(duì)于腫瘤的診斷和治療以及受體顯示(類(lèi)固醇、抗體，等)一樣，能通過(guò)細(xì)胞壁和血-腦屏障的物質(zhì)和適于檢查器官功能，例如，在移植前和移植后，和適等于檢測(cè)血管損傷的物質(zhì)是特別有用的。越來(lái)越多的配合劑被開(kāi)發(fā)用于許多放射性核素并與組織相關(guān)的或代謝作用相關(guān)的支持分子偶聯(lián)以便獲得更高的放射性藥物選擇性和在與其相關(guān)的靶器官中更高的放射性核素濃度。嘗試了將錸的放射性同位素用作治療藥劑。
由于锝-99m特別適合作為體內(nèi)診斷的同位素，所以它是最常用的放射性核素，這是由于它的有利的物理性質(zhì)(無(wú)顆粒型輻射，有利的物理半衰期，γ-射線(xiàn)140keV)和由此產(chǎn)生的低幅射。锝-99m容易從核素發(fā)生器中以〔99mTc〕-高锝酸鹽的形成得到。為了回收锝-99m螯合物，用適宜的還原劑(例如SnCl2，S2O42-，等)將高锝酸鹽還原至較低的氧化值，此時(shí)锝-99m與螯合劑或蛋白質(zhì)形成配合物。已經(jīng)開(kāi)發(fā)和敘述了用锝-99m標(biāo)記潛在的螯合劑和制備藥盒特異性方法以滿(mǎn)足日常臨床的需要。因此，可直接用锝-99m利用蛋白質(zhì)的供電子團(tuán)(氨基、酰胺、硫羥，等)(J.Nucl.Med.1986，27，685)或通過(guò)引入配合劑(美國(guó)專(zhuān)利4,479,930和Fritzberg，A.R.等，J.Nucl.Med.1986.27.957)標(biāo)記蛋白質(zhì)。
已經(jīng)由環(huán)胺(Troutner，D.E.等；J.Nucl.Med.1980，21，443和Mcke.H；DE-3，911816)，環(huán)烷烴(Ketring，A.R.，Troutner.D.E等J.Nucl.Med.，1980，21，443-448，Int.J.Nucl.Med.Biol.1984，11，113，Volkert等，Applied Radiat，Isot.1982，33，891-896)，N2O2體系(Pillai，M.R.A.；Troutner，D.E.等Inorg.Chem.1990，29.1850)開(kāi)發(fā)出配合劑；同樣敘述了N2S2體系(Bormans，G.；Nucl.Med.Biol.1990，17，499)和N3S體系(Fritzburg，A.EP-A-0 173424和EP-A-0 250 013)。
但是所有這些配合劑都有很多缺點(diǎn)，即標(biāo)記環(huán)烷烴以及從文獻(xiàn)中所知的N2O2體系(Pillai，M.R.A等Inorg.Chem.1990.29.1850-1856)都需要pH值為10-13。此外，這些體系沒(méi)有任何可促進(jìn)與生物分子或蛋白激素偶聯(lián)的反應(yīng)性基團(tuán)。N2S2和N3S體系在各自的情況下可以是足夠穩(wěn)定的，但只適用于簡(jiǎn)單的排泄時(shí)期如多尿癥，EP-A-0,250,013進(jìn)行了簡(jiǎn)化從文獻(xiàn)(EP-A-0,250,013)中所知的需要加熱至100℃進(jìn)行放射性標(biāo)記的MAG3制備的嘗試(Ban-nister，K.M.等；J.Nucl.Med.1990.31.1568-1573)但這樣的方法至今尚未用于臨床。
N2S2配合物(Borman，G.等Nud.Med.Biol.1990.17.499)從制備至應(yīng)用間的穩(wěn)定性小于1小時(shí)，這是一個(gè)很大的缺點(diǎn)。雖然還未與臨床實(shí)踐相關(guān)，但正在努力消除缺點(diǎn)(Merryn，W.等，Applied.Ra-diat.Isot.Vol.42(7)，607-612)。
到現(xiàn)在為止已知的配合劑具有均勻的結(jié)構(gòu)。因此只適用一個(gè)診斷目的。分子的變化限于骨架的亞組分，因而不允許通過(guò)配合物的變化能得以實(shí)現(xiàn)的更廣泛的醫(yī)學(xué)應(yīng)用。所以考慮到個(gè)別配合物的制備和理論上的理解這兩方面，它們都是昂貴的。
本發(fā)明的問(wèn)題是提供短鏈N-烷基肽螯合劑，在室溫和寬的pH范圍下與锝和錸配合，并形成離子的和非離子的配合物，從而提供沒(méi)有已知99mTc-和180，188Re-配合物的缺點(diǎn)的化合物。
將這些化合物應(yīng)用于人類(lèi)必須滿(mǎn)足對(duì)暴露于放射線(xiàn)下，穩(wěn)定性和溶解性的要求；同時(shí)，應(yīng)該建立一種盡可能簡(jiǎn)單的表征這些化合物的方法，和提供一種本發(fā)明的化合物結(jié)合物和它們的金屬配合物的藥盒組合物用于臨床應(yīng)用。
該問(wèn)題根據(jù)本發(fā)明得到解決，其中本發(fā)明提供了通式(I)的化合物R3-S-CH2-CO-NR1-[CH2-CO-NH]n-CH2-CO-R2(I)式中n代表數(shù)0，1或2，R1是含有1至20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基殘基，它選擇性地被1至3個(gè)氧原子打斷或置換，和該基團(tuán)可以包括末端的-COOH，-OH或-NH2基團(tuán)，這些基團(tuán)通過(guò)乙醇酸或它的酯或醚被選擇性地酯化或醚化，用含有至多18個(gè)碳原子的羧酸或醇形成酯或醚，或表示選擇性地在它的4-位具有COOH，NH2或OH基團(tuán)的苯基或環(huán)己基殘基，COOH，NH2或OH基團(tuán)用含有至多6個(gè)碳原子的羧酸或醇進(jìn)行酯化、醚化或酰胺化，或被一個(gè)鹵素原子置換，R2是鹵素原子、鹵代甲基、甲基羧基、三氟甲基羧基、NH2或OH基團(tuán)，當(dāng)R2＝OH被立即、或用含有至多8個(gè)碳原子的α、ω-羧基羧酸通過(guò)它的端羧基醚化后，用生物分子、類(lèi)固醇、麥角靈衍生物、苯并二氮雜衍生物縮膽囊肽、肽、蛋白質(zhì)、蛋白激素、氨基糖、內(nèi)皮素，內(nèi)皮素衍生物、內(nèi)皮素抗體或內(nèi)皮素片段進(jìn)行酯化或酰胺化時(shí)形成羧基，R2是通式II的殘基 或通式IIa的殘基 其中R4是亞甲基、1、3-亞丙烯基氨基、亞丙炔基氨基、亞甲基氨基或亞甲氧基和R8是氫原子或甲基，R2是通式III的殘基 或通式IIIa的殘基 其中R5是-NH-，-NH-CO-N＜、-NH-CO-NH-或亞甲氧基，R6是氫原子、鹵素原子或甲基和R7是氫原子或含有至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基殘基，R3是氫原子、乙?；⒈郊柞；?、對(duì)甲氧基芐基、乙酰氨基甲基、苯甲酰氨基甲基、三甲基乙酰氨基甲基、羥基乙?；?、乙氧基乙基、硫乙基、三苯甲基或易于分離的硫保護(hù)性基團(tuán)和由藥物上可接受的酸或堿所形成的它們的鹽。
令人吃驚地，發(fā)現(xiàn)了一類(lèi)化合物，它們不僅避免了上述缺點(diǎn)而且作為99MTc+5配合物包括從N3S→N2SO→S2O2→N2S2-N-烷基肽配合物體系的轉(zhuǎn)變，因此可以在廣泛的范圍內(nèi)用作配合劑。
式IV表示99MTc核(中性)與R3S-CH2-CO-NR1〔CH2-CO
式IV表示99MTc核(中性)與R3S-CH2-CO-NR1〔CH2-CO-NH〕2-CH2-CO-R2的N3S-N烷基肽配合物 式V表示99MTc核(中性)與R3S-CH2-CO-NR1〔CH2-CO-NH〕1-CH2-COOH的N2OS-N烷基肽配合物 式VI表示99MTc核(帶負(fù)電荷)與R3S-CH2-CD-NR1〔CH2-CO-NH〕0-CH2-COOH的O2S2-N烷基肽配合物 和式VII最后表示99MTc核(帶正電荷)與R3S-CH2-CO-NR1〔CH2-CO-NH〕0-CH2-LO-R2中的N2S2-N烷基肽配合物。 由分子變化所形成的配合物在其生物學(xué)特性方面顯示出驚人的范圍和一致性。因此當(dāng)這種類(lèi)型的化合物與生物配位體偶聯(lián)時(shí)，它們適用于受體顯示(這一點(diǎn)對(duì)于99MTc化合物還未被敘述過(guò))并且很好地適用于血管損傷的斑的顯示和腎功能的測(cè)定，可以選擇化合物與生物活性的配位體偶聯(lián)。
其中R1是-CH2-(CH2)m-CH3基團(tuán)，其中M＝1-14，或R1是苯基、對(duì)苯基胺、環(huán)己基胺、對(duì)羥基苯基、4-羥基環(huán)己基、對(duì)鹵代苯基或4-鹵代環(huán)己基的化合物是優(yōu)選的。
此外，通式I的化合物是優(yōu)選的，其中R1等于-(CH2)q-OOC-CH2-OOC-(CH2)r-CH3，q和r是從1至16的整數(shù)。
通式I的這樣的化合是特別優(yōu)選的其中R1是直鏈或支鏈的含有1-6個(gè)碳原子的烷基殘基，或?qū)︿灞交鶜埢?br>
另外，通式I的化合物是優(yōu)選的其中R2是通式II的殘基 或通式IIa的殘基 其中R4是亞甲基、1，3-亞丙烯基氨基、亞丙炔基氨基、亞甲基氨基或亞甲氧基和R8是氫原子或甲基。
17α-乙炔基雌甾二醇或它們的3-甲基醚是這些類(lèi)固醇中優(yōu)選的。
雌甾二醇的17α-乙炔基也可以與乙烯基偶聯(lián)。乙炔和乙烯基的次序可以改變，同樣將乙炔或乙烯基加倍是有用的。螯合劑和雌甾二醇分子間的最短距離，優(yōu)選剛性乙炔或乙烯基團(tuán)，對(duì)于防止側(cè)鏈的折疊是重要的。
如果I鍵合到雌甾二醇骨架該優(yōu)選的17α-位上，如文件例如Epperly，M.W.等人〔J.Steroid Biochem，Molec.Biol.Vol.39.No.5A.729-734，1991〕證明的可預(yù)見(jiàn)到所產(chǎn)生的螯合配合物—生物配位體化合物具有很小或不具有生物活性的降低。
這些雌激素螯合配合物的顯著意義是基于它們穿透細(xì)胞壁并連接到雌激素受體上的能力。這一點(diǎn)尤其適用于根據(jù)通式In＝2的配合劑。這些N3S配合物在99MTc+5處是中性的，這是由于在Tc核上的N1烷基化的結(jié)果(參見(jiàn)式IV)。帶電的配合物如N3S配合物硫代乙?；桓拾滨Ｒ桓恃貂Ｒ桓拾滨?O-酯型17α-乙炔基螯合類(lèi)固醇(我們的試驗(yàn))不能穿透細(xì)胞壁，而本發(fā)明的N1烷基化的配合物(N1＝甲基)可穿透細(xì)胞壁并在靜脈內(nèi)注射后其自身附著到子宮上。按照血液/子宮商數(shù)，它們的濃度是0.2并且能隨著N1烷基鏈的長(zhǎng)度或取代基而變化。這有利于按照SPECT方法的mammaca的早期檢測(cè)。在這里根據(jù)實(shí)施例10的化合物是特別優(yōu)選的。
此外，通式I的化合物是優(yōu)選的，其中R2是通式III的殘基 或通式IIIa的殘基 式中R5是-NH-NH-CO-N＜，NH-CO-NH-，或亞甲氧基，R6是氫原子、鹵原子或甲基和R7是含有至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基殘基。
通式III和IIIa的這些化合物是麥角靈衍生物如果需要，在2-和/或6-位具有烷基取代基且2位上鏈長(zhǎng)為C1或6位上是C1-3和/或2位上是甲基或鹵素取代基的8α-氨基-6-甲基麥角靈是這些麥角靈微生物中優(yōu)選的。在麥角靈8位上的取代基，除了是XNH2外，也可以是β-CH2O-或αNH-CO-N＜或αNH-CO-NH-。
根據(jù)本發(fā)明的通式I的化合物在末端的硫原子上帶有一個(gè)R3殘基。該R3殘基是一個(gè)硫保護(hù)基團(tuán)，在根據(jù)本發(fā)明的通式I的化合物的合成中需要該基團(tuán)。這樣的保護(hù)基因應(yīng)該是能容易分離的。適當(dāng)?shù)腞3線(xiàn)基是，例如，乙?；?、苯甲酰基、對(duì)甲氧基芐基、乙酰氨基甲基、苯甲酰氨基甲基、三甲基乙酰氨基甲基、羥基乙?；?、乙氧乙基、或三苯甲基。苯甲?；翘貏e優(yōu)選的。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是金屬螯合配合物，它由放射性金屬離子與根據(jù)本發(fā)明的通式I(其中R1、R2和R3如上所定義)的化合物形成。
適宜的放射性金屬離子是，例如，Tc，Re，Cn，Ga，Gd，γ和In的放射性核素離子。放射性核素根據(jù)本發(fā)明的通式I的金屬螯合復(fù)合物的應(yīng)用的需要來(lái)選擇。
不同的放射性核素被用于放射治療學(xué)或放射診斷學(xué)中。
Tc和Re同位素放射性金屬離子在此是優(yōu)先的。
放射性核素锝-99m是特別優(yōu)選的。本發(fā)明的另一個(gè)目的是結(jié)合物、其含有通式I的化合物或由Tc，Re，Cn，Ga，Gd，γ和In的放射性金屬離子與通式I的化合物形成的金屬螯合配合物，和選擇性積聚在病變組織或腫瘤中的物質(zhì)，在所說(shuō)的物質(zhì)之間存在共價(jià)鍵，該共價(jià)鍵對(duì)于含有羧基或氨基的物質(zhì)如肽、蛋白質(zhì)、抗體或它們的片段是酰胺鍵，對(duì)于含有羥基的物質(zhì)如脂肪醇是酯樣鍵，對(duì)于含有醛基的物質(zhì)是亞氨鍵。
優(yōu)選的結(jié)合物具有在病變組織中積聚的肽如內(nèi)皮素、部分內(nèi)皮素序列、內(nèi)皮素類(lèi)似物，內(nèi)皮素衍生物或內(nèi)皮素拮抗物。
特別優(yōu)選的是這樣的共軛物，它們含有通式I化合物和在病變組織中選擇性積聚的肽，其中包含下列序列 或部分序列his-leu-asp-ile-ile-trp或環(huán)狀氨基酸序列環(huán)-(Dtrp-Dasp-pro-Dval-leu)，環(huán)-(Dglu-ala-alloDile-leu-Dtrp).
本發(fā)明的另一個(gè)目的是根據(jù)本發(fā)明的通式I的化合物及其由藥物上可接受的酸或堿形成的鹽的制備方法R3-S-CH2-CO-NR1-〔CH2-CO-NH〕n-CH2-CO-R2(I)其中n表示0，1或2的數(shù)，R1是被1至3個(gè)氧原子選擇性隔斷或置換的含有1至20個(gè)碳原子的直鏈成支鏈的烷基殘基，和它可以包括末端的-COOH，-OH或-NH2基團(tuán)，這些基團(tuán)，如果需要，可通過(guò)乙醇酸或它的酯或醚選擇性酯化或醚化，用含有至多18個(gè)碳原子的羧酸或醇形成酯或醚，或表示苯基或環(huán)己基殘基，在它的4-位上選擇性地具有能用含有至多6個(gè)碳原子的羧酸或醇選擇性酯化、醚化或酰胺化或被鹵素原子取代的，-COOH，NH2-或OH-基團(tuán)。R2是鹵素原子，鹵代甲基、甲基羧基、三氟甲基羧基、NH2或OH基因、當(dāng)R2＝OH時(shí)形成的羧基被直接，或在用含有至多8個(gè)碳原子的α.ω-羥基羧酸通過(guò)它的末端羧基醚化后，與生物分子、類(lèi)固醇、麥角靈衍生物、苯并二氮雜衍生物、縮膽囊肽、肽、蛋白質(zhì)、蛋白激素、氨基糖、內(nèi)皮素、內(nèi)皮素衍生物，內(nèi)皮素拮抗物或內(nèi)皮素片段進(jìn)行酯化或酰胺化，R2是通式II的殘基 或通式IIa的殘基 式中R4是亞甲基、1，3-亞丙烯基氨基、亞丙炔氨基、亞甲基氨基或亞甲基氧基和R8是氫原子或甲基，R2是通式III的殘基 或通式IIIa的殘基 其中R5是-NH-， -NH-CO-NH-或亞甲氧基，R6是氫原子，鹵原子或甲基和R7是氫原子或含有至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基殘基，R3是氫原子、乙?；?、苯甲?；?、對(duì)甲氧基芐基、乙酰氨基甲基、苯甲酰氨基甲基、三甲基乙酰氨基甲基、羥基乙酰基、乙氧基乙基、乙硫基、三苯甲基或容易分離的硫保護(hù)基，其特征在于首先使a)甘氨酸的二酮哌嗪衍生物或b)甘氨酸與鹵代酸鹵化物反應(yīng)，然后與通式VI的烷基胺或芳基胺反應(yīng)
R1-NH2(VI)式中R1如上面所定義，再與鹵代酸鹵化物反應(yīng)，然后與通式IV的化合物反應(yīng)R3-SH (IV)式中R3如上面所定義，或使通式V的化合物R1-NH-CH2-CO-R2(V)式中R2如上面所定義，與鹵代酸鹵化物反應(yīng)，然后與通式VI的烷基胺或芳基胺反應(yīng)，R1-NH2(VI)式中R1如上面所定義，和再與鹵代酸鹵化物反應(yīng)，然后與通式IV的化合物反應(yīng)R3-SH(IV)式中R3是如上面所定義，和如果需要，將這些化合物用藥物上可接受的酸或堿轉(zhuǎn)化成鹽。
當(dāng)從根椐本發(fā)明的通式I(其中n是0或1)的化合物開(kāi)始，并使其與含有末封基團(tuán)的化合物反應(yīng)，與上述化合物偶聯(lián)后由此形成R2殘基時(shí)也可以制備根據(jù)本發(fā)明的通式I的化合物。這樣產(chǎn)生根據(jù)本發(fā)明的通式I的化合物，其中n是1或2。這意味著根據(jù)本發(fā)明通式I的化合物的鏈的一部分是由通過(guò)偶聯(lián)加成的R2殘基提供的。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是由放射性金屬離子和根據(jù)本發(fā)明的通式I的化合物組成的根據(jù)本發(fā)明的金屬螯合配合物的制備。
用通常已知的方法使通式I的化合物反應(yīng)，R3殘基預(yù)先或同時(shí)選擇性裂解除去。
Tc和Re的放射性金屬離子和通式I的化合物的金屬螯合配合物通過(guò)使高锝酸鹽或高錸酸鹽形式的锝-99m或Re在還原劑和如果需要，輔助配位體存在下與通式I的化合物R3-S-CH2-CO-NR1-〔CH2-CO-NH〕n-CH2-CO-R2(I)其中R1、R2和R3如上面所定義，進(jìn)行反應(yīng)來(lái)制備。
化合物和它們的配合物驚人的易變性是與本發(fā)明尤其相關(guān)的。對(duì)于根據(jù)通式I(n＝2)的化合物得到了一種N3S體系。當(dāng)從n＝2變化至n＝1時(shí)，通形成一個(gè)具有驚人的配合物穩(wěn)定性的N2SO-N-烷基體系。最后，在n＝0時(shí)與N1S1-N-烷基體系(該體系一方面代表一種N2S2-N-烷基體系，或作為另一種二聚物，是一種O2S2-N-烷基配合物)的配合過(guò)程中可形成一種螯合配合物，而不需要一種化學(xué)上的共價(jià)橋鍵連接該配合物。
由于它們的化學(xué)易變性和配合變體，這些新的化合物也具有廣泛的臨床應(yīng)用范圍。
直至今天還沒(méi)有一種體內(nèi)顯示作為動(dòng)脈粥樣硬化初發(fā)征狀的斑形成的方法。動(dòng)脈粥樣硬化是一種很普遍的疾病和冠狀動(dòng)脈心臟病的早期階段，冠心病導(dǎo)致現(xiàn)代工業(yè)化國(guó)家中大約40％人口死亡。因此特別需要用一種簡(jiǎn)單設(shè)備顯示血管損傷。由此根據(jù)本發(fā)明的N-烷基螯合物可被用于動(dòng)脈粥樣硬化血管病的早期檢測(cè)。
在靜脈內(nèi)應(yīng)用根據(jù)通式I的化合物，其中R2是內(nèi)皮素、部分內(nèi)皮素序列、內(nèi)皮素類(lèi)似物、內(nèi)皮素衍生物，或內(nèi)皮素拮抗物，以后在動(dòng)物試驗(yàn)(通過(guò)人工產(chǎn)生血管的動(dòng)脈粥樣硬化變化的WHHL-型兔子；由于缺少或不完善的LDL受體WHHL兔子在血液中顯示較高含量的LDL并由此產(chǎn)生血管的動(dòng)脈粥樣硬化變化)中得到的斑和完整血管的活性商數(shù)是1∶5(參見(jiàn)
圖1和圖2)。
盡管從鏈長(zhǎng)為C6的R1烷基鏈中產(chǎn)生的配合物是親脂性的，令人非常吃驚的是只在3小時(shí)后排泄就發(fā)生了。
主動(dòng)脈區(qū)域的損傷能在質(zhì)量非常好的放射自顯影圖中被顯示。由于脂肪樣分子斑或它們的受體的親和力足夠強(qiáng)以保持粘附到斑上，盡管由于肝臟的代謝作用使得血液中化合物的濃度降低了。
通過(guò)改變R1烷基可以影響動(dòng)脈粥樣硬化變化的血管中斑的親和力。因此通過(guò)R1中殘基的特點(diǎn)可以控制親脂性而R2，作為游離的羧基，提供了良好的水溶性條件。作為游離羧酸R2的一種替換，用一種氨基烴酰胺化該羧基能有助于改進(jìn)水溶性。
已知蛋白質(zhì)，特別是短鏈蛋白激素如內(nèi)皮素當(dāng)與螯合劑通過(guò)共價(jià)鍵偶聯(lián)時(shí)喪失它們的效力。根據(jù)本發(fā)明的化合物在與內(nèi)皮素，它們的拮抗物或片段共價(jià)鍵合后的特性因此是完全意想不到的(實(shí)施例11.12)。
用內(nèi)皮素從在此所示的螯合的初步階段(實(shí)施例11和12)產(chǎn)生根據(jù)本發(fā)明通式I的N-烷基配合劑的方法是一種產(chǎn)生這樣的配合位置的新方法。這種新的通式I的N-烷基配合物具有與已知的N3S配合物相似的穩(wěn)定性。
已經(jīng)敘述了診斷動(dòng)脈粥樣硬化的非侵害性枝術(shù)，特別是包括放射性碘標(biāo)記的技術(shù)。用放射性核素標(biāo)記的抗體或標(biāo)記的“低密度脂蛋白”(LDL)鍵合于動(dòng)脈粥樣硬化壁區(qū)域(Lees等，1983，J.Nucl.Med.24.154-156，Kaliman等，1985，Circulation，72，300；Virgolini等，1991，Eur.J.Nucl，Med.，18，944-947)。但是，這些方法仍保留著主要的缺點(diǎn)，例如，在體系中抗體的抗原性或從病人的血液中分離、純化和標(biāo)記LDL所需要的長(zhǎng)時(shí)間(幾天)。所有缺點(diǎn)中最主要的是，這些大分子在血液中具有較長(zhǎng)的半衰期，這一點(diǎn)連同體內(nèi)較高的背景輻射一起使得動(dòng)脈粥樣硬化損傷的定位很困難(如果不是不可能的話(huà))。Shih等(1990，Proc.Narl.Acad.Sci.，87，1436-1440)合成了LDL蛋白部分(apo-B-100)的部分序列，它們?nèi)匀绘I合于動(dòng)脈粥樣硬化斑上，但是具有短得多得血內(nèi)半衰期和改善的信噪此。由于與斑的親和力太低和/或這些肽在斑中上的鍵合位置密度低，未能證實(shí)使用這些apo-B-肽成功地在活體內(nèi)診斷動(dòng)脈粥樣硬化。
通常，這些化合物共同具有放射性碘-123的缺點(diǎn)。由于它們是在回旋加速器中制得的和具有13小時(shí)的物理半衰期并且它們很容易在體系內(nèi)被分離，所以它們是不易得到的。因此，發(fā)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明通式I的化合物，在共價(jià)鍵合于內(nèi)皮素的NH基上并與99mTc配合后表現(xiàn)出良好的在動(dòng)脈粥樣硬化斑中的積聚作用是令人吃驚的。特別引人注意的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是在用酰胺化方法，包括定位于適當(dāng)位置上的各自的內(nèi)皮素的NH和SH基團(tuán)(如果有的話(huà))，共價(jià)鍵合于內(nèi)皮素上之后n＝1和n＝0的化合物產(chǎn)生新的N-烷基肽配合劑。
當(dāng)使根據(jù)本發(fā)明的化合物與多巴胺樣生物活性分子反應(yīng)時(shí)，令人吃驚地來(lái)自麥角靈家族的這些化合物的受體親和力并未喪失；在初步階段中，(有或沒(méi)有D2受體親和力)，甚至獲得了足以利于D2受體的顯示的腦通道。到目前為止使用99mTc+5配合物顯示大腦中的受體的嘗試已經(jīng)失敗。例如，當(dāng)8α-氨基-6-甲基麥角靈與巰基-乙?；?甘氨酰-甘氨酰-甘氨酸反應(yīng)產(chǎn)生8α-酰胺，并在給大鼠(wistar)靜脈注射后用99mTc+5配合時(shí)，在大腦中沒(méi)有攝入。
但是如果用根據(jù)本發(fā)明通式I的化合物(其中K1＝甲基)未進(jìn)行該反應(yīng)和通過(guò)R2進(jìn)行酰胺化或酯化，則在類(lèi)似條件下0.1至0.5％的劑量積聚在大腦中。 用n＝1和n＝0，與生物活性分子相互作用，形成N-烷基肽配合物的新結(jié)構(gòu)，與多巴胺樣化合物的結(jié)構(gòu)驚人地相似并大量地積聚在大腦中可被用來(lái)顯示D-受體(式IX)。 (按照本領(lǐng)域中已知的方法)(A Specialist Periodical Report；Amino-acids，Peptides and Proteins；The Chemical Society，Burlington Hoμse，Iondon，WIVOBN)制備本發(fā)明的化合物。從肌氨酸開(kāi)始與氯乙酰基氯化物反應(yīng)制備R1＝CH3和R2＝OH的化合物。用常規(guī)的方法使產(chǎn)生的氯乙?；“彼崤c硫代苯甲酸反應(yīng)，如此產(chǎn)生n＝0的結(jié)構(gòu) 化合物A
n＝2的化合物通過(guò)使甘氨酸的二酮基哌嗪與氯乙?；然锓磻?yīng)來(lái)制備。產(chǎn)生的氯乙?；拾滨８拾彼峤又cN-甲基胺反應(yīng)或，為了插入更長(zhǎng)的殘基，與N-烷基胺、苯基胺、烷基-氧雜-烷基胺、環(huán)烷基胺或甘氨酸基醇酸酯反應(yīng)。再與氯乙?；然锓磻?yīng)和接著進(jìn)行硫代苯甲酰化產(chǎn)生n＝2的下式化合物。 化合物BR1表示在肌氨酰氮原子上的變化。
使甘氨酸鹽與N-保護(hù)的肌氨?；衔锓磻?yīng)或使甘氨酸與氯乙酰氯化物反應(yīng)和接著將氯甲基氨解制得n＝1的各自的化合物。再與氯乙酰氯化物反應(yīng)和接著進(jìn)行硫代芐基化產(chǎn)生n＝1的標(biāo)題化合物。 化合物C化合物A、B、C、用通常的方法不與帶有氨基或羥基的共反應(yīng)物反應(yīng)。為此，將A至C溶解在N-甲基吡咯烷酮中，用BOP(B.Cas-tro等Tetrahedron Letters 14(1975)1219)或TBTU(Knorr等Te-trahedron Setters 30(1989)1927)預(yù)活化，然后與氨基組分反應(yīng)。酯化反應(yīng)優(yōu)選用二環(huán)己基碳化二亞胺在二甲基氨基吡啶存在下進(jìn)行。為了合成具有雌激素作為生物配位體的化合物，從已在17α位上帶有不飽和取代基如炔丙基胺或炔丙基醇?xì)埢拇萍に亻_(kāi)始并用所述的方法使之與化合物A至C反應(yīng)。
化合物A至C按照肽化學(xué)中普通的方法，可以方便地在溶液中，優(yōu)選在二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亞砜中，或這些組分的混合物中與肽，特別是內(nèi)皮素組分進(jìn)行反應(yīng)。當(dāng)使用固相方法時(shí)，氨基組分可以在通常條件下用合成樹(shù)脂酰化。裂解除去合成樹(shù)脂產(chǎn)生所需要的化合物。如果需要，通過(guò)在RP18柱上用含有0.1％三氟乙酸的水/乙腈梯度進(jìn)行色譜來(lái)完成制備性純化。
帶有氨基或羥基的麥角靈與肽反應(yīng)類(lèi)似地在溶液中進(jìn)行反應(yīng)。在N-甲基吡咯烷酮中進(jìn)行反應(yīng)。如在肽中所述來(lái)完成制備性純化。
通過(guò)下列方法得到其它的R4殘基使R1與R2＝OH反應(yīng)形成被保護(hù)的二肽A-C后，接著用NH2-CH2Cl、NH2-CH2-CH＝CHJ或NH2-CH2-C＝CJ活化，和，在鈀-O反應(yīng)后，用C-C鍵使17α-乙炔類(lèi)固醇與所需要的配合劑鍵合。
配合物優(yōu)選通過(guò)用，例如，錫(II)氯化構(gòu)成二硫化物在含水介質(zhì)中于pH6～9和室溫下還原高錸酸鈉來(lái)形成；如果需要，使用一種輔助配位體如檸檬酸鈉或酒石酸鈉，在反應(yīng)前或在原位裂解掉保護(hù)基R3。
當(dāng)R2＝OH時(shí)形成的R2羧基的活化，或用NCS或類(lèi)似的反應(yīng)性基因?qū)⑵渲脫Q導(dǎo)致肽螯合物與更大的蛋白質(zhì)或蛋白激素，內(nèi)皮素、內(nèi)皮素類(lèi)似物、或內(nèi)皮素拮抗物，內(nèi)皮素衍生物，部分內(nèi)皮素序列的共價(jià)鍵合，和隨后的配合。
如在制備指導(dǎo)中所證明的，本發(fā)明的99mTc和186，188Re配合物可在室溫、中性或弱堿性pH下，有或沒(méi)有再螯合(例如經(jīng)過(guò)一個(gè)七葡糖酸鹽-99mTc配合物)以95％的產(chǎn)率來(lái)制備。經(jīng)過(guò)一個(gè)游離陽(yáng)離子它們的易成鹽作用保證了它們?cè)谒械牧己萌芙庑浴?br>
金屬配合物的制備按照本領(lǐng)域中已知的方法將保護(hù)基裂解下來(lái)(見(jiàn)“Protective groups in organic synthesis”T.N.Greene.John；Wi-ley and Sons 1981)。
應(yīng)用于人體診斷通常所使用的量是370MBq至1850MBq，優(yōu)選740至1480MBq。以設(shè)計(jì)成適用于人類(lèi)的藥盒形式提供本發(fā)明的化合物。該藥盒含有至少一種根據(jù)通式I的螯合劑，可以是游離的或與配位體鍵合的。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是一種冷藥盒，它含有一種通式I的螯合劑，該螯合劑可以是游離的或鍵合于生物活性分子如麥角靈、雌二醇或者內(nèi)皮素衍生物上，并且能結(jié)合金屬原子。
為了進(jìn)行合成中間引入的保護(hù)基團(tuán)的裂解經(jīng)常產(chǎn)生困難。由于-S-保護(hù)基(R3)的裂解同時(shí)伴有肽鏈的裂解，這一過(guò)程產(chǎn)生嚴(yán)重?fù)p害或無(wú)用的片段，尤其是在具有肽鍵的螯合劑情況下；因此更令人吃驚的是在氫/Pd/CaCO3和通常的堿存在下高達(dá)80％的保護(hù)基被裂解，即，保護(hù)基在氫化條件下分離。
游離螯合配合物合成的這一決定性改進(jìn)是重要的，因?yàn)楸Ｗo(hù)基可以在組合藥盒前裂解，而這一點(diǎn)是在獲得不含保護(hù)基的螯合劑工藝中的主要改進(jìn)。
實(shí)施例3敘述了根據(jù)本發(fā)明的分離方法。雖然用堿的常規(guī)方法只產(chǎn)生一種難于分離的混合物，但在氫/Pd/CaCO3存在下用堿分離保護(hù)基導(dǎo)致約100％的產(chǎn)率，其中含有80％所需要的物質(zhì)。
值得一提的是，例如，與胺或醇的反應(yīng)是通過(guò)用本領(lǐng)域中已知的方法活化羧酸R2＝OH來(lái)進(jìn)行的。
活化基團(tuán)是，例如酰氯、混合酸酐〔Org.Prep.Pvoc，Int，1975，7，215〕，活化的酯〔Adv.Org.Chem.Part B.472〕。這些可通過(guò)連接劑與生物分子相連接，例如用碳化二亞胺的方法〔Fieser，Reagentsfor Organie Synthesis 10.142〕。連接是以這樣的方式進(jìn)行的，即在螯合劑和生物分子之間形成共價(jià)鍵。
當(dāng)用類(lèi)固醇作為生物分子時(shí)，在17α位具有取代基的雌二醇衍生物是優(yōu)選的。這些化合物的合成方法已有敘述，例如，Blickenstaff敘述了合成17α-乙炔基雌二醇衍生物的方法(Blickenstaff A；Steroids 46，899(1985)；USP 462，426)。具有末端NH2或OH功能的帶有17α-炔丙基取代基的雌二醇衍生物的合成已由Blicken-staff，Brandes和Poirier敘述。(Blickenstaff等，Steroids 48，223(86)；Brandes.A.等，Dissertation 87-01441，1986，University of Illi-nois，D.Poiner等，J.Steroids，Biochem.Molec.Biol.38.No.6，759-774，1991)。
在Aldrichchimica Acta，Vol 15.No.1.1982；Shun-ichi Mura-hashi等，Stepher A.Godleski，Tetrachedron Leters.Vol.22.No24.PP2247-2250，1981；Tetrahedron Letters.Vo 129.No.24.2973-2976，1988中給出了對(duì)連接三鍵和雙鍵(例如在鈀-O反應(yīng)后)的概括研究。例如，具有R2＝-NH-CH2-C≡CH的式I根據(jù)給出的參考文獻(xiàn)在與17α〔2-鹵代-乙炔基〕雌二醇偶聯(lián)過(guò)程中進(jìn)行反應(yīng)。
從文獻(xiàn)中已知6-甲基-8-取代的麥角靈型麥角生物堿具有廣泛的化學(xué)變化范圍而在效果和8-位取代基之間沒(méi)有可清楚認(rèn)識(shí)的聯(lián)系〔Engot Alkaloids and Related Compounds，EditorsB.Berde和H.O.Schild，Springer-Verlag，Berlin.Heidelleng，New York 1978〕。
麥角靈是優(yōu)選的多巴胺樣配位體。在Ergot Alkaloids and Re-lated Compound，Editor B，Berde和H.O.Schild，Springer-VerlagBerlin.Heidelleng.New Youk，1978，Chapter II Chemical Background，J.Ruisemmann和P.A.Steidler中給出3對(duì)8-取代的麥角靈合成方法的概括研究。
與8α-氨基或8β-羥基-甲基麥角靈的反應(yīng)是優(yōu)選的。反應(yīng)經(jīng)過(guò)R2中的活化基團(tuán)，例如，苯并三唑-1-基-四甲基-脲陽(yáng)離子四氟硼酸鹽，或按照已知的碳化二亞胺方法進(jìn)行。
當(dāng)根據(jù)本發(fā)明包括在麥角靈8α-氨基和6-N-甲基的氮在內(nèi)使用n＝1和n＝0的配合劑或部分配合劑時(shí)生成新的配合物。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是金屬螯合物用于診斷和/或治療目的的用途以及含有至少一種根據(jù)本發(fā)明通式I的螯合物，和如果需要，含有在蓋倫醫(yī)學(xué)中普通的添加劑的藥物。
為了用于人體，以冷或熱的藥盒形式提供根據(jù)本發(fā)明的化合物。藥盒含有至少一種游離或結(jié)合形式的根據(jù)式I的螯合劑，選自麥角靈、雌二醇、內(nèi)皮素、短鏈合成肽、縮膽囊肽的配位體是優(yōu)選的。
實(shí)施例與葡糖酸鈉的一般性配合99mTc-葡糖酸鹽
將2毫升99mTc發(fā)生器洗脫液加入到2毫升0.1M的葡糖酸鈉溶液中并與10微升0.01M SnCl2(在0.01M HCl中)混合。然后用薄層色譜法檢查高锝酸鹽的還原量。
TLC(硅膠/丙酮)99mTc-葡糖酸鹽Rf0-0.1；99mTcO44-Rf0.9.實(shí)施例1〔99mTc〕-巰基乙?；“彼岬谝徊铰纫阴；“彼釋?.07摩爾的肌氨酸溶于50毫升1N氫氧化鈉溶液中，和將0.08摩爾的氯乙?；然锖?10毫升1N的氫氧化鈉溶液在0℃分幾份加入。45分鐘后加完，和用20毫升5N的鹽酸將反應(yīng)溶液酸化。
將產(chǎn)物在減壓下蒸發(fā)至干，和剩余物每次用50毫升冷的丙酮萃取，萃取三次。在減壓下除去丙酮和剩余物用100毫升乙醚萃取。將乙醚蒸發(fā)和用一些乙醚浸溶剩余的油狀物，使其在強(qiáng)攪拌下結(jié)晶出來(lái)。產(chǎn)率7 7％的理論量TIC硅膠∥丁醇/冰乙酸/水2∶1∶1Rf0.65(碘蒸汽)第二步苯甲酰基巰基乙?；“彼嵊谑覝卦诒Ｗo(hù)性氣體氣氛下將0.02摩爾的氯乙?；“彼嵩跀嚢柘氯苡?50毫升甲醇。緩慢滴加0.041摩爾硫代苯甲酸溶于20毫升甲醇并用甲醇鈉中和的溶液；將該批反應(yīng)物攪拌12小時(shí)以上。
減壓下除去溶劑和用2N鹽酸浸溶剩余物。從上層溶液中分離出棕色油狀的反應(yīng)產(chǎn)物沉淀并用氯仿萃取。在減壓下除去氯仿和向剩余物中加入乙醚。通過(guò)冷卻和強(qiáng)烈攪拌沉淀出反應(yīng)產(chǎn)物，過(guò)濾，并在素?zé)砂迳细稍铩?br>
pH滴定和IR光譜表明反應(yīng)產(chǎn)物由60％甲基酯和40％游離氨基酸的混合物組成。
第三步保護(hù)其的分離將0.08毫摩爾得到的混合物懸浮在2毫升無(wú)水甲醇中，然后加入2毫克的Pd/CaCO3(5％)并在攪拌下于66kpa的氫氣壓力下與0.13毫摩爾的甲醇鈉在1毫升無(wú)水甲醇中的溶液進(jìn)行反應(yīng)。該批反應(yīng)物進(jìn)一步攪拌15分鐘，然后用Dowex50W×8的甲醇溶液中和。過(guò)濾除去催化劑和樹(shù)脂，將物料冷凍干燥和用2毫升苯萃取雜質(zhì)。隨后分離出苯，和物料用乙醇冷凍干燥。
得到的酯和游離酸的混合物通過(guò)Sephadex G10分離(柱14×1000，20毫升/小時(shí)，RI-檢測(cè)器)。巰基-乙?；?肌氨酸-甲基酯作為第二個(gè)級(jí)分被分離出來(lái)，參見(jiàn)實(shí)施例1a。巰基乙?；“彼酺LCJ硅膠∥丁醇/冰乙酸/水2∶1∶1Rf0.7(水合茚三酮)Rp 18/甲醇Rf0.85(水合茚三酮)′H-NMR(DMSO)TMSδ2.9(SH，1H)，δ3.1(N-CH3，3H)，δ3.9(-CH2，2H)
N-甲基-MAG1的標(biāo)記將溶于200微升水中的大約1毫克N-甲基-MAG1加入到2毫升99mTc葡糖酸鹽溶液中。15-20分鐘的反應(yīng)時(shí)間后用TLC在硅膠60/95％乙醇上測(cè)試純度。大部分活性出現(xiàn)在Rf＝0.1處(大約80％)；其它峰是Rf＝0.2(大約10％)和Rf＝0.4(大約10％)。
電脈圖表明具有相對(duì)遷移率u高锝酸鹽/uTcMAG10.2的陰離子Tc-MAG1配合物。
實(shí)施例1a當(dāng)從實(shí)施例1，第3步中分離反應(yīng)混合物時(shí)，得到20％無(wú)色油狀形式的硫基-乙?；?肌氨酸-甲基酸。
實(shí)施例2巰基-乙?；?己基氨基乙酸第1步己基氨基乙酸將0.1摩爾己基胺加入到0.021摩爾的氯乙酸中并在室溫下保持5天。粘稠的糖漿狀物隨后被攪拌入500毫升丙酮中并以白色薄片形式結(jié)晶出來(lái)。產(chǎn)率2.1克(63％的理論量)TLC硅膠∥丁醇/冰乙酸/水2∶1∶1Rf＝0.6(水合茚三酮)第2步氯乙?；?乙基氨基乙酸將0.01摩爾的己基氨基乙酸溶于10毫升的1N氫氧化鈉溶液中，冷卻，然后在0℃與1.5毫升(1毫升＝0.012摩爾)的氯乙?；然锖?0毫升1N氫氧化鈉溶液交替混合。反應(yīng)在30分鐘后結(jié)束。在溫和加熱下將該批反應(yīng)物攪拌大約30分鐘。然后用3毫升5N鹽酸酸化；分離出棕色油狀沉淀。
用熱水將油狀物萃取數(shù)次和不需進(jìn)一步純化以白色油狀物用于下一步的合成。TLC硅膠∥丁醇/冰乙酸/水2∶1∶1Rf＝0.75(碘蒸汽)第3步苯甲酰基巰基乙?；?乙基氨基乙酸在氮?dú)夥障聦?.018摩爾的氯乙酰基己基氨基酸在500毫升甲醇中攪拌。將0.036摩爾的硫代苯甲酸用甲醇鈉中和并在30分鐘內(nèi)將其加入到溶液中，在保護(hù)性氣體氣氛下將該批反應(yīng)物攪拌12小時(shí)以上。減壓下除去甲醇，剩余物用2N鹽酸酸化，分離出黃色油狀沉淀。產(chǎn)率370毫克TLC硅膠∥丁醇/冰乙酸/水2∶1∶1Rf0.5實(shí)施例3〔99mTc〕巰基乙酰基-肌氨酰-二甘氨酸第1步氯乙?；拾彼嵩?50毫升三頸瓶中于室溫下將10克甘氨酸酐溶于50毫升2N氫氧化鈉溶液中。45分鐘后將溶液冷卻至0℃，以持續(xù)攪拌和冷卻下交替滴入11.1克氯乙?；然锖?4毫升5N氫氧化鈉溶液。45分鐘后加完。隨后，加入40毫升5N鹽酸，這將使溶液?jiǎn)适漕伾瑫r(shí)物料開(kāi)始結(jié)晶。在0℃將其保持1小時(shí)以上和用吸濾法過(guò)濾。用冷水洗滌數(shù)次和從熱水中重結(jié)晶。產(chǎn)率5克在減壓下蒸發(fā)母液。從水中將沉淀重結(jié)晶。產(chǎn)率2.5克熔點(diǎn)173℃TLC硅膠∥正丁醇/冰乙酸/水4∶1∶1Rf0.75(碘蒸汽)IR(KBr中的固體)Vc＝o1636，1676；δNH1550；υCOOH1708cm-1第2步肌氨酰二甘氨酸將5克氯乙酰基二甘氨酸與15毫升33％甲基胺水浴液混合并在室溫下保持2天。然后在減壓下將溶液蒸發(fā)至糖漿狀稠度，將糖漿狀物在水浴中加熱并與50毫升熱乙醇混合。使沉淀在冷處沉降并用G4多孔玻璃濾器以吸濾法過(guò)濾。將沉淀溶于43毫升熱水中，向該溶液中加入43毫升的熱乙醇，產(chǎn)物結(jié)晶化，用吸濾法過(guò)濾并冷凍干燥。產(chǎn)率3克＝60％理論量熔點(diǎn)237℃TLCsilufol∥正丁醇/冰乙酸/水4∶1∶1Rf0.3(水合茚三酮)IR(KBr中固體)υc＝o1620，1650，δNH1540；υCOOH1672cm-1′H-NMR(DMSO)TMSδ2.8(N-CH3，3H)，δ3.8-4.1(-CH2，6H)第3步氯乙?；?肌氨酰二甘氨酸在室溫下將2克肌氨酰-二甘氨酸溶于10毫升1N NaOH和接著在0℃保持溶液攪拌下與1毫升氯乙酰氯化物和16毫升1NNaOH交替混合?；旌显?0分鐘內(nèi)完成。將溶液攪拌30分鐘以上，然后用3克5NHCl酸化，和接著在減壓下將產(chǎn)物蒸發(fā)至干。將產(chǎn)生的結(jié)晶溶于熱水，和將溶液與乙醇混合。過(guò)濾除去氯化鈉沉淀并在減壓下蒸發(fā)濾液。通過(guò)用熱的丙酮多次處理萃取所需要的產(chǎn)物。減壓下除去丙酮，和用少量水浸溶剩余物并冷凍干燥。產(chǎn)率1.1克＝53％理論量熔點(diǎn)74℃TLCSil.ufol∥正丁醇/冰乙酸/水4∶1∶1Rf0.7(碘蒸汽)IR(KBr中固體)υc＝o1655；δNH1550；υCOOH1730cm-1第4步苯甲酰基巰基乙酰基-肌氨酰二甘氨酸于室溫在保持性氣體氣氛和攪拌下將1克氯乙?；?肌氨酰-二甘氨酸溶于140毫升的試劑及甲醇中。
在一個(gè)錐形燒瓶中，將0.8克的硫代苯甲酸溶于3毫升甲醇中并用甲醇鈉中和。在保護(hù)性氣體氣氛下通過(guò)滴加將該溶液緩慢加入到母液中并保持?jǐn)嚢?2小時(shí)以上。減壓下除去溶劑和用2NHCl浸溶剩余物。用吸濾法將其過(guò)濾和用溫水將其洗至中性。然后將剩余物用20毫升氯仿、20毫升乙腈和20毫升乙醚洗滌并在減壓下干燥。產(chǎn)率0.83克＝61％理論量熔點(diǎn)134℃TLCSilufol∥正丁醇/冰乙酸/水4∶1∶1Rf0.8(碘蒸汽)IR(KBr中固體)υc＝o1620；δNH1550cm-1，υCOOH1720cm-1第5步巰基乙?；?肌氨酰二甘氨酸保護(hù)基的堿性分離當(dāng)按照常規(guī)的方法分離保護(hù)基時(shí)，最終產(chǎn)物雜質(zhì)很高。只含有大約25％的巰基乙酰基-肌氨酰二甘氨酸。除了一種未確認(rèn)的副產(chǎn)物外，在該皂化過(guò)程中產(chǎn)生的主要產(chǎn)物是巰基乙酰基-肌氨酸和二甘氨酸。只有較低產(chǎn)率的所需要的產(chǎn)物。
在氫化條件下的堿性分離將0.08毫摩爾的物質(zhì)懸浮于2毫升無(wú)水甲醇中，與2毫克Pol/CaCO3(5％)混合和在攪拌下于60kpa的氫氣壓力下與0.13毫摩爾甲醇鈉在1毫升無(wú)水甲醇中的溶液進(jìn)行反應(yīng)，將溶液攪拌15分鐘和接著用Dowex50w×8的甲醇溶液中和。過(guò)濾除去催化劑和樹(shù)脂，將物料冷凍干燥并用2毫升苯萃取。然后分離出苯，將物料從乙醇中冷凍干燥。產(chǎn)率10.2毫克＝61％理論量，無(wú)色油狀物TLCSilufol∥正丁醇/冰乙酸/水4∶1∶1Rf0.4(水合茚三酮)Rp18∥甲醇Rf＝0.8(水合茚三酮)IR(KBr中固體)υc＝o1650，1680；δNH1550，υCOOH1745cm-11H-NMR(DMSO)TMSδ2.8(SH，1H)δ3.0(N-CH3，3H)，δ3.5-4.1(CH2，8H)，δ8.1-8.2(CO-NH-，2H)〔99mTc〕巰基乙?；?肌氨酰二甘氨酸將1毫升99mTc葡糖酸鹽溶液與0.4毫克前述第4步中的純物質(zhì)在0.5毫升水中的溶液混合，30分鐘后完成反應(yīng)。TLC(硅膠60，95％乙醇)兩個(gè)組分Rf0-0.1(40％)，Rf0.8(60％)電泳(pH7.0)兩個(gè)組分均以陰離子遷移。
實(shí)施例4〔99mTc〕巰基乙?；夯拾滨６拾彼岬?步己基甘氨酰二甘氨酸將0.0048摩爾氯乙?；拾彼崤c0.05摩爾己基胺和5毫升乙醇混合，保持靜置。6天后在減壓下除去溶劑。將油狀剩余物加至50毫升丙酮中并加熱。冷卻后，分離出黃色溶液并將白色剩余物用大約5毫升丙酮再洗一次。產(chǎn)物在素?zé)砂迳细稍铩?br>
產(chǎn)率610.5毫克(47％理論量)TLCSilufol∥正丁醇/冰乙酸/水2∶1∶1Rf0.3(水合茚三酮)Rp18∥甲醇，Rf0.7(水合茚三酮)第2步氯乙?；夯拾滨６拾彼釋?.0022摩爾的己基甘氨酰二甘氨酸溶于5毫升的1N氫氧化鈉溶液中并在室溫下攪拌30分鐘。然后將溶液冷卻。在0℃，將0.3毫升的氯乙?；然锖?毫升1N氫氧化鈉溶液交替加入，30分鐘內(nèi)加完。在不用冷卻下將溶液再攪拌30分鐘。
用5N鹽酸酸化后，在減壓下除去溶劑，并得到黃色油狀形式的產(chǎn)物。用100毫升熱丙酮萃取數(shù)次后，減壓下除去丙酮。剩余物懸浮于30毫升的丙酮中。在素?zé)砂迳蠈咨恋砀稍?。產(chǎn)率311毫克(40％理論量)TLCSilufol∥正丁醇/冰乙酸/水2∶1∶1Rf0.75(碘蒸汽)第3步；苯甲?；鶐€基乙?；夯拾滨６拾彼釋?.00089摩爾的氯乙酰基己基甘氨酸二甘氨酸溶于70毫升的甲醇(用于微電子學(xué)的特殊純度級(jí))和在保護(hù)性氣體氣氛下(N2)攪拌。將0.002摩爾的硫代苯甲酸溶于5毫升甲醇并用0.4毫升的甲醇鈉中和。在保護(hù)性氣體氣氛下將該溶液緩慢加入到上述溶液中并攪拌12小時(shí)以上，減壓下除去甲醇和用2NHCl浸溶剩余物，同樣減壓下除去鹽酸，剩余物用水洗，用傾析法除去洗滌用水。將粘稠的剩余物與少量甲醇混合，和產(chǎn)物沉淀出來(lái)。將產(chǎn)物用乙腈洗并在素?zé)砂迳细稍?。產(chǎn)率253.3毫升(67％理論量)TLCSilufol∥丁醇/冰乙酸/水2∶1∶1Rf0.8(UV)第4步巰基乙酰基己基甘氨酰二甘氨酸將0.064(28.8毫升)毫摩爾的苯甲?；鶐€基乙?；夯拾滨６拾彼釕腋∮?毫升甲醇中，加入2.7毫克的5％Pol/CaCo3并將它們裝入氫化裝置中。將0.04毫升的甲醇化鈉和1毫升的甲醇裝入一個(gè)錐形燒瓶中。將裝置抽空并用氫氣沖洗。
將甲醇化物加入并在60kpa的氫氣壓力下攪拌15分鐘。溶液中用Dowex50w×8的甲醇溶液酸化，用折褶濾器(氬鐘罩)將樹(shù)脂過(guò)濾，用甲醇洗和然后冷凍干燥。剩余物每次用4毫升苯萃取，萃取3次，用傾析法除去苯，剩余物再溶于甲醇中并冷凍干燥，產(chǎn)物用sephadex柱純化。產(chǎn)率9.8毫克(42％理論量)TLCSilufol∥丁醇/冰乙酸/水2∶1∶1Rf0.5(水合茚三酮)′H-NMR(DMSO)TMSδ1.2(-CH3，3H)，δ3.1(SH，1H)，δ3.2(N-CH2，10H)，δ3.7(-CH2，6H)，δ3.8(CH2-SH，2H)，δ8.2-8.5(-NH，2H)，〔99mTc〕巰基乙?；夯拾滨６拾彼釋?毫升99mTc葡糖酸鹽溶液與400微升的0.1N氫氧化鈉溶液和30微升前述第4步的溶液-1.63毫克/100微升水混合。將該批物料保持靜置40分鐘后，用2毫升0.1M磷酸鈉緩沖溶液(pH＝7.0)中和。反應(yīng)混合物至少在2小時(shí)內(nèi)是穩(wěn)定的。
TLC(硅膠60；95％乙醇)Rf0.7(95％)電泳(pH7.0)陰離子遷移。
實(shí)施例4a〔99mTc〕巰基乙酰基己基甘氨酰二甘氨酸在WHHL兔主動(dòng)脈的動(dòng)脈粥樣硬化斑中的聚集將99.9GBq(2.7mci)的按照實(shí)施例4標(biāo)記的物質(zhì)用磷酸鹽緩沖的鹽水稀釋至1毫升并通過(guò)耳靜脈施用于麻醉的Rompun/Ke-tavetWHHL兔(1∶2)。在施用5小時(shí)后將兔殺死，進(jìn)行主動(dòng)脈的放射性自顯影以及蘇丹(III)染色以顯示動(dòng)脈粥樣硬化斑(圖1)。根據(jù)斑的形成蘇丹III染料在正常的和動(dòng)脈粥樣硬化的壁區(qū)域之間的富集因子為3～5。見(jiàn)兔子活體影像圖2。
實(shí)施例5S-Bzl-乙酰基-sar-ghy-gly-〔8α-麥角靈基酰胺〕將200毫克的S-bzl-乙?；?sar-gly-gly-OH和161毫克的苯并三唑-1-基-四甲基-脲陽(yáng)離子-四氟硼酸鹽溶于1毫升的N-甲基吡咯烷酮中，并加入172微升的二異丙基乙基胺。3分鐘后將無(wú)色溶液滴加到攪拌著的120毫克的8α-氨基-麥角靈溶液中。將淡紅棕色的溶液在室溫下攪拌4小時(shí)同時(shí)在一個(gè)VY-DACC18柱(4.6×250mm)上用梯度為10％至60％的B在25分鐘內(nèi)(洗脫劑A1000毫升水/2毫升三氟乙酸酐，洗脫劑B 500毫升乙腈/100毫升水/1毫升三氟乙酸酐)以HPLC-色譜法追蹤進(jìn)一步的反應(yīng)過(guò)程。
這批反應(yīng)物料不需進(jìn)一步預(yù)處理就可在一個(gè)VYDAC柱(40×300mm)上用梯度從20％到30％B在20分鐘內(nèi)(洗脫劑組成如上)進(jìn)行制備性分離。然后進(jìn)行冷凍干燥。產(chǎn)率75毫克質(zhì)譜顯示預(yù)期的分子量。
實(shí)施例6
S-(bzl)-乙?；睳1-己基〕-gly-gly-gly-〔8α-麥角靈基酰胺〕將60毫克S-bzl-乙?；?〔N1-已基〕-gly-gly-gly-OH和40毫克苯并三唑-1基-四甲基脲陽(yáng)離子-四氟硼酸鹽懸浮在0.6毫升的N-甲基吡咯烷酮中并通過(guò)加入17.2微升的二異丙基乙基胺將其轉(zhuǎn)化成溶液。通過(guò)滴加將該溶液加入到30毫克8α-氨基-麥角靈在0.4毫升的N-甲基吡咯烷酮的溶液中。4小時(shí)后處理反應(yīng)溶液。將粗反應(yīng)混合物進(jìn)行制備性色譜(如在實(shí)施例5中所述)。然后冷凍干燥產(chǎn)生所需要的產(chǎn)物。產(chǎn)率30毫克的假晶產(chǎn)物。質(zhì)譜顯示出預(yù)期的分子量。
實(shí)施例7S-bzl-乙?；?sar-gly-〔8α-麥角靈基酰胺〕將180毫克的S-bzl-乙?；?sar-gly-OH和161毫克的苯并三唑-1-基-四甲基脲陽(yáng)離子-四氟硼酸鹽溶于1毫升的N-甲基吡咯烷酮中，并加入172微升的二異丙基乙基胺。3分鐘后，通過(guò)滴加將無(wú)色溶液加入到攪拌著的120毫克8α-氨基麥角靈溶液中。將淡紅棕色溶液在室溫下攪拌4小時(shí)以上，并如在實(shí)施例5中所述進(jìn)行處理和色譜。產(chǎn)率70毫克(假晶)MS顯示出預(yù)期的峰。
實(shí)施例8S-bzl-乙?；?sar-〔8α-麥角靈基酰胺〕將120毫克S-bzl-乙酰基-sar-OH和161毫克的苯并三唑-1-基-四甲基-脲陽(yáng)離子-四氟硼酸鹽溶于1毫升的N-甲基吡咯烷酮中，并加入172微升的二異丙基乙基胺。
將溶液按實(shí)施例5進(jìn)行反應(yīng)；在處理和分離后，得到52毫克的假晶化合物。MS顯示出預(yù)期的質(zhì)譜峰。
實(shí)施例93，17β-二羥基-17α-〔5(S-苯甲酰硫基-乙?；?肌氨酰-甘氨酰)-氨基-戊-1-烯-3-炔〕-1，3，5-雌三烯將0.35克的〔S-苯甲?；?硫代乙?；?肌氨酰-甘氨酰-炔丙基酰胺〕，11.0毫克的芐基三乙基氯化銨，11.5毫克的四-(三苯基膦)鈀10)，9毫克碘化銅(I)懸浮在5毫升甲苯中，將其加入到130毫克的17β-羥基-17α-碘乙烯基-1，3，5-雌三烯-3-四氫吡喃基醚的懸浮液中，并在室溫下攪拌90小時(shí)。將懸浮液與水混合，用甲苯萃取并干燥。減壓下除去溶劑，用10毫升四氫呋喃浸溶剩余物，與在5毫升乙醇中的190毫克的吡啶鎓-對(duì)甲苯-對(duì)磺酸混合，并回流3小時(shí)。然后減壓下除去溶劑并用二氯甲烷/甲醇(81)在硅膠柱上純化。產(chǎn)率30％理論量。該物質(zhì)使用TLC(CH2Cl2/MeOH)5∶5顯示Rf為0.4。
實(shí)放例103，17β-二羥基-17α-〔N-(苯甲?；?硫代-乙酰基-肌氨酰-甘氨酰)-氨基-丙炔-1〕-1，3，5雌三烯將在3毫升DMF中的350毫克的S-苯甲?；?硫代乙酰基-肌氨酰-甘氨酸加入到110毫克17β-羥基-17α-炔丙基-氨基-1，3，5-雌三烯-3-四氫吡喃基醚的3毫升DMF懸浮液中。在保護(hù)性氣體氣氛下將該批反應(yīng)物料在100℃下攪拌24小時(shí)。
加入10毫升四氫呋喃后，用吸濾法過(guò)濾結(jié)晶物并在減壓下蒸發(fā)。用20毫升四氫呋喃浸溶剩余物，用在3毫升乙醇中的100毫克的吡啶鎓對(duì)甲苯-對(duì)磺酸溶解，混合，并回流1小時(shí)。除去溶劑后，將該物質(zhì)在硅膠低壓柱上以甲醇/二氯甲烷體系(1∶8)進(jìn)行純化。使用TLC(CH2Cl2/MeOH)5∶5該物質(zhì)顯示Rf為0.6。產(chǎn)率71毫克實(shí)施例11將0.001摩爾的S-bzl-乙酰基-sar-gly-OH和322毫克的苯并三唑-1-基-四甲基-脲陽(yáng)離子-四氟硼酸鹽溶于3毫升DMF中同時(shí)加入344微升的二異丙基乙基胺。將溶液預(yù)活化5分鐘以形成苯并三唑基酯，和然后將清液加入到33毫摩爾保護(hù)的his(trt)-leu-asp(Obut)-ile-ile-trp樹(shù)脂中。將懸浮液攪拌1小時(shí)，然后用DMF洗數(shù)次，用吸濾法過(guò)濾，并干燥。象通常那樣用TFA/清除劑處理干燥的樹(shù)脂以使產(chǎn)物與保護(hù)基分離。按實(shí)施例5中所述進(jìn)行純化。
根據(jù)一般性方法中所給出的步驟(實(shí)施例1)將按照實(shí)施例10得到的化合物與99mTc配合。
實(shí)施例12將在sasrin樹(shù)指上制得的0.010摩爾的his(trt)-leu-asp(Obut)-ile-ile-trp-OH溶于DMF/NMP的混合物中同時(shí)加入0.010摩爾的二異丙基乙基胺，和在攪拌下與0.010摩爾的在實(shí)施例1中所制得的溶于3毫升的DMF的S-bzl-乙酰基-sar-OH混合。將溶液攪拌2小時(shí)，然后除去溶劑。留下的剩余物與水一起攪拌并用吸濾法過(guò)濾、洗滌和干燥。用通常的方法除去保護(hù)基，將得到的產(chǎn)物倒入乙醚中，按照在實(shí)施例5中所述進(jìn)行純化。
S-bzl-乙?；?〔N14-溴苯基〕-gly-gly-gly-OH第1步氯乙?；拾彼嵩?50毫升三頸燒瓶中將10克甘氨酸酐在室溫下溶于50毫升2N的氫氧化鈉溶液中。45分鐘后，將仍有些混濁的溶液冷卻至大約0℃并在攪拌下交替滴加入11.1克(7.8毫升)氯乙?；然锖?4毫升5N氫氧化鈉溶液。45分鐘后加入完成。溶液帶有淺粉紅色。加入40毫升5N鹽酸，這將引起溶液脫色，并且物質(zhì)開(kāi)始結(jié)晶。使該批反應(yīng)物在0℃靜置大約1小時(shí)，剩余物用吸濾法過(guò)濾。用冷水洗滌數(shù)次并以熱水中重結(jié)晶。產(chǎn)率5克熔點(diǎn)173-174℃在減壓下蒸發(fā)母液，剩余物同樣從水中重結(jié)晶。產(chǎn)率2.5克熔點(diǎn)173℃總產(chǎn)率7.5克＝41％理論量TLCSilμfol∥正丁醇/冰乙酸/水4∶1∶1第2步4-溴苯基三甘氨酸在20毫升乙醇和20毫升1NNaOH中將0.0144摩爾氯乙?；拾彼崤c0.029摩爾的4-溴苯胺一起回流7小時(shí)。減壓下除去溶劑后，將留下的剩余物萃取3次，每次用50毫升加熱的丙酮萃取，留下的產(chǎn)物從熱水中重結(jié)晶。粗產(chǎn)物用于第3步。產(chǎn)率大約60％。
第3步4-溴苯基三甘氨酸的氯乙?；瘜?.01摩爾4-溴苯基三甘氨酸在室溫下溶于10毫升1N的NaOH中并在0℃于攪拌下在30分鐘內(nèi)交替地與0.012摩爾氯乙酰基氯化物和20毫升1N的NaOH混合。將溶液攪拌30分鐘以上，用5N HCl酸化，和產(chǎn)物在減壓下蒸發(fā)至干。產(chǎn)生的結(jié)晶溶于熱水中，使溶液與乙醇混合。過(guò)濾除去沉淀的氯化鈉，并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器將濾液蒸發(fā)。所需要的產(chǎn)物通過(guò)數(shù)次處理濾液，每次用30毫升熱丙酮來(lái)萃取，然后在減壓下除去丙酮，剩余物用少量水浸溶并冷凍干燥。產(chǎn)率50％理論量。TLCSilμfol∥正丁醇/冰乙酸/水2∶1∶1Rf0.6第4步S-bzl-乙?；?〔N1-溴苯基〕-gly-gly-gly-OH在攪拌和保護(hù)性氣體氣氛下，于室溫將0.01摩爾的氯乙酰基產(chǎn)物溶于140毫升甲醇中。為此，將0.02摩爾硫代苯甲酸溶于20毫升甲醇中并用甲醇鈉中和，在攪拌和保護(hù)性氣體氣氛下將其緩慢滴加到上述溶液中，并再保持?jǐn)嚢?2小時(shí)。減壓下除去溶劑和用2NHCl浸溶剩余物。用吸濾法將產(chǎn)生的晶體過(guò)濾并用熱水洗至中性。接著用20毫升氯仿，20毫升乙腈和20毫升乙醚洗。和剩余物在減壓下干燥。產(chǎn)率60％理論量第5步硫代-乙酰基-〔N′-溴苯基〕-gly-gly-gly-OH
將0.08毫摩爾得自第4步的物質(zhì)懸浮在2毫升的無(wú)水甲醇中，然后與2毫克的Rd/CaCO3(5％)混合，并在攪拌和氫氣壓力為66kpa下與0.13毫摩爾甲醇鈉在1毫升無(wú)水甲醇中的溶液反應(yīng)。再將溶液攪拌15分鐘并用Dowex50w×8的甲醇溶液中和。過(guò)濾除去催化劑和樹(shù)脂，將物質(zhì)冷凍干燥并用2毫升苯萃取。然后分離出苯，將該物質(zhì)用乙醇冷凍干燥。用制備型HPLC進(jìn)行純化。TLCSiluful∥丁醇/冰乙酸/水2∶1∶1Rf0.8產(chǎn)率40％理論量99mTc〔硫代乙?；?〔N′-溴苯基〕-gly-gly-gly-OH如在前面實(shí)施例1中關(guān)于配合的一般性敘述中所述的，使硫代-乙?；?〔N′-溴苯基〕-gly-gly-gly-OH與〔99mTc〕葡糖酸鹽制劑反應(yīng)。
權(quán)利要求
1.通式I的化合物R3-S-CH2-CO-NR1-〔CH2-CO-NH〕n-CH2-CO-R2(I)其中n代表數(shù)0、1或2，R1是含有1至20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基殘基，它選擇性地被1至3個(gè)氯原子打斷或置換，和該基團(tuán)可以包括未端-COOH，-OH或-NH2基團(tuán)，這些基團(tuán)通過(guò)乙醇酸或它的酯或醚被選擇性地酯化或醚化，用含有至多18個(gè)碳原子的羧酸或醇形成酯或醚，或表示選擇性地在它的4-位具有COOH，NH2或OH基團(tuán)的苯基或環(huán)己基殘基，COOH，NH2或OH基團(tuán)用含有至多6個(gè)碳原子的羧酸或醇進(jìn)行酯化，醚化或酰胺化，或被鹵素原子取代，R2是鹵素原子，鹵代甲基、甲基羧基、三氟甲基羧基，NH2或OH基團(tuán)，當(dāng)R2＝OH被直接，或用含有至多8個(gè)碳原子的α，ω-羥基羧酸通過(guò)它的末端羧基醚化后，用生物分子、類(lèi)固醇、麥角靈衍生物、苯并二氨雜草衍生物、縮膽囊肽、肽蛋白質(zhì)、蛋白激素、氨基糖、內(nèi)皮素、內(nèi)皮素衍生物、內(nèi)皮素抗體或內(nèi)皮素片段進(jìn)行酯化或酰胺化時(shí)形成羧基，R2是通式II的殘基， 或通式IIa的殘基 其中R4是亞甲基1，3-亞丙烯基氨基，亞丙炔基氨基，亞甲基氨基或亞甲氨基和R8是氫原子或甲基R2是通式III的殘基 或通式IIIa的殘基 其中R5是-NH，-NH-CO-N，-NH-CO-NH-或亞甲氨基，R6是氫原子、鹵素原子或甲基和R7是氫原子或含有至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基殘基，R3是氫原子、乙?；?、苯甲?；?、對(duì)甲氧基芐基、乙酰氨基甲基、苯甲酰氨基甲基、三甲基乙酰氨基甲基、氫基乙?；⒁野被一?、乙硫基、三苯甲基或易于分離的硫保護(hù)性基團(tuán)，和由藥物上可接受的酸或堿所形成的它們的鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其特征在于R1是含有1至6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基殘基或?qū)?溴苯基殘基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1和2中至少一個(gè)的化合物，其特征在于R2是OH或CH3-O基團(tuán)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1和2中至少一個(gè)的化合物，其特征在于R2是通式II的殘基， 或通式IIa的殘基 式中R4是亞甲基或亞丙炔基氨基和R8是氫原子
5.根據(jù)權(quán)利要求1和2中至少一個(gè)的化合物，其特征在于R2是通式III的殘基 或通式IIIa的殘基 式中R5是NH基因，R6是氫原子或甲基和R7是甲基、乙基或正丙基殘基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中至少一個(gè)的化合物，其特征在于R3是氫原子或苯甲?；鶜埢?br>
7.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，即17α-〔5-(巰基-乙?；?肌氨酰-甘氨酰-氨基-1-戊烯-3-炔基〕雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇，6-N-甲基-8α-氨基-〔8α-N(硫代-乙?；?肌氨酰-甘氨酰-甘氨酰)〕麥角靈，6-N-甲基-8α-氨基-〔8α-N-(硫代-乙?；?肌氨酰)〕麥角靈，6-N-甲基-8β-羥基亞甲基-〔O-(硫代-乙?；?肌氨酰-甘氨酰-甘氨酰)〕麥角靈和6-N-甲基-8β-羥基亞甲基-〔O-(硫代-乙酰基-肌氨酰-甘氨酰)〕麥角靈。
8.Tc、Re、Cu、Ga、Gd、Y和In的放射性金屬離子與通式I的化合物R3-S-CH2-CO-NR1-〔CH2-CO-NH〕n-CH2-CO-R2(I)式中n代表數(shù)0，1或2，R1是含有1至20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基殘基，它選擇性地被1至3個(gè)氯原子打斷或置換，和該基團(tuán)可以包括末端-COOH，-OH或NH2基團(tuán)，這些基團(tuán)通過(guò)乙醇酸或它的酯或醚被選擇性地酯化或醚化，用含有至多18個(gè)碳原子的羧酸或醇形成酯或醚，或表示一個(gè)選擇性地在它的4-位具有COOH，NH2或OH基因的苯基環(huán)己基殘基，COOH，NH2或OH基團(tuán)用含有至多6個(gè)碳原子的羧酸或醇進(jìn)行酯化、醚化或酰胺化，或被鹵素原子取代，R2是鹵素原子、鹵代甲基、甲基羧基、三氟甲基羧基、NH2或OH基團(tuán)，當(dāng)R2＝OH被立即、或用含有至多8個(gè)碳原子的α，ω-羥基羧酸通過(guò)它的端羧基醚化后，用生物分子、類(lèi)固醇、麥角靈衍生物、苯并二氮雜草衍生物、縮膽囊肽、肽蛋白質(zhì)、蛋白激素、氨基糖、內(nèi)皮素、內(nèi)皮素衍生物、內(nèi)皮素抗體或內(nèi)皮素片段進(jìn)行酯化或酰胺化時(shí)形成羧基，R2是通式I的殘基 或通式IIa的殘基 其中R4是亞甲基、1，3-亞丙烯基氨基，亞丙炔基氨基，亞甲基氨基或亞甲氨基和R8是氫原子或甲基，R2是通式III的殘基， 或通式IIIa的殘基 其中R5是-NH-，-NH-CO-N、-NH-CO-NH-或亞甲氧基，R6是氫原子、鹵素原子或甲基和R7是氫原子或含有至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基殘基，R3是氫原子、乙酰基、苯甲?；?、對(duì)甲氧基芐基、乙酰氨基甲基、苯甲酰氨基甲基、三甲基乙酰氨基甲基、羥基乙?；?、乙氧基乙基、硫乙基、三苯甲基或易于分離的硫保護(hù)性基團(tuán)和由藥物上可接受的酸或堿所形成的它們的鹽的金屬螯合配合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的金屬螯合配合物，其特征在于放射性金屬離子是Tc和Re的同位素。
10.根據(jù)權(quán)利要求8和9中至少一個(gè)的金屬螯合配合物，其特征在于放射性核素是锝-99m。
11.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物，即〔99mTc〕-巰基乙酰基肌氨酸，〔99mTc〕-巰基乙?；?肌氨酰-二甘氨酸，〔99mTc〕-巰基乙酰基-六甘氨酰-二甘氨酸和〔99mTc〕-巰基乙?；?N′-〔4-溴苯基〕-甘氨酰-甘氨酸。
12.結(jié)合物，含有通式I的化合物或元素Tc、Re、Cu、Ga、Gd、Y和In的放射性金屬離子與通式I的化合物的金屬螯合配合物和選擇性聚集在病變組織中的物質(zhì)，在所說(shuō)的物質(zhì)之間存在共價(jià)鍵，該共價(jià)鍵對(duì)于含有羧基或氨基的物質(zhì)如肽、蛋白質(zhì)、抗體或它們的片段是酰胺鍵，對(duì)于含有羥基的物質(zhì)如脂肪醇是酯樣鍵，對(duì)于含有醛基的物質(zhì)是亞氨鍵。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的結(jié)合物，其特征在于聚集在病變組織中的物質(zhì)是肽，如內(nèi)皮素、部分內(nèi)皮素序列、內(nèi)皮素類(lèi)似物、內(nèi)皮素衍生物或內(nèi)皮素拮抗物。
14.根據(jù)權(quán)利要求12的結(jié)合物，其特征在于肽含有下列序列 或部分序列his-leu-asp-ile-ile-trp或環(huán)狀氨基酸序列環(huán)-(Dtrp-Dasp-pro-Dval-leu)，環(huán)-(Dglu-ala-alloDile-leu-Dtrp).
15.通式I化合物的制備方法，其特征在于首先使a)甘氨酸的二酮哌嗪衍生物或b)甘氨酸與鹵代酸鹵化物反應(yīng)，然后與通式VI的胺反應(yīng)R1-NH2(VI)其中R1是如上所定義的，再與鹵代酸鹵化物反應(yīng)，然后與通式VI的化合物反應(yīng)R3-SH (IV)其中R3如在權(quán)利要求1中所定義，或使通式V的化合物NH2-CH2-CO-R2(V)其中R2如上所定義，與鹵代酸鹵化物反應(yīng)，然后與通式VI的烷基胺或芳基胺反應(yīng)R1-NH(VI)其中R1如上所定義，和再與鹵代酸鹵化物反應(yīng)，然后與通式IV的化合物反應(yīng)R3-SH(IV)其中R3如上所定義，和通過(guò)藥物上可接受的酸或堿使這些化合物選擇性地轉(zhuǎn)化成鹽。
16.Tc和Re放射性金屬離子與通式I化合物的金屬螯合配合物的制備方法，其特征在于以高锝酸鹽或高錸酸鹽形式存在的锝-99m或錸在還原劑和選擇性地輔助配位體存在下，與通式I的化合物進(jìn)行反應(yīng)R3-S-CH2-CO-NR1-〔CH2-CO-NH〕n-CH2-CO-R2(I)式中R1，R2和R3如在權(quán)利要求1中所定義。
17.用于制備放射性藥物的藥盒，包括根據(jù)權(quán)利要求1到7中任一項(xiàng)的通式I的化合物，或根據(jù)權(quán)利要求12到14中任一項(xiàng)的結(jié)合物，以及還原劑和選擇性地輔助配位體，可以是干的或溶液狀的，和使用說(shuō)明書(shū)，包括所述化合物與以高锝酸鹽或高錸酸鹽溶液形式存在的锝-99m或Re進(jìn)行反應(yīng)的指導(dǎo)。
18.用于非侵害性活體內(nèi)受體和含有受體的組織和/或動(dòng)脈粥樣硬化斑的顯示和/或用于腎功能檢查的放射性藥物組合物，其特征在于它含有根據(jù)權(quán)利要求8到10中任一項(xiàng)的化合物或根據(jù)權(quán)利要求12到14中任一項(xiàng)的結(jié)合物和選擇性地在蓋倫派醫(yī)學(xué)中常用的添加劑，其中化合物在根據(jù)權(quán)利要求17的含有以高锝酸鹽或高錸酸鹽溶液形式存在的锝-99m或錸的藥盒中制備。
全文摘要
本發(fā)明涉及N-烷基肽螯合劑，它們與放射性核素的金屬配合物，它們的制備方法，和含有這些化合物的放射性藥物。本發(fā)明進(jìn)一步涉及含有所述的以與金屬配合的形式存在的螯合物的放射性藥物和它們的診斷藥盒，其中螯合物既可以非配合形式存在，也可通過(guò)加入锝離子或錸離子被配合，以及將這種制劑用于診斷和藥用目的。
文檔編號(hào)C07J41/00GK1134158SQ94193990
公開(kāi)日1996年10月23日 申請(qǐng)日期1994年10月27日 優(yōu)先權(quán)日1993年11月1日
發(fā)明者H·斯皮斯, P-E·斯庫(kù)爾茈, B·諾爾, S·諾爾, L·丁克爾伯格 申請(qǐng)人:柏林弗賴(lài)恩大學(xué)診斷研究學(xué)院有限公司