專(zhuān)利名稱(chēng)：一種恩拉霉素粗品的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于分離技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種純化恩拉霉素粗品的方法。
背景技術(shù)：
恩拉霉素(enramycin)又名恩來(lái)霉素、恩霉素、安來(lái)霉素、持久霉素，是由放線菌(Streptomyces fungicidicus)發(fā)酵而得,是不飽和脂肪酸與十幾種氨基酸結(jié)合的多肽類(lèi)抗生素，是其鹽酸鹽形式應(yīng)用。對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌有顯著抑菌作用，主要阻礙細(xì)菌細(xì)胞壁的合成。敏感細(xì)菌有金黃葡萄球菌、表皮葡萄球菌、檸檬色葡萄球菌、釀膿鏈球菌等。而肺炎球菌、枯草桿菌、炭疽桿菌、破傷風(fēng)梭菌、肉毒梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌亦較敏感。白色或微黃白色粉末(粗品呈灰色或灰褐色的粉末，有特臭)。234 238°C分解，易溶于稀鹽酸、微溶于水、甲醇、乙醇，不溶于丙酮。恩拉霉素對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌有很強(qiáng)的活性，特別是對(duì)腸內(nèi)的有害梭狀芽孢桿菌(Clostridium)抑制力很強(qiáng)。長(zhǎng)期使用后不容易產(chǎn)生抗藥性，因它改變了腸道內(nèi)的細(xì)菌群，所以對(duì)飼料中營(yíng)養(yǎng)成分的利用效果好，可以促進(jìn)豬、雞增重和提高飼料轉(zhuǎn)化率。
為了避免由于抗生素的濫用引起耐藥菌株大量繁殖或使藥物在畜產(chǎn)品中的殘留量增大，對(duì)畜禽生長(zhǎng)及人體健康造成直接危害，應(yīng)用畜禽專(zhuān)用的抗生素飼料添加劑已迫在眉睫。由于恩拉霉素具有優(yōu)良的促生長(zhǎng)和改善飼料利用率的作用，恩拉霉素內(nèi)服極不易被吸收，藥物主要通過(guò)糞便排出體外。因此被世界上許多國(guó)家推薦作為抗生素促生長(zhǎng)劑。市場(chǎng)上主要的應(yīng)用形式將產(chǎn)生恩拉霉素的發(fā)酵液直接離心或壓濾形成菌絲體，再將菌絲體混合入飼料中。這種方法雖然省去了提純的步驟，但是會(huì)造成恩拉霉素效價(jià)低，用量大的問(wèn)題，不利于動(dòng)物飼料的精細(xì)化制備和控制。因此，需要一種能夠低成本且高效率制備含有較高恩拉霉素效價(jià)的粗品的方法。
權(quán)利要求
1.一種恩拉霉素粗品的制備方法，其包括如下步驟步驟1，取產(chǎn)生恩拉霉素的鏈霉菌發(fā)酵液，用鹽酸溶液將發(fā)酵液調(diào)整至PH值為3. 0-5. O ;步驟2，向發(fā)酵液中加入與發(fā)酵液等體積的極性有機(jī)溶劑，攪拌并浸泡l_3h，得浸出液；步驟3，對(duì)步驟2處理得到的浸出液進(jìn)行固液分離出濾液和濾渣，收集濾液；步驟4，向步驟3中獲得的濾液中加入1-3倍濾液體積的純水，通過(guò)聚醚砜超濾膜，截留分子量為30KD，收集超濾膜濾出液；步驟5，將步驟4中的膜濾出液通過(guò)截留分子量為5KD的聚醚砜納濾膜或聚酰胺納濾膜，收集該一次納濾膜濾出液；步驟6，將一次納濾膜濾出液通過(guò)截留分子量為IKD的聚醚砜納濾膜或聚酰胺納濾膜，當(dāng)未通過(guò)該納濾膜的截留液體積縮小至步驟2浸出液體積的1/50至1/80時(shí)，收集截留液；步驟7，先向截留液加入無(wú)水甲醇或無(wú)水乙醇，無(wú)水甲醇或無(wú)水乙醇的用量為截留液體積的2-5倍；再向截留液加入甲基叔丁基醚或乙醚，甲基叔丁基醚或乙醚的用量為截留液體積的2-8倍，攪拌1-10分鐘后靜置；步驟8，分離并干燥步驟7中的析出物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種恩拉霉素粗品的制備方法，其特征在于所述的步驟5中的納濾膜為截留分子量為5KD的聚醚砜納濾膜，所述的步驟6中的納濾膜為截留分子量為IKD的聚醚砜納濾膜。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種恩拉霉素粗品的制備方法，其特征在于所述的步驟2中的極性有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇或丙酮的一種或幾種，甲醇、乙醇或丙酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90%-I00%ο
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種恩拉霉素粗品的制備方法，其特征在于所述的步驟2中的極性有機(jī)溶劑為95%的乙醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種恩拉霉素粗品的制備方法，其特征在于所述的步驟8中的析出物的分離采用離心分離。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種恩拉霉素粗品的制備方法，包括如下步驟，步驟1，取產(chǎn)生恩拉霉素的鏈霉菌發(fā)酵液；步驟2，向發(fā)酵液中加入與發(fā)酵液等體積的極性有機(jī)溶劑得浸出液；步驟3，固液分離出濾液和濾渣，收集濾液；步驟4，通過(guò)聚醚砜超濾膜，截留分子量為30KD，收集超濾膜濾出液；步驟5，通過(guò)截留分子量為5KD的聚醚砜納濾膜；步驟6，將一次納濾膜濾出液通過(guò)截留分子量為1KD的聚醚砜納濾膜，收集截留液；步驟7，先向截留液加入無(wú)水甲醇或無(wú)水乙醇；再向截留液加入甲基叔丁基醚或乙醚，攪拌后靜置；步驟8，分離并干燥步驟7中的析出物。該方法能夠得到恩拉霉素粗品。
文檔編號(hào)C07K7/08GK102898509SQ201210433028
公開(kāi)日2013年1月30日 申請(qǐng)日期2012年11月4日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月4日
發(fā)明者樂(lè)占線 申請(qǐng)人:樂(lè)占線