專利名稱:一種從臺灣含笑中提取分離含笑內(nèi)酯的方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域,特別是涉及一種從臺灣含笑中提取分離含笑內(nèi)酯的方法。
背景技術(shù):
含笑內(nèi)酯(Micheliolide)屬于倍半萜內(nèi)酯類化合物,為愈創(chuàng)木烷型倍半萜內(nèi)酯類化合物。分子式為C15H2tlO3,分子量為248. 32,為無色結(jié)晶,mp. 142_145°C。再木蘭科植物黃蘭 Mickelia champaca L.的根皮、臺灣含笑#2.<^<97/<3 compressa (Maxim. ) Sarg.的根皮中均有分布。有報道發(fā)現(xiàn)含笑內(nèi)酯在治療白血病方面同小白菊內(nèi)酯的效果幾乎等同,且其對正常細(xì)胞無明顯殺傷作用。研究發(fā)現(xiàn)含笑內(nèi)酯及其衍生物可用于治療如下癌癥白血病、乳腺癌、前列腺癌、大腸癌或肺癌,另有報道含笑內(nèi)酯還具有治療肝癌、食道癌、胃癌、腸道癌、腎癌、口腔癌、何杰金淋巴癌、胰腺癌、直腸結(jié)腸癌等的用途。 現(xiàn)有制備含笑內(nèi)酯的方法主要通過化學(xué)合成,中國專利申請?zhí)?01010153685. 5公開了一種含笑內(nèi)酯的制備方法,以小白菊內(nèi)酯為原料,在適當(dāng)有機溶劑中,在酸催化劑下制備得到含笑內(nèi)酯,產(chǎn)率達60%以上。該方法副產(chǎn)物較多,不易分離,且重現(xiàn)性較差,不適用于工業(yè)化生產(chǎn)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于解決現(xiàn)有技術(shù)的不足和缺陷,提供一種從臺灣含笑中提取分離含笑內(nèi)酯的方法。為了實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明的技術(shù)方案如下
一種從臺灣含笑中提取分離含笑內(nèi)酯的方法,其特征在于包括以下步驟以臺灣含笑為原料,粉碎20-40目,加入萃取釜中,以無水甲醇為夾帶劑,采用超臨界CO2萃取,收集萃取液,回收甲醇,得萃取物,用石油醚回流脫除脂溶性雜質(zhì),再將脫脂物用低碳醇熱溶,加入活性炭回流脫色,脫色液回收溶劑至適量體積,經(jīng)制備液相ODS RP-C18反相柱進行純化,以甲醇和水的混合溶液進行洗脫,濃縮對應(yīng)組分,石油醚-丙酮(2:1,V/V)重結(jié)晶,得含笑內(nèi)酯產(chǎn)品。所述超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為45_60°C,萃取壓力為23_34MPa,分離釜I溫度為40-50°C,壓力為8-10MPa,分離釜II溫度為35_40°C,壓力為4_6MPa,萃取時間為2-6h。所述石油醚脫脂,加入2-5倍萃取物體積量的石油醚加熱回流脫脂1-3次,離心,分離固液,得脫脂物。所述低碳醇為C1-C4醇,優(yōu)選乙醇、甲醇或異丙醇。所述甲醇和水的混合溶液是指甲醇體積百分比為83%,水的體積百分比為17%的混合溶液。本發(fā)明優(yōu)勢在于方法采用超臨界CO2萃取,提取效率高、能耗低、綠色環(huán)保;用制備液相直接分離純化出高純度的晶體,為大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)提供了可能,大大節(jié)省了分離時間,提高了分離率。
具體實施例方式 下面將結(jié)合具體實施方式
進一步說明本發(fā)明,但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施例。實施例I :
臺灣含笑藥材粉碎40目,取IOkg原料加入超臨界CO2萃取釜中,開啟設(shè)備,設(shè)定參數(shù)萃取溫度為45°C,萃取壓力為34MPa,分離釜I溫度為40°C,壓力為lOMPa,分離釜II溫度為 38 0C,壓力為4MPa。通入CO2流體,達到上述參數(shù)后,以CO2液體22L/h流量萃取,并夾帶無水甲醇3L/h,動態(tài)萃取3. 5h,收集萃取液,回收甲醇,加入2倍萃取物體積的石油醚,加熱回流提取I次,離心除去液體,再將脫脂物用甲醇加熱溶解,加入活性炭回流脫色,脫色液回收溶劑至原體積的1/3,以甲醇超聲溶解配制成20mg/ml濃度的溶液,用O. 45 μ m的尼龍膜濾過濾,用制備高效液相色譜儀分離純化,甲醇-水(83:17)等梯度洗脫,收集響應(yīng)組分旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后,得到純度為95. 3%的含笑內(nèi)酯晶體,再經(jīng)石油醚-丙酮(2:1,V/V)重結(jié)晶3次,得純度為98. 7%的含笑內(nèi)酯產(chǎn)品。實施例2:
臺灣含笑藥材粉碎20目,取IOkg原料加入超臨界CO2萃取釜中,開啟設(shè)備,設(shè)定參數(shù)萃取溫度為58°C,萃取壓力為31MPa,分離釜I溫度為50°C,壓力為8MPa,分離釜II溫度為40 0C,壓力為6MPa。通入CO2流體,達到上述參數(shù)后,以CO2液體22L/h流量萃取,并夾帶無水甲醇3L/h,動態(tài)萃取4h,收集萃取液,回收甲醇,加入3倍萃取物體積的石油醚,加熱回流提取3次,離心除去液體,再將脫脂物用異丙醇加熱溶解,加入活性炭回流脫色,脫色液回收溶劑至原體積的1/3,以甲醇超聲溶解配制成20mg/ml濃度的溶液,用O. 45 μ m的尼龍膜濾過濾,用制備高效液相色譜儀分離純化,甲醇-水(83:17)等梯度洗脫,收集響應(yīng)組分旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后,得到純度為95. 6%的含笑內(nèi)酯晶體,再經(jīng)石油醚-丙酮(2:1,V/V)重結(jié)晶2次,得純度為99. 2%的含笑內(nèi)酯產(chǎn)品。實施例3
臺灣含笑藥材粉碎40目,取IOkg原料加入超臨界CO2萃取釜中,開啟設(shè)備,設(shè)定參數(shù)萃取溫度為46°C,萃取壓力為24MPa,分離釜I溫度為42°C,壓力為9MPa,分離釜II溫度為36 0C,壓力為5MPa。通入CO2流體,達到上述參數(shù)后,以CO2液體22L/h流量萃取,并夾帶無水甲醇3L/h,動態(tài)萃取5h,收集萃取液,回收甲醇,加入5倍萃取物體積的石油醚,加熱回流提取2次,離心除去液體,再將脫脂物用乙醇加熱溶解,加入活性炭回流脫色,脫色液回收溶劑至原體積的1/3,以甲醇超聲溶解配制成20mg/ml濃度的溶液,用O. 45 μ m的尼龍膜濾過濾,用制備高效液相色譜儀分離純化,甲醇-水(83:17)等梯度洗脫,收集響應(yīng)組分旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后,得到純度為96. 1%的含笑內(nèi)酯晶體,再經(jīng)石油醚-丙酮(2:1,V/V)重結(jié)晶3次,得純度為98. 5%的含笑內(nèi)酯產(chǎn)品。實施例4:
臺灣含笑藥材粉碎40目,取IOkg原料加入超臨界CO2萃取釜中,開啟設(shè)備,設(shè)定參數(shù)萃取溫度為53°C,萃取壓力為27MPa,分離釜I溫度為48°C,壓力為8MPa,分離釜II溫度為35 0C,壓力為4MPa。通入CO2流體,達到上述參數(shù)后,以CO2液體22L/h流量萃取,并夾帶無水甲醇3L/h,動態(tài)萃取3h,收集萃取液,回收甲醇,加入4倍萃取物體積的石油醚,加熱回流提取3次,離心除去液體,再將脫脂物用異丙醇加熱溶解,加入活性炭回流脫色,脫色液回收溶劑至原體積的1/3,以甲醇超聲溶解配制成20mg/ml濃度的溶液,用0. 45 y m的尼龍膜濾過濾,用制備高效液相色譜儀分離純化,甲醇-水(83:17)等梯度洗脫,收集響應(yīng)組分旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后,得到純度為95. 8%的含笑內(nèi)酯晶體,再經(jīng)石油醚-丙酮(2:1,V/V)重結(jié)晶2次,得純度為98. 2%的含笑內(nèi)酯產(chǎn)品。實施例5:
臺灣含笑藥材粉碎40目,取IOkg原料加入超臨界CO2萃取釜中,開啟設(shè)備,設(shè)定參數(shù)萃取溫度為60°C,萃取壓カ為23MPa,分離釜I溫度為43°C,壓カ為lOMPa,分離釜II溫度為380C,壓カ為6MPa。通入CO2流體,達到上述參數(shù)后,以CO2液體22L/h流量萃取,并夾帶無水甲醇3L/h,動態(tài)萃取6h,收集萃取液,回收甲 醇,加入2倍萃取物體積的石油醚,加熱回流提取2次,離心除去液體,再將脫脂物用こ醇加熱溶解,加入活性炭回流脫色,脫色液回收溶劑至原體積的1/3,以甲醇超聲溶解配制成20mg/ml濃度的溶液,用0. 45 y m的尼龍膜濾過濾,用制備高效液相色譜儀分離純化,甲醇-水(83:17)等梯度洗脫,收集響應(yīng)組分旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后,得到純度為95. 5%的含笑內(nèi)酯晶體,再經(jīng)石油醚-丙酮(2:1,V/V)重結(jié)晶4次,得純度為98. 6%的含笑內(nèi)酯產(chǎn)品。實施例6:
臺灣含笑藥材粉碎20目,取IOkg原料加入超臨界CO2萃取釜中,開啟設(shè)備,設(shè)定參數(shù)萃取溫度為56°C,萃取壓カ為33MPa,分離釜I溫度為46°C,壓カ為9MPa,分離釜II溫度為360C,壓カ為5MPa。通入CO2流體,達到上述參數(shù)后,以CO2液體22L/h流量萃取,并夾帶無水甲醇3L/h,動態(tài)萃取2h,收集萃取液,回收甲醇,加入5倍萃取物體積的石油醚,加熱回流提取I次,離心除去液體,再將脫脂物用甲醇加熱溶解,加入活性炭回流脫色,脫色液回收溶劑至原體積的1/3,以甲醇超聲溶解配制成20mg/ml濃度的溶液,用0. 45 y m的尼龍膜濾過濾,用制備高效液相色譜儀分離純化,甲醇-水(83:17)等梯度洗脫,收集響應(yīng)組分旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后,得到純度為96. 3 %的含笑內(nèi)酯晶體,再經(jīng)石油醚-丙酮(2:1,V/V)重結(jié)晶5次,得純度為99. 5%的含笑內(nèi)酯產(chǎn)品。
權(quán)利要求
1.一種從臺灣含笑中提取分離含笑內(nèi)酯的方法,其特征在于包括以下步驟以臺灣含笑為原料,粉碎20-40目,加入萃取釜中,以無水甲醇為夾帶劑,采用超臨界CO2萃取,收集萃取液,回收甲醇,得萃取物,用石油醚回流脫除脂溶性雜質(zhì),再將脫脂物用低碳醇熱溶,力口入活性炭回流脫色,脫色液回收溶劑至適量體積,經(jīng)制備液相ODS RP-C18反相柱進行純化,以甲醇和水的混合溶液進行洗脫,濃縮對應(yīng)組分,石油醚-丙酮(2:1,V/V)重結(jié)晶,得含笑內(nèi)酯產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述從臺灣含笑中提取含笑內(nèi)酯的方法,其特征在于所述超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為45-60°C,萃取壓力為23-34MPa,分離釜I溫度為40_50°C,壓力為8-10MPa,分離釜II溫度為35-40°C,壓力為4_6MPa,萃取時間為2_6h。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述從臺灣含笑中提取含笑內(nèi)酯的方法,其特征在于所述石油醚脫月旨,加入2-5倍萃取物體積量的石油醚加熱回流脫脂1-3次,離心,分離固液,得脫脂物。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述從臺灣含笑中提取含笑內(nèi)酯的方法,其特征在于所述低碳醇為 C1-C4醇,優(yōu)選乙醇、甲醇或異丙醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述從臺灣含笑中提取含笑內(nèi)酯的方法,其特征在于所述甲醇和水的混合溶液是指甲醇體積百分比為83%,水的體積百分比為17%的混合溶液。
全文摘要
本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域,公開了一種從臺灣含笑中提取分離含笑內(nèi)酯的方法。方法是以臺灣含笑為原料,粉碎20-40目,加入萃取釜中,以無水甲醇為夾帶劑,采用超臨界CO2萃取,收集萃取液,回收甲醇,得萃取物,用石油醚回流脫除脂溶性雜質(zhì),再將脫脂物用低碳醇熱溶,加入活性炭回流脫色,脫色液回收溶劑至適量體積,經(jīng)制備液相ODSRP-C18反相柱進行純化,以甲醇和水的混合溶液進行洗脫,濃縮對應(yīng)組分,石油醚-丙酮(2∶1,V/V)重結(jié)晶,得含笑內(nèi)酯產(chǎn)品。
文檔編號C07D307/93GK102850310SQ20121036283
公開日2013年1月2日 申請日期2012年9月26日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月26日
發(fā)明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司