專利名稱：一種麥冬總甾體皂苷提取物的制備方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬中藥領(lǐng)域，具體涉及一種麥冬總留體皂苷提取物的制備方法，以及其在制備預(yù)防及治療老年性癡呆等神經(jīng)退行性疾病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著全球社會(huì)人口的發(fā)展，老年人口的增長(zhǎng)是世界性的趨勢(shì)，而老年性癡呆的患病率和發(fā)病率也逐漸增高，老年性癡呆不僅是一個(gè)醫(yī)學(xué)難題，而將成為一個(gè)突出的社會(huì)問(wèn)題。目前，全球老年性癡呆患者可能已達(dá)1700萬(wàn)，隨著人口老齡化的進(jìn)程，老年性癡呆的發(fā)病率已上升為常見(jiàn)死亡原因的第3位，僅次于心腦血管病和癌癥。老年性癡呆癥在我國(guó)也已逐漸成為嚴(yán)重威脅老年人健康的頑癥。老年期癡呆是指老年期發(fā)生的癡呆，包括阿爾茨海默病(Alzheimer，s Dementia)，血管性癡呆(Vascular dementia)，混合性癡呆(mixed dementia)和其他原因所致癡呆[2]。阿爾茨海默病的病理學(xué)特征表現(xiàn)為腦內(nèi)大量淀粉樣老年斑(SP)，神經(jīng)纖維纏結(jié)(NF T)及選擇性神經(jīng)元和突觸缺失，多種神經(jīng)遞質(zhì)尤其是乙酰膽堿嚴(yán)重下降，相應(yīng)地形成了以β淀粉樣蛋白(Ai3)、tau蛋白及神經(jīng)元缺失三大機(jī)制研究領(lǐng)域。近年來(lái)隨著對(duì)AD的神經(jīng)生理、生化、藥理等方面不斷的深入研究，防治AD的藥物開(kāi)發(fā)研究不斷取得進(jìn)展。目前對(duì)老年癡呆的藥物治療主要是通過(guò)抑制acChE來(lái)提高患者體內(nèi)的乙酰膽堿水平，即乙酰膽堿酯酶(Acetylcholinesterase，AChE)抑制劑，它是臨床上用于治療AD最早最為成熟的一類藥物。目前，對(duì)于輕、中度AD患者的治療， 經(jīng)美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市的藥品有4種，他克林(tacrine)、多奈哌齊(donepezi 1)、利斯的明 (Rivastigmine)、加蘭他敏(Galantamine)，均為乙酰膽堿酯酶抑制劑。β、γ分泌酶抑制藥；腦代謝調(diào)節(jié)劑，如長(zhǎng)春胺、尼莫地平；影響自由基代謝的藥物，如司來(lái)吉林、維生素E等。 目前用于治療AD的藥物品種繁多，適用于不同的作用機(jī)制，它們?cè)谀撤N程度上，是起到了緩解老年癡呆的作用，但是無(wú)論是上市或者在研的藥物，都有一定的毒副作用，目前AD仍為一個(gè)沒(méi)有辦法根治的頑疾。因此，尋找針對(duì)AD病因的新的有效治療藥物和方法，成為當(dāng)今研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。在眾多的待選藥物中，我們把目光投向了神經(jīng)生長(zhǎng)因子。神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)屬于神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(NTF)家族的成員，維持神經(jīng)元的數(shù)量和存活。NGF對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育及功能維持，促進(jìn)損傷神經(jīng)的再生與修復(fù)具有重要作用。 NGF作為一種可能治療AD的有效方法，但目前仍存在下列問(wèn)題(1)價(jià)格昂貴；(2)相對(duì)分子質(zhì)量大，不能透過(guò)(Blood Brain Barrier，BBB)[25]，只可腦室內(nèi)注射，長(zhǎng)期治療存在許多技術(shù)問(wèn)題。因此，尋找類似于NGF活性，并且可以順利通過(guò)血腦屏障的小分子化合物即NGF mimics，已經(jīng)成為了目前的研究熱點(diǎn)。到目前為止，科學(xué)家們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了近百種NGF mimics，可以有效的促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞增長(zhǎng)，部分化合物已經(jīng)完成了結(jié)構(gòu)修飾或是全合成。目前，NGF mimics已有化合物扎利羅登feliproden處于三期臨床階段。此外，我國(guó)天然資源豐富，地大物博，有很多寶貴的道地藥材，并且對(duì)其新的成分和新的活性的研究也十分重視。研究表明，中藥對(duì)老年性癡呆癥有顯著療效，其中最著名的是從蛇足石杉中提取的生物堿一石杉?jí)A甲(huperzine A)，它是一種高效高選擇性的乙酰膽堿酯酶(AChE)抑制藥。麥冬ifiphiopogon japonicus (Thunb. ) Ker-Gawl)為百合科植物麥冬的干燥塊根，為常用中藥.主要用于治療冠心病、心絞痛等癥。主要含有留體皂苷、高異黃酮等多種成分。其中麥冬留體皂苷作為主要的有效成分之一，具有廣泛的生物學(xué)活性，一直受到國(guó)內(nèi)外相關(guān)領(lǐng)域研究者矚目。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種操作簡(jiǎn)便、純度高的總留體皂苷提取物的制備方法，主要通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)
(1)粉碎和浸提
中藥麥冬經(jīng)粉碎后，用工業(yè)級(jí)甲醇室溫下浸提4飛天，抽濾濃縮，得甲醇浸提物粗樣；
(2)分離和純化
將甲醇浸提粗樣先經(jīng)十八烷基鍵合硅膠色譜柱(ODS)開(kāi)口柱分離，溶劑系統(tǒng)為甲醇 水，含目的提取物的樣品進(jìn)一步通過(guò)硅膠色譜開(kāi)口柱的分離，溶劑系統(tǒng)為氯仿甲醇，最終得到麥冬總留體皂苷提取物。本發(fā)明制備的總甾體皂苷提取物，其提取物中的總甾體皂苷的含量>50%，同時(shí)鑒定了其中包含的四種甾體皂苷類化合物，，分別是化合物(lhOphiopogonin D ；化合物(2): (257 ) -3 β -hydroxyspirost-5-en-l β -jl~0- α -L-rhamnopyranosyl - (1 — 2) ~0~ [ β _D_xy lopyranosyl- (1 3) ] - 4- (2-hydroxy-3-methylvaleryl) - α -L-arabinopyranoside ；化合物(3) :Sprengerinin 化合物(4): 14-hydroxy Sprengerinin C0 其結(jié)構(gòu)式如下
化合物(1)
化合物(2)
HO ty,
化合物(3)
權(quán)利要求
1.一種麥冬總留體皂苷提取物的制備方法，其特征在于(1)粉碎和浸提中藥麥冬經(jīng)粉碎后，用工業(yè)級(jí)甲醇室溫下浸提4飛天，抽濾濃縮，得甲醇浸提物粗樣；(2)分離和純化將甲醇粗樣先經(jīng)十八烷基鍵合硅膠色譜柱開(kāi)口柱分離，溶劑系統(tǒng)為甲醇水，含目的提取物的樣品進(jìn)一步通過(guò)硅膠色譜開(kāi)口柱的分離，溶劑系統(tǒng)為氯仿甲醇，最終得到麥冬總甾體皂苷提取物，其中的總甾體皂苷含量>50%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種麥冬總留體皂苷提取物的制備方法，其特征在于 制備獲得的提取物中包含四種留體皂苷類化合物，總含量>50%，分別是化合物(1): Ophiopogonin D ；化合物(2) (257 ) -3 β -hydroxyspirost-5-en-l β -yl- O- α -L-rham nopyranosyl-(1 一 2)~0~{_ β -D~xylopyranosy 1-(1 一 3)]- 4-(2-hydroxy-3-methylvale ryl) - α -L~arabinopyranoside ； Wi^^i (3) :Sprengerinin C ； Wi^^i (4) 14-hydroxy Sprengerinin C。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法制備獲得的一種麥冬總留體皂苷提取物在制備預(yù)防老年癡呆癥神經(jīng)退行性疾病的藥物中的應(yīng)用。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述麥冬總留體皂苷提取物在制備治療阿爾茨海默癥藥物中的應(yīng)用。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物的劑型為固體制劑或液體制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物的給藥途徑為腸道和非腸道。
全文摘要
本發(fā)明提供一種麥冬總甾體皂苷提取物的制備方法，通過(guò)將中藥麥冬粉碎，甲醇浸提，抽濾濃縮，先經(jīng)ODS柱分離，再通過(guò)硅膠色譜開(kāi)口柱分離獲得。本發(fā)明通過(guò)抗老年癡呆的體外篩選模型-大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證實(shí)所述的麥冬總甾體皂苷提取物具有顯著的類似神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)活性，可促使神經(jīng)細(xì)胞長(zhǎng)出突起，可在制備預(yù)防和治療老年性癡呆，尤其在制備治療阿爾茨海默癥等神經(jīng)退行性疾病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明拓展了麥冬總甾體皂苷提取物的藥物用途，制備方法簡(jiǎn)便，提取的產(chǎn)物純度高，且麥冬來(lái)源廣泛，取材便利。
文檔編號(hào)C07J71/00GK102250197SQ20111013712
公開(kāi)日2011年11月23日 申請(qǐng)日期2011年5月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月25日
發(fā)明者葉英, 戚建華, 曲媛, 李靜 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)