專利名稱：催化氧化降解甾體總皂甙制備次生甾體皂苷和皂苷元的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方法。
背景技術(shù)：
留體皂甙(Steroidal Saponins)是植物中一類重要的生物活性物質(zhì)，留體皂甙的研究在天然產(chǎn)物化學(xué)中一直占有重要的地位。有關(guān)留體皂甙的分離、鑒定和結(jié)構(gòu)測定的研 究已有較多報道。據(jù)不完全統(tǒng)計，已研究了近150種植物中的約200多種天然留體皂甙，發(fā) 現(xiàn)甾體皂甙根據(jù)其苷元的結(jié)構(gòu)不同可分為螺留皂苷和呋留皂苷，留體皂甙的甙元是含有27 個碳原子的螺留醇或呋留醇。留體皂甙大多存在于單子葉植物的百合科，石蒜科和薯蕷科 等植物中，許多常用中藥知母、天門冬、麥門冬、七葉一枝花(重樓)、黃精、薤白、蒺藜、黃山 藥、黃姜、穿山龍、番麻和劍麻等都含有大量的留體皂甙。由于留體皂甙元是合成留體避孕 藥及激素類藥物的原料，國內(nèi)外學(xué)者在50 60年代在尋找資源、改進(jìn)工藝等方面做了大量 工作。迄今已從植物中得到大約400種此類成分，甾體皂甙已成為藥物研究開發(fā)的重要先 導(dǎo)化合物，由不含糖的留體皂苷元出發(fā)幾乎可以合成所有的留體激素藥物，是生產(chǎn)留體激 素藥物最理想的基礎(chǔ)原料。到目前為止中國已是大量生產(chǎn)薯蕷皂甙元(Diosgenin)、替告皂 甙元(Tigogenin)和?？略磉霸?Hecogenin)的重要國家。中國的留體皂苷元加工企業(yè)已 經(jīng)發(fā)展到近200多家，生產(chǎn)能力達(dá)5000多噸，產(chǎn)值超過20億元人民幣。研究表明，留體皂甙具有良好的心血管活性、抗腫瘤、抗癡呆、抗炎、抗病原微生 物、降血糖及雌激素樣作用。天然留體皂甙的生物活性研究及其臨床應(yīng)用，最早為法國的 專利，報道薯蕷皂甙元(diosgenin)及其皂甙有抗關(guān)節(jié)炎作用。前蘇聯(lián)的科研人員發(fā)現(xiàn)高 加索薯蕷中的皂甙提取物有降膽固醇的作用，臨床實(shí)驗(yàn)也有證明。80年代Ravikumer等發(fā) 現(xiàn)云南白藥中的薯蕷皂甙有抗癌活性。從龍舌蘭科的植物(Dracaena Afromontan)中分 離出的新甾體皂甙(Afromontoside)具有抑制KB細(xì)胞的活性。另外，美國Pfizer制藥公 司用替告皂甙元(Tigogenin)和?？略磉霸?Hecogenin)為留體母核所合成的纖維雙糖 甙有很強(qiáng)的降血脂作用。我國也有很多有關(guān)留體皂甙生物活性的報道。例如，從重樓屬植 物中分離出的留體皂甙，具有止血、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤及對心血管系統(tǒng)的作用。從叉蕊薯蕷 (Dioscorea collettii)中分離得到的叉蕊皂甙II有很明顯的降膽固醇活性。從穿龍薯蕷 (D. nipponica)中分得的薯蕷皂甙(dioscin)有明顯的止咳、祛痰、平喘活性。目前，國內(nèi) 以不同種的薯蕷屬植物為原料，提取其總留體皂甙作為臨床上的降血脂藥已有數(shù)家工廠生 產(chǎn)，其中用盾葉薯蕷(D. zingibernsis)為原料研制成功的新藥"盾葉冠心寧"，臨床治療 冠心病、心絞痛有一定療效。已上市的〃地奧心血康〃也是一種降血脂的藥物，該藥是以黃 山藥(D. panthaica)的根莖為原料提取的薯蕷皂甙的混合物，其中包括單糖甙、二糖甙等， 它們實(shí)際上是原薯蕷皂苷的代謝次生衍生物。最新的生物醫(yī)學(xué)研究表明，許多來自天然植物的單體活性成分藥物或多組分活性 成分藥物經(jīng)人體胃腸道代謝或經(jīng)肝臟代謝后所產(chǎn)生的各種代謝衍生物，被吸收入血后，才成為人體內(nèi)真正起藥效作用的活性成分，且具有比原形植物活性成分更顯著療效的特性。 比如大鼠口服放射性標(biāo)記的地奧心血康膠囊24h后，大鼠糞便中出現(xiàn)了 2-3個新的衍生 物，同時也存在少量未改變的原型藥物，進(jìn)一步的研究表明，這些新出現(xiàn)的衍生物是留體皂 甙糖基選擇性水解的一系列去糖基的次生留體皂苷。說明地奧心血康在腸內(nèi)菌代謝后真正 被吸收入血的是代謝衍生物。此外，從滇重樓莖葉中也可分離到少量的去糖基的次生甾體 皂苷，這些衍生物的生物活性和原型皂甙不同，具有較強(qiáng)的體外抗白血病活性。因此，系統(tǒng) 的研究留體皂甙的化學(xué)及生物活性，尋找有活性的先導(dǎo)化合物，進(jìn)一步開發(fā)成為新藥，是藥 物研發(fā)的重要目標(biāo)。但是通過分離純化留體皂甙的工作，從植物中將那些含量很低的混合 皂甙一個個分離純化獲得純品，再篩選其藥理活性，是既費(fèi)時、費(fèi)力又不經(jīng)濟(jì)的方法。再加 上一些單體皂甙(特別是只含單糖甙、二糖甙的代謝次生留體皂苷)在植物中含量很低，且 分離過程復(fù)雜，很難用于工業(yè)化生產(chǎn)。雖然皂甙元相對于皂甙來說，容易分離得到，且分離純化過程易于工業(yè)化。因此可 以采用留體皂甙元為母核，參考已知的天然留體皂甙中糖的連接方式，定向的半合成甾體 皂甙，篩選藥理活性，進(jìn)而研究結(jié)構(gòu)與活性的關(guān)系，開發(fā)療效好而毒副作用小的新藥。通過 對皂甙元進(jìn)行糖基化來大量合成具有藥理活性的各種皂甙，既有利于新藥的開發(fā)，又可推 動甾體皂甙研究的進(jìn)一步深化。所以研究天然及半合成的留體皂甙是藥物創(chuàng)新中一個值得 開發(fā)的領(lǐng)域。但是迄今為止，皂苷元主要是采用強(qiáng)酸水解植物總皂甙提取物的工藝進(jìn)行工 業(yè)化生產(chǎn)，產(chǎn)生的酸性廢渣和廢水已經(jīng)對環(huán)境造成嚴(yán)重的影響，社會成本極大，如何克服這 個技術(shù)瓶頸一直是留體皂素生產(chǎn)行業(yè)的戰(zhàn)略目標(biāo)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處，提供一種在中性介質(zhì)中制備甾 體皂苷元和次生留體皂苷的方法，該制備方法有效降低生產(chǎn)成本，和避免了嚴(yán)重的環(huán)境污 染問題。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下方案一種催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方法，包括以下步 驟A、采用薯蕷科、百合科、玄參科、菝葜科或龍舌蘭科植物中的一種或兩種以上的混 合物制備留體總皂甙提取物；本發(fā)明采用重樓、黃精、薤白、知母、大蒜、麥冬、蒺藜、黃山藥、 黃姜、穿山龍、番麻或劍麻等一種或兩種以上的植物提取的留體總皂甙，其中含有；薯蕷皂 甙、原薯蕷皂甙、原纖細(xì)皂甙、纖細(xì)皂甙、知母皂甙、大蒜皂甙、劍麻皂甙、重樓皂甙、番麻皂試等。其中留體總皂甙提取工藝，其中包括a)、以上述植物的根莖或須根和葉等為原 料，選用水、甲醇、乙醇、丙醇、丙酮中的一種或兩種以上的混合物溶劑提?。籦)、將a)中提 取物醇沉后去除不溶物，通過大孔樹脂，用水、甲醇、乙醇、丙醇、丙酮中的一種或兩種以上 的混合物作洗脫劑洗脫得到總皂甙；B、將上述的留體總皂甙提取物用70-90%的甲醇或乙醇溶解，采用含混合價過渡 金屬活氧催化劑EN0100和EN0200使普通氧氣充分活化后和上述留體總皂甙提取物的糖苷 鍵作用；所述的活氧催化劑EN0100 和EN0200都是非均相催化劑，包含能夠使普通氧氣充分活化的不同種類和混合價態(tài)的過渡金屬，反應(yīng)過程易于分離和循環(huán)利用。C、通過控制氧化降解的溫度和氧氣壓力，控制糖苷鍵的氧化降解程度，達(dá)到分別制備次生留體皂苷和留體皂苷元的目的；其中氧化降解的溫度為50 210°C，氧氣壓力 0. l_5Mpa，氧化降解的時間為8 24小時；D、氧化降解后采用中性介質(zhì)分離提純后，得到次生留體皂苷和留體皂苷元；其中上述所有反應(yīng)均在中性介質(zhì)中進(jìn)行，留體總皂甙提取物與中性介質(zhì)的用量比 為 100 300g/L。如上所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方法，其特 征在于所述的活氧催化劑EN0100和EN0200的用量按重量百分比是留體總皂甙提取物的 0. 1-30%。如上所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方法，其特 征在于所述的活氧催化劑EN0100和EN0200的用量按重量百分比是留體總皂甙提取物的 0. 5-10%。如上所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方法，其特征 在于步驟C中所述的氧氣的壓力為0. l-2MPa。如上所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方法，其特征 在于步驟D中所述的分離提純過程是降解后的反應(yīng)液在常溫常壓下，經(jīng)過過濾除去活氧 催化劑，有機(jī)層蒸干，殘渣用水洗滌，用乙醇、丙酮、四氫呋喃或石油醚萃取，蒸干有機(jī)溶劑 得到留體次生皂苷和留體皂苷元粗品或精品，粗品經(jīng)過柱層析后得到精品。如上所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方法，其特征 在于步驟D中所述的中性介質(zhì)為水或有機(jī)溶劑醇中的一種或者兩種以上的混合物。如上所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方法，其特征 在于所述的有機(jī)溶劑醇是C2-C10的飽和一元醇。如上所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方法，其特征 在于所述的飽和一元醇為乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、異丁醇、戊醇中的一種或兩種以上 的混合物。如上所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方法，其特征 在于可用步驟D中制得的次生留體皂苷作為原料制備相應(yīng)的留體皂苷元，具體過程是次 生甾體皂苷溶于85-95%的甲醇或乙醇溶液，加入5-10%催化劑，氧氣壓力為0. 5-lMPa，在 110-120°C下反應(yīng)10-12h ；反應(yīng)完成后，在常溫常壓下，過濾除去催化劑；濾液濃縮至大量 沉淀產(chǎn)生，過濾后得到灰白色固體，用乙醇、丙酮、四氫呋喃、石油醚中的一種或兩種以上的 混合物重結(jié)晶后得到白色微晶狀留體皂苷元。本發(fā)明制備方法中所述的薯蕷科、百合科、玄參科、菝葜科、龍舌蘭科屬植物的總 皂甙提取物在氧氣作用下經(jīng)過所述的活氧催化劑EN0100和EN0200的催化氧化降解制 備相應(yīng)的次生留體皂苷，最終的反應(yīng)和分離純化過程是總皂甙提取物溶于70-90%的甲 醇或乙醇溶液，加入5-10%的活氧催化劑EN0100和EN0200，氧氣壓力為0. 1-0. 5MPa，在 80-100°C下反應(yīng)8-10h。反應(yīng)完成后，在常溫常壓下，過濾除去催化劑，再生后可以循環(huán)使 用；濾液濃縮至大量沉淀產(chǎn)生，加入適量的水洗滌3次，過濾后得到棕黃色固體，用90-95% 的乙醇重結(jié)晶后得到白色微晶狀次生留體皂苷。
本發(fā)明所述的制備方法，所述的薯蕷科、百合科、玄參科、菝葜科、龍舌蘭科屬植物 的總皂甙提取物在氧氣作用下經(jīng)過所述的活氧催化劑EN0100和EN0200的催化氧化直接降 解制備相應(yīng)的留體皂苷元，最終的反應(yīng)和分離純化過程是總皂甙提取物溶于80-95%的 甲醇或乙醇溶液，加入5-10%所述的催化劑，氧氣壓力為0. 8-1. 5MPa，在110_140°C下反應(yīng) 14-16h。反應(yīng)完成后，在常溫常壓下，過濾除去催化劑，再生后可以循環(huán)使用；濾液濃縮至大 量沉淀產(chǎn)生，過濾后得到灰白色固體，用乙醇、丙酮、四氫呋喃、石油醚或二者的混合物重結(jié) 晶后得到白色微晶狀留體皂苷元。發(fā)明所涉及到的次生留體皂苷和留體皂苷元具有如下螺留烷型骨架的分子結(jié)構(gòu) (la, lb, Ic, Id) 其中:R= H(Ial, Ibl) ；_Glu(Ia2，Ib2) ；Glu-Rha(Ia3) 其中R= H, -Glu, X = H, OH ;Υ = H, OH本發(fā)明相對于現(xiàn)有的次生留體皂苷和留體皂苷元的制備方法，具有以下優(yōu)點(diǎn)(1)不是直接從原藥材中提取總皂甙后再分離，避免了因總皂甙中次生留體皂苷 含量較低，富集成本較高的缺點(diǎn)；(2)避免使用酸性介質(zhì)水解糖苷鍵，減少副反應(yīng)的發(fā)生，有利于分離和純化；另 夕卜，由于沒有酸堿廢液的排放，不會產(chǎn)生任何環(huán)保問題；(3)活氧催化劑ΕΝ0100和ΕΝ0200催化劑是固體狀態(tài)，易于分離和循環(huán)利用，采用 活氧催化氧化降解技術(shù)可以控制糖苷鍵的降解程度，達(dá)到定向合成相關(guān)次生留體皂苷的目 的，從而可以大批量地制備具有新型生物活性的次生留體皂苷，有利于開發(fā)新一代植物醫(yī)藥。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式
對本發(fā)明做進(jìn)一步描述甾體總皂苷的制備方法
(1)薯蕷總皂甙的制備以薯蕷飲片為原料，粉碎后分別用70%，80%和90%的乙 醇提取三次，合并后回收乙醇至大量的微晶狀沉淀析出，過濾收集微晶狀固體(a)；濾液加 95 %的乙醇至沒有沉淀析出，過濾除去沉淀，濾液減壓濃縮至干燥固體(b)，合并固體a和 b得到粗的薯蕷總皂甙；用85%的乙醇從結(jié)晶或者上大孔樹脂柱分別用水和80%的乙醇洗 脫，收集乙醇部分得到精制的總皂甙。(2)重樓莖葉總皂甙的制備以重樓地上部分的莖葉為原料，粉碎后用乙醇提取， 回收乙醇后的水溶物，上大孔樹脂分別用水，70%的乙醇，95%的乙醇洗脫，收集70%乙醇 的洗脫部分回收乙醇后得到的固體為重樓莖葉總皂甙。 (3)劍麻總皂甙的制備劍麻去除纖維后得到的廢液和廢渣經(jīng)自然發(fā)酵后曬干， 粉粹后用95%的乙醇提取，然后將醇浸膏懸浮于水，用水飽和的正丁醇萃取，減壓濃縮后即 得到粗的劍麻總皂甙?；蛘邔⒋继嵛飸腋∮谒苯油ㄟ^大孔吸附樹脂柱，皂甙被吸附，再 用不同濃度的乙醇(80%，95%)洗脫，收集80%乙醇的洗脫部分回收乙醇后得到精制的劍 麻總皂甙。采用上述留體總皂苷制備次生留體皂苷和皂苷元實(shí)施例1薯蕷次苷/重樓莖葉次苷(Ia2)的制備方法(1)在IL的高壓反應(yīng)釜中，加入薯蕷總皂甙20g，溶于85-90%的乙醇IOOmL,力口 入2g活氧催化劑EN0100或EN0200，在密閉條件下充入0. 2MPa的氧氣，逐漸升溫加熱至 90-10(TC，反應(yīng)IOh后使溫度和壓力降到常溫常壓，打開反應(yīng)釜倒出反應(yīng)液，過濾除去催化 劑和少量不溶物，濾液濃縮至大部分乙醇被蒸出后，大量的白色固體析出，過濾并用水洗 滌、干燥后，先用石油醚(60-80°C)萃取，除去少量的皂苷元(Ial)，剩下的固體再用95%的 乙醇重結(jié)晶，得到產(chǎn)物6. 6-7. 0g，純度為92% (HPLC)的白色微晶狀固體Ia2。(2)在IL的高壓反應(yīng)釜中，加入重樓莖葉總皂甙20g，溶于90%的乙醇IOOmL,力口 入2g非均相活氧催化劑EN0100或EN0200，在密閉條件下充入0. 2MPa的氧氣，逐漸升溫 加熱至90-100(TC，反應(yīng)IOh后使溫度和壓力降到常溫常壓，打開反應(yīng)釜倒出反應(yīng)液，過濾 除去催化劑和少量不溶物，把乙醇蒸干后，得到白色固體，先用石油醚(60-80°C )萃取，除 去少量的皂苷元(Ial)，剩下的固體再用95%的乙醇重結(jié)晶，得到6. 8-7. 2g純度為93% (HPLC)的白色微晶狀固體Ia2。實(shí)施例2薯蕷次苷/重樓莖葉次苷(Ia3)的制備方法(1)在IL的高壓反應(yīng)釜中，加入薯蕷總皂甙20g，溶于85-90%的乙醇1 OOmL，力口 入Ig活氧催化劑EN0100或EN0200，在密閉條件下充入0. IMPa的氧氣，逐漸升溫加熱至 80-90°C，反應(yīng)7h后使溫度和壓力降到常溫常壓，打開反應(yīng)釜倒出反應(yīng)液，過濾除去催化劑 和少量不溶物，濾液濃縮至大部分乙醇被蒸出后，大量的白色固體析出，過濾并用水洗滌、 干燥，然后上硅膠柱分別用70-85%的乙醇洗脫，得到1. 4-1. 6g純度92%的Ia2和7. 8_8g 純度為93% (HPLC)的白色微晶狀固體Ia3。(2)在IL的高壓反應(yīng)釜中，加入重樓莖葉總皂甙20g，溶于90%的乙醇IOOmL,力口 入Ig活氧催化劑EN0100或EN0200，在密閉條件下充入0. IMPa的氧氣，逐漸升溫加熱至 80-90°C，反應(yīng)7h后使溫度和壓力降到常溫常壓，打開反應(yīng)釜倒出反應(yīng)液，過濾除去催化劑 和少量不溶物，把乙醇蒸干后，得到白色固體，然后上硅膠柱分別用70-85%的乙醇洗脫，得 到1. 5-1. 7g純度92%的Ia2和7. 8-8. 2g純度為93. 5% (HPLC)的白色微晶狀固體Ia3。
實(shí)施例3薯蕷/重樓莖葉皂苷元(Ial)的制備方法(1)在IL的高壓反應(yīng)釜中，加入薯蕷總皂甙20g，溶于85-90%的乙醇1 OOmL，力口 入2g活氧催化劑EN0100或EN0200，在密閉條件下充入0. 5MPa的氧氣，逐漸升溫加熱至 120-140°C，反應(yīng)12-14h后使溫度和壓力降到常溫常壓，打開反應(yīng)釜倒出反應(yīng)液，過濾除 去催化劑和少量不溶物，濾液濃縮至大部分乙醇被蒸出后，大量的白色固體析出，過濾并 用水洗滌、干燥后再用石油醚(60-80°C)萃取并重結(jié)晶，得到產(chǎn)物4. 0-4. 3g，純度為95% (HPLC)的白色微晶狀固體Ial。 (2)在IL的高壓反應(yīng)釜中，加入重樓莖葉總皂甙20g，溶于90%的乙醇IOOmL,力口 入2g活氧催化劑EN0100或EN0200，在密閉條件下充入0. 5MPa的氧氣，逐漸升溫加熱至 120-140°C，反應(yīng)12-14h后使溫度和壓力降到常溫常壓，打開反應(yīng)釜倒出反應(yīng)液，過濾除去 催化劑和少量不溶物，把乙醇蒸干后，得到白色固體，用石油醚(60-80°C)萃取并重結(jié)晶， 得到4.2-4. 6g純度為94% (HPLC)的白色微晶狀固體Ial。(3)在IL的高壓反應(yīng)釜中，加入薯蕷次苷/重樓次苷Ia2 (或Ia3) 5g，溶于95 %的 乙醇50mL，加入0. 4g活氧催化劑EN0100或EN0200，在密閉條件下充入0. 3MPa的氧氣，逐 漸升溫加熱至120-14(TC，反應(yīng)10-12h后使溫度和壓力降到常溫常壓，打開反應(yīng)釜倒出反 應(yīng)液，過濾除去催化劑和少量不溶物，濾液濃縮至乙醇被蒸干，大量的白色固體析出，干燥 后再用石油醚(60-80°C)萃取并重結(jié)晶，得到產(chǎn)物2. 2-2. 8g，純度為95% (HPLC)的白色微 晶狀固體Ial。實(shí)施例5劍麻皂苷元(替告皂甙元Ibl和?？略磉霸狪cl)的制備方法在IL的高壓反應(yīng)釜中，加入劍麻總皂甙20g，溶于85-95 %的乙醇1 OOmL，力口 入2g活氧催化劑EN0100或EN0200，在密閉條件下充入0. 6MPa的氧氣，逐漸升溫加熱至 130-150°C，反應(yīng)12-14h后使溫度和壓力降到常溫常壓，打開反應(yīng)釜倒出反應(yīng)液，過濾除去 催化劑和少量不溶物，濾液濃縮至大部分乙醇被蒸出后，大量的白色固體析出，過濾并用水 洗滌、干燥后先用THF萃取，并重結(jié)晶，得到產(chǎn)物3. 6-3. Sg的白色晶狀固體Ibl和Icl的混 合物。利用常規(guī)的乙?；椒?，使?？略磉霸梢阴；苌?，利用石油醚萃取分離； 或者上色譜柱用CHCl3-MeOH-H2O (7 3 0. 2v/v/v)洗脫分離。實(shí)施例6大蒜皂苷元(Idl，其中X = H，Y = 0H)的制備方法在IL的高壓反應(yīng)釜中，加入大蒜總皂甙20g，溶于85-90 %的乙醇IOOmL,加 入2g活氧催化劑EN0100或EN0200，在密閉條件下充入0. 5MPa的氧氣，逐漸升溫加熱至 120-140°C，反應(yīng)12-14h后使溫度和壓力降到常溫常壓，打開反應(yīng)釜倒出反應(yīng)液，有大量的 不溶物和催化劑一起，用THF萃取后，過濾除去催化劑，濃縮至大量的白色固體析出，過濾 并用水洗滌、干燥后再用熱的乙醇萃取并重結(jié)晶，得到產(chǎn)物3. 7-3. 9g純度為92% (HPLC)的 白色微晶狀固體大蒜皂苷元Idl (其中X = H，Y = 0H)。
權(quán)利要求
一種催化氧化降解甾體總皂甙制備次生甾體皂苷和皂苷元的方法，其特征在于包括以下步驟A、采用薯蕷科、百合科、玄參科、菝葜科或龍舌蘭科植物中的一種或兩種以上的混合物制備甾體總皂甙提取物；B、將上述的甾體總皂甙提取物溶于70-90％的甲醇或乙醇溶液，采用含混合價過渡金屬活氧催化劑ENO100和ENO200使普通氧氣充分活化后和上述甾體總皂甙提取物的糖苷鍵作用；C、通過控制氧化降解的溫度和氧氣壓力，控制糖苷鍵的氧化降解程度，達(dá)到分別制備次生甾體皂苷和甾體皂苷元的目的；其中氧化降解的溫度為50～210℃，氧氣壓力0.1-5Mpa，氧化降解的時間為8～24小時；D、氧化降解后采用中性介質(zhì)分離提純后，得到次生甾體皂苷和甾體皂苷元；其中上述所有反應(yīng)均在中性介質(zhì)中進(jìn)行，甾體總皂甙提取物與中性介質(zhì)的用量比為100～300g/L。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方 法，其特征在于所述的活氧催化劑EN0100和EN0200的用量按重量百分比是留體總皂甙提 取物的0. 1-30% ο
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方 法，其特征在于所述的活氧催化劑EN0100和EN0200的用量按重量百分比是留體總皂甙提 取物的0. 5-10%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方 法，其特征在于步驟C中所述的氧氣的壓力為0. l-2MPa。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方 法，其特征在于步驟D中所述的分離提純過程是降解后的反應(yīng)液經(jīng)過過濾除去活氧催化 齊U，有機(jī)層蒸干，殘渣用水洗滌，用乙醇、丙酮、四氫呋喃或石油醚中的一種或兩種以上的混 合物重結(jié)晶，蒸干有機(jī)溶劑得到留體次生皂苷和留體皂苷元粗品或精品，粗品經(jīng)過柱層析 后得到精品。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方 法，其特征在于步驟D中所述的中性介質(zhì)為水或有機(jī)溶劑醇中的一種或者兩種以上的混合 物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方 法，其特征在于所述的有機(jī)溶劑醇是C2-C10的飽和一元醇。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方 法，其特征在于所述的飽和一元醇為乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、異丁醇、戊醇中的一種 或兩種以上的混合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的催化氧化降解留體總皂甙制備次生留體皂苷和皂苷元的方 法，其特征在于可用步驟D中制得的次生留體皂苷作為原料制備相應(yīng)的留體皂苷元，具體 過程是次生留體皂苷溶于85-95%的甲醇或乙醇溶液，加入5-10%催化劑，氧氣壓力為 0. 5-lMPa，在110-120°C下反應(yīng)10_12h ；反應(yīng)完成后，在常溫常壓下，過濾除去催化劑；濾液 濃縮至大量沉淀產(chǎn)生，過濾后得到灰白色固體，用乙醇、丙酮、四氫呋喃、石油醚中的一種或兩種以上的混合物重結(jié)晶后得到 白色微晶狀留體皂苷元。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種催化氧化降解甾體總皂甙制備次生甾體皂苷和皂苷元的方法，步驟A、制備甾體總皂甙提取物；B、將上述的甾體總皂甙提取物溶于70-90％的甲醇或乙醇溶液，采用含混合價過渡金屬活氧催化劑ENO100和ENO200使普通氧氣充分活化后和上述甾體總皂甙提取物的糖苷鍵作用；C、通過控制氧化降解的溫度和氧氣壓力，控制糖苷鍵的氧化降解程度，達(dá)到分別制備次生甾體皂苷和甾體皂苷元的目的；D、氧化降解后采用中性介質(zhì)分離提純后，得到次生甾體皂苷和甾體皂苷元；其中上述所有反應(yīng)均在中性介質(zhì)中進(jìn)行。本發(fā)明的目的提供一種制備甾體皂苷元和次生甾體皂苷的方法，該制備方法有效降低生產(chǎn)成本，和避免了嚴(yán)重的環(huán)境污染問題。
文檔編號C07J71/00GK101845076SQ201010186160
公開日2010年9月29日 申請日期2010年5月21日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月21日
發(fā)明者余佩華, 鄧躍敏 申請人:中山以諾生物科技有限公司