專利名稱：：一組胺基苯酰衍生物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一組胺基苯酰衍生物；本發(fā)明又涉及所述化合物的制備方法和在抗病毒中的應(yīng)用；本發(fā)明還涉及所述化合物的藥物組合物。
背景技術(shù)：
：目前，臨床上應(yīng)用的抗病毒藥物，其作用靶點(diǎn)均為病毒蛋白，作用機(jī)制為抑制病毒的復(fù)制或阻斷病毒的侵入。病毒是"移動(dòng)的靶"，依靠不斷變異逃避藥物攻擊。以病毒蛋白為靶點(diǎn)的藥物均造成病毒變異和耐藥，已成為世界性難題。同樣，目前臨床常用的抗艾滋病病毒藥物，其作用靶點(diǎn)均為HIV病毒蛋白，長(zhǎng)期用藥后會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重耐藥問(wèn)題，導(dǎo)致治療失敗。多藥聯(lián)合應(yīng)用(雞尾酒療法)可大大降低患者病毒載量，減緩耐藥發(fā)生，但最終還是難免發(fā)生耐藥；新上市品種在抗耐藥毒株上會(huì)有一定優(yōu)勢(shì)，但隨著臨床使用時(shí)間的延長(zhǎng)，耐藥性還是無(wú)法避免。因此，對(duì)付病毒耐藥是當(dāng)前要解決的主要課題。隨著病毒學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷深入，大量研究成果表明，在生物進(jìn)化的漫長(zhǎng)過(guò)程中，宿主細(xì)胞普遍形成針對(duì)不同病原病毒的防御體系，而病毒也會(huì)形成特異性的拮抗機(jī)制，來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)宿主細(xì)胞抑制作用的逃避。病毒和宿主細(xì)胞之間相互依存和相互拮抗關(guān)系，特別是HIV-1相關(guān)細(xì)胞因子己經(jīng)成為目前國(guó)際醫(yī)學(xué)生物學(xué)基礎(chǔ)和應(yīng)用研究中最為前沿的方向和發(fā)展最為迅速的領(lǐng)域。Vif(病毒感染性因子)是HIV-1基因組編碼的病毒蛋白，在HIV-1的復(fù)制和感染過(guò)程中起著關(guān)鍵的作用。近來(lái)的研究表明，hA3G與Vif的生物學(xué)功能密切相關(guān)。hA3G是在人的淋巴細(xì)胞中表達(dá)的一種RNA/DNA編輯酶，歸屬于APOBEC蛋白超家族成員。AP0BEC3G屬于AP0BEC家族，最新的研究結(jié)果表明，其可以導(dǎo)致HIV-1病毒基因組的GA超突變，高效抑制病毒的復(fù)制，是宿主細(xì)胞中天然產(chǎn)生的抗艾滋病病毒的細(xì)胞因子。在以hA3G/Vif為靶點(diǎn)的抗病毒藥物篩選研究中，本發(fā)明證實(shí)，3-胺基苯酰衍生物具有抑制hA3G/Vif結(jié)合活性，并具有抑制病毒復(fù)制的作用。本發(fā)明所述化合物及其作用，迄今為止未見(jiàn)有國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)的報(bào)道。發(fā)展針對(duì)新藥物靶點(diǎn)hA3G的新型抗病毒化合物，對(duì)于解決HIV耐藥性問(wèn)題可望取得突破性進(jìn)展，從而為臨床提供更有效的新型抗病毒藥物。本發(fā)明的主要目的在于，通過(guò)對(duì)一組胺基苯酰衍生物的構(gòu)效研究，篩選獲得一類新的以hA3G/Vif為靶點(diǎn)的抗病毒化合物及藥用鹽，該類化合物不僅抑制hA3G/Vif結(jié)合，還具有顯著的抗病毒活性。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了一組胺基取代苯甲酰衍生物。本發(fā)明提供了制備所述衍生物的方法。本發(fā)明提供了含有這種胺基苯酰衍生物作為活性成分的藥物組合物。本發(fā)明還提供了該胺基苯酰衍生物及藥用鹽在抗病毒中的應(yīng)用，尤其是在治療HIV感染中的應(yīng)用，包括與其它抗病毒化療藥物的聯(lián)合應(yīng)用。本發(fā)明首先提供了具有以下通式(1)的胺基苯酰衍生物及藥用鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中Ri代表氫，連接于苯環(huán)的一個(gè)或多個(gè)硝基、鹵素、氰基、酯基、酰胺基、羥基、巰基、取代或未取代的低級(jí)垸基、低級(jí)垸氧基或芳基氧基、低級(jí)烷硫基或芳基硫基、氨基、取代的氨基等；R2，R3可以相同也可以不同，代表氫，低級(jí)烷基，羰基或磺酰基；X代表O、S、NH、NR5、CH2或CHR6;Y代表C、S或SO;R4、R5代表氫、低級(jí)烴基、羥基、芳烴或取代的芳烴；本發(fā)明按照上述定義通式(l)的胺基取代苯酰衍生物還包括其與酸發(fā)生成鹽反應(yīng)的產(chǎn)物?；衔?I)與酸成鹽的例子可以有無(wú)機(jī)酸，如鹽酸鹽、氫溴酸鹽和硫酸鹽等；有機(jī)酸鹽，如乙酸鹽、乳酸鹽、琥珀酸鹽、富馬酸鹽、馬來(lái)酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、甲磺酸鹽和對(duì)苯甲酸鹽等。本發(fā)明從大量候選化合物篩選中所定義的胺基苯酰衍生物，其非限定性的結(jié)構(gòu)示例可以有<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>261326112621本發(fā)明進(jìn)一步提供了該3-胺基苯酰衍生物或其鹽作為hA3G/Vif結(jié)合抑制劑及其在制備抗病毒藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明另一方面還提供了一種抗病毒藥物組合物，其包括治療有效量的上述3-胺基苯酰衍生物或其藥用鹽及藥學(xué)上可接受的藥用輔料，可將化合物本身或其與可藥用賦形劑、稀釋劑等的混合物以片劑、膠囊、顆粒劑、散劑或糖漿劑的形式口服給藥，或以注射劑的形式非口服給藥。上述制劑可通過(guò)常規(guī)制藥方法制備?？捎玫乃幱幂o劑的例子包括賦形劑(例如糖類衍生物如乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和山梨糖醇；淀粉衍生物如玉米淀粉、土豆淀粉、糊精和羧甲基淀粉；纖維素衍生物如結(jié)晶纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素、羧甲基纖維素鈣、羧甲基纖維素鈉；阿拉伯膠；右旋糖酐；硅酸鹽衍生物如偏硅酸鎂鋁；磷酸鹽衍生物如磷酸鈣；碳酸鹽衍生物如碳酸鈣；硫酸鹽衍生物如硫酸鈣等)；粘合劑(例如明膠、聚乙烯吡咯烷酮和聚乙二醇)；崩解劑(例如纖維素衍生物如羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯垸酮)；潤(rùn)滑劑(例如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、鯨蠟、硼酸、苯甲酸鈉、亮氨酸)、穩(wěn)定劑(對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯等);矯味劑(例如常用的甜味劑、酸味劑和香料等)；稀釋劑和注射液用溶劑(例如水、乙醇和甘油等)。本發(fā)明的3-胺基苯酰衍生物及可藥用鹽可以根據(jù)目的化合物中的X、Y的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)來(lái)確定起始物和反應(yīng)物，例如，當(dāng)X=0、S、NH;￥=羰基、磺?；鶗r(shí)，各類3-胺基苯酰衍生物可利用各類取代的3-胺基苯甲酸(磺酸)與芳基胺或酚進(jìn)行縮合反應(yīng)制備，具體過(guò)程可以是將保護(hù)的或酰化后的A與HOBT(l-羥基苯并三唑)，DIC(N，N'-二異丙基碳二亞胺)按適當(dāng)比例混合溶于DMF(N，N-二甲基亞砜)中，大約半小時(shí)后加入B室溫下反應(yīng)24小時(shí)，產(chǎn)物用柱層析分離純化。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>其中，X=0、S或NH;Y=C、S或SO;R4，R2，R3及R4同前。上述過(guò)程中，起始原料3-胺基苯甲酸(磺酸)、芳基胺(酚)或芐基醇可以購(gòu)買(mǎi)或由各種已知方法制備。本發(fā)明還提供了所述化合物的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究。根據(jù)HIV-1病毒蛋白Vif介導(dǎo)的hA3G的降解作用的研究進(jìn)展，本發(fā)明建立了以Vif介導(dǎo)的降解hA3G為靶點(diǎn)的抗HIV-1藥物高通量篩選模型，以篩選能抑制該降解過(guò)程的小分子活性物質(zhì)。這一模型的作用原理是，在細(xì)胞內(nèi)共表達(dá)HIV-1的Vif和融合了熒光蛋白(yellowfluorescentprotein(YFP))的hA3G，由于Vif對(duì)hA3G的降解造成融合在hA3G上的YFP的降解，從而導(dǎo)致胞內(nèi)熒光強(qiáng)度(530nm)的下降。通過(guò)測(cè)定熒光強(qiáng)度的變化，可以定量分析篩選樣品對(duì)Vif降解hA3G的影響。同時(shí)為了區(qū)分樣品對(duì)泛素降解途徑的非特異性抑制作用，本+發(fā)明還建立了檢測(cè)以腺病毒早期基因產(chǎn)物對(duì)P53的降解作用為復(fù)篩模型，以保證該模型所得到的陽(yáng)性樣品特異性地阻斷Vif降解hA3G。結(jié)果參見(jiàn)表1。采用HIV-1P24抗原試劑盒，測(cè)定了發(fā)明化合物的抑制HIV-1活性，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。表1發(fā)明化合物對(duì)hA3G的上調(diào)活性<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>以上結(jié)果初步驗(yàn)證了本發(fā)明化合物或其藥用鹽在抑制hA3G/Vif結(jié)合及抗病毒方面的作用，為其作為抗病毒藥物的開(kāi)發(fā)應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例可以進(jìn)一步幫助本領(lǐng)域技術(shù)人員了解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。<實(shí)施例1〉、(3-丙酰胺基-4-甲氧基苯)甲酰G，，4，，5，-三甲氧基苯)胺(261)的合成在25ml的燒瓶中，將0.6g3-氨基-4-甲氧基苯甲酸(l.Og，6mmo1)溶于干燥的THF(四氫呋喃)后，加入三乙胺(1.2ml,12mmo1)得到黃色透明溶液，氮?dú)獗Ｗo(hù)，攪拌，冰水浴條件下向其中滴加丙酰氯(0.78ml，9mmo1)，滴加完畢后自然恢復(fù)室溫反應(yīng)。過(guò)濾反應(yīng)液，濾液蒸干后上硅膠柱分離得到3-丙酰胺基-4-甲氧基苯甲酸1.3g(收率67%)。將上述產(chǎn)物100mg在冰水浴條件下與HOBT53mg(mmol)，DIC0.03ml(mmol)混合在干燥DMF中，N2保護(hù)，攪拌30min后加入3，4，5-三甲氧基苯胺72mg(mmo1),自然恢復(fù)室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。減壓蒸干反應(yīng)液，殘余物用乙酸乙酯溶解后過(guò)濾，濾液蒸干后用制備薄層硅膠板分離得到化合物26140mg(收率還)。!H麗R(CDC13,S)1.3(t,3H,CH3),2.5(q,2H，CH2),3.82(s,3H,4，-OCH3),3.9(s,6H，3，，5，-OCH3),3.95(s，3H，4-OCH3),6.98(s,2H,2，，6，-H),7.0(d，1H，5-H),7.8(dd,1H，6-H),7.9(br，2H,NH),8.9(d,1H,2-H)<實(shí)施例2>、(3-丙酰胺基-4-甲氧基苯)甲酸(3，，4，，5，-三甲氧基苯基)酯(351)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、丙酰氯和3，4，5-三甲氧基苯酚為原料，按照實(shí)施例l的類似方法，合成得到化合物351，兩步收率30%。tH雇R(CDCl3,S)1.3(t,3H,CH3),2.5(q，2H,CH2),3.8(s,9H，4，,5，,6，-OCH3)，3.95(s,3H，4-OCH3),6.44(s,2H,2',6，-H)，6.98(d,1H,5陽(yáng)H),7.76(br,1H,3-NHCO),7.9(dd，1H,6-H),7.9(br，1H，l-CONH),9.2(d,1H，2-H)<實(shí)施例3〉、(3-三氟乙酰胺基-4-甲氧基苯)甲酰(3，，4，，5，-三甲氧基苯基)胺(263)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、三氟乙酰氯和3，4，5-三甲氧基苯胺為原料，按照實(shí)施例l的類似方法，合成得到化合物263，兩步收率50%。iH麗R(CDCl3.S)3.84(s,9H,4，,5，,6，-OCH3),4.0(s,3H,4-OCH3)，6.97(s,2H2',6，-H)，7.03(d，1H,5-H),7.86(d，1H，6-H)，7.9(s,1H,3-NHCOR)，8.6(s，1H,l-CONH),8.75(s，1H,2-H)<實(shí)施例4〉、(3-三氟乙酰胺基-4-甲氧基苯)甲酸(3，，4，，5，-三甲氧基苯基)酯(353)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、三氟乙酰氯和3，4，5-三甲氧基苯酚為原料，按照實(shí)施例l的類似方法，合成得到化合物353，兩步收率40%。力畫(huà)R(CDC13,S)3.85(s,9H,4,,5，,6，-OCH3),4.0(s,3H,4-OCH3),6.46(s,2H,2'，6，-H)，7.05(d,1H，5-H),8.07(dd,1H，6-H),8.54(s，1H,3-NHC0R),9.12(s,1H,2-H)<實(shí)施例5>、(3-丙酰胺基-4-甲氧基苯)甲酰(4'-氯苯)胺(2613)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、丙酰氯和4-氯苯胺為原料，按照實(shí)施例1的類似方法，合成得到化合物2613，兩步收率30%。&麗R(CDC13,S)1.28(t，3H,CH3)，2.48(q,2H,CH2)，3.96(s,3H,4，-OCH3)，6.98(d,lH,5-H),7.33(d,2H，2',6，-H)，7.6(d,2H,3',5，-H),7,77(dd,1H,6-H),7.8(s,1H,3-NHCOR)，8.0(br，lH，l-CONH),8.87(s，lH，2墨H)<實(shí)施例6〉、(3-丙酰胺基-4-甲氧基苯)甲酰(4'-甲氧基苯)胺(2611)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、丙酰氯和4-甲氧基苯胺為原料，按照實(shí)施例1的類似方法，合成得到化合物2611，兩步收率70%。NMR(DMSO-d6.S)1.07(t,3H,CH3)，2.4(q，2H,CH2),3.73(s，3H,4，-OCH3),3.89(s,3H,4-OCH3),6.89(d,2H,2'，6，-H)，7.1(d,lH,5陽(yáng)H),7.6(d,2H,3',5，-H),7.7(dd,lH，6-H),8,48(br，lH，3-NHCOR),9.15(s,lH,2-H),10.0(s,lH，l-CONH)<實(shí)施例7>、[3-(2-氯乙酰氨基)-4-甲氧基苯]甲酰(3，，4，，5，-三甲氧基苯)胺(1)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、2-氯乙酰氯和3，4，5-三甲氧基苯胺為原料，按照實(shí)施例l的類似方法，合成得到化合物l，兩步收率56%。雇R(CDC13,S)4.5(s,2H,CH2),3.82(s,3H,4，-OCH3),3.9(s,6H，3，,5，-OCH3)，3.95(s,3H,4-OCH3)，6.98(s，2H，2',6'-H),7.0(d,1H,5-H),7.8(dd,1H，6-H),7.9(br，2H，NH),8.9(d,1H,2-H)<實(shí)施例8〉、(3-丙酰胺基-4-甲氧基苯)甲酸(3，，4，5，-三甲氧基苯巰基)酯(9)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、丙酰氯和3'，4'，5，-三甲氧基苯硫酚為原料，按照實(shí)施例l的類似方法，合成得到化合物9，收率50%。&麗R(CDC13,S)1.3(t，3H,CH3),2.5(q,2H，CH2),3.8(s,9H,4，,5，，6，-OCH3),3.95(s,3H，4-OCH3)，6.44(s,2H，2'，6，-H)，6.98(d，1H，5-H),7.76(br，1H,NH)，7.9(dd,1H，6-H),7.9(br,2H，NH),9.2(d,1H，2-H)<實(shí)施例9>、[3-(2-氟丙酰胺基)-4-甲氧基苯]甲酸(3，，4，5'-三甲氧基苯巰基)酯(21)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、2-氟丙酰氯和3，，4，，5'-三甲氧基苯硫酚為原料，按照實(shí)施例l的類似方法，合成得到化合物21，收率54t力麗R(CDC13,5)1.3(d,3H,CH3),4.5(q,1H，CH),3.8(s,9H，4',5，,6，-OCH3),3.95(s,3H,4-OCH3),6.44(s,2H,2',6，-H),6.98(d,1H,5-H),7.76(br，1H,NH)，7.9(dd，1H,6-H)，7.9(br,2H，NH),9.2(d，1H，2-H)<實(shí)施例10〉、(3-甲氧基-4-丙酰胺基苯)甲酰(3，，4，5，-三甲氧基苯)胺(64)的合成以3-甲氧基-4-氨基苯甲酸、丙酰氯和3'，4'，5，-三甲氧基苯胺為原料，按照實(shí)施例1的類似方法，合成得到化合物64，收率57%。!H麗R(CDC13)S1.3(t，3H,CH3)，2.5(q，2H,CH2),3.82(s,3H,4，-OCH3),3.9(s,6H,3,,5，-OCH3)，3.95(s,3H，4-OCH3),6.98(s,2H，2',6，-H),7.0(d，1H,2-H),7.8(dd，1H,6-H)，7.9(br，2H,,，8単1H，5-H)<實(shí)施例11〉、(3-丙酰胺基-4-甲氧基苯)甲酰(4'-甲氧基呋喃-2，-)胺(48)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、丙酰氯和4-甲氧基呋喃-2-胺為原料，按照實(shí)施例l的類似方法，合成得到化合物48，收率70%。NMR(DMSO-d6.S)1.07(t，3H，CH3),2.4(q,2H,CH2),3.89(s,3H，4-OCH3),4.73(s,3H,4，-OCH3),6.89(s,1H,5，-H)，7.6(d,1H,5-H)，7.7(dd，lH,6-H)，7.89(s,1H,3'-H),8.48(br,lH,3-NHC0R),9.15(s,lH，2-H)，lO.O(s，lH,l-CONH)<實(shí)施例12>、(3-丙酰胺基-4-甲氧基苯)甲酰(4'-甲氧基吡咯-2，-)胺(49)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、丙酰氯和4-甲氧基吡咯-2-胺為原料，按照實(shí)施例l的類似方法，合成得到化合物49，收率68%。'H顧R(DMSO-d6,3)1.07(t,3H,CH3),2.4(q，2H，CH2),3.89(s,3H,4-OCH3),4.73(s,3H,4，-OCH3),6.76(s,1H,5'國(guó)H),7.6(d,1H,5-H)，7.7(dd,lH,6-H),7.72(s，1H,3'-H),8.48(br，lH，3-NHCOR)，9.15(s，lH，2-H),10.0(s,lH,l-CONH)<實(shí)施例13>、(3-丙酰胺基-4-甲氧基苯)甲酰-(嘧啶4'-)胺(61)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、丙酰氯和4-氨基嘧啶為原料，按照實(shí)施例1的類似方法，合成得到化合物61，收率47%。'HNMR(DMSO-d6,S)1.07(t,3H,CH3),2.4(q,2H,CH2),3.89(s,3H,4-OCH3):6.76(d，1H,5，-H),7.2(d,1H,5-H)，7.6(d，1H，5-H),7.7(dd,lH,6-H),8.2(s,1H,3'-H):8.48(br，lH,3-NHCOR)，9.15(s,lH，2-H)，10.0(s,lH,l-CONH)<實(shí)施例14>、(2-丙酰胺基-4-甲氧基苯)甲酰(3，，4'5，-三甲氧基苯)胺(63)的合成以4-甲氧基-2-氨基苯甲酸、丙酰氯和3'，4，，5'-三甲氧基苯胺為原料，按照實(shí)施例l的類似方法，合成得到化合物63，收率64%。&麗R(CDC13,S)1.3(t，3H,CH3)，2.5(q,2H,CH2)，3.82(s,3H,4，-OCH3),3.9(s,6H,3，,5，-OCH3)，3.95(s,3H，4-OCH3)，6.98(s，2H,2，,6，-H),7.0(d，1H,3-H)，7.8(dd，1H,6-H),7.9(br，2H,NH),8.0(d,1H,5-H)<實(shí)施例15>、(3-丙酰胺基-4-甲基苯)甲酰(4'-三氟甲氧基苯)胺(69)的合成以3-氨基-4-甲基苯甲酸、丙酰氯和4-三氟甲氧基苯胺為原料，按照實(shí)施例1的類似方法，合成得到化合物69，收率49%。LH畫(huà)R(DMSO-d6.5)1.07(t,3H,CH3),2.4(q，2H,CH2),2.5(s,3H，4-CH3)，3.89(s,3H,4-OCH3),6.89(d，2H,2，,6，-H),7.1(d,lH，5-H)，7.6(d，2H,3，,5，-H)，7.7(dd,lH，6-H)，8.48(br，lH，3-NHCOR),9.15(s,lH,2匿H),10.0(s,lH，1-CONH)<實(shí)施例16>、(3-乙酰胺基-5-三氟甲基苯)甲酸(3，，4，，5，-三甲氧基苯基)酯(73)的合成'3-氨基-5-三氟甲基苯甲酸、乙酰氯和3，4，5-三甲氧基苯酚為原料，按照實(shí)施例l的類似方法操作，合成得到化合物73，收率61%。iH麗R(CDC13,S)2.3(s,3H,CH3),3.8(s，9H,4，,5，,6，-OCH3),6.44(s，2H,2'，6'墨H),6.98(d，1H,5鄰，7.76(br，1H，NH),7.9(dd,1H，6-H),7.9(br,2H,NH)，9.2(d，1H,2-H)<實(shí)施例17>、(3-乙酰胺基-4-氟-5-甲氧基苯)甲酰(3，，4，，5，-三甲氧基苯)胺(75)的合成以3-氨基-4-氟-5-甲氧基苯甲酸、丙酰氯和3，4，5-三甲氧基苯胺為原料，按照實(shí)施例1的類似方法操作，合成得到化合物75，收率76%。!H麗R(CDC13,S)2.3(s,3H,CH3),3.8(s，9H,4，,5，,6，-OCH3),3.97(s,3H，5-OCH3),6.44(s,2H,2'，6，-H)，7.76(br,1H,NH),7.9(d,1H,6-H),7.9(br，lH,NH),9.2(d,1H,2-H)<實(shí)施例18>、G-丙酰胺基-4-甲氧基-6-氟苯)甲酰(3，，4，，5，-三甲氧基苯)胺(79)的合成以3-氨基-4-甲氧基-6-氟苯甲酸、丙酰氯和3，4，5-三甲氧基苯胺為原料，按照實(shí)施例1的類似方法操作，合成得到化合物79，收率66%。力醒R(CDC13,S)1.07(t,3H,CH3),2.3(q,2H,CH2),3.8(s，9H,4，,5，,6，-OCH3),3.97(s,3H,4-OCH3),6.44(s，2H,2'，6，-H),7.76(br,1H,NH),7.9(s,1H,5陽(yáng)H),7.9(br,1H,NH),9.2(s,1H,2-H)<實(shí)施例19>、(3-丙酰胺基-4-甲氧基苯)甲酰(3，-氟-4，-胺基苯)胺(80)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、丙酰氯和3-氟-l，4-苯二胺為原料，按照實(shí)施例l的類似方法操作，合成得到化合物80，收率60%。'H顧R(CDC13,S)1.07(t,3H,CH3)，2.4(q,2H,CH2),3.89(s,3H,4-OCH3)，6.89(d,2H,2，，6，-H),7.1(d,lH，5-H),7.6(d,1H，5'-H),7.7(dd,lH,6-H)，8.3(d,1H,6，-H),8.48(br,lH,3-NHC0R),9.15(s,lH，2-H),9.3(s,lH，2，陽(yáng)H),10.0(s,lH,l-CONH)<實(shí)施例20>、(3-丙酰胺基-4-甲氧基苯)磺酰(3，，4，5，-三甲氧基苯)胺(83)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯磺酸、丙酰氯和3，4，5-三甲氧基苯胺為原料，按照實(shí)施例l的類似方法操作，合成得到化合物83，收率63%。丄H雇R(DMSO-d6,3)1.03(t,3H,CH3),2.5(q，2H，CH2),3.8(s,9H,4，,5，,6，-OCH3)，3.95(s,3H,4-OCH3)，6.7(s,2H,2'，6，隱H),7.3(d,1H,5-H),7.7(br,1H,CONH)7.9(dd,1H,6-H),8.8(br，1H，S02NH),9.2(d,1H,2-H)。<實(shí)施例21>、(3-丙酰胺基-4-甲氧基苯)磺酸(3，，4'5，-三甲氧基苯基)酯(84)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯磺酸、丙酰氯和3，4,5-三甲氧基苯酚縮合，按照實(shí)施例l的類似方法操作，合成得到化合物84，收率53%。JH腿R(CDC13,S)1.03(t,3H,CH3),2.5(q,2H,CH2),3.8(s,9H,4，,5，,6，-OCH3),3.95(s,3H,4-OCH3),6.7(s,2H，2，,6，-H),7.3(d，IH,5-H),7.7(br,IH,CONH)7.9(dd,1H，6-H)，9.2(d，1H，2-H)<實(shí)施例22〉、(3，，4，，5，-三甲氧基苯)磺酰(3-丙酰胺基-4-甲氧基苯)胺(91)的合成以3-丙酰胺基-4-甲氧基苯胺和3，4，5-三甲氧基苯磺酸為原料，按照實(shí)施例l的類似方法操作，合成得到化合物91，收率40%。^畫(huà)R(DMSO-d6,S)1.03(t，3H,CH3),2.5(q,2H,CH2)，3.8(s,9H，3，,4，,5，-OCH3),3.95(s,3H,4-OCH3)，6.3(d,1H，6-H)，6.7(br,1H,CONH)6.9(dd,1H,5-H),7.7(s，2H，2'，6，-H),8.8(br,1H，S02NH),9.2(d，1H，2-H)<實(shí)施例23>、(3-甲磺酰胺基-4-甲氧基苯)甲酸(3，，4，，5，-三甲氧基苯基)酯(103)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、甲磺酰氯和3，4，5-三甲氧基苯酚縮合，按照實(shí)施例l的類似方法操作，合成得到化合物103，收率52%。NMR(DMSO-d6,S)2.5(s,3H,CH3),3.8(s,9H，3'，4，，5'-OCH3)，3.95(s,3H,4-OCH3),6.7(s,2H，2，,6，陽(yáng)H)，7.3(d,1H，5-H)，7.7(br,1H,CONH)7.9(dd,1H,6-H),9.2(d,1H，2-H)<實(shí)施例24〉、(3-三氟乙酰胺基-4-甲氧基苯)甲酸(3，，4，，5，-三甲氧基苯基)酯(353)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、三氟乙酰氯和3，4,5-三甲氧基苯酚為原料，按照實(shí)施例l的類似方法，合成得到化合物353，兩步收率46%。&顧R(CDCl3，S)3.8(s,9H，3，,4，,5，-OCH3)，6.44(s,2H，2'，6，-H),6.98(d,1H,5-H)，7.76(br,1H,NH)，7.9(dd,1H,6陽(yáng)H),9.2(d，1H,2-H)<實(shí)施例25〉、(3-丙酰胺基-4-甲氧基苯)甲酰(4'-硝基苯)胺(2612)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、丙酰氯和4-硝基苯胺為原料，按照實(shí)施例1的類似方法，合成得到化合物2612，收率53%。!H畫(huà)R(DMSO-d6,S)1.07(t，3H,CH3),2.4(q，2H,CH2),3.73(s,3H,4，-OCH3),3.89(s，3H,4-OCH3),6.89(d,2H,2，,6，-H),7.1(d,lH,5-H)，7.7(dd,lH,6-H):8.3(d，2H，3',5，-H),8.48(br,lH,3-NHCOR),9.15(s,lH,2-H),10.0(s，lH,l-CONH)<實(shí)施例26>、(3-丙酰胺基-4-甲氧基苯)甲酰(4'-氯苯)胺(2613)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、丙酰氯和4-氯苯胺為原料，按照實(shí)施例1的類似方法，合成得到化合物2613，收率56%。iH顧R(DMSO-d6,S)1.07(t,3H,CH3),2.4(q,2H，CH2),3.73(s,3H,4，-OCH3)，3.89(s,3H，4-OCH3),6.6(d，2H，2，,6，-H),7.1(d,lH，5-H)，7.7(dd,lH,6-H)，8.2(d,2H,3',5，-H),8.48(br,lH,3-NHCOR),9.15(s，lH,2-H),10.0(s,lH，l-CONH)<實(shí)施例27>、(3-睛基-4-甲氧基苯)甲酰(3，，4，，5，-三甲氧基苯)胺(68)的合成以3-睛基-4-甲氧基苯甲酸和3，4，5-三甲氧基苯胺為原料，按照實(shí)施例1的類似方法，合成得到化合物68，收率60%。顧R(CDC13，S)3.82(s,3H，4，-OCH3)，3.9(s,6H,3，,5，-OCH3),3.95(s，3H,4-OCH3)，6.68(s，2H，2,，6，-H),6.8(d,1H,5-H),7.0(dd,1H,6-H)，7.9(br,2H,NH),8.9(d，1H，2-H)按照實(shí)施例l的類似方法，合成得到的化合物還包括ll、12、14、15、17、18、19、21、22、23、24、26、27、29、30、31、33、35、46、47、50、51、52、53、57、58、59、60、62、67、70、71、72、74、76、77、78、81、82、86、88、89、92、93、94、95、96、97、99、100、101、102、104?！磳?shí)施例28〉、(3-氨基-4-甲氧基苯)甲酰(3，，4'，5，-三甲氧基苯)胺(262)的合成1)將1.0g(6mmol)3-氨基-4-甲氧基苯甲酸溶于10ml的4NNaOH水溶液中，向其中緩慢滴加2.5ml(llmmol)叔丁酸酐,加熱至5(TC反應(yīng)至完全，將堿水液用1N的鹽酸快速酸化至P1^2,用氯仿提取三次，合并氯仿液，無(wú)水硫酸鈉干燥后濃縮蒸干得到的類白色固體0.8g，收率50%。2)將1)的產(chǎn)物200mg(0.8mmo1)在冰水浴條件下與120mg(0.9mmo1)HOBT，0.06ml(0.6mmo1)DIC混合在干燥DMF中，N2保護(hù)，攪拌30min后加入160mg(0.9mmo1)3，4，5-三甲氧基苯胺，自然恢復(fù)室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。減壓蒸干反應(yīng)液，殘余物用乙酸乙酯溶解后過(guò)濾，濾液蒸干后用制備薄層硅膠板分離得到產(chǎn)物180mg，收率55.6%。3)將2)的產(chǎn)物160mg的溶于6ml甲醇，向其中滴加乙酰氯0.12ml，室溫反應(yīng)至完全脫去叔丁酰保護(hù)基，蒸干反應(yīng)液后，殘余物用二氯甲垸10ml混勻后過(guò)濾得到白色固體(262)60mg，收率49%。&麗R(DMSO-de.5)3.62(s,3H,4，-OCH3)，3.78(s,6H，3，,5，-OCH3)，3.95(s,3H,4-OCH3)，4.5(br,2H,-NH2),7.1(d,1H,5-H),7.2(s,2H,2'，6，-H),7.6(s,1H，6-H),7.7(s,1H,2-H),IO.O(S,IH,l-CO卿<實(shí)施例29>、(3-氨基-4-甲氧基苯)甲酰苯胺(2621)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸和苯胺為原料，按照實(shí)施例28的類似方法，合成得到化合物2621，收率37%。麗R(DMSO-d6,5)3.55(s,3H,4-OCH3),4.5(br,2H,-NH2),7.0(m，1H，4,-H)，7.1(d，IH,5-H),7.2(d，2H，2，，6,-H),7.4(dd,2H,3'，5，-H)，7.6(d，1H，6-H)，7.7(s，1H,2-H),lO.O(s，lH，l-CONH)<實(shí)施例30〉、(3-甲胺基-4-甲氧基苯)甲酰(3'-氟-4，-磺胺基苯)胺(98)的合成以3-甲胺基-4-甲氧基苯甲酸和3-氟-4-磺胺基苯胺為原料，按照實(shí)施例28的類似方法操作，合成得到化合物98，收率52%。力腹R(DMSO-d6,5)2.5(br,2H,-NH2),2.8(d,3H,3-CH3),3,75(s,3H，4-OCH3)，4.5(br，1H，3墨NH)，6.5(m,1H,6'-H)，6.67(s,lH，2，鄰，6単1H，5-H),7.2(d,1H,5'陽(yáng)H),7.4(dd,2H,3',5，-H)，7.6(d,1H，6-H),7.7(s,1H,2-H)，lO.O(s,lH,l-CO,<實(shí)施例31>、(3-甲胺基-4-羥基苯)甲酰(2，，6'-二甲氧基嘧啶-4'-)胺(3)的合成以3-甲胺基-4-羥基苯甲酸和2，6-二甲氧基4-氨基嘧啶為原料，按照實(shí)施例28的類似方法，合成得到化合物3，收率67%。iH麗R(DMSO-d6，S)2.8(d,3H,3-CH3),3.73(s,3H,6，-OCH3),3.77(s，3H,2，-OCH3),4.4(br,1H,3-NH),5.1(br，1H,4-0H),6.8(d,lH，5-H),7.2(d，1H,5'-H),7.6(d,1H,6-H),7.7(s,1H,2-H),9.2(s,lH,l-CONH)<實(shí)施例32>、(3-氨基-4-甲氧基苯)甲酸(3，，4，，5，-三甲氧基苯巰基)酯(5)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸和3，4，5-三甲氧基苯硫酚為原料，按照實(shí)施例28的類似方法，合成得到化合物5，收率47%。&顧R(DMSO-d6,S)3.62(s，3H，4，-OCH3)，3,78(s,6H，3，,5，-OCH3)，3.95(s,3H,4-OCH3)，4.2(br,2H,隱NH2)，7.1(d,1H,5-H),7.3(s，2H,2，,6，-H)，7.6(s,1H，6-H),7.7(s,1H,2-H)<實(shí)施例33>、(3-甲胺基-4-甲氧基苯)甲酰(3，5-二甲氧基苯)胺(40)的合成以3-甲胺基-4-甲氧基苯甲酸和3，5-二甲氧基苯胺為原料，按照實(shí)施例28的類似方法，合成得到化合物40，收率50%。&顧R(DMSO-de,S)2.4(d,3H,3-CH3),3.75(s,3H,4-OCH3),3.8(s,6H，3，，5，陽(yáng)OCH3),5.0(br,1H,3-NH),6.5(s,2H,2，,6，-H),6.8(d,lH,5-H),7.6(d,1H，6-H),7.7(s，1H,2-H),9.4(s，lH，l-CONH)<:實(shí)施例34>、(3-氨基-4-甲氧基苯)磺酰(3，4，5-二甲氧基苯)胺(85)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯磺酸和3，4，5-二甲氧基苯胺為原料，按照實(shí)施例28的類似方法，合成得到化合物85，收率52%。iHNMR(DMSO-d6)S3.62(s,9H，3，,4，,5，-OCH3),3.78(s,3H,4-OCH3),4.2(br,2H，-NH2),7.1(d,1H,5-H),7.3(s,2H,2,,6，-H),7.6(s，1H,6陽(yáng)H),7.7(s,1H,2-H),8.5(br,lH，-S02NH)<實(shí)施例35〉、(3-羥基-4-甲氧基苯)甲酰(3，，4，，5'-三甲氧基苯)胺(87)的合成以3-羥基-4-甲氧基苯甲酸和3，4，5-二甲氧基苯胺為原料，按照實(shí)施例28的類似方法，合成得到化合物87，收率34%。^顧R(DMS0-d6,S)3.62(s，9H，3，，4，，5，-OCH3)，3.78(s,3H，4-OCH3),5.2(br，1H,-OH)，7.1(d,1H,5陽(yáng)H),7.3(s，2H,2',6，-H),7.6(s,1H,6-H),7.7(s,1H,2-H),8.9(br,lH，-CONH)<實(shí)施例36>、(3-氨基-4-甲氧基苯)甲酸(3，，4，，5，-三甲氧基苯基)酯(352)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸和3，4，5-三甲氧基苯酚為原料，按照實(shí)施例28的類似方法操作，合成得到化合物352，收率30%。畫(huà)R(DMSO-d6,S)3.65(s，3H,4，-OCH3),3.75(s,6H,3,,5，-OCH3),3.85(s,3H,4-OCH3),5.05(br,2H,-NH2),6.56(s,2H，2，,6，-H),6.94(d,1H，5-H),7.35(d,1H,6-H),7.38(s,lH,2鄰按照實(shí)施例28的類似方法，合成得到的化合物還包括4、6、34、36、37、41、42、43、45、54、55、56、90。<實(shí)施例37>、(3-丙酰胺基-4-甲氧苯基)(3，，4，，5'-三甲氧基節(jié)基)酮(10)的合成在25ml的燒瓶中將0.6g3-氨基-4-甲氧基苯甲酸(l.Og，6mmo1)溶于干燥的四氫呋喃后，加入三乙胺(1.2ml，12mmo1)得到黃色透明溶液，氮?dú)獗Ｗo(hù)，攪拌，冰水浴條件下向其中滴加丙酰氯(0.78ml，9mmo1)，滴加完畢后自然恢復(fù)室溫反應(yīng)。過(guò)濾反應(yīng)液，濾液蒸干后上硅膠柱分離得到3-丙酰胺基-4-甲氧基苯甲酸1.3g。3-丙酰胺基-4-甲氧基苯甲酸1.3g與10ml二氯亞砜混合，并于室溫下攪拌l小時(shí)以上。蒸除過(guò)量的二氯亞砜，用甲苯帶蒸數(shù)次以保證二氯亞砜除干凈，殘余物溶于無(wú)水乙醚中，冰水冷卻下加入等當(dāng)量的3，4，5-三甲氧基節(jié)基鎘，維持溫度在0-5。C反應(yīng)1小時(shí)以上。按照格氏反應(yīng)的常規(guī)方法處理反應(yīng)，得目標(biāo)化合物物(10)1.2g(收率52%)。&雇R(CDC13,S)1.03(t，3H,CH3)，2.5(q,2H，CH2)，3.4(s，2H,-COCH2),3.8(s,9H，4，,5，,6，-OCH3),3.95(s，3H，4-OCH3),6.7(s,2H,2，,6，-H)，7.3(d，1H,5-H)，7.4(s,lH,3-NHCO),7.9(dd,1H,6-H)，8.4(s,lH,l-CONH),9.2(s，1H,2-H)<實(shí)施例38>、[3-(2-氟丙酰胺基)-4-甲氧苯萄(3，，4，，5，-三甲氧基芐基)酮(25)的合成以3-氨基-4-甲氧基苯甲酸、2-氟丙酰氯和3，4，5-三甲氧基芐基鎘為原料，按照實(shí)施例37類似方法，合成得到化合物25(收率57%)雇R(CDC13,3)1.3(d，3H,CH3),3.2(s,2H，-COCH2),3.8(s，9H,4，,5，,6，-OCH3)，3.95(s，3H,4-OCH3),4.5(q，1H,CHF),6.44(s,2H,2',6，-H),6.98(d,1H,5-H),7.16(br，1H,3-NHC0),7.4(dd,1H,6-H),7.9(br，1H,l-CONH),9.2(d,1H,2-H)<實(shí)施例39>、1-(3，-丙酰胺基-4-甲氧苯基)-2-(3"，4"，5"-三甲氧基苯基)乙醇(32)的合成將實(shí)施例38所得產(chǎn)物25溶于甲醇中，加入適量NaBH4還原，原料消失后終止反應(yīng)，分離得到目標(biāo)化合物32(收率86)。雇R(DMSO-d6,S)1.03(t,3H,CH3)，2.5(q，2H,CH2),3.8(s,9H,4，,5，,6，-OCH3),3.95(s，3H,4-OCH3),4.4(d,2H,2-CH2),5.0(t,lH,l-CH),6.7(s,2H,2",6"-H),7.3(d,1H，5，-H),7.4(s,lH，3，-NHCO),7.9(dd,1H,6，-H),9.2(s,1H,2，-H)按照實(shí)施例37的類似方法，合成得到的化合物包括13、16、20、28?！磳?shí)施例40>、hA3G上調(diào)活性篩選實(shí)驗(yàn)取細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)滿培養(yǎng)瓶后，棄舊培養(yǎng)基，用消化液消化。待細(xì)胞變圓，棄消化液，立即加入培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打瓶底，使細(xì)胞完全脫離瓶底且使之分散為單細(xì)胞懸液。血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，取細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿，用于進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染。將含有轉(zhuǎn)染質(zhì)粒和轉(zhuǎn)染試劑的培養(yǎng)基輕輕混勻，室溫孵育后，加到細(xì)胞培養(yǎng)上清中，培養(yǎng)一段時(shí)間。然后吸去舊的培養(yǎng)基，用消化液消化，棄消化液，立即加入培養(yǎng)基，輕輕吹打，使細(xì)胞分散為單細(xì)胞懸液。血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，接種。化合物樣品取純品化合物溶到DMSO中，加水倍比稀釋，取稀釋液作用于細(xì)胞體系。在細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入不同濃度的檢測(cè)樣品。繼續(xù)培養(yǎng)后，吸去舊的培養(yǎng)基，用磷酸緩沖液(PBS)吹打細(xì)胞，直至細(xì)胞完全脫離。將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到黑板中，檢測(cè)熒光強(qiáng)度，激發(fā)波長(zhǎng)為485nm，檢測(cè)波長(zhǎng)為520nm。測(cè)量?jī)纱稳∑骄怠y(cè)定的熒光強(qiáng)度減去空白對(duì)照組的數(shù)值作為各組YFP熒光強(qiáng)度數(shù)值。相對(duì)熒光強(qiáng)度=實(shí)驗(yàn)組熒光強(qiáng)度/陽(yáng)性組熒光強(qiáng)度X100%降解抑制率=(樣品實(shí)驗(yàn)組一陰性對(duì)照組)/(陽(yáng)性組一陰性對(duì)照組)X100%篩選結(jié)果列入表l。<實(shí)施例41>、抑制HIV-1活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)在96孔細(xì)胞培養(yǎng)中加入8個(gè)不同稀釋濃度的表2化合物樣品的DMSO溶液和陽(yáng)性對(duì)照藥AZT(齊多呋啶，0.15ng/ml)DMSO溶液，每個(gè)稀釋度重復(fù)2孔，設(shè)細(xì)胞對(duì)照；再將2xl05細(xì)胞/ml100P1接種于含藥96孔細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)。置37°C、5%0)2和飽和濕度培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，每天觀察細(xì)胞病變。按HIV-1P24抗原試劑盒提供的操作步驟，測(cè)定加藥后第4天(96小時(shí))細(xì)胞培養(yǎng)上清HIV-lP24抗原含量，計(jì)算藥物對(duì)病毒的抑制活性，結(jié)果列入表2。權(quán)利要求1.一組胺基苯酰衍生物，其結(jié)構(gòu)如式(I)所示其中R1代表氫，連接于苯環(huán)的一個(gè)或多個(gè)硝基、鹵素、氰基、酯基、酰胺基、羥基、巰基、取代或未取代的低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基或芳基氧基、低級(jí)烷硫基或芳基硫基、氨基或取代的氨基等；R2，R3可以相同也可以不同，代表氫、低級(jí)烷基、羰基或磺?；籜代表O、S、NH、NR5、CH2或CHR6；Y代表C、S或SO；R4、R5代表氫、低級(jí)烴基、羥基、芳烴或取代的芳烴。2.3、權(quán)利要求1所述化合物在藥學(xué)上可接受的鹽。4、權(quán)利要求1所述化合物的藥物組合物，以其含有治療有效量的上述化合物為活性成分，與一種或多種藥學(xué)上可接受的載體所組成。5、權(quán)利要求l所述化合物在制備抗病毒藥物中的應(yīng)用。6、權(quán)利要求3所述藥學(xué)上可接受的鹽在制備抗病毒藥物中的應(yīng)用。7、權(quán)利要求4所述藥物組合物在制備抗病毒藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明涉及一組胺基苯酰衍生物及其制備方法和應(yīng)用；通過(guò)對(duì)hA3G/Vif為靶點(diǎn)的抗病毒藥物篩選研究，證明3-胺基苯酰衍生物不僅具有抑制hA3G/Vif結(jié)合活性，還具有抑制病毒復(fù)制的作用，這對(duì)解決HIV耐藥性問(wèn)題可望取得突破性進(jìn)展，從而為臨床提供更有效的新型抗病毒藥物。文檔編號(hào)C07C303/26GK101367749SQ20081016882公開(kāi)日2009年2月18日申請(qǐng)日期2008年9月28日優(yōu)先權(quán)日2008年9月28日發(fā)明者余利巖,山岑,建徐,李卓榮,李艷萍,蔣建東申請(qǐng)人:中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所