專利名稱：香豆素衍生物在抗真菌治療中的應(yīng)用的制作方法
專利說(shuō)明香豆素衍生物在抗真菌治療中的應(yīng)用 發(fā)明領(lǐng)域 本發(fā)明涉及化合物以及其在抗真菌治療中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：
皮膚真菌是皮膚病原體真菌。皮膚真菌包括發(fā)癬菌屬、表皮癬菌屬、小孢子菌屬的真菌。普通的皮膚真菌感染是甲癬，所述甲癬是指指甲感染，其可以造成指甲的劈裂、薄化和厚化。甲癬最通常是由紅色發(fā)癬菌造成的，但是其它真菌例如絮狀表皮癬菌、犬小孢子菌和趾間發(fā)癬菌也可以是該病的成因。
香豆素是一種化合物，該化合物包括苯并吡喃酮環(huán)，通常為苯并吡喃-2-酮或苯并吡喃-4-酮環(huán)。該化合物可天然得到也可通過(guò)合成得到，例如通過(guò)Perkin或Pechman合成。香豆素自身的結(jié)構(gòu)如下所示
香豆素 所選擇的香豆素被認(rèn)為具有抗真菌活性。例如，Sardari等人在(Bioorg.Med.Chem.7，1999，1933-1940)中描述的有限數(shù)量的香豆素具有抗白色念珠菌、新生隱球菌、釀酒酵母菌和黑曲霉菌的活性。在香豆素中，測(cè)試七葉亭和七葉苷(糖苷形式的七葉亭)，其被發(fā)現(xiàn)對(duì)測(cè)試真菌具有最小的抗真菌活性。
除了丙酮芐羥香豆素，香豆素在臨床設(shè)置中的應(yīng)用是最小的。然而，一個(gè)已經(jīng)應(yīng)用于臨床的香豆素的實(shí)例是七葉苷，其被用作用于治療痔和直腸病變藥物(

)的組分。
雖然它們?cè)谝欢ǚ秶鷥?nèi)具有已知的抗真菌潛力，但是香豆素在活性濃度的范圍內(nèi)是難溶的。大體上，綜合考慮潛在的安全和毒性的問(wèn)題，可以排出這類化合物任何實(shí)際直接的治療應(yīng)用。
發(fā)明概述 本發(fā)明基于至少部分地基于以下發(fā)現(xiàn)糖苷香豆素化合物例如七葉苷有效地治療甲癬和其它皮膚真菌感染的發(fā)現(xiàn)。不希望不受到理論的束縛，相據(jù)信可以存在在皮膚上的皮膚真菌和可能存在于皮膚上的其它微生物(共生的或病原的真菌或細(xì)菌)可以能夠代謝結(jié)合到香豆素化合物上連接的糖苷基團(tuán)，將所述化合物轉(zhuǎn)化成具有抗真菌活性的活性核的香豆素，其具有抗真菌活性。例如，已經(jīng)證實(shí)皮膚真菌產(chǎn)生β-葡糖苷酶，該所述β-葡糖苷酶可以移動(dòng)七葉苷的糖基團(tuán)并將其轉(zhuǎn)化成具有抗真菌性的七葉亭，其具有抗真菌性(該申請(qǐng)應(yīng)用；K Otsuka等人(1979)，Chem Pharm Bull，272042-2047)。因此，糖基團(tuán)在某種意義上可以被認(rèn)為具有前藥的功能。對(duì)糖苷香豆素作為藥物應(yīng)用比非糖苷形式的更值得期望可以勝于非糖苷形式，因?yàn)榍罢吒子谌芙馇乙虼嗽趯?shí)際踐中可以被引入到適當(dāng)?shù)妮d體中用于治療實(shí)施，并且其也在操作和應(yīng)用中被認(rèn)為更加安全。
本發(fā)明還基于以下的驚人發(fā)現(xiàn)，即鹵代香豆素化合物如7-羥基-4-(三氟甲基)香豆素雖然僅在低濃度下可溶，但是其具有顯著的抗真菌活性。
因此，本發(fā)明的第一方面是香豆素化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥，其用于治療、預(yù)防患者中的皮膚真菌感染或延緩其發(fā)展。該香豆素化合物可以是糖苷香豆素化合物。選擇性地，該香豆素化合物可以是鹵代香豆素化合物。
本發(fā)明的第二方面是用于治療、預(yù)防患者中的皮膚真菌感染或延緩其發(fā)展的藥物制劑，該藥物制劑含有香豆素化合物如糖苷香豆素化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥。
本發(fā)明的又一方面涉及香豆素化合物如糖苷香豆素化合物、或其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥的應(yīng)用，所述應(yīng)用是在制備用于治療、預(yù)防真菌感染如皮膚真菌感染或延緩其發(fā)展的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明還提供一種用于治療、預(yù)防皮膚真菌感染或延緩其發(fā)展的方法，該方法包括向患者給予治療有效量的香豆素化合物如糖苷香豆素化合物、或其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥。
本發(fā)明的化合物可以以不同的形式例如像游離酸、游離堿、酯和其它的前藥、鹽和互變異構(gòu)體的形式存在，并且本發(fā)明的公開(kāi)內(nèi)容包括這些化合物的所有變體形式。
本發(fā)明的保護(hù)范圍包括包含有或聲稱包含有本發(fā)明化合物的偽劣產(chǎn)品或假冒產(chǎn)品，不論其是否實(shí)際上的確包含這樣的化合物，也不論任意的這樣的化合物是否以治療有效量被包含。
本發(fā)明的保護(hù)范圍包括以下的包裝，該包裝包括指示所述包裝包含本發(fā)明的物種或藥物制劑以及指示所述包裝包含含有或聲稱含有這樣的制劑或物種的產(chǎn)品的描述或說(shuō)明。這樣的包裝可以是但并不必需是偽劣或假冒的。
與本發(fā)明的實(shí)施例、實(shí)施方案或特定方面共同描述的特征、整體、特性、化合物、化學(xué)部分或基團(tuán)被理解為適用于本文描述的實(shí)施例、實(shí)施方案或任何其它方面，除非與其不一致。
各種實(shí)施方案的描述 糖苷/糖苷化合物 術(shù)語(yǔ)“糖苷”或“糖苷化合物”在本文中可以互換使用，并且是指包括通過(guò)水解產(chǎn)生糖和糖苷配基的任意種類的化合物。
香豆素 本文所使用的術(shù)語(yǔ)“香豆素”是指包括含有苯并吡喃酮(chromenone)環(huán)的化合物。在一類香豆素化合物中，所述的苯并吡喃酮環(huán)為苯并吡喃-2-酮環(huán)，而另一類苯并吡喃酮環(huán)為苯并吡喃-4-酮環(huán)。許多已知的香豆素均屬于前類。后類的香豆素的例子包括五羥黃酮及其衍生物。
烴基 本文所使用的術(shù)語(yǔ)“烴基”是指包括僅由氫原子和碳原子組成的部分；這樣的部分可以包括脂肪部分和/或芳香部分。該部分可以包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個(gè)碳原子。烴基的例子包括C1-6的烷基(例如C1、C2、C3或C4烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、正-丁基、仲-丁基或叔-丁基)；被芳基(例如苯甲基)或被環(huán)烷基(例如環(huán)丙基甲基)所取代的C1-6烷基；環(huán)烷基(例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基)；芳基(例如苯基、萘基或茐基)等等。
烷基 本文所使用的術(shù)語(yǔ)“烷基”和“C1-6烷基”是指包括具有1、2、3、4、5或6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基部分。該術(shù)語(yǔ)是指包括例如甲基、乙基、丙基(正丙基或異丙基)、丁基(正-丁基、仲-丁基或叔-丁基)、戊基、己基等的基團(tuán)。尤其是，所述烷基部分可以具有1、2、3或4個(gè)碳原子。
烯基 本文所使用的術(shù)語(yǔ)“烯基”和“C2-6的烯基”是指包括直鏈或支鏈的烷基部分，該烷基部分具有2、3、4、5或6個(gè)碳原子并還具有至少一個(gè)可使用的反式異構(gòu)體或順式異構(gòu)體的雙鍵。該術(shù)語(yǔ)是指包括如乙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、1-己烯基、2-己烯基和3-己烯基等的基團(tuán)。
炔基 本文所使用的術(shù)語(yǔ)“炔基”和“C2-6的炔基”是指包括直鏈或支鏈的烷基部分，該部分具有2、3、4、5或6個(gè)碳原子并且還具有至少一個(gè)三鍵。該術(shù)語(yǔ)是指包括如乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、1-己炔基、2-己炔基和3-己炔基等的基團(tuán)。
烷氧基 本文所使用的術(shù)語(yǔ)“烷氧基”和“C1-6的烷氧基”是指包括-O-烷基，其中烷基為直鏈或支鏈并且包括1、2、3、4、5或6個(gè)碳原子。在一類實(shí)施方案中，烷氧基具有1、2、3或4個(gè)碳原子。該術(shù)語(yǔ)是指包括如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、叔-丁氧基、戊氧基、己氧基等的基團(tuán)。
環(huán)烷基 本文所使用的術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”是指包括具有3、4、5、6、7或8個(gè)碳原子的脂環(huán)部分。該基團(tuán)可以是橋環(huán)體系或多環(huán)體系。環(huán)烷基基團(tuán)更經(jīng)常地為單環(huán)。該術(shù)語(yǔ)是指包括例如環(huán)丙烷基、環(huán)丁烷基、環(huán)戊烷基、環(huán)己烷基、降冰片烯基、雙環(huán)[2，2，2]辛基等的基團(tuán)。
芳基 本文所使用的術(shù)語(yǔ)“芳基”是指包括包含6、7、8、9、10、11、12、12、14、15或16個(gè)碳原子的芳香環(huán)體系。芳基通常為苯基但可以是具有兩個(gè)或更多環(huán)的多環(huán)體系，其中至少一個(gè)是芳香環(huán)。該術(shù)語(yǔ)是指包括例如苯基、萘基、茐基、薁基、茚基、蒽基等的基團(tuán)。
環(huán)狀基團(tuán) “環(huán)狀基團(tuán)”是指環(huán)或環(huán)體系，其可以是不飽和的或部分不飽和的但通常是飽和環(huán)，一般包含5-13個(gè)成環(huán)的原子，例如五元環(huán)或六元環(huán)。其包括碳環(huán)和雜環(huán)部分。
碳環(huán) 本文所使用的術(shù)語(yǔ)“碳環(huán)”是指包括具有3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16個(gè)碳環(huán)原子的飽和(例如環(huán)烷基)或不飽和(例如芳基)的環(huán)部分。尤其是，碳環(huán)包括3-10個(gè)原子的環(huán)或環(huán)體系。并且尤其是五元環(huán)或六元環(huán)，其可以是飽和的或不飽和的。例如，碳環(huán)部分選自環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、降冰片烯基、雙環(huán)[2，2，2]辛基、苯基、萘基、茐基、薁基、茚基、蒽基等等。
雜環(huán) 本文所使用的術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”是指包括具有3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16個(gè)環(huán)原子的飽和的(例如雜環(huán)烷基)或不飽和的(例如雜芳基)的雜環(huán)部分，至少其中一個(gè)環(huán)原子選自氮、氧、磷、硅和硫。尤其是包括三至十元環(huán)或環(huán)體系的雜環(huán)，并且更尤其是包括五元環(huán)或六元環(huán)的雜環(huán)，所述雜環(huán)可以是飽和的或不飽和的。
例如，雜環(huán)部分選自環(huán)氧乙基、氮雜環(huán)丙烯基(azirnyl)、1，2-氧硫環(huán)已烷基、咪唑基、噻吩基、呋喃基、四氫呋喃基、吡喃基、噻喃基、噻蒽基、異苯并呋喃基、苯并呋喃基、苯并吡喃基、2H-吡咯基、吡咯基、吡咯啉基、吡咯烷基、吡咯烷士定基(pyrrolizidinyl)、咪唑基、咪唑烷基、苯并咪唑基、吡唑基、吡嗪基、吡唑烷基、噻唑基、異噻唑基、二噻唑基、噁嗪基、異噁嗪基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶烷基、哌啶基、哌嗪基、噠嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基，特別是硫代嗎啉代基(thiomorpholino)、中氮茚基、異吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、苯并咪唑基、香豆基(cumaryl)、吲唑基、三唑基、四唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、異喹啉基、喹啉基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、十氫喹啉基、八氫異喹啉基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、苯并噻吩基、二苯并噻吩基、2，3-二氮雜萘基、1，5-二氮雜萘基、喹喔啉基、喹唑啉基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、咔啶基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、

啶基、菲咯啉基、呋咱基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、苯并吡喃基、異苯并二氫吡喃基、苯并二氫吡喃基等。
雜環(huán)烷基 本文所使用的術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)烷基”是指包括飽和的雜環(huán)部分，該飽和的雜環(huán)部分具有3、4、5、6或7個(gè)環(huán)碳原子以及1、2、3、4或5個(gè)環(huán)雜原子，該環(huán)雜原子選自氮、氧、磷和硫。該基團(tuán)可以是多環(huán)體系但更經(jīng)常是單環(huán)的。該術(shù)語(yǔ)是指包括例如氮雜環(huán)丁基、吡咯烷基、四氫呋喃基、哌啶基、環(huán)氧乙基、吡唑烷基、咪唑基、中氮茚烷基、哌嗪基、噻唑烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、喹嗪烷基等基團(tuán)。
雜芳基 本文所使用的術(shù)語(yǔ)“雜芳基”是指包括芳香的雜環(huán)體系，其具有5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16個(gè)環(huán)原子，所述環(huán)原子中的至少一個(gè)選自氮、氧和硫。該基團(tuán)可以是具有兩個(gè)或更多個(gè)環(huán)的多環(huán)體系，至少其中之一為芳香環(huán)，但更經(jīng)常為單環(huán)。該術(shù)語(yǔ)是指包括例如嘧啶基、呋喃基、苯并硫苯基(benzo[b]thiophenyl)、硫苯基、吡咯基、咪唑基、吡咯烷基、吡啶烷基、苯并呋喃基(benzo[b]furanyl)、吡唑基、嘌呤基、吲哚基、苯并咪唑基、喹啉基、吩噻嗪基、噻嗪基、2，3-二氮雜萘基、2H-苯并吡喃基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異吲哚基、吲唑基、嘌呤基、異喹啉基、喹唑啉基、蝶啶烷基等基團(tuán)。
鹵素 本文所使用的術(shù)語(yǔ)“鹵素”是指包括F、Cl、Br或I。尤其是，鹵素可以是F或Cl，其中F更經(jīng)常地被使用。
含鹵素的部分 本文所使用的表達(dá)“含鹵素的部分”是指包括包含1-30個(gè)多價(jià)態(tài)原子的部分，所述的多價(jià)態(tài)原子選自碳、氮、氧和硫，所述部分包括至少一個(gè)鹵素。該部分可以是烴基如C1-6的烷基或C1-6的烷氧基，或可以是碳環(huán)如芳基。
取代的 本文所使用的術(shù)語(yǔ)“取代的”是指一個(gè)所述部分中的一個(gè)或多個(gè)部分氫原子，在所述部分中特別是最高達(dá)5個(gè)氫原子，更特別是1、2或3個(gè)氫原子彼此各自獨(dú)立地被相應(yīng)數(shù)目的所述取代基來(lái)替代。本文使用的術(shù)語(yǔ)“任選地取代的”意思是指取代或未取代。當(dāng)然應(yīng)當(dāng)理解，所述取代基僅在其可能化學(xué)取代的位置，所屬領(lǐng)域技術(shù)人員能夠(實(shí)驗(yàn)的或理論上的)不費(fèi)力地確定特定的取代是否可能。
獨(dú)立地 當(dāng)選自所列原子或基團(tuán)的兩個(gè)或多個(gè)部分被描述成“各自獨(dú)立地”時(shí)，這是指所述的部分可以相同或不同。因此，各個(gè)部分的特性獨(dú)立于一個(gè)或多個(gè)其它部分的特性。
以下描述本發(fā)明的實(shí)施方案。本發(fā)明各個(gè)方面的優(yōu)選特征是就已作修正的其它各個(gè)方面而言的。此外，應(yīng)當(dāng)理解，在各個(gè)實(shí)施方案中的具體特征可以與其它的具體特征相組合從而提供進(jìn)一步的實(shí)施方案。
化合物 本發(fā)明包括香豆素化合物的應(yīng)用，特別是糖苷香豆素化合物包括七葉亭、繖形酮、瑞香素、秦皮苷或五羥黃酮的衍生物。優(yōu)選地，所述香豆素化合物為糖苷香豆素化合物。糖苷基團(tuán)可以作為酶的基底，該酶由存在于附近或作為共同感染的皮膚真菌或任何其它的微生物產(chǎn)生的。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式(I)或式(II)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥
其中 R1、R2、R3、R4、R5和R6各自獨(dú)立地為氫、鹵素或包含1-30個(gè)多價(jià)態(tài)原子的部分，所述的多價(jià)態(tài)原子選自碳、氮、氧和硫； 或R3和R4、R4和R5、R5和R6或是R4、R5和R6可以與它們所連接的碳原子一起結(jié)合形成環(huán)狀基團(tuán)，該環(huán)狀基團(tuán)任選地被鹵素或包含1-30個(gè)多價(jià)態(tài)原子的部分所取代，所述多價(jià)態(tài)原子選自碳、氮、氧和硫； 并且，R1、R2、R3、R4、R5和R6中的至少一個(gè)或所述環(huán)狀基團(tuán)包含糖苷基團(tuán)。
所述化合物可以包含一個(gè)或多個(gè)(如一或兩個(gè))糖苷基團(tuán)，但是通常包括單獨(dú)的糖苷基團(tuán)，一般在香豆素環(huán)上的5-位、6-位、7-位或8-位。因此，在式(I)的一個(gè)實(shí)施方案中，R3、R4、R5和R6中的至少一個(gè)包括含糖苷基團(tuán)。在一個(gè)特定的實(shí)施方案中，至少R5、R6和R7中的至少一個(gè)包括含糖苷基團(tuán)。特別提及的是化合物，其中R5或R6包括含糖苷基團(tuán)的化合物。在式(II)的情形中，糖苷基團(tuán)可以尤其存在于3-位，其中R2包含糖苷基團(tuán)。其中除了糖苷基團(tuán)，R1、R2、R3、R4、R5和R6通常各自獨(dú)立地選自R7、-OR7、-C(O)R7以及-C(O)OR7和R6，其中 R7獨(dú)立地選自氫，任選地被1、2、3、4或5個(gè)R8取代的烴基以及任選地被1、2、3、4或5個(gè)R8取代的-(CH2)k-雜環(huán)； R8獨(dú)立地選自鹵素、三氟甲基、氰基、硝基、氧代、＝NR9、-OR9、-C(O)R10、-C(O)N(R9)R10、-C(O)OR9、-OC(O)R9、-S(O)iR9、-S(O)iN(R9)R10、-N(R9)R10、-N(R9)N(R9)R10、-N(R9)C(O)R10和-N(R9)S(O)iR10；并且 R9和R10各自獨(dú)立地為氫或選自烴基和-(CH2)k-雜環(huán)，所述烴基和-(CH2)k-雜環(huán)各自任選地由1、2、3、4或5個(gè)取代基所取代，該取代基獨(dú)立地選自鹵素、氰基、氨基、羥基、C1-6烷基和C1-6烷氧基；其中k為1-6的整數(shù)(例如1、2或3)。
尤其是，R1、R2、R3、R4、R5和R6中的一個(gè)或多個(gè)可以各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、三氟甲基、R7、-OR7、-C(O)R7和-C(O)OR7，其中R7為氫或選自烴基和-(CH2)k-雜環(huán)，所述烴基和-(CH2)k-雜環(huán)各自任選地被1、2、3、4或5個(gè)取代基取代，該取代基獨(dú)立地選自鹵素、氰基、氨基、羥基、C1-6烷基和C1-6烷氧基。在這方面，R7尤其為氫或C1-6的烷基，所述烷基任選地被1、2或3個(gè)取代基取代，所述取代基獨(dú)立地選自鹵素、氰基、氨基、羥基和C1-6烷氧基。因此，R1、R2、R3、R4、R5和R6中的一個(gè)或多個(gè)可以各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、三氟甲基、羥基、C1-6烷基和C1-6烷氧基，其中所述的C1-6烷基和C1-6烷氧基任選地被1、2、3、4或5個(gè)取代基取代，所述取代基獨(dú)立地選自例如鹵素(例如氟或氯)、氰基、氨基、羥基和C1-6烷氧基。在特定的化合物中，R1為氫、羥基或乙?；?；R2為氫、羥基、甲基、甲氧基、氟、氯或三氟甲基；而R3、R4、R5和R6中的一個(gè)包括糖苷基團(tuán)、并且其它基團(tuán)各個(gè)自選自氫、羥基、甲基、甲氧基、氟、氯或三氟甲基。特別提到的是其中R5和R6中的一個(gè)包含糖苷基團(tuán)而另一個(gè)為羥基的化合物。
如上所述，R3和R4、R4和R5或R5和R6中的一個(gè)或多個(gè)與它們所連接的碳原子結(jié)合在一起從而形成環(huán)狀基團(tuán)，該環(huán)狀基團(tuán)任選地被鹵素或包含1-30個(gè)多價(jià)態(tài)原子的部分所取代，所述多價(jià)態(tài)原子選自碳、氮、氧和硫。該環(huán)狀基團(tuán)可以是碳環(huán)(例如苯基)或雜環(huán)(例如呋喃基)基團(tuán)，其中任何一個(gè)均可以任選地被例如R7、-OR7、-C(O)R7和-C(O)OR7中的一個(gè)或多個(gè)所取代。選擇性地或附加性地，如此形成的環(huán)狀基團(tuán)可以包含糖苷基團(tuán)例如糖基。
在式(II)化合物的情形中，R1通常為任選地被1、2、3、4或5個(gè)R8取代的苯基。特別是在該化合物為例如五羥黃酮的情形下，其中R1通常是1，2-二羥基-4-苯基。R2通常包含糖苷基團(tuán)，而R3和R5通常是-OR7尤其是羥基。在式(II)的某些化合物中，R4和R6各自為氫。
所述糖苷基團(tuán)或各個(gè)糖苷基團(tuán)通常為烴基，特別是單糖、二糖或多糖基團(tuán)，且可以各種異構(gòu)形式如α-D、α-L、β-D或β-L的形式存在。
采用舉例說(shuō)明的方式，糖苷基團(tuán)可以是下式基團(tuán)之一
示例性的糖苷基團(tuán)包括吡喃葡糖苷、吡喃半乳糖苷、吡喃甘露糖苷、吡喃巖藻糖苷、吡喃阿拉伯糖苷、吡喃葡糖苷、吡喃半乳糖苷、葡糖苷酸、吡喃乳糖苷、吡喃木糖苷、氨基葡糖苷(glucosaminide)、氨基半乳糖苷(galactosaminide)、阿洛糖苷、來(lái)蘇糖苷、太羅糖苷、蘇阿糖苷、核糖苷、果糖苷、鼠李糖苷和古洛糖苷基團(tuán)。更特別地，所述糖苷基團(tuán)可以選自α-D-吡喃葡糖苷、α-D-吡喃半乳糖苷、α-D-吡喃甘露糖苷、α-L-吡喃巖藻糖苷、α-L-吡喃阿拉伯糖苷、β-D-吡喃葡糖苷、β-D-吡喃半乳糖苷、β-D-葡糖苷酸、β-D-吡喃乳糖苷、β-D-吡喃木糖苷、β-D-氨基葡糖苷(glucosaminide)、β-D-氨基半乳糖苷(galactosaminide)、β-D-阿洛糖苷、β-D-來(lái)蘇糖苷、β-D-太羅糖苷、β-D-蘇阿糖苷、β-D-核糖苷、β-D-果糖苷、β-D-鼠李糖苷和β-L-古洛糖苷基團(tuán)。
本發(fā)明所包括的化合物的例子如下所示。當(dāng)然應(yīng)當(dāng)理解的是，其中各個(gè)適宜的化合物可以為游離化合物、酸或堿加成鹽、或前藥的形式。

七葉苷 秦皮苷
4-甲基傘花基α-D-吡喃葡糖苷 4-甲基傘花基α-D-吡喃半乳糖苷
七葉亭-7-O-糖苷(菊苣苷)
4-甲基傘花基α-D-吡喃甘露糖苷 4-甲基傘花基α-L-吡喃巖藻糖苷
4-甲基傘花基α-L-吡喃阿拉伯糖苷 4-甲基傘花基β-D-吡喃葡糖苷
4-甲基傘花基β-D-吡喃半乳糖苷 4-甲基傘花基β-D-葡糖苷酸
4-甲基傘花基N-乙酰基-β-D- 4-甲基傘花基N-乙?；?β-D- 氨基葡糖苷 氨基半乳糖苷 (glucosaminide) (galactosaminide)
4-甲基傘花基β-D-吡喃木糖苷 4-甲基傘花基β-D-吡喃乳糖苷
4-三氟甲基傘花基β-D-4-三氟甲基傘花基β-D- 吡喃葡糖苷 吡喃半乳糖苷
6，8-二氟-4-甲基傘花基β-D- 五羥黃酮3-β-D-葡糖苷 吡喃葡糖苷
五羥黃酮3-鼠李糖苷 五羥黃酮3-D-木糖苷 或其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥。
本發(fā)明還包括鹵代香豆素化合物的應(yīng)用，例如氟代化合物。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式(I)或式(II)的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥
其中 R1、R2、R3、R4、R5和R6各自獨(dú)立地為氫、鹵素或包含1-30個(gè)多價(jià)原子的部分，該多價(jià)態(tài)原子選自碳、氮、氧和硫； 或R3和R4、R4和R5、R5和R6或R4、R5和R6可以與它們所連接的碳原子結(jié)合在一起從而形成環(huán)狀基團(tuán)，該環(huán)狀基團(tuán)任選地被鹵素或包含1-30個(gè)多價(jià)態(tài)原子的部分所取代，所述多價(jià)態(tài)原子選自碳、氮、氧和硫； 其中R1、R2、R3、R4、R5和R6中的至少一個(gè)或所述環(huán)狀基團(tuán)包含鹵素或含有鹵素的部分。
所述化合物可以包括一個(gè)或多個(gè)(例如一或兩個(gè))鹵素或含有鹵素的部分。因此，在式(I)的一個(gè)實(shí)施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6中的至少一個(gè)包含鹵素或含有鹵素的部分。優(yōu)選地，R1、R2、R3、R4、R5和R6中僅有一個(gè)包含鹵素或含有鹵素的部分。特別提到的化合物是其中R2、R4或R6獨(dú)立地包含鹵素或含有鹵素的部分。
除鹵素外，R1、R2、R3、R4、R5和R6可以各自獨(dú)立地選自R7、-OR7、-C(O)R7以及-C(O)OR7和R8，其中 R7獨(dú)立地選自氫、烴基和-(CH2)k-雜環(huán)基，所述烴基任選地被1、2、3、4或5個(gè)R8取代，而所述的-(CH2)k-雜環(huán)基任選地被1、2、3、4或5個(gè)R8取代； R8獨(dú)立地選自鹵素、三氟甲基、氰基、硝基、氧代、＝NR9、-OR9、-C(O)R10、-C(O)N(R9)R10、-C(O)OR9、-OC(O)R9、-S(O)iR9、-S(O)iN(R9)R10、-N(R9)R10、-N(R9)N(R9)R10、-N(R9)C(O)R10和-N(R9)S(O)iR10；并且 R9和R10各自獨(dú)立地為氫或選自烴基和-(CH2)k-雜環(huán)基，所述烴基和-(CH2)k-雜環(huán)基各自任選地被1、2、3、4或5個(gè)取代基取代，所述取代基獨(dú)立地選自鹵素、氰基、氨基、羥基、C1-6烷基和C1-6烷氧基；其中k為1-6的整數(shù)(例如1、2或3)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述鹵素是F。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述含有鹵素的部分為C1-6的烷基(例如甲基)被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)鹵素所取代(例如F或Cl)。含有鹵素的部分可以為三氟甲基(例如7-羥基-4-(三氟甲基)香豆素)或三氯甲基。
本發(fā)明包括的化合物的例子如下所示。當(dāng)然應(yīng)當(dāng)理解，其中各個(gè)適宜的化合物可以是游離化合物、酸或堿加成鹽、或前藥的形式 6-溴-3-丁酰香豆素 6-溴香豆素-3-甲酸 6-溴香豆素-3-甲酸 6，8-二溴香豆素-3-甲酸 3-氯香豆素 4-氯-3-硝基香豆素 7-氨基-4-(三氟甲基)香豆素 7-氨基-4-(三氟甲基)香豆素 7-羥基-4-(三氟甲基)香豆素 2，3，6，7-四氫-9-三氟甲基-1H，5H-喹嗪并(9，1-gh)香豆素(香豆素153) 6-溴-3-(2，3-二氯苯基氨基甲?；?-香豆素 7-乙氧基-4-(三氟甲基)香豆素 7-羥基-4-(三氟甲基)香豆素 7-甲氧基-4-(三氟甲基)香豆素 7-(苯基乙酰氨基)-4-(三氟甲基)香豆素 3-乙?；?6-溴香豆素 L-丙氨基-7-酰氨基-4-甲基香豆素三氟乙酸酯 6-溴香豆素 6-溴-3-氰基香豆素 6-溴-3-氰基-4-甲基香豆素 6-溴-4-羥基香豆素 6-溴甲基-7-乙酰氧基香豆素 4-(溴甲基)-6，7-二甲氧基香豆素 4-(溴甲基)-7-甲氧基香豆素 6-溴-4-甲基-3-苯基香豆素 3-丁酰-6，8-二溴香豆素 6-氯香豆素 6-氯-3-氰基香豆素 6-氯-3-氰基-4，7-二甲基香豆素 6-氯-3-氰基-4-甲基香豆素 6-氯-3-氰基-4，7-二甲基-3-苯基香豆素 6-氯-4-羥基香豆素 6-氯-7-羥基-4-(甲氧基甲基)香豆素 6-氯-4-羥基-7-甲基香豆素 6-氯-4-羥基-4-(三氟甲基)香豆素 6-氯-4-甲基-7-苯基香豆素 4-氯-3-硝基香豆素 6-(3-氯丙氧基)-4-甲基香豆素 3-氰基-6，8-二溴-4-甲基香豆素 3-氰基-6，8-二氯-4-甲基香豆素 3-氰基-6，7-二氯-4-甲基香豆素 3-氰基-6-氟-4-甲基香豆素 6，8-二溴-4-羥基香豆素 6，8-二溴香豆素-3-羧酸 6，8-二溴-4-甲基-3-苯基香豆素 6，7-二氯-4-羥基香豆素 6，8-二氯-4-羥基香豆素 6，7-二氯-4-甲基-3-苯基香豆素 6，8-二氯-4-甲基-3-苯基香豆素 乙基6，8-二溴香豆素甲酸酯 6-氟-4-羥基香豆素 6-氟-4-甲基-3-苯基香豆素 7-羥基-4-(三氟甲基苯基)香豆素 如上所述，R3和R4、R4和R5、或R5和R6中的一個(gè)或多個(gè)與其所連接的碳原子結(jié)合在一起從而可以形成環(huán)狀基團(tuán)，該環(huán)狀基團(tuán)任選地被鹵素或包含1-30個(gè)多價(jià)態(tài)原子的含鹵素的部分所取代，所述多價(jià)態(tài)原子選自碳、氮、氧和硫。該環(huán)狀基團(tuán)可以是碳環(huán)(例如苯基)或雜環(huán)(例如呋喃基)基團(tuán)，其中任一個(gè)可以任選地由例如R7、-OR7、-C(O)R7和-C(O)OR7中的一個(gè)或多個(gè)取代。選擇性地或附加性地，如此形成的環(huán)狀基團(tuán)可以包括糖苷基團(tuán)如糖基團(tuán)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的鹵代香豆素化合物為糖苷化合物。
如果適宜，本發(fā)明的化合物可以是其藥學(xué)上可接受鹽的形式。本文所使用的術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受”是指包括這些化合物、材料、組合物和/或其藥劑形式，它們?cè)诤侠磲t(yī)學(xué)判斷的范圍內(nèi)，適于與人類和動(dòng)物的組織相接觸使用，并且沒(méi)有過(guò)度的毒性、刺激、過(guò)敏反應(yīng)或其它問(wèn)題或并發(fā)癥，且與合理的利益/風(fēng)險(xiǎn)率相當(dāng)。該術(shù)語(yǔ)對(duì)于人和獸醫(yī)用途上均是可接受性的。
藥學(xué)上可接受的鹽可以通過(guò)常規(guī)的化學(xué)方法由含有堿性或酸性部分的母體化合物中合成。通常地，這樣的鹽可以通過(guò)將這些化合物的游離酸或堿的形式按化學(xué)計(jì)算量與在水或有機(jī)溶劑或兩者的混合物中的適當(dāng)堿或酸混合；通常地，優(yōu)選的非水介質(zhì)如醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或丙烯腈。適宜的鹽的列舉參見(jiàn)Remington′s Pharmaceutical Sciences，第17版，Mack Publishing Company，Easton，Pa.，US，1985，第1418頁(yè)，其公開(kāi)內(nèi)容在此引入作為參考；還參見(jiàn)Stahl等人，Eds，＂Handbook of Pharmaceutical SaltsProperties Selection and Use＂，Verlag Helvetica Chimica Acta and Wiley-VCH，2002。
因此，本發(fā)明的公開(kāi)內(nèi)容包括所公開(kāi)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽，其中母體化合物通過(guò)制備其酸或堿鹽來(lái)修飾。例如，如從無(wú)機(jī)的或有機(jī)的酸或堿中形成的常規(guī)的無(wú)毒鹽或季銨鹽。這樣的酸加成鹽的例子包括乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙基硫酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽(glucoheptanoate)、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽(heptanoate)、己酸鹽、氫氯酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙基磺酸鹽、乳酸鹽、馬來(lái)酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽(pamoate)、果膠酸鹽、過(guò)硫酸鹽、3-丙酸苯酯、苦味酸鹽、三甲基乙酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一酸鹽。堿式鹽包括銨鹽，堿金屬鹽例如鈉鹽和鉀鹽，堿土金屬鹽例如鈣鹽和鎂鹽，有機(jī)堿的鹽例如二環(huán)己基胺鹽、N-甲基-D-葡糖胺以及氨基酸的鹽例如精氨酸、賴氨酸等。還有，含氮的堿基團(tuán)可以由例如低級(jí)鹵代烷的試劑季銨化，例如甲基氯、甲基溴、甲基碘，乙基氯、乙基溴、乙基碘，丙基氯、丙基溴、丙基碘和丁基氯、丁基溴、丁基碘；二烷基硫酸鹽如二甲基、二乙基、二丁基和二戊硫酸鹽，長(zhǎng)鏈鹵代物例如癸基氯、癸基溴、癸基碘，月桂基氯、月桂基溴、月桂基碘，和硬脂基氯、硬脂基溴、硬脂基碘，芳烷基鹵代物例如苯甲基溴、苯乙基溴及其它。
本發(fā)明包括用于本發(fā)明的活性藥物品種的前藥，其中例如雖然保護(hù)或衍生出一個(gè)或多個(gè)官能團(tuán)，但其在活體中還是可以轉(zhuǎn)變成所述官能團(tuán)，就如同羧酸酯在活體中轉(zhuǎn)化成游離酸或保護(hù)的胺轉(zhuǎn)化成氨基基團(tuán)的情況。本文所使用的術(shù)語(yǔ)“前藥”表示特定的化合物在活體中迅速地轉(zhuǎn)化成母體化合物，例如通過(guò)血液的水解。全面的討論提供自T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugs asNovel Delivery Systems，the A.C.S.Symposium Series的第14卷；Edward B.Roche等人，Bioreversible Carriers in Drug Design，American PharmaceuticalAssociation and Pergamon Press，1987；H Bundgaard等人，Design of Prodrugs，Elsevier，1985；以及Judkins等人，SyntheticCommunieations，26(23)，4351-4367(1996)，其各自引入本文作為參考。
因此，前藥包括具有已經(jīng)轉(zhuǎn)化成其可逆衍生物的官能團(tuán)的藥物。通常地，這樣的前藥通過(guò)水解轉(zhuǎn)化成活性藥物?？梢蕴岬降膶?shí)例如下所示 前藥還包括通過(guò)氧化或還原反應(yīng)轉(zhuǎn)化成活性藥物的化合物。作為可以提到的例子有氧化活化(例如N-和O-脫烷基化、氧化脫氨基化、N-氧化或環(huán)氧化)和還原活化(例如偶氮還原、亞砜還原、二硫化物還原、生物還原烷基化或硝基還原)。
也作為前藥的代謝活化提到的有核苷活化、磷酸化活化和脫羧基化活化。更多的信息，參見(jiàn)“The Organic Chemistry of Drug Design and DrugAction”，R B Silverman(特別是第8章，第497-546頁(yè))，在此引入作為參考。
保護(hù)性基團(tuán)的使用全面地描述于由J W F McOmie編輯的“ProtectiveGroups in Organic Chemistry”，Organic Chemistry，Pelnum Press(1973)，以及TW Greene & P G M Wutz，“Protective Groups in Organic Synthesis”，第2版，Wiley-lnterscience(1991)。
因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，雖然本發(fā)明所保護(hù)的化合物衍生物可能不具有像這樣的藥物活性，但是它們可以通過(guò)給藥，例如通過(guò)腸胃外或口服給藥，并隨后在體內(nèi)代謝以形成具有藥物活性的本發(fā)明化合物。因此，這樣的衍生物是“前藥”的例子。所述化合物的所有前藥都包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
本發(fā)明的化合物可以各種同分異構(gòu)或互變異構(gòu)的形式存在。例如，在化合物所述香豆素環(huán)的7-位上具有羥基的情況下，該化合物可以存在如下所示的七葉苷中的6，7-或2，6-的形式。

6，7-七葉苷 2，6-七葉苷 應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明包括所述化合物的所有這樣的同分異構(gòu)形式和互變異構(gòu)形式。
本發(fā)明公開(kāi)的化合物還可以包含一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱的碳原子，并且因此可以存在旋光異構(gòu)和/或非對(duì)映異構(gòu)。所有的非對(duì)映異構(gòu)體可以通過(guò)常規(guī)技術(shù)例如色譜或分級(jí)結(jié)晶來(lái)分離。各種立體異構(gòu)體可以使用常規(guī)的例如分級(jí)結(jié)晶或HPLC技術(shù)通過(guò)分離外消旋化合物或化合物的其它混合物來(lái)分離。選擇性地，所期望的旋光異構(gòu)體可以通過(guò)在不造成外消旋化或差向表異構(gòu)化的條件下利用適當(dāng)?shù)墓鈱W(xué)活性起始材料反應(yīng)制得或通過(guò)衍生制得，例如利用同手型酸，隨后通過(guò)常規(guī)的方式(例如HPLC、硅色譜)來(lái)分離非對(duì)映異構(gòu)的衍生物。所有的立體異構(gòu)體都包含在本發(fā)明公開(kāi)的范圍內(nèi)。當(dāng)公開(kāi)單個(gè)的對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體時(shí)，其公開(kāi)內(nèi)容也覆蓋其它的對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體和外消旋體；關(guān)于這一點(diǎn)，本文列舉了具體的化合物作為特別參考。
幾何異構(gòu)體也可以存在于本發(fā)明公開(kāi)的化合物中。本發(fā)明關(guān)注由于在碳-碳雙鍵周?chē)O(shè)置取代基而產(chǎn)生的各種幾何異構(gòu)體及其混合物。這樣的異構(gòu)體被定義為Z或E構(gòu)象，其中術(shù)語(yǔ)“Z”表示取代基在碳-碳雙鍵的同側(cè)，而術(shù)語(yǔ)“E”表示取代基在碳-碳雙鍵的異側(cè)。
因此，本發(fā)明的公開(kāi)內(nèi)容包括所定義的化合物的所有變體形式，例如所定義化合物的任何互變異構(gòu)體或任何藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酸或所定義化合物的其它變體和它們的互變異構(gòu)體以及物質(zhì)，它們?cè)诮o藥時(shí)能夠直接或間接地提供以上所定義的化合物或提供能夠與這樣的化合物平衡存在的物種。
合成 本發(fā)明的化合物可以是天然產(chǎn)生的、商業(yè)上可得到的或利用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法例如通過(guò)Perkin或Pechman合成法來(lái)合成的。
得到的最終產(chǎn)物或中間體的任何混合物可以基于組分間的物化差異通過(guò)已知的方式分離成純的最終產(chǎn)物或中間體，例如通過(guò)色譜、蒸餾、分級(jí)結(jié)晶，或是通過(guò)在環(huán)境適當(dāng)或可能時(shí)成鹽。
給藥&藥物制劑 本發(fā)明的化合物可以通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何適宜的方式給藥。根據(jù)所述障礙和被治療的患者以及給藥的方式，所述組合物可以以變化的劑量給藥。
所述化合物通常局部給藥。例如，本發(fā)明化合物局部給藥的劑型包括粉末、噴霧和藥膏。所述活性化合物可以在無(wú)菌的條件下與藥學(xué)上可接受載體和任何需要的防腐劑、緩沖劑或可能需要的推進(jìn)劑相混合。
可以改變本發(fā)明藥物組合物中活性成分的實(shí)際劑量水平以獲得大量的活性化合物，該化合物對(duì)實(shí)現(xiàn)特定病人、組合物和給藥模式所期望的治療效應(yīng)是有效的。所選擇的劑量水平將依賴于特定化合物的活性、給藥方式、被治療病癥的嚴(yán)重程度以及被治療病人的病況和之前的病史。然而，本領(lǐng)域現(xiàn)有技術(shù)已知，化合物的初始劑量水平低于為實(shí)現(xiàn)所期望治療效果的需要，并逐漸增加劑量直至獲得所期望的效果。
在治療、預(yù)防、控制、改善或減少病癥危險(xiǎn)時(shí)，需要抑制真菌的活性，適宜的劑量水平將通常約為0.1-100mg/kg每天。所述化合物可以以每天1-4次的計(jì)劃來(lái)給藥?？梢哉{(diào)整所述的給藥計(jì)劃以提供最佳的治療效應(yīng)。
應(yīng)用 本文所使用的術(shù)語(yǔ)“皮膚真菌感染”是指由真菌引起的真皮或指甲(手指甲、腳趾甲、或非人類的動(dòng)物的臌脹癥和爪)的感染。這樣的真菌包括但不限于發(fā)癬菌種、表皮癬菌種和小孢子菌種。
本發(fā)明的化合物可以用于治療各種局部指甲感染，特別是由皮膚真菌引起的感染。所述感染可以包括癬感染例如須癬(胡須)、頭癬(頭)、體癬(身體)、股癬(腹股溝)、面癬(臉)、手癬(手)、足癬(腳)、甲癬(指甲)、花斑癬(糖疹)、難辨認(rèn)癬或黑癬。所述感染可以由表皮癬菌屬、小孢子菌屬和發(fā)癬菌屬(例如紅色發(fā)癬菌和趾間發(fā)癬菌)的真菌引起。
所述皮膚真菌感染可以是皮膚、神經(jīng)板、角質(zhì)層、指甲(手指甲和腳趾甲)或頭發(fā)的感染。特別提到的是由發(fā)癬菌屬、表皮菌屬或小孢子菌屬的皮膚真菌引起的皮膚真菌感染。皮膚真菌的例子包括絮狀表皮癬菌、犬小孢子菌、頭癬小孢子菌、石膏樣小孢子菌、矮小孢子菌、鐵銹色小孢子菌、扭曲小孢子菌(Microsporum distortum)、黃褐色小孢子菌、紅色發(fā)癬菌、須癬發(fā)癬菌趾間變種(Trichophyton mentagrophytes var.interdigitale)、須癬發(fā)癬菌結(jié)節(jié)變種(Trichophyton mentagrophytes var.nodulare)、斷發(fā)發(fā)癬菌、蘇丹發(fā)癬菌(Trichophyton soudanese)、堇色發(fā)癬菌、梅尼尼發(fā)癬菌、舍恩萊因發(fā)癬菌、雞發(fā)癬菌、Trichophton krajdenli、赤非發(fā)癬菌(Trichophytonyaoundei)、馬發(fā)癬菌、Trichophyton erinacel和疣發(fā)癬菌。
本發(fā)明的特定的實(shí)施方案中，皮膚真菌感染為甲癬。術(shù)語(yǔ)“甲癬”包括，但不限于，遠(yuǎn)端側(cè)位甲下甲癬、淺表性白色甲癬(superficial white)、近端白色甲癬(proximal white subungual)、繼發(fā)性營(yíng)養(yǎng)不良(secondary dystrophic)、原發(fā)性營(yíng)養(yǎng)不良(primary dystrophic)、甲板內(nèi)型(endonyx)、念珠菌性(candidal)(例如甲松離和慢性皮膚粘膜疾病)類型的甲癬(onychomycosis)和甲癬(Tinea ungium)。
甲癬已經(jīng)顯示為更加嚴(yán)重的臨床并發(fā)癥的重大危險(xiǎn)因素，例如臂部/腿部的急性細(xì)菌蜂窩組織炎和其它繼發(fā)細(xì)菌感染，因此本發(fā)明包括這些感染的治療。甲癬可以但不限于由發(fā)癬菌種的真菌引起。例如，所述真菌可以是趾間發(fā)癬菌或紅色發(fā)癬菌。
附圖的簡(jiǎn)要說(shuō)明

圖1為顯示加入β-葡糖苷酶和七葉苷對(duì)于紅色發(fā)癬菌NCPF118生長(zhǎng)的影響的柱形圖。
圖2為顯示加入β-葡糖苷酶和七葉苷對(duì)于趾間發(fā)癬菌NCPF335生長(zhǎng)的影響的柱形圖。
圖3為顯示七葉亭對(duì)紅色發(fā)癬菌NCPF18的劑量依賴性抗真菌作用的圖。
圖4為顯示紅色發(fā)癬菌NCPF118和趾間發(fā)癬菌NCPF335的較老培養(yǎng)物對(duì)七葉苷的敏感性的圖。
圖5為顯示香豆素葡糖苷(終濃度為5mM)對(duì)紅色發(fā)癬菌NCPF118的活性的圖。
圖6為顯示鹵代的香豆素糖苷配基對(duì)紅色香豆素NCPF118的活性的圖。
以下的實(shí)施例闡釋了本發(fā)明 實(shí)施例 糖苷香豆素的合成 利用全細(xì)胞的生物催化發(fā)酵方法來(lái)合成糖苷香豆素，該方法是基于EKLim等人，(2004)，Biotech.Bioeng.87(636-637)中所述的。所選擇的糖基轉(zhuǎn)移酶用于將糖苷結(jié)合到以下的香豆素上 七葉亭 4-(三氟甲基)香豆素 通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的HPLC法將所述糖苷從粗發(fā)酵提取物中提純至95％的純度。
香豆素-糖苷配基相對(duì)于各自糖苷的溶解度 七葉苷、七葉亭、4-(三氟甲基)香豆素、瑞香素、秦皮苷商購(gòu)自Sigma-Aldrich Company Ltd.。
在RPMI1640介質(zhì)中和DMSO中糖苷配基相對(duì)于各自糖苷的溶解度。結(jié)果示出于表1中。
表1所選擇的香豆素和相應(yīng)糖苷的溶解度 1pH＝7.0 2使用ALOGPS程序(Virtual Computational Chemistry Laboratory)計(jì)算的 3不可商業(yè)獲得的化合物 表1的結(jié)果證實(shí)了香豆素糖苷在RPMI1640介質(zhì)(pH7.0)中與0.0-0.4％(v/v)DMSO中比各自的糖苷配基更易于溶解，并且未測(cè)試的香豆素糖苷基于預(yù)測(cè)的分配系數(shù)(LogP)在理論上比各自糖苷配基更易于溶解。在有機(jī)化學(xué)和醫(yī)藥化學(xué)領(lǐng)域，分配系數(shù)或分布系數(shù)為，化合物于平衡狀態(tài)下在互不相溶的兩相溶劑中的濃度比率。因此，這些系數(shù)是測(cè)定在兩種溶劑間不同的溶解度。較高值表示較低的水溶性，而較低的值包括負(fù)值表示較大的水溶性。
香豆素糖苷配基和各自糖苷的抗真菌活性 材料和方法 測(cè)試七葉苷、七葉亭和大量的其它香豆素以及它們的糖苷對(duì)于紅色發(fā)癬菌、趾間發(fā)癬菌以及其它從指甲和皮膚分離的真菌的抗真菌活性。
真菌分生孢子和菌絲段的懸溶液被用作實(shí)驗(yàn)接種體，該實(shí)驗(yàn)接種體是通過(guò)向在30℃下已培養(yǎng)了7-10天的斜面培養(yǎng)基中加入3ml的去礦物水或0.15％(w/v)的NaCl溶液并用無(wú)菌塑料移液管探測(cè)培養(yǎng)基表面來(lái)制備的。在臨床分離物顯示緩慢或差的生長(zhǎng)的情況下，將培養(yǎng)基的周期延長(zhǎng)至18天以使得其為制備濃的孢子懸溶液而充分生長(zhǎng)。得到的懸溶液通過(guò)雙層無(wú)菌外科薄紗過(guò)濾；如果需要的話，利用3ml體積的水或0.15％(w/v)的NaCl沖洗薄紗中的任何孢子或小菌絲段。光學(xué)密度調(diào)整為500nm下0.14-0.16(相應(yīng)于0.5-1.5×106繁殖體/ml)100μl這樣的懸溶液，將該懸溶液加入到無(wú)菌96-孔微量滴定平板中，同時(shí)向該無(wú)菌96-孔微量滴定平板中加入100μl的2×強(qiáng)度RPMI1640介質(zhì)(廣泛用于組織培養(yǎng)和抗微生物抗性測(cè)試的化學(xué)限定的營(yíng)養(yǎng)介質(zhì))。將以這種方式制備的接種體用于所有的實(shí)驗(yàn)；此外，對(duì)于圖4所示的七葉苷的一些實(shí)驗(yàn)而言，將利用如上所述制備的標(biāo)準(zhǔn)接種體(圖4中標(biāo)有“新接種體”的)得到的結(jié)果與利用已經(jīng)培養(yǎng)9周的接種體(圖4中標(biāo)有“老接種體”的)在相似的測(cè)試中得到的結(jié)果對(duì)比。適當(dāng)?shù)兀瑢⑾愣顾丶尤氲奖P(pán)中前先預(yù)先溶解到2×強(qiáng)度RPMI1640介質(zhì)中。以相同的方式設(shè)置白色念珠菌酵母和克魯氏假絲酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)，但在這些情況下，細(xì)胞懸溶液的過(guò)濾就不必要了。
七葉苷易溶于2×強(qiáng)度RPMI1640介質(zhì)中。其它化合物的溶解需要DMSO的存在。七葉亭、瑞香素、4-(三氟甲基)香豆素、4-(三氟甲基)-香豆素-7-0-葡萄糖和菊苣苷以最終測(cè)試濃度的1000倍溶解于DMSO中；當(dāng)使用2×強(qiáng)度的RPMI1640介質(zhì)將該溶液稀釋到實(shí)驗(yàn)所用的濃度時(shí)，DMSO的最終濃度為0.05％，其單獨(dú)地在進(jìn)行若干實(shí)驗(yàn)測(cè)試中對(duì)真菌是無(wú)作用的。秦皮苷需要DMSO的最終濃度為0.2％，但這對(duì)于在分離實(shí)驗(yàn)中測(cè)試真菌的生長(zhǎng)也是沒(méi)有影響的。
一系列香豆素溶液的稀釋液是通過(guò)將貯液器中已知體積的香豆素儲(chǔ)存溶液與新鮮的2×RPMI1640介質(zhì)在平板上相混合來(lái)制備的。在三倍貯液器中研究各個(gè)濃度的香豆素。為了從國(guó)家病原性真菌收集(the NationalCollection of Pathogenic Fungi)(布里斯托爾)中得到的紅色發(fā)癬菌NCPF118和趾間發(fā)癬菌NCPF335進(jìn)行觀察，在30℃下，在Bio-Tek Powerwave XS掃描平板讀器中孵育所述平板，并以每2小時(shí)為間隔測(cè)定平板中的真菌生長(zhǎng)直至72小時(shí)或96小時(shí)，并在具體文件中記錄530nm下所述孔的吸收度(光密度)。以同樣的方式對(duì)于白色念珠菌酵母和克魯氏假絲酵母細(xì)胞進(jìn)行觀察，但是孵育的溫度為37℃，且孵育的時(shí)間為48小時(shí)。為了對(duì)于從M.Monod收集(洛桑，瑞士)獲得的臨床真菌分離物進(jìn)行觀察，所述操作如上所述，除了適應(yīng)這些分離物的相對(duì)較低的生長(zhǎng)，在30℃靜態(tài)的孵育器中進(jìn)行孵育，且以每24小時(shí)為間隔在Bio-TekPowerwave XS掃描平板閱讀器中人工讀取數(shù)據(jù)直至168小時(shí)，在每次讀取后返回到孵育器中。如上所述花斑癬菌在系統(tǒng)中生長(zhǎng)較差，那么對(duì)于這樣的有機(jī)體而言，將標(biāo)準(zhǔn)接種體的花斑癬菌與等體積的七葉亭溶液混合，并將混合物置于含有Sabouraud’s agar介質(zhì)的Petri平板中。在37℃長(zhǎng)達(dá)96小時(shí)的培養(yǎng)期間，可視地監(jiān)視生長(zhǎng)，并與無(wú)香豆素時(shí)的生長(zhǎng)作對(duì)比。
結(jié)果 表2證實(shí)了大量的經(jīng)測(cè)試香豆素糖苷配基在0.25-1mM濃度范圍時(shí)對(duì)于的發(fā)癬菌種的參照菌株具有抑制作用。
表2 表3證實(shí)了皮膚真菌的臨床分離物對(duì)七葉亭的敏感性 表3 表4證實(shí)了病原性真菌的其它真菌分離物對(duì)七葉亭的敏感性。
表4 圖1證實(shí)了向紅色發(fā)癬菌NCPF118中加入β-葡糖苷酶和七葉苷顯著抑制了真菌生長(zhǎng)。
圖2證實(shí)了向趾間發(fā)癬菌NCPF335中加入β-葡糖苷酶和七葉苷顯著抑制了真菌生長(zhǎng)。
圖3證實(shí)了七葉亭對(duì)紅色發(fā)癬菌NCPF118的劑量依賴性抗真菌作用。
圖4證實(shí)了由于在老培養(yǎng)物中β-葡糖苷酶產(chǎn)量的增加，使得紅色發(fā)癬菌NCPF118和趾間發(fā)癬菌NCPF335的老培養(yǎng)物對(duì)七葉亭更敏感。
圖5證實(shí)了香豆素糖苷對(duì)紅色發(fā)癬菌NCPF118的活性。
圖6證實(shí)了盡管7-羥基-4-(三氟甲基)香豆素的糖苷配基僅在低濃度下可溶，但該糖苷配基在1-2mM濃度下對(duì)紅色發(fā)癬菌具有顯著的抗真菌性。
權(quán)利要求
1.一種香豆素化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥，所述香豆素化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥用于治療、預(yù)防患者中的皮膚真菌感染或延緩其發(fā)展。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，該化合物為糖苷香豆素化合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的化合物，其中所述的感染是由發(fā)癬菌屬、表皮癬菌屬或小孢子菌屬的皮膚真菌引起的。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的化合物，其中所述的皮膚真菌選自絮狀表皮癬菌、犬小孢子菌、頭癬小孢子菌、石膏樣小孢子菌、矮小孢子菌、鐵銹色小孢子菌、扭曲小孢子菌(Microsporum distortum)、黃褐色小孢子菌、紅色發(fā)癬菌、須癬發(fā)癬菌趾間變種(Trichophyton mentagrophytes var.interdigitale)、須癬發(fā)癬菌結(jié)節(jié)變種(Trichophyton mentagrophytes var.nodulare)、斷發(fā)發(fā)癬菌、蘇丹發(fā)癬菌(Trichophyton soudanese)、堇色發(fā)癬菌、梅尼尼發(fā)癬菌、舍恩萊因發(fā)癬菌、雞發(fā)癬菌、Trichophton krajdenli、赤非發(fā)癬菌(Trichophyton yaoundei)、馬發(fā)癬菌、Trichophyton erinacel和疣發(fā)癬菌。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的化合物，其中所述的皮膚真菌為紅色發(fā)癬菌。
6.根據(jù)前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的化合物，其中所述的感染為甲癬。
7.根據(jù)前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的化合物，其中該化合物為式(I)或式(II)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥
其中
R1、R2、R3、R4、R5和R6各自獨(dú)立地為氫、鹵素或包含1-30個(gè)多價(jià)態(tài)原子的部分，所述的多價(jià)態(tài)原子選自碳、氮、氧和硫；
或R3和R4、R4和R5、或是R5和R6可以和與其相連的碳原子結(jié)合在一起以形成環(huán)狀基團(tuán)，該環(huán)狀基團(tuán)任選地被鹵素或包含1-30個(gè)多價(jià)態(tài)原子的部分所取代，所述的多價(jià)態(tài)原子選自碳、氮、氧和硫；
并且R1、R2、R3、R4、R5和R6中的至少一個(gè)或是所述的環(huán)狀基團(tuán)中包含糖苷基。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的化合物，其中R2、R4、R5或R6包含糖苷基。
9.根據(jù)前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的化合物，其中所述化合物包含糖苷基，該糖苷基為單糖、二糖或多糖基團(tuán)。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的化合物，其中所述的糖苷基選自吡喃葡糖苷、吡喃半乳糖苷、吡喃甘露糖苷、吡喃巖藻糖苷、吡喃阿拉伯糖苷、吡喃葡糖苷、吡喃半乳糖苷、葡糖苷酸、吡喃乳糖苷、吡喃木糖苷、氨基葡糖苷、氨基半乳糖苷、阿洛糖苷、來(lái)蘇糖苷、太羅糖苷、蘇阿糖苷、核糖苷、果糖苷、鼠李糖苷和古洛糖苷基團(tuán)。
11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的化合物，其中所述的糖苷基選自α-D-吡喃葡糖苷、α-D-吡喃半乳糖苷、α-D-吡喃甘露糖苷、α-L-吡喃巖藻糖苷、α-L-吡喃阿拉伯糖苷、β-D-吡喃葡糖苷、β-D-吡喃半乳糖苷、β-D-葡糖苷酸、β-D-吡喃乳糖苷、β-D-吡喃木糖苷、β-D-氨基葡糖苷、β-D-氨基半乳糖苷、β-D-阿洛糖苷、β-D-來(lái)蘇糖苷、β-D-太羅糖苷、β-D-蘇阿糖苷、β-D-核糖苷、β-D-果糖苷、β-D-鼠李糖苷和β-L-古洛糖苷基團(tuán)。
12.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，所述化合物選自以下化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥
七葉苷秦皮苷
4-甲基傘花基α-D-吡喃葡糖苷 4-甲基傘花基α-D-吡喃半乳糖苷
4-甲基傘花基α-D-吡喃甘露糖苷 4-甲基傘花基α-L-吡喃巖藻糖苷
4-甲基傘花基α-L-吡喃阿拉伯糖苷 4-甲基傘花基β-D-吡喃葡糖苷
4-甲基傘花基β-D-吡喃半乳糖苷4-甲基傘花基β-D-葡糖苷酸
4-甲基傘花基N-乙?；?β-D-4-甲基傘花基N-乙酰基-β-D-
氨基葡糖苷 氨基半乳糖苷
4-甲基傘花基β-D-吡喃木糖苷 4-甲基傘花基β-D-吡喃乳糖苷
4-三氟甲基傘花基β-D- 4-三氟甲基傘花基β-D-
吡喃葡糖苷 吡喃半乳糖苷
6，8-二氟-4-甲基傘花基β-D- 五羥黃酮3-β-D-葡糖苷
吡喃葡糖苷
五羥黃酮3-鼠李糖苷 五羥黃酮3-D-木糖苷。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的化合物，該化合物為七葉苷或其前藥。
14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，該化合物為鹵代的香豆素化合物。
15.一種藥物制劑，所述藥物制劑包含香豆素化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥，該藥物制劑用于在患者中治療、預(yù)防皮膚真菌感染或延遲其發(fā)展。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的制劑，其中所述的香豆素化合物為糖苷香豆素化合物。
17.根據(jù)權(quán)利要求15或16所述的制劑，其中所述的感染如權(quán)利要求3-6任一項(xiàng)中所定義。
18.根據(jù)權(quán)利要求16或17所述的制劑，其中所述的化合物如權(quán)利要求7-13任一項(xiàng)中所定義。
19.根據(jù)權(quán)利要求15-18中任一項(xiàng)所述的制劑，其中所述的制劑還包括藥學(xué)上可接受的佐劑、稀釋劑或載體。
20.香豆素化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥在制備用于治療、預(yù)防皮膚真菌感染或延緩其發(fā)展的藥物中的應(yīng)用。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的應(yīng)用，其中所述的香豆素化合物為糖苷香豆素化合物。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的應(yīng)用，其中所述的化合物如權(quán)利要求7-13任一項(xiàng)中所定義。
23.根據(jù)權(quán)利要求20所述的應(yīng)用，其中所述的化合物為鹵代的香豆素化合物。
24.根據(jù)權(quán)利要求20-23中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中所述的感染如權(quán)利要求3-6任一項(xiàng)中所定義。
25.一種用于治療、預(yù)防皮膚真菌感染或延遲其發(fā)展的方法，所述方法包括向患者給予治療有效量的香豆素化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥。
26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中所述的化合物為糖苷香豆素化合物。
27.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中所述的化合物為鹵代的香豆素化合物。
28.根據(jù)權(quán)利要求26所述的方法，其中所述的化合物如權(quán)利要求6-12任一項(xiàng)中所定義。
29.根據(jù)權(quán)利要求25-28中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的感染如權(quán)利要求2-5任一項(xiàng)中所定義。
全文摘要
本發(fā)明提供了香豆素化合物，尤其是糖苷香豆素化合物，其在治療皮膚真菌感染中有用。
文檔編號(hào)C07D311/18GK101501015SQ200780029384
公開(kāi)日2009年8月5日 申請(qǐng)日期2007年6月5日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月6日
發(fā)明者C·S·斯圖爾特 申請(qǐng)人:諾瓦生命科學(xué)有限公司