專(zhuān)利名稱：：用于hcv治療的3’,5’-二-o-?；塑盏闹谱鞣椒ㄓ糜贖CV治療的3'，5，-二-0-酰化核苷本發(fā)明提供了3，，5，-二-0-?；塑眨錇楸透窝撞《?HepatitisCVirus,HCV)RNA依賴性RNA病毒聚合酶的抑制劑的前體藥物。當(dāng)經(jīng)口施用時(shí)，這些化合物可以輕易地從胃腸道(GItract)吸收，并且有效地在體內(nèi)回復(fù)為母體核苷。這些前體藥物抑制RNA依賴性的RNA病毒復(fù)制，并且用作HCVNS5B聚合酶的抑制劑、用作HCV復(fù)制的抑制劑、以及用于哺乳動(dòng)物治療丙型肝炎感染。具體而言，本發(fā)明涉及?；氖纫Ш塑盏挠猛荆?dāng)經(jīng)口施用核苷時(shí)，所述嘧啶核普提供改善的藥物吸收，并且所述嘧淀核苷優(yōu)于先前公開(kāi)的前體藥物。丙型肝炎病毒是全世界主要的健康問(wèn)題，并且是慢性肝疾病的主要原因。(Boyer，N.等人J.Hepatol.200032:98-112)。感染了HCV的患者有惡化為肝硬化、并隨后惡化為肝細(xì)胞癌的風(fēng)險(xiǎn)，因此，HCV是肝移植的主要指征。根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WorldHealthOrganization)，全世界有超過(guò)2億的感染個(gè)體，每年至少有3百萬(wàn)至4百萬(wàn)人感染。一旦感染，大約20%的人清除病毒，但剩下的人將在余生攜帶HCV。10-20%的慢性感染個(gè)體最終惡化為肝損壞的肝石更化或癌癥。該病毒疾病通過(guò)污染的血液和血液制品、污染的針頭而腸胃外地傳染，或者通過(guò)性傳染，并且由感染的母體或攜帶HCV的母體垂直傳染給其子代。目前對(duì)HCV感染的治療限于單獨(dú)地或者聯(lián)合核苷類(lèi)似物利巴韋林(ribavirin)地使用重組干擾素a的免疫療法，這種療法由于抗性快速發(fā)展而在臨床上的益處有限。迫切需要有效治療慢性HCV感染的改進(jìn)的治療劑。目前，僅有有限數(shù)量的改善療法能用來(lái)治療HCV感染。下列文獻(xiàn)綜述了新的以及現(xiàn)存的治療HCV和抑制HCVNS5B聚合酶的治療方法R.G.Gish，Se附.I/iw.199919:5;DiBesceglie，A.M.和Bacon,B.R,，S"^i,折c爿附^7c朋，1999年10月80-85;G.Lake-Bakaar，"對(duì)慢性丙型肝炎病毒肝病的當(dāng)前和未來(lái)療法(CurrentandFutureTherapyforChronicHepatitisCVirusLiverDisease)"，Cm/t.Z)rwgr"rg.//i/e"D/s.20033(3):247-253;P.Hoffmann等人，"實(shí)驗(yàn)性治療丙型肝炎病毒感染的最近專(zhuān)利(RecentpatentsonexperimentaltherapyforhepatitisCvirusinfection)(1999-2002)"，Qp/".77^/",200313(11):1707-1723;F.F.Poordad等人"2000-2002年間丙型肝炎治療的進(jìn)展(DevelopmentsinHepatitisCtherapyduring2000-2002)，，，五平0/7/".五附一/igZ)r^20038(l):9-25;M.P.Walker等人，"用于治療慢性丙型肝炎的有前景的候選物(PromisingCandidatesforthetreatmentofchronichepatitisC)"，￡"平/"v^餘.Z)r"gs200312(8):1269-1280;S,L.Tan等人，"丙型肝炎治療法當(dāng)前現(xiàn)狀和浮現(xiàn)的策略(HepatitisCTherapeutics:CurrentStatusandEmergingStrategies)",胸""及ev.Z)尸"g2002l:867-881jR.DeFrancesco等人"對(duì)丙型肝炎病毒的治療將進(jìn)入一個(gè)新的時(shí)代NS3-4A絲氨酸蛋白酶和NS5BRNA依賴性RNA聚合酶的抑制劑(ApproachinganeweraforhepatitisCvirustherapy:inhibitorsoftheNS3-4AserineproteaseandtheNS5BRNA-dependentRNApolymerase)",JwftV/m//仏200358:1-16;Q.M.Wang等人"丙型肝炎病毒編碼的蛋白抗病毒治療的乾(HepatitisCvirusencodedproteins:targetsforantiviraltherapy)",Z)n/gso/^e200025(9):933-8-944;J.A.Wu和Z.Hong,"用于抗HCV化學(xué)治療的靶向NS5B依賴的RNA聚合酶(TargetingNS5B-DependentRNAPolymeraseforAnti-HCVChemotherapy)",C"r.ZVg7^g.-/w/Z>&.20033:207-219。這些綜述引用了當(dāng)前的在發(fā)展過(guò)程多個(gè)階段的化合物。聯(lián)合兩種或者三種作用于相同或者不同靶點(diǎn)的抗病毒劑的聯(lián)合療法已經(jīng)成為標(biāo)準(zhǔn)的抗病毒療法來(lái)避免或者減緩病毒抗性林的出現(xiàn)，并且上述綜述中公開(kāi)的化合物可以用于與本發(fā)明的化合物聯(lián)合的聯(lián)合療法，因此這些綜述以其整體引入本文作為參考。利巴韋林(l畫(huà)((2R,3R，4S，5R)-3,4-二羥基-5-羥甲基-四氫呋喃-2-基)-lH-[l,2，4三唑-3-羧酸酰胺；VIRAZOLE⑧)是合成的、非干擾素誘導(dǎo)的廣鐠抗病毒核苷類(lèi)似物。利巴韋林具有在體外抵抗一些DNA和包括黃病毒科(F/"WWnV/fle)在內(nèi)的RNA病毒的活性(G.L.Davis，(7flWwewte/<^v2000118:S104-S114)。在單一療法中，利巴韋林在40%的患者中將血清氨基轉(zhuǎn)移酶的水平降低至正常水平，但其不降低HCV-RNA的血清水平。利巴韋林也顯示出顯著的毒性，并且已知為誘發(fā)貧血。利巴韋林尚未被批準(zhǔn)來(lái)在單一療法中抵抗HCV，但批準(zhǔn)該化合物在與干擾素oc-2a和干擾素cc-2b的聯(lián)合療法中。韋拉米啶(Viramidine)是在肝細(xì)胞中轉(zhuǎn)變?yōu)槔晚f林的前體藥物。干擾素(IFN)可以用來(lái)治療慢性肝炎已經(jīng)將近十年。IFN為免疫細(xì)胞響應(yīng)病毒感染產(chǎn)生的糖蛋白。認(rèn)識(shí)到有兩種不同類(lèi)型的干擾素1型包括幾種干擾素cx和一種干擾素P，2型包括干擾素Y。1型干擾素主要由感染的細(xì)胞產(chǎn)生，并且保護(hù)臨近細(xì)胞免于從頭感染。IFN抑制許多病毒的病毒復(fù)制，其中包括HCV，并且當(dāng)用作丙型肝炎感染的唯一治療時(shí)，IFN將血清HCV-RNA抑制到不可檢測(cè)的水平。額外地，IFN常態(tài)化血清的氨基轉(zhuǎn)移酶水平。不幸的是，IFN的效果是暫時(shí)的。停止治療會(huì)導(dǎo)致70%的復(fù)發(fā)率，并且僅有10-15%顯現(xiàn)出具有正常血清丙氨酸轉(zhuǎn)移酶水平的持續(xù)病毒學(xué)反應(yīng)(L.-B.Davis，見(jiàn)上文)早期IFN療法的一個(gè)限制是該蛋白質(zhì)從血液的快速清除。IFN與聚乙二醇(PEG)的化學(xué)衍生物產(chǎn)生具有基本改善的藥物代謝動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的蛋白質(zhì)。PEGASYS⑧為干擾素ot-2a與40kD分支的單甲氧基PEG的綴合物，并且PEG-INTRON⑧為干擾素oc-2b與12kD單甲氧基PEG的綴合物。(B.A.Luxon等人，C7/汰7T^m/;.2002;24(9):1363-1383;A.Kozlowski和J.M.Harris,/Ow"o/.及e/efl^,200172:217-224)。目前，批準(zhǔn)干擾素oc-2a和干擾素ot-2b作為治療HCV的單一療法。ROFERON-A⑧(Roche)是重組形式的干擾素ot-2a。PEGASYS⑧(Roche)是聚乙二醇化(即聚乙二醇修飾的)形式的干擾素oc-:2a。INTRON-A(ScheringCorporation)是重組形式的干擾素oc-2b，并且PEG-INTRON(ScheringCorporation)是聚乙二醇化形式的干擾素oc-2b。其它形式的干擾素oc、以及干擾素P、Y、t和co目前正在臨床研制來(lái)治療HCV。例如InterMune的INFERGEN⑧(干擾素alphacon國(guó)l)、Viragen的OMNIFERON⑧(天然干擾素)、HumanGenomeSciences的ALBUFERON、Ares-Serono的REBIF⑧(干擾素卩-la)、BioMedicine的co干擾素、AmarilloBiosciences的口月良干擾素oc、以及InterMune的干擾素Y、干擾素t和干擾素Y-lb正在研制中。對(duì)于HCV，利巴韋林和干擾素-oc的聯(lián)合療法代表著目前最適的療法。聯(lián)合利巴韋林和PEG-IFN(見(jiàn)下文)在54-56%的患者中產(chǎn)生持續(xù)的病毒反應(yīng)(SVR)。SVR處理80%的2型和3型的HCV。(Walker，見(jiàn)上文)。不幸的是，這種聯(lián)合也產(chǎn)生副作用，這提出了臨床上的挑戰(zhàn)。抑郁、流感樣癥狀以及皮膚反應(yīng)與皮下施用的IFN-oc相關(guān)，且溶血性貧血與持續(xù)的利巴韋林治療相關(guān)。目前處于臨床前或者臨床研制中、治療丙型肝炎病毒感染的其它大分子化合物包括Schering-Plough的白細(xì)胞介素-10、Intemeuron的IP-SOl、Vertex的Merimebodib(VX-497)、RPI的HEPTAZYME、IdunPharma的IDN-6556、XTL的XTL-002、Chiron的HCV/MFS9、NABI的CIVACIR⑧(丙型肝炎免疫球蛋白)、SciClone的ZADAXIN⑥(胸腺素oc-l)、SciClone的胸腺素加上聚乙二醇化的干擾素、CEPLENE、Innogenetics的乾向E2的治療性疫苗、Intercell的治療性疫苗、Epimmune/Genencor的治療性疫苗、Merix的治療性疫苗、Tripep的治療性疫苗Chron-VacC。核酶靶向于HCVRNA。核酶是具有催化序列特異性切割RNA的核酸內(nèi)切酶活性的、短的天然存在的分子。備選方法是使用結(jié)合RNA、并且刺激RNA酶H介導(dǎo)的切割的反義寡核苷酸?，F(xiàn)在，已經(jīng)鑒定出許多進(jìn)行抗HCV療法的藥物研發(fā)的潛在分子靶點(diǎn)，其中包括但不限于NS2-NS3自身蛋白酶、NS3蛋白酶、NS3解旋酶和NS5B聚合酶。RNA依賴性RNA聚合酶對(duì)于單鏈、正義的RNA基因組復(fù)制是絕對(duì)必需的。這個(gè)酶已經(jīng)引起藥用化學(xué)家的極大興趣。NS5B聚合酶的核苷抑制劑可以用作不能鏈延伸的非天然底物，或者作為與天然核苷酸竟?fàn)幗Y(jié)合聚合酶的竟?fàn)幮砸种苿Ｒ惺规溄K止子的功能，核苷類(lèi)似物必須被細(xì)胞攝入，并且在體內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)槿姿狨?lái)竟?fàn)幘酆厦负塑账峤Y(jié)合位點(diǎn)。向三磷酸酯的轉(zhuǎn)變通常通過(guò)將額外的結(jié)構(gòu)需求傳遞給潛在的核苷聚合酶抑制劑的細(xì)胞激酶介導(dǎo)。不幸的是，這將對(duì)核苷作為HCV復(fù)制抑制劑的直接評(píng)估限制為能夠原位磷酸化的基于細(xì)胞的測(cè)試法。B=腺嘌呤胸苷,尿嘧啶,胞苷,鳥(niǎo)噪呤和次黃嘌呤2P-甲基核苷1由E.Walton等人(/.C&附.196912(2):306-309)首次描述。取代的核苷的酯已經(jīng)用在合成順序中作為被保護(hù)的碳7JC化合物中間體(E.Walton，GB12909654，1970年10月21日公開(kāi))。當(dāng)堿基為胞苷時(shí)，酰化的衍生物通常為2的二酯和三酯，其中氨基取代基被?；?E.Walton，見(jiàn)上文，J.L.Clark等人/7kTWC7^附.200548(17):5504-5508;R.E.Harry-O'kuru等人丄Org.CTie附.199762(6):1754-1759;J.-P.Sommadossi等人WO2004002422)。酯中間體一般為更可能提供結(jié)晶化合物的苯甲酸酯或苯乙酸酯。已經(jīng)報(bào)道了4-氨基-l-((2R，3R，4R，5R)-3，4-二羥基-5-羥曱基-3-甲基-四氫呋喃-2-基)-lH-嘧啶-2-酮衍生物的抗病毒活性(E.Walton,/M^/CAe附.見(jiàn)上文)。在2001年11月29日公開(kāi)的WO0190121中,J.-P.Sommadossi和P.Lacolla公開(kāi)并例證了式1和2的l，-烷基-以及2，-烷基核苷的抗-HCV聚合酶活性。在2001年12月6日公開(kāi)的WO01/92282中，J.-P.Sommadossi和P.Lacolla公開(kāi)并例證了用式1和2的l，-烷基-以及2，-烷基核苦治療黃8病毒屬(F/"WWr附")和痙疫病毒屬(尸e幼V/r附")。在2003年4月3日公開(kāi)的WO03/026675中，G.Gosselin公開(kāi)了治療黃病毒屬和痕疫病毒屬的4，-烷基核苷3。在2004年6月3日公開(kāi)的WO2004/046331中，J.-P.Sommadossi等人公開(kāi)了2，-分支的核苷以及黃病毒科突變。在2003年4月3日公開(kāi)的WO03/026589中，G.Gosselin等人公開(kāi)了用4，-修飾的核普治療丙型肝炎病毒的方法。在2005年2月3日公開(kāi)的WO2005009418中，R.Storer等人公開(kāi)了治療由黃病毒科(包括HCV)引起的疾病的嘌呤核苷類(lèi)似物。其它專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)了一些核苷類(lèi)似物治療丙型肝炎病毒感染的用途。在2001年5月10日公開(kāi)的WO01/32153中，R.Storer公開(kāi)了治療病毒疾病的核苷衍生物。在2001年8月23日公開(kāi)的WO01/60315中,H.Ismaili等人公開(kāi)了用核苷化合物治療或者預(yù)防黃病毒感染的方法。在2002年3月7日公開(kāi)的WO02/18404中，R.Devos等人公開(kāi)了治療HCV病毒的4，-取代的核苷酸。在2001年10月25日公開(kāi)的WO01/79246中，K.A.Watanabe公開(kāi)了治療病毒疾病的2，-或3，-羥曱基核苷化合物。在2002年4月25日公開(kāi)的WO02/32920和2002年6月20日公開(kāi)的WO02/48165中，L.Stuyver等人公開(kāi)了治療病毒疾病的核苷化合物。在2003年12月24日公開(kāi)的WO03/105770中，B.Bhat等人公開(kāi)了一系列用于治療HCV感染的碳環(huán)核苷衍生物。在2003年1月22日公開(kāi)的WO2004/007512中，B.Bhat等人公開(kāi)了抑制RNA依賴的RNA病毒聚合酶的核苷化合物。在這些出版物中公開(kāi)的核苷主要是2，-甲基-2'-羥基取代的核苷。在2002年7月25日公開(kāi)的WO2002/057425中，S.S.Carroll等人公開(kāi)了抑制RNA依賴的病毒聚合酶的核苷衍生物、以及治療HCV感染的方法。在2002年7月25日公開(kāi)的WO02/057287中，S.S.Carroll等人公開(kāi)了相關(guān)的2oc-曱基和2P-甲基核糖衍生物，其中堿基為任選取代的7H-吡咯并[2，3-d嘧咬基5。相同申請(qǐng)公開(kāi)了3P-曱基核苷的一個(gè)實(shí)例。S.S.Carroll等人(7.Oie附.2003278(14):11979-11984)公開(kāi)了通過(guò)4畫(huà)氨基-l-((2R，3R，4R，5R)-4-羥基-5-羥甲基-3-曱氧基-四氫呋喃-2-基)-lH-嘧啶-2-酮(5a)抑制HCV聚合酶。在2004年1月29日公開(kāi)的WO2004/00卯20中，D.B.Olsen等人公開(kāi)了一系列作為RNA依賴的RNA病毒聚合酶的抑制劑的硫代核苷衍生物。Emory大學(xué)題為"2'-氟代核苷，，的PCT公開(kāi)號(hào)WO99/43691公開(kāi)了一些2'-氟代核苷治療HCV的用途。Emory大學(xué)題為"2'-氟代核苷"的美國(guó)專(zhuān)利號(hào)6,348,587公開(kāi)了用于治療乙型肝炎、HCV、HIV以及異常細(xì)胞增殖的2'-氟代核苷家族。2'氟取代的兩種構(gòu)型都進(jìn)行了公開(kāi)。Eldrup等人(口頭講演V，丙型肝炎病毒，黃病毒科；關(guān)于抗病毒研究的第16次國(guó)際會(huì)議(OralSessionV，HepatitisCVirus,Flaviviridae;16thInternationalConferenceonAntiviralResearch)(2003年4月27日，Savannah,Ga.))描述了抑制HCV的2，修飾核苷的結(jié)構(gòu)活性關(guān)系。Bhat等人(口頭講演V，丙型肝炎病毒，黃病毒科；關(guān)于抗病毒研究的第16次國(guó)際會(huì)議(2003年4月27日，Savannah,Ga.);pA75)描述了可能作為HCVRNA復(fù)制抑制劑的核苷類(lèi)似物的合成以及藥物代謝動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。作者報(bào)道了2，-修飾的核苷在基于細(xì)胞的復(fù)制子測(cè)試中表現(xiàn)出強(qiáng)效的抑制活性。Olsen等人(口頭講演V，丙型肝炎病毒，黃病毒科；關(guān)于抗病毒研究的第16次國(guó)際會(huì)議(2003年4月27日，Savannah,Ga.)pA76)也描述了2'-修飾的核苷對(duì)HCVRNA復(fù)制的影響。已經(jīng)證實(shí)，單獨(dú)、以及聯(lián)合核苷抑制劑、以及聯(lián)合蛋白酶抑制劑的HIV逆轉(zhuǎn)錄酶的非核苷變構(gòu)抑制劑是有效的療法。已經(jīng)描述了一些類(lèi)型的非核苷HCVNS5B抑制劑，并且這些非核苷HCVNS5B抑制劑目前處于研制的多個(gè)階段，其中包括苯并咪唑(H.Hashimoto等人WO01/47833，H.Hashimoto等人WO03/000254，P.L.Beaulieu等人WO03/020240A2;P.L.Beaulieu等人US6,448,281Bl;P.L.Beaulieu等人WO03/007945Al);p引味(P.L.Beaulieu等人WO03/0010141A2);苯并瘞二溱(D.Dhanak等人WO01/85172Al;D.Dhanak等人WO03/037262A2;K.J.Duffy等人WO03/099801Al，D.Chai等人WO2004052312，D.Chai等人WO2004052313,D.Chai等人WO02/098424,J.K.Pratt等人WO2004/041818Al;J.K.Pratt等人WO2004/087577Al)、嚷汾(C.K.Chan等人WO02/100851);苯并瘞吩(D.C.Young和T.R.BaileyWO00/18231);P-酮基丙酮酸(S.Attamura等人US6,492,423Bl，A.Attamura等人WO00/06529);嘧咬(C.Garddli等人WO02/06246Al);嘧咬二酮(T.R.Bailey和D.C.YoungWO00/13708);三喚(K,H.Chung等人WO02/079187Al);繞丹寧衍生物(T.R.Bailey和D.C.YoungWO00/10573，J.C.Jean等人WO01/77091A2);2，4-二氧代吡喃(R.A,Love等人EP256628A2);苯丙氨酸衍生物(M.Wang等人《/Oie附.2003278:2489-2495)。NS3蛋白酶作為發(fā)現(xiàn)新的抗HCV療法的主要靶點(diǎn)浮現(xiàn)。在1998年5月28日公開(kāi)的WO98/22496中，M,R.Attwood等人公開(kāi)了蛋白酶基于機(jī)制的活性位點(diǎn)抑制劑(M.R.Attwood等人,Jwriw'm/C7^附&^);"wdC^附W/^m/^199910:259-273;M.R.Attwood等人，制備和使用氨基酸衍生物作為抗病毒劑(Preparationanduseofaminoacidderivativesasanti-viralagents),德國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)DE19914474)。在1998年4月30日公開(kāi)的W098/17679中，R.D.Tung等人公開(kāi)了NS3蛋白酶的基于機(jī)制的肽抑制劑。在1999年2月18日公開(kāi)的WO99/07734和1999年8月9日公開(kāi)的WO00/09543中，MLlinas-Bnmet等人公開(kāi)了HCV蛋白酶的肽抑制劑。在2000年10月12日公開(kāi)的WO00/59929中，Y.S.Tsantrizos等人公開(kāi)了為HCVNS3蛋白酶強(qiáng)效抑制劑的大環(huán)三肽。一系列來(lái)自Boehringer-Ingleheim的相關(guān)專(zhuān)利爿^開(kāi)了相關(guān)的蛋白酶抑制劑，并導(dǎo)致了三肽衍生物BILN2061的鑒定(M.Llinas-Brimet等人5Zorg.AfW,C7^附.丄e汰200010(20):2267陽(yáng)70;/AfWC7^附.200447(26):6584-94;/C7ie附.200447(7):1605-1608;C&附.200342(12):1356-60)。已經(jīng)^Hf了Bristol-MyersSquibb鑒定的其它三肽抑制劑，特別是在2003年12月4日公開(kāi)的WO03/099274、2004年4月22日公開(kāi)的WO2004/032827、2003年7月3日公開(kāi)的WO03/053349、2005年5月26日公開(kāi)的WO2005/046712、以及2005年6月9日公開(kāi)的WO2005/051410。在2004年8月26日公開(kāi)的WO2004/072234和2004年11月4日公開(kāi)的WO2004/093798中，EnantaPharmaceuticals公開(kāi)了其它的三肽蛋白酶抑制劑。在2005年4月28日公開(kāi)的WO2005/037214,L.M.Blatt等人也公開(kāi)了抑制HCVNS3蛋白酶的其它三肽衍生物。在2005年4月7日公開(kāi)的WO2005/030796中，S.Venkatraman等人公開(kāi)了HCVNS3絲氨酸蛋白酶的大環(huán)抑制劑。在2005年6月30日公開(kāi)的WO2005/058821中，F(xiàn).Velazquez等人公開(kāi)了HCVNS3/NS4a絲氨酸蛋白酶的抑制劑。在2002年6月20日公開(kāi)的WO02/48172中，Z.Zhu公開(kāi)了作為NS3蛋白酶抑制劑的二芳基肽。在2002年1月31日公開(kāi)的WO02歸87和WO02/08256中，A.Saksena等人公開(kāi)了HCVNS3蛋白酶的肽抑制劑。在2002年1月31日公開(kāi)的WO02/08251中，M.Lim-Wilby等人公開(kāi)了NS3蛋白酶的肽抑制劑。在1999年12月21日公開(kāi)的US6,004,933中，L.W.Spruce等人公開(kāi)了抑制半胱氨酸蛋白酶(包括HCV內(nèi)肽酶)的雜環(huán)肽衍生物。也正在研究基于非底物的NS3蛋白酶抑制劑例如2，4，6-三羥基-3-硝基-苯曱酰胺衍生物(SudoK.等人，55及C1997238:643-647;SudoK.等人Jw"v/m/C7^附^07"w^C7^附W/^ni/y;19989:186)，其中包括RD3-4082和RD3-4078,前者在酰胺上用14碳鏈進(jìn)行了取代，并且后者加工了對(duì)苯氧基苯基基團(tuán)。SCH68631(—種菲醌)是HCV蛋白酶抑制劑(ChuM.等人rem^WfwiLe汰199637:7229-7232)。在相同作者給出的另一實(shí)例中，從12真菌灰黃青霉(尸emc/肌M附gr/wo/w/v"附)分離的SCH351633被鑒定為蛋白酶抑制劑(ChuM.等人，C7^附，Ze汰19999:1949-1952)。通過(guò)設(shè)計(jì)基于大分子水蛭蛋白酶抑制劑(eglin)c的選擇性抑制劑達(dá)到了抗HCVNS3蛋白酶的納摩爾功效。從水蛭分離的水蛭蛋白酶抑制劑c是幾種絲氨酸蛋白酶的強(qiáng)效抑制劑，其中所述的絲氨酸蛋白酶例如灰色鏈霉菌gWw附)蛋白酶A和B、oc-糜蛋白酶、類(lèi)胰凝乳蛋白酶(chymase)和枯草桿菌蛋白酶(QasimM.A.等人，祝oc/^附/拚j;199736:1598-1607)。瘞唑烷衍生物在用NS3/4A融合蛋白質(zhì)和NS5A/5B底物的反相HPLC測(cè)試中顯示相關(guān)的抑制作用(SudoK,等人Jw,/Wm/及^^wr^199632:9-18)，尤其是具有用長(zhǎng)的烷基鏈進(jìn)行取代的稠合的肉桂酰部分的化合物RD-1國(guó)6250、RD46205和RD46193。瘞峻烷和N-苯甲酰苯胺由N.Kakiuchi等人在尸^B5"丄".1998421:217-220中、以及N.Takeshita等人/4w"/.祝oc&附.1997247:242-246中進(jìn)行鑒定。在ScheringCorporation于2002年1月31日公開(kāi)的WO02/08198和BristolMyersSquibb于2002年6月20日公開(kāi)的WO02/48157中公開(kāi)了作為HCV的NS3絲氨酸蛋白酶抑制劑的咪唑烷酮。在2002年6月20日公開(kāi)的WO02/48116中，P.Glunz等人公開(kāi)了NS3蛋白酶的嘧啶酮抑制劑?？笻CV的其它酶學(xué)靶點(diǎn)包括HCVIRES位點(diǎn)(內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn))和HCV解旋酶。IRES抑制劑已由Immusol，RigelPharmaceuticals(R803)和Anadys(ANA245和ANA246)報(bào)道。Vertex公開(kāi)了HCV解旋酶的抑制劑。能夠抑制抗性突變林的聯(lián)合療法已經(jīng)成為充分建立的抗病毒化學(xué)療法。本文公開(kāi)的核苷抑制劑可以與其它核苷HCV聚合酶抑制劑、非核苷的HCV聚合酶抑制劑、以及HCV蛋白酶抑制劑聯(lián)合。隨著其它類(lèi)型的HCV藥物例如病毒進(jìn)入抑制劑、解旋酶抑制劑、IRES抑制劑、核酶以及反義寡核苷酸的出現(xiàn)和研制，它們也將是聯(lián)合療法的良好候選。干擾素衍生物已經(jīng)成功地與利巴韋林和千擾素進(jìn)行了聯(lián)合，并且化學(xué)修飾的干擾素將用于與本文公開(kāi)的核苷聯(lián)合。本發(fā)明的目的在于提供治療感染了丙型肝炎病毒的宿主的新型化合物、方法和纟且合物。核苷衍生物通常是強(qiáng)效的抗病毒(例如HIV、HCV、單純皰疹病毒(We/T^s/柳/;/e;C、CMV)和抗癌的化學(xué)治療劑。不幸的是，它們的實(shí)際使用通常受兩因素限制。首先，不佳的藥物代謝動(dòng)力學(xué)性質(zhì)通常限制核普從消化道吸收和限制了核苷衍生物的細(xì)胞內(nèi)濃度，以及，第二，最適度以下的物理性質(zhì)限制了用來(lái)增強(qiáng)活性成分遞送的制劑選擇。Albert引入術(shù)語(yǔ)前體藥物來(lái)描述缺少內(nèi)在生物學(xué)活性、但能夠代謝轉(zhuǎn)化為活性藥物物質(zhì)的化合物(A.Albert,Se&"/veChapmanandHall,London,1951)。最近，對(duì)前體藥物進(jìn)行了綜述(P.Ettmayer等人，/.C7^附.200447(10):2393-2404;K.Beaumont等人，Cmit.Z>rwgAfe似6.20034:461-485;H.Bundgaard,前體藥物的設(shè)計(jì)多種官能團(tuán)和化學(xué)實(shí)體的生物可轉(zhuǎn)化的衍生物(Z)es/gwjProflfrwgs:5/orevw'6/edmVWves/or書(shū)中，H.Bundgaard(編著)ElsevierSciencePublishers,Amersterdam1985;G.M.Pauletti等人爿rfv.Z)e/Zv.及ev.199727:235-256;R.J.Jones和N.Bischofberger,顛/Wm/紐199527;1-15以及C.R.Wagner等人，AfW.及d/ev.200020:417-45)，并且這些參考文獻(xiàn)在此處以其整體引入作為參考。雖然轉(zhuǎn)化可以通過(guò)特異性酶通常為水解酶來(lái)催化，但活性化合物也可以通過(guò)非特異的化學(xué)方法再生?？伤幱们绑w藥物指的是在宿主中進(jìn)行代謝例如水解或氧化來(lái)形成本發(fā)明化合物且不形成毒理學(xué)問(wèn)題的片段的化合物。前體藥物的一般實(shí)例包括具有與活性化合物的功能部分連接的生物學(xué)不穩(wěn)定保護(hù)基團(tuán)的化合物。已經(jīng)利用對(duì)糖部分上羥基的烷基化、?；蛘咂渌H脂修飾來(lái)設(shè)計(jì)前體核苷酸(pronucleotides)。這些前體核苷酸可以在體內(nèi)水解或脫烷基化來(lái)產(chǎn)生活性化合物。限制口服生物利用度的因素通常是從胃腸道的吸收和通過(guò)腸壁和肝的首過(guò)(first-pass)排泄。最佳化的穿過(guò)胃腸道的跨細(xì)胞吸收需要D(7.4)大于0。然而，分配系數(shù)的最佳化不保證成功。前體藥物必須避免腸細(xì)胞中的主動(dòng)排出轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。在腸細(xì)胞中細(xì)胞內(nèi)的新陳代謝可以導(dǎo)致被動(dòng)運(yùn)輸、或者通過(guò)排出泵將代謝產(chǎn)物主動(dòng)運(yùn)輸回消化道內(nèi)腔。前體藥物必須設(shè)計(jì)為在到達(dá)靶細(xì)胞或受體之前避免在血液中的不希望的生物轉(zhuǎn)化。肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(PEPT蛋白質(zhì))為定位在腸和腎臟上皮細(xì)胞刷狀緣膜中的質(zhì)子偶聯(lián)的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，其在蛋白質(zhì)和氨基酸的吸收中發(fā)揮重要作用。這個(gè)發(fā)現(xiàn)即這些轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)能夠介導(dǎo)與氨基酸連接的藥物的攝入為藥物遞送提供了有力工具(T.Terada和K.Inui，Z)r"gAf""6.20045(1):85-94;E.DeClercq和H.J.Field,5n7./尸/^f附flco/.2006147(1):1-11)。發(fā)現(xiàn)抗皰滲的核苷無(wú)環(huán)鳥(niǎo)脊(acyclovir)和更昔洛韋(ganciclovir)當(dāng)連接于L-氨基酸酯時(shí)，通過(guò)PEPT蛋白質(zhì)有效地轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞(H.Han等人，尸/^r附.199815(8):1154-1159;C.U.Nielsen和B，Brodin，20034(5):373-388)。發(fā)現(xiàn)無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷和萬(wàn)乃洛韋(valacyclovir)的L-纈氨酸酯(L-valinylester)為PEPT攝入的底物(G.M.Friedrichsen等人/尸Aar附.200216(1-2):1-13;A.Guo等人/尸/^r附.五x/;.7T^r.1999289(32):29509-29514;M.E.Ganapathy等人，祝oc/iem.J,V/^".及仏CV7/wm"w，1998246(2):470-475)。在2004年1月8日公開(kāi)的WO2004/003000中，J,P.Sommadossi等人公開(kāi)了l'-、2'-、3'-和4'-取代的P-D和P-L核苷的2'-和3'前體藥物。在2004年1月8日公開(kāi)的WO2004/002422中，公開(kāi)了治療黃病毒科感染的2'-C-甲基-3'-0-纈氨酸酯呋喃核糖基(ribofuransyl)胞苷。Idenix報(bào)道了相關(guān)化合物NM283的臨床試驗(yàn)，其中認(rèn)為NM283為1的纈氨酸酯4(B=胞嘧淀)。在2004年1月8日公開(kāi)的WO2004/002999中，J.-P.Sommadossi等人公開(kāi)了治療黃病毒感染(其中包括HCV感染)的、l'、2'、3'或4'分支的核苷的一系列2'或3'前體藥物。在2004年6月24日公開(kāi)的WO2004/052899中，R.Storer等人公開(kāi)了制備2|3-甲基-胞嘧"定的3'-0-纈氨?；?valinyl)衍生物的方法。在2004年7月15日公開(kāi)的WO2004/058792中，R.Storer等人公開(kāi)了制備3'-0-纈氨酰基衍生物的一步法。在2005年1月25日發(fā)行的US6,846,810中，J.A.Martin等人公開(kāi)了用作治療HCV感染患者的作為前體藥物的4'-疊氮基-胞嘧啶的酰基衍生物。在美國(guó)系列號(hào)11/635898中，K.Sarma等人公開(kāi)了用于治療HCV感染患者的2'-脫氧-2'-0^氟代-2'-卩-甲基-胞苷的二?；苌铩Ｔ?006年2月23日公開(kāi)的美國(guó)公開(kāi)號(hào)2006/00408卯中，J.A.Martin等人公開(kāi)了用于治療HCV感染患者的4'-疊氮基-阿糖胞苷及其前體藥物。本發(fā)明涉及4-氨基-l-((2R，3R，4R，5R)-3，4-二羥基-5-羥甲基-3-甲基-四氫呋喃-2-基)-l/T-嘧啶-2-酮的新型二-酰基衍生物(1，也稱為(2R)-2P-甲基-胞苷)及其K合物、溶劑合物和酸加成鹽其中，R'獨(dú)立地選自C2.s未分支或者分支的烷基、Cw未分支或者分支的烯基、C3-S環(huán)烷基和C2-s鹵代烷基。本發(fā)明的化合物用于治療HCV介導(dǎo)的病癥。本發(fā)明進(jìn)一步包括在單獨(dú)或聯(lián)合療法中用本發(fā)明的化合物治療HCV感染患者的方法、以及包含所述化合物的藥物組合物。本發(fā)明進(jìn)一步涉及制備二?；苌锏姆椒?。已經(jīng)公開(kāi)了4-氨基-l-((2R，3R，4R，5R)-3，4-二羥基-5-羥甲基-3-曱基-四氫呋喃-2-基)-1//-嘧淀-2-酮1-4的HCV聚合酶抑制活性(J,P.Sommadossi等人，Ji丄X)。在臨床應(yīng)用中，期望在最小化病毒突變可能性的條件下提供高血液水平的1-4來(lái)快速抑制HCV聚合酶、并因此降低病毒水平，以及來(lái)篩選抗性菌林。用母體核苷很難達(dá)到充分高的水平。前體藥物能夠改善化合物的藥物代i射動(dòng)力學(xué)和物理學(xué)性質(zhì)，并因此最佳化生物利用度。纈氨酸酯1-5已經(jīng)作為1-4的前體藥物進(jìn)行了研究。雖然前體藥物候選物看起來(lái)容易想象，但鑒定具有適當(dāng)物理化學(xué)和藥物代謝動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的化合物、體內(nèi)轉(zhuǎn)換以及安全特性是需要大量試驗(yàn)的復(fù)雜、多學(xué)科問(wèn)題。鑒定經(jīng)口遞送的前體藥物的障礙包括，在施用后快速并且有效釋放活性部分的同時(shí)維持足夠的水溶性、親脂性以及化學(xué)穩(wěn)定性。必須最小化前體藥物的非酯酶代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白介導(dǎo)的清除(K.Beaumont等人C"/r.Z^"gM""6.20034(6):461-485)。同樣地，細(xì)胞色素P4so酶的抑制作用或誘導(dǎo)作用能夠產(chǎn)生不希望的藥物-藥物相互作用，這是我們不希望的。現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)，I-4的二酯是優(yōu)良的前體藥物，并且提供實(shí)質(zhì)上更高血液水平的1-4。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了根據(jù)式I的化合物，其中R'如本文上文定義。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了根據(jù)式I的化合物，其中R1為乙基、正丙基、異丙基、正丁基或異丁基。此外，在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了根據(jù)式I的化合物，其中W為乙基或異丙基。此外，在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了根據(jù)式I的化合物，其中W為異丙基、并且化合物為鹽酸鹽、甲磺酸鹽、半硫酸鹽(hemisulfate)或石充酸鹽。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案為如上定義的根據(jù)式I的化合物或其水合物、溶劑合物或酸加成鹽作為治療由HCV介導(dǎo)的疾病的抗病毒劑的用途。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案為如上定義的根據(jù)式I的化合物或其水合物、溶劑合物或酸加成鹽作為抗病毒劑與至少一種免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑和/或至少一種抗病毒劑聯(lián)合地治療由HCV介導(dǎo)的疾病的用途。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是如上定義的根據(jù)式I的化合物或其水合物、溶劑合物或酸加成鹽用于制備治療由HCV介導(dǎo)的疾病的藥物的用途。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是如上定義的根據(jù)式I的化合物或其水合物、溶劑合物或酸加成鹽與至少一種免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑和/或至少一種抑制HCV復(fù)制的抗病毒劑聯(lián)合來(lái)制備治療由HCV介導(dǎo)的疾病的藥物的用途。此外，在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了治療由HCV介導(dǎo)的疾病的方法，其中包括向需要其的患者施用治療有效量的根據(jù)式I的化合物或其水合物、溶劑合物或酸加成鹽，其中W選自Cw未分支或者分支的烷基、C2—5未分支或者分支的烯基、C2_5卣代烷基和Cw環(huán)烷基。此外，在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了治療由HCV介導(dǎo)的疾病的方法，其中包括向需要其的患者施用0.1-10g/天的根據(jù)式I的化合物或其7jC合物、溶劑合物或酸加成鹽，其中W選自(^2.5未分支或者分支的烷基、C2-s未分支或者分支的烯基、(:2.5閨代烷基和<:3_5環(huán)烷基。此外，在另一實(shí)施方案中，劑量為在0,5-7g/天之間，并且在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，劑量為在1.0-6.0g/天之間。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了治療由HCV介導(dǎo)的疾病的方法，所述方法包括向需要其的患者共施用治療有效量的根據(jù)式I的其中R1選自<:2.5未分支或者分支的烷基、Cw未分支或者分支的烯基、(:2.5囟代烷基和C3_5環(huán)烷基的化合物或其7K合物、溶劑合物或酸加成鹽和治療有效量的至少一種免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑和/或至少一種抑制HCV復(fù)制的抗病毒劑。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了治療由HCV介導(dǎo)的疾病的方法，所述方法包括向需要其的患者共施用治療有效量的根據(jù)式I的其中R1選自<:2.5未分支或者分支的烷基、(:2.5未分支或者分支的烯基、<:2_5卣代烷基和C3_5環(huán)烷基的化合物或其水合物、溶劑合物或酸加成鹽和治療有效量的至少一種免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑，其中所述的免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑為干擾素、白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子或者集落刺激因子。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了治療由HCV介導(dǎo)的疾病的方法，所述方法包括向需要其的患者共施用治療有效量的根據(jù)式I的其中R1選自C2-s未分支或者分支的烷基、C2，5未分支或者分支的烯基、Cw卣代烷基和C3_s環(huán)烷基的化合物或其7JC合物、溶劑合物或酸加成鹽和治療有效量的至少一種免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑，其中所述的免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑為干擾素或者化學(xué)衍生的干擾素。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了治療由HCV介導(dǎo)的疾病的方法，所述方法包括向需要其的患者共施用治療有效量的根據(jù)式I的其中R1選自<:2.5未分支或者分支的烷基、C2-s未分支或者分支的烯基、<:2-5離代烷基和C3_5環(huán)烷基的化合物或其水合物、溶劑合物或酸加成鹽和治療有效量的至少一種其它抗病毒化合物。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了治療由HCV介導(dǎo)的疾病的方法，所述方法包括向需要其的患者共施用治療有效量的根據(jù)式I的其中R1選自(:2.5未分支或者分支的烷基、Cw未分支或者分支的烯基、(:2.5卣代烷基和C3_5環(huán)烷基的化合物或其水合物、溶劑合物或酸加成鹽和治療有效量的至少一種其它抗病毒化合物，其中所述的抗病毒化合物為HCV蛋白酶抑制劑、另一種核苷HCV聚合酶抑制劑、非核苷HCV聚合酶抑制劑、HCV解旋酶抑制劑、HCV51發(fā)酶抑制劑或HCV融合抑制劑。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了包含與至少一種可藥用載體、稀釋劑或賦形劑混合的、根據(jù)式I的其中RJ選自Cw未分支或者分支的烷基、C2_5未分支或者分支的烯基、C^卣代烷基和C3—5環(huán)烷基的化合物或其7jC合物、溶劑合物或酸加成鹽的藥物組合物。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了制,備根據(jù)式I的其中Ri選自C2_5未分支或者分支的烷基、C2-s未分支或者分支的烯基、C2-5卣代烷基和C3.5環(huán)烷基的化合物或其水合物、溶劑合物或酸加成鹽的方法，所述方法包括下文列舉以及在實(shí)施例中例證的步驟(/)-(v)。所述方法包括在堿性含水有機(jī)介質(zhì)中處理I,其中所述堿性含水有機(jī)介質(zhì)可以是在存在DMAP和足夠的堿來(lái)維持溶液的pH至少為大約7.5時(shí)，與本文定義的?；瘎﹦蛸|(zhì)或者雙相性。本方法允許?；饔?，但不伴隨與雜環(huán)堿的反應(yīng)。本發(fā)明進(jìn)一步的實(shí)施方案為在堿性反應(yīng)條件下進(jìn)行核苷I的選擇性O(shè)-?；饔脕?lái)提供O-?；塑誌I的方法其中W選自C2—5未分支或者分支的烷基、Cw未分支或者分支的烯基、Cw環(huán)烷基、Cw卣代烷基，以及任選取代的苯基，所述方法包括下列步驟(/)在多相的含水溶劑混合物中溶解II和DMAP，并添加水性堿來(lái)調(diào)節(jié)pH為大約7.5至大約12;任選地加入足夠的飽和水性NaCI來(lái)產(chǎn)生二相性的反應(yīng)混合物；(///)添加?；瘎┖皖~外的堿，足以維持pH為大約7.5至大約12;(/v)監(jiān)測(cè)反應(yīng)，并在轉(zhuǎn)化達(dá)到滿意水平時(shí)停止加入所述酰化劑和所述堿；(v)任選地將O-酰基核苷接觸可藥用酸來(lái)形成O-?；塑盏乃峒映甥}。本文所用詞語(yǔ)"一，，或"一種，，實(shí)體指的是一種或多種實(shí)體；例如一種化合物指的是一種或者多種化合物或者至少一種化合物。諸如此類(lèi)，術(shù)語(yǔ)"一個(gè)"、"一個(gè)或多個(gè)"、以及"至少一個(gè)"在本文可以互換使用。詞語(yǔ)"如上文定義"指的是說(shuō)明書(shū)提供的第一個(gè)定義。術(shù)語(yǔ)"獨(dú)立地，，在本文用來(lái)表示應(yīng)用于任意一種情況中的變量，而不考慮在相同化合物中存在或者不存在具有相同或不同定義的變量。因此，在化合物中，當(dāng)R1出現(xiàn)兩次并且定義為"獨(dú)立地選自<:2_5未分支或者分支的烷基、Cw未分支或者分支的烯基、Cw環(huán)烷基和C2—5卣代烷基"時(shí)，兩個(gè)W可以是相同的，或者兩個(gè)W可以具有不同含義。如本文所用的術(shù)語(yǔ)"任選的"或"任選地"表示其后描述的事件或情形可以但不需要出現(xiàn)，并且該描述包括事件或情形出現(xiàn)的情況和不出現(xiàn)的情況。術(shù)語(yǔ)"獨(dú)立地"在本文用來(lái)表示應(yīng)用于任意一種情況中的變量，而不考慮在相同化合物中存在或者不存在具有相同或不同定義的變量。因此，在化合物中，當(dāng)R1出現(xiàn)兩次并且定義為"獨(dú)立地選自Cw未分支或者分支的烷基、C2-5未分支或者分支的烯基、Q-5環(huán)烷基和C2-5商代烷基"時(shí)，兩個(gè)R1可以相同或者彼此不同。術(shù)語(yǔ)"烯基，，在本文用來(lái)表示具有2-10個(gè)碳原子且具有1個(gè)或者2個(gè)烯屬雙鍵[優(yōu)選一個(gè)烯屬雙鍵I的未被取代的烴鏈。如本文所用的"<:2_5烯基"指的是由2-5個(gè)碳組成的烯基。實(shí)例為乙烯基、l-丙烯基、2-丙烯基(烯丙基)或2-丁烯基(巴豆基)。如本文所用，術(shù)語(yǔ)"烷基"表示含有l(wèi)-10個(gè)碳原子的未分支或分支的鏈、飽和的、單價(jià)烴殘基。如本文所用，"Qr5烷基"指的是由2-5個(gè)碳組成的烷基。烷基的實(shí)例包括但不限于乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基或戊基、異戊基、新戊基。如本文所用，術(shù)語(yǔ)"環(huán)烷基"表示含有3-8個(gè)碳原子的飽和碳環(huán)，即環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基或環(huán)辛基。如本文所用，"C3_5環(huán)烷基"指的是在碳環(huán)中由3-5個(gè)碳組成的環(huán)烷基。如本文所用，術(shù)語(yǔ)"卣代烷基"表示如上文定義的未分支或分支的鏈烷基，其中l(wèi)個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或多個(gè)氫原子被卣素取代。如本文所用，"C2-s鹵代烷基"指的是由2-5個(gè)碳和1-11個(gè)卣素取代基組成的卣代烷基。實(shí)例為l-氟代曱基、l-氯代曱基、l-溴代甲基、l-碘代甲基、三氟甲基、三氯曱基、三溴曱基、三捵甲基、l-氟代乙基、l-氯代乙基、l-溴代乙基、1-碘代乙基、2-氟代乙基、2-氯代乙基、2-溴代乙基、2-碘代乙基、2，2-二氯乙基、3-溴代丙基或2,2,2-三氟乙基。如本文所用，術(shù)語(yǔ)"二-酰基"指的是如本文所述衍生的核苷化合物，其中3'-和5'-羥基為酯-0C(O)R1,其中R1如權(quán)利要求1定義。如本文所用，術(shù)語(yǔ)"酰化劑"指的是酐或者?；?。如本文所用，術(shù)語(yǔ)"酐"指的是通用結(jié)構(gòu)為Wc(0)-0-C(0)I^的化合物，其中W如權(quán)利要求1定義。如本文所用，術(shù)語(yǔ)"?；?指的是通用結(jié)構(gòu)為RC(0)X的化合物，其中X為鹵素。術(shù)語(yǔ)"酰基咪唑"指的是通用結(jié)構(gòu)為R'C(0)X的化合物，其中X為N-咪唑基。如本文所用，術(shù)語(yǔ)化合物的"活化的衍生物"指的是使化合物在預(yù)期化學(xué)反應(yīng)中活化的最初化合物的瞬時(shí)活性形式，其中所述的最初化合物僅為適當(dāng)活性或者無(wú)活性?；罨饔猛ㄟ^(guò)在分子內(nèi)形成具有比最初化合物更21高能量的^f汙生物或化學(xué)基來(lái)完成，這使得活化的形式更加容易與另一試劑反應(yīng)。在本發(fā)明的上下文中，羧基的活化作用尤為重要，并且在下文更加詳細(xì)地描述了活化羧基的相應(yīng)活化劑或基團(tuán)。本發(fā)明特別的興趣在于羧酸酐和羧酸的酰氯。如本文所用，詞語(yǔ)"多相的含水溶劑混合物"指的是產(chǎn)生兩相或多相混合物的水和有機(jī)共溶劑的混合物。這種多相的含水溶劑混合物可以得自具有有限水溶性的共溶劑，或者可以調(diào)整水性組分的離子強(qiáng)度來(lái)限制在水相中共溶劑的溶解性。術(shù)語(yǔ)"堿金屬氫氧化物"指的是式為MOH的化合物，其中M為鋰、鈉、鉀或銫，"堿金屬碳酸氫鹽"指的是化合物MHC03,其中M為鈉或鉀，并且"堿金屬碳酸鹽"指的是化合物M2C03，其中M為鈉或鉀。本領(lǐng)域技術(shù)人員理解能用來(lái)維持pH在預(yù)期范圍的其它堿，并且其它堿在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。本申請(qǐng)中使用的縮寫(xiě)包括乙?；?Ac)、大氣(Atm)、高壓液相色語(yǔ)(HPLC)、甲基(Me)、乙腈(MeCN)、丁基(Bu)、曱醇(MeOH)、熔點(diǎn)(mp)、MeSOH甲磺?；騇s)、質(zhì)譜(ms)、曱基叔丁基醚(MTBE)、二氯甲烷(DCM)、丙基(Pr)、磅每平方英寸(psi)、吡咬(pyr)、室溫rt或RT、N，N-二甲基乙酰胺(DMA)、4-N，N-二甲基氨基吡啶(DMAP)、三乙胺(Et3N或TEA)、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亞砜(DMSO)、薄層層析(TLC)、乙酸乙酯(EtOAc)、四氫呋喃(THF)、乙醚(EtzO)、乙基(Et)、4-Me-C6H4S02-或曱苯磺?；?Ts)、異丙基(Z-Pr)、乙醇(EtOH)。當(dāng)用于烷基部分時(shí)，包括字首法正(n)、異(Z-)、仲(mc-)、叔(teW-)和新("")在內(nèi)的常規(guī)命名法具有其習(xí)慣含義。(J.Rigaudy和D.P.Klesney，iVo附ewc/a似i^,wOgflmcC7^/w^y，IUPAC1979PergamonPress,Oxford.)。表1給出了本發(fā)明包括、并且在本發(fā)明范圍內(nèi)的代表性化合物的實(shí)例。提供下列這些實(shí)施例和制劑來(lái)使本領(lǐng)域技術(shù)人員更加清楚地理解和使用本發(fā)明。它們不理解為限制本發(fā)明的范圍，而僅僅用作例證及其代表。一般而言，本申請(qǐng)所用命名法基于產(chǎn)生IUPAC系統(tǒng)命名法的BdlsteinInstitute計(jì)算機(jī)系統(tǒng)AUTONOMTMv.4.0。如果在所述結(jié)構(gòu)和該結(jié)構(gòu)給定的名稱之間存在偏差，那么以所述結(jié)構(gòu)為準(zhǔn)。此外，如果結(jié)構(gòu)的立體化學(xué)或部分結(jié)構(gòu)沒(méi)有用例如加粗或虛線標(biāo)識(shí)，那么結(jié)構(gòu)或者部分結(jié)構(gòu)理解為包含其所有立體異構(gòu)體。表l中顯示了這些環(huán)結(jié)構(gòu)的計(jì)數(shù)系統(tǒng)。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>AUC(cyt)為母體胞苷核苷1-5曲線下的面積母體核苷為了進(jìn)一步評(píng)估在人受體中的可能作用方式，對(duì)推定的前體藥物評(píng)估了通過(guò)Caco-2細(xì)胞的運(yùn)輸。Caco-2細(xì)胞通常用來(lái)評(píng)估分子的潛在吸收/通透性(G.Gaviraghi等人，在戶/ra簡(jiǎn)flrcoA:Z""/c0/^附/z"&》wrese"rc/r.^/o/6>g/ai/，JPAfl,附flcoA:,Vie,Zc做"0附/7"toAVw"http://S^m&g/es.—書(shū)中，B.Testa等人編輯，WileyInterscienceVCH,Zurich2001pp3-14)。發(fā)現(xiàn)1-4的C2-4烷基二酯的Caco-2通透性是可以接受的。本發(fā)明的化合物可以通過(guò)在水性有機(jī)溶劑中?；?-4而方便地一步制備。溶劑可以是同質(zhì)的水性溶液或者兩相溶液。水性有機(jī)溶劑的pH通過(guò)加入堿中和?；饔卯a(chǎn)生的酸來(lái)維持在高于7.5。堿可以是堿或堿金屬氫氧化物或叔胺。反應(yīng)在存在DMAP下進(jìn)行，其中DMAP在本領(lǐng)域已知為?；饔玫拇呋瘎１痉椒ǖ膬?yōu)點(diǎn)是可以獲得預(yù)期產(chǎn)物而不?；s環(huán)堿。不需要保護(hù)基團(tuán)，這排除了對(duì)保護(hù)/脫保護(hù)步驟的需要。該方法在所附實(shí)施例中進(jìn)行了描述。本發(fā)明的化合物可以制劑成非常多的經(jīng)口施用劑量形式和載體。經(jīng)口施用可以是片劑、包衣片劑、硬明膠膠嚢和軟明膠膠嚢、溶液、乳劑、糖漿劑或懸浮液形式。在其它施用途徑中，當(dāng)通過(guò)栓劑施用時(shí)，本發(fā)明的化合物是有效的。最方便的施用方式是通常的經(jīng)口施用，其中使用可以根據(jù)疾病的嚴(yán)重性和患者對(duì)抗病毒藥物的反應(yīng)進(jìn)行調(diào)整的常規(guī)的日劑量方案。本發(fā)明的化合物及其可藥用鹽可以與一種或多種常規(guī)賦形劑、載體或稀釋劑一起放置成為藥物組合物和單位劑量的形式。藥物組合物和單位劑量形式可以包含常規(guī)比例的常規(guī)成分，具有或不具有額外的活性化合物或成分，并且單位劑量形式可以包含與所用預(yù)期日劑量范圍同量的任意合適有效量的活性成分。藥物組合物可以采用固體例如片劑或填充的膠嚢、半固體、粉末、持續(xù)釋放的制劑，或者液體例如溶液、懸浮液、乳劑、酏劑或口服用途的填充膠嚢，或者用于直腸或陰道施用的栓劑形式，或者腸胃外用途的無(wú)菌注射溶液。一般的制劑包含大約5%至大約95%的活性化合物(W/W)。術(shù)語(yǔ)"制劑"或"劑量形式"旨在既包括活性化合物的固體制劑也包括活性化合物的液體制劑，并且本領(lǐng)域技術(shù)人員理解，活性成分可以根據(jù)靶器官或組織和預(yù)期劑量以及藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)而在不同制劑中存在。本文所用術(shù)語(yǔ)"賦形劑，，指的是在制備藥物組合物中有用的、通常安全、無(wú)毒并且既非生物學(xué)上不期望也非其它方面不期望的化合物，并且包括在獸醫(yī)用途以^A藥物用途上都可接受的賦形劑。可以僅施用本發(fā)明的化合物，但通?？紤]預(yù)期的施用途徑和標(biāo)準(zhǔn)的藥物實(shí)踐而在與一種或多種適當(dāng)?shù)乃幬镔x形劑、稀釋劑或載體的混合后施用?；钚猿煞值?可藥用鹽"形式最初也可以對(duì)活性成分賦予非鹽形式?jīng)]有的期望的藥物代謝動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，并且甚至可能積極地影響活性成分在其體內(nèi)治療活性方面的藥物代謝動(dòng)力學(xué)。名詞化合物的"可藥用鹽"表示可藥用并且具有母體化合物預(yù)期藥理學(xué)活性的鹽。此類(lèi)鹽包括(l)與無(wú)機(jī)酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等或者與有機(jī)酸例如羥乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、竿果酸、馬來(lái)酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、3-(4-羥基苯甲?；?苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、曱磺酸、乙磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羥基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲M酸、樟腦磺酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、水楊酸、己二烯二酸等形成的酸加成鹽。應(yīng)當(dāng)理解的是，所有談及的可藥用鹽都包括同一酸加成鹽如本文定義的溶劑加成形式(溶劑合物)或結(jié)晶形式(多晶型物)。固體形式制劑包括粉劑、片劑、丸劑、膠嚢劑、栓劑和可分散顆粒劑。固體載體可以是一種或多種也可以起稀釋劑、調(diào)味劑、助溶劑、潤(rùn)滑劑、懸浮劑、粘合劑、防腐劑、片劑崩解劑或裝膠嚢材料作用的物質(zhì)。在粉劑中，載體通常為細(xì)微分開(kāi)的固體，其是含細(xì)微分開(kāi)的活性成分的混合物。在片劑中，活性成分通常以適當(dāng)比例與具必需的結(jié)合能力的栽體混合，并壓制成預(yù)期形狀和大小。合適載體包括但不限于碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石、糖、乳糖、果膠、糊精、淀粉、明膠、黃蓍、曱基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點(diǎn)蠟、可可脂等。除了活性成分外，固體形式制劑還可以包含著色劑、香料、穩(wěn)定劑、緩沖液、人造和天然的增甜劑、分散劑、增稠劑、增溶劑等。液體制劑也適合經(jīng)口施用，其包括乳劑、糖漿劑、酏劑和水懸浮液的液體制劑。這些包括旨在使用前不久才轉(zhuǎn)變?yōu)橐后w形式制劑的固體形式制劑。乳劑可以在溶液例如含水丙二醇溶液中制備，或者可以包含乳化劑，例如卵磷脂、失水山梨糖醇單油酸酯(sorbitanmonooleate)或阿拉伯膠。水懸浮液可以通過(guò)在含粘性物質(zhì)例如天然的或合成的樹(shù)膠、樹(shù)脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和其它熟知的助懸劑的水中^:經(jīng)細(xì)微分開(kāi)的活性成分來(lái)制備?？梢詫⒈景l(fā)明的化合物制劑為用作栓劑施用。首先熔化低熔點(diǎn)蠟例如脂肪酸甘油酯的混合物或可可脂，并將活性成分例如通過(guò)攪拌進(jìn)行均勻分散。然后將熔化的勻質(zhì)混合物傾倒進(jìn)入合適大小的模具，隨后冷卻并凝固?？蓪⒈景l(fā)明的化合物制劑為用于陰道施用。除了活性成分外，還包含本領(lǐng)域已知的適當(dāng)載體如陰道栓劑、塞劑、乳劑、凝膠劑、糊劑、發(fā)泡劑或噴霧劑。Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy1995，E.W.Martin編輯，Mack出版公司，第19版，伊斯頓，賓西凡尼亞一書(shū)中描述了合適的制劑和藥用栽體、稀釋劑和賦形劑。熟練的制劑科學(xué)家可以在說(shuō)明書(shū)教義之內(nèi)改變制劑來(lái)提供許多針對(duì)特定施用途徑的制劑，而不使本發(fā)明組合物不穩(wěn)定或影響其治療效果。例如通過(guò)輕微改變(例如形成鹽)可輕易地實(shí)現(xiàn)對(duì)本化合物的修飾來(lái)使其更加可溶于水或其它載體，這為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知。本領(lǐng)域技術(shù)人員還熟知，對(duì)特定化合物的施用途徑和劑量方案進(jìn)行改變以便本化合物的藥物代謝動(dòng)力學(xué)在患者中達(dá)最大有利效果。本文所用術(shù)語(yǔ)"治療有效量"表示在個(gè)體中減輕疾病癥狀所需要的量。在每種特定情況中，都將劑量調(diào)整為個(gè)體需要量。劑量可以在大范圍內(nèi)變化，這取決于很多因素，例如待治療疾病的嚴(yán)重性、患者的年齡和總體健康狀態(tài)、患者正在接受治療的其它藥物、施用途徑和形式以及相關(guān)醫(yī)生的偏愛(ài)和經(jīng)驗(yàn)。對(duì)于經(jīng)口施用，大約0.1至大約10g/天的日劑量在單一療法中和/或在聯(lián)合療法中是適當(dāng)?shù)?。?yōu)選的日劑量在大約0.5至大約7.5g/天之間、更加優(yōu)選1.5至大約6.0g/天之間。一般地，治療以大的起始"負(fù)荷劑量(loadingdose)"開(kāi)始來(lái)快速降低或者消除病毒，然后減少劑量至足以防止感染復(fù)發(fā)的水平。本文所述治療疾病的普通技術(shù)人員能夠不需要過(guò)多實(shí)驗(yàn)而僅依賴個(gè)人知識(shí)、經(jīng)驗(yàn)和本發(fā)明的公開(kāi)確定本發(fā)明化合物對(duì)所給疾病和患者的治療有效量。治療功效可以通過(guò)肝功能和肝臟代謝功能測(cè)試確定，其中所述的肝功清蛋白質(zhì)(例如白蛋白、凝固因子、堿性磷酸酶、轉(zhuǎn)氨酶(例如丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶)、5，-核苷酶、y-谷氨?；D(zhuǎn)肽酶等)、膽紅素的合成、膽固醇的合成、以及膽汁酸的合成，并且其中所述的肝臟代謝功能測(cè)試包括但不限于糖代謝、氨基酸和氨代謝。備選地，治療功效可以通過(guò)檢測(cè)HCV-RNA來(lái)監(jiān)測(cè)。這些結(jié)果使得可以優(yōu)化劑量。在本發(fā)明的實(shí)施方案中，活性化合物或鹽可以與另一種抗病毒劑例如利巴韋林、另一種核苷HCV聚合酶抑制劑、另一種HCV非核苷聚合酶抑制劑、HCV蛋白酶抑制劑、HCV解旋酶抑制劑或HCV融合抑制劑組合施用。當(dāng)活性化合物或其衍生物或鹽與另一種抗病毒劑組合施用時(shí)，活性會(huì)超過(guò)母體化合物。當(dāng)治療為聯(lián)合療法時(shí)，該施用可以與核苷衍生物的施用同時(shí)或相繼進(jìn)行。因此，本文所用"同時(shí)施用"包括在同一時(shí)間或者在不同時(shí)間施用藥劑。在同一時(shí)間施用兩種或多種藥劑可以通過(guò)包含兩種或多種活性成分的單一制劑或者通過(guò)基本同時(shí)施用兩種或多種具單一活性藥劑的劑量形式實(shí)現(xiàn)。應(yīng)當(dāng)理解的是，本文談及治療時(shí)擴(kuò)展至預(yù)防和治療存在的疾病。此外，如本文所用的術(shù)語(yǔ)"治療"HCV感染，也包括治療或預(yù)防與HCV感染關(guān)聯(lián)或由HCV感染介導(dǎo)的疾病或者病癥或其臨床癥狀。實(shí)施例1丙酸(21^，311，411，511)-5-(4-氨基-2-氧代-2好-嘧啶-1-基)-4-羥基-4-甲基-3-丙酸基-四氫呋喃-2-基甲基酯；鹽酸鹽9(1-1)向在THF(15mL)和H20(7mL)中的1-4(1.0g，3.89mmol)溶液中加入TEA(4.72g，33.87mol),并將反應(yīng)混合物冷卻至5'C。在將反應(yīng)混合物的溫度維持在0。C以下的同時(shí)，緩慢加入丙酰氯(1.44g，15.45mmol)。通過(guò)hplc監(jiān)測(cè)反應(yīng)，并在最初加入結(jié)束之后，在仍然存在單丙酸酯時(shí)，加入額外的丙酰氯(0.72g，7.77mmo1)，并在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過(guò)夜。將反應(yīng)混合物冷卻至0'C，并將pH用濃HC1調(diào)整為大約6.5。將混合物在EtOAc(30mL)和H20(15mL)之間分配，并分離各相。用EtOAc(2x25mL)提取7JC相，并用27稀釋的鹽水(2x20mL)洗滌合并的有機(jī)提取物、將其干燥(Na2S04)、過(guò)濾、并在真空中濃縮來(lái)提供作為油的游離堿。將油溶解在IPA(5mL)中，用HC1在IPA中處理(lmL的大約4NHC1),并在真空中濃縮。將殘余物從IPA/MTBE/乙酸異丙酯(1:3:15)中再結(jié)晶，過(guò)濾所得結(jié)晶，用乙酸異丙酯洗滌，并在真空中在80。C干燥來(lái)提供0.95g(60.1。/o)的1-1。實(shí)施例2異丁酸(2R，3R，4R,5R)-5-(4-氨基-2-氧代-2好-嘧啶-l-基)-4-羥基-3-異丁酰氧基-4-曱基-四氫呋喃-2-基甲基酯；鹽酸鹽(I-2)向1-4(0.50g，1.94mmol)、DMAP(0.026g，0.21mmol)、THF(8mL)和H20(4mL)的溶液中加入TEA(2.36g，16.93mmol)，并將反應(yīng)混合物冷卻至大約-5。C。以允許將反應(yīng)溫度維持在0。C以下的速率逐滴加入異丁酰氯(0.93mL，8.75mmol)。通過(guò)HPLC-MS監(jiān)測(cè)反應(yīng)。加入額外份數(shù)的0.41g和0.21g異丁酰氯(共1.55g，14.58mmol)來(lái)除去單?；碑a(chǎn)物(通過(guò)hpk測(cè)定)。反應(yīng)物在RT攪拌過(guò)夜，冷卻至0'C，并用濃HCl將pH調(diào)整為pH6.5。將混合物在EtOAc(30mL)和H20(15mL)之間分配，并分離相。用EtOAc(2xl5mL)提取水相，并接下來(lái)依次用稀釋的鹽水(20mL)、稀釋的NaHCO3(20mL)、稀釋的鹽水(15mL)洗滌合并的有機(jī)提取物，將其干燥(Na2S04)，過(guò)濾，并在真空中濃縮來(lái)提供作為油的游離堿。將油溶解在IPA(5mL)中，用HCl在IPA中處理(lmL的大約4NHCl),并在真空中濃縮。將殘余物從IPA/MTBE(1:10)中再結(jié)晶，過(guò)濾所得結(jié)晶，用MTBE洗滌，并在真空中在80。C干燥來(lái)提供0.61g(72.6。/o)的1-2。實(shí)施例3戊酸(2R，3R，4R，5R)-5-(4-氨基-2-氧代-2/r-嘧啶-l-基)-4-羥基-4-甲基-3-戊?；趸?四氫呋喃-2-基甲基酯；鹽酸鹽(I-3)向I畫(huà)4(0.4卯g，l.卯mmol)、DMAP(0.026g，0.21mmol)、THF(7mL)和H20(3mL)的溶液中加入TEA(2.31g，16.59mmol)，并將反應(yīng)混合物冷卻至大約0'C。以允許將反應(yīng)溫度維持在5。C以下的速率逐滴加入戊酸酐(1.6g，2.57mmol)。通過(guò)HPLC-MS監(jiān)測(cè)反應(yīng)。加入兩份0.32g戊酸酐(共282.24g，11.99mmol)來(lái)除去單?；碑a(chǎn)物。反應(yīng)混合物冷卻至0°C，并用濃HC1將pH調(diào)整為pH6.8。將混合物在EtOAc(30mL)和H20(15mL)之間分配，并分離相。用EtOAc(2xl5mL)提取水相，并依次用稀釋的NaHCO3(2x20mL)和水(lx20mL)洗涂合并的有機(jī)提取物，將其干燥(Na2S04)，過(guò)濾，并在真空中濃縮來(lái)提供作為油的游離堿。將油溶解在IPA(5mL)中，用HCl在IPA中處理(0.8mL的大約4NHCl),并在真空中濃縮。將殘余物從IPA/MTBE/庚烷(1:0.5:10;15mL)中再結(jié)晶，過(guò)濾所得結(jié)晶，并用庚烷洗滌，并在真空中于80。C、N2下干燥來(lái)提供0.88g(55.7。/o)的1-3。實(shí)施例4在大鼠中測(cè)定藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)使用重200-250g的完整雄性IGSWistarHanRatsCrl:WI(GLx/BRL/Han)IGSBR(Hanover-Wistar)大鼠。實(shí)驗(yàn)化合物的每個(gè)劑量水平使用三組大鼠。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中允許動(dòng)物正常獲取食物和水。將測(cè)試物制劑成含有Captex355EP、CapmulMCM、EtOH和丙二醇(30:20:20:30)、劑量相當(dāng)于10mg/kg1-5的水性懸浮液，并將其通過(guò)管飼法經(jīng)口施用。將受處理的大鼠在0.25、0.5、1、3、5、和8小時(shí)從頸靜脈插管、在24小時(shí)通過(guò)心臟穿刺采集血液樣品(0.3mL)。向取樣過(guò)程中保存在水上的樣品中加入草酸鉀/NaF。立即在-4。C的冷凍離心機(jī)中離心樣品，并將血漿樣品保存在-80。C水箱直至分析。血漿等份(0.05mL)與0.1mL乙腈混合。加入內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)(在水中的0.05mL)和0.02mL空白溶劑。通過(guò)混合0.05mL未處理的大鼠的血漿等份和O.lmL乙腈、0.02mL在甲醇:水(1:1)中的標(biāo)準(zhǔn)溶液等份和0.05mL在水中的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)等份來(lái)制備校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品。將每一血漿樣品和校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品充分渦旋，然后以3000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘來(lái)沉淀蛋白質(zhì)。將離心的上清(每種100|nL)轉(zhuǎn)移入含有200iliL水流動(dòng)相的96孔板中來(lái)進(jìn)行LC/MS/MS分析。樣品分析一用配有串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC/MS/MS)的高壓液相色鐠分析前體藥物。使用ThermoAquasilC184.6x50mm柱(5jLiM)進(jìn)行分離。使用電噴射離子化(ESI)進(jìn)行離子化過(guò)程。流動(dòng)相A含有在具0.1%甲酸的水中的5mM醋酸銨，并且流動(dòng)相B含有具0.1%甲酸的MeOH。以1mL/分鐘的流動(dòng)速率進(jìn)行梯度洗脫。實(shí)施例5Caco2方法材料Krebs-Henseleit緩沖劑的粉末、氯化釣二水合物和碳酸氫鈉購(gòu)自Sigma(St.Louis，MO)。Caco-2細(xì)胞(傳代100代)得自RocheBasel。Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基(DMEM)/高培養(yǎng)基、4-(2-羥乙基)-l-艱，秦乙烷-磺酸(HEPES)以及牛血清得自JRHBioscience(Lenexa，KS)。MEM非必需氨基酸、L-谷氨酰胺、青霉素和鏈霉素得自GIBCOLabs,LifeTech.LLC(GrandIsland,NY)。Snapwe11細(xì)胞培養(yǎng)插入物(6.5mm直徑，1.12cm2，0.4pm孔徑大小)得自Costar(Cambridge，MA)。細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞在75-cm2燒瓶中生長(zhǎng)，并維持37。C、5%(:02和95%空氣的環(huán)境。培養(yǎng)基由補(bǔ)充了5%牛血清、25mMHEPES、1%MEM非必需氨基酸、1。/oL-谷氨酰胺、100U/mL青霉素和100iag/mL鏈霉素的DMEM/高培養(yǎng)基組成。培養(yǎng)物每周以1-3的分離比傳代。對(duì)于通透性研究，將代數(shù)為110-120的Caco-2細(xì)胞以400,000個(gè)細(xì)胞/cm2的密度鋪板在Snapwell插入皿的Transwdl聚碳酸酯濾器上，并在使用前培養(yǎng)7天。Krebs-Henseleit緩沖劑按照包裝說(shuō)明制備含有10mM葡萄糖和2.5mMCaCl2、pH6.5和7.4的Krebs-Henseleit碳酸氫鹽緩沖液。將粉末鹽定量地用MiUipore水溶解在大約90%的所需體積中。在用1NHC1或1NNaOH調(diào)節(jié)pH之前加入氯化鈣二水合物和碳酸氫鈉。加入額外的Millipore水使溶液達(dá)到終體積。溶液用0.22微米孔徑的膜過(guò)濾除菌，并保存在冰箱(20。C)中直至使用。細(xì)月包制備從CellCultureCoreFacility獲得分化的細(xì)胞，并在37。C、在5%C02和95%空氣的環(huán)境下平衡。將含有caco-2單層的Snapwdls插入皿在37°C、平衡的Krebs-HensdeitpH7.4緩沖液中漂洗。方法使用細(xì)胞插入皿作為擴(kuò)散室。在室頂端和基底的Krebs-Henseleit緩沖液的pH分別為6.5和7.4，并且在頂端一側(cè)的底物初濃度為100^M。將具測(cè)試化合物的細(xì)胞在37°C、5%C02和95%空氣的環(huán)境下在頂端室中預(yù)孵育大約30分鐘。當(dāng)將在pH6.5的Krebs-Henseleit緩沖液中含有100化合物的細(xì)胞插入皿轉(zhuǎn)移進(jìn)入在基底室中含有預(yù)平衡緩沖液的新平板時(shí)，起始實(shí)驗(yàn)。收集0分鐘時(shí)供體側(cè)、30分鐘時(shí)供體和受體兩側(cè)的樣品進(jìn)行分析。實(shí)驗(yàn)后控制使用LuciferYellow評(píng)估擴(kuò)散系統(tǒng)的性能。在對(duì)測(cè)試化合物進(jìn)行最后采用之后，向頂端室中加入LuciferYellow來(lái)產(chǎn)生100pM的初濃度。孵育60分鐘之后，從基底室取出250^iL，并進(jìn)行測(cè)試。計(jì)算滲透系數(shù)(P叩p)使用下列公式計(jì)算Papp:VxdCP卿---(oW秒)AxC。xdt其中V為受體溶液體積(cm3)，A為Snapwell插入皿的表面積(cm2)，C。為初濃度(nM)，并且dC/dt為受體室中濃度對(duì)時(shí)間的變化，即受體室中濃度對(duì)時(shí)間的斜率(nM/分鐘)。校準(zhǔn)每個(gè)采樣時(shí)間點(diǎn)的濃度來(lái)計(jì)算實(shí)驗(yàn)中從供體插入皿移動(dòng)或轉(zhuǎn)移入新板的部分。實(shí)施例6主題化合物的代表性藥物組合物用于經(jīng)口施用的濕顆粒制劑的組合物(A)___成分_%wt./wt顆粒內(nèi)(Intragramilar)有效成分(I-2)50.0甘露糖醇(PartechM200)USP39.0聚乙烯吡咯烷酮K30USP5.0交聯(lián)羧甲纖維素鈉NF純化水USP顆粒夕卜(Extragramilar)交聯(lián)羧曱纖維素USP4.0用于顆?；?.0將成分混合，?；?，并分配入含有大約500mg活性化合物的硬明膠膠嚢中。用于經(jīng)口施用的組合物(B)成分%wt./wt.有效成分(I-2)50.0甘露糖醇(PartechM200)USP30.0聚乙烯吡咯烷酮K30USP5.0交聯(lián)羧甲纖維素鈉NF9.5微晶纖維素5.0硬脂酸鎂0.5將成分組合，并用溶劑例如水一使其?；?。然后干燥制劑，并用適當(dāng)?shù)闹破瑱C(jī)將其制成含有大約500mg活性化合物的片劑。用于經(jīng)口施用的組合物(C)__成分%wt./wt.活性化合物羧曱基纖維素對(duì)羥基苯甲酸甲酯對(duì)羥基苯甲酸丙酯'〗'J6glg0.15g0.05g0.035mL0.5mg補(bǔ)充至100mL適量，將pH調(diào)整為約4混合成分形成經(jīng)口施用的懸浮液。<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>聚乙二醇IOOO74.5%_聚乙二醇4000_24.5%_將成分熔化在一起，在蒸汽浴中混合，并傾入含有總重量2.5g的模具。上述說(shuō)明書(shū)或者下列權(quán)利要求(以其特定形式或者以執(zhí)行所公開(kāi)功能的方式表達(dá))中公開(kāi)的特征或者獲得所公開(kāi)結(jié)果的方法或過(guò)程根據(jù)需要可以分開(kāi)或任意組合所述特征地用來(lái)以其不同形式實(shí)現(xiàn)本發(fā)明。為了清楚和理解，上述發(fā)明已經(jīng)通過(guò)示例和實(shí)例在一些細(xì)節(jié)上進(jìn)行了描述。本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見(jiàn)，可以在附加的權(quán)利要求書(shū)范圍之內(nèi)進(jìn)行改變和變更。因此，應(yīng)當(dāng)理解，上述描述旨在示例說(shuō)明而非限制。因此本發(fā)明的范圍不應(yīng)當(dāng)參考上述描述來(lái)確定，相反應(yīng)當(dāng)參考下附權(quán)利要求和該權(quán)利要求所賦予的等同物的全部范圍來(lái)確定。本申請(qǐng)中引用的所有專(zhuān)利、專(zhuān)利申請(qǐng)和出版物在此處以其整體為了所有的目的以相同的程度引入作為參考，就如同每一專(zhuān)利、專(zhuān)利申請(qǐng)或出版物單獨(dú)引入一樣。權(quán)利要求1.式I的化合物及其水合物、溶劑合物和酸加成鹽其中R1獨(dú)立地選自C2-5未分支或分支的烷基、C2-5未分支或分支的烯基、C3-5環(huán)烷基和C2-5鹵代烷基。2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中W為乙基、正丙基、異丙基、正丁基或異丁基。3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1為乙基或異丙基。4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中R'為異丙基，并且化合物為鹽酸鹽、曱磺酸鹽、半硫酸鹽或硫酸鹽。5.如權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的根據(jù)式I的化合物或其7K合物、溶劑合物或酸加成鹽的用途，用作治療由HCV介導(dǎo)的疾病的抗病毒劑。6.如權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的根據(jù)式I的化合物或其水合物、溶劑合物或酸加成鹽的用途，用作抗病毒劑與至少一種免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑和/或至少一種抑制HCV復(fù)制的抗病毒劑聯(lián)合來(lái)治療由HCV介導(dǎo)的疾病。7.如權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的根據(jù)式I的化合物或其水合物、溶劑合物或酸加成鹽的用途，用于制備治療由HCV介導(dǎo)的疾病的藥物。8.與至少一種免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑和/或至少一種抑制HCV復(fù)制的抗病毒劑聯(lián)合的、如權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的根據(jù)式I的化合物或其水合物、溶劑合物或酸加成鹽的用途，用于制備治療由HCV介導(dǎo)的疾病的藥物。9.治療由丙型肝炎病毒(HCV)介導(dǎo)的疾病的方法，所述方法包括向需要其的哺乳動(dòng)物施用治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求l的化合物。10.權(quán)利要求9的方法，其中將化合物向患者施用0.1至10g/天的劑量。11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中向患者施用0.5至7.5g/天的12.根據(jù)權(quán)利要求ll所述的方法，其中向患者施用1.0至6.0g/天的劑量。13.權(quán)利要求9的方法，其還包括施用至少一種免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑和/或至少一種抑制HCV復(fù)制的抗病毒劑。14.藥物組合物，其包含與至少一種可藥用載體、稀釋劑或賦形劑混合的、治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求l所述的化合物。15.在堿性反應(yīng)條件下進(jìn)行核普I的選擇性O(shè)-?；饔脕?lái)提供O-?；塑誌I的方法其中W選自C2-4未分支或者分支的烷基、C^未分支或者分支的烯基、<:3.6環(huán)烷基、<:2.5卣代烷基，以及任選取代的苯基，所述方法包括下列步驟(/)在多相的含水溶劑混合物中溶解II和DMAP，并添加水性堿來(lái)調(diào)節(jié)pH為大約7.5至大約12;(//)任選地加入足夠的飽和水性NaCl來(lái)產(chǎn)生二相性的反應(yīng)混合物；添加?；瘎┖皖~外的堿，足以維持pH為大約7.5至大約12;(Zv)監(jiān)測(cè)反應(yīng)，并在轉(zhuǎn)化達(dá)到滿意水平時(shí)停止加入所述?；瘎┖退鲂?；(v)任選地將O-酰基核苷接觸可藥用酸來(lái)形成O-?；塑盏乃峒映甥}。全文摘要具有其中R<sub>1</sub>如本文定義的式I化合物為丙型肝炎病毒NS5b聚合酶抑制劑。也公開(kāi)了抑制肝炎復(fù)制的組合物和方法，制備所述化合物和用于所述方法的合成中間體的方法。文檔編號(hào)C07D405/04GK101460488SQ200780020565公開(kāi)日2009年6月17日申請(qǐng)日期2007年3月26日優(yōu)先權(quán)日2006年4月4日發(fā)明者K·薩爾馬申請(qǐng)人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司