專利名稱：一種同時(shí)制備款冬花酮和新款冬花內(nèi)酯的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種同時(shí)制備款冬花酮和新款冬花內(nèi)酯的方法，尤其是涉及ー種柱層析與逆流色譜結(jié)合分離純化款冬花酮和新款冬花內(nèi)酯的方法。
背景技術(shù)：
款冬花酮和新款冬花內(nèi)酷，均為倍半萜類化合物，來(lái)源于來(lái)源于菊科植物款冬花ijussilago farfara L.)的花蕾。款冬花具有潤(rùn)肺下氣，化痰止嗽等功效?，F(xiàn)代藥理研究表明，款冬花對(duì)呼吸系統(tǒng)具有止咳，祛痰和平喘作用；對(duì)交感神經(jīng)、擬交感神經(jīng)、血管平滑肌等具有直接興奮作用；對(duì)在體或離體胃腸道平滑肌均呈抑制作用。款冬花分布河北、河南、湖北、四川、山西、陜西、甘肅、內(nèi)蒙古、新疆、青海，西藏等地，資源豐富?？疃ㄍ?，分子式=C21H3tlO3,分子量330. 47，無(wú)色膠狀物。新款冬花內(nèi)酷，分子式C21H28O4，分子量344.45.。款冬花酮和新款冬花內(nèi)酯均具有較強(qiáng)的抑制血小板活化因子的作用，能抑制PAF誘導(dǎo)的血小板聚集。目前尚未見提純款冬花酮和新款冬花內(nèi)酷的相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供ー種利用高速逆流色譜法純化款冬花酮和新款冬花內(nèi)酯的方法。本發(fā)明所述的ー種同時(shí)制備款冬花酮和新款冬花內(nèi)酯的方法，其特征在于按下列步驟進(jìn)行
(1)取款冬花的花蕾粉碎后用80-100%こ醇超聲提取1-2次，合并提取液加入針劑類藥用活性炭脫色，濾出活性炭，提取液減壓濃縮；
(2)將濃縮液以熱水分散，加入20-100目硅膠層析柱，ニ氯甲烷-甲醇混合溶劑洗脫，薄層跟蹤，收集洗脫液，濃縮干燥；
(3)采用高速逆流色譜儀，溶劑系統(tǒng)由正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水組成，體積比為6-11 :7-15 :4-8 :3，置于分液漏斗中，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，取步驟(2)干燥物溶于下相中，用泵將固定相灌滿分離柱，然后使主機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)，泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出吋，連續(xù)進(jìn)樣，根據(jù)檢測(cè)器譜圖收集目標(biāo)成分，濃縮，低溫干燥即得產(chǎn)品。所述步驟(I)中活性炭用量為提取液總質(zhì)量的3-5%。。所述步驟(2)中柱層析所用的混合溶劑的比例為1:3-10。所述步驟(3)中高速逆流色譜儀流動(dòng)相流速控制在2-3ml/min,主機(jī)轉(zhuǎn)速為750-950rpm.。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下的優(yōu)點(diǎn)及有益效果
1)本發(fā)明先用柱層析富集純化，降低了后續(xù)エ序的處理量；
2)采用高速逆流色譜法分離純化，制備量大，產(chǎn)品純度高，處理過(guò)程中樣品無(wú)損失。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I :
取IOkg款冬花的花蕾粉碎后用80%こ醇超聲提取2次，合并提取液加入3%。針劑類藥用活性炭脫色，濾出活性炭，提取液減壓濃縮，濃縮液以熱水分散，加入100目硅膠層析柱，用ニ氯甲烷-甲醇(1:3)洗脫，薄層跟蹤，收集洗脫液，濃縮干燥得粗提物；
取正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水(6 7 8 3)置于分液漏斗中，靜置分層，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，取樣品溶于下相中，用泵將固定相灌滿分離柱，然后使主機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)達(dá)到950rpm,以2. Oml/min流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出時(shí)，開始連續(xù)進(jìn)樣，根據(jù)檢測(cè)器譜圖分別收集款冬花酮流分和新款冬花內(nèi)酯流分，濃縮，低溫干燥即得到款冬花酮和新款冬花內(nèi)酷，檢測(cè)含量都在98%以上。
實(shí)施例2:
取IOkg款冬花的花蕾粉碎后用こ醇超聲提取I次，合并提取液加入5%。針劑類藥用活性炭脫色，濾出活性炭，提取液減壓濃縮，濃縮液以熱水分散，加入20目硅膠層析柱，用ニ氯甲烷-甲醇(1:10)洗脫，薄層跟蹤，收集洗脫液，濃縮干燥得粗提物；
取正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水(11 15 :4:3)置于分液漏斗中，靜置分層，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，取樣品溶于下相中，用泵將固定相灌滿分離柱，然后使主機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)達(dá)到750rpm,以2. Oml/min流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出時(shí)，開始連續(xù)進(jìn)樣，根據(jù)檢測(cè)器譜圖分別收集款冬花酮流分和新款冬花內(nèi)酯流分，濃縮，低溫干燥即得到款冬花酮和新款冬花內(nèi)酷，檢測(cè)含量都在98%以上。實(shí)施例3:
取IOkg款冬花的花蕾粉碎后用90%こ醇超聲提取2次，合并提取液加入4%。針劑類藥用活性炭脫色，濾出活性炭，提取液減壓濃縮，濃縮液以熱水分散，加入80目硅膠層析柱，用ニ氯甲烷-甲醇(1:5)洗脫，薄層跟蹤，收集洗脫液，濃縮干燥得粗提物；
取正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水(7 8 5 3)置于分液漏斗中，靜置分層，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，取樣品溶于下相中，用泵將固定相灌滿分離柱，然后使主機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)達(dá)到850rpm,以2. 5ml/min流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出時(shí)，開始連續(xù)進(jìn)樣，根據(jù)檢測(cè)器譜圖分別收集款冬花酮流分和新款冬花內(nèi)酯流分，濃縮，低溫干燥即得到款冬花酮和新款冬花內(nèi)酷，檢測(cè)含量都在98%以上。實(shí)施例4:
取IOkg款冬花的花蕾粉碎后用85%こ醇超聲提取2次，合并提取液加入5%。針劑類藥用活性炭脫色，濾出活性炭，提取液減壓濃縮，濃縮液以熱水分散，加入60目硅膠層析柱，用ニ氯甲烷-甲醇(1:5)洗脫，薄層跟蹤，收集洗脫液，濃縮干燥得粗提物；
取正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水(9 11 5 3)置于分液漏斗中，靜置分層，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，取樣品溶于下相中，用泵將固定相灌滿分離柱，然后使主機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)達(dá)到800rpm,以2. 8ml/min流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出時(shí)，開始連續(xù)進(jìn)樣，根據(jù)檢測(cè)器譜圖分別收集款冬花酮流分和新款冬花內(nèi)酯流分，濃縮，低溫干燥即得到款冬花酮和新款冬花內(nèi)酷，檢測(cè)含量都在98%以上。實(shí)施例5:
取IOkg款冬花的花蕾粉碎后用90%こ醇超聲提取2次，合并提取液加入4%。針劑類藥用活性炭脫色，濾出活性炭，提取液減壓濃縮，濃縮液以熱水分散，加入80目硅膠層析柱，用ニ氯甲烷-甲醇(1:8)洗脫，薄層跟蹤，收集洗脫液，濃縮干燥得粗提物；
取正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水(10 9 6 :3)置于分液漏斗中，靜置分層，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，取樣品溶于下相中，用泵將固定相灌滿分離柱，然后使主機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)達(dá)到 850rpm,以2. Oml/min流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出時(shí)，開始連續(xù)進(jìn)樣，根據(jù)檢測(cè)器譜圖分別收集款冬花酮流分和新款冬花內(nèi)酯流分，濃縮，低溫干燥即得到款冬花酮和新款冬花內(nèi)酷，檢測(cè)含量都在98%以上。
權(quán)利要求
1.一種同時(shí)制備款冬花酮和新款冬花內(nèi)酯的方法，其特征在于按下列步驟進(jìn)行 (1)取款冬花的花蕾粉碎后用80-100%乙醇超聲提取1-2次，合并提取液加入針劑類藥用活性炭脫色，濾出活性炭，提取液減壓濃縮； (2)將濃縮液以熱水分散，加入20-100目硅膠層析柱，二氯甲烷-甲醇混合溶劑洗脫，薄層跟蹤，收集洗脫液，濃縮干燥； (3)采用高速逆流色譜儀，溶劑系統(tǒng)由正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水組成，體積比為6-11 :7-15 :4-8 :3，置于分液漏斗中，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，取步驟(2)干燥物溶于下相中，用泵將固定相灌滿分離柱，然后使主機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)，泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出時(shí)，連續(xù)進(jìn)樣，根據(jù)檢測(cè)器譜圖收集目標(biāo)成分，濃縮，低溫干燥即得產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的同時(shí)制備款冬花酮和新款冬花內(nèi)酯的方法，其特征在于所述步驟(I)中活性炭用量為提取液總質(zhì)量的3-5%。。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的同時(shí)制備款冬花酮和新款冬花內(nèi)酯的方法，其特征在于所述步驟(2)中柱層析所用的混合溶劑的比例為1:3-10。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種同時(shí)制備款冬花酮和新款冬花內(nèi)酯的方法，包括取款冬花的花蕾粉碎醇提，提取液過(guò)柱層析初步分離，再采用高速逆流色譜法純化，將洗脫溶劑系統(tǒng)置于分液漏斗中分層，取上相為固定相，下相為流動(dòng)相，取款冬花提取物溶解于下相中，將固定相用泵灌滿分離柱，連接柱首端與進(jìn)樣閥，調(diào)節(jié)流動(dòng)相流速和主機(jī)轉(zhuǎn)速，分段收集分離物，濃縮干燥即得款冬花酮及新款冬花內(nèi)酯。該分離方法分離效率高，能得到高含量的款冬花酮和新款冬花內(nèi)酯。
文檔編號(hào)C07C67/56GK102659585SQ201210117158
公開日2012年9月12日 申請(qǐng)日期2012年4月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月20日
發(fā)明者劉東鋒, 吳艷波 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司