專利名稱：有機化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的7，8-二氫-咪唑并[l，2-"I吡唑并[4，3-^嘧啶-4-酮化合物 和7，8，9-三氫-[l/T或2司-嘧啶并[l,2-al吡唑并[4，3-e嘧啶-4(5H)-酮化合物、 它們的生產(chǎn)方法、它們作為藥物的用途以及包含它們的藥物組合物。最感 興趣的是可用作磷酸二酯酶l (PDE1)抑制劑的新化合物，例如用于治療涉 及多巴胺D1受體細胞內(nèi)途徑障礙的疾病，例如帕金森病、抑郁和認知功 能損害，例如在精神分裂癥中。發(fā)明背景已經(jīng)鑒別了十一個家族的磷酸二酯酶(PDE)，但是僅家族I的PDE， 即Ca"-鉤調(diào)蛋白-依賴性磷酸二酯酶(CaM-PDE)，已經(jīng)被證明介導(dǎo)鉀和環(huán) 核苷酸(例如cAMP和cGMP)信號傳導(dǎo)途徑。三種已知的CaM-PDE基因， 即PDE1A、 PDE1B和PDE1C，均在中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織中有表達。PDE1A 在腦的各處均有表達，在海馬區(qū)的CA1至CA3層以及小腦中的表達水平 較高，在紋狀體中的表達水平低。PDE1A還在肺和心臟中有表達。PDE1B 在紋狀體、齒狀回、嗅束和小腦中的表達占優(yōu)勢，其表達與具有高水平多 巴胺能神經(jīng)分布的腦區(qū)域有關(guān)。雖然PDE1B主要在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中表達， 但是其可以在心臟中被檢測到。PDE1C主要在嗅上皮、小腦顆粒細胞和紋 狀體中表達。PDE1C還在心臟和血管平滑肌中有表達。環(huán)核苷酸磷酸二酯酶通過使這些環(huán)核苷酸水解為它們各自的無活性 5'-單磷酸鹽(5，AMP和5，GMP)而降低細胞內(nèi)cAMP和cGMP信號傳導(dǎo)。CaM-PDE在介導(dǎo)腦細胞、特別是稱為基底核或紋狀體的腦區(qū)域內(nèi)的腦細 胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)方面起關(guān)鍵作用。例如，NMDA-型谷氨酸受體激活和/或多 巴胺D2受體激活導(dǎo)致細胞內(nèi)鉤濃度增加，從而導(dǎo)致效應(yīng)子如鉤調(diào)蛋白依 賴性激酶II (CaMKII)和鉀調(diào)磷酸酶的激活以及CaM-PDE的激活，導(dǎo)致 cAMP和cGMP降低。另 一方面，多巴胺Dl受體激活導(dǎo)致4丐依賴性核苷 酸環(huán)化酶的激活，從而導(dǎo)致cAMP和cGMP增加。這些環(huán)核苷酸又激活蛋 白激酶A (PKA; cAMP-依賴性蛋白激酶)和/或蛋白激酶G (PKG; cGMP-依賴性蛋白激酶)，所述蛋白激酶使得下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑元件如DARPP-32 (多巴胺和cAMP-調(diào)節(jié)的磷蛋白)和cAMP應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(CREB)磷酸 化。因此，CaM-PDE可影響基底核(紋狀體)中的多巴胺調(diào)節(jié)的和其它的細 胞內(nèi)信號傳導(dǎo)途徑，包括但不限于氧化氮、去甲腎上腺素能、神經(jīng)降壓素、 CCK、 VIP、血清素、谷氨酸(例如NMDA受體、AMPA受體)、GABA、 乙酰膽堿、腺苷(例如A2A受體)、大麻素受體、利尿鈉肽(例如ANP、 BNP、 CNP)和內(nèi)啡肽的細胞內(nèi)信號傳導(dǎo)途徑。磷酸二酯酶(PDE)活性、特別是磷酸二酯酶l (PDE1)活性在腦組織中 作為運動活性和學(xué)習(xí)及記憶調(diào)節(jié)劑起作用。PDE1是調(diào)節(jié)細胞內(nèi)信號傳導(dǎo) 途徑的治療靶點，優(yōu)選在神經(jīng)系統(tǒng)中，包括但不限于多巴胺Dl受體、多 巴胺D2受體、氧化氮、去甲腎上腺素能、神經(jīng)降壓素、CCK、 VIP、血 清素、谷氨酸(例如NMDA受體、AMPA受體)、GABA、乙酰膽堿、腺苷 (例如A2A受體)、大麻素受體、利尿鈉肽(例如ANP、 BNP、 CNP)或內(nèi)啡 肽的細胞內(nèi)信號傳導(dǎo)途徑。例如，PDE1B抑制應(yīng)當通過保護cGMP和 cAMP免受降解來使得多巴胺Dl激動劑的作用成為可能，并且應(yīng)當通過 抑制PDE1活性類似地抑制多巴胺D2受體信號傳導(dǎo)途徑。細胞內(nèi)鉀的慢 性增加與各種疾病中的細胞死亡有關(guān)，特別是與神經(jīng)變性疾病如阿爾茨海 默氏病、帕金森病和亨廷頓病以及導(dǎo)致中風(fēng)和心肌梗塞的循環(huán)系統(tǒng)疾病中 的細胞死亡有關(guān)。因此，PDE1抑制劑可有效地用于特征在于多巴胺D1受 體信號傳導(dǎo)活性降低的疾病，例如帕金森病、多動腿綜合征、抑郁和認知 缺損。因此，需要選擇性地抑制PDE1活性、尤其是PDE1B活性的化合物。 發(fā)明概述本發(fā)明提供了新的游離、鹽或前藥形式的任選被取代的7,8-二氫-1〃 或2司-咪唑并[l，2-ff吡唑并[4，3-el嘧啶-4(5^)-酮或7，8，9-三氫-[l/T或2^]-嘧啶并[l，2-a吡唑并[4，3-e嘧咬-4(5H)-酮，其在1或2位上被Cw烷基或 C3_9環(huán)烷基或者任選被取代的雜芳基烷基或取代的芳基烷基取代(下文稱為 "本發(fā)明的化合物")。1-或2-位取代基優(yōu)選是被取代的千基或吡咬基甲基， 例如相對于連接點在對位被例如芳基(例如苯基)或雜芳基(例如吡咬基或噻 二唑基)取代。出人意料地發(fā)現(xiàn)這些化合物選擇性地抑制磷酸二酯酶1 (PDE1)活性、尤其是PDE1B活性。本發(fā)明的化合物優(yōu)選是式I的7,8-二氫-[li7或2司-咪唑并[1，2- 1吡唑 并[4，3-e嘧咬-4(5用-酮和7，8，9-三氫-[l/T或2司-嘧啶并[l，2-a吡唑并[4,3-e
嘧咬-4(5H)-酮，其中(i) &是H或d_4烷基(例如曱基)；(ii) R4是H或Cw烷基且R2和R3獨立地是H或C"烷基(例如議2和R3 均為甲基，或者R2是H且R3是異丙基)、芳基、雜芳基、芳基(任選是 雜芳基)烷氧基或者芳基(任選是雜芳基)烷基；或者R2是H且R3和R4—起形成二-、三-或四-亞甲基橋(優(yōu)選其中R3和R 一起具有順式構(gòu)型，例如其中載有R3和R4的碳分別具有R和S構(gòu)型); (iii)Rs是被取代的雜芳基烷基，例如被囟代烷基取代，或者 Rs與式l的吡唑并部分上的氮之一連接，并且為式A部分其中X、 Y和Z獨立地是N或C,且Rs、 R9、 Rn和Ru獨立地是H 或鹵素(例如C1或F)，且Rw是卣素、烷基、環(huán)烷基、卣代烷基(例如 三氟甲基)、芳基(例如苯基)、雜芳基(例如吡咬基(例如吡啶-2-基)或者 噻二唑基(例如1，2，3-噻二唑-4-基))、二唑基、三哇基、四唑基、芳基羰 基(例如苯甲酰基)、烷基磺?；?例如曱基磺?；?、雜芳基羰基或烷氧 基羰基；條件是，當X、 Y或Z是氮時，R8、 R9或Rw分別不存在；(iv) R6是H、烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基(例如芐基)、芳基氨基(例如 苯基氨基)、雜芳基絲、N，N-二烷基絲、N，N-二芳基氨基或N-芳基 -N-(芳基烷基)氨基(例如N-苯基-N-(l，l，-聯(lián)苯-4-基甲基)氨基)；且(v) n-0或1;(vi) 當n=l時，A是隱C(RuR")誦其中Ru和R"獨立地是H或Cw烷基、芳基、雜芳基、芳基(任選是 雜芳基)烷氧基或芳基(任選是雜芳基)烷基； 游離、鹽或前藥形式，包括其對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體和外消旋物。本發(fā)明還提供了如下的式I化合物 1.1 式I，其中I^是甲基且n-0;1.2 式I或l.l,其中R4是H或d-4烷基，且R2和R3中至少一個是低級 烷基，以便當載有R3的碳是手性的時，其具有R構(gòu)型，例如其中R2 和R3均為甲基或其中一個是氫且另一個為異丙基；1.3 式I或l.l，其中R4是H且R2和R3中至少一個是芳基烷氧基；1.4 式I，其中Ri是甲基，R2、 R3和R4為H， n=l,且Ru和Rm獨立地 是H或Cw烷基(例如甲基或異丙基)；1.5 式I或l,l,其中R2是H,且R3和R4—起形成三-或四-亞甲基橋， 具有順式構(gòu)型，優(yōu)選其中載有R3和R4的碳分別具有R和S構(gòu)型；1.6 式I、 1.1或1.5，其中Rs是被取代的雜芳基甲基，例如被卣代烷基對 位取代；1.7 式I、 1.1、 1.2、 1.3、 1.4或1.5,其中Rs是式A部分，其中R8、 R9、 Ru和Ri2是H，且Ru)是苯基；1.8 式I、 1.1、 1.2、 1.3、 1.4或1.5，其中Rs是式A部分，其中R8、 R9、 Rii和R12是H,且R1()是吡咬基或瘞二唑基；1.9 式I、 1.1、 1.2、 1.3、 1.4或1.5,其中Rs是式A部分，其中R8、 R9、 Rii和Ri2獨立地是H或鹵素，且Rn)是鹵代烷基；1.10式I、 1.1、 1.2、 1.3、 1.4或1.5，其中Rs是式A部分，其中R8、 R9、Rii和R12獨立地是H，且R1()是烷基磺酰基； 1.11前述式中的任一項，其中Rs與吡唑并環(huán)上的2-位氮連接； 1.12前述式中的任一項，其中R6是節(jié)基；1.13前述式中的任一項，其中R6是苯基M或苯基烷基M(例如節(jié)基氨 基)；1.14前述式中的任一項，其中R6是苯基氨基； 1.15前述式中的任一項，其中X、 Y和Z均為C;1.16前述式中的任一項，其中X、 Y和Z均為C,且R10是苯基或2-吡咬 基；和/或1.17前述式中的任一項，其中化合物抑制磷酸二酯酶-介導(dǎo)的(例如PDEl-介導(dǎo)的、尤其是PDElB-介導(dǎo)的)cGMP水解，例如在如實施例24中 所述的固定化金屬親和微粒試劑PDE測定(mmobilized-metal affinityparticle reagent PDE assay)中具有低于ljiM、優(yōu)選低于25 nM的 IC50; 游離或鹽形式。例如，本發(fā)明的化合物包括式Ia的7,8-二氫-[lH或2H]-咪唑并[l，2-a吡 唑并[4，3-e]嘧啶-4(5H)-酮(i) 是H或d.4烷基[例如甲基；(ii) R4是H， R2和R3獨立地是H或d_4烷基[例如R2和R3均為甲基或 R2是H且R3是異丙基、芳基或芳基烷基；或者R2是H且R3和R4—起形成二-、三-或四-亞甲基橋[優(yōu)選其中R3 和R4具有順式構(gòu)型，例如其中載有R3和R4的碳分別具有R和S構(gòu)型；(iii) Rs與式I的吡唑并環(huán)的氮之一連接，并且是式B的被取代的千基，式Ia<formula>formula see original document page 15</formula>
式B<formula>formula see original document page 15</formula>其中Rs、 R9、 Ru和Ru獨立地是H或鹵素(例如Cl或F);且1110是囟 素、烷基、環(huán)烷基、鹵代烷基(例如三氟曱基)、芳基(例如苯基)、雜芳 基(例如吡》^(例如吡咬-2-基)或嚷二唑基(例如1，2，3-噢二唑-4-基))、 芳基羰基(例如苯曱?；?、烷基磺?；螂s芳基羰基；和 (iv)R6是H、烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基[例如節(jié)基、芳基氨基[例如 苯基氨基、雜芳基氬基、芳基烷基氛基、N，N-二烷基氨基、N,N-二芳 基氨基或N-芳基-N-(芳基烷基)氨基[例如N-苯基-N-(l，l，-聯(lián)苯-4-基曱基)氨基； 游離、鹽或前藥形式。本發(fā)明還提供了如下的式Ia化合物 1.1:式Ia，其中&是曱基；1.2:式Ia或l.l，其中R4是H且R2和R3中至少一個是低級烷基，以便當載有R3的碳是手性的時，其具有R構(gòu)型，例如其中R2和R3均為甲基或者其中一個是氫且另一個是異丙基； 1.3:式Ia或l.l，其中R2是H且R3和R4—起形成三-或四-亞甲基橋，具有順式構(gòu)型，優(yōu)選其中載有R3和R4的碳分別具有R和S構(gòu)型； 1.4: 式Ia、 1.1、 1.2或1.3,其中Rs是式A部分，其中R8、 R9、 Rn和Ru為H且Rn)是苯基； 1.5:式Ia、 1.1、 1.2或1.3,其中Rs是式A部分，其中R8、 R9、 Rn和R12為H且R1()是吡咬基或噻二唑基； 1.6:式Ia、 1.1、 1.2、 1.3、 1.4或1.5'其中R5與吡唑并環(huán)的2-位氮連接； 1.7:式Ia、 1.1、 1.2、 1.3、 1.4、 1.5或1.6，其中Rs是千基； 1.8:式Ia、 1.1、 1.2、 1.3、 1.4、 1.5或1.6,其中R6是苯基絲或苯基烷基氨基(例如節(jié)基氨基)；和/或 1.9:式Ia、 1.1、 1.2、 1.3、 1.4、 1.5、 1.6、 1.7或1.8,其中化合物抑制磷酸二酯酶-介導(dǎo)的(例如PDEl-介導(dǎo)的、尤其是PDElB-介導(dǎo)的)cGMP水解,例如在如實施例15中所述的固定化金屬親和微粒試劑PDE測定中具有低于lnM、優(yōu)選低于25 nM的IC5o;游離或鹽形式。在另 一項實施方案中，本發(fā)明的化合物為如下定義的式I化合物，其中(i) Ri是甲基;(ii) R2、 R3和R4為H;(iii) n=l且Ra和Rb獨立地是H或甲基；(iv) Rs是式A部分，其中R8、 R9、 Ru和R12為H且Rw是苯基、吡M(例 如吡啶-2-基)或噻二唑基(例如1，2，3-瘞二唑-4-基)；(v) R6是節(jié)基、苯基氨基或節(jié)基氨基； 游離或鹽形式。在另 一項實施方案中，本發(fā)明的化合物為如下定義的式I化合物，其中(i) Ri是甲基;(ii) n=0;(iii) R2是H且R3和R4 —起形成三-或四-亞甲基橋[優(yōu)選載有R3和R4的碳 分別具有R和S構(gòu)型I;或者R2和R3中至少一個是曱基、異丙基或芳 基烷氧基，且R4是H;或者R2和R3是H且R4是Cw烷基；(iv) Rs是被取代的雜芳基曱基，例如被卣代烷基對位取代；或者 Rs是式A部分，其中Rs、 R9、 Rn和Ru是H或卣素且Rw是囟代烷 基、苯基、吡^^(例如吡咬-2-基)或噻二唑基(例如1，2，3-噻二唑-4-基)； 且(v) R6是節(jié)基、苯基氨基或千基氨基； 游離或鹽形式。在另一項實施方案中，本發(fā)明的化合物為如下定義的式Ia化合物，其中..(i) Ri是甲基；(ii) R2是H且R3和R4 —起形成三-或四-亞甲基橋[優(yōu)選載有R3和R4的碳 分別具有R和S構(gòu)型];或者R2和R3各自是曱基且R4是H;或者R2和R4是H且R3是異丙基優(yōu)選載有R3的碳具有R構(gòu)型l;(iii) Rs是式A部分，其中Rs、 R9、 Ru和Ru是H且Rn)是鹵代烷基、苯 基、吡咬基(例如吡啶-2-基)或噻二唑基(例如1,2,3-噻二唑-4-基)；且(iv) R6是節(jié)基、苯基氨基或千基氨基； 游離或鹽形式。例如，本發(fā)明的化合物包括式II、 III和IV化合物<formula>formula see original document page 18</formula>式II其中Ra和Rb獨立地是H或d_4烷基； R6是苯基氨基或千基氨基；Rio是苯基、吡咬基(例如吡咬-2-基)或瘞二唑基(例如1，2,3-噻二唑-4-基); 游離或鹽形式。<formula>formula see original document page 18</formula>其中R2是H且R3和R4 —起形成三-或四-亞曱基橋優(yōu)選載有R3和R4的碳 分別具有R和S構(gòu)型；或者R2和R3中至少一個是甲基、異丙基或芳基烷 氧基且R4是H;或者R2和R3是H且R4是d—4烷基；R6是苯基氨基或芐基氨基；Rio是鹵代烷基、苯基、吡^(例如吡咬-2-基)或噻二唑基(例如1，2，3-瘞二唑_4-基)；游離或鹽形式。式IV其中R2是H且R3和R4 —起形成三-或四-亞甲基橋[優(yōu)選載有R3和R4的碳 分別具有R和S構(gòu)型；或者R2和R3中至少一個是甲基、異丙基或芳基烷 氧基且R4是H;或者R2和R3是H且R4是C^烷基；R6是苯基氨基或芐基氨基；Rio是苯基、吡戰(zhàn)(例如吡啶畫2隱基)或噻二唑基(例如1，2，3-噻二唑-4畫基》游離或鹽形式。本發(fā)明的化合物包括例如下文實施例1-23的標題化合物。 上下文若無特別說明或不是可以清楚地看出的話，如本文所用的下述術(shù)語具有如下含義a.如本文所用的"烷基"是飽和或不飽和的烴部分，優(yōu)選是飽和的，優(yōu)選 長度為1至4個碳原子，其可以是直鏈或支鏈的，并且可以任選被取代，例如被單-、二-或三-取代，例如被卣素(例如氯或氟)、羥基或g取代。b. 如本文所用的"環(huán)烷基"是飽和或不飽和的非芳族烴部分，優(yōu)選是飽和的，優(yōu)選包含3至9個碳原子，其中至少某些形成非芳族單環(huán)或二環(huán)或 者橋環(huán)結(jié)構(gòu)，其可以任選被取代，例如被卣素(例如氯或氟)、羥基或羧 基取代。c. 如本文所用的"芳基"是單環(huán)或二環(huán)芳族烴，優(yōu)選是苯基，其是任選被 取代的，例如被烷基(例如曱基)、卣素(例如氯或氟)、卣代垸基(例如三 氟曱基)、羥基、羧基或另外的芳基或雜芳基(例如聯(lián)苯或吡咬基苯基)取 代。d. 如本文所用的"雜芳基"是其中構(gòu)成芳族環(huán)的原子中的一個或多個是疏 或氮而非碳的芳族部分，例如吡咬基或噻二唑基，其可以是任選被取代 的，例如被烷基、卣素、卣代烷基、羥基或羧基取代。本發(fā)明的化合物可以以游離或鹽形式、例如酸加成鹽形式存在。在本 說明書中，若無另外指示，諸如本發(fā)明的化合物的表述將理解為包括任意 形式的化合物，例如游離或酸加成鹽形式，或者當化合物含有酸性取代基 時，還包括堿加成鹽形式。本發(fā)明的化合物意欲用作藥物，因而優(yōu)選可藥 用鹽。不適于藥物用途的鹽可以是有用的，例如對于本發(fā)明的化合物或其 可藥用鹽的分離或純化而言，因而這類鹽也被包括在內(nèi)。本發(fā)明的化合物在某些情況下以前藥形式存在。例如，當化合物含有 羥基或g取代基時，這些取代基可以形成生理學(xué)上可水解的和可接受的 酯。如本文所用的"生理學(xué)上可水解的和可接受的酯，，指在生理條件下可 以水解產(chǎn)生酸(在本發(fā)明的化合物具有羥基取代基的情況下)或醇(在本發(fā)明 的化合物具有g(shù)取代基的情況下)的本發(fā)明化合物的酯，它們自身在欲施 用劑量下是生理學(xué)上可耐受的。正如將被理解的那樣，該術(shù)語因而嚢括常 規(guī)的藥用前藥形式。本發(fā)明還提供了制備本發(fā)明的化合物的方法、可用于制備本發(fā)明化合 物的新的中間體以及采用本發(fā)明的化合物治療如下文所述的疾病和紊亂的 方法(尤其是治療特征在于多巴胺D1受體信號傳導(dǎo)活性降低的疾病，例如帕金森病、多動腿綜合征、抑郁和精神分裂癥的認知缺損)。 發(fā)明詳述辦務(wù)本尤鵬合樹才法式I化合物及它們的可藥用鹽可以采用本文所描述和所舉例的方法、 與之類似的方法和化學(xué)領(lǐng)域已知的方法來制備。這類方法包括但不限于下 文所述的那些。如果不能通過商業(yè)途徑獲得，那么用于這些方法的原料可技術(shù)來制備。本文引用的所有參考文獻整體-引入本文作為參考。''本發(fā)明范圍內(nèi)的一些個體化合物可以含有雙鍵。在本發(fā)明中雙鍵的表示包括雙鍵的E和Z異構(gòu)體兩者。另外，本發(fā)明范圍內(nèi)的一些化合物可以含有一個或多個不對稱中心。本發(fā)明包括任一種旋光純的立體異構(gòu)體以及 立體異構(gòu)體的任意組合的使用。熔點未經(jīng)校正，(dec)表示分解。溫度以攝氏度(。C)給出；除非另有說明，否則操作在室溫或環(huán)境溫度、即18至25。C下進行。色鐠法表示快速硅膠色語法；薄層色鐠法(TLC)在硅膠板上進行。NMR數(shù)據(jù)是主要特征質(zhì)子的8值，以相對于作為內(nèi)標的四曱基甲硅烷(TMS)的百萬分率(ppm)給出。使用信號形狀的常規(guī)縮寫。偶合常數(shù)(J)以Hz給出。對于質(zhì)語法(MS)，對分子報道最低質(zhì)量的主要離子，其中同位素分裂導(dǎo)致多重質(zhì)鐠峰。溶劑混合物組成以體積百分比或體積比給出。當NMR光鐠是復(fù)雜的時，僅報道特征信號。術(shù)語和縮略語 BUtOH=叔丁醇 CAN -硝酸鈰(IV)銨 DIPEA= 二異丙基乙胺 DMF = N，N-二曱基甲酰胺 DMSO= 二甲基亞砜 Et20=乙醚EtOAc=乙酸乙酯 equiv.=當量h=小時HPLC =高效液相色鐠法 K2C03 =碳酸鉀 MeOH=甲醇 NaHC03=碳酸氬鈉 NH4OH=氬氧化銨 PMB=對甲氧基節(jié)基 POCl3=氧氯化磷 S0C12=亞硫酰氯 TFA=三氟乙酸 THF=四氫吹喃下文解釋說明了本發(fā)明的合成方法?；鶊FR的含義如上文式I中給出， 另有指示除外。在本發(fā)明的一個方面，中間體式lib化合物可以如下合成使式IIa 化合物與二羧酸、乙酸酐和乙^應(yīng)，反應(yīng)物在加熱下混合約3小時，然 后冷卻中間體lie可例如如下制備使式lib化合物與例如氯化化合物如 POCl3反應(yīng)，有時帶有少量水，該反應(yīng)加熱約4小時，然后冷卻<formula>formula see original document page 22</formula>其中R1是H或烷基[例如甲基。<formula>formula see original document page 0</formula> 中間體IId可以通過使式lie化合物與例如P、X在溶劑如DMF和堿 如K2C03中于室溫或者在加熱下反應(yīng)來形成<formula>formula see original document page 0</formula>其中P1是保護基[例如甲氧基節(jié)基(PMB)；X是離去基，例如卣素、甲 磺酸酯基或甲苯磺酸酯基。中間體lie可以如下制備使式lid化合物與肼或肼7jC合物在溶劑如甲 醇中反應(yīng)，該反應(yīng)回流約4小時，然后冷卻<formula>formula see original document page 0</formula>中間體IIf可以如下合成使式lie化合物與肼或肼水合物在溶劑如甲 氧基甲醇中反應(yīng)，該反應(yīng)回流約30分鐘，然后冷卻<formula>formula see original document page 0</formula>中間體IIg(其中R"是烷基、芳基[例如苯基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基)可以如下合成使式lie化合物與例如芳基的異硫氰酸酯或異氰 酸酯在溶劑如DMF中反應(yīng)，該反應(yīng)于110。C加熱約2天，然后冷卻<formula>formula see original document page 24</formula> (lie) (llg) 中間體IIh可以由式IIg化合物通過采用適當方法除去保護基P1來合成。例如，如果^是對曱氧基千基，則其可以用AlCl3于室溫下除去或者 用TFA在加熱條件下除去。中間體IIh還可以直接由式IIf化合物采用類 似的方法來制備，但是產(chǎn)率是相對低的。9 HN—R139 HN-R13脫保護<formula>formula see original document page 24</formula>R13-N-C=0或R13-N=OS DMF,加熱中間體II-I可以通過例如使式llh化合物與例如氯化化合物如POCl3 反應(yīng)來制備。該反應(yīng)可以在大氣壓下進行并回流約2天，或者在密閉小瓶 中用微波于150至200。C加熱約10分鐘。<formula>formula see original document page 24</formula>或200 QC, 5-10 min 密閉小瓶，在微波中(Hh)中間體IIJ可以通過使式II-I化合物與氨基醇在堿性條件下在溶劑如DMF中反應(yīng)來制備。該反應(yīng)可以加熱過夜，然后冷卻<formula>formula see original document page 25</formula>除非另有說明或定義，R2、 W和R"與上文中所定義的那些相同，例 如在式l中所定義的那些。中間體IIK可以如下形成使式IIJ化合物與例如脫水劑如SOCh在 溶劑如CH2Cl2中反應(yīng)，該反應(yīng)于室溫過夜或者于35。C加熱約4小時、然 后冷卻9 HN-R13SOCI2CH2CI2或MeOH, r丄R3 R4(IIJ) 軀、化合物la和lb可以通過使式Ilk化合物與例如R5-X在溶劑如DMF 和堿如K2C03中于室溫或者在加熱下反應(yīng)來形成SHN-R13 ^HN-R13 ，^HN-R13A、' + R-x ~~^ "N' + ^R2~M 匿 R2^~<4 R2W4 R5R3 R4 R3 R4 R3 R4(IIK) (la) (lb)其中RS如前文所定義[例如任選被取代的節(jié)基；X是離去基，例如卣素、 甲磺酸酯基或甲苯磺酸酯基。RS還可以通過例如使IIg與RSX反應(yīng)來引入，然后進行與上文類似的 操作以形成化合物la和lb，只要R5在P1脫保護步驟中將不被裂解。第二種合成途徑被指定用于制備其中W是烷基、芳基或雜芳基的化合 物la和Ib。中間體IIIa (其中iT是被相應(yīng)于上文式A的被取代的節(jié)基的Rs.u取代 的芳基、優(yōu)選苯基)可以通過使式lie化合物與醛R7CHO在溶劑如EtOAc中于o'c或者于室溫反應(yīng)來制備，<formula>formula see original document page 26</formula>(川a)中間體IIIb可以如下制備例如使式IIIa化合物與例如醛在溶劑如 DMF中反應(yīng)，該反應(yīng)加熱過夜，然后冷卻，<formula>formula see original document page 26</formula>(訓(xùn)中間體IIIc可以由式IIIb化合物通過采用適當方法除去保護基pi來 制備。例如，如果W是對甲氧基節(jié)基，則其可以通過用CAN于室溫下除 去。中間體IIIc還可以直接由式IIf化合物采用類似方法來制備，但是產(chǎn) 率是相對低的。<formula>formula see original document page 26</formula>脫保護<formula>formula see original document page 26</formula>中間體IIIe可以通過使式IIIc化合物與例如氯化化合物如POCl3反應(yīng) 來制備。該反應(yīng)可以在大氣壓下進行并回流約2天，或者在密閉小瓶中用 微波儀器于150至200。C加熱約10分鐘。<formula>formula see original document page 27</formula>'，H 密閉小瓶，在微波中 Cl, I :N R7("lc) "He)中間體IIIf可以如下形成使式IIIe化合物與氨基醇在堿性條件下在 溶劑如DMF中反應(yīng)，該反應(yīng)加熱過夜，然后冷卻，<formula>formula see original document page 27</formula>化合物Ia可以如下形成^使式IIIf化合物與例如脫水劑如SOCl2在 溶劑如CH2Cl2中反應(yīng)，該反應(yīng)于室溫過夜或者于35。C加熱約4小時、然 后冷卻<formula>formula see original document page 27</formula>(la)對于其中R6為烷基或芳基的化合物Ia和Ib的合成有供選的途徑。如 果對于IIIb的脫保護而言采用較嚴厲的條件，則R7CH2基團也可被裂解。 例如，如果pi是對甲氧基節(jié)基且I^是被取代的苯基，則W和R"CH2可以 用AlGb于室溫下裂解。因而，采用這種途徑可以形成中間體IIIg:<formula>formula see original document page 27</formula>中間體IIIh可以通過使式IIIg化合物與例如氯化化合物如POCl3反應(yīng)來制備。該反應(yīng)可以在大氣壓下進行并回流約2天，或者在密閉小瓶中用 微波儀器于150至200。C加熱約10分鐘。<formula>formula see original document page 28</formula>或200 DC，5-10min 密閉小瓶，在微波中("lg)中間體III-I可以如下形成使式IIIh化合物與氨基醇在堿性條件下 在溶劑如DMF中反應(yīng)，該反應(yīng)加熱過夜，然后冷卻，<formula>formula see original document page 28</formula>中間體IIIJ可以如下形成使式III-I化合物與例如脫水劑如SOCl2 在溶劑如CH2Cl2或曱醇中反應(yīng)，該反應(yīng)于室溫過夜或者于35。C加熱約4 小時、然后冷卻，<formula>formula see original document page 28</formula>中間體IIIJ還可以通過使式la化合物與例如強酸或路易斯酸如A1C13 反應(yīng)來形成，<formula>formula see original document page 28</formula>(la) (、"J> 化合物la和lb可以通過使式IIIJ化合物與例如R5-X在溶劑如DMF和堿如K2C03中于室溫或者在加熱下反應(yīng)來形成，<formula>formula see original document page 29</formula>第三種合成途徑被指定用于制備其中W是氫的化合物la和Ib。中間體IVa可以通過例如使式lie化合物與POCb和DMF反應(yīng)來形成,<formula>formula see original document page 29</formula>中間體IVb可以通過使式IVa化合物與例如R5-X在溶劑如DMF和 堿如K2C03中于室溫或者在加熱下反應(yīng)來形成，<formula>formula see original document page 29</formula>中間體IVc可以由式IVb化合物通過采用適當方法除去保護基P1來合 成。例如，如果pi是PMB基團，則其可以用CAN于室溫下除去， o<formula>formula see original document page 29</formula>(IVb、 (IVc、中間體IVd可以如下制備:使式IVc化合物與例如氯化化合物如POCl3 反應(yīng)，該反應(yīng)回流約2天，或者在密閉小瓶中用微波儀器于150至200。C 加熱約10分鐘，然后冷卻，<formula>formula see original document page 30</formula>(IVc) (IVd)中間體IVe可以如下形成使化合物IVd與氨基醇在堿性條件下在溶 劑如DMF中反應(yīng)，該反應(yīng)加熱過夜，然后冷卻，<formula>formula see original document page 30</formula>flVd) "Ve、化合物Ia可以如下形成使化合物IVe與例如脫水劑如SOCl2在溶劑 如CH2Cl2中反應(yīng)，該反應(yīng)于室溫下過夜或者于35。C加熱約4小時、然后 冷卻。類似于上文所述的方法，化合物Ia中的R5基團可以采用適當?shù)姆?法裂解，然后可將所得中間體與其它RSX反應(yīng)，以得到化合物Ia和Ib。N-R5 S0C12 7 T" N-R5CH2CI2或MeOH, r丄R3' 、R4 Ha、因而，本發(fā)明提供了制備如上所述的本發(fā)明化合物的方法，例如，該方法包括(i)使7，8-二氫-咪唑并[l,2《I吡唑并[4，3-e嗜啶-4(5^0-酮或7，8,9-三氫-[Lff或 2司-嘧啶并l，2-fl]吡唑并4，3-e嘧咬-4(5^)-酮與式X-Rs化合物反應(yīng)，其中X是離去基，例如卣素、甲磺酸酯基或甲苯磺酸酯基，且Rs是C2，9烷基、Cw環(huán)烷基、雜芳基烷基或被取代的芳基烷基，例如其中Rs是如上所述的 式A的被取代的節(jié)基，該反應(yīng)例如在堿性條件下進行，例如其中7，8-二氫-咪唑并[l，2-fl]吡唑并[4，3-e嘧啶-4(5^)-酮是式IIIJ化合物其中Rw如上文所定義，例如式I中所定義；和/或(ii)使式V化合物脫水，例如采用脫水劑如亞硫酰氯使之脫水，其中RL6和[An如上文所定義，例如式I中所定義； 并且分離所得的本發(fā)明化合物。本發(fā)明化合物的使用方法本發(fā)明的化合物可用于治療特征在于cAMP和cGMP介導(dǎo)的途徑的破 壞或損害的疾病，例如作為歸因于環(huán)核苷酸合成誘導(dǎo)劑如多巴胺和氧化氮 (NO)抑制或水平降低的PDE1表達增加或者cAMP和cGMP表達降低的 結(jié)果。通過防止cAMP和cGMP被PDE1B降解并由此增加cAMP和cGMP 的細胞內(nèi)水平，本發(fā)明的化合物增強了環(huán)核苷酸合成誘導(dǎo)劑的活性。本發(fā)明提供了下述病癥中任意一種或多種的治療方法，該方法包括給 需要其的人或動物患者施用有效量的本發(fā)明的化合物(i) 神經(jīng)變性疾病，包括帕金森病、多動腿、震顫、運動障礙、亨廷頓病、 阿爾茨海默病和藥物引起的運動紊亂；(ii) 精神障礙，包括抑郁、注意力缺陷障礙、注意缺陷多動癥、雙相性精神障礙(bipolarillness)、焦慮、睡眠障礙、認知缺損、癡呆、精神興奮 劑戒斷和藥物成癮；(iii) 循環(huán)和心血管紊亂，包括腦血管疾病、中風(fēng)、充血性心臟病、高血壓、 肺動脈高壓和性功能障礙；(iv) 呼吸系統(tǒng)和炎性紊亂，包括哮喘、慢性阻塞性肺疾病和變應(yīng)性鼻炎， 以及自身免疫性和炎性疾??；和/或(v) 特征在于在表達PDE1的細胞中的低水平cAMP和/或cGMP (或者 cAMP和/或cGMP信號傳導(dǎo)途徑的抑制)的任意疾病或病癥。本發(fā)明還提供了增加或增強細胞或組織內(nèi)的多巴胺D1細胞內(nèi)信號傳 導(dǎo)活性的方法，該方法包括使所述細胞或組織與足以抑制PDE1B活性的量 的本發(fā)明的化合物接觸。本發(fā)明還提供了在需要其的患者中治療PDEl-相關(guān)的、尤其是PDEIB-相關(guān)的紊亂或者多巴胺D1受體細胞內(nèi)信號傳導(dǎo)途徑紊亂的方法，該方法包 括給患者施用抑制PDE1B的有效量的本發(fā)明的化合物，其中PDE1B活性調(diào) 節(jié)DARPP-32和/或GluRl AMPA受體的磷酸化。本發(fā)明還提供了(i) 用作藥物、例如用于任意方法或上述任意疾病或病癥的治療的本發(fā)明 的化合物，(ii) 本發(fā)明的化合物在制備用于治療如上所述的任意疾病或病癥的藥物中 的用途，和(iii) 藥物組合物，包含與可藥用稀釋劑或載體組合或聯(lián)合的本發(fā)明的化合 物。因此，用語"治療"將理解為嚢括疾病的預(yù)防和治療或癥狀改善以及 病因的治療。本發(fā)明的化合物可特別用于治療帕金森病。本發(fā)明的化合物可以作為單獨的治療物質(zhì)使用，但是也可以與其它活 性物質(zhì)組合使用或共同施用。例如，由于本發(fā)明的化合物使得Dl激動劑 如多巴胺的活性增強，因而它們可以與常規(guī)多巴胺能藥物治療如左旋多巴 和左旋多巴佐劑(如卡比多巴、COMT抑制劑、MAO-B抑制劑)、多巴胺激動劑和抗膽堿能藥同時、依次或同時期地施用，例如在帕金森病患者的 治療中。實施本發(fā)明所采用的劑量當然將根據(jù)例如所治療的具體疾病或病癥、 所用的具體的本發(fā)明化合物、施用模式以及所希望的療法而改變。本發(fā)明 的化合物可以通過任意適宜的途徑來施用，包括口服、胃腸道外、經(jīng)皮或通過吸入施用，但是優(yōu)選通過口月良施用。通常而言，以約0.01至2.0mg/kg 級別的劑量口服施用凈皮指示可以獲得令人滿意的結(jié)果，例如對于治療上文 所述的疾病而言。因此，在較大型哺乳動物如人中，口服施用的指示日劑 量將為約0.75至150mg，方便地一次施用或者以分開劑量每天施用2至4 次或者以緩釋形式施用。因而，口服施用的單位劑量形式例如可以含有約 從0.2至75或150mg、例如約從0.2或2.0至50、 75或100mg的本發(fā)明 的化合物以及用于其的可藥用稀釋劑或載體。包含本發(fā)明化合物的藥物組合物可以采用蓋侖領(lǐng)域已知的常規(guī)稀釋劑 或賦形劑和技術(shù)來制備。、因而口服劑量形式可以包括片劑、膠嚢劑、溶液 劑和混懸劑等。實施例 實施例1:2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-7，8-二氫-5，7，7-三甲基-[2H]-咪唑并-[l，2-fl吡唑并[4，3-e
嘧咬-4(5外酮(a) 1-甲基嘧啶-2,4，6(1/7，3^,5司-三酮向丙二酸(80g， 0.79mol)和甲基脲(50g， 0.68mol)在180ml乙酸中的70。0:溶液中緩慢加入乙酸酐(1301111，1.3711101)。加入完成后，將反應(yīng)混合物于 卯。C攪拌3小時，然后冷卻至室溫。減壓除去溶劑，殘余物用350ml乙醇 處理以沉淀出淺黃色固體。將固體從乙醇中重結(jié)晶，得到63.1g產(chǎn)物，為 結(jié)晶狀固體(產(chǎn)率65.8%)。 m.p. = 131.2-133.1。C[Lit : m.p. = 130-131.5°C。(b) 6-氯-3-甲基嘧咬-2，4(l好，3^0-二酮于0。C將水(2.7mL)滴加至l-甲基嘧啶-2，4，6(l/T，3好，5/0-三酮(14.2g， 100mol)在POCl3 (95mL)中的混懸液中。然后將反應(yīng)混合物于80。C加熱5 小時。將所得褐色溶液冷卻，減壓蒸發(fā)POCl3。將殘余物用MeOH處理， 所得固體從乙醇中重結(jié)晶，得到11.5g產(chǎn)物(產(chǎn)率71.6%)。m.p. = 279-282。C (分解)[Lit.2: 280-282°C。& NMR (400 MHz， DMSO-d6) 3 3.10 (S， 3H)， 5.90 (S， 1H)， 12.4 (br, 1H)。(c) 6-氯-1-(4-曱氧基節(jié)基)-3-甲基嘧咬-2,4(lH,3H)-二酮將6-氯-3-甲基嘧咬-2，4(1開，3/0-二酮(16.2& lOlmmol)、對曱氧基千基 氯(16.51111, 122mmol)和碳酸鉀(7.0g, 50.7mmol)在無水DMF (200mL)的混 合物于60。C加熱3小時。加入另外的碳酸鉀(3.0g，21.7mmo1)，將反應(yīng)混合 物于60。C加熱另外3小時。趁熱過濾后，將濾液減壓蒸發(fā)至干。所得油直 接用于下一步驟進行合成。將少量產(chǎn)物通過硅膠快速色譜法進行進一步純 化，得到純的產(chǎn)物，為結(jié)晶。力NMR (400 MHz, MeOH-d4) 53.37 (s， 3H)， 3.83 (s， 3H)， 5.24 (s， 2H)， 5.96 (s， 1H), 6.91和7.32 (AB, 4H, /= 6.8 Hz)。 MS (FAB) m/z 281.23 [M+H廣(d) 6-肼基-1-(4-甲氧基千基)-3-甲基嘧啶-2，4(lH,3H)-二酮向6-氯隱l陽(4國甲氧基爺基)-3畫甲基嘧咬國2,4(lH，3H)-二酮(2.4g 8.6mmo1) 在EtOH (25mL)和MeOH (50mL)中的溶液中緩慢加入無水肼(1.2mL)。將 反應(yīng)混合物回流3小時，然后冷卻。將大量乙醚加入反應(yīng)混合物中，然后 過濾，得到2.0g產(chǎn)物，為結(jié)晶狀固體(產(chǎn)率84%)。 ^ NMR(DMSO-d6) 5 3.13 (s, 3H)， 3.73 (s, 3H)， 4.42 (br， 1H)， 5.03 (s， 2H)， 5.15 (s, 1H)， 6.88和7.15(AB， 4H， /= 6.4 Hz)， 8.08 (br， 1H). MS (FAB) m/z 277.28 [M+H+。(e) 7-(4-甲氧基芐基)-5-曱基-lH-吡唑并[3，4-d嘧啶-4，6(5H，7H)-二酮于0。C向6-肼基-l-(4-甲氧基節(jié)基)-3-甲基嘧咬-2，4(lH,3H)-二酮(0.45g， 1.6mmol)在DMF (2mL)中的溶液中滴加POCl3 (0.3ml， 3.3mmo1)。將反應(yīng) 混合物于O'C攪拌1小時后，將混合物用甲醇小心處理，得到白色固體。 將固體通過色諳法進一步純化，得到0.4g產(chǎn)物(產(chǎn)率85%)。 NMR (DMSO-d6) 33.23 (s， 3H), 3.71 (s， 3H)， 5.05 (s， 2H)， 6.85和7.31 (AB， 4H， / =11.6 Hz)， 8.47 (s， 1H), 13.5 (br， 1H). MS (FAB) m/z 287.21 [M+H+。(f) 2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-7-(4-曱氧基千基)-5-甲基-2H-吡唑并[3，4-d嘧啶 -4，6(5H，7H)-二酮將7-(4-曱氧基節(jié)基)-5-甲基-lH-吡唑并[3，4-d嘧啶-4，6(5H，7H)-二酮 (0.312g， 1.09mmo1)、 /i-聯(lián)苯曱基溴(0.296g， 1.20mmol)和碳酸鉀(0.151g， 1.09mmol)在丙酮(20mL)中的混合物于室溫攪拌過夜。減壓蒸發(fā)溶劑。將 殘余物直接通過色鐠法純化，得到0,382g產(chǎn)物，為白色固體(產(chǎn)率77.5)。 ifi[ NMR (400 MHz， CDC13) 53.37 (s， 3H)， 3.75 (s， 3H)， 5.15 (s， 2H)， 5.34 (s, 2H), 6.81 (m, 2H)， 7.27 (m， 3H)， 7.47 (m， 4H), 7.60 (m， 4H)， 7.87 (s， 1H)。 MS (FAB) m/z 453.3 [M+H]+。(g) 2-(聯(lián)苯-4-基曱基)-5-甲基-2H-吡唑并[3，4-d嘧啶-4,6(5H，7H)-二酮向2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-7-(4-甲氧基節(jié)基)-5-甲基-2H-吡唑并3，4-d]嘧啶 -4,6(5H，7H)-二酮(300mg， 0.663mmol)在THF (9mL)中的溶液中加入硝酸 鈰(IV)銨(L82g， 3.32mmol)在水(3mL)中的溶液。將所得橙色溶液于室溫攪 拌過夜。加入另外一批0入]\(1.82&3.3211111101),將混合物攪拌6小時，然 后加入第三批CAN(1.82g),并將混合物于室溫攪拌過夜。將反應(yīng)混合物蒸 發(fā)至干。殘余物用鹽水處理，用二氯甲烷萃取5次。合并有機相并濃縮。 將殘余物通過色鐠法純化，以高產(chǎn)率獲得產(chǎn)物，為白色固體。iHNMR(400 MHz, DMDO-d6) 5 3.16 (s， 3H)， 5.37 (s， 2H)， 7.38 (m， 3H)， 7.46 (m， 2H),7.65 (m， 4H)， 8.59 (s， 1H)， 11.6 (s， 1H). MS (FAB) m/z 333.3 [M+H]+。(h) 2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-6-氯-5-曱基-2H-吡唑并[3，4-d嘧啶-4(5H)-酮將2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-5-甲基-2H-吡唑并[3，4-dl嘧啶-4,6(5H，7H)-二酮 (25mg， 0.075mmol)在POCl3 (10mL)中回流60小時，將混合物蒸發(fā)至干。 殘余物通過硅膠快速色鐠法純化，得到26mg產(chǎn)物，為白色固體(產(chǎn)率 98.5%)。 & NMR (400 MHz, CDC13) 33.68 (s， 3H)， 5.45 (s， 2H)， 7,39 (m， 3H), 7.43 (m， 2H)， 7.59 (m， 4H)， 8.01 (s， 1H). MS (FAB) m/z 351.2 [M+H+。(i) 2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-6-(1-羥基-2-曱基丙烷-2-基氨基)-5-甲基-2H-吡唑并 [3，4-d嘧啶-4(5H)-酮將2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-6-氯-5-甲基-211-吡唑并[3，4-d嘧啶-4(5H)-酮 (26mg, 0.074mmol)和2-iJ^2誦曱基畫l-丙醇(71nL， 0.74mmol)在DMF (lmL) 中的溶液于110。C加熱過夜。然后將反應(yīng)混合物通過色鐠法純化，得到 21.1mg產(chǎn)物(產(chǎn)率71%)。 MS (FAB) m/z 404.2 [M+H+。(j) 2-(聯(lián)苯-4-基曱基)-7，8-二氫-5，7，7-三甲基-[2用-咪唑并-[l，2-"吡唑并 [4，3-e嘧咬-4(5用-酮在氬氣中，向2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-6-(l-羥基-2-甲基丙烷-2-基氨基)-5-曱 基-2H-吡唑并[3，4-d嘧啶-4(5H)-酮(17mg， 0.042mmol)在二氯曱烷(lmL)中 的溶液中加入2.0M亞硫酰氯的CH2Cl2溶液(63fiL， 0.126mmo1)。將反應(yīng)混 合物于室溫攪拌過夜。將反應(yīng)物用5% NaHC03淬滅，所得混合物通過色 鐠法純化，得到llmg終產(chǎn)物，為白色固體(產(chǎn)率68%)。 & NMR (400 MHz, DMSO-d6 +CDC13) 3 1.36 (s， 6H)， 3.30 (s， 3H)， 3.69 (s， 2H)， 5.30 (s， 2H)， 7.36 (m, 3H)， 7.43 (m， 2H)， 7.58 (m, 4H), 8.10 (s， 1H)。 MS (FAB) m/z 386.1 [M+H+。實施例2順式-(6a/^，10aP)-l-(4-苯曱酰基節(jié)基)-5，6a，7,8，9，10，10a-七氫-5-甲基-3-(苯 基氨基)環(huán)己三烯并[4，51咪唑并[l，2-fl吡唑并[4，3-e嘧啶-4(Lfi0-酮<formula>formula see original document page 37</formula>(a) 7-(4-甲氧基芐基)-5-曱基-3-(苯基氨基吡唑并[3，4-d嘧啶 -4，6(5仏7用畫二酮將異硫氰酸苯基酯(3.9ml， 32.7mmol)加入6-肼基-1-(4-甲氧基節(jié)基)-3-甲基嘧啶-2，4(lH,3H)-二酮(0.45g， 1.6mmol)在DMF (12mL)中的混懸液中。 將反應(yīng)混合物于120。C加熱40小時，然后減壓蒸發(fā)以除去溶劑。將殘余物 用己烷洗滌，然后用MeOH(125mL)處理，于-15。C儲存2天，得到結(jié)晶狀 固體。將固體從CH30H-EtOAc中重結(jié)晶，得到2.5g產(chǎn)物(產(chǎn)率61%)。 NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 3.21 (s, 3H)， 3.73 (s， 3H)， 5.01 (s， 2H), 6.88-7.36 (m， 9H)。 MS (FAB) m/z 378.3 [M+H+。(b) 5-甲基-3-(苯基氨基)-Lff-吡唑并[3，4-d嘧啶-4,6(5及，7fl)-二酮在氬氣下，將AlCl3 (0.733g， 5.50mmol)加入7-(4-曱l^節(jié)基)-5-甲基 腳3國(苯基^J0-lH-吡唑并[3,4-d嘧啶-4，6(5H，7H)-二酮(0.692g， 1.83mmol)和 茴香醚(40jiL， 0.367mmol)在1，2-二氯乙烷(10mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合 物于室溫攪拌30分鐘，然后用水淬滅，同時冷卻。將所得混懸液經(jīng)硅藻土 層過濾，硅藻土用MeOH (20mL)洗滌。用大量THF從硅藻土中洗脫出產(chǎn) 物。將THF洗脫液蒸發(fā)，得到0.47g產(chǎn)物(產(chǎn)率99%)。 MS (FAB) m/z 258.2 [M+H+。(c) 6-氯-5-甲基-3-(苯基氨基)-l」ff-吡唑并[3,4-d嗜咬-4(5/0-酮將5-曱基-3-(苯基^i^)-lJy-吡唑并[3，4-d]嗜啶-4,6(5好，7用-二酮(450mg,1.75mmol)在POCl3(20mL)中回流60小時，將混合物蒸發(fā)至干。殘余物通 過珪膠快速色鐠法純化，得到122mg產(chǎn)物，為白色固體，回收得207mg原 料(產(chǎn)率47%)。 MS (FAB) m/z 276.1 [M+H+。(d) 6畫((1及*,2及*)-2-羥基環(huán)己基氨基)陽5國曱基-3-(苯基狄)-l/7國吡唑并[3，4-d
嘧咬畫4(5外酮將6-氯-5-甲基-3-(苯基氨基)-l/T-吡唑并[3，4-d嘧啶-4(5^0-酮(75.8mg， 0.275mmo1)、反式-2-#^-環(huán)己醇鹽酸鹽(83.4mg， 0.55mmol)和DIPEA (144 jiL, 0.825mmol)在DMF (3mL)中的溶液于110。C加熱過夜。將反應(yīng)混合物 減壓蒸發(fā)以除去DMF。然后將殘余物通過色譜法純化，得到63.1mg產(chǎn)物 (產(chǎn)率64.7%)。 MS (ESI) m/z 355.0 [M+H+。(e) 順式-(6a及、10aP)-5，6a，7，8，9，10，10a-七氫-5-曱基-3-(苯基氨基)環(huán)己三 烯并[4，51咪唑并[l，2-ol吡唑并[4，3-e嘧啶-4(l/0-酮將2.0M亞硫酰氯的CH2C12溶液(267jiL, 0.534mmo1)加入 6-((1及*，2及*)-2-羥基環(huán)己基氨基)-5-曱基-3-(苯基氨基)-lH-吡唑并[3，4-d嘧 咬-4(5H)畫酮(63.1mg, 0.178mmol)在CH2C12 (6mL)和THF (4mL)中的溶液 中。將反應(yīng)混合物于室溫攪拌過夜，然后用100nL28。/。NH4OH淬滅。將 所得混合物濃縮，通過色語法純化，得到25mg產(chǎn)物，為白色固體(產(chǎn)率 42%)。 MS (ESI) m/z 337.1 [M+H+。(f) 順式-(6aiT，10aP)-l-(4-苯甲?；S基)-5,6a，7，8，9,10，10a-七氫-5-曱基 -3-(苯基氨基)環(huán)己三烯并[4，51咪唑并1，2-"吡唑并[4，3^嘧啶-4(1司-酮在氬氣下，將順式-(6a及 10aP)-5，6a，7，8，9，10,10a-七氫-5-甲基-3-(苯基 氨基)環(huán)己三烯并[4,5咪唑并[1,2-fl吡唑并4，3-e嘧啶-4(1用-酮(7.1mg, 0.021mmo1)、 4-苯甲?；?jié)基溴(5.8mg， 0.021mmol)和K2C03 (2.92mg， 0.021mmol)在DMF (lmL)中的混合物于室溫攪拌過夜。反應(yīng)混合物通過半 制備型HPLC純化，得到3.5mg終產(chǎn)物(產(chǎn)率31%)。 MS (ESI) m/z 531.1 [M+H+。實施例33-芐基-2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-7，8-二氬-5，7，7-三甲基-[2司-咪唑并-[l，2-fl吡唑并 [4，3-e嘧咬-4(5司-酮(a) 6-(2-(聯(lián)苯-4畫基亞甲基)肼基)-1-(4-甲氧基芐基)-3-甲基嘧啶-2,4(l及，3^國 二酮將4-苯基苯甲醛(395mg， 2.17mmol)在EtOAc中的溶液緩慢加入用干 冰冷卻的6-肼基-1-(4-甲氧基千基)-3-曱基嘧啶-2，4(lH，3H)-二酮(200mg， 0.724mmol)在EtOAc中的漿狀液中。加入后，將反應(yīng)混合物于室溫攪拌2 小時。減壓蒸發(fā)溶劑，殘余物用MeOH研制，然后過濾，得到256mg產(chǎn) 物，為淺黃色固體(產(chǎn)率80.3%)。 & NMR (400 MHz，DMSO-d6) 53.17 (s， 3H), 3.71 (s， 3H)， 5.22 (s， 2H)， 5.59 (s， 1H), 6.91和7.21 (AB， / = 7.2 Hz, 4H)， 7.37-7.81 (m， 9H)， 8.36 (s， 1H), 10.67 (s, 1H)。 MS (FAB) m/z 441.4 [M+H]+。(b) ;3-芐基J-(聯(lián)苯4-基甲基)-;(4-曱氧基節(jié)基)-5-甲基-2J7-吡唑并[3,4-d嘧 啶國4，6(5好，7用-二酮于50。C將乙酸(4.4mL)加入6-(2-(聯(lián)苯-4-基亞甲基)肼基)-l-(4-曱氧基 芐基)-3-甲基嘧啶-2，4(li/,3/0-二酮(3,2g， 7.26mmol)在DMF (50mL)和 Bi^OH (25mL)中的溶液中。將哌啶(8.7mL)與2-苯基乙醛(8.5ml， 72.6mmo1) 在DMF (20mL)中的溶液混合，將所得綠色溶液加入上述溶液中。將反應(yīng) 混合物在氬氣下于40-45。C攪拌36小時，在高真空中蒸發(fā)溶劑。殘余物用 MeOH(200mL)處理，沉淀出1.23g產(chǎn)物，為砂質(zhì)固體(產(chǎn)率31.4%)。 MS(FAB) m/z 543.4 [M+H十。(c) 3-芐基-2-(聯(lián)苯-4-基曱基)-5-甲基-2好-吡唑并[3，4-d嘧啶-4，6(5K,7司-二酮將硝酸鈰(IV)銨(204mg， 0.371mmol)在水(0.6mL)中的溶液加入3-節(jié)基 -2-(聯(lián)苯-4-基曱基)-7-(4-甲氧基爺基)-5-甲基-2H-吡唑并[3，4-d嘧啶 -4，6(5H，7H)-二酮(40.3mg， 0.0743mmol)在THF (2mL)中的溶液中。將所得 橙色溶液于室溫攪拌過夜。加入另一批CAN(204mg，0.371mmo1),將混合 物攪拌3小時，然后加入第三批CAN (204 mg)并將混合物于室溫攪拌過夜。 將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干。殘余物用鹽水處理，用二氯甲烷萃取5次。合并 有機相并濃縮。殘余物通過色鐠法純化，得到11.6mg產(chǎn)物，為白色固體(產(chǎn) 率36.9%)。 ！11 NMR (400 MHz,丙酮-&) 53.27 (s， 3H)， 4.51 (s， 2H), 5.33 (s， 2H)， 7.13-7,62 (m， 14H)， 10.26 (s， 1H)。 MS (FAB) m/z 423.2 [M+H廣。(d) 3-節(jié)基-2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-6-氯-5-曱基-2i7-吡唑并[3，4-d嘧啶-4(5^)-酮將3-芐基-2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-5-甲基吡唑并[3,4-d嘧啶 畫4，6(5/T，7/0-二酮(10mg, 0.024mmol)在POCl3 (10mL)中回流4天，然后將 混合物蒸發(fā)至干。將殘余物通過硅膠快速色譜法純化，得到10.4mg產(chǎn)物， 為白色固體(產(chǎn)率100%)。 MS (FAB) m/z 441.2 [M+H+。(e) 3-芐基-2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-6-(1-羥基-2-甲基丙烷-2-基亞氨基)-5-甲基 -6，7-二氫-2好-吡唑并[3,4-d嗜咬-4(5/0-酮將3-千基-2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-6-氯-5-甲基-2及-吡唑并[3，4-d]嘧啶 -4(5巧畫酮(9.511^, 0.022mmol)和2-feJ^國2-甲基國l-丙醇(21jiL， 0.22mmol)在 DMF (2mL)中的溶液于110。C加熱過夜。然后將反應(yīng)混合物通過色鐠法純 化，得到5.5mg產(chǎn)物(產(chǎn)率52%)。 MS (FAB) m/z 494.4 [M+H]+。④3-芐基-2-(聯(lián)苯-4-基曱基)-7，8-二氫-5，7，7-三曱基-[2司-咪唑并-[l，2-fl]吡 唑并[4，3-^嘧啶-4(5用- 酮將2.0M亞硫酰氯的二氯甲烷溶液(25jiL， 0.050mmol)加入3-爺基-2-(聯(lián) 苯-4-基甲基)-6-(1-羥基-2-曱基丙烷-2-基亞氨基)-5-甲基-6,7-二氫-2樂吡唑 并[3，4-d嘧啶-4(5fl)-酮(5.0mg， O.OlOmmol)在二氯甲烷(lmL)中的溶液中。 將反應(yīng)混合物于室溫攪拌過夜，然后用5% NaHC(V淬滅。將所得混合物 通過色鐠法純化，得到3.2mg終產(chǎn)物(產(chǎn)率67%)。 MS (FAB) m/z 476.4 [M+H+。實施例4l-(聯(lián)苯-4-基甲基)-7,8-二氫-5，7，7-三甲基-3-(苯基氨基)-[Lff]-咪唑并-[1，2《
吡唑并[4，3-e嘧啶-4(5Z/)-酮該合成方法類似于實施例2,其中在步驟(d)中加入2-氨基-2-甲基-1-丙醇代替反式-2-氨基-環(huán)己醇鹽酸鹽和在步驟①中加入/;-聯(lián)苯基甲基溴代 替苯甲?；?jié)基溴。實施例5l-(4-(l，2，3-噻二唑-4-基)芐基)-7，8-二氫-5，7，7-三甲基-3-(苯基氨基)-[l用畫咪 唑并-[l，2-a吡唑并[4,3-e嘧啶-4(5司-酮<formula>formula see original document page 42</formula> 該合成方法類似于實施例2，其中在步驟(d)中加入2-氨基-2-甲基-1-丙醇代替反式-2-氨基-環(huán)己醇鹽酸鹽和在步驟(f)中加入4-(1，2，3-噻二唑-4-基)千基溴代替苯甲酰基千基溴。實施例6l-(聯(lián)苯-4-基甲基)-3-((聯(lián)苯-4-基甲基)(苯基)氨基)-7，8-二氫-5，7，7-三甲基 -[1司-咪唑并-[1，2-"吡唑并[4，3-^嘧啶-4(5^0-酮<formula>formula see original document page 42</formula>該合成方法類似于實施例2，其中在步驟(d)中加入2-氨基-2-曱基-1-丙醇代替反式-2-氨基-環(huán)己醇鹽酸鹽和在步驟(f)中加入p-聯(lián)苯基曱基溴代 替苯甲?；?jié)基溴。實施例7順式-(6aiT，10a^)-5,6a，7，8，9，10，10a-七氫-5-甲基-3-(苯基氨基)-l-(4-(吡咬-2-基)芐基)-環(huán)己三烯并[4，5咪唑并[l，2-"吡唑并[4,3-e嘧啶-4-(LH)-酮該合成方法類似于實施例2,其中在步驟(f)中加入2-(4-(溴甲基)笨基) 吡咬代替苯曱酰基節(jié)基溴。實施例8順式-(6ai^，10a^)-2-(4-(吡啶誦2-基)節(jié)基)畫5，6a，7，8，9，10，10a-七氫-5咖甲基 一3-(苯基氨基)環(huán)己三烯并[4，5咪唑并[l，2-fl吡唑并[4,3-e嘧啶-4(2fl)-酮該合成方法類似于實施例2，其中在步驟(f)中加入4-吡咬-2-基節(jié)基溴 代替苯曱?；?jié)基溴。實施例9順式-(6a及M0aP)-3-(節(jié)基)畫5，6a，7，8，9，10，10a國七氫曙5-甲基-2國(4國(l，2,3-噻二 唑-4-基)爺基)-環(huán)己三烯并[4，5咪唑并[l，2-fl吡唑并[4，3-e嘧咬-4(2用-酮該合成方法類似于實施例3,其中在步驟(a)中加入4-(1,2，3-噻二唑-4-基)苯甲醛和DMF代替4-苯基苯甲醛并加熱過夜和在步驟(e)中加入反式-2-氨基-環(huán)己醇鹽酸鹽代替2-氨基-2-甲基-l-丙醇。實施例10順式-(6a及M0aS"-3-(節(jié)基)-2-(4-聯(lián)苯-4-基甲基)-5，6a，7，8，9,10，10a-七氫-5誦 甲基-環(huán)己三烯并[4，5咪唑并[l,2-"吡唑并[4，3國e嘧啶-4(2/0誦酮該合成方法類似于實施例3，其中在步驟(e)中加入反式-2-^-環(huán)己醇 鹽酸鹽代替2-氨基-2-曱基-l-丙醇。實施例11(及)-3-(芐基)-2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-7，8-二氫-7-異丙基-5-曱基-[2司-咪唑并 -1，2-司吡唑并4，3^嘧啶-4(5/0-酮該合成方法類似于實施例3，其中在步驟(e)中加入(R)-2-M-3-甲基丁 烷小醇代替2-氨基-2-甲基-l-丙醇。實施例12(6a及，9a5)誦5，6a，7，8，9，9a畫六氫畫5誦曱基-3畫(苯基氨基)誦2-(4誦吡啶畫2-基)畫千基)誦環(huán) 戊二烯并[4，5]咪唑并[l，2-al吡唑并[4,3-e嘧啶-4(2用-酮該合成方法類似于實施例2，其中在步驟(d)中加入(7及，2i^-2-iJ^環(huán) 戊醇代替反式-2-氨基-環(huán)己醇鹽酸鹽和在步驟(f)中加入2-(4-(溴甲基)苯基) 吡啶代替苯曱酰基節(jié)基溴。實施例13(6a及，9a5)-5，6a，7，8,9,9a-六氫-5畫曱基隱3-(苯基氨基)-l-(4-吡啶-2-基)-節(jié)基)國環(huán) 戊二烯并4，5咪唑并[l，2-"l吡唑并[4，3-el嘧啶-4(Lff)-酮該合成方法類似于實施例2,其中在步驟(d)中加入(7及，2及)-2-氨基-環(huán) 戊醇代替反式-2-氨基-環(huán)己醇鹽酸鹽和在步驟(f)中加入4-吡咬-2-基千基溴 代替苯甲酖基芐基溴。實施例14(6ai ，9a5)畫3國(芐基氨基)畫5,6a，7，8，9，9a國六氫畫5國曱基-2-(4國吡啶-2國基)-節(jié)基)隱環(huán) 戊二烯并[4，5咪唑并[l，2-a吡唑并[4,3-e]嘧啶-4(2用-酮該合成方法類似于實施例2，其中在步驟(a)中加入異硫氰酸節(jié)基酯代 替異硫氰酸苯基酯；在步驟(d)中加入rZ/U^-2-氨基-環(huán)戊醇代替反式-2-氨 基-環(huán)己醇鹽酸鹽；和在步驟(f)中加入4-吡咬-2-基爺基溴代替苯甲?；?jié)基 溴。實施例15(6a及,9aS)-3-(苯基氨基)-5，6a，7，8，9,9a-六氫-5-甲基-2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-環(huán)戊 二烯并[4，5]咪唑并[l，2《吡唑并4，3-^嗜咬-4(2/0-酮該合成方法類似于實施例2，其中在步驟(d)中加入^/及，2i^-2-氨基-環(huán) 戊醇代替反式-2-氨基-環(huán)己醇鹽酸鹽和在步驟(f)中加入4-(溴曱基)聯(lián)苯代 替苯甲?；?jié)基溴。實施例162-(聯(lián)苯-4-基甲基)-7，8，9-三氫-5，8，8-三甲基-3-(苯基氨基)-[2司-嘧啶并 -[1，2- ]吡唑并[4，3-^嘧啶-4(5/0-酮該合成方法類似于實施例2,其中在步驟(d)中加入3-氨基-2，2-二甲基 -1-丙醇代替反式-2-氨基-環(huán)己醇鹽酸鹽和在步驟(f)中加入4-(溴甲基)聯(lián)苯 代替苯甲酰基節(jié)基溴。實施例17(7R)-2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-7,8-二氫-5,7-二曱基-3-(苯基氨基H2司-咪唑并-[1 ，2-"吡唑并[4，3-e嘧咬-4(5^)-酮乂該合成方法類似于實施例2，其中在步驟(d)中加入(R)-2-氨基丙烷-l-醇代替反式-2-氨基-環(huán)己醇鹽酸鹽和在步驟(f)中加入4-(溴甲基)聯(lián)苯代替 苯甲?；?jié)基溴。實施例18(8R)-2-(聯(lián)苯-4-基曱基)-7，8-二氫-5，8-二曱基-3-(苯基氨基H2^1-咪唑并 -[1，2《1吡唑并[4,3-^嘧啶-4(5用-酮該合成方法類似于實施例2，其中在步驟(d)中加入(R)-l-氨基丙烷-2-醇代替反式-2-氨基-環(huán)己醇鹽酸鹽和在步驟(f)中加入4-(溴甲基)聯(lián)苯代替 苯甲?；?jié)基溴。實施例19<formula>formula see original document page 49</formula>該合成方法類似于實施例2,其中在步驟(d)中加入(R)-2-氨基-3-曱基 丁烷-l-醇代替反式-2-氨基-環(huán)己醇鹽酸鹽和在步驟(f)中加入4-(溴甲基)聯(lián) 苯代替苯甲?；Щ?。實施例20(6a及，9a^)-3-(苯基氨基)-5，6a，7，8，9，9a-六氫國5醒甲基-2-(4-(三氟甲基)-節(jié)基)誦環(huán) 戊二烯并[4,5]咪唑并l,2-"I吡唑并[4，3-el嘧啶-4(2^)-酮<formula>formula see original document page 49</formula>該合成方法類似于實施例2,其中在步驟((1)中加入(7及，2及>2-氨基-環(huán) 戊醇代替反式-2-氨基-環(huán)己醇鹽酸鹽和在步驟(f)中加入/;-三氟曱基節(jié)基溴 代替苯曱酰基節(jié)基溴。實施例21(6a及，9a^-3-(苯基氨基)-5，6a，7，8，9，9a-六氫-5-甲基-2-((6-三氟甲基)-吡啶畫3畫 基)曱基)-環(huán)戊二烯并[4，51咪唑并[l,2-"吡唑并[4，3-e嘧啶-4(2司-酮該合成方法類似于實施例2,其中在步驟(d)中加入(7及，2^-2-氨基-環(huán) 戊醇代替反式-2-氨基-環(huán)己醇鹽酸鹽和在步驟(f)中加入5-(溴曱基)-2-(三氟 甲基)吡啶代替笨甲?；?jié)基溴。實施例22(63及,9&5>3-(苯基氨基)-5，63，7，8，9，93-六氫-5-甲基-2-(3-氟-4-(三氟甲基)曙爺 基)-環(huán)戊二烯并[4,5咪唑并[l，2-"I吡唑并[4，3-el嘧啶-4(2用誦酮該合成方法類似于實施例2，其中在步驟(d)中加入"及，2i^-2-氨基-環(huán) 戊醇代替反式-2-氨基-環(huán)己醇鹽酸鹽和在步驟(f)中加入3-氟-4-三氟甲基-千 基溴代替苯甲?；?jié)基溴。實施例23(6a及，9a5)-3-(苯基氨基)-5，6a，7,8，9，9a-六氫-5-甲基-2-(4-曱基磺?；?節(jié)基)誦 環(huán)戊二烯并[4，5]咪唑并[l，2-fl吡唑并[4，3-e嗜啶-4(2^0-酮該合成方法類似于實施例2,其中在步驟(d)中加入r/及，2R)-2-氨基-環(huán) 戊醇代替反式-2-M-環(huán)己醇鹽酸鹽和在步驟(i)中加入/7-甲基磺酰基-千基 溴代替苯曱?；?jié)基溴。實施例24采用IMAP磷酸二酯酶分析試劑盒測定PDE1B體外抑制磷酸二酯酶1B (PDElB)是將環(huán)鳥苷酸(cGMP)轉(zhuǎn)化為5，-鳥苷一磷酸 (5'-GMP)的鉤/4丐調(diào)蛋白依賴性磷酸二酯酶。PDElB還可以將改變的cGMP 底物、例如熒光分子cGMP-熒光素轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的GMP-熒光素。由cGMP-熒光素生成GMP-熒光素可以采用例如IMAP (Molecular Devices, Sunnyvale, CA)固定化金屬親和微粒試劑進行定量。簡言之，IMAP試劑以高親和力與在GMP-焚光素中發(fā)現(xiàn)而未在 cGMP-熒光素中發(fā)現(xiàn)的游離5，-磷酸結(jié)合。所得的GMP-熒光素-IMAP復(fù) 合物相對于cGMP-熒光素而言是大的。在大的、緩慢倒轉(zhuǎn)的復(fù)合物中建立 的小的熒光團可以與未結(jié)合的熒光團區(qū)分開，因為它們發(fā)熒光時所釋放的 光子保持與用于激發(fā)熒光的光子相同的極性。在磷酸二酯酶分析中，cGMP-熒光素(其不能與IMAP結(jié)合并因而幾 乎不保留熒光偏振)被轉(zhuǎn)化為GMP-熒光素，其當與IMAP結(jié)合時使得焚光 偏振(Amp)產(chǎn)生大的增加。因此，磷酸二酯酶的抑制被作為Amp的降低來 檢測。 酶分析材料除了 IMAP試劑外，所有化學(xué)物質(zhì)可自Sigma-Aldrich (St. Louis，MO)獲得，IMAP試劑(反應(yīng)緩沖液，結(jié)合緩沖液，F(xiàn)L-GMP和IMAP珠)可 自Molecular Devices (Suimyvale，CA)獲得。分析將3，，5，-環(huán)核苷酸特異性牛腦磷酸二酯酶(Sigma， St. Louis, MO) 用50y。甘油重構(gòu)至2.5U/ml。于30。C和在pH7.5下，1單位的Sl^分鐘將 l.Opmole 3',5，-cAMP水解為5，-AMP。將一份酶加入1999份反應(yīng)緩沖液(30CaCl2， 10U/ml釣調(diào)蛋白(Sigma P2277)、 10mM Tris畫HCl pH 7.2、 10mM MgCl2、 0.1% BSA、 0.05%NaN3)t，得到終濃度為1.25mU/ml。將99^1 稀釋的酶溶液加入平底96孔聚乙烯板的各孔中，其中加入有l(wèi)pl溶于100% DMSO中的受試化合物。將化合物與酶混合并于室溫預(yù)處理10分鐘。在384孔微量滴定板中，通過合并4份酶與抑制劑混合物和1份底物 溶液(0.225inM)開始FL-GMP轉(zhuǎn)化反應(yīng)。將反應(yīng)物于室溫在暗處孵育15分 鐘。向384孔板的各孔中加入60^1結(jié)合試劑(IMAP珠在補充有1:1800消 泡劑稀釋液的結(jié)合緩沖液中的l:400稀釋液)阻止反應(yīng)。將板于室溫孵育1 小時，以允許IMAP結(jié)合進行完全，然后置于Envision多模式微量板讀數(shù) 器(PerkinElmer， Shelton, CT)中以測定熒光偏振(Amp)。作為降低的Amp所測得的GMP濃度的降低指示了 PDE活性的抑制。 ICso值通過測定在0.0037nM至80，000nM范圍內(nèi)的8至16個濃度的化合 物存在下的酶活性、然后將藥物濃度對Amp作圖來確定，其允許采用非線 性回歸分析軟件(XLFit; IDBS， Cambrige， MA)來估計ICs。值。在該分析中，實施例1-14的化合物的ICs。值低于luM，通常低于 10nM。
權(quán)利要求
1.7，8-二氫-[1H或2H]-咪唑并[1，2-a]吡唑并[4，3-e]嘧啶-4(5H)-酮或7，8，9-三氫-[1H或2H]-嘧啶并[1，2-a]吡唑并[4，3-e]嘧啶-4(5H)-酮，其在1或2位上被C2-9烷基、C3-9環(huán)烷基、雜芳基烷基或被取代的芳基烷基取代，為游離、鹽或前藥形式。
2. 權(quán)利要求l的化合物，具有式I結(jié)構(gòu)，(i) 是H或d_4烷基例如曱基；(ii) R4是H或d.4烷基且R2和R3獨立地是H或d.4烷基、芳基、雜芳基、 雜芳基烷氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷基或芳基烷基；或者 R2是H且R3和R4—起形成二-、三-或四-亞曱基橋；(iii) Rs是被取代的雜芳基烷基，例如被卣代烷基取代，或者 Rs與式A的吡唑并部分上的氮之一連接，并且為式A部分其中R9 式A其中X、 Y和Z獨立地是N或C,且Rs、 R9、 Ru和Ru獨立地是H 或鹵素，且Rw是鹵素、烷基、環(huán)烷基、卣代烷基、芳基、雜芳基、噻 二唑基、二唑基、三唑基、四唑基、芳基羰基、烷基磺?；?、雜芳基 皿或烷氧基羰基；條件是，當X、 Y或Z是氮時，R8、 R9或Rk)分 別不存在；(iv) R6是H、烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基氨基、雜芳基氨基、 N，N-二烷基氨基、N，N-二芳基氨基或N-芳基-N-(芳基烷基)氨基；且(v) n=0或1;(vi) 當n=l時，A是-C(RuRm)國 其中Ru和R"獨立地是H或d-4烷基、芳基、雜芳基、雜芳基烷氧基、 芳基烷氧基、雜芳基烷基或芳基烷基，游離、鹽或前藥形式。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中所述化合物為式II化合物，o式II其中Ra和Rb獨立地是H或Cw烷基； R6是苯基氨基或芐基氨基； Rk)是笨基、吡咬基或噻二唑基； 游離或鹽形式。
4.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中所述化合物為式III化合物,<formula>formula see original document page 3</formula>式III其中R2是H且R3和R4 —起形成三-或四-亞甲基橋[優(yōu)選載有R3和R4的碳 分別具有R和S構(gòu)型；或者R2和R3中至少一個是甲基、異丙基或芳基烷 氧基且R4是H;或者R2和R3是H且R4是d-4烷基；R6是苯基氨基或芐基氨基；Rn)是鹵代烷基、苯基、吡-A^(例如吡咬-2-基)或噻二唑基(例如1，2,3-噢二唑-4-基)； 游離或鹽形式。<formula>formula see original document page 3</formula>R2是H且R3和R4 —起形成三-或四-亞曱基橋[優(yōu)選載有R3和R4的碳 分別具有R和S構(gòu)型；或者R2和R3中至少一個是甲基、異丙基或芳基烷 氧基且R4是H;或者R2和R3是H且R4是C^烷基；R6是苯基氨基或芐基氨基；
5.Rio是苯基、吡咬基或噻二唑基； 游離或鹽形式。
6.根據(jù)權(quán)利要求l的化合物，具有式Ia結(jié)構(gòu)，其中(i) Ri是H或Cw烷基；(ii) R4是H， R2和R3獨立地是H或C^烷基、芳基或芳基烷基； 或者R2是H且R3和R4—起形成二-、三-或四-亞曱基橋；(iii) Rs與式I的吡唑并環(huán)的氮之一連接，并且是式B的被取代的節(jié)基，R9 式B其中Rs、 R9、 Ru和Ru獨立地是H或鹵素；且1110是鹵素、烷基、環(huán) 烷基、卣代烷基、芳基、雜芳基、芳基羰基或雜芳基羰基；且(iv)R6是H、烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基氨基、雜芳基氨基、 芳基烷基氨基、N，N-二烷基氨基、N，N-二芳基氨基或N-芳基-N-(芳基 烷基)氨基；游離、鹽或前藥形式。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的化合物，其中所述化合物為式V化合物，其中R2是H且R3和R4 —起形成三-或四-亞甲基橋[優(yōu)選載有R3和R4的碳 分別具有R和S構(gòu)型；或者R2和R3各自是曱基且R4是H;或者112和 R4是H且R3是異丙基[優(yōu)選載有R3的碳具有R構(gòu)型；R6是苯基氨基或芐基氨基；Rn)是苯基、吡咬基或噻二唑基； 游離或鹽形式。
8.選自如下的化合物2- (聯(lián)苯-4-基甲基)-7，8-二氫-5，7，7-三曱基-[2^]-咪唑并-[l，2-fl吡唑并[4，3-e
嗜咬-4(5用-酮；順式-(6a及V0aP)-l-(4-苯甲?；S基)-5,6a，7，8，9，10，10a-七氫-5-曱基-3-(苯 基氨基)環(huán)己三烯并[4，5]咪唑并[l，2-fl吡唑并[4,3-e嘧啶-4(l/0-酮；3- 芐基-2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-7，8-二氫-5，7，7-三曱基-[2司-咪唑并-[1，2-"吡唑并 [4，3-e嘧啶-4(5用-酮；l-(聯(lián)苯-4-基甲基)-7，8-二氫-5,7，7-三甲基-3-(苯基氨基Hl司-咪唑并-[l，2-fl
吡唑并[4，3-e嗜啶-4(5^0-酮；1-(4-(1，2，3-噻二唑-4-基)千基)-7，8-二氫-5，7，7-三甲基-3-(苯基氨基)-[1司隱咪 唑并-[l，2-"吡唑并[4，3-e嘧啶-4(5Z0-酮；1- (聯(lián)苯-4-基甲基)-3-((聯(lián)苯-4-基甲基)(苯基)氨基)-7，8-二氫-5，7，7-三甲基 -[1^]-咪唑并-[1，2-"吡唑并[4,3-6嘧咬-4(5/0-酮；順式-(6a及 10aP)-5,6a,7，8，9，10,10a-七氫-5-曱基-3-(苯基氨基)-l-(4-(吡啶 -2-基)芐基)芐基)-環(huán)己三烯并[4，5咪唑并[1，2-"吡唑并[4，3^嘧啶-4-(1/0-酮；順式-(6ai 10a5^)-2-(4-(吡啶-2-基)節(jié)基)-5，6a，7，8，9，10，10a-七氫-5-甲基-3-(苯基氨基)環(huán)己三烯并[4，51咪唑并[1，2《吡唑并[4，3^嘧啶-4(2^)-酮；順式畫(6a及V0aP)-3曙(爺基)畫5，6a,7，8，9,10，10a國七氫隱5-甲基-2-(4-(l，2，3畫噻二唑-4-基)節(jié)基)-環(huán)己三烯并[4，51咪唑并[l，2-fl吡唑并[4，3-e嘧咬-4(2/0-酮；順式-(63/ *，10級》5*)-3-(節(jié)基)-2-(4-聯(lián)苯-4-基甲基)-5，63，7，8，9，10，103-七氫國5-甲基-環(huán)己三烯并[4，51咪唑并l，2-al吡唑并[4，3-el嘧啶-4(2司-酮；(及)-3-(芐基)-2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-7，8-二氫-7-異丙基-5-甲基-[2^]-咪唑并-[l,2-fl吡唑并[4,3-e嘧啶-4(5/0-酮；(6a及，9a5)畫5，6a，7，8，9，9a-六氫-5畫甲基國3畫(苯基氨基)畫2畫(4翻吡啶-2-基)曙千基)-環(huán)戊二烯并[4，5咪唑并[l,2-"I吡唑并[4，3-e嘧咬-4(2^)-酮；(6a及，9a5)國5,6a，7，8，9，9a國六氫畫5畫甲基畫3-(苯基氨基)國l國(4畫吡咬畫2-基)-千基)-環(huán)戊二烯并[4，5咪唑并[l，2-a吡唑并[4，3-el嘧啶-4(LH)-酮；(6ai ，9a5)-3-(節(jié)基氨基)-5，6a，7，8，9，9a-六氫-5-甲基-2-(4-吡啶-2-基)-節(jié)基)-環(huán)戊二烯并[4,5咪唑并[l，2-"l吡唑并[4，3-e嘧啶-4(2^0-酮；(6a及，9a5)-3-(苯基氨基)-5，6a,7，8，9，9a-六氫-5-曱基-2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-環(huán)戊二烯并[4，5咪唑并[1，2《吡唑并[4，3-￡嘧咬-4(2用-酮；2- (聯(lián)苯-4-基曱基)-7，8，9-三氫-5，8，8-三甲基-3-(苯基氨基)-[2司-嘧啶并 -[1，2-"1吡唑并[4，3-《1嘧啶-4(5^)-酮；(7R)-2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-7，8-二氫-5，7-二甲基-3-(苯基氨基H2司-咪唑并 ■ [1 ，2畫a吡唑并[4，3翻e嘧啶畫4(5司畫酮；(8R)-2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-7，8-二氫-5，8-二甲基-3-(苯基氨基)-[2司-咪唑并 -[l，2-fl吡唑并[4,3-e嘧啶-4(5用-酮；(7R)-2-(聯(lián)苯-4-基甲基)-7,8-二氫-3-(苯基氨基)-5-甲基-7-(1-曱基乙基)-[2司-咪唑并-[l，2-"吡唑并[4，3-e嗜啶-4(5司-酮；(6aJ ，9a5)-3-(苯基氨基)-5，6a，7，8，9,9a-六氫-5-曱基-2-(4-(三氟甲基)-節(jié)基)-環(huán) 戊二烯并[4，5咪唑并[l，2-ff]吡唑并[4，3-e嘧啶-4(2/0-酮； (6a及，9a5)-3-(苯基氨基)-5，6a，7，8，9，9a-六氫-5-曱基-2-((6-三氟甲基)-吡啶-3-基)曱基)-環(huán)戊二烯并[4，5咪唑并[l，2-tf吡唑并[4，3-e嘧啶-4(2^0-酮； (6a及，9a5)-3-(苯基氨基)-5,6a，7,8，9，9a-六氫-5-甲基-2-(3-氟-4-(三氟曱基)-節(jié) 基)-環(huán)戊二烯并[4，5咪唑并[l,2-fl]吡唑并[4，3-e嘧啶-4(2用-酮；和 (63及，935)-3-(苯基氨基)-5，63，7，8，9，93-六氫-5-甲基-2-(4-甲基磺?；?節(jié)基)-環(huán)戊二烯并[4，5咪唑并[l，2-"]吡唑并[4,3-el嘧啶-4(2用-酮； 游離或鹽形式或者純的對映異構(gòu)形式。
9. 藥物組合物，包含與可藥用稀釋劑或載體混合的前述權(quán)利要求任一 項的化合物。
10. 治療任意下述病癥的方法帕金森病、多動腿、震顫、運動障礙、 亨廷頓病、阿爾茨海默病和藥物引起的運動紊亂；抑郁、注意力缺陷障礙、 注意缺陷多動癥、雙相性精神障礙、焦慮、睡眠障礙、認知缺損、癡呆、 精神興奮劑戒斷和/或藥物成癮；腦血管疾病、中風(fēng)、充血性心臟病、高血 壓、肺動脈高壓和/或性功能障礙；哮喘、慢性阻塞性肺疾病和/或變應(yīng)性鼻 炎，以及自身免疫性和炎性疾??；和/或特征在于在表達PDEl的細胞中的 低水平cAMP和/或cGMP (或者cAMP和/或cGMP信號傳導(dǎo)途徑的抑制) 的任意疾病或病癥；該方法包括給需要該治療的患者施用有效量的權(quán)利要 求l、 2、 3、 4、 5、 6、 7或8任一項的化合物或者權(quán)利要求9的藥物組合 物。
11. 根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所述病癥是帕金森病。
12. 根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所述病癥是認知缺損。
13. 制備根據(jù)權(quán)利要求l、 2、 3、 4、 5、 6、 7或8任一項的化合物的 方法，該方法包括使7，8-二氫-咪唑并[l，2-a吡唑并[4，3-e嘧啶-4(5/0-酮或7，8,9-三氫-[1好或2^]-嘧啶并[l，2《l吡唑并[4，3-e]嘧咬-4(5Z0-酮與式X-R5 化合物反應(yīng)，其中X是離去基且Rs是C2-9烷基、Cw環(huán)烷基、雜芳基烷基 或被取代的芳基烷基，并分離由此獲得的權(quán)利要求1、 2、 3、 4、 5、 6、 7 或8的化合物。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的化合物，其中所述的7,8-二氫-咪唑并[1，2-
吡唑并[4，3-e嗜啶-4(5司-酮是式IIIJ化合物其中Rw和R6如權(quán)利要求2、 3、 4或5任一項的式I中所定義或者如權(quán)利 要求6和7任一項的式la中所定義。
15.制備權(quán)利要求l、 2、 3、 4、 5、 6或8任一項的化合物的方法，該 方法包括使式VI化合物脫水，其中Rw和[A]n如權(quán)利要求2、 3、 4或5任一項的式I中所定義或者如權(quán) 利要求6和7任一項的式la中所定義， 并回收權(quán)利要求l、 2、 3、 4、 5、 6、 7或8的化合物。
16.制備權(quán)利要求6或7的化合物的方法，該方法包括使權(quán)利要求15 的式V化合物脫水，其中n是0,且其中RL6如權(quán)利要求6或7的式Ia中 所定義，并且回收權(quán)利要求6或7的化合物。
全文摘要
本發(fā)明提供了新的游離、鹽或前藥形式的7，8-二氫-咪唑并[1，2-a]吡唑并[4，3-e]嘧啶-4-酮和7，8，9-三氫-[1H或2H]-嘧啶并[1，2-a]吡唑并[4，3-e]嘧啶-4(5H)-酮化合物，其在1或2位上被C_2-9烷基或C_3-9環(huán)烷基、雜芳基烷基或取代的芳基烷基取代；它們的生產(chǎn)方法，它們作為藥物、特別是作為PDE1抑制劑的用途以及包含它們的藥物組合物。
文檔編號C07D487/00GK101248050SQ200680026973
公開日2008年8月20日 申請日期2006年6月6日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月6日
發(fā)明者H·吳, P·李 申請人:細胞內(nèi)治療公司