專利名稱：地黃莖葉總苷提取物的提取工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有多種醫(yī)藥用途的地黃莖葉總苷提取物及其提取工藝，地黃莖葉總苷提取物能有效地預(yù)防和治療哮喘病、過敏病癥和慢性阻塞性肺病(COPD)等。
背景技術(shù)：
地黃莖葉是玄參科植物地黃Rehmannia glutinosa Libsch.的地上部分的新鮮品或干燥品。地黃是多年生草本，主要為栽培品，亦野生于海拔50-1100米的山坡及路旁荒地。分布于遼寧、內(nèi)蒙古、河北、河南、山西、陜西、山東、安徽、浙江、湖北、湖南、四川等地。文獻(xiàn)記載，地黃莖葉中含有環(huán)烯醚萜苷類、單萜及其苷、黃酮及其苷、有機(jī)酸、多糖、氨基酸、甾醇等多種化學(xué)成分，及鈣、鎂、鉀、鐵、鋅、錳等二十種金屬元素。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供地黃莖葉總苷提取物的制備方法。地黃莖葉總苷提取物是從中藥地黃莖葉中提取的，地黃莖葉總苷提取物主要由以下化學(xué)成分組成梓醇(catalpol)、地黃苷A，B，C，D(rehmannioside A，B，C，D)、乙酰梓醇(acetylcatalpol)、二氫梓醇(dihydrocatalpol等，以及其它微量的環(huán)烯醚萜類成分和其它微量成分，并以梓醇為主要有效成分。所述地黃莖葉總苷提取物環(huán)烯醚萜苷總苷含量應(yīng)不低于50％，梓醇含量應(yīng)大于20％。
本發(fā)明提供了地黃莖葉總苷提取物的提取、分離、純化的方法。該方法是1、取地黃莖葉，用水、或水與甲醇、乙醇、丙酮等溶劑組成的二種及多種混合溶劑提取，提取液在真空中70℃以下濃縮并蒸去有機(jī)溶劑(如無有機(jī)溶劑時(shí)也可以直接上柱)，加水至合適的體積，去除沉淀(如有沉淀)。
2、上述水溶液通過活性炭分離柱。
3、用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，為了提高地黃莖葉總苷的含量，可以再用3-10％的稀乙醇，或5-15％的稀甲醇或3-10％的稀丙酮洗至洗脫液近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)。
4、用10％以上的乙醇水溶液，或甲醇或者15％以上的甲醇水溶液，或者10％以上的丙酮水溶液洗脫。收集洗脫液并且濃縮至干，即得地黃莖葉環(huán)烯醚萜苷總苷提取物。
對上述提取物進(jìn)行TLC分析，點(diǎn)上相應(yīng)的對照品，能很容易檢測出梓醇，也能檢出地黃莖葉苷A，B，C，D、乙酰梓醇、二氫梓醇等。檢測條件是用煙臺(tái)市芝罘黃務(wù)硅膠開發(fā)試驗(yàn)廠生產(chǎn)的高效硅膠板HSGF254板。展開劑用以下系統(tǒng)，1、乙酸乙酯-甲乙酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)；2、氯仿-甲醇-水(15∶10∶1)；3、氯仿∶甲醇∶水∶甲酸(30∶10∶1∶1)。顯色劑用碘蒸汽顯色，也可以用2％的硫酸香草醛溶液噴霧顯色。
本發(fā)明的創(chuàng)造性在于通過科學(xué)可行的方法從地黃莖葉中提取分離出了用于治療哮喘病和其它過敏性疾病的地黃莖葉環(huán)烯醚萜苷總苷提取物。如前所述，本發(fā)明提供的用于治療哮喘病和其它過敏性疾病的藥物的有效成分是包括含有梓醇、地黃苷A，D、乙酰梓醇、二氫梓醇等的地黃莖葉總苷提取物。為達(dá)到發(fā)明的目的，地黃莖葉總苷提取物中梓醇的含量應(yīng)大于20％，環(huán)烯醚萜苷總苷含量大于50％。
為保證地黃莖葉總苷的質(zhì)量，在生產(chǎn)過程中需要對洗脫液和最終提取物中的有效成分的含量進(jìn)行檢測，用于檢測梓醇和環(huán)烯醚萜苷總苷含量的方法可以借助任何可行的檢測手段和公知的方法，本發(fā)明參照有關(guān)文獻(xiàn)在此提出一套可行的檢測方法。
(一)地黃莖葉總苷提取物梓醇的含量測定梓醇的含量測定方法用高壓液相色譜法(HPLC)，色鋪柱KYWG-C18，10μm，25cm×4.6mm ID(北京分析儀器廠，流動(dòng)相0.8％的乙腈，柱溫30℃，流速1毫升/分鐘，測定波長210nm。
標(biāo)準(zhǔn)曲線精密稱取梓醇對照品10mg，置于10ml的容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別取稀釋液0.2ml，0.4ml，0.6ml，0.8ml，1.0ml置于1ml的容量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，備用。分別取2ml容量瓶中的溶液各10μl，進(jìn)行測定，以峰面積值(X)對含量(Y)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
回歸方程Y＝5.15×10-5X+6.33×10-4相關(guān)系數(shù)R＝0.9997含量測定精密稱取地黃莖葉環(huán)烯醚萜苷總苷提取物約10mg，置于10ml的容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻。取2溶液10μl，進(jìn)行測定，以峰面積值代入回歸方程計(jì)算出梓醇的含量。
(二)地黃莖葉總苷提取物的環(huán)烯醚萜苷總苷的含量測定1、梓醇標(biāo)準(zhǔn)溶液精密稱取梓醇0.05克，置于50ml容量瓶中，用85％的乙醇溶解并稀釋至刻度。
2、顯色劑0.5ml10％的三氯化鐵水溶液加到100ml50％(V/V)的硫酸溶液中。
3、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別取梓醇的標(biāo)準(zhǔn)溶液10，20，30，40，50，60μl，置于具塞試管中，于水浴上蒸干后各加顯色劑5ml，于85℃水浴加熱三分鐘，溶液呈棕黃色。于400nm波長測定吸收度，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。線性范圍10-60μg；回歸方程Y＝64.54X+0.086；相關(guān)系數(shù)R＝0.99984、總苷的測定精密稱取地黃莖葉總苷提取物0.100克，置于50ml容量瓶中，用85％的乙醇溶解并稀釋至刻度。取30μl，置于具塞試管中，于水浴上蒸干后各加顯色劑5ml，于85℃水浴加熱三分鐘，溶液呈棕黃色。于400nm波長測定吸收度，以吸收度計(jì)算含量。
具體實(shí)施例方式
用以下的實(shí)施例對本發(fā)明作具體說明，但本發(fā)明并不限于下列實(shí)施例包含的內(nèi)容。
取地黃莖葉的干燥品500g，用70％的甲醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用70％的甲醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用70％的甲醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無乙醇味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(1kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用5％的稀甲醇洗至洗脫液近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用70％的甲醇5000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至150ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇400ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物16.4克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量52.7％。
取地黃莖葉的干燥品1kg，用50％的甲醇8000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用50％的甲醇8000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用50％的甲醇8000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無甲醇味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(500g活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用10％的稀甲醇洗至洗脫液近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用50％的甲醇3000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至300ml，在攪拌下緩慢加入異丙醇800ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物31.6克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量57.8％。
取地黃莖葉的干燥品2kg，用30％的甲醇16升加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用30％的甲醇16升加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用30％的甲醇16升ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無甲醇味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(2kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用13％的稀甲醇洗至洗脫液近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用60％的甲醇10000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至600ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇1800ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物55.4克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量60.7％。
取地黃莖葉的干燥品500g，用60％的丙酮4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用60％的丙酮4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用60％的丙酮4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無丙酮味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(5kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用4％的稀丙酮洗至洗脫液近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用30％的丙酮25000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至150ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇400ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物18.4克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量51.8％。
取地黃莖葉的干燥品1kg，用45％的丙酮8000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用45％的丙酮8000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用45％的丙酮8000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無丙酮味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(10kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用7％的稀丙酮洗至洗脫液近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用50％的丙酮50000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至300ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇800ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物29.9克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量54.7％。
取地黃莖葉的干燥品500g，用30％的丙酮4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用30％的丙酮4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用30％的丙酮4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無丙酮味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(500g活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用10％的稀丙酮洗至洗脫液近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用70％的丙酮3000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至150ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇400ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物15.2克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。地黃莖葉總苷含量55.3％。
取地黃莖葉的干燥品500g，用70％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用70％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用70％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無乙醇味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(3kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用4％的稀乙醇洗至洗脫液近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用20％的乙醇15000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至150ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇400ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物164克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量52.7％。
取地黃莖葉的干燥品500g，用50％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用50％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用50％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無乙醇味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(6kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用7％的稀乙醇洗至洗脫液近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用40％的乙醇30000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至150ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇400ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物16.6克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量53.4％。
取地黃莖葉的干燥品500g，用30％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用30％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用30％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無乙醇味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(8kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用10％的稀乙醇洗至洗脫液近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用40％的乙醇40000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至干，即得地黃莖葉總苷提取物16.5克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。地黃莖葉總苷含量53.8％。
取地黃莖葉的干燥品500g，用水4000ml加熱煎煮0.5小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水3000ml加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水4000ml加熱煎煮0.5小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，去除沉淀(如有沉淀)，通過活性炭(1kg活性炭105℃活化4小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用4％的稀乙醇洗至洗脫液近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用40％的乙醇5000ml洗脫。40％的乙醇洗脫液真空濃縮至150ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇400ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物16.3克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量50.5％。
取地黃莖葉的干燥品1kg，用水6000ml加熱煎煮0.5小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水4000ml加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水4000ml加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，去除沉淀(如有沉淀)，通過活性炭(1kg活性炭110℃活化4小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用7％的稀乙醇洗至洗脫液近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用40％的乙醇4000ml洗脫。40％的乙醇洗脫液真空濃縮至300ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇800ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物32.3克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量52.9％。
取地黃莖葉的干燥品2kg，用水12升加熱煎煮0.5小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水8升加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水8升加熱煎煮小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，去除沉淀(如有沉淀)，通過活性炭(1kg活性炭120℃活化4小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用10％的稀乙醇洗至洗脫液近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用40％的乙醇4000ml洗脫。40％的乙醇洗脫液真空濃縮至600ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇1600ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，，即得地黃莖葉總苷提取物61.5克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量53.5％。
取地黃莖葉的干燥品500g，用水4000ml加熱煎煮0.5小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水3000ml加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水3000ml加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，去除沉淀(如有沉淀)，通過活性炭(1kg活性炭130℃活化4小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，，用40％的乙醇4000ml洗脫。40％的乙醇洗脫液真空濃縮至150ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇400ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物48.6克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量36.5％。
取地黃莖葉的干燥品10kg，用水60升加熱煎煮30小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水50升加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水50升加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，去除沉淀，上已處理好的活性炭(10kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用5％的稀乙醇洗至洗脫液近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用40％的乙醇50000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至3000ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇8000ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物335克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量52.7％。
權(quán)利要求
1.一種地黃莖葉總苷提取物的提取方法，其特征是中藥地黃莖葉經(jīng)提取所得的地黃莖葉提取液通過活性炭吸附分離地黃莖葉總苷。
2.按照權(quán)利要求1中所述地黃莖葉總苷提取物的提取方法，其特征是中藥地黃莖葉經(jīng)提取所得的地黃莖葉提取液通過活性炭吸附分離地黃莖葉總苷，中藥地黃莖葉與活性炭的重量之比為1∶0.5～1∶20。
3.按照權(quán)利要求1中所述地黃莖葉總苷提取物的提取方法，其特征是中藥地黃莖葉經(jīng)提取所得的地黃莖葉提取液通過活性炭吸附分離地黃莖葉總苷，所用的活性炭是40目以上的活性炭顆粒。
4.按照權(quán)利要求1中所述的地黃莖葉總苷提取物的提取方法。其特征是以地黃莖葉為原料，(1)用極性溶劑提??；(2)必要時(shí)70℃以下真空濃縮，并除去有機(jī)溶劑，制成水溶液，濾除沉淀；(3)地黃莖葉提取水溶液通過活性炭分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性；(4)用10％以上的乙醇水溶液，或甲醇或者15％以上的甲醇水溶液，或10％以上的丙酮水溶液洗脫；(5)收集含有機(jī)溶劑的洗脫液，濃縮洗脫液至小體積，加有機(jī)溶劑沉淀后，取上清液減壓濃縮至干，即得地黃莖葉總苷提取物。地黃莖葉總苷提取物主要含有環(huán)烯醚萜苷類成分，并以梓醇為主要有效成分。
5.按照權(quán)利要求1中所述的地黃莖葉總苷提取物的提取方法。其特征是以地黃莖葉為原料，(1)用極性溶劑提取；(2)必要時(shí)70℃以下真空濃縮，并除去有機(jī)溶劑，制成水溶液，濾除沉淀；(3)地黃莖葉提取水溶液通過活性炭分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性；(4)用低于10％的乙醇水溶液，或者低于15％的甲醇水溶液，或者低于10％的丙酮水溶液洗至洗脫液近無色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性；(5)用10％以上的乙醇水溶液，或甲醇或者15％以上的甲醇水溶液，或者10％以上的丙酮水溶液洗脫；(6)收集有機(jī)溶劑濃度較高的溶劑洗脫的洗脫液，濃縮洗脫液至小體積，加有機(jī)溶劑沉淀，上清液減壓濃縮至干，即得地黃莖葉總苷提取物。地黃莖葉總苷提取物主要含有環(huán)烯醚萜苷類成分50％以上，并以梓醇為主要有效成分。
6.按照權(quán)利要求4或5中所述的有機(jī)溶劑沉淀，其特征是有機(jī)溶劑是乙醇。
7.一種地黃莖葉總苷提取物，其特征是主要含有梓醇，其中，梓醇含量大于20％，環(huán)烯醚萜總苷含量大于50％。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種地黃莖葉總苷提取物的制備方法，該方法是將地黃莖葉的提取物的水溶液用活性炭吸附處理后，用水，或者水與低濃度有機(jī)溶劑的混合溶劑洗脫糖和其它雜質(zhì)，再用濃度較高有機(jī)溶劑的水溶液進(jìn)行洗脫，洗脫液濃縮后，用乙醇沉淀，上清液真空濃縮至干，即得地黃莖葉總苷提取物。地黃莖葉總苷提取物的主要有效成分是環(huán)烯醚萜苷類化合物，其中梓醇的含量最高。地黃莖葉總苷提取物總苷含量可達(dá)50％以上。
文檔編號(hào)C07H17/04GK1715285SQ20041006224
公開日2006年1月4日 申請日期2004年7月2日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月2日
發(fā)明者羅何生 申請人:羅何生