專利名稱：一種地黃苷d標準物質(zhì)的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從中藥地黃中分離制備地黃苷D標準物質(zhì)的方法及其質(zhì)量評價方法。
背景技術(shù)：
地黃來源于玄參科植物地黃Rehmannia glutinosa Libosch.的新鮮或干燥塊根， 2010年版《中國藥典》一部的成方制劑中有近二百種(194種)選用了地黃，是一種常用大宗中藥材。作為 我國著名的“四大懷藥”道地藥材之一，地黃是藥用價值很高的滋陰補血類中藥，活性作用十分廣泛，對免疫、血液、內(nèi)分泌、心腦血管、神經(jīng)系統(tǒng)及抗菌、抗炎等方面均有一定的作用。在臨床上有鮮用、生用和熟用的不同。鮮地黃與生地黃在性味上有寒與涼之分，鮮地黃的清熱生津、止血之功效均勝于生地黃，多用于瘟病傷陰、高熱煩渴、吐血、咳血等癥，而熟地黃在加工方法上與鮮、生地黃完全不同，所記載的主治功能有更大的區(qū)別， 主要用于補血、補腎養(yǎng)陰[1]。地黃中主要含有環(huán)烯醚萜苷類化學成分，藥理研究表明環(huán)烯醚萜苷類成分為其主要活性成分?，F(xiàn)已從鮮地黃、生地黃、熟地黃、地黃愈傷組織、地黃葉及有病害的地黃中，已分離鑒定了環(huán)烯醚萜苷類24個梓醇、乙酰梓醇、地黃苷A、地黃苷B、jioglutoside Α、二氫梓醇、二氫馬鞭草苷、8-表番木鱉酸、京尼平苷、jioglutoside B、桃葉珊瑚苷、單蜜力特苷、蜜力特苷、地黃苷 D、筋骨草醇、6-0-E-feruloyl ajugol、6-0-P-coumaroyl ajugol、 6-0-Z-feruloyl ajugol>6-0-P-hydroxybenzoate ajugol>6-0-vani 1 late ajugol^iiiljilif C、氯化梓醇、6-0-(4〃 -0- α -L-rhamnopyranosyl vanilloyl ajugol 和筋骨草苷。非苷環(huán)烯醚萜類11個焦地黃素A、焦地黃素B、焦地黃素C、焦地黃素D、焦地黃素E、地黃素A、地黃素B、地黃素C、地黃素D、焦地黃內(nèi)酯、焦地黃呋喃。通過比較其來源發(fā)現(xiàn)，環(huán)烯醚萜類化合物在鮮地黃中均不存在，而是在生地黃和熟地黃中才出現(xiàn)的，說明在加工炮制過程中某些環(huán)烯醚萜苷類化合物脫去糖基而發(fā)生了一系列的化學變化[2]。地黃現(xiàn)有標準品梓醇系我們在國家七五期間及河南省自然基金課題研究成果，已經(jīng)推廣應(yīng)用于地黃藥材。我們[3]曾對梓醇成分進行分離制備，研究發(fā)現(xiàn)但其熱穩(wěn)定性較差， 從鮮品加工成生地黃及熟地黃，梓醇的含量降低至原來的1/10。北川勛M等曾研究了地黃苷成分，發(fā)現(xiàn)地黃苷D系三糖苷較穩(wěn)定，生地、熟地均有較高的含量，經(jīng)加工炮制過程幾乎不分解。于震[5]等對地黃苷D進行了滋陰、補血和降血糖作用的實驗研究，研究發(fā)現(xiàn)地黃苷D可以使陰虛模型小鼠體重明顯增加，血漿cAMP含量明顯降低；地黃苷D可以明顯升高血虛模型小鼠白細胞數(shù)、血小板數(shù)、網(wǎng)織紅細胞數(shù)和骨髓DNA含量和體重；地黃苷D具有降低糖尿病模型小鼠血糖的趨勢。地黃苷D的藥效學作用亦與中醫(yī)傳統(tǒng)用藥相符合，含量均較高而且比較穩(wěn)定，比較適宜作為地黃藥材及制劑中地黃的質(zhì)量控制標準物質(zhì)，同時該成分本身具有比較大的藥用價值和較好的應(yīng)用前景。迄今，未見涉及地黃苷D標準物質(zhì)制備及其質(zhì)量評價方法的專利報道。參考文獻[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典一部[M].北京中國醫(yī)藥科技出版社，2010 115.
[2]劉彥飛，趙宇，武衛(wèi)紅，等.地黃的化學成分及其在加工炮制過程中的變化 [J] ·國外醫(yī)藥·植物藥分冊，2007，22 (3) 102-108.[3]李更生，王慧森，都恒青，等.液相層析法制備地黃活性成分梓醇[J].中成藥， 1998，20 (6) 36.[4]北川勛，西村正，古林安見子.懷慶地黃根莖O成分，藥學雜志[日本]，1971， 2001,91(5) 593.[5]于震，王軍，李更生，等.地黃甙D滋陰補血和降血糖作用的實驗研究[J].遼寧中醫(yī)雜志，2001，28 (4) 240.

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種地黃苷D標準物質(zhì)的制備方法。本發(fā)明的另一個目的在于提供一種地黃苷D標準物質(zhì)的質(zhì)量評價方法。本發(fā)明所述的地黃苷D標準物質(zhì)系從中藥地黃中提取分離得到。其結(jié)構(gòu)如下
權(quán)利要求
1.一種地黃苷D標準物質(zhì)，其特征在于該標準物質(zhì)由中藥地黃中提取獲得。
2.如權(quán)利要求1所述的地黃苷D標準物質(zhì)，其特征在于地黃為市售地黃、熟地黃飲片或玄參科植物地黃的新鮮、干燥塊根、加工炮制品。
3.如權(quán)利要求1所述的地黃苷D標準物質(zhì)，其特征在于地黃苷D標準物質(zhì)純度為98 100% (w/w) O
4.如權(quán)利要求1 3所述的地黃苷D標準物質(zhì)，其特征在于采用溶劑提取法、溶劑萃取法、大孔吸附樹脂法、柱色譜法、液-液逆流分配色譜法等任意一種方法，或這些方法的任意組合進行制備。
5.如權(quán)利要求4所述的地黃苷D標準物質(zhì)制備方法，其特征在于在使用這些方法進行制備時，包括以下一個或幾個步驟提取提取原料中可以采用無氧條件下加熱或直接用水蒸氣熱處理或拌入碳酸鈣或氫氧化鋇，用來抑制酶的活性和中和植物酸，也可以不滅活直接提??；所用溶劑可以是水或任意一種醇類、酮類及脂類溶劑，或這些溶劑按一定比例組成的混合溶劑；提取方法可以是浸漬、滲濾、煎煮、回流提取、連續(xù)回流提取、超聲波提取、微波輔助提取、酶法提取等；除雜使用或不使用以下任一種澄清劑或其組合醇沉劑、各種樹脂、101果汁澄清劑、 甲殼素類(如殼聚糖)、ZTC天然澄清劑、明膠、鞣酸等；過濾包括離心、抽濾、超濾、壓濾等方法；濃縮包括常壓或減壓條件下的薄膜蒸發(fā)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)及煎煮濃縮等；干燥包括真空干燥、噴霧干燥、冷凍干燥等。
6.如權(quán)利要求4所述的地黃苷D標準物質(zhì)制備方法，其特征在于當使用大孔吸附樹脂時，所用的大孔樹脂可以是非極性、弱極性、中等極性等任何一種類型，如D101、DA-201、 D301、HPD400、AB-8、S_8、XAD-2等，其中優(yōu)選的為弱極性或中等極性的樹脂，如D101、AB-8、 HPD400等，所用的洗脫劑為水和含水的乙醇、甲醇等。
7.如權(quán)利要求4所述的地黃苷D標準物質(zhì)制備方法，其特征在于選用AB-8、HPD400、 DlOl等中等極性、弱極性或非極性大孔吸附樹脂作為純化樹脂，地黃甲醇提取物上樣液濃度0. 1 1.0g/mL，吸附流速1 6BV/h，樹脂柱徑高比1 5 1 10，0 20%乙醇洗脫 1 4倍樹脂體積進行除雜，除雜流速為1 6BV/h，用20% 90%乙醇洗脫3 6倍樹脂體積進行解吸，解吸流速為1 6BV/h。
8.如權(quán)利要求4所述的地黃苷D標準物質(zhì)制備方法，其特征在于當采用柱層析法進行制備時，其處理的對象可以是上述提取步驟所獲得的產(chǎn)物，也可以是經(jīng)上述溶劑提取法、 溶劑萃取法、大孔吸附樹脂法初步純化后的產(chǎn)物，所用的柱填料可以是硅膠、氧化鋁、聚酰胺、葡聚糖(S印hadex系列或S印hadexLH-20系列)、C_8、C_18、活性碳、纖維素等，所用的洗脫液因填料的不同而不同，一般是由水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等組成的混合溶劑。
9.如權(quán)利要求1所述的地黃苷D的應(yīng)用，其特征在于具有滋陰、補血和降血糖作用的該單體物質(zhì)，可以單獨或與其它任何中西藥物或食物按任意比例配伍，用于制備藥物或功能性食品，所制得的藥物或功能性食品可以是膠囊劑、片劑、丸劑、顆粒劑、口服液、糖漿、酒齊U、注射劑、飲料等。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從中藥地黃中提取得到的地黃苷D標準物質(zhì)及其制備方法。地黃苷D標準物質(zhì)可由溶劑提取法、溶劑萃取法、大孔吸附樹脂法、柱色譜法、液-液逆流分配色譜法等任意一種方法，或這些方法的任意組合進行制備。所制得的地黃苷D標準物質(zhì)純度為98～100％(w/w)。
文檔編號C07H1/08GK102382156SQ20111027551
公開日2012年3月21日 申請日期2011年9月16日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月16日
發(fā)明者劉明, 李更生, 王慧森 申請人:河南省中醫(yī)藥研究院