專利名稱：治療膿毒癥的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及治療和/或預防膿毒癥或者膿毒性休克的方法。
背景技術：
在以下兩篇文章中已充分描述了人非-胰腺分泌磷酯酶A2(在下文稱作“sPLA2”)的結構和物理性質(zhì)即“Cloning and RecombinantExpression of Phospholipase A2Present in Rheumatoid Arthritic SynovialFluid”(由Seilhamer，Jeffrey J.；Pruzanski，Waldemar；Vadas Peter；Plant，Shelley，Miller，Judy A；Kloss，Jean和Johnson，Lorin K.編輯；The Journal of Biological Chemistry，Vol.264，No.10，Issue of April 5，第5335-5338頁，1989)和“Structure and Properties of a Human Non-Pancreatic Phospholipase A2”(由Kramer，Ruth M.；Hession，Catherine；Johansen，Berit；Hayes，Gretchen；McGray，Panla；Chow，E.Pingchang；Tizard，Richard和Pepinsky，R.Blake編輯；The Journal of BiologicalChemistry，Vol.264，No.10，Issue of April 5，第5768-5775頁)，其公開內(nèi)容通過引用結合到本文中。
人們認為，sPLA2為水解膜磷脂的花生四烯酸級聯(lián)中的一種限速酶。膜磷脂依次又與炎性疾病和由對損傷和/或炎癥的全身性反應引起的疾病有關(參見Uhl等，J.Am.Coll.Surg.331，180，3，323-331，1993)。因此，開發(fā)抑制sPLA2介導的脂肪酸(例如花生四烯酸)釋放和在哺乳動物尤其是人體內(nèi)可高度生物利用的化合物和治療方法是重要的。這樣的化合物和方法在由sPLA2過度產(chǎn)生誘導和/或維持的疾病的一般性治療中是有價值的，所述疾病為例如膿毒性休克、成人呼吸窘迫綜合征、胰腺炎、創(chuàng)傷、支氣管哮喘、過敏性鼻炎、類風濕性關節(jié)炎等。
據(jù)估計，膿毒癥及其癥狀在全世界范圍內(nèi)每年困擾約500,000-2,000,000人，死亡率約為30-50％，這與病毒、真菌或細菌感染的全身性反應有關，其特征通常為突然性寒冷、肺炎、創(chuàng)傷和手術期間的感染和燒傷感染。這在例如癌癥和AIDS患者中是經(jīng)常發(fā)生的，當這樣的患者在醫(yī)院或臨床處置中時更是如此。迄今為止，仍未有令人滿意的膿毒癥治療方法。因此，每年大約有100000人死于膿毒癥。而受到膿毒癥及其癥狀困擾的人數(shù)和為此而花費的費用也是巨大的。
通過引用結合至本文中的美國專利第5654326號描述了用于治療膿毒癥的某些吲哚類sPLA2抑制劑及相關的酯類前體藥物。具體地說，該專利例證性說明了((3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸的鈉鹽和甲酯。1997年10月27日遞交的美國專利臨時申請?zhí)朣N 60/063646描述了用于治療膿毒癥的具有高生物利用度的吲哚類sPLA2抑制劑。1998年4月21日遞交的美國專利申請SN 09/063066(名稱為“取代的咔唑和1，2，3，4-四氫咔唑”)公開了用于治療膿毒癥的咔唑類化合物，其全部公開內(nèi)容均通過引用結合到本文中。1998年3月3日遞交的美國專利申請SN09/260490公開了sPLA2抑制劑化合物的某些凍干制劑，其全部公開內(nèi)容通過引用結合到本文中。
因此，人們?nèi)匀恍枰_發(fā)具有高生物利用度的sPLA2抑制劑來治療和/或預防膿毒癥的專用的方法，尤其是那些適于通過醫(yī)學專業(yè)的或合適的護理給予者用于介入和/或預防的新方法的口服或靜脈給藥的化合物。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及使用sPLA2抑制劑化合物來治療膿毒癥的方法，該方法包括在一定的時間間隔內(nèi)給予sPLA2抑制劑化合物。
本發(fā)明為治療或預防患有膿毒癥或易受膿毒癥影響的患者膿毒癥的方法，包括在膿毒癥發(fā)作前或者第一次器官衰竭后最多可達24小時時給予sPLA2抑制劑化合物，并且在醫(yī)療或臨床需要時繼續(xù)給藥。
本發(fā)明涉及使用sPLA2抑制劑化合物來治療膿毒癥的方法，其中在第一次器官衰竭后0-24小時內(nèi)給予所述活性成分且持續(xù)給藥約1-7天或者直到測定的醫(yī)療終止點(stopping point)。
本發(fā)明涉及使用sPLA2抑制劑化合物來治療膿毒癥的方法，其中第一次器官衰竭后0-18小時內(nèi)給予所述活性成分且持續(xù)給藥約1-7天或者直到測定的醫(yī)療終止點。
本發(fā)明也提供用于預防或治療膿毒癥的方法，該方法包括以下步驟a.選擇易受膿毒癥影響的患者；b.監(jiān)測患者體內(nèi)sPLA2活性水平；如果sPLA2活性水平高或者正在升高，那么則給予有效量的式I或II化合物。
本發(fā)明涉及使用sPLA2抑制劑化合物來治療膿毒癥的方法，其中在第一次器官衰竭后0-12小時內(nèi)給予所述活性成分且持續(xù)給藥約1-7天或者直到測定的醫(yī)療終止點。
本發(fā)明涉及使用sPLA2抑制劑化合物來治療膿毒癥的方法，其中在第一次器官衰竭后0-6小時內(nèi)給予所述活性成分且持續(xù)給藥約1-7天或者直到測定的醫(yī)療終止點。
本發(fā)明涉及使用sPLA2抑制劑化合物來治療膿毒癥的方法，其中在第一次器官衰竭后0-2小時內(nèi)給予所述活性成分且持續(xù)給藥約1-7天或者直到測定的醫(yī)療終止點。
本發(fā)明也涉及預防易受膿毒癥影響的包括人在內(nèi)的哺乳動物膿毒癥的方法，其中在sPLA2水平升高前開始給予sPLA2抑制劑化合物。
根據(jù)本發(fā)明，在可導致膿毒癥或者能夠引起導致膿毒癥的損傷的侵入性操作前，向患者提供sPLA2抑制劑化合物。
本發(fā)明也為治療或預防膿毒癥的方法，該方法包括在第一次器官衰竭后24小時內(nèi)，給予與其它的用于膿毒癥的有效療法組合的治療有效量的sPLA2化合物，并且繼續(xù)給予約1-7天或者根據(jù)醫(yī)療需要給予。
本發(fā)明為治療或預防膿毒癥的方法，該方法包括在器官衰竭前開始給予易受膿毒癥影響的患者或者在器官衰竭后約24小時內(nèi)開始給予膿毒癥患者包含sPLA2抑制劑的藥用制劑。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明涉及使用式I化合物來治療或預防膿毒癥的方法，其中所述式I化合物為 其中R1-R7和X如下定義。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明也涉及使用式II的sPLA2抑制劑化合物來治療或預防膿毒癥的方法，其中式II化合物為
其中R31-R34、R31’-R34’和Y1如下定義。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明也涉及治療或預防膿毒癥的方法，該方法包括給予包含式I或II化合物和載體或稀釋劑的藥用制劑。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明也為治療或預防患有或者易受膿毒癥影響的患者膿毒癥的方法，該方法包括在第一次器官衰竭后24小時內(nèi)或sPLA2水平升高前，開始給予包含式I或II化合物和其它的膿毒癥的有效療法或輔助藥物的藥用制劑。
本發(fā)明涉及預防包括人在內(nèi)的哺乳動物膿毒癥的方法，所述方法包括在引起癥狀的損傷發(fā)生前給予易受膿毒癥影響的患者藥用有效量的sPLA2抑制劑化合物。
本發(fā)明涉及治療膿毒癥的方法，其中在自第一次器官衰竭后一定時間間隔內(nèi)或在sPLA2活性水平升高時開始用藥用有效量的式I或II的sPLA2抑制劑化合物治療患者。
本發(fā)明涉及治療膿毒癥的方法，其中在自第一次器官衰竭后一定時間間隔內(nèi)或sPLA2水平升高時開始用藥用有效量的式I或II的sPLA2抑制劑化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物衍生物治療患者。
本發(fā)明涉及式I或II的sPLA2抑制劑化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物衍生物在制備用于治療膿毒癥的藥物中的用途，其中在自第一次器官衰竭后一定時間間隔內(nèi)或sPLA2水平升高時開始給予藥用有效量的式I或II的sPLA2抑制劑化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物衍生物。
本發(fā)明為式(I)或(II)的化合物在制備用于治療或預防患有膿毒癥或者易受膿毒癥影響的患者的膿毒癥的藥物中的用途，包括在自第一次器官衰竭后24小時內(nèi)或sPLA2水平升高前開始給予包含式I或II的化合物的藥用制劑。
本發(fā)明也為式(I)或(II)的化合物在制備用于治療或預防患有膿毒癥或者易受膿毒癥影響的患者的膿毒癥的藥物中的用途，包括在自第一次器官衰竭后24小時內(nèi)或sPLA2水平升高前開始給予包含與其它的膿毒癥的有效療法或輔助藥物組合的式I或II化合物的藥用制劑。
附圖本文提供三幅圖(

圖1、圖2和圖3)。圖1表示治療28-天內(nèi)的死亡率(Y-軸)與sPLA2活性四分位或范圍(小于82-大于511ng/mL)(X-軸)之間的關系。條形圖1、4、7和10表示在合適的sPLA2活性四分位下給予安慰劑時的死亡率。條形圖2、5、8和11表示在合適水平的sPLA2活性(四分位)下給予“低劑量”的sPLA2抑制劑化合物的死亡率。條形圖3、6、9和12表示用“高劑量”的式(I)化合物治療患者的結果。
圖2反映其結果在圖1中表示的實驗，但是在圖2中，將觀察到治療組的28天死亡率(Y-軸)對IL-6活性四分位(介于小于107-大于1506ng/mL的活性水平)(X-軸)進行作圖。同樣，由條形圖1、4、7和10表示在不同的IL-6四分位下給予安慰劑的結果。由條形圖2、5、8和11表示在不同的IL-6四分位下給予低劑量的sPLA2抑制劑化合物的結果。并由條形圖3、6、9和12表示在不同的IL-6活性四分位下高劑量的sPLA2抑制劑化合物的結果。
圖3表示治療組的28-天死亡率(Y-軸)對在第一次器官衰竭后給予式I的sPLA2抑制劑化合物的時間(X-軸)下曲線圖。圖3表明在第一次器官衰竭后12小時內(nèi)，優(yōu)選通過灌注給予式I的sPLA2抑制劑化合物，優(yōu)選為化合物(Vb)，“低劑量”下的死亡率為19.2％(條形圖2)，給予安慰劑的死亡率為42.9％(條形圖1)。
在相同的時間模式(即第一次器官衰竭后小于12小時)下，給予“高劑量”的式(I)的sPLA2抑制劑化合物的死亡率為5.4％(條形圖3)。對在第一次器官衰竭后0-12小時內(nèi)給予低劑量與高劑量藥物的表觀死亡率減少進行統(tǒng)計學分析表明，具有顯著性差異，這是未曾料到的。圖3還表明，第一次器官衰竭后12-24小時內(nèi)，給予安慰劑的死亡率為35.1％(條形圖4)，“低劑量”給藥組的死亡率為38.2％(條形圖5)，“高劑量”給藥組的死亡率為31.5％(條形圖6)。這些數(shù)據(jù)點表明，在第一次器官衰竭后0-24小時內(nèi)、且優(yōu)選在第一次器官衰竭后0-12小時內(nèi)，與安慰劑比較，給予sPLA2抑制劑化合物、優(yōu)選為式I化合物、更優(yōu)選為化合物(Vb)，可使膿毒癥的死亡率顯著減少。當在第一次器官衰竭后0-24小時、優(yōu)選0-12小時時，給予“高劑量”的sPLA2抑制劑化合物時，給予sPLA2抑制劑的效果特別顯著。
用對初步試驗的層化因素校正的Cochran-Mantel-Haenszel檢驗以兩側5％顯著性水平分析數(shù)據(jù)。對總體治療作用以及兩兩比較進行分析。
發(fā)明詳述定義在此所用的術語“易受膿毒癥影響的”指獨立呈現(xiàn)膿毒癥癥狀或者其特征在于易患有可導致膿毒癥的感染(即病毒、真菌或細菌)的并發(fā)癥的行為或癥狀的患者。這樣的行為和/或癥狀的實例包括(但不限于)急性或慢性酒精中毒、AIDS、呼吸疾病、胃腸疾病、燒傷、創(chuàng)傷，特別是在就相關或不相關的癥狀準許進入醫(yī)院進行臨床處理或護理時。通過主管護理給予者即醫(yī)師，根據(jù)例如在上述Harrison’s Principlesof Internal Medicine中描述的患者所呈現(xiàn)的癥狀和/或風險因素的程度或嚴重性的流行醫(yī)學知識，可進行對膿毒癥敏感性的測定。因此，并非所有的患者都包含于膿毒癥敏感性的定義中，該定義僅包括以上描述的測定中的那些患者。
根據(jù)本發(fā)明的方法，在此處所用的sPLA2抑制劑化合物與其它有效藥物療法、藥物或治療方法的聯(lián)合療法指以單一劑量、分開的劑量使用sPLA2化合物和其它的有效療法，可以同時或分開給藥，但這些均包括于本發(fā)明的治療方案中，即在第一次器官衰竭之前或之后24小時內(nèi)開始給予sPLA2抑制劑化合物。
在此所用的術語“LY315920”、“LY315920鈉”與以下式(Vb)化合物同義，且在化學上也被稱作((2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸鈉鹽或其它化學上相當?shù)拿Q。
在此所用的前綴“CT”代表臨床試驗材料，并可以鑒別用一個編號代表的化合物、藥物或安慰劑。
在此所用的“膿毒癥”包括其特征由標準醫(yī)學參考文獻可知和/或本領域技術人員已知的疾病或癥狀的所有階段。例如膿毒癥包括嚴重的膿毒癥、膿毒性休克等。
在此所用的術語“sPLA2抑制劑”、“sPLA2化合物”和“sPLA2抑制劑化合物”同義。
術語“治療有效量”為足以改善動物膿毒癥繼發(fā)性癥狀的sPLA2抑制劑的量。
術語“治療有效間隔”為當在需要的患者中開始給予sPLA2抑制劑或輔助藥物或聯(lián)合療法或藥物中的任一個的時間和兩者中的一個或者兩者治療有效性限制結束時之間的時間段。
術語“非腸道”或“非腸道給藥”指通過途徑如皮下、肌內(nèi)、眼眶內(nèi)、囊內(nèi)、脊柱內(nèi)、胸骨內(nèi)、經(jīng)皮、經(jīng)粘膜、經(jīng)口含化、經(jīng)直腸、經(jīng)陰道、經(jīng)鼻或靜脈給藥。
術語“動物”指動物界的任何成員，包括哺乳動物、爬行動物、魚類和家禽。
在此所用的術語“凍干組合物”、“藥用組合物”和“藥用制劑”指在日本藥典的“制劑通則”中描述的所有制劑，優(yōu)選為那些是溶液劑和注射制劑的制劑，更優(yōu)選為注射用溶液劑和注射用凍干制劑。
在此所用的術語“低劑量”和“低-LY”同義，并且代表給予sPLA2抑制劑化合物以達到200ng/mL的靶標sPLA2血漿濃度的治療組。
在此所用的術語“高劑量”和“高-LY”同義，并且代表給予sPLA2抑制劑化合物以達到800ng/mL的靶標sPLA2血漿濃度的治療組。
術語“凍干組合物”指通過本發(fā)明的方法制備物質(zhì)的固體冷凍干燥組合物，該組合物中包括下列必需成分(1)用于實施本發(fā)明的化合物，即[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉；(2)增溶劑。
術語“活性化合物”或“活性成分”指一種或者更多種sPLA2抑制劑和/或與用于在本發(fā)明方法中使用的sPLA2化合物組合的其它的輔助藥物；(2)增溶劑和(3)穩(wěn)定劑。
術語“活性成分”(也被稱作用于實施本發(fā)明的化合物，即sPLA2抑制劑化合物)包括化合物[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉，即由下式表示的化合物 術語“坍縮溫度(collapse temperature)”描述無定形固體的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度或者結晶固體的低共熔溫度。坍縮溫度為產(chǎn)物尚未完全冷凍的溫度以上的溫度。冷凍干燥顯微鏡的發(fā)明使冷凍溶液在升華過程期間開始喪失它們的剛性結構的溫度的測量成為可能。對[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉的冷凍溶液，測得退火前的坍縮溫度約為-33℃而退火后的坍塌溫度約為-13℃。
術語“增溶劑”指螯合劑?！坝行Я康脑鋈軇睘橐欢康目墒够钚猿煞中纬蛇m用于醫(yī)療用途的穩(wěn)定的水溶液的增溶劑。
術語“穩(wěn)定劑”指固體糖或糖-醇?！坝行Я康姆€(wěn)定劑”為一定量的使冷凍干燥的組合物易于溶解以形成適用于醫(yī)療用途的水溶液的穩(wěn)定劑。
術語“活性成分的等價酸”或“化合物(I)的等價酸”指[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸。在本說明書中，活性成分的重量由sPLA2抑制劑即[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉或聯(lián)合治療藥物的實際重量顯示。在表示活性成分的比率(重量％)時，基于活性成分的等價酸來計算。因此，例如當活性成分為[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉時，活性成分的重量必須乘以因子100/105.8來計算等價酸的等價重量。
術語“聯(lián)合”指共同給予sPLA2抑制劑與輔助藥物療法或方法。所述術語還表示以單一劑型或作為分開的劑型同時給予或者順序給予sPLA2抑制劑和輔助藥物、或者其它的用于治療或預防膿毒癥的有效治療方法。
術語“輔助藥物”為在治療間隔內(nèi)，與作為單一劑量或者作為分開的劑量的sPLA2抑制劑組合，同時或者順序給予治療有效的藥物或方法。
在此所用的術語“損傷引起的癥狀”指已知使人易患有膿毒癥或引起膿毒癥，即膿毒癥風險因素的癥狀。這些癥狀已在文獻中描述并且是本領域技術人員已知的。在以下參考文獻中描述了膿毒癥風險因素，所述參考文獻包括Harrison’s Principles of Internal Medicine，第13版，1994，第511-515頁，McGraw-Hill，Inc.，ISBN 0-07-032370-4，和Sorensen等，Platelet Activating Factor and Phospholipase A2inpatients with septic shock and trauma，Intensive Care Medicine(1994)20，555-561。
在此所用的術語“sPLA2活性水平”和“sPLA2水平”同義，并且指如由本領域技術人員已知的試驗測定的全身、血清或血漿sPLA2水平，其中測定所有這些(sPLA2)水平的增加大于約300單位/mL(或者其它的通常已知的或者依分析方法而設定的正常水平)用來表示與依嚴重性而定的不同水平的膿毒癥有關的損傷的全身性反應。參見Sorensen等，Intensive Care Medicine，20，555-561，(1994)，其中陳述健康個體的正常血漿PLA2活性小于300單位/mL。
在此所用的術語“高sPLA2水平”、“升高的sPLA2水平”、“在sPLA2水平上增加”同義，且指以上預先測定的，或通常符合正常的或平均水平或范圍的sPLA2活性水平分析的單點結果，或者表明自最初的數(shù)據(jù)點水平增加的sPLA2活性水平分析的多點結果。I.用于本發(fā)明方法的sPLA2抑制劑分泌的磷脂酶A2(sPLA2)抑制劑通常用于實施本發(fā)明的方法。根據(jù)本發(fā)明的方法，各類合適的用于治療和/或預防膿毒癥或膿毒性休克的sPLA2抑制劑示例包括選自以下的成員1H-吲哚-3-乙醛酰胺(glyoxylamide)、1H-吲哚-3-酰肼、1H-吲哚-3-乙酰胺、1H-吲哚-1-乙醛酰胺、1H-吲哚-1-酰肼、1H-吲哚-1-乙酰胺、中氮茚-1-乙酰胺、中氮茚-1-乙酸酰肼、中氮茚-1-乙醛酰胺、茚-1-乙酰胺、茚-1-乙酸酰肼、茚-1-乙醛酰胺、咔唑、四氫咔唑、吡唑、苯基乙醛酰胺(glyoxamide)、吡咯、萘基乙醛酰胺、萘基乙酰胺、苯基乙酰胺、吡咯并[1，2-a]吡嗪、9H-咔唑、9-芐基咔唑和它們的混合物。1H-吲哚-3-乙醛酰胺抑制劑在美國專利5654326中描述了1H-吲哚-3-乙醛酰胺sPLA2抑制劑及制備它們的方法，其公開內(nèi)容通過引用結合到本文中。在歐洲專利申請第95302166.4號，公開第0675110號(1995年10月4日公開)中也描述了這些1H-吲哚-3-乙醛酰胺化合物。1H-吲哚-3-乙醛酰胺化合物的定義詞組“酸連接體”指由-(La)-所代表的1H-吲哚-3-乙醛酰胺化合物的二價連接基團，其作用在于將吲哚核的4或5位與酸性基團以下列關系相連接 詞組“酸連接體長度”指在其使吲哚核的4或5位與酸性基團結合的連接體-(La)-的最短鏈上原子(不包括氫)的數(shù)目。
本發(fā)明方法包括在由于膿毒癥造成的第一次器官衰竭后24小時內(nèi)用于治療包括人在內(nèi)的動物膿毒癥的方法、或者器官衰竭或sPLA2水平升高前預防易受膿毒癥影響的包括人在內(nèi)的動物膿毒癥的方法。
本發(fā)明包括在本發(fā)明方法的時間模式(間隔)內(nèi)給予所述動物治療有效量的式(I)表示的1H-吲哚-3-乙醛酰胺、或其藥學上可接受的鹽或脂族酯前體藥物衍生物； 其中；X為氧，R1選自-C7-C20烷基， 和 其中R10選自鹵代、(C1-C10)烷基、(C1-C10)烷氧基、-S-(C1-C10烷基)和鹵代(C1-C10)烷基，且t為0-5的整數(shù)，0和5均包括在內(nèi)；R2選自氫、鹵代、環(huán)丙基、甲基、乙基和丙基；R4和R5獨立選自氫、不互相干擾的取代基和基團-(La)-(酸性基團)；其中，R4和R5中至少一個為基團-(La)-(酸性基團)，其中(酸性基團)選自-CO2H、-SO3H或-P(O)(OH)2；其中，-(La)-為酸連接體，前提是；R4的酸連接體-(La)-選自 和其中R103為不互相干擾的取代基，并且其中，R5的酸連接體-(La)-選自 和 其中R84和R85分別獨立選自氫、C1-C10烷基、芳基、C1-C10烷芳基、C1-C10芳烷基、羧基、烷氧羰基和鹵代，和R6和R7分別獨立選自氫和不互相干擾的取代基，其中不互相干擾的取代基選自C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C7-C12亞芳基烷基、C7-C12烷芳基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、苯基、甲苯基、二甲苯基、聯(lián)苯基、C1-C6烷氧基、C2-C6鏈烯氧基、C2-C6炔氧基、C2-C12烷氧基烷基、C2-C12烷氧基烷氧基、C2-C12烷基羰基、C2-C12烷基羰基氨基、C2-C12烷氧基氨基、C2-C12烷氧基氨基羰基、C2-C12烷基氨基、C1-C6烷硫基、C2-C12烷硫基羰基、C1-C6烷基亞硫酰基、C1-C6烷基磺酰基、C2-C6鹵代烷氧基、C1-C6鹵代烷基磺?；2-C6鹵代烷基、C1-C6羥基烷基、-C(O)O(C1-C6烷基)、-(CH2)n-O-(C1-C6烷基)、芐氧基、苯氧基、苯硫基、-(CONHSO2R)、-CHO、氨基、脒基、溴代、氨基甲酰基、羧基、烷氧羰基、-(CH2)n-CO2H、氯代、氰基、氰基胍基、氟代、胍基、酰肼、肼基、酰肼基、羥基、羥基氨基、碘代、硝基、膦酰基、-SO3H、硫縮醛、硫代羰基和C1-C6羰基，其中n為1-8，且R為氫、烷基、芳基或芳基烷基。
本發(fā)明的方法也包括通過在sPLA2水平升高前開始給予sPLA2抑制劑化合物，從而可預防易受膿毒癥影響的包括人在內(nèi)的動物的膿毒癥，或者通過第一次器官衰竭后24小時內(nèi)開始給予sPLA2抑制劑化合物來治療患有膿毒癥的動物的方法。該方法包括給予所述動物治療有效量的式(II)表示的9H-咔唑化合物、或其藥學上可接受的鹽或脂族酯前體藥物衍生物 其中Y1選自O、NH、NR1和S；R1選自-(C7-C20)烷基， 和 其中R10選自鹵代、(C1-C10)烷基、(C1-C10)烷氧基、-S-(C1-C10烷基)和鹵代(C1-C10)烷基，且t為0-5的整數(shù)，0和5均包括在內(nèi)；其中R31、R32、R33、R31’、R32’、R33’、R34和R34’獨立選自氫、CONR101R102、烷基、烷基芳基、芳基、烷基雜芳基、鹵代烷基、烷基CONR101R102、不互相干擾的取代基和基團-(La)-(酸性基團)；其中-(La)-為選自以下的酸連接體， 和 和 其中R84和R85分別獨立選自氫、C1-C10烷基、芳基、C1-C10烷芳基、C1-C10芳烷基、羧基、烷氧羰基和鹵代，和n為1或2，和，其中(酸性基團)選自-CO2H、-SO3H、-CO2NR101R102和-P(O)(OH)2，和，其中R101和R102獨立選自氫、烷基、芳基、雜芳基和鹵代烷基，和其中不互相干擾的取代基選自C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C7-C12芳基烷基、C7-C12烷芳基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烷基、苯基、甲苯基、二甲苯基、聯(lián)苯基、C1-C6烷氧基、C2-C6烷基氧基、C2-C6炔氧基、C2-C12烷氧基烷基、C2-C12烷氧基烷基氧基、C2-C12烷基羰基、C2-C12烷基羰基氨基、C2-C12烷氧基氨基、C2-C12烷氧基氨基羰基、C2-C12烷基氨基、C1-C6烷硫基、C2-C12烷硫基羰基、C1-C6烷基亞硫酰基、C1-C6烷基磺?；?、C2-C6鹵代烷氧基、C1-C6鹵代烷基磺?；?、C2-C6鹵代烷基、C1-C6羥基烷基、-C(O)O(C1-C6烷基)、-(CH2)n-O-(C1-C6烷基)、芐氧基、苯氧基、苯硫基、-(CONHSO2(R))、-CHO、氨基、脒基、溴代、氨基甲?；?、羧基、烷氧羰基、-(CH2)n-CO2H、氯代、氰基、氰基胍基、氟代、胍基、酰肼、肼基、酰肼基、羥基、羥基氨基、碘代、硝基、膦酰基、-SO3H、硫縮醛、硫代羰基和C1-C6羰基，其中n為1-8，和R選自氫和烷基，其中R31、R32、R33或R34中至少一個為基團-(La)-(酸性基團)。
本發(fā)明也包括在第一次器官衰竭后24小時內(nèi)通過給予sPLA2抑制劑化合物治療患有膿毒癥的動物(包括人)或在sPLA2水平升高前通過給予sPLA2抑制劑化合物預防易受膿毒癥影響的動物(包括人)的膿毒癥的方法。該方法包括給予如上所述動物治療有效量的選自以下的化合物(A)-(AL)的1H-吲哚-3-乙醛酰胺化合物或9H-咔唑、或它們的藥學上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物衍生物(A)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(B)dl-2-[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]丙酸，(C)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(D)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-3-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(E)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-4-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(F)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-[(2，6-二氯苯基)甲基]-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(G)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-[4(-氟代苯基)甲基]-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(H)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-[(1-萘基)甲基]-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(I)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(J)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-[(3-氯代苯基)甲基]-2-乙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(K)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-乙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(L)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-丙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(M)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-環(huán)丙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(N)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-環(huán)丙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(O)4-[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-5-基]氧基]丁酸，(P)9H-咔唑，(Q)9-芐基咔唑，(AG)1-(9H-芐基咔唑-1-鹵代-4-基氧基-5-烷基酰氨基)烷基乙酸酯，(AH)1-(9H-芐基咔唑-4-基氧基-5-烷基酰氨基)烷基乙酸酯，(AI)1-(9H-芐基咔唑-1-鹵代-4-基氧基-5-烷基酰氨基)乙酸，(AJ)1-(9H-芐基咔唑-4-基氧基-5-烷基酰氨基)乙酸，和(AK)(AG)-(AJ)的混合物，和(AL)與另外的治療組合物組合的(A)-(AK)的混合物。
式(II)和稱作化合物(A)-(AL)的化合物特別有用的前體藥物為簡單的芳族和脂族酯，例如甲基酯。
本發(fā)明也包括在第一次器官衰竭后24小時內(nèi)用治療有效量的sPLA2抑制劑治療患有膿毒癥動物(包括人)膿毒癥的方法，或者在器官衰竭或sPLA2水平升高前通過給予sPLA2抑制劑化合物預防易受膿毒癥影響的動物(包括人)膿毒癥的方法。所述方法包括給予需要如上描述的這樣治療或預防的所述動物治療有效量的選自以下的組合物 和 其中R為甲基、乙基、鈉離子或N-嗎啉代乙基。sPLA2抑制劑的制備在美國專利5654326中描述了1H-吲哚-3-乙醛酰胺sPLA2抑制劑和制備它們的方法，其全部公開內(nèi)容通過引用結合到本文中。在1998年6月26日遞交發(fā)明名稱為“制備4-取代的1H-吲哚-3-乙醛酰胺的方法”的美國專利申請順序號09/105381中描述了制備1H-吲哚-3-乙醛酰胺sPLA2抑制劑的另一方法，其全部公開內(nèi)容通過引用結合到本文中。美國專利申請順序號09/105381公開具有下面步驟(a)-(i)的方法制備式I化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物衍生物， 其中R1選自-C7-C20烷基， 和 其中R10選自鹵代、(C1-C10)烷基、(C1-C10)烷氧基、-S-(C1-C10烷基)和鹵代(C1-C10)烷基，且t為0-5的整數(shù)，0和5均包括在內(nèi)；R2選自氫、鹵代、C1-C3烷基、C3-C4環(huán)烷基、C3-C4環(huán)烯基、-O-(C1-C2烷基)、-S-(C1-C2烷基)、芳基、芳氧基和HET；R4選自-CO2H、-SO3H和-P(O)(OH)2或其鹽和前體藥物衍生物；和R5、R6和R7分別獨立選自氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、鹵代(C1-C6)烷氧基、鹵代(C2-C6)烷基、溴代、氯代、氟代、碘代和芳基；該方法包括以下步驟a)用SO2Cl2鹵代式X化合物 其中R8為(C1-C6)烷基、芳基或HET；形成式IX化合物 b)使式IX化合物水解和脫羧， 形成式VIII化合物 c)將式VII化合物 用式VIII化合物烷基化 形成式VI化合物； d)在可形成且與水共沸的溶劑存在下，用式R1NH2的胺將式VI化合物胺化和脫水， 形成式V化合物； e)在催化劑存在下，通過在具有至少150℃的沸點和至少10的介電常數(shù)的極性烴類溶劑中回流，使式V化合物氧化形成式IV化合物； f)用式XCH2R4a(其中X為離去基團且R4a為-CO2R4b、-SO3R4b、-P(O)(OR4b)2或-P(O)(OR4b)H，其中R4b為酸保護基團)的烷化劑使式IV化合物烷基化， 形成式III化合物； g)使式III化合物與草酰氯和氨反應， 形成式IIa化合物 和h)任選使式IIa化合物水解， 形成式I化合物；和i)任選使式I化合物成鹽。制備1H-吲哚-3-乙醛酰胺sPLA2抑制劑的原料的合成方法學可為化學領域技術人員認為可行的任何合適的方法。然而，這樣的方法并不是本發(fā)明用途的方法的一部分，具體地說，本發(fā)明的方法為治療患有或者易受膿毒癥影響的哺乳動物的方法。
本發(fā)明方法為預防通過臨床測定的易受膿毒癥影響的包括人在內(nèi)的哺乳動物膿毒癥或者治療易受膿毒癥影響的包括人在內(nèi)的哺乳動物的方法。所述方法包括在膿毒癥的病癥發(fā)作前或者發(fā)作期間及第一次器官衰竭后最多可達24小時時，開始給予所述哺乳動物治療有效量的由式(Ia)表示的化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物衍生物； 其中；兩個X均為氧；R1選自 其中R10獨立選自鹵代、C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、-S-(C1-C10烷基)和C1-C10鹵代烷基，且t為0-5的數(shù)；R2選自鹵代、環(huán)丙基、甲基、乙基和丙基；
R4和R5獨立選自氫、不互相干擾的取代基或基團-(La)-(酸性基團)；其中-(La)-為酸連接體，前提是R4的酸連接體-(La)-選自； 和 且R5的酸連接體-(La)-選自； 和 其中R84和R85分別獨立選自氫、C1-C10烷基、芳基、C1-C10烷芳基、C1-C10芳烷基、羧基、烷氧羰基和鹵代，和前提是R4和R5中至少一個必須為基團-(La)-(酸性基團)，其中R4或R5的基團-(La)-(酸性基團)上的(酸性基團)選自-CO2H、-SO3H或-P(O)(OH)2；R6和R7分別獨立選自氫和不互相干擾的取代基，不互相干擾的取代基選自以下基團C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C7-C12芳烷基、C7-C12烷芳基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、苯基、甲苯基、二甲苯基、聯(lián)苯基、C1-C6烷氧基、C2-C6鏈烯氧基、C2-C6炔氧基、C2-C12烷氧基烷基、C2-C12烷氧基烷氧基、C2-C12烷基羰基、C2-C12烷基羰基氨基、C2-C12烷氧基氨基、C2-C12烷氧基氨基羰基、C2-C12烷基氨基、C1-C6烷硫基、C2-C12烷硫基羰基、C1-C6烷基亞硫?；?、C1-C6烷基磺?；2-C6鹵代烷氧基、C1-C6鹵代烷基磺酰基、C2-C6鹵代烷基、C1-C6羥基烷基、-C(O)O(C1-C6烷基)、-(CH2)n-O-(C1-C6烷基)、芐氧基、苯氧基、苯硫基、-(CONHSO2R)、-CHO、氨基、脒基、溴代、氨基甲酰基、羧基、烷氧羰基、-(CH2)n-CO2H、氯代、氰基、氰基胍基、氟代、胍基、酰肼、肼基、酰肼基、羥基、羥基氨基、碘代、硝基、膦酰基、-SO3H、硫縮醛、硫代羰基和C1-C6羰基，其中n為1-8。
優(yōu)選的用于實施本發(fā)明方法的為1H-吲哚-3-乙醛酰胺化合物和所有其相應的藥學上可接受的鹽、溶劑合物和前體藥物衍生物，且包括如下(A)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(B)dl-2-[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]丙酸，(C)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(D)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-4-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(E)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-4-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(F)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-[(2，6-二氯苯基)甲基]-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(G)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-[4(-氟代苯基)甲基]-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(H)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-[(1-萘基)甲基]-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(I)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(J)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-[(3-氯代苯基)甲基]-2-乙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(K)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-乙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(L)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-丙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(M)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-環(huán)丙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(N)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-環(huán)丙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(O)4-[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-5-基]氧基]丁酸，和(P)(A)至(P)的任何組合的混合物。
在藥學上可接受的鹽的定義中包括本發(fā)明化合物的相對無毒性的無機和有機堿加成鹽，例如銨、季銨和衍生自具有足夠堿性以與本發(fā)明化合物形成鹽的氮堿的銨陽離子(參見如S.M.Berge等，“Pharmaceutical Salts”，J.Phar.Sci.，661-19(1977))。另外，本發(fā)明化合物的堿性基團可以與合適的有機或無機酸反應形成鹽，例如乙酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、溴化物、右旋樟腦磺酸鹽、碳酸鹽、氯化物、克拉維酸鹽、枸櫞酸鹽、氯化物、乙二胺四乙酸鹽、乙二磺酸鹽(edisylate)、丙酸酯十二烷基硫酸鹽(estolate)、乙磺酸鹽(esylate)、氟化物、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽(gluceptate)、葡糖酸鹽(gluconate)、谷氨酸鹽、乙醇酰阿散酸鹽、己基間苯二酚鹽、溴化物、氯化物、羥基萘甲酸鹽、碘化物、羥乙磺酸鹽(isothionate)、乳酸鹽、乳糖醛酸鹽、月桂酸鹽、蘋果酸鹽、malseate、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、甲基溴化物、甲基硝酸鹽、甲基硫酸鹽、粘酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、泛酸鹽、磷酸鹽、多聚半乳糖醛酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、堿式乙酸鹽、琥珀酸鹽、單寧酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽、三氟乙酸鹽、三氟甲烷磺酸鹽和戊酸鹽。
本發(fā)明的某些化合物可具有一個或者更多個手性中心，因此，可以以旋光活性形式存在。同樣，當化合物包含鏈烯基或亞鏈烯基時，則可能存在化合物的順式-和反式-異構體形式。R-和S-異構體及它們的混合物，包括外消旋混合物以及順式-和反式-異構體的混合物包括在本發(fā)明中。其他的不對稱碳原子可以存在于取代基如烷基中。所有這樣的異構體以及它們的混合物指包括在本發(fā)明中。如果需要特定的立體異構體，則可通過本領域熟知的方法采用與含有不對稱中心且已經(jīng)拆分的原料的立體特異性反應，或者通過產(chǎn)生立體異構體的混合物、隨后通過已知的拆分方法來制備。例如，使外消旋混合物與某些其它化合物的單一對映體反應。這就把外消旋形式變化為立體異構體和非對映體的混合物，由于它們具有不同的熔點、不同的沸點和不同的溶解度，所以能夠通過常規(guī)方法如結晶分離它們。
前體藥物為本發(fā)明化合物的衍生物，后者具有化學上或代謝上可裂解基團并且通過溶劑解或在生理條件下變成其體內(nèi)具有藥理活性的本發(fā)明的化合物。本發(fā)明化合物的衍生物以它們的酸和堿衍生物形式存在時均具有活性，但酸衍生物形式經(jīng)常具有哺乳動物體內(nèi)溶解性、組織可適配性或者延遲釋放的優(yōu)點(參見Bundgard，H.，Designof Prodrugs，第7-9頁，21-24，Elsevier，Amsterdam 1985)。前體藥物包括本領域?qū)嵺`者熟知的酸衍生物，例如通過母體酸性化合物與合適的醇反應制備的酯，或者通過母體酸性化合物與合適的胺反應制備的酰胺。衍生自本發(fā)明化合物的側鏈酸性基團的簡單的脂族或芳族酯為優(yōu)選的前體藥物。在一些情況下，制備雙酯類型的前體藥物如(酰氧基)烷基酯或((烷氧基羰基)氧基)烷基酯是合乎需要的。作為前體藥物特別優(yōu)選的酯為甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、嗎啉代乙基和N，N-二乙基2-羥乙酰氨基酯。
通過使式(I)化合物的鈉鹽(在例如二甲基甲酰胺的介質(zhì)中)與2-氯-N，N-二乙基乙酰胺(可自Aldrich Chemical Co.，Milwaukee，WisconsinUSA，Item No.25，099-6得到)反應，可制備N，N-二乙基2-羥乙酰氨基酯前體藥物。通過使式(I)化合物的鈉鹽(在例如二甲基甲酰胺的介質(zhì)中)與4-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(可自Aldrich Chemical Co.，Milwaukee，Wisconsin USA，Item No.C4，220-3得到)反應，可制備嗎啉基乙基酯前體藥物。
式(I)和稱作化合物(A)-(O)的化合物的特別有用的前體藥物為簡單的芳族和脂族酯，例如甲基酯、乙基酯、正丙基酯、異丙基酯、正丁基酯、仲丁基酯、叔丁基酯、N，N-二乙基2-羥乙酰氨基酯和嗎啉代-N-乙基酯。在美國專利號5,654,326號中公開了制備酯前體藥物的方法。在1997年10月27日遞交的美國臨時專利申請順序號60/063280(發(fā)明名稱為吲哚sPLA2抑制劑的N，N-二乙基二羥乙酰氨基酯前體藥物)，其全部公開內(nèi)容通過引用結合到本文中；在1997年10月27日遞交的美國臨時專利申請順序號60/063646(發(fā)明名稱為吲哚sPLA2抑制劑的嗎啉代-N-乙基酯前體藥物)，其全部公開內(nèi)容通過引用結合到本文中；及在1997年10月27日遞交的美國臨時專利申請順序號60/063284(發(fā)明名稱為吲哚sPLA2抑制劑的異丙基酯前體藥物)中，其全部公開內(nèi)容通過引用結合到本文中，公開了前體藥物合成的其它的方法。
本發(fā)明方法的實施中最優(yōu)選為由下式表示的[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸的酸、鈉鹽、甲基酯和嗎啉代-N-乙基酯形式 和 在1997年10月27日遞交的美國臨時專利申請SN 60/063,646號中進一步描述了它的制備。
在以下反應流程中另外描述了1H-吲哚-3-乙醛酰胺sPLA2抑制劑的合成方法1H-吲哚-3-乙醛酰胺反應流程 反應流程的解釋為得到在含有經(jīng)由氧原子在4位被酸性官能團取代的乙醛酰胺，可采用流程1中概述的反應(對轉(zhuǎn)變1-5，參見Robin D.Clark，Joseph M.Muchowski，Lawrence E.Fisher，Lee A.Flippin，David B.Repke，MichelSouchet，Synthesis，1991，871-878，其公開內(nèi)容通過引用結合到本文中)。采用Pd/C作為催化劑，可將鄰-硝基甲苯1還原為2-甲基苯胺2。采用低壓力的氫氣，在乙醇或四氫呋喃(THF)或兩者的組合中進行反應。于回流溫度下，在THF中在二碳酸二叔丁酯存在下加熱，可以良好收率將苯胺2轉(zhuǎn)變?yōu)镹-叔丁基羰基衍生物3。采用仲丁基鋰于-40至-20℃下，在THF中生成3的二價陰離子的二鋰鹽，并與合適的取代的N-甲氧基-N-甲基烷酰胺反應。通過從己烷中結晶，可將產(chǎn)物4純化，或者直接與二氯甲烷中的三氟乙酸反應，得到1，3-未取代的吲哚5。于室溫(20-25℃)將1，3-未取代的吲哚5與氫化鈉在二甲基甲酰胺中反應0.5-1.0小時。用芳基甲基鹵化物處理得到5的鈉鹽，于0-100℃的溫度范圍內(nèi)，通常在環(huán)境溫度下將混合物攪拌4-36小時，得到1-芳基甲基吲哚6。通過與三溴化硼在二氯甲烷中攪拌大約5小時，該吲哚6可被在O上脫甲基化(參見Tsung-Ying Shem和Charles A Winter，Adv.Drug Res.，1977，12，176，其公開內(nèi)容通過引用結合到本文中)。采用氫化鈉作為堿，用在二甲基甲酰胺(DMF)中的α-溴代烷酸酯使4-羥基吲哚7烷基化，反應條件與5向6的轉(zhuǎn)變所描述的類似。α-[(吲哚-4-基)]氧基烷酸酯8與草酸酰氯在二氯甲烷中反應，可得到9，后者不須純化可直接與氨反應，得到乙醛酰胺10。采用1N氫氧化鈉在甲醇中水解該產(chǎn)物。最終產(chǎn)物乙醛酰胺11或者作為游離的羧酸或者作為其鈉鹽分離。當化合物11的R2、R3、R4和R5每個為氫時，鈉鹽為本發(fā)明的優(yōu)選化合物。當需要鈉鹽時，本領域技術人員可以通過用約1N NaOH處理分離產(chǎn)物10，而無須再經(jīng)過酸洗。咔唑和四氫咔唑化合物在1998年4月21日提出的美國專利申請SN 09/063066(發(fā)明名稱為“取代的咔唑類和1，2，3，4-四氫咔唑類”)中，描述了咔唑和四氫咔唑SPLA2抑制劑和制備這些化合物的方法，其全部公開內(nèi)容通過引用結合到本文中。本發(fā)明方法，包括用這些化合物治療哺乳動物。
本發(fā)明方法為治療患有膿毒癥或易受膿毒癥影響的包括人在內(nèi)的哺乳動物的方法。所述方法包括在由膿毒癥引起的第一次器官衰竭之前和/或最多可達24小時時給予所述人治療有效量的由以下式(Ie)表示的咔唑或四氫咔唑類化合物或其藥學上可接受的外消旋物、溶劑合物、互變異構體、旋光異構體、前體藥物衍生物或鹽 其中；a為苯基或吡啶基，其中氮處于5-、6-、7-或8-位；B或D中的一個為氮且另一個為碳；Z為環(huán)己烯基、苯基、吡啶基，其中氮處于1-、2-或3-位，或者在1-、2-或3-位具有一個選自硫或氧的雜原子和在1-、2-、3-或4-位具有氮雜原子的6-元雜環(huán)； 為雙或單鍵；R20選自(a)、(b)和(c)，其中；(a)為-(C5-C20)烷基、-(C5-C20)鏈烯基、-(C5-C20)炔基、碳環(huán)基團或雜環(huán)基團，或者(b)為用一個或多個獨立選自不互相干擾的取代基取代的(a)中的一個成員；或者(c)為基團-(L)-R80；其中，-(L)-為選自碳、氫、氧、氮和硫的1-12個原子的二價連接基團；其中-(L)-中原子的組合選自(i)僅有碳和氫原子，(ii)僅一個硫原子，(iii)僅一個氧原子，(iv)僅一個或兩個氮和氫，(v)碳、氫和僅有一個硫，和(vi)僅有碳、氫和氧；并且其中R80選自(a)或(b)；R21為不互相干擾的取代基；R1’為-NHNH2、-NH2或-CONH2；R2’選自-OH和-O(CH2)tr5’，其中R5’為H、-CN、-NH2、-CONH2、-CONR9R10、-NHSO2R15；-CONHSO2R15、其中R15為-(C1-C6)烷基或-CF3；苯基或用-CO2H或-CO2(C1-C4)烷基取代的苯基；和-(La)-(酸性基團)，其中-(La)-具有1-7的酸性連接長度的酸性連接基團和t為1-5；R3’選自不互相干擾的取代基、碳環(huán)基團、用不互相干擾的取代基取代的碳環(huán)基團、雜環(huán)基團和用不互相干擾的取代基取代的雜環(huán)基團；前提是；當R3’為H，R20為芐基和m為1或2時，R2’不為-O(CH2)mh；和前提是當D為氮時，Z的雜原子在1-、2-或3-位選自硫或氧和在1-、2-、3-或4-位為氮。
在本發(fā)明方法的實施中，優(yōu)選的是由式(IIe)表示的化合物或其藥學上可接受的外消旋物、溶劑合物、互變異構體、旋光異構體、前體藥物衍生物或鹽 其中Z為環(huán)己烯基或苯基R21為不互相干擾的取代基；R1為-NHNH2或-NH2；R2選自-OH和-O(CH2)mr5，其中R5為H、-CO2H、-CONH2、-CO2(C1-C4烷基)； 其中R6和R7分別獨立為-OH或-O(C1-C4)烷基；-SO3H、-SO3(C1-C4烷基)、四唑基、-CN、-NH2、-NHSO2R15；-CONHSO2R15，其中R15為-(C1-C6)烷基或-CF3、苯基或用-CO2H或-CO2(C1-C4)烷基取代的苯基，其中m為1-3；R3為H、-O(C1-C4)烷基、鹵代、-(C1-C6)烷基、苯基、-(C1-C4)烷基苯基；用-(C1-C6)烷基、鹵代或-CF3取代的苯基；-CH2OSi(C1-C6)烷基、呋喃基、噻吩基、-(C1-C6)羥基烷基；或-(CH2)nr8，其中R8為H、-CONH2、-NR9R10、-CN或苯基，其中R9和R10獨立為-(C1-C4)烷基或-苯基(C1-C4)烷基且n為1-8；R4為H、-(C5-C14)烷基、-(C3-C14)環(huán)烷基、吡啶基、苯基或用以下基團取代的苯基，包括-(C1-C6)烷基、鹵代、-CF3、-OCF3、-(C1-C4)烷氧基、-CN、-(C1-C4)烷硫基、苯基(C1-C4)烷基、-(C1-C4)烷基苯基、苯基、苯氧基或萘基。
用于實施本發(fā)明方法的包括其所有的鹽和前體藥物衍生物在內(nèi)的優(yōu)選具體化合物如下1 9-芐基-5，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-羧酸酰肼；2 9-芐基-5，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；3 [9-芐基-4-氨基甲?；?7-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸鈉鹽；4 [9-芐基-4-氨基甲?；?7-甲氧基咔唑-5-基]氧基乙酸；5 [9-芐基-4-氨基甲?；?7-甲氧基咔唑-5-基]氧基乙酸甲酯；6 9-芐基-7-甲氧基-5-氰基甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；7 9-芐基-7-甲氧基-5-(1H-四唑-5-基-甲基)氧基)-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；8 {9-[(苯基)甲基]-5-氨基甲酰基-2-甲基-咔唑-4-基}氧基乙酸；9 {9-[(3-氟苯基)甲基]-5-氨基甲酰基-2-甲基-咔唑-4-基}氧基乙酸；10 {9-[(3-甲基苯基)甲基]-5-氨基甲酰基-2-甲基-咔唑-4-基}氧基乙酸；11 {9-[(苯基)甲基]-5-氨基甲酰基-2-(4-三氟甲基苯基)-咔唑-4-基}氧基乙酸；12 9-芐基-5-(2-甲亞磺酰氨基(sulfonamido))乙氧基-7-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；13 9-芐基-4-(2-甲亞磺酰氨基)乙氧基-2-甲氧基咔唑-5-甲酰胺；14 9-芐基-4-(2-三氟甲亞磺酰氨基)乙氧基-2-甲氧基咔唑-5-甲酰胺；15 9-芐基-5-甲亞磺酰氨基甲氧基-7-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；16 9-芐基-4-甲亞磺酰氨基甲氧基-咔唑-5-甲酰胺；17 [5-氨基甲?；?2-戊基-9-(苯基甲基)咔唑-4-基]氧基乙酸；18 [5-氨基甲?；?2-(1-甲基乙基)-9-(苯基甲基)咔唑-4-基]氧基乙酸；19 [5-氨基甲酰基-9-(苯基甲基)-2-[(三(-1-甲基乙基)甲硅烷基)氧基甲基]咔唑-4-基]氧基乙酸；20 [5-氨基甲?；?2-苯基-9-(苯基甲基)咔唑-4-基]氧基乙酸21 [5-氨基甲?；?2-(4-氯苯基)-9-(苯基甲基)咔唑-4-基]氧基乙酸；22 [5-氨基甲?；?2-(2-呋喃基)-9-(苯基甲基)咔唑-4-基]氧基乙酸；23 [5-氨基甲酰基-9-(苯基甲基)-2-[(三(-1-甲基乙基)甲硅烷基)氧基甲基]咔唑-4-基]氧基乙酸，鋰鹽；24 {9-[(苯基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基}氧基乙酸；25 {9-[(3-氟苯基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基}氧基乙酸；26 {9-[(3-苯氧基苯基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基}氧基乙酸；27 {9-[(2-氟苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；28 {9-[(2-三氟甲基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；29 {9-[(2-芐基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；30 {9-[(3-三氟甲基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；31 {9-[(1-萘基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基}氧基乙酸；32 {9-[(2-氰基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；33 {9-[(3-氰基苯基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基}氧基乙酸；34 {9-[(2-甲基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；35 {9-[(3-甲基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；36 {9-[(3，5-二甲基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；37 {9-[(3-碘苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；38 {9-[(2-氯苯基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基}氧基乙酸；39 {9-[(2，3-二氟苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；40 {9-[(2，6-二氟苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；41 {9-[(2，6-二氯苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；42 {9-[(3-三氟甲氧基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；43 {9-[(2-聯(lián)苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；44 {9-[(2-聯(lián)苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；45 {9-[(2-聯(lián)苯基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基}氧基乙酸；46 [9-芐基-4-氨基甲?；?1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸；47 {9-[(2-吡啶基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；48 {9-[(3-吡啶基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；49 [9-芐基-4-氨基甲?；?8-甲基-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸；50 [9-芐基-5-氨基甲酰基-1-甲基咔唑-4-基]氧基乙酸；51 [9-芐基-4-氨基甲?；?8-氟-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸；52 [9-芐基-5-氨基甲?；?1-氟咔唑-4-基]氧基乙酸；53 [9-芐基-4-氨基甲?；?8-氯-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸；54 [9-芐基-5-氨基甲?；?1-氯咔唑-4-基]氧基乙酸；55 [9-[(環(huán)己基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基]氧基乙酸；56 [9-[(環(huán)戊基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基]氧基乙酸；57 5-氨基甲?；?9-(苯基甲基)-2-[[(丙烯-3-基)氧基]甲基]咔唑-4-基]氧基乙酸；58 [5-氨基甲?；?9-(苯基甲基)-2-[(丙氧基)甲基]咔唑-4-基]氧基乙酸；59 9-芐基-7-甲氧基-5-((甲酰氨基甲基)氧基)-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；60 9-芐基-7-甲氧基-5-氰基甲氧基-咔唑-4-甲酰胺；61 19-芐基-7-甲氧基-5-((1H-四唑-5-基-甲基)氧基)-咔唑-4-甲酰胺；62 9-芐基-7-甲氧基-5-((甲酰氨基甲基)氧基)-咔唑-4-甲酰胺；和63 [9-芐基-4-氨基甲?；?1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸或其藥學上可接受的外消旋物、溶劑合物、互變異構體、旋光異構體、前體藥物衍生物或鹽。
適合于實施本發(fā)明方法的其它合乎需要的咔唑化合物選自由式(XXX)表示的那些化合物或其藥學上可接受的外消旋物、溶劑合物、互變異構體、旋光異構體、前體藥物衍生物或鹽 其中R1為-NHNH2或-NH2；R2選自-OH和-O(CH2)mr5，其中R5為H、-CO2H、-CO2(C1-C4烷基)； 其中R6和R7分別獨立為-OH或-O(C1-C4)烷基；-SO3H、-SO3(C1-C4烷基)、四唑基、-CN、-NH2、-NHSO2R15；-CONHSO2R15，其中R15為-(C1-C6)烷基或-CF3、苯基或用-CO2H或-CO2(C1-C4)烷基取代的苯基，其中m為1-3；R3為H、-O(C1-C4)烷基、鹵代、-(C1-C6)烷基、苯基、-(C1-C4)烷基苯基；用-(C1-C6)烷基、鹵代或-CF3取代的苯基；-CH2OSi(C1-C6)烷基、呋喃基、噻吩基、-(C1-C6)羥基烷基；或-(CH2)nr8，其中R8為H、-CONH2、-NR9R10、-CN或苯基，其中R9和R10獨立為-(C1-C4)烷基或-苯基(C1-C4)烷基且n為1-8；R4為H、-(C5-C14)烷基、-(C3-C14)環(huán)烷基、吡啶基、苯基或用以下基團取代的苯基，包括-(C1-C6)烷基、鹵代、-CF3、-OCF3、-(C1-C4)烷氧基、-CN、-(C1-C4)烷硫基、苯基(C1-C4)烷基、-(C1-C4)烷基苯基、苯基、苯氧基或萘基；a為苯基或吡啶基，其中氮處于5-、6-、7-或8-位；Z為環(huán)己烯基、苯基、吡啶基，其中氮處于1-、2-或3-位，或者在1-、2-或3-位具有一個選自硫或氧的雜原子和在1-、2-、3-或4-位具有氮雜原子的6-元雜環(huán)；其中用＝O任選取代在雜環(huán)上的一個碳；前提是A或Z中的一個為雜環(huán)。
適合于本發(fā)明方法的另外合乎需要的具體化合物選自以下(R，S)-(9-芐基-4-氨基甲?；?1-氧代-3-硫雜-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基)氧基乙酸；(R，S)-(9-芐基-4-氨基甲?；?1-氧代-3-硫雜-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基)氧基乙酸；[N-芐基-1-氨基甲?；?1-氮雜-1，2，3，4-四氫咔唑-8-基]氧基乙酸；4-甲氧基-6-甲氧基羰基-10-苯基甲基-6，7，8，9-四氫吡啶并[1，2-a]吲哚；(4-甲酰氨基-9-苯基甲基-4，5-二氫噻喃并[3，4-b]吲哚-5-基)氧基乙酸；3，4-二氫4-甲酰氨基-5-甲氧基-9-苯基甲基吡喃并[3，4-b]吲哚；2-[(2，9-雙芐基-4-氨基甲?；?1，2，3，4-四氫-β-咔啉-5-基)氧基]乙酸或其藥學上可接受的外消旋物、溶劑合物、互變異構體、旋光異構體、前體藥物衍生物或鹽。
適合于治療和/或預防膿毒癥的特別優(yōu)選的咔唑型化合物由以下式(Xe)和(Xle)表示 和 對所有以上咔唑或四氫咔唑型化合物而言，以它們的(i)酸形式，或(ii)藥學上可接受的鹽(例如，Na、K)形式，或(iii)和前體藥物衍生物(例如，甲基酯、乙基酯、正丁基酯、嗎啉代乙酯)使用它們是有利的。
前體藥物為用于本發(fā)明方法的sPLA2抑制劑的衍生物，其具有化學上或代謝學上可裂解的基團且通過溶劑解或在生理條件下變成在體內(nèi)具藥學活性的本發(fā)明化合物。本發(fā)明化合物的衍生物以它們的酸和堿衍生物形式存在時均具有活性，但酸性衍生物形式在哺乳動物生物體體內(nèi)經(jīng)常具有溶解性、組織適配性或延遲釋放的優(yōu)點(參見，Bundgard，H.，Design of Prodrugs，pp 7-9，21-24，Elsevier，Amsterdam 1985)。前體藥物包括本領域?qū)I(yè)人員熟知的酸性衍生物，例如，通過母體酸性化合物與適宜的醇反應制備的酯或者通過母體酸性化合物與適宜的胺反應制備的酰胺。衍生自本發(fā)明化合物的側鏈酸性基團的簡單的脂族或芳族酯為優(yōu)選的前體藥物。在一些情況中，制備雙酯型前體藥物例如(酰氧基)烷基酯或((烷氧基羰基)氧基)烷基酯是合乎需要的。特別優(yōu)選的前體藥物為包括甲酯、乙酯、正丙基酯、異丙基酯、正丁基酯、仲丁基酯、叔丁基酯、N，N-二乙基2-羥乙酰氨基酯和嗎啉代-N-乙基酯的酯前體藥物。在U.S.專利5,654,326號中公開了制備酯前體藥物的方法。以下公開前體藥物合成的其它方法，包括在1997年10月27日提出的U.S.臨時專利申請順序60/063280號(發(fā)明名稱為，吲哚sPLA2抑制劑的N，N-二乙基2-羥乙酰氨基酯前體藥物)，其全部公開內(nèi)容通過引用結合到本文中；在1997年10月27日提出的U.S.臨時專利申請順序60/063646號(發(fā)明名稱為，吲哚sPLA2抑制劑的嗎啉代-N-乙基酯前體藥物)，其全部公開內(nèi)容通過引用結合到本文中；和1997年10月27日提出的US臨時專利申請順序60/063284號(發(fā)明名稱為，吲哚sPLA2抑制劑的異丙基酯前體藥物)，其全部公開內(nèi)容通過引用結合到本文中。
通過以下通法可制備用于實施本發(fā)明方法的咔唑和四氫咔唑sPLA2抑制劑化合物。
按照以下反應流程Ig(a)和(c)制備其中Z為環(huán)己烯的式Ie化合物。流程Ig(a) 其中；R1為-NH2，R3(a)為H、-O(C1-C4)烷基、鹵代、-(C1-C6)烷基、苯基、-(C1-C4)烷基苯基；用-(C1-C6)烷基、鹵代或-CF3取代的苯基；-CH2OSi(C1-C6)烷基、呋喃基、噻吩基、-(C1-C6)羥基烷基、-(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基、-(C1-C6)烷氧基(C1-C6)鏈烯基；或-(CH2)nr8，其中R8為H、-CONH2、-NR9R10、-CN或苯基，其中R9和R10獨立為氫、-CF3、苯基、-(C1-C4)烷基、-(C1-C4)烷基苯基或-苯基(C1-C4)烷基且n為1-8；當R1為-NHNH2，R3(a)為H、-O(C1-C4)烷基、鹵代、-(C1-C6)烷基、苯基、-(C1-C4)烷基苯基；用-(C1-C6)烷基、鹵代或-CF3取代的苯基；-CH2OSi(C1-C6)烷基、呋喃基、噻吩基、-(C1-C6)羥基烷基、-(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基、-(C1-C6)烷氧基(C1-C6)鏈烯基；或-(CH2)nr8，其中R8為H、-NR9R10、-CN或苯基，其中R9和R10獨立為氫、-CF3、苯基、-(C1-C4)烷基、-(C1-C4)烷基苯基或-苯基(C1-C4)烷基且n為1-8；R2(a)為-OCH3或-OH。
優(yōu)選在室溫下，通過用還原劑如在Pd/C存在下的氫處理，可將合適取代的硝基苯(1)還原為苯胺(2)。
在約0-20℃的溫度下，使用烷基化試劑如合適取代的醛和氰基硼氫化鈉，將化合物(2)N-烷基化，形成(3)?；蛘撸砂押线m取代的芐基鹵化物用于第一個烷基化步驟。通過優(yōu)選在約80℃的溫度下用2-乙氧甲酰-6-溴代環(huán)己酮處理，或者通過用六甲基二硅烷疊氮化鉀(potassium hexamethyldisilazide)和溴代酮酸酯處理，將生成的中間體進一步N-烷基化，得到(4)。
通過優(yōu)選在80℃下與在苯中的ZnCl2回流約1-2天，將產(chǎn)物(4)環(huán)化為四氫咔唑(5)(參見Julia，H.，Lenzi.J.Preparation d’acidestetrahydro-1，2，3，4-carbazole-1 ou-4.Bull.Soc.Chim.France，1962，2262-2263)。通過在約100℃的溫度下用肼處理，使化合物(5)轉(zhuǎn)化為酰肼(6)，或者通過與在苯中的甲基氯氨化鋁反應，使化合物(5)轉(zhuǎn)化為酰胺(7)(參見Levin，J.I.；Turos，E.；Weinreb，S.M.An alternativeprocedure for the aluminum-mediated conversion of esters to amides.Syn.Comm.，1982，12，989-993)?；蛘?，通過用阮內(nèi)鎳活化催化劑處理(6)，可產(chǎn)生(7)。
可以理解，當R3(a)為下式時 (C1-C4烷基)，用該方法也可達到將其轉(zhuǎn)化為酰胺的目的。
優(yōu)選在0℃至室溫下，用脫烷基化試劑如三溴化硼或硫代乙醇鈉，可將化合物(6)和(7)脫烷基化，得到化合物(7)，其中R2(a)為-OH，然后通過用堿如氫化鈉和烷基化試劑如Br(CH2)mr5再烷基化可將化合物(7)再轉(zhuǎn)化為化合物(9)，其中R5為羧酸酯或膦酸二酯或腈(如上定義)。通過用堿水溶液處理，可將R2轉(zhuǎn)化為羧酸。當R2為腈時，通過與三丁基疊氮化錫反應可實現(xiàn)轉(zhuǎn)化為四唑的目的或通過與堿性過氧化氫反應可實現(xiàn)轉(zhuǎn)化為酰胺的目的。當R2為膦酸二酯時，通過與脫烷基化試劑如三甲基甲硅烷基溴化物反應可實現(xiàn)轉(zhuǎn)化為酸。通過使所述二酯與含有堿的水溶液反應可得到單酯。
當R2和R3兩者均為甲氧基時，通過在100℃下與在二甲基甲酰胺中的乙硫醇鈉反應，可實現(xiàn)選擇性脫甲基。
如下在流程I(b)中表明中間體(5)的另外一種合成。流程Ig(b) 其中PG為保護基團；R3a如在以上流程1中定義。在50℃下，在碳酸氫鈉存在下，用在二甲基甲酰胺中的2-乙氧甲酰-6-溴代環(huán)己酮將苯胺(2)N-烷基化8-24小時。優(yōu)選的保護基團包括甲基、碳酸根和甲硅烷基如叔丁基二甲基甲硅烷基。使用在以上流程I(a)中描述的在苯中的ZnCl2條件下，將反應產(chǎn)物(4’)環(huán)化為(5’)。在室溫下，通過用在二甲基甲酰胺中的氫化鈉和適宜的烷基鹵化物處理4-8小時，可完成(5’)的N-烷基化，得到(5)。
在本發(fā)明的一個方面，口服給藥后式(I)、(Ie)或(II)具有高的生物利用度，并且當在sPLA2水平升高前或衰竭之后24小時內(nèi)給藥時，可有效對抗膿毒癥或膿毒性休克，因此可預防器官衰竭和/或死亡。
具體地說，在臨床實驗中已觀察到當在第一次器官衰竭后24小時內(nèi)、優(yōu)選在18小時內(nèi)、更優(yōu)選在12小時內(nèi)，在臨床實驗參加者的分組中給予式I化合物(即化合物(Vb))并繼續(xù)給藥多達7天時，死亡率減少。在第一次器官衰竭之后給予式I化合物的時間開始地越早，所觀察到的死亡率越低。
據(jù)認為，在sPLA2水平升高前(即預防)，或者第一次器官衰竭后24小時內(nèi)但優(yōu)選18小時內(nèi)，在sPLA2水平高或者正在升高(治療)時，當給予易受膿毒癥影響的患者或者要進行可能引起膿毒癥的操作的患者式I、Ie或II化合物時，這些化合物可以減少由于膿毒癥造成的死亡率。當sPLA2水平已達峰值(一般在第一次器官衰竭后約24小時之后)或者sPLA2水平處于下降時，這些化合物有效性似乎降低。這個觀察結果可能表明體內(nèi)的防御機制已經(jīng)被擊潰，在這種情況下患者一般會死亡，或者是患者自身的防御機制已抑制了sPLA2水平的升高。后一種患者通常能夠生存下來，并且認為在約24小時后不再那么需要sPLA2抑制劑化合物(也就是說病情已得到緩解)。產(chǎn)生該現(xiàn)象的機制或其解釋不屬于本發(fā)明的方面。
本發(fā)明化合物的合成((3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸，N-嗎啉代乙酯(式I化合物，上述)的合成采用((3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸或其鹽作為起始物料。通過U.S.專利5,654,326號的的反應流程或?qū)嵤├?的方法(其公開內(nèi)容通過引用結合到本文中)可制備該起始物料。在歐洲專利申請95302166.4號、公開號0 675 110(1995年10月4日公開)中描述了類似方法。其它常規(guī)方法也可用于制備這種起始物料。用于合成本發(fā)明化合物的方法在以下闡述的實施例1中具體化實施例1由下式表示的化合物((3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸，N-嗎啉代乙酯的制備 部分A.N-叔丁氧基羰基-3-甲氧基-2-甲基苯胺的制備。
將44.4g(344mmol)的3-甲氧基-2-甲基苯胺和75g(344mmol)的二碳酸二叔丁酯在400mL的THF中的溶液加熱以維持回流4小時。減壓濃縮后，用乙酸乙酯溶解殘余物，用1N枸櫞酸、水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓除去溶劑后，從己烷中結晶殘余物，得到64.5g(84％收率)的N-叔丁氧基羰基-3-甲氧基-2-甲基苯胺，mp，56-57℃。對C13H19NO3分析理論值C，65.80；H，8.07；N，5.90實測值C，63.32；H，7.83；N，5.56部分B.4-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚的制備。
將280mL(0.36mol)的1.3M仲丁基鋰在環(huán)己烷中的溶液緩慢加入到在300mL的THF中的用干冰-乙醇浴保持在低于-40℃的溫度下的N-叔丁氧基羰基-3-甲氧基-2-甲基苯胺(43g，0.18mol)中。撤除干冰-乙醇浴，使溫度升至-20℃，然后恢復干冰-乙醇浴。在溫度已冷卻至-60℃后，滴加在等體積THF中的18.5g(0.18mol)的N-甲氧基-N-甲基乙醛酰胺。將反應混合物攪拌1小時，撤除冷卻浴并攪拌另外1小時。然后將其傾入600mL乙醚和600mL的1N HCl的混合物中。分離有機層，用水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，減壓濃縮，得到39.5g的1-(2-(叔丁氧基羰基氨基)-6-甲氧基苯基)-2-丙酮和起始N-酰苯胺的混合物。把該混合物溶于100mL二氯甲烷和40mL三氟乙酸中并攪拌總共26小時。用水洗滌混合物，干燥(MgSO4)，減壓濃縮。殘余物經(jīng)硅膠層析，用20％ EtOAc/己烷洗脫，從CH2Cl2/己烷中結晶，得到13.9g的4-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚，mp，80-86℃。對C10H11NO分析理論值C，74.51；H，6.88；N，8.69實測值C，74.41；H，7.08；N，8.47部分C.4-甲氧基-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚的制備。
將4-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚(1g，6.2mmol)加入到在15mL的DMF中的248mg(6.2mmol)的60％氫化鈉/礦物油(加入DMF之前用己烷漂洗)中，并在攪拌0.5小時后，加入0.74mL(6.2mmol)的芐基溴。在室溫下，將混合物攪拌18小時，用水稀釋并用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌乙酸乙酯溶液，干燥(MgSO4)，并在減壓濃縮后，殘余物經(jīng)硅膠層析，用20％ EtOAc/己烷洗脫，得到1.3g(84％收率)的4-甲氧基-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚，在96-116℃熔融。對C17H17NO分析理論值C，81.24；H，6.82；N，5.57實測值C，81.33；H，6.74；N，5.29部分D.4-羥基-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚的制備。
在室溫下，將1.25g(5mmol)的4-甲氧基-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚和20mL的1M BBr3/CH2Cl2在50mL二氯甲烷中的溶液攪拌5小時，減壓濃縮。將殘余物溶于乙酸乙酯中，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓濃縮后，殘余物經(jīng)硅膠層析，用20％ EtOAc/己烷洗脫，得到577mg(49％收率)的4-羥基-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚，125-127℃。對C16H15NO分析理論值C，80.98；H，6.37；N，5.90實測值C，80.76；H，6.26；N，5.80部分E.((2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸甲酯的制備。
將4-羥基-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚(530mg，2.2mmol)加入到在20mL的DMF中的88mg(2.2mmol)的60％ NaH/礦物油中并把混合物攪拌0.67小時。然后，加入0.21mL(2.2mmol)的溴代乙酸甲酯并維持攪拌17小時。用水稀釋混合物并用乙酸乙酯提取，用鹽水洗滌乙酸乙酯溶液，干燥(MgSO4)，減壓濃縮。殘余物經(jīng)硅膠層析，用20％ EtOAc/己烷洗脫，得到597mg(88％收率)的((2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸甲酯，140-143℃。對C19H19NO3分析理論值C，73.77；H，6.19；N，4.53實測值C，74.01；H，6.23；N，4.32部分F.((3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸甲酯的制備。
將草酰氯(0.16mL，1.9mmol)加入到在10mL的二氯甲烷中的582mg(1.9mmol)的((2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸甲酯中并把混合物攪拌1.5小時。減壓濃縮混合物，并用10mL的二氯甲烷溶解殘余物。將無水氨鼓泡進入0.25小時，把混合物攪拌1.5小時并減壓蒸發(fā)。將殘余物在20mL乙酸乙酯中攪拌并過濾混合物。濃縮濾液，得到672mg的((3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸甲酯和氯化銨的混合物，mp 202-215℃。部分G.((3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸的制備。
將660mg(1.7mmol)的((3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸甲酯和10mL的1N NaOH在30mL甲醇中的混合物加熱以維持回流1小時，冷卻至室溫并攪拌0.5小時。減壓濃縮混合物并用EtOAc/水處理殘余物。分離水層，用1N HCl酸化至pH2-3并用EtOAc提取。濃縮EtOAc溶液，使431mg(69％收率)的((3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸結晶，在218-220℃熔融。對C20H18N2O5分析理論值C，65.57；H，4.95；N，7.65實測值C，63.31；H，4.79；N，6.91部分G2.((3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸鈉鹽的制備。
將660mg(1.7mmol)的((3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸甲酯和10mL的1N NaOH在30mL甲醇中的混合物加熱以維持回流1小時，冷卻至室溫并攪拌0.5小時。減壓濃縮混合物并用EtOAc/水處理殘余物。分離水層，優(yōu)選在真空下濃縮至干。任選用非質(zhì)子溶劑如己烷洗滌產(chǎn)物并進一步干燥，得到目標化合物。部分H.[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-苯基-3-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸，N-嗎啉代乙酯的制備。
在適宜的溶劑優(yōu)選為二甲基甲酰胺中，通過4-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(可從Aldrich Chemical Co.，Milwaukee，Wisconsin USA，Item No.C4，220-3得到)和適宜的堿優(yōu)選為CsCO3和((3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基)氧基)乙酸鈉鹽反應，可形成本發(fā)明化合物。將所述漿狀物應加熱至60℃或其它適宜的溫度直到形成溶液。繼續(xù)加熱直到反應完全。采用常規(guī)有機實驗室技術，處理反應混合物以分離產(chǎn)物。實施例22-乙基-4-甲氧基-1H-吲哚的制備。
將140ml(0.18mol)的1.3M仲丁基鋰在環(huán)己烷中的溶液緩慢加入到在250ml的THF中的用干冰-乙醇浴保持在低于-40℃的溫度下的N-叔丁氧基羰基-3-甲氧基-2-甲基苯胺(21.3g，0.09mol)中。撤除干冰-乙醇浴，使溫度升至0℃，然后恢復干冰-乙醇浴。在溫度已冷卻至-60℃后，滴加在等體積THF中的18.5g(0.18mol)的N-甲氧基-N-甲基丙酰胺。將反應混合物攪拌5分鐘，撤除冷卻浴并攪拌另外18小時。然后將其傾入300ml乙醚和400mL的0.5N HCl的混合物中。分離有機層，用水、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，減壓濃縮，得到25.5g的粗品1-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-6-甲氧基苯基]-2-丁酮。把該物料溶于250ml二氯甲烷和50ml三氟乙酸中并攪拌總共17小時。減壓濃縮混合物，加入乙酸乙酯和水以維持油狀物。分離乙酸乙酯，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮。在硅膠上將殘余物層析三次，用20％EtOAc/己烷洗脫，得到13.9g的2-乙基-4-甲氧基-1H-吲哚。對C11H13NO分析理論值C，75.40；H，7.48；N，7.99實測值C，74.41；H，7.64；N，7.97部分B.2-乙基-4-甲氧基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚的制備。
將2-乙基-4-甲氧基-1H-吲哚(4.2g，24mmol)溶于30ml的DMF中并加入960mg(24mmol)的60％ NAH/礦物油。1.5小時后，加入2.9ml(24mmol)的芐基溴。4小時后，用水稀釋混合物，用乙酸乙酯提取兩次。用鹽水洗滌合并的乙酸乙酯，干燥(MgSO4)，減壓濃縮。殘余物經(jīng)硅膠層析，用20％ EtOAc/己烷洗脫，得到3.1g(49％收率)的2-乙基-4-甲氧基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚。部分C.2-乙基-4-羥基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚的制備。
在室溫下，將3.1g(11.7mmol)的2-乙基-4-甲氧基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚和48.6ml的1M BBr3/CH2Cl2在50ml二氯甲烷中的溶液攪拌5小時，減壓濃縮。將殘余物溶于乙酸乙酯中，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓濃縮后，殘余物經(jīng)硅膠層析，用20％ EtOAc/己烷洗脫，得到1.58g(54％收率)的2-乙基-4-羥基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚，mp 86-90℃。對C17H17NO分析理論值C，81.24；H，6.82；N，5.57實測值C，81.08；H，6.92；N，5.41部分D.[[2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸叔丁酯的制備。
將2-乙基-4-羥基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚(5.82g，20mmol)加入到在25ml的DMF中的7.82g(24mmol)碳酸銫中，并在35℃下將混合物攪拌30分鐘。冷卻至20℃后，加入溴代乙酸叔丁酯(4.65g，23.8mmol)在5ml的DMF中的溶液并維持攪拌直到經(jīng)TLC分析判斷反應完全(幾小時)。用水稀釋混合物并用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌乙酸乙酯溶液，干燥(MgSO4)，減壓濃縮，得到6.8g的固體。質(zhì)譜365對C23H27NO3分析理論值C，75.59；H，7.75；N，3.83；實測值C，75.87；H，7.48；N，3.94。部分E.[[2-乙基-1-(苯基甲基)-3-脲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸叔丁基酯的制備。
在室溫下，將2.3g(6.3mmol)[[2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸叔丁酯和4.8g(12.6mmol)雙(2，2，2-三氯乙基)偶氮二羧酸酯在乙醚中的溶液攪拌24小時。將過濾生成的固體真空干燥。將該加成物(1g，13mmol)溶于10ml的THF中并用鋅(1g)和冰乙酸(0.5ml)處理。在室溫下攪拌30分鐘后，加入在1ml的THF中的過量的三甲基甲硅烷基異氰酸酯并于室溫下繼續(xù)攪拌18小時。用水稀釋混合物并用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機層，經(jīng)MgSO4干燥，并濃縮至干，得到0.385g(69％收率)的副標題物料。質(zhì)譜423。對C24H29N3O4分析理論值C，68.07；H，6.90；N，9.92；實測值C，67.92；H，6.84；N，9.70。部分F.[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸的制備。
將788mg(2mmol)的[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯、10ml的1N NaOH和30ml甲醇的混合物加熱以維持回流0.5小時，在室溫下攪拌0.5小時并減壓濃縮。用乙酸乙酯和水處理殘余物，分離水層并用1N HCl酸化至pH2-3。過濾沉淀并用乙酸乙酯洗滌，得到559mg(74％收率)的[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，mp，230-234℃。對C21H20N2O5分析理論值C，65.96；H，5.80；N，7.33；實測值C，66.95；H，5.55；N，6.99。實施例3由下式表示的化合物[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸的制備 部分A.1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-4-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚的制備。
使用在實施例1部分C中描述的方法，將1g(6.2mmol)的4-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚先后與248mg(6.2mmol)的60％ NaH/礦物油和1.1mL(6.2mmol)的2-(溴代甲基)聯(lián)苯反應，經(jīng)硅膠層析(用17％EtOAc/己烷洗脫)后，得到1.63g(80％收率)為油的1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-4-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚。對C23H21NO分析理論值C，84.37；H，6.46；N，4.28實測值C，84.11；H，5.66；N，3.83。部分B.1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-4-羥基-2-甲基-1H-吲哚的制備。
通過在實施例1部分D中使用的方法，經(jīng)用20mL的1MBBr3/CH2Cl2處理，將1.6g(4.9mmol)的1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-4-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚進行O-脫甲基。在硅膠上將粗品產(chǎn)物層析化，并用20％ EtOAc/己烷洗脫，得到841mg(55％收率)的1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-4-羥基-2-甲基-1H-吲哚。對C22H19NO分析理論值C，84.32；H，6.11；N，4.47實測值C，84.59；H，6.33；N，4.75。部分C.[[1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯的制備。
如在實施例1部分E中描述的那樣，通過用在DMF中的0.23mL(2.45mmol)的溴代乙酸甲酯和98mg(2.45mmol)的60％ NaH/礦物油處理，將1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-4-羥基-2-甲基-1H-吲哚(767mg，2.45mmol)烷基化。經(jīng)硅膠層析法純化產(chǎn)物，用20％ EtOAc/己烷洗脫，得到730mg(77％收率)的[[1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯，99-101℃對C25H23NO3分析理論值C，77.90；H，6.01；N，3.63實測值C，78.11；H，6.17；N，3.74。部分D.[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯的制備。
使用在實施例1部分F中的方法，首先將715mg(1.9mmol)的[[1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯與0.16mL(1.9mmol)的草酰氯反應隨后與過量的氨反應，得到白色固體。將其與乙酸乙酯一起攪拌并分離不溶性物料，干燥，得到660mg的[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯和氯化銨的混合物。該混合物在144-148℃熔融。部分E.[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸的制備。
將648mg(1.4mmol)的[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯在10mL的1NNaOH和20mL的MeOH中的混合物加熱以維持回流1小時，冷卻至室溫并攪拌0.5小時。濃縮混合物，把殘余物用EtOAc/水的混合物攪拌并過濾不溶的固體物料，干燥，得到227mg(35％收率)的[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，鈉鹽，mp＞265℃。對C26H21N2O5Na分析理論值C，67.24；H，4.56；N，6.03實測值C，69.38；H，4.88；N，5.42。
部分F從得自以上的濾液分離水層并用1N HCl酸化至pH 2-3。用EtOAc提取沉淀，濃縮去除EtOAc，128mg(20％收率)的[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯]-2-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸沉淀，mp，228-231℃。對C26H22N2O5分析理論值C，70.58；H，5.01；N，6.33實測值C，73.12；H，5.37；N，5.81。實施例4由下式表示的化合物[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-[1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸的制備 部分A.1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-4-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚的制備。
使用在實施例1部分C中的方法，將805mg(5mmol)的4-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚先后與在DMF中的200mg(5mmol)的60％ NaH/礦物油和1.0g(5mmol)的3-(氯代甲基)聯(lián)苯反應，經(jīng)硅膠層析(用20％EtOAc/己烷洗脫)后，得到1.25g(76％收率)的1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-4-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚，mp，127-131℃。對C23H21NO分析理論值C，84.37；H，6.46；N，4.27實測值C，83.30；H，6.55；N，4.07。部分B.1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-4-羥基-2-甲基-1H-吲哚的制備。
通過在實施例1部分D中使用的方法，經(jīng)用15.2mL的1MBBr3/CH2Cl2處理，將1.25g(3.8mmol)的1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-4-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚進行O-脫甲基，得到1.03g(87％收率)的粗品1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-4-羥基-2-甲基-1H-吲哚。部分C.[[1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯的制備。
如在實施例1部分E中描述的那樣，經(jīng)用在DMF中的0.31mL(3.3mmol)的溴代乙酸甲酯和132mg(3.3mmol)的60％ NaH/礦物油處理，將1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-4-羥基-2-甲基-1H-吲哚(1.03g，3.3mmol)烷基化。經(jīng)硅膠層析法純化產(chǎn)物，用20％ EtOAc/己烷洗脫，得到1.0g(79％收率)的[[1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯，99-102℃對C25H23NO3分析理論值C，77.90；H，6.01；N，3.63實測值C，77.61；H，6.09；N，3.62。部分D.[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯的制備。
將草酰氯(0.23mL，2.6mmol)加入到在15mL二氯甲烷中的1.0g(2.6mmol)的[[1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯中并把混合物攪拌1.3小時。減壓濃縮混合物，把殘余物再次溶于15mL二氯甲烷中，并將氨氣鼓泡進入0.25小時，攪拌0.25小時并濃縮。將殘余物與EtOAc/水一起攪拌并過濾不溶的物料，得到300mg的[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯。分離得自濾液的EtOAc層，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮。殘余物經(jīng)硅膠層析，用EtOAc洗脫，得到另外671mg的[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯，mp，175-179℃。產(chǎn)物合并的總收率為82％。對C27H24N2O5分析理論值C，71.04；H，5.30；N，6.14實測值C，71.30；H，5.41；N，6.35。部分E.[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸的制備。
使用在實施例2部分E中描述的方法，將956mg(2.1mmol)的[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯在10mL的1N NaOH和20mL的MeOH中水解，得到403mg(41％收率)的[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，鈉鹽，mp＞265℃。對C26H21N2O5Na分析理論值C，67.24；H，4.56；N，6.03實測值C，67.20；H，4.58；N，6.03。
也得到346mg(37％收率)的[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯]-3-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，mp，236-238℃。對C26H22N2O5分析理論值C，70.58；H，5.01；N，6.33實測值C，70.58；H，5.25；N，6.11。實施例59-芐基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺的制備。部分A.9-芐基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-羧酸酰肼的制備。
采用在Julia，M.和Lenzi，J.Bull.Soc.Chim.France，1962，2262-2263中給出的方法，制備化合物(5)(R2＝6-MeO，R3(a)＝H，R4＝苯基)。將等摩爾量的N-芐基-對-甲氧基苯胺(3)和3-溴-2-環(huán)己酮羧酸乙酯(Sheehan，J.和Mumaw，C.E.J.Am.Chem.Soc.，1950，72，2127-2129)溶于二甲基甲酰胺中并在過量碳酸氫鈉存在下攪拌5天，得到3-N-芐基-4-甲氧基苯胺基-2-環(huán)己酮羧酸乙酯(4)，將其用在回流的苯中的氯化鋅處理，得到(5)R2＝6-MeO R3＝H)。
將0.5g化合物(5)和2-3ml的水合肼在30ml乙醇中的溶液回流66小時，冷卻，過濾，得到副標題化合物405mg，80％，mp 185-187℃。對C21H23N3O2分析理論值C，72.18；H，6.63；N，12.02實測值C，71.90；H，6.68；N，11.87。部分B.9-芐基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺的制備。
將0.3g以上部分A的化合物、2-3g阮內(nèi)鎳催化劑和100ml乙醇的混合物回流2.5小時，冷卻，傾析溶液并真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用二氯甲烷/1-3％甲醇的梯度洗脫，得到標題化合物，220mg，80％，mp 154-156℃/乙醚。對C21H22N2O2分析理論值C，75.42；H，6.63；N，8.38實測值C，75.58；H，6.62；N，8.24。實施例64-[(9-芐基-4-氨基甲?；?1，2，3，4-四氫咔唑-6-基)氧基]丁酸的制備將280mg的化合物(7)(R2＝6-MeO，R3＝H，R4＝苯基)在25ml二氯甲烷中的溶液用3ml在二氯甲烷中的1M三溴化硼處理2.75小時，用水洗滌，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)，得到290mg的粗品化合物(7)(R2＝6-OH，R3＝H)，將其溶于10ml四氫呋喃和50ml二甲基亞砜中并用40mg氫化鈉(60％在礦物油中)處理10分鐘，然后用0.15ml 4-溴代丁酸乙酯處理1.75小時。用乙酸乙酯和水稀釋溶液，用水洗滌有機相，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用二氯甲烷/0-2％甲醇梯度洗脫，得到340mg的化合物(9)(R2＝-O(CH2)4CO2Et，R3＝H)，將其溶于含有2-3ml的2N氫氧化鈉的25ml乙醇中并攪拌4.25小時，用鹽酸酸化并用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空濃縮，得到標題化合物，300mg，90％，mp 199-200℃。對C24H26N2O4元素分析理論值C，70.92；H，6.45；N，6.89實測值C，70.63；H，6.49；N，6.87。實施例73-[(9-芐基-4-氨基甲?；?1，2，3，4-四氫咔唑-6-基)氧基]丙基膦酸的制備部分A.二甲基-3-[(9-芐基-4-氨基甲?；?1，2，3，4-四氫咔唑-6-基)氧基]丙基膦酸的制備。
部分A.將840mg的化合物(7)(R2(a)＝OH，R3＝H)(如在實施例2中那樣制備)在20ml四氫呋喃和70ml二甲基亞砜中的溶液用120mg氫化鈉(60％在礦物油中)處理10分鐘，然后用700mg 3-溴代丙基膦酸二甲酯處理5小時。用水和乙酸乙酯稀釋溶液。用水洗滌有機相，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)，得到副標題化合物，940mg，75％，無定形固體。對C25H31N2O5P元素分析理論值C，63.82；H，6.64；N，5.95實測值C，63.94；H，6.58；N，6.15部分B.將450mg部分A的化合物和1.5ml三甲基甲硅烷基溴化物在25ml二氯甲烷中的溶液攪拌16小時，然后真空蒸發(fā)。把殘余物溶于25ml甲醇之中，攪拌2.5小時，真空蒸發(fā)，自乙酸乙酯和甲醇的混合物中結晶，得到標題化合物，325mg，78％，mp 200-201℃。對C23H27N2O5P·2H2O元素分析理論值C，57.73；H，6.53；N，5.86實測值C，57.51；H，5.94；N，6.00實施例82-[(9-芐基-4-氨基甲?；?1，2，3，4-四氫-咔唑-6-基)氧基]甲基苯甲酸的制備。部分A.2-[(9-芐基-4-氨基甲?；?1，2，3，4-四氫咔唑-6-基)氧基]甲基苯甲酸甲酯的制備。
用100mg氫化鈉(60％在礦物油中)把700mg的化合物(7)(R2(a)＝OH，R3＝H，R4＝苯基)(如在實施例2中那樣制備)在20ml四氫呋喃和70ml二甲基亞砜中的溶液處理10分鐘，然后用575mg的2-溴代甲基苯甲酸甲酯處理2.5小時。用水和乙酸乙酯稀釋溶液。用水洗滌有機相，用鹽水洗滌，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用二氯甲烷/0-2％甲醇的梯度洗脫，得到副標題化合物，840mg，90％，mp119-120℃/Et2O。對C29H28N2O4元素分析理論值C，74.34；H，6.02；N，5.98實測值C，74.22；H，6.03；N，5.70部分B.2-[(9-芐基-4-氨基甲酰基-1，2，3，4-四氫咔唑-6-基)氧基]甲基苯甲酸的制備。
將670mg部分A的化合物和5ml的2N氫氧化鈉在100ml乙醇和15ml四氫呋喃中的溶液攪拌16.5小時，用鹽酸酸化，用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用二氯甲烷/2-4％甲醇的梯度洗脫，得到標題化合物，230mg，34％，無定形固體。對C28H26N2O4·H2O元素分析理論值C，71.17；H，5.97；N，5.93實測值C，71.31；H，5.68；N，5.65實施例99-芐基-5，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-羧酸酰肼的制備。部分A.9-芐基-3，5-二甲氧基苯胺的制備。
將25g(0.163mol)的3，5-二甲氧基苯胺和18.3ml(0.18mol)的苯甲醛在300ml甲醇中的溶液于冰-水中冷卻并分批用10.3g(0.18mol)的氰基硼氫化鈉處理。攪拌溶液并冷卻3小時，用1-2g的硼氫化鈉處理30分鐘，用水稀釋并用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用己烷/15-70％乙醚梯度洗脫，得到為油的9-芐基-3，5-二甲氧基苯胺28.0g，71％。對C15H17NO2元素分析理論值C，74.05；H，7.04；N，5.76實測值C，74.30；H，7.12；N，5.70部分B.9-芐基-5，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-羧酸酰肼的制備。
將9.72g的部分A化合物和4.98g的2-乙氧甲酰-6-溴代環(huán)己酮(J.Sheehan和C.E.Mumaw，J.Am.Chem.Soc.，72，2127-2129，(1950).)在125ml苯中的溶液回流72小時，冷卻，過濾，真空蒸發(fā)。將殘余物(12g)和10g氯化鋅在250ml苯中回流6小時，冷卻，真空蒸發(fā)。用乙酸乙酯處理殘余物，用1N鹽酸洗滌，用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用甲苯/0-5％乙酸乙酯的梯度洗脫，得到化合物(5)(R2＝5-MeO，R3＝7-MeO，R4＝苯基)，1.88g，將其溶于含有10ml水合肼的100ml乙醇中并回流5天，冷卻，傾析溶液，用乙酸乙酯稀釋，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)，得到標題化合物，1.1g，60％，mp 189-190℃/CH2Cl2-EtOH。對C22H25N3O3元素分析理論值C，69.64；H，6.64；N，11.07實測值C，69.59；H，6.74；N，10.84實施例99-芐基-5，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺的制備。
將980mg實施例5的化合物、2g阮內(nèi)鎳催化劑、1-2ml水合肼和125ml乙醇的混合物回流1小時，傾析溶液，用乙酸乙酯稀釋，用水洗滌，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用二氯甲烷/1-3％甲醇的梯度洗脫，得到標題化合物，820mg，84％，mp 190-192℃/EtOH。對C22H24N2O3元素分析理論值C，72.51；H，6.64；N，7.69實測值C，71.88；H，6.89；N，7.81實施例10[9-芐基-4-氨基甲?；?7-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧代乙酸的制備。部分A.9-芐基-5-羥基-7-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺的制備。
將1.75g.(4.8mmol)實施例6的化合物在50ml二甲基甲酰胺中的溶液與硫代乙醇鈉(13.5mmol)在75ml二甲基甲酰胺中的溶液混合，然后在100℃下加熱21小時。冷卻混合物，用水稀釋，用鹽酸酸化并用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用二氯甲烷/0-4％甲醇的梯度洗脫，得到副標題產(chǎn)物，825mg.，50％，mp 225-7℃/乙醇。對C21H22N2O3元素分析理論值C，71.98；H，6.33；N，7.99實測值C，71.71；H，6.37；N，7.72部分B.[9-芐基-4-氨基甲?；?7-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧代乙酸乙酯的制備。
將700mg.(2.0mmol)的得自部分A的產(chǎn)物在70ml.二甲基甲酰胺和15ml.四氫呋喃中的溶液用100mg.氫化鈉(60％在礦物油中；2.5mmol)處理10分鐘，然后用0.3ml.(2.7mmol)的溴代乙酸乙酯處理3小時。用乙酸乙酯稀釋混合物，用水洗滌，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用二氯甲烷/1-2％甲醇的梯度洗脫，得到副標題產(chǎn)物，670mg.，77％，mp167-169℃/乙醚。對C25H28N2O5元素分析理論值C，68.79；H，6.47；N，6.42實測值C，69.57；H，6.39；N，5.77部分C.[9-芐基-4-氨基甲?；?7-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧代乙酸的制備。
將650mg.的得自部分B的產(chǎn)物在20ml.四氫呋喃和70ml.乙醇中的懸浮液用5ml.的2N氫氧化鈉處理并把生成的溶液攪拌15.5小時。用乙酸乙酯和水稀釋溶液并用鹽酸酸化。用鹽水洗滌有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空濃縮，過濾，得到標題產(chǎn)物，540mg.，87％，mp251-254℃。對C23H24N2O5元素分析理論值C，67.63；H，5.92；N，6.86實測值C，67.73；H，5.74；N，6.82實施例113-[(9-芐基-4-氨基甲?；?7-正辛基-1，2，3，4-四氫咔唑-6-基)氧基]丙基膦酸的制備。部分A.9-芐基-6-甲氧基-7-正辛基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-羧酸乙酯的制備。
將1.3g的9-芐基-4-甲氧基-5-正辛基苯胺(3)(通過實施例9，部分A的方法，使用正庚基三苯基膦鎓溴化物制備)、1.0g的2-乙氧甲酰-6-溴代環(huán)己酮、675mg的碳酸氫鈉和40ml二甲基甲酰胺的混合物攪拌5天，用乙酸乙酯稀釋，用水洗滌，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將在250ml苯中的殘余物和10g氯化鋅回流6小時，冷卻，用乙酸乙酯稀釋，用1N鹽酸洗滌，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用己烷/10-15％乙醚的梯度洗脫，得到化合物(5)(R2＝6-MeO，R3a＝7-正辛基，R4＝苯基)，930mg，將其溶于30ml苯中并在50℃下用15ml的0.67M甲基氯代氨化鋁處理16小時，冷卻，用冰和1N鹽酸分解并用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)，得到副標題化合物，795mg，91％，mp 131-133℃/Et2O。對C29H38N2O2元素分析理論值C，77.97；H，8.58；N，6.27實測值C，77.75；H，8.62；N，5.99部分B.9-芐基-6-羥基-7-正辛基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺的制備。
用在二氯甲烷中的10ml 1M三溴化硼把770mg部分A的化合物在75ml二氯甲烷中的溶液處理1.75小時，然后用冰和1N鹽酸分解。用鹽水洗滌有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用二氯甲烷/1-3％甲醇的梯度洗脫，得到副標題化合物，360mg，47％，mp 223-225℃。對C28H36N2O2元素分析理論值C，77.74；H，8.39；N，6.48實測值C，77.97；H，8.45；N，6.40部分C.3-[(9-芐基-4-氨基甲?；?7-正辛基-1，2，3，4-四氫咔唑-6-基)氧基]丙基膦酸的制備。
用40mg氫化鈉(60％在礦物油中)把360mg部分B的化合物在10ml四氫呋喃和70ml二甲基甲酰胺中的溶液處理15分鐘，然后用230mg的3-溴代丙基膦酸二甲酯處理4小時，用水稀釋并用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用二氯甲烷/1-5％甲醇的梯度洗脫，得到化合物(9)，(R2＝6-(MeO)2P＝O(CH2)3，R3＝7-正辛基，R4＝苯基)，290mg，將其溶于30ml二氯甲烷和1ml三甲基甲硅烷基溴化物中，攪拌20小時，真空蒸發(fā)，溶于30ml甲醇中，攪拌2.25小時，真空蒸發(fā)，自苯-甲醇-乙醚的混合物中結晶，得到標題化合物，185mg，67％，mp 160-162℃。對C31H43N2O5P·2H2O元素分析理論值C，63.03；H，8.02；N，4.74實測值C，63.18；H，7.53；N，4.93實施例124-[(9-芐基-4-氨基甲?；?7-乙基-1，2，3，4-四氫咔唑-6-基)氧基]丁酸的制備。部分A.9-芐基-6-甲氧基-7-乙基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-羧酸芐酯的制備。
將22g(0.13mol)的5-硝基水楊醛(salicaldehyde)、10ml(0.16mol)碘甲烷、28g(0.2mol)碳酸鉀、75ml二甲基亞砜和125ml的2-丁酮的懸浮液回流20小時，冷卻，用乙酸乙酯稀釋，用水洗滌，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用己烷/10-50％乙醚的梯度洗脫，得到(1)，(R2＝4-MeO，R3(a)＝3-CHO)，15g，67％。
將19.6g(0.055mol)的甲基三苯基膦鎓溴化物在300ml四氫呋喃中的懸浮液在-5℃下冷卻并用35ml正丁基鋰(1.6M在己烷中，0.055mol)緩慢處理。撤除冷卻浴并經(jīng)45分鐘使混合物溫熱至室溫。將9.1g(0.050mol)以上制備的醛的溶液緩慢加入到該黃色溶液中并攪拌2小時，用水稀釋并用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用己烷/15-50％乙醚的梯度洗脫，得到(1)(R2＝4-MeO，R3(a)＝3-CH2＝CH)，7.7g，86％。
在1大氣壓氫氣下，將在200ml乙醇中的產(chǎn)物和3g的10％ Pd/C攪拌6小時，過濾，真空蒸發(fā)，得到(2)，(R2＝4-MeO，R3(a)＝3-CH3CH2)。在0-5℃下，攪拌在150ml甲醇中的該粗品產(chǎn)物和5ml苯甲醛，同時分批加入2.5g的氰基硼氫化鈉。在該溫度下另外60分鐘后，用水稀釋混合物并用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用己烷/5-15％乙醚的梯度洗脫，得到9-芐基-4-甲氧基-5-乙基苯胺，6.0g，60％。
將3.3g的9-芐基-4-甲氧基-5-乙基苯胺、3.7g的2-乙氧甲酰-6-溴代環(huán)己酮、1.3g的碳酸氫鈉和100ml的二甲基甲酰胺的混合物攪拌5天，用乙酸乙酯稀釋，用水洗滌，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將在250ml苯中的殘余物和10g的氯化鋅回流1.75小時，冷卻，用乙酸乙酯稀釋，用1N鹽酸洗滌，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用己烷/10-20％乙醚的梯度洗脫，得到副標題化合物，2.6g，50％，mp 85-86/EtOH。對C25H29NO3元素分析理論值C，76.70；H，7.47；N，3.58實測值C，77.00；H，7.56；N，3.69部分B.9-芐基-6-甲氧基-7-乙基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺的制備。
在50℃下，將在75ml苯中的2.6g部分A的化合物和30ml的0.67M甲基氯代氨化鋁在苯/甲苯中的溶液加熱24小時，冷卻，用1N鹽酸分解并用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)，得到副標題化合物，2.2g，91％，mp 168-169℃/CH2Cl2-EtOH。對C23H26N2O2元素分析理論值C，76.21；H，7.23；N，7.73實測值C，76.55；H，7.74；N，6.84部分C.4-[(9-芐基-4-氨基甲?；?7-乙基-1，2，3，4-四氫咔唑-6-基)氧基]丁酸的制備。
將在150ml二氯甲烷中的2.1g部分B的化合物和15ml的1M三溴化硼在二氯甲烷中的溶液攪拌2小時，用冰和水分解并用鹽水洗滌有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)，得到化合物(7)(R2(a)＝6-HO，R3＝7-乙基，R4＝苯基)，1.6g，80％，mp 255℃分解/二氯甲烷-乙醇。用100mg氫化鈉(60％在礦物油中)把750mg物料在20ml四氫呋喃和70ml二甲基甲酰胺中的溶液處理10分鐘，然后用0.33ml的4-溴代丁酸乙酯處理4.5小時，用乙酸乙酯稀釋，用水洗滌，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用二氯甲烷/1-3％甲醇的梯度洗脫，得到化合物(9)(R2＝6-EtO2CCH2CH2CH2O，R3＝7-乙基)，625mg，64％，mp 134-136℃/二氯甲烷-乙醇，將其溶于含有3ml的2N氫氧化鈉的10ml四氫呋喃和40ml乙醇中并攪拌22小時。把溶液用鹽酸酸化并用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。得到標題化合物，410mg，73％，mp 208-210℃/CH2Cl2-EtOH。對C26H30N2O4·0.4H2O元素分析理論值C，64.05；H，7.15；N，5.54實測值C，71.76；H，6.90；N，6.56實施例133-[(9-芐基-4-氨基甲酰基-7-乙基-1，2，3，4-四氫咔唑-6-基)氧基]丙基膦酸的制備。部分A.3-[(9-芐基-4-氨基甲?；?7-乙基-1，2，3，4-四氫咔唑-6-基)氧基]丙基膦酸二甲酯的制備。
用100mg氫化鈉(60％在礦物油中)把750mg實施例8的化合物在20ml四氫呋喃和75ml二甲基甲酰胺中的溶液處理10分鐘，然后用510mg的3-溴代丙基膦酸二甲酯處理5.25小時，用乙酸乙酯稀釋，用水洗滌，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠層析，用二氯甲烷/1-5％甲醇的梯度洗脫，得到副標題化合物，655mg，61％，無定形固體。對C27H35N2O5P元素分析理論值C，64.12；H，7.15；N，5.54實測值C，64.27；H，7.00；N，5.92部分B.3-[(9-芐基-4-氨基甲?；?7-乙基-1，2，3，4-四氫咔唑-6-基)氧基]丙基膦酸的制備。
將部分A的化合物和1ml三甲基甲硅烷基溴化物在30ml二氯甲烷中的溶液攪拌18小時，真空蒸發(fā)，溶于25ml甲醇中，攪拌3.75小時，真空濃縮，得到標題化合物，475mg，80％，mp 235-238℃分解。對C25H31N2O5P元素分析理論值C，63.82；H，6.64；N，5.95實測值C，63.56；H，6.62；N，6.07本發(fā)明方法的實施本發(fā)明的實施包括開始給予易患膿毒癥或者需要它們的患者式I或II的sPLA2抑制劑化合物或它們的組合、或者式I或II的sPLA2抑制劑化合物和有效的治療藥物、化合物或治療方法的聯(lián)合療法，最大地增強活性成分的治療和/或預防能力。本發(fā)明基于這樣的發(fā)現(xiàn)，即當患者表現(xiàn)出異常高的sPLA2水平的24小時內(nèi)給藥時，所選擇的sPLA2抑制劑在預防和治療膿毒癥中更有效。特別優(yōu)選地是膿毒癥發(fā)作前或者第一次器官衰竭后24小時內(nèi)給藥并且此后繼續(xù)給藥約1-7天或者由主治醫(yī)師確定。更特別優(yōu)選地是在第一次器官衰竭后18小時內(nèi)或者觀察到sPLA2水平升高時，開始給予sPLA2抑制劑化合物、其外消旋物、藥學上可接受的鹽、溶劑合物、互變異構體或前體藥物衍生物。甚至更特別優(yōu)選地是在第一次器官衰竭后12小時內(nèi)或者觀察到sPLA2水平升高時，開始給予sPLA2抑制劑化合物、其外消旋物、藥學上可接受的鹽、溶劑合物、互變異構體或前體藥物衍生物。最特別優(yōu)選地是在第一次器官衰竭后6小時內(nèi)或者觀察到sPLA2水平升高時，開始給予sPLA2抑制劑化合物、其外消旋物、藥學上可接受的鹽、溶劑合物、互變異構體或前體藥物衍生物。
可采用包含式I或II的sPLA2抑制劑的外消旋物、其藥學上可接受的鹽、溶劑合物、互變異構體或前體藥物衍生物(優(yōu)選，在此認為優(yōu)選的sPLA2抑制劑)的藥用制劑、或者包含如在先前部分中講授的sPLA2抑制劑與其它的已批準的包括用于治療和/或預防膿毒癥的有效療法聯(lián)合的制劑來實施本發(fā)明的方法。用于本發(fā)明方法的聯(lián)合療法或輔助藥物的其它的有效藥物包括激活的蛋白C，優(yōu)選為重組人激活的蛋白C，和N-[鄰-(對-新戊酰氧基苯)磺酰氨基苯甲?；鵠甘氨酸，也稱作N-[2-[4-(2，2-二甲基丙酰氧基)苯基磺酰氨基苯甲?；鵠氨基乙酸。盡管認為本發(fā)明的方法不能預防膿毒癥的病因，但是當按照本發(fā)明的方法給藥時，通過給予足以預防膿毒癥的危害或者防止大量的患者死亡的sPLA2抑制劑(和它們的制劑)，將減少嚴重性或程度。
所給予的劑量將依已知的因素如具體藥物的藥代動力學、給藥模式和途徑依接受者的年齡、健康狀況和體重、癥狀的性質(zhì)和程度、現(xiàn)行治療的種類、治療次數(shù)和要求的作用而變化?；钚曰衔锏拿刻靹┝客ǔ＜s為每公斤體重0.1-500毫克。以分開的劑量，每天1-6次，或者以持續(xù)釋放的形式，一般每天每公斤體重給予0.5-50，優(yōu)選1-25毫克即可有效得到要求的結果。依患者的狀態(tài)而定，在膿毒癥或誘導膿毒癥的癥狀(即通過sPLA2水平的增加測定)發(fā)作前，可給予較低的劑量，而當需要強烈作用以對抗sPLA2水平升高時，可給予較高的劑量。
通常，應給予動物可接受的治療有效量的sPLA2抑制劑。通過對個體患者以增加的劑量給予活性化合物并觀察在患者身上的作用，例如，發(fā)熱減少，抑制sPLA2活性水平升高，或者減少膿毒癥的其它癥狀，可常規(guī)確定治療有效量。
通常，必須以動物體內(nèi)的sPLA2抑制劑的血液濃度達到10-5000納克/ml且優(yōu)選100-1000納克/ml濃度的方式和劑量給予化合物。
經(jīng)有經(jīng)驗的護理給予者(主治醫(yī)師)確定，治療方案可持續(xù)數(shù)天至數(shù)月乃至數(shù)年。由于口服給藥和/或靜脈灌注對患者便利和耐受性而是優(yōu)選的。至于口服給藥，每天1-4個口服劑量，每次約0.01-25mg/kg體重，優(yōu)選的劑量約為0.1mg/kg-約5mg/Kg體重。本發(fā)明方法中所用的活性化合物的百分比和重量以占制劑0.1-99.9重量百分比的量使用1H-吲哚-3-乙醛酰胺化合物。
藥用制劑優(yōu)選以單位劑型存在。該單位劑型本身可以是膠囊劑或片劑，或者是這些中任一種合適的成員?；钚曰衔镌诮M合物的單位劑型中的量可以按照所包括的具體治療方案而進行變化或者調(diào)整為約0.1-1000毫克或更高。
適于內(nèi)服給藥的組合物(劑型)每單位包含約1毫克-500毫克活性化合物。在這些藥用組合物中，活性化合物通常應以基于組合物的總重量約0.5-95％(重量)的量存在。
有用的藥用組合物及其成分的比例的實例闡明如下膠囊劑通過填充標準兩段硬明膠膠囊可制備膠囊劑，每膠囊含50mg的粉末狀活性化合物、175mg的乳糖、24mg的滑石粉和6mg的硬脂酸鎂。
軟明膠膠囊劑制備活性化合物在大豆油中的混合物并通過正性置換泵(positive displacement pump)注射到明膠中，形成含50mg的活性化合物的軟明膠膠囊。膠囊在石油醚中漂洗并干燥。
片劑通過常規(guī)方法可制備片劑以使每單位劑型中含50mg的活性化合物、6mg的硬脂酸鎂、70mg的微晶纖維素、11mg的玉米淀粉和225mg的乳糖。應用合適的包衣以增加可口性或延遲吸收。
混懸劑制備口服給藥的水混懸劑以使每5ml含25mg細分的活性化合物、200mg的羧甲基纖維素鈉、5mg的苯甲酸鈉、1.0g的山梨醇溶液(U.S.P)和0.025mg的香草醛。
注射劑通過在10％(體積)丙二醇和水中攪拌1.5％(重量)的活性化合物，制備適于注射給藥的非腸道組合物。通過常規(guī)使用的技術可將溶液滅菌。
鼻噴霧劑制備水溶液以使每1ml含10mg的活性化合物、1.8mg的對羥基苯甲酸甲酯、0.2mg的對羥基苯甲酸丙酯、10mg的甲基纖維素。將溶液分散到1ml小瓶中。
以占制劑0.01-99.9重量百分比的量使用活性化合物。
氣溶膠制劑可被分散為約0.5-約1.0微米的粒子大小且具有足夠的sPLA2抑制劑以使抑制劑在呼吸道表面的濃度達到每升約10-10至10-2摩爾。
當需要迅速減輕患者的痛苦時，例如當分析表明sPLA2水平增加或者第一次器官衰竭后最多可達24小時內(nèi)，非腸道給藥(具體地說，靜脈給藥)經(jīng)常是優(yōu)選的。至于非腸道給藥，可全天持續(xù)給藥或間歇給藥0.01-200mg/kg/天。非腸道給藥時，化合物可以以生理鹽水溶媒(例如0.9％正常鹽水、0.45％正常鹽水等)、右旋糖溶媒(例如5％右旋糖在水中)或鹽水和右旋糖溶媒的組合(0.9％正常鹽水在5％右旋糖中)給予。
通過使用用于本發(fā)明實施的化合物即式I化合物的冷凍干燥的凍干組合物，優(yōu)選非腸道給藥。用于本發(fā)明實施的凍干組合物中的成分的名稱和配比在一個實施方案中，本發(fā)明的實踐包括藥用組合物的用途，所述組合物包括sPLA2抑制劑即作為活性成分的式(Vb)化合物和有效量的作為螯合劑的增溶劑，例如優(yōu)選至少一種選自枸櫞酸、乙二胺四乙酸(例如EDTA二鈉)、多聚磷酸及其鹽的化合物，更優(yōu)選為枸櫞酸鈉。多聚磷酸及其鹽的實例為如在日本食品添加劑標準第6版中描述的多聚磷酸鉀和在日本食品添加劑標準第6版和日本化妝品成分標準第2版中描述的多聚磷酸鈉。枸櫞酸鈉作為無水枸櫞酸三鈉、枸櫞酸三鈉二水合物和枸櫞酸三鈉五水合物是可以得到的，但最便利和優(yōu)選以枸櫞酸三鈉二水合物的形式使用(分子量294.10)。
增溶劑的量隨增溶劑的種類和化合物(Vb)的濃度而變化，例如，可以為約1％-約400％(w/w)，優(yōu)選為1-200％(w/w)，最優(yōu)選為1-100％(w/w)量的化合物(Vb)的等價酸。對于采用枸櫞酸鈉的藥用組合物，增溶劑的重量為10％-60％(w/w)且最優(yōu)選為25％-50％(w/w)量的如化合物(Vb)的等價酸。
在先前段落中描述的藥用組合物優(yōu)選也具有有效量的穩(wěn)定劑。穩(wěn)定劑為至少一種選自固體糖和糖-醇的藥學上可接受的化合物，更優(yōu)選為至少一種選自以下的化合物，包括甘露糖醇、木糖醇、山梨醇、葡萄糖、果糖、乳糖和麥芽糖。甘露糖醇為最優(yōu)選的穩(wěn)定劑成分。
穩(wěn)定劑的量隨穩(wěn)定劑的種類和sPLA2抑制劑即化合物(Vb)的濃度而變化，并且可以為40％-500％(w/w)，優(yōu)選為50％-300％(w/w)，更優(yōu)選為50％-200％(w/w)，最優(yōu)選為1 00％-200％(w/w)量的如化合物(Vb)的等價酸。
可將其它的藥學上可接受的添加劑任選加入到用于本發(fā)明實施的制劑中，這并不背離本發(fā)明的目的和范圍。根據(jù)本發(fā)明，當制備注射用溶液時，可向其中加入等滲劑、安慰劑或其它的添加劑。
以上描述的藥用組合物除活性成分、增溶劑和穩(wěn)定劑以外優(yōu)選不含有鹽。用于本發(fā)明實施的凍干組合物優(yōu)選地，將先前部分中描述的藥用組合物冷凍干燥。最優(yōu)選通過采用用于實施本發(fā)明的化合物即式(Vb)化合物的坍縮溫度特性，用退火步驟可制備凍干組合物。
例如，凍干組合物含化合物(Vb)的等價酸約1-200％(w/w)量的增溶劑。增溶劑的比率與藥用組合物先前部分中給出的相同。當增溶劑為EDTA(或者它的酸或其它的鹽)時，優(yōu)選采用約1％-約15％(w/w)量的如化合物(Vb)的等價酸。
增溶劑的名稱和配比與藥用組合物先前部分中給出的相同。甘露糖醇作為本發(fā)明的凍干組合物的穩(wěn)定劑成分是最優(yōu)選的。
表1列出本發(fā)明具體優(yōu)選的凍干組合物的組分(所有的量以毫克表示)
A.I.＝活性成分，Na Citrate＝枸櫞酸三鈉二水合物EDTA＝乙二胺四乙酸二鈉鹽優(yōu)選地，本發(fā)明的固體凍干組合物除其中包含的化合物(Vb)、增溶劑和穩(wěn)定劑以外基本上不含有鹽。
可將凍干藥用制劑溶于藥學上可接受的載體如滅菌水中，滅菌水任選包含鹽水和/或含糖的滅菌水。例如，對靜脈注射，本發(fā)明的組合物可以2mg/ml的濃度溶于4％右旋糖/0.5％枸櫞酸Na水溶液。制備用于本發(fā)明實施的凍干組合物的方法用于本發(fā)明實施的凍干組合物指通過使含sPLA2抑制劑化合物即化合物(Vb)的溶液冷凍干燥，任選經(jīng)歷加熱處理且在高真空下干燥使水升華制備的制劑。這樣的凍干制劑包括以上提及的注射用凍干制劑。通過常規(guī)方法，包括塔板冷凍干燥、噴霧冷凍干燥和小瓶冷凍干燥方法，可以生產(chǎn)凍干制劑。小瓶冷凍干燥對制備如以上描述的本發(fā)明的多-劑量單位是有利的。
為通過本發(fā)明的方法得到化合物(Vb)的溶液，將化合物(Vb)、增溶劑和溶劑混合并攪拌直到混合物變得透明。溶劑優(yōu)選為含水溶劑，例如在日本藥典中描述的水、純凈水、注射用水、等滲氯化鈉溶液或葡萄糖注射液，更優(yōu)選為無鹽含水溶劑，例如水、純凈水、注射用水或葡萄糖注射液。
或者，形成本發(fā)明組合物的溶液形式的合適的溶劑還可以為在美國藥典(1995，ISBN 0195-7996)中描述的那些，例如，“注射用滅菌水”、“右旋糖和氯化鈉注射液”、“右旋糖注射液”、“甘露糖醇注射液”或“甘露糖醇在氯化鈉中的注射液”。
例如為通過本發(fā)明的方法得到化合物(Vb)的凍干制劑，首先，冷凍干燥前制備加工溶液(processing solution)。冷凍干燥前的加工溶液為通過使化合物(Vb)、增溶劑和溶劑，優(yōu)選化合物(Vb)、增溶劑、穩(wěn)定劑和溶劑混合且攪拌直到混合物變得透明制備的溶液。對于將成分加入到溶劑中的順序，高度優(yōu)選地是首先溶解增溶劑和穩(wěn)定劑，然后溶解化合物(Vb)。溶劑優(yōu)選為例如以上先前給出的且在日本藥典中描述的含水溶劑，更優(yōu)選為無鹽含水溶劑，例如水、純凈水、注射用水或葡萄糖注射液?；衔?Vb)冷凍干燥前的加工溶液，例如，可包含約0.5％-2％(w/w)的化合物(Vb)。如果需要，冷凍干燥前的加工溶液可經(jīng)過濾。
過濾過程包括，例如在為注射制劑的情況下，在冷凍干燥前進行加工溶液的除菌過濾和/或超濾，以去除冷凍干燥前的加工溶液中的微生物或其它的污染物質(zhì)。
如果需要，對冷凍干燥前的加工溶液進行分配。分配過程包括，例如在小瓶冷凍干燥的情況下，為使小瓶中的產(chǎn)物含有所需量的sPLA2抑制劑化合物，將合適體積的含有一定濃度的sPLA2抑制劑化合物即化合物(Vb)的冷凍干燥前的加工溶液分配到小瓶中的過程。
如下進行冷凍干燥過程優(yōu)選通過順序加熱和冷卻的過程制備凍干組合物。在低于大氣壓下，在足以從含水溶劑中除去水的時間內(nèi)，順序進行以下步驟，得到固體凍干產(chǎn)物(a)使含有sPLA2抑制劑如[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉(化合物(Vb))、增溶劑和穩(wěn)定劑的各凍干組合物組分溶于含水溶劑中；(b)使步驟(a)的加工溶液冷卻至-33℃以下；(c)使步驟(b)的產(chǎn)物加熱至-33℃以上；(d)使步驟(c)的產(chǎn)物冷卻至-33℃以下；(e)使步驟(d)的產(chǎn)物加熱至-13℃以上。
優(yōu)選地，通過將以下物質(zhì)溶于含水溶劑中進行步驟(a)sPLA2抑制劑即[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉；選自枸櫞酸、乙二胺四乙酸、多聚磷酸及其鹽的增溶劑，它們的量為化合物(Vb)的等價酸的1-100％(w/w)；及選自甘露糖醇、木糖醇、山梨醇、葡萄糖、果糖、乳糖和麥芽糖的穩(wěn)定劑，它們的量為化合物(Vb)的等價酸的50-200％(w/w)；此外，步驟(a)、(b)、(c)、(d)和(e)中的每一步優(yōu)選進行至少1個半小時，且步驟(e)在小于133Pa(1000毫托)的低于大氣壓下進行。
冷凍干燥過程中優(yōu)選的參數(shù)為那些其中例如通過冷卻至-35℃至-45℃化合物(Vb)可以冷凍的參數(shù)。這個冷卻步驟優(yōu)選進行2-4小時。在下文中這個過程稱作“初級冷凍過程”。如果需要，則將在初級冷凍過程中得到的冷凍溶液溫熱至-5℃至-25℃，優(yōu)選-10℃至-20℃。這個溫熱步驟進行3小時，優(yōu)選5-10小時。在下文中這個過程稱作“加熱處理過程”。
將加熱處理過程中得到的組合物再冷凍，優(yōu)選為-35℃至-45℃。這個冷卻步驟優(yōu)選進行2-4小時。在下文中這個過程稱作“再冷凍過程”。
按照本領域技術人員已知的方法，通過使水升華，高真空下將經(jīng)初級冷凍過程、加熱處理過程和再冷凍過程得到的組合物干燥。由此，可得到本發(fā)明的凍干制劑。如果需要，為完全除去水，可以進行其中溫度和真空度不同的兩步干燥。在下文中這個過程稱作“干燥過程”。如果進行兩步干燥，這些過程分別稱作“初級干燥”過程和“次級干燥”過程。
冷凍干燥過程除去大部分原來存在的水，但終產(chǎn)物凍干組合物可包含一些游離水。通常，水分含量可介于0.5％-5.0％(重量百分比)之間。更通常地，水分含量介于0.8％-2.0％的范圍內(nèi)。
吸入療法也可以單獨或者作為其它給藥途徑的補充來使用。采用吸入療法時，使膿毒癥的臨床癥狀減輕所必需的劑量易于測定和使用。膿毒癥的測試方法膿毒癥的診斷學經(jīng)常是推理性或者提示性的。例如患者具有膿毒癥的癥狀如心動過緩、心動過速、變化的精神狀態(tài)、白細胞增多或白細胞減少和血小板減少(如上Harrison’s Principles of InternalMedicine)。由于確信膿毒癥引發(fā)分泌性磷酸二酯酶A2的釋放，所以檢測血漿或體液中增加的或正在增加的sPLA2水平是膿毒癥發(fā)作或者潛在性導致膿毒癥的不適狀況的有用的指標。因此，另一個有用的診斷方法可以是長期分析經(jīng)確定易受膿毒癥影響的患者的sPLA2水平。
IL-6水平有時也用于單獨或者與其它方法結合作為膿毒癥發(fā)作或膿毒癥敏感性的指標。
用于膿毒癥的其它的診斷標準為在標準醫(yī)學參考文獻(例如Harrison’s Principles of Internal Medicine，第13版，1994，第511-515頁，McGraw-Hill，Inc.，ISBN 0-07-032370-4)和在Sorensen等，PlateletActivating Factor and Phospholipase A2in Patients with septic Shock andTrauma，Intensive Care Medicine(1994)20，555-561中發(fā)現(xiàn)的那些標準。當開始采用本發(fā)明的方法時，這些標準，或經(jīng)權威醫(yī)學意見指定的標準可被用來確定治療的頻率和程度及停止治療的時間。臨床試驗方案和結果研究者該多中心研究包括72名高級研究者。研究中心 具有72個研究中心。研究日期 1998年9月至1999年8月臨床階段 2期目的 本研究的主要目的如下基于已證實患有嚴重膿毒癥的患者的28-天所有原因的死亡率減少確定3期治療的最佳劑量并且證實LY315920具有可接受的安全性。方法學平行設計的多中心、雙盲、安慰劑對照試驗受試者數(shù)LY315920男性212，女性178，總數(shù)390；目安慰劑男性116，女性80，總數(shù)196。診斷和納入 在納入研究前36-小時內(nèi)，經(jīng)全身炎性反應綜合征(SIRS)標準 的測定，4項指標中滿足3項或3項以上的男性和女性嚴重膿毒癥患者；懷疑或者證明存在感染；在納入研究前24小時內(nèi)存在至少一種膿毒癥誘導的器官衰竭。劑量和給受試物-LY315920鈉，作為凍干粉末提供。每瓶含有100藥mg的LY315920。復制后，所有劑量的LY315920在注射用5％右旋糖中稀釋到0.2mg/mL或0.8mg/mL的最終濃度用于靜脈給藥，以提供約200和800ng/mL血漿濃度的LY315920。任何24-小時期間內(nèi)所給予的最大體積的5％右旋糖不超過600mL。通過灌注泵靜脈給予研究藥物且給藥前不與任何其它的靜脈藥物混合。
安慰劑-A市場上可得到的注射復合維生素(Cernevit，Baxter HealthCare Corporation)。當與5％右旋糖混合時，安慰劑溶液似乎幾乎與LY315920的溶液相同。所給予的復合維生素的量≤復合維生素制劑的每天推薦劑量。
CT11923LY315920；CT14552LY315920；CT14708LY315920；CT9701149安慰劑；CT9701150安慰劑；CT9800291安慰劑。治療持續(xù)的 LY315920鈉7天(168小時)時間評價標準 效力-主要效力終點為28-天所有原因?qū)е碌乃劳雎省⒒颊叻诸悶椤霸诘?8天生存”或“在第28天死亡”，而不考慮死亡原因。28-天時間點恰好發(fā)生在研究藥物給藥開始后672小時。
藥物代謝動力學-主要的藥物代謝動力學和藥效學測定指標為血漿LY315920濃度，血清IL-6濃度、血清sPLA2酶促活性和血清sPLA2酶濃度。隨168小時灌注進行，測定每一目標血漿濃度。
安全性-在這個研究中評價以下安全參數(shù)副作用(嚴重的和治療中發(fā)生的)；生命體征；中心實驗室測試；局部實驗室測試；及與膿毒癥有關的器官功能障礙的發(fā)生率和嚴重性(SOFA評分)。統(tǒng)計方法 性能變化參數(shù)以發(fā)生率表示(數(shù)目[N]和百分率)。對性能變化，采用x2檢驗和Cochran-Mantel-Haenszel檢驗，比較治療組性能變化參數(shù)。采用對數(shù)值調(diào)整的相對風險率方法計算相對風險率和可信度區(qū)間(SAS Institute Inc.
1989)。所有28-天死亡率分析均基于x2檢驗和Cochran-Mantel-Haenszel檢驗。
測定中心值和方差表示連續(xù)變化參數(shù)?；诜旨壍暮臀捶旨壍臄?shù)據(jù)(Snedecor和Cochran，1989)，采用方差分析(ANOVA)進行連續(xù)變量的統(tǒng)計學檢驗的。除主要效能分析以外，所有其他效能分析和安全性分析均采用雙側5％顯著性水平和95％可信度區(qū)間。主要效能分析采用0.025的雙側臨界α水平，用于解釋與安慰劑比較的兩個LY315920給藥方案納入標準如果他們滿足以下列出的所有標準，那么則將研究參與者納入該研究中。預測幾乎所有滿足這些標準的患者處于醫(yī)院的緊急護理區(qū)域，例如特級護理單位、step-down unit、急診部或恢復室。滿足這些納入標準的事件必須可歸結于膿毒癥的發(fā)作并且不歸結于進行中的疾病過程或者歸因于伴行療法的作用。在納入研究前36小時，滿足以下SIRS的4項標準中的3項或者更多項。這些標準不需要同時存在。
A)≥38℃(100.4°F)或≤36℃(96.8°F)的體內(nèi)溫度(coretemperature)；體內(nèi)溫度定義為直腸、中心插管溫度或鼓膜溫度。如果采用口內(nèi)或腋下溫度作為輔助溫度，則在實際讀數(shù)基礎上加0.5℃(1°F)。
B)在無已知的醫(yī)學癥狀或預防心動過速的治療(例如，使用β腎上腺素能阻滯劑或心臟阻斷劑)的情況下，心率每分鐘≥90次。如果患者具有已知的醫(yī)學癥狀或者接受預防心動過速的治療，則他們必須滿足全身炎癥的其余三個標準中的兩個標準。
C)呼吸率每分鐘≥20次或PaCO2≤32mmHg或者急性過程的機械換氣(與神經(jīng)肌肉疾病或者全身麻醉的需要無關)。
D)白細胞數(shù)目≥12,000或≤4000細胞/mm3(不是由于抗腫瘤藥的作用)或者＞10％未成熟的嗜中性白細胞(帶)。懷疑或證實感染的存在。
疑患有感染的患者必須具有急性感染的證據(jù)存在，如正常無菌體液中的白細胞、穿孔的內(nèi)臟、與肺炎相符的和與化膿性痰產(chǎn)生有關的肺X-射線、或者與高可能性的感染有關的臨床癥狀(例如，上行膽管炎)。納入研究前24小時內(nèi)具有至少一種下列器官被膿毒癥誘導衰竭A)心血管a)盡管補充足夠的液體或者靜脈大劑量給予液體(≥500mL的正常鹽水或等價物1小時)，但是動脈收縮血壓仍然＜90mmHg至少1小時；或者b)需要給予血管升壓素至少1小時以維持收縮血壓≥90mmHg。血管升壓素包括任何劑量的多巴胺(≥5μg/kg/min)和去氧腎上腺素、腎上腺素或去甲腎上腺素。多巴酚丁胺不被考慮為血管升壓素。
和/或B)呼吸系統(tǒng)a)急性肺功能障礙定義為PaO2/FiO2比率≤300和(如果可測量)肺毛細血管楔壓不暗示中心體積(central volume)過載的證據(jù)?；蛘遙)在肺炎的處置中，患者必須具有PaO2/FiO2比率≤200和(如果可測量)肺毛細血管楔壓不暗示中心體積過載。
和/或C)血液學血小板計數(shù)＜100000/mm3；或者b)篩選前3天內(nèi)記錄的血小板計數(shù)由最高值減少50％。
和/或D)腎a)盡管補充足夠的液體，但是尿排出量仍然＜0.5mL/Kg/hr連續(xù)2小時；或者b)血清肌酸濃度＞3.0mg/dL(在膿毒癥發(fā)作前，在預先存在腎損傷(定義為血清肌酸濃度＞3.0mg/dL的情況下)，該患者必須滿足其它的四種器官衰竭指標之一)。
和/或E)乳酸中毒，其特征在于動脈血漿乳酸濃度的升高＞正常的上限1.5倍且動脈pH≤7.3或缺堿≥5.0mEq/L。藥物濃度測量主要的藥物代謝動力學和藥效學測量指標1)血漿LY315920濃度；2)血清IL-6濃度；3)血清sPLA2酶促活性；和4)血清sPLA2酶濃度。于指定的時間間隔，自每位患者收集一份血漿樣品(LY315920)和一份血清樣品(測定sPLA2活性、sPLA2濃度、IL-6濃度)。在獲得藥物代謝動力學和藥效學樣品同時獲得一份血漿樣品(枸櫞酸鹽抗凝劑)。藥物代謝動力學和藥效學樣品冷凍儲存待用。應在同一時間內(nèi)收集所有的樣品。記錄收集樣品的準確時間。應注意用于測定LY315920濃度的血漿樣品中不含有來自灌注溶液的污染物。結果在第一次器官衰竭后24小時內(nèi)、優(yōu)選在第一次器官衰竭后18小時內(nèi)、最優(yōu)選在第一次器官衰竭后12小時內(nèi)，用式I的sPLA2化合物，即式(Vb)化合物(LY315920)治療膿毒癥患者，所述結果表明死亡率減少具有顯著的統(tǒng)計學意義。通過推斷，結果表明開始給予易受膿毒癥影響的患者sPLA2抑制劑化合物為最優(yōu)選。在表1-3中示出IL-6水平和sPLA2活性水平的基線分析結果。在圖1-3中示出死亡率數(shù)據(jù)。表1基線IL-6濃度、第一次器官衰竭與第一次給予研究藥物之間的間隔時間和性別
表2基線IL-6濃度、基線下器官衰竭數(shù)目和性別
表3sPLA2活性和第一次膿毒癥誘導的器官衰竭持續(xù)時間
盡管已通過某些具體的實施方案對本發(fā)明進行了闡述，但是這些具體的實施例不應限制所附的權利要求描述的本發(fā)明的范圍。
權利要求
1.一種預防包括人在內(nèi)的哺乳動物膿毒癥的方法，所述方法，包括在損傷引起的癥狀發(fā)作前開始給予易受膿毒癥影響的患者藥用有效量的sPLA2抑制劑化合物。
2.一種治療膿毒癥的方法，其中自第一次器官衰竭一定時間間隔內(nèi)或者sPLA2活性水平升高時，開始用藥用有效量的式I或II的sPLA2抑制劑化合物治療患者。
3.一種治療膿毒癥的方法，其中自第一次器官衰竭一定時間間隔內(nèi)或者sPLA2活性水平升高時，開始用藥用有效量的式I或II的sPLA2抑制劑化合物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物衍生物治療患者。
4.一種權利要求2的方法，其中所述時間間隔為第一次器官衰竭后0-24小時。
5.一種權利要求2的方法，其中所述時間間隔為第一次器官衰竭后0-24小時或者sPLA2水平升高時。
6.一種權利要求2的方法，其中所述時間間隔為第一次器官衰竭后0-18小時或者sPLA2水平升高時。
7.一種權利要求2的方法，其中所述時間間隔為第一次器官衰竭后0-12小時或者sPLA2水平升高時。
8.一種權利要求2的方法，其中所述時間間隔為第一次器官衰竭后0-8小時或者sPLA2水平升高時。
9.一種權利要求2的方法，其中所述時間間隔為第一次器官衰竭后0-6小時或者sPLA2水平升高時。
10.一種權利要求1、2、3、4、5、6或7的方法，其中式I的sPLA2抑制劑化合物為； 其中；X為氧，R1選自-C7-C20烷基， 和 其中R10選自鹵代、C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、-S-(C1-C10烷基)和鹵代(C1-C10)烷基，且t為0-5的整數(shù)，0和5均包括在內(nèi)；R2選自氫、鹵代、環(huán)丙基、甲基、乙基和丙基；R4和R5獨立選自氫、不互相干擾的取代基和基團-(La)-(酸性基團)；其中，R4和R5中至少一個為基團-(La)-(酸性基團)，該(酸性基團)選自-CO2H、-SO3H或-P(O)(OH)2；其中，-(La)-為酸連接體，前提是；R4的酸連接體-(La)-選自 ，和 其中R103為不互相干擾的取代基，并且其中，R5的酸連接體-(La)-選自 和 其中R84和R85分別獨立選自氫、C1-C10烷基、芳基、C1-C10烷芳基、C1-C10芳烷基、羧基、烷氧羰基和鹵代，和R6和R7分別獨立選自氫和不互相干擾的取代基，其中不互相干擾的取代基選自C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C7-C12亞芳基烷基、C7-C12烷芳基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、苯基、甲苯基、二甲苯基、聯(lián)苯基、C1-C6烷氧基、C2-C6鏈烯氧基、C2-C6炔氧基、C2-C12烷氧基烷基、C2-C12烷氧基烷氧基、C2-C12烷基羰基、C2-C12烷基羰基氨基、C2-C12烷氧基氨基、C2-C12烷氧基氨基羰基、C2-C12烷基氨基、C1-C6烷硫基、C2-C12烷硫基羰基、C1-C6烷基亞硫?；?、C1-C6烷基磺?；?、C2-C6鹵代烷氧基、C1-C6鹵代烷基磺?；2-C6鹵代烷基、C1-C6羥基烷基、-C(O)O(C1-C6烷基)、-(CH2)n-O-(C1-C6烷基)、芐氧基、苯氧基、苯硫基、-(CONHSO2R)、-CHO、氨基、脒基、溴代、氨基甲?；?、羧基、烷氧羰基、-(CH2)n-CO2H、氯代、氰基、氰基胍基、氟代、胍基、酰肼、肼基、酰肼基、羥基、羥基氨基、碘代、硝基、膦酰基、-SO3H、硫縮醛、硫代羰基和C1-C6羰基，其中n為1-8。
11.一種權利要求1、2、3、4、5、6或7的方法，其中所述sPLA2抑制劑化合物為式I化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物衍生物 其中；X為氧，R1選自-C7-C20烷基， 和其中R10選自鹵代、C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、-S-(C1-C10烷基)和鹵代(C1-C10)烷基，且t為0-5的整數(shù)，0和5均包括在內(nèi)；R2選自氫、鹵代、環(huán)丙基、甲基、乙基和丙基；R4和R5獨立選自氫、不互相干擾的取代基和基團-(La)-(酸性基團)；其中，R4和R5中至少一個為基團-(La)-(酸性基團)，該(酸性基團)選自-CO2H、-SO3H或-P(O)(OH)2；其中，-(La)-為酸連接體，前提是；R4的酸連接體-(La)-選自 和 其中R103為不互相干擾的取代基，并且其中，R5的酸連接體-(La)-選自 和 其中R84和R85分別獨立選自氫、C1-C10烷基、芳基、C1-C10烷芳基、C1-C10芳烷基、羧基、烷氧羰基和鹵代，和R6和R7分別獨立選自氫和不互相干擾的取代基，其中不互相干擾的取代基選自C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C7-C12亞芳基烷基、C7-C12烷芳基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、苯基、甲苯基、二甲苯基、聯(lián)苯基、C1-C6烷氧基、C2-C6鏈烯氧基、C2-C6炔氧基、C2-C12烷氧基烷基、C2-C12烷氧基烷氧基、C2-C12烷基羰基、C2-C12烷基羰基氨基、C2-C12烷氧基氨基、C2-C12烷氧基氨基羰基、C2-C12烷基氨基、C1-C6烷硫基、C2-C12烷硫基羰基、C1-C6烷基亞硫酰基、C1-C6烷基磺酰基、C2-C6鹵代烷氧基、C1-C6鹵代烷基磺酰基、C2-C6鹵代烷基、C1-C6羥基烷基、-C(O)O(C1-C6烷基)、-(CH2)n-O-(C1-C6烷基)、芐氧基、苯氧基、苯硫基、-(CONHSO2R)、-CHO、氨基、脒基、溴代、氨基甲?；Ⅳ然?、烷氧羰基、-(CH2)n-CO2H、氯代、氰基、氰基胍基、氟代、胍基、酰肼、肼基、酰肼基、羥基、羥基氨基、碘代、硝基、膦?；?、-SO3H、硫縮醛、硫代羰基和C1-C6羰基，其中n為1-8，且R為氫、C1-C6烷基。
12.一種權利要求1、2、3、4、5、6或7的方法，其中式II的sPLA2抑制劑化合物為 其中Y1選自O、NH、NR1和S；R1選自-C7-C20烷基， 和其中R10選自鹵代、C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、-S-(C1-C10烷基)和鹵代(C1-C10)烷基，且t為0-5的整數(shù)，0和5均包括在內(nèi)；其中R31、R32、R33、R31’、R32’、R33’、R34和R34’獨立選自氫、CONR101R102、烷基、烷基芳基、芳基、烷基雜芳基、鹵代烷基、烷基CONR101R102、不互相干擾的取代基和基團-(La)-(酸性基團)；其中-(La)-為選自以下的酸連接體， 和 和 其中R84和R85分別獨立選自氫、C1-C10烷基、芳基、C1-C10烷芳基、C1-C10芳烷基、羧基、烷氧羰基和鹵代，和n為1或2，和，其中所述(酸性基團)選自-CO2H、-SO3H和-P(O)(OH)2，和，其中R101和R102獨立選自氫、烷基、芳基、雜芳基和鹵代烷基，和其中不互相干擾的取代基選自C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C7-C12芳基烷基、C7-C12烷芳基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烷基、苯基、甲苯基、二甲苯基、聯(lián)苯基、C1-C6烷氧基、C2-C6烷基氧基、C2-C6炔氧基、C2-C12烷氧基烷基、C2-C12烷氧基烷基氧基、C2-C12烷基羰基、C2-C12烷基羰基氨基、C2-C12烷氧基氨基、C2-C12烷氧基氨基羰基、C2-C12烷基氨基、C1-C6烷硫基、C2-C12烷硫基羰基、C1-C6烷基亞硫?；1-C6烷基磺?；?、C2-C6鹵代烷氧基、C1-C6鹵代烷基磺?；?、C2-C6鹵代烷基、C1-C6羥基烷基、-C(O)O(C1-C6烷基)、-(CH2)n-O-(C1-C6烷基)、芐氧基、苯氧基、苯硫基、-(CONHSO2(R)、-CHO、氨基、脒基、溴代、氨基甲?；Ⅳ然?、烷氧羰基、-(CH2)n-CO2H、氯代、氰基、氰基胍基、氟代、胍基、酰肼、肼基、酰肼基、羥基、羥基氨基、碘代、硝基、膦酰基、-SO3H、硫縮醛、硫代羰基和C1-C6羰基，其中n為1-8，和R選自氫和烷基，其中R31、R32、R33或R34中至少一個為基團-(La)-(酸性基團)。
13.權利要求1、2、3、4、5、6或7的方法，其中式I或II化合物存在于包含式I或II化合物和載體或稀釋劑的藥用制劑中。
14.權利要求1、2、3、4、5、6、7、8或9的方法，其中式I或II化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物衍生物存在于包含式I或II化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物衍生物和載體或稀釋劑的藥用制劑中。
15.權利要求11的方法，其中所述藥用制劑包括式I或II化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物衍生物的冷凍干燥的凍干制劑。
16.權利要求11的方法，其中所述藥用制劑包括如下所示的式(Vb)化合物的冷凍干燥的凍干制劑
17.權利要求1、2、3、4、5、6或7的方法，其中所述式I或II化合物存在于包含式I或II化合物、用于治療膿毒癥的其它的有效藥物、載體和/或稀釋劑的藥用制劑中。
18.權利要求1、2、3、4、5、6或7的方法，其中所述式I或II化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物存在于包含式I或II化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物、用于治療膿毒癥的其它的有效藥物、載體或稀釋劑的藥用制劑中。
19.一種權利要求1、2、3、4、5、6或7的方法，其中所述式I化合物選自(A)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(B)dl-2-[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]丙酸，(C)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(D)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-3-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(E)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-4-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(F)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-[(2，6-二氯苯基)甲基]-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(G)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-[4(-氟代苯基)甲基]-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(H)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-[(1-萘基)甲基]-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(I)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(J)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-[(3-氯代苯基)甲基]-2-乙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(K)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-乙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(L)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-丙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(M)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-環(huán)丙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(N)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-環(huán)丙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(O)4-[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-5-基]氧基]丁酸，(A)-(P)的任何組合的混合物或它們的藥學上可接受的外消旋物、溶劑合物、互變異構體、旋光異構體、前體藥物衍生物或鹽。
20.一種權利要求1、2、3、4、5、6或7的方法，其中所述式II化合物選自9-芐基-5，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-羧酸酰肼；9-芐基-5，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；[9-芐基-4-氨基甲?；?7-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸鈉鹽；[9-芐基-4-氨基甲?；?7-甲氧基咔唑-5-基]氧基乙酸；[9-芐基-4-氨基甲酰基-7-甲氧基咔唑-5-基]氧基乙酸甲酯；9-芐基-7-甲氧基-5-氰基甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；9-芐基-7-甲氧基-5-(1H-四唑-5-基-甲基)氧基)-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；{9-[(苯基)甲基]-5-氨基甲?；?2-甲基-咔唑-4-基}氧基乙酸；{9-[(3-氟苯基)甲基]-5-氨基甲酰基-2-甲基-咔唑-4-基}氧基乙酸；{9-[(3-甲基苯基)甲基]-5-氨基甲?；?2-甲基-咔唑-4-基)氧基乙酸；{9-[(苯基)甲基]-5-氨基甲?；?2-(4-三氟甲基苯基)-咔唑-4-基}氧基乙酸；9-芐基-5-(2-甲亞磺酰氨基)乙氧基-7-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；9-芐基-4-(2-甲亞磺酰氨基)乙氧基-2-甲氧基咔唑-5-甲酰胺；9-芐基-4-(2-三氟甲亞磺酰氨基)乙氧基-2-甲氧基咔唑-5-甲酰胺；9-芐基-5-甲亞磺酰氨基甲氧基-7-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；9-芐基-4-甲亞磺酰氨基甲氧基-咔唑-5-甲酰胺；[5-氨基甲酰基-2-戊基-9-(苯基甲基)咔唑-4-基]氧基乙酸；[5-氨基甲酰基-2-(1-甲基乙基)-9-(苯基甲基)咔唑-4-基]氧基乙酸；[5-氨基甲?；?9-(苯基甲基)-2-[(三(-1-甲基乙基)甲硅烷基)氧基甲基]咔唑-4-基]氧基乙酸；[5-氨基甲?；?2-苯基-9-(苯基甲基)咔唑-4-基]氧基乙酸[5-氨基甲酰基-2-(4-氯苯基)-9-(苯基甲基)咔唑-4-基]氧基乙酸；[5-氨基甲酰基-2-(2-呋喃基)-9-(苯基甲基)咔唑-4-基]氧基乙酸；[5-氨基甲?；?9-(苯基甲基)-2-[(三(-1-甲基乙基)甲硅烷基)氧基甲基]咔唑-4-基]氧基乙酸，鋰鹽；{9-[(苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3-氟苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3-苯氧基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-氟苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-三氟甲基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-芐基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3-三氟甲基苯基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基}氧基乙酸；{9-[(1-萘基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-氰基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3-氰基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-甲基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3-甲基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3，5-二甲基苯基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基}氧基乙酸；{9-[(3-碘苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-氯苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2，3-二氟苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2，6-二氟苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2，6-二氯苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3-三氟甲氧基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-聯(lián)苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-聯(lián)苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-聯(lián)苯基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基}氧基乙酸；[9-芐基-4-氨基甲?；?1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸；{9-[(2-吡啶基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基}氧基乙酸；{9-[(3-吡啶基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基}氧基乙酸；[9-芐基-4-氨基甲?；?8-甲基-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸；[9-芐基-5-氨基甲?；?1-甲基咔唑-4-基]氧基乙酸；[9-芐基-4-氨基甲?；?8-氟-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸；[9-芐基-5-氨基甲酰基-1-氟咔唑-4-基]氧基乙酸；[9-芐基-4-氨基甲酰基-8-氯-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸；[9-芐基-5-氨基甲酰基-1-氯咔唑-4-基]氧基乙酸；[9-[(環(huán)己基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基]氧基乙酸；[9-[(環(huán)戊基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基]氧基乙酸；5-氨基甲?；?9-(苯基甲基)-2-[[(丙烯-3-基)氧基]甲基]咔唑-4-基]氧基乙酸；[5-氨基甲?；?9-(苯基甲基)-2-[(丙氧基)甲基]咔唑-4-基]氧基乙酸；9-芐基-7-甲氧基-5-((甲酰氨基甲基)氧基)-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；9-芐基-7-甲氧基-5-氰基甲氧基-咔唑-4-甲酰胺；9-芐基-7-甲氧基-5-((1H-四唑-5-基-甲基)氧基)-咔唑-4-甲酰胺；9-芐基-7-甲氧基-5-((甲酰氨基甲基)氧基)-咔唑-4-甲酰胺；和[9-芐基-4-氨基甲酰基-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸或其藥學上可接受的外消旋物、溶劑合物、互變異構體、旋光異構體、前體藥物衍生物或鹽。
21.一種權利要求1、2、3、4、5、6或7的方法，其中所述式I或II化合物選自 和 其中R為甲基、乙基、鈉離子或N-嗎啉代乙基。
22.一種權利要求1、2、3、4、5、6或7的方法，其中所述化合物為
23.一種權利要求1的方法，包括給予sPLA2抑制劑化合物和用于膿毒癥的其它的有效藥物的組合。
24.一種權利要求12的方法，其中用于膿毒癥的其它的有效藥物為激活的蛋白C或N-[鄰-(對-新戊酰氧基苯)磺酰氨基苯甲?；鵠甘氨酸。
25.一種預防或治療膿毒癥的方法，包括以下步驟c.選擇易受膿毒癥影響的患者；d.監(jiān)測患者體內(nèi)sPLA2活性水平；e.如果sPLA2活性水平高或者正在升高，那么則給予有效量的式I或II化合物。
26.一種治療膿毒癥的方法，包括以下步驟a.選擇處于第一次器官衰竭后18小時內(nèi)的膿毒癥患者；b.開始給予有效量的式I或II化合物；c.之后繼續(xù)給予有效量的式I或II化合物約1-7天或者直到測定的醫(yī)療終止點或者sPLA2活性水平正?；?br> 27.一種治療膿毒癥的方法，包括以下步驟a.選擇處于第一次器官衰竭后12小時內(nèi)的膿毒癥患者；b.開始給予有效量的式I或II化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物。
28.一種治療膿毒癥的方法，包括以下步驟a.選擇處于第一次器官衰竭后6小時內(nèi)的膿毒癥患者；b.開始給予有效量的式I或II化合物。
29.式I或II的sPLA2抑制劑化合物或其藥學上可接受鹽、溶劑合物或前體藥物衍生物在制備用于治療膿毒癥的藥物中的用途，其中在第一次器官衰竭后一定時間間隔內(nèi)或sPLA2水平升高時開始給予藥用有效量的式I或II的sPLA2抑制劑化合物或其藥學上可接受鹽、溶劑合物或前體藥物衍生物。
30.式(I)或(II)的化合物在制備治療或預防患有膿毒癥的或易受膿毒癥影響的患者體內(nèi)膿毒癥的藥物中的用途，包括在第一次器官衰竭后24小時內(nèi)或sPLA2水平升高前開始給予包含式I或II化合物的藥用制劑。
31.式(I)或(II)的化合物在制備治療或預防患有膿毒癥的或易受膿毒癥影響的患者膿毒癥的藥物中的用途，包括在第一次器官衰竭24小時內(nèi)或sPLA2水平升高前開始給予包含式I或II化合物和用于膿毒癥的其它的有效藥物或輔助藥物的藥用制劑。
32.根據(jù)權利要求30的式(I)或(II)化合物在制備治療或預防的膿毒癥的藥物中的用途，其中所述時間間隔為第一次器官衰竭后0-18小時或在sPLA2水平升高時。
33.根據(jù)權利要求30式(I)或(II)化合物在制備治療或預防的膿毒癥的藥物中的用途，其中所述時間間隔為第一次器官衰竭后0-12小時或在sPLA2水平升高時。
34.根據(jù)權利要求30式(I)或(II)化合物在制備治療或預防的膿毒癥的藥物中的用途，其中所述時間間隔為第一次器官衰竭后0-8小時或在sPLA2水平升高時。
35.根據(jù)權利要求30式(I)或(II)化合物在制備治療或預防的膿毒癥的藥物中的用途，其中所述時間間隔為第一次器官衰竭后0-6小時或在sPLA2水平升高時。
36.權利要求1、2、3、4、5、6或7的方法中的式I或II化合物在制備用于治療膿毒癥的藥物中的用途，其中所述式I化合物選自(A)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(B)dl-2-[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]丙酸，(C)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(D)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-3-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(E)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-4-基甲基)-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(F)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-[(2，6-二氯苯基)甲基]-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(G)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-[4(-氟代苯基)甲基]-2-甲基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(H)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-甲基-1-[(1-萘基)甲基]-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(I)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(J)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-[(3-氯代苯基)甲基]-2-乙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(K)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-乙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(L)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-丙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(M)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-環(huán)丙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(N)[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-1-([1，1’-聯(lián)苯基]-2-基甲基)-2-環(huán)丙基-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，(O)4-[[3-(2-氨基-1，2-二氧代乙基)-2-乙基-1-(苯基甲基)-1H-吲哚-5-基]氧基]丁酸，任何組合的(A)-(P)的混合物或其藥學上可接受的外消旋物、溶劑合物、互變異構體、旋光異構體、前體藥物衍生物或鹽。
37.權利要求1、2、3、4、5、6或7的方法中的式I或II化合物在制備用于治療膿毒癥的藥物中的用途，其中式II化合物選自9-芐基-5，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-羧酸酰肼；9-芐基-5，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；[9-芐基-4-氨基甲?；?7-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸鈉鹽；[9-芐基-4-氨基甲?；?7-甲氧基咔唑-5-基]氧基乙酸；[9-芐基-4-氨基甲?；?7-甲氧基咔唑-5-基]氧基乙酸甲酯；9-芐基-7-甲氧基-5-氰基甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；9-芐基-7-甲氧基-5-(1H-四唑-5-基-甲基)氧基)-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；{9-[(苯基)甲基]-5-氨基甲酰基-2-甲基-咔唑-4-基}氧基乙酸；{9-[(3-氟苯基)甲基]-5-氨基甲?；?2-甲基-咔唑-4-基}氧基乙酸；{9-[(3-甲基苯基)甲基]-5-氨基甲酰基-2-甲基-咔唑-4-基}氧基乙酸；{9-[(苯基)甲基]-5-氨基甲酰基-2-(4-三氟甲基苯基)-咔唑-4-基}氧基乙酸；9-芐基-5-(2-甲亞磺酰氨基)乙氧基-7-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；9-芐基-4-(2-甲亞磺酰氨基)乙氧基-2-甲氧基咔唑-5-甲酰胺；9-芐基-4-(2-三氟甲亞磺酰氨基)乙氧基-2-甲氧基咔唑-5-甲酰胺；9-芐基-5-甲亞磺酰氨基甲氧基-7-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；9-芐基-4-甲亞磺酰氨基甲氧基-咔唑-5-甲酰胺；[5-氨基甲?；?2-戊基-9-(苯基甲基)咔唑-4-基]氧基乙酸；[5-氨基甲酰基-2-(1-甲基乙基)-9-(苯基甲基)咔唑-4-基]氧基乙酸；[5-氨基甲?；?9-(苯基甲基)-2-[(三(-1-甲基乙基)甲硅烷基)氧基甲基]咔唑-4-基]氧基乙酸；[5-氨基甲?；?2-苯基-9-(苯基甲基)咔唑-4-基]氧基乙酸[5-氨基甲酰基-2-(4-氯苯基)-9-(苯基甲基)咔唑-4-基]氧基乙酸；[5-氨基甲?；?2-(2-呋喃基)-9-(苯基甲基)咔唑-4-基]氧基乙酸；[5-氨基甲?；?9-(苯基甲基)-2-[(三(-1-甲基乙基)甲硅烷基)氧基甲基]咔唑-4-基]氧基乙酸，鋰鹽；{9-[(苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3-氟苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3-苯氧基苯基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基}氧基乙酸；{9-[(2-氟苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-三氟甲基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-芐基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3-三氟甲基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(1-萘基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-氰基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3-氰基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-甲基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3-甲基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3，5-二甲基苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3-碘苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-氯苯基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基}氧基乙酸；{9-[(2，3-二氟苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2，6-二氟苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2，6-二氯苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3-三氟甲氧基苯基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基}氧基乙酸；{9-[(2-聯(lián)苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-聯(lián)苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(2-聯(lián)苯基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；[9-芐基-4-氨基甲?；?1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸；{9-[(2-吡啶基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；{9-[(3-吡啶基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基}氧基乙酸；[9-芐基-4-氨基甲?；?8-甲基-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸；[9-芐基-5-氨基甲?；?1-甲基咔唑-4-基]氧基乙酸；[9-芐基-4-氨基甲?；?8-氟-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸；[9-芐基-5-氨基甲?；?1-氟咔唑-4-基]氧基乙酸；[9-芐基-4-氨基甲酰基-8-氯-1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸；[9-芐基-5-氨基甲?；?1-氯咔唑-4-基]氧基乙酸；[9-[(環(huán)己基)甲基]-5-氨基甲酰基咔唑-4-基]氧基乙酸；[9-[(環(huán)戊基)甲基]-5-氨基甲?；沁?4-基]氧基乙酸；5-氨基甲?；?9-(苯基甲基)-2-[[(丙烯-3-基)氧基]甲基]咔唑-4-基]氧基乙酸；[5-氨基甲?；?9-(苯基甲基)-2-[(丙氧基)甲基]咔唑-4-基]氧基乙酸；9-芐基-7-甲氧基-5-((甲酰氨基甲基)氧基)-1，2，3，4-四氫咔唑-4-甲酰胺；9-芐基-7-甲氧基-5-氰基甲氧基-咔唑-4-甲酰胺；9-芐基-7-甲氧基-5-((1H-四唑-5-基-甲基)氧基)-咔唑-4-甲酰胺；9-芐基-7-甲氧基-5-((甲酰氨基甲基)氧基)-咔唑-4-甲酰胺；和[9-芐基-4-氨基甲?；?1，2，3，4-四氫咔唑-5-基]氧基乙酸或其藥學上可接受的外消旋物、溶劑合物、互變異構體、旋光異構體、前體藥物衍生物或鹽。
38.權利要求1、2、3、4、5、6或7的方法中的式I或II化合物在制備用于治療膿毒癥的藥物中的用途，其中所述式I或II化合物選自 和 其中R為甲基、乙基、鈉離子或N-嗎啉代乙基。
39.權利要求1-7中任一項的式(I)或(II)化合物在制備用于治療膿毒癥的藥物中的用途，其中所述化合物為
全文摘要
本發(fā)明公開一種新的治療和/或預防膿毒癥的方法。
文檔編號C07D209/12GK1450893SQ01812765
公開日2003年10月22日 申請日期2001年6月29日 優(yōu)先權日2000年7月14日
發(fā)明者A·羅, W·L·馬西亞斯, S·斯克爾亞尼克 申請人:伊萊利利公司