專利名稱：用二氧化碳超臨界萃取提取苦瓜油的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從植物種子或種仁中提取有效成分的方法，具體的涉及從苦瓜籽中提取苦瓜油的方法。
背景技術(shù)：
苦瓜(monordica charantia L.)又名涼瓜、金荔枝、癩瓜等，為葫蘆科苦瓜屬一年生蔓性草本植物。原產(chǎn)于印度，廣泛分布于熱帶、亞熱帶和溫帶地區(qū)。南宋時傳人我國云南等地，至明代中后期才較多地為南方人所食用，至今仍為華南栽培較多，近年來北方地區(qū)已逐步栽培和較廣泛地食用。苦瓜其肉質(zhì)脆嫩，苦味適中，是瓜類中維生素C含量最高的一種，還具有清熱解毒、明目、解暑、利尿等功效，因此深受人們喜歡。近幾年隨著苦瓜在免疫、抗腫瘤、抗菌、降血糖等方面的藥理作用逐漸被揭示，人們對苦瓜的需求量日益增加。為適應(yīng)市場經(jīng)濟發(fā)展的需要，加強對苦瓜產(chǎn)品的研究與開發(fā)，人們除了對苦瓜肉進行研究外，對苦瓜籽仁也進行了較多研究，因為過去人們除了留作種子外，苦瓜籽大多都丟棄，沒有加以利用，十分可惜。苦瓜籽用途十分廣泛，苦瓜每果含種子20-30粒，種子盾形黃褐色，種皮較厚，苦瓜籽仁兼具有食用和降脂降糖等保健功能，因此，對其開發(fā)利用已引起人們的廣泛重視。近年來人們對苦瓜和苦瓜籽仁的作用又進一步研究，發(fā)現(xiàn)苦瓜籽仁還具有以下作用1、苦瓜籽仁的活性蛋白有抑制癌細胞增殖和滅活癌細胞；2、苦瓜籽仁中含有抗艾滋病病毒的有效活性成分，苦瓜籽仁有三種具有生理活性的蛋白質(zhì)能阻止艾滋病毒DNA的合成，抑制艾滋病毒的感染與生長；3、苦瓜籽仁對細菌具有較強的抑制作用，國內(nèi)有的醫(yī)學(xué)院用苦瓜提取液和籽仁進行的抗菌實驗證明，對革蘭氏陽性球菌、革蘭氏桿菌、革蘭氏陰性桿菌均具有較好的抗菌作用；4、苦瓜籽仁具有調(diào)節(jié)免控的功能，有關(guān)研究人員進行的試驗表明，苦瓜原汁和苦瓜提取液對正常小鼠的血清血凝抗體滴度、血清溶菌酶的含量、血中白細胞的吞噬能力均有明顯增強作用，說明苦瓜籽仁對正常小鼠的免疫功能有全面的促進和調(diào)節(jié)作用。
目前對苦瓜籽仁活性成分的提取公開文獻有一些報道，如(1)、“苦瓜籽核糖體失活蛋白的分離純化及抗氧化活性的研究”作者傅明輝田潔，汕頭大學(xué)生物系，刊名中國生化藥物雜志.2002，23(3))，文摘苦瓜籽經(jīng)粉碎，50mmol/L乙酸抽提，硫酸銨沉淀，經(jīng)陽離子交換及凝膠柱色譜等步驟進一步純化后，測定所得兩種核糖體失活蛋白的理化性質(zhì)，純化后得到一種分子量為29.6kD的蛋白質(zhì)和一種小分子量蛋白質(zhì).從苦瓜籽中分離純化出兩種不同分子量的核糖體失活蛋白均為糖蛋白質(zhì)，且具有一定的抗氧化活性。(2)“苦瓜籽核糖體失活蛋白的分離純化及抗氧化活性的研究”作者傅明輝田潔機構(gòu)汕頭大學(xué)生物系，刊名中國生化藥物雜志.2002，23(3).文摘目的改進苦瓜籽核糖體失活蛋白的提取工藝，并對其抗氧化活性進行研究。方法苦瓜籽經(jīng)粉碎，50mmol/L乙酸抽提，硫酸銨沉淀，經(jīng)陽離子交換及凝膠柱色譜等步驟進一步純化后，測定所得兩種核糖體失活蛋白的理化性質(zhì)，結(jié)果純化后得到一種分子量為29.6kD的蛋白質(zhì)和一種小分子量蛋白質(zhì)，兩者在無細胞系中抑制50％蛋白質(zhì)合成濃度分別為4.3×10-6，1.4×10-6mol/L，含糖量分別為4.83％，1.82％，類超氧化物歧化酶(SOD)活性分別為79.05，17.25u/mg。陽性對照純品SOD活性為1267u/mg。結(jié)論從苦瓜籽中分離純化出兩種不同分子量的核糖體失活蛋白均為糖蛋白質(zhì)，且具有一定的抗氧化活性。(3)、中國專利，申請?zhí)?9816804，來自苦瓜的油、其制備方法和用途(普什帕康納，印度新德里，)，本發(fā)明涉及適于局部施用于哺乳動物身體且用作抗炎、抗關(guān)節(jié)炎、血管擴張和創(chuàng)傷愈合劑的一種從苦瓜提取的新型油，所述的油主要包括癸酸0.7-1.2重量％、月桂酸0.6-1重量％、棕櫚酸4.2-5.0重量％、硬脂酸59-62重量％、油酸13-15重量％、原酸3-5重量％、亞油酸8-10重量％和其它未檢測出的次要酸6-8重量％；以及生產(chǎn)這種油的方法。從苦瓜種子中提取油的方法步驟如下1、在適合的碾磨機中將干燥種子磨成細粉；2、以非極性溶劑混合物處理粉碎的種子；3、使該混合物在室溫下保持48小時以便分離出油；4、采用分液漏斗從清液中收集油；5、以任意的非極性溶劑回流加熱步驟4所得的混合物以除去最后的痕量油；6、通過沉淀該鹽和其中的雜質(zhì)來純化油。其中采用的非極性溶劑可包括丙酮和選自苯、己烷、石油醚和乙醚的芳烴和脂肪烴的混合物。(4)、苦瓜瓤和籽的揮發(fā)性成分研究，樂長高，付紅蕾，東華理工學(xué)院應(yīng)用化學(xué)系，撫州市第一醫(yī)院，刊名林產(chǎn)化工通訊.2003，37(3))，應(yīng)用氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)測定苦瓜瓤和籽的揮發(fā)性成分及其相對含量。發(fā)現(xiàn)苦瓜瓤有23個以上成分，鑒定了其中的12個成分；苦瓜籽有12個以上成分，鑒定了其中的8個成分，并用歸一化法確定了各成分的相對含量?？喙献训膿]發(fā)性化學(xué)組分更少，含量相對集中，十六碳酸和十六碳酸乙酯分別占33.79％、32.89％，十八碳酸和十八碳酸乙酯分別占4.16％、6.32％。(5)苦瓜籽蛋白的分離、純化及其抗氧化作用的研究(傅明輝，汕頭大學(xué)生物系，藥物生物技術(shù).2001，8(5))，苦瓜籽經(jīng)粉碎抽提，硫酸銨沉淀，陽離子交換及凝膠柱層析等步驟純化，得到一種蛋白，SDS-PAGE和IEF顯示為單一條帶，相對分子質(zhì)量28000，PI8.9-9.0，該蛋白類SOD活性為16.71U/mgpr。(6)中國專利<申請?zhí)?amp;gt;02134773<發(fā)明名稱>苦瓜降糖多肽<申請人>北海海玉農(nóng)業(yè)開發(fā)有限責(zé)任公司，廣西壯族自治區(qū)北海市海城區(qū)海玉小區(qū)88幢4樓<文摘>本發(fā)明公開的是苦瓜降糖多肽。它是利用苦瓜籽仁為原料，提取的活性成分，它是以下述方法制備的將苦瓜籽脫殼，然后清洗晾干、粉碎，再用有機溶劑脫脂，脫脂后的苦瓜籽仁粉真空干燥，再用堿提取，此時先于干燥苦瓜籽仁粉中加入純凈水，粉水之比為1∶6-10，加入堿調(diào)pH值為9.5-9.6，靜置后取上清液，于上清液中加入酸，并調(diào)pH值為2.5-3.5，則有沉淀析出，過濾后得到沉淀物，沉淀物用純凈水清洗，干燥后粉碎，調(diào)入適量純凈水并冷凍干燥。本發(fā)明易被人體所吸收利用，可激活人體內(nèi)胰島素，達到降低人體血糖的目的，對糖尿病患者具有一定的保健作用。(7)苦瓜籽中脂肪酸的分離及生理作用研究(于長春等，四平師范學(xué)院等，松遼學(xué)刊自然科學(xué)版.1995(2))，稱取干燥苦瓜籽80克，以無水乙醚作溶劑，用索氏提取儀置50℃恒溫水浴中回流抽提48小時，回收乙醚，即得苦瓜籽粗脂肪，并對苦瓜籽粗脂肪的生理作用進行了研究。苦瓜籽中含有大量的脂肪，經(jīng)動物實驗表明，苦瓜脂肪具有明顯降血脂作用，所以研究開發(fā)苦瓜籽，從中提取PUFA具有重要意義?？喙献阎兄舅岬姆蛛x及生理作用研究(于長春等，四平師范學(xué)院等，松遼學(xué)刊自然科學(xué)版.1995(2))，稱取干燥苦瓜籽80克，以無水乙醚作溶劑，用索氏提取儀置50℃恒溫水浴中回流抽提48小時，回收乙醚，即得苦瓜籽粗脂肪，并對苦瓜籽粗脂肪的生理作用進行了研究?？喙献阎泻写罅康闹?，經(jīng)動物實驗表明，苦瓜脂肪具有明顯降血脂作用，所以研究開發(fā)苦瓜籽，從中提取PUFA具有重要意義。
從上述公開的文獻中了解到，目前從苦瓜籽中提取苦瓜油通常都是采用溶劑法(包括丙酮、環(huán)己烷、己烷、乙酸、石油醚和乙醚的芳烴或脂族烴的混合物等)，這種方法存在溶劑回收和產(chǎn)品帶有溶劑殘留問題，有的提取過程較復(fù)雜，油得率較低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人經(jīng)過研究和探索，發(fā)明了一種不需要用有機溶劑從苦瓜種子提取苦瓜油的方法，該方法提取的苦瓜油回收率高，無殘留溶劑，工藝過程簡單。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下本發(fā)明所述的苦瓜油是用二氧化碳超臨界萃取法從苦瓜籽中提取的，提取方法包括下述步驟1、將苦瓜籽脫殼，去殼留仁，然后將苦瓜籽仁清洗晾干，經(jīng)粉碎后得凈苦瓜籽仁粉；2、設(shè)定萃取缸、兩個分離缸(I、II)的溫度；3、將裝有一定量的苦瓜籽仁粉的料筒放入萃取缸中；4、啟動二氧化碳循環(huán)系統(tǒng)，調(diào)節(jié)萃取缸、兩個分離缸(I、II)的壓力；5、待萃取缸、分離缸(I、II)的溫度及壓力達到設(shè)定值時，開始記錄時間；6、定時從分離缸放料口放出苦瓜油，稱量、記錄；7、分離苦瓜油以后得到的苦瓜籽仁粉可以進一步用于制備苦瓜多肽或作為蛋白粉。
以上所述的用二氧化碳超臨界萃取法提取苦瓜油的方法，在設(shè)定萃取缸和兩個分離缸的溫度過程中，萃取缸的溫度為32℃～40℃，分離缸I的溫度為50℃～55℃，分離缸II的溫度為40℃～45℃。
以上所述的用二氧化碳超臨界萃取法提取苦瓜油的方法，在調(diào)節(jié)萃取缸、兩個分離缸(I、II)的壓力中，萃取的壓力為35MPa～40MPa，分離缸I壓力為5.0MPa～6.0MPa，分離缸II壓力為4.0MPa～5.0MPa。
以上所述的用二氧化碳超臨界萃取法提取苦瓜油的方法，萃取的時間為6-16小時。
本發(fā)明苦瓜油用途藥性活血化瘀、消炎止痛，用于關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、脊椎炎、糖尿病患者腿和手部的肌肉疼痛及創(chuàng)傷愈合劑。也可以作為制藥工業(yè)原料，或者日用化工、食品添加劑的原料。
與現(xiàn)有溶劑法提取苦瓜油的方法相比，本發(fā)明的突出的實質(zhì)性特點和顯著的進步是用二氧化碳超臨界萃取法提取苦瓜油可在常溫下進行，并且二氧化碳無毒、無殘留，氣源來源穩(wěn)定，可循環(huán)使用，提取工藝簡單，萃取效率高，不需要經(jīng)過復(fù)雜煩瑣的提取過程，工業(yè)化生產(chǎn)的成本低，實施容易。
具體實施例方式
實施例1取適量干燥苦瓜籽，用脫殼機將苦瓜籽外殼脫去，得苦瓜子仁，去雜質(zhì)、清洗，常溫下干燥，粉碎，得到大于40目的苦瓜子粉。接通超臨界萃取設(shè)備電源，打開冷循環(huán)開關(guān)及加熱開關(guān)，設(shè)定萃取缸的溫度為32℃，分離缸I的溫度為50℃，分離缸II的溫度為40℃，將已粉碎的苦瓜子粉倒入料筒放入萃取缸中，啟動二氧化碳循環(huán)系統(tǒng)，調(diào)節(jié)萃取缸的壓力為35MPa，分離缸I的壓力為5.5MPa，分離缸II的壓力為4.0MPa，待萃取缸、分離缸(I、II)的溫度及壓力達到設(shè)定值時，開始計時，苦瓜油即可以從分離缸I分離，再將物料和二氧化碳導(dǎo)入分離缸II，每間隔一小時從分離缸放料口放出苦瓜油一次，二氧化碳循環(huán)使用，經(jīng)過6小時的萃取，萃取率達到96％。
實施例2取適量干燥苦瓜籽，將苦瓜籽外殼脫去，得苦瓜子仁，去雜質(zhì)、清洗，常溫下干燥，在30℃以下冷凍粉碎，得到大于40目的苦瓜子粉。接通超臨界萃取設(shè)備電源，打開冷循環(huán)開關(guān)及加熱開關(guān)，設(shè)定萃取缸的溫度為36℃，分離缸I的溫度為55℃，分離缸II的溫度為45℃，將已粉碎的苦瓜子粉倒入料筒放入萃取缸中，啟動二氧化碳循環(huán)系統(tǒng)，調(diào)節(jié)萃取缸的壓力為38MPa，分離缸I的壓力為5.0MPa，分離缸II的壓力為5.0MPa，待萃取缸、分離缸(I、II)的溫度及壓力達到設(shè)定值時，開始計時，苦瓜油即可以從分離缸I分離，再將物料和二氧化碳導(dǎo)入分離缸II，每間隔一小時從分離缸放料口放出苦瓜油一次，二氧化碳循環(huán)使用，經(jīng)過10小時的萃取，萃取率達到98.5％以上。
實施例3取適量干燥苦瓜籽，將苦瓜籽外殼脫去，得苦瓜子仁，去雜質(zhì)、清洗，常溫下干燥，在30℃以下冷凍粉碎，得到大于40目的苦瓜子粉。接通超臨界萃取設(shè)備電源，打開冷循環(huán)開關(guān)及加熱開關(guān)，設(shè)定萃取缸的溫度為40℃，分離缸I的溫度為53℃，分離缸II的溫度為42℃，將已粉碎的苦瓜子粉倒入料筒放入萃取缸中，啟動二氧化碳循環(huán)系統(tǒng)，調(diào)節(jié)萃取缸的壓力為40MPa，分離缸I的壓力為6.0MPa，分離缸II的壓力為4.5MPa，待萃取缸、分離缸(I、II)的溫度及壓力達到設(shè)定值時，開始計時，苦瓜油即可以從分離缸I分離，再將物料和二氧化碳導(dǎo)入分離缸II，每間隔一小時從分離缸放料口放出苦瓜油一次，二氧化碳循環(huán)使用，經(jīng)過16小時的萃取，萃取率達到98.7％以上。
權(quán)利要求
1.一種從苦瓜籽中提取苦瓜油的方法，其特征在于所述的苦瓜油提取是用二氧化碳超臨界萃取法從苦瓜籽中提取的，提取方法包括下述步驟(1)將苦瓜籽脫殼，去殼留仁，然后將苦瓜籽仁清洗晾干，經(jīng)粉碎后得凈苦瓜籽仁粉；(2)設(shè)定萃取缸、兩個分離缸(I、II)的溫度；(3)將裝有一定量的苦瓜籽仁粉的料筒放入萃取缸中；(4)啟動二氧化碳循環(huán)系統(tǒng)，調(diào)節(jié)萃取缸、兩個分離缸(I、II)的壓力；(5)待萃取缸、分離缸(I、II)的溫度及壓力達到設(shè)定值時，開始記錄時間；(6)定時從分離缸放料口放出苦瓜油，稱量、記錄；以上所述的設(shè)定萃取缸和兩個分離缸的溫度過程中，萃取缸的溫度為32℃～40℃，分離缸I的溫度為50℃～55℃，分離缸II的溫度為40℃～45℃；以上所述的在調(diào)節(jié)萃取缸、兩個分離缸(I、II)的壓力中，萃取的壓力為35MPa～40MPa，分離缸I壓力為5.0MPa～6.0MaP，分離缸II壓力為4.0MPa～5.0MPa。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從苦瓜籽中提取苦瓜油的方法，其特征在于二氧化碳超臨界萃取的時間為6-12小時。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從苦瓜籽中提取苦瓜油的方法，其特征在于分離苦瓜油以后得到的苦瓜籽仁粉進一步用于制備苦瓜多肽或作為蛋白粉。
4.如權(quán)利要求1所述的苦瓜油的用途，其特征在于苦瓜油在活血化瘀或消炎止痛、關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、脊椎炎、糖尿病患者腿和手部的肌肉疼痛及創(chuàng)傷愈合劑，或者作為工業(yè)原料的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開的是從苦瓜果實中剝離出的苦瓜籽用二氧化碳超臨界萃取法提取苦瓜油的一種方法，目前從苦瓜籽中提取苦瓜油通常都是采用溶劑法，這種方法存在溶劑回收和產(chǎn)品帶有溶劑殘留問題，本發(fā)明用二氧化碳超臨界萃取法提取苦瓜油可在常溫下進行，并且二氧化碳無毒、無殘留，氣源來源穩(wěn)定，可循環(huán)使用，提取工藝簡單，萃取效率高，不需要經(jīng)過復(fù)雜繁瑣的提取過程，工業(yè)化生產(chǎn)的成本低，實施容易。
文檔編號C11B1/00GK1594520SQ20041002772
公開日2005年3月16日 申請日期2004年6月22日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月22日
發(fā)明者張萍, 陳立新, 蘇菲, 郭寧平, 李無畏 申請人:北海安泰生物技術(shù)有限公司