一種治療動脈粥樣硬化的藥物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種治療動脈粥樣硬化的藥物。由0.3份~99.7重量份的工業(yè)大麻火麻仁提取物和99.7份~0.3重量份的工業(yè)大麻火麻素混勻制成。實(shí)驗證明該藥物能明顯降低血脂、提高血清NO含量、降低ET?1含量,并抑制斑塊進(jìn)展,效果優(yōu)于大麻二酚,具有明確的治療動脈粥樣硬化的作用,市場應(yīng)用前景良好。
【專利說明】
一種治療動脈粥樣硬化的藥物
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于動脈粥樣硬化治療藥物領(lǐng)域,具體地說是涉及一種以工業(yè)大麻為主要 原料制備的治療動脈粥樣硬化的藥物組合物。
【背景技術(shù)】
[0002] 大麻的種植歷史悠久,古代大麻主要用于制作加工繩索、漁網(wǎng)、服裝和造紙原料, 以及油脂、食品等。隨著社會的發(fā)展和進(jìn)步,人們發(fā)現(xiàn)大麻中含有一種毒性成分(四氫大麻 酚)可使人致幻成癮,歐美許多國家曾在相當(dāng)長時期內(nèi)禁種大麻。由于大麻的經(jīng)濟(jì)利用價值 高,到20世紀(jì)80年代,一些歐洲國家研究培育出了低毒大麻品種并獲得推廣種植。1990年歐 共體率先緊急修訂農(nóng)業(yè)政策,廢除了禁種大麻的禁令,開始恢復(fù)大麻的生產(chǎn)和研究。隨后美 國、加拿大、澳大利亞等國解除了大麻種植的禁令,全球大麻種植面積和纖維產(chǎn)量有了迅速 增長,歐美國家對工業(yè)大麻的開發(fā)利用再次掀起,國際市場對生態(tài)大麻的需求也在迅速增 長。根據(jù)大麻的經(jīng)濟(jì)屬性,為充分利用其為人類服務(wù),1988年聯(lián)合國明確規(guī)定不具備提取毒 性成分(四氫大麻酚THC)價值或直接作為毒品吸食的,專供工業(yè)用途的原料大麻,工業(yè)大麻 (其生長期大麻花葉中的四氫大麻酚含量小于0.3%),可以合法進(jìn)行規(guī)?;N植與工業(yè)化 開發(fā)利用。
[0003] 工業(yè)大麻是獨(dú)具特色、比較優(yōu)勢突出的生物資源。工業(yè)大麻與傳統(tǒng)有毒大麻具有 本質(zhì)差別,工業(yè)大麻是一類無毒化的工業(yè)原料產(chǎn)品,具有極高的經(jīng)濟(jì)利用價值。到2003年末 世界各國先后一共選育出25個工業(yè)大麻品種,而且歐盟的法、德、英等七國也都成為工業(yè)大 麻主要種植生產(chǎn)國,以工業(yè)大麻纖維和麻籽及其花、葉、根、莖為原料進(jìn)行系列產(chǎn)品研發(fā)與 產(chǎn)業(yè)化綜合開發(fā),已在工業(yè)大麻初級加工主產(chǎn)品麻皮纖維、桿芯纖維、麻籽油脂和籽柏蛋 白、藥用標(biāo)準(zhǔn)化提取物實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步進(jìn)行深加工利用,派生出來的產(chǎn)品 已達(dá)到二萬五千種以上,包含了人類的衣、食、住、行、用各大類產(chǎn)品。工業(yè)大麻產(chǎn)業(yè)的研究、 開發(fā)和生產(chǎn)主要集中在歐洲、加拿大、美國等技術(shù)發(fā)達(dá)國家。工業(yè)大麻產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,首先是 從選育無毒或低毒化的工業(yè)大麻新品種開始的,并以此為基礎(chǔ)實(shí)現(xiàn)了規(guī)?;姆N植和高技 術(shù)產(chǎn)業(yè)化的綜合開發(fā)利用,形成了一個"新興綠色產(chǎn)業(yè)群"和新型工業(yè)經(jīng)濟(jì)的快速增長點(diǎn)。
[0004] 火麻仁為大麻干燥成熟果實(shí),古代通常將火麻仁入藥,食療亦有記載。國家衛(wèi)生部 已將火麻仁納入"既是藥品又是食品"一一"藥食兩用"名單。火麻仁的藥性及藥理為:甘, 平。歸脾、胃、大腸經(jīng)。功能主治:潤燥,滑腸,通淋,活血。治腸燥便秘,消渴,熱淋,風(fēng)痹,痢 疾。月經(jīng)不調(diào),疥瘡,癬癩。在醫(yī)書中有詳細(xì)療效記載,如《本經(jīng)》:"補(bǔ)中益氣。";《唐本草》: "主五勞。";《肘后方》:"治大渴,日食數(shù)斗,小便赤澀者:麻子一升,水三升,煮三、四沸,取汁 飲之。";《日華子本草》:"補(bǔ)虛勞,長肌肉,下乳,止消渴,催生。治橫逆產(chǎn)。";《本草拾遺》:"下 氣,利小便,去風(fēng)痹皮頑,炒令香搗碎,小便浸取汁服;婦人倒產(chǎn)吞二七枚。";《食療本草》: "取汁煮粥,去五臟風(fēng)、潤肺。治關(guān)節(jié)不通、發(fā)落,通血脈。"。
[0005] 大麻的花葉均供藥用。麻葉的藥性及藥理為:辛;有毒。歸肺;膀胱;大腸經(jīng)。功能主 治:止痛,定喘,驅(qū)蛔。主治氣喘,跌撲疼痛,蛔蟲病。麻花的藥性及藥理為:苦;辛;性溫;有 毒。功能主治:祛風(fēng);活血;生發(fā)。主風(fēng)病肢體麻木;遍身瘙癢;婦女經(jīng)閉。
[0006] 動脈粥樣硬化(Atherosclerosis,AS)是一種常見的嚴(yán)重危害人類健康的心腦血 管疾病。流行病學(xué)調(diào)查,我國每年遭受動脈粥樣硬化困擾的患者超過7000萬,并且患病率和 發(fā)病率呈逐年上升趨勢,在40-49歲的人群中,檢出率分別為58.36%和88.31%,已成為中 老年人死亡的主要?dú)⑹种弧?br>[0007] 動脈粥樣硬化是一種侵犯全身動脈系統(tǒng)的疾病,可有數(shù)十年的無癥狀期,病因復(fù) 雜、病程漫長,包括內(nèi)皮損傷,低密度脂蛋白(LDL)氧化修飾,高密度脂蛋白濃度(HDL)增高, 單核細(xì)胞粘附,平滑肌細(xì)胞增值及纖維斑塊形成。在多種危險因素(高血壓、高膽固醇含量、 高脂血癥等)的作用下,動脈內(nèi)皮損傷壞死剝落,產(chǎn)生和釋放細(xì)胞粘附因子和生長因子,使 得血小板和單核細(xì)胞在該處粘附,進(jìn)而單核細(xì)胞進(jìn)入皮下間隙轉(zhuǎn)為巨噬細(xì)胞;中膜平滑肌 細(xì)胞移行至內(nèi)膜處增殖或凋亡;巨噬細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞攝取膽固醇轉(zhuǎn)成泡沫細(xì)胞,形成AS 的早期病變即脂紋。在此基礎(chǔ)上,逐步發(fā)展為由壞死細(xì)胞碎片、膽固醇及其酯、血管平滑肌、 巨噬細(xì)胞以及致密的纖維組織構(gòu)成的纖維斑塊。斑塊形成后不穩(wěn)定因素導(dǎo)致纖維帽破裂形 成血管堵塞,淤滯等。動脈粥樣硬化與高血壓、冠心病、中風(fēng)有著密切聯(lián)系,嚴(yán)重威脅著人類 的健康,也給社會和家庭帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)和生活負(fù)擔(dān)。因此,加強(qiáng)動脈粥樣硬化的治療是 我國乃至全球亟待解決的問題,廣泛尋找治療藥物具有極其深遠(yuǎn)的理論和實(shí)際意義。
[0008] 大麻二酚(CBD)是從大麻花葉中萃取的一種無毒的可用于藥品、化妝品、保健食品 的一種高附加值的酚類物質(zhì)。目前,以色列、美國、英國等發(fā)達(dá)國家已用其做原料并開發(fā)出 多種特效藥品和化妝品。CBD是大麻中的非成癮性成分,能阻礙THC對人體神經(jīng)系統(tǒng)影響,并 具有抗痙攣、抗風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、抗焦慮等藥理活性,亦有在治療動脈粥樣硬化方面的報道, 但單獨(dú)使用大麻二酚(CBD)的治療效果并不理想。因此開發(fā)新的活性高,毒副作用小的治療 藥物顯得非常必要。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0009] 本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足,提供一種以工業(yè)大麻為主要原料制備的 治療動脈粥樣硬化的藥物組合物。
[0010] 本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)。
[0011] 除非另有說明,本發(fā)明所采用的百分?jǐn)?shù)均為質(zhì)量百分?jǐn)?shù)。
[0012] -種治療動脈粥樣硬化的藥物,其特征在于,由下述重量份的原料混勻制成:工業(yè) 大麻火麻仁提取物0.3份~99.7份,工業(yè)大麻火麻素99.7份~0.3份。
[0013] 所述的治療動脈粥樣硬化藥物的原料組成優(yōu)選為工業(yè)大麻火麻仁提取物40份和 工業(yè)大麻火麻素60份。
[0014] 其中,所述的工業(yè)大麻火麻仁提取物通過以下方法制備而成:
[0015] (1)取成熟的工業(yè)大麻火麻仁,經(jīng)烘干、除雜,粉碎后備用;
[0016] (2)在20~85°C條件下,用乙醇對粉碎火麻仁料進(jìn)行提取,乙醇濃度為95%~ 100% (V/V),料液比為 1:5~1:20;
[0017] (3)濾出浸提液,減壓濃縮后即為工業(yè)大麻火麻仁提取物。
[0018]在用乙醇對工業(yè)大麻火麻仁進(jìn)行提取時,可采用以下多種方式進(jìn)行:如室溫下浸 提,每批物料浸提2次,每次7~10天;在60~85 °C條件下,加熱提取2次,每次1~3小時;超聲 波輔助提取,超聲波頻率30~60kHz,功率100~1000W,提取時間30~60min,浸提溫度25~ 50°C ;亦可采用微波輔助提取等其它現(xiàn)有技術(shù)。
[0019] 所述的工業(yè)大麻火麻素通過以下方法制備而成:
[0020] (1)取工業(yè)大麻的花、葉、麻糠或三者的混合物,經(jīng)烘干、除雜、粉碎至10~60目;
[0021] (2)超臨界二氧化碳萃取:將上述粉碎好的工業(yè)大麻原料投入超臨界二氧化碳萃 取裝置中,控制萃取溫度40~50°C,萃取時間30~90min,萃取壓力25~35Mpa,二氧化碳流 量40kg/h,分離釜出口收集萃取物;
[0022] (3)萃取物用0 · 2~10倍體積的95 %~100 % (V/V)的乙醇洗脫,洗脫次數(shù)為1~3 次;
[0023] (4)收集洗脫液,減壓濃縮,真空干燥,粉碎后即得工業(yè)大麻火麻素。
[0024]所述的工業(yè)大麻的花、葉、麻糠三者混合物的優(yōu)選配比為1:3:2。
[0025] 普通的麻葉、麻花均具有毒性(含有四氫大麻酚THC-毒品大麻的至幻物質(zhì))。為排 除原料藥的毒性,本發(fā)明優(yōu)選采用云南生長的工業(yè)大麻品種一一"云麻1號"的花、葉、麻糠 和火麻仁作為原料。按我國相關(guān)法律文件規(guī)定,"云麻1號"只能在云南境內(nèi)種植,并且其花、 葉、麻糠只能在云南境內(nèi)加工。
[0026] 本發(fā)明的藥物組合物可進(jìn)一步制成不同的藥物制劑,包括口服劑和針劑,其中口 服劑包括膠囊劑、口服液、片劑、滴丸、顆粒劑等,針劑包括注射液劑型及注射用凍干粉針劑 型等。在制備口服制劑時可選用的輔型劑可以是淀粉、糊精或環(huán)糊精、蔗糖、硬脂酸鹽等常 規(guī)充填劑。凍干粉針劑可以通過無菌噴霧干燥、低溫真空干燥、冷凍干燥等方法制備。各制 劑的后期制備工藝及設(shè)備均屬制藥領(lǐng)域的常規(guī)技術(shù),本發(fā)明對此不作限定,故在此不予詳 述。
[0027]本發(fā)明的藥物組合物能明顯降低血脂、提高血清NO含量、降低ET-I含量,并抑制斑 塊進(jìn)展,效果優(yōu)于大麻二酚,具有明確的治療動脈粥樣硬化的作用。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 下面通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明,但實(shí)施例并不是對本發(fā)明技術(shù)方 案的限定。
[0029] 實(shí)施例1
[0030] 采用云南生長的工業(yè)大麻品種--"云麻1號"的花、葉、麻糠和火麻仁作為原料。 取成熟的工業(yè)大麻火麻仁,經(jīng)烘干、除雜,粉碎后備用;用乙醇對粉碎火麻仁料進(jìn)行提取(在 60~85 °C條件下,加熱提取2次,每次1~3小時),乙醇濃度為95 %~100 % (V/V),料液比為 1:5~1:20;濾出浸提液,減壓濃縮后即為工業(yè)大麻火麻仁提取物。
[0031] 取工業(yè)大麻的花、葉、麻糠1:3:2質(zhì)量比的混合物,經(jīng)烘干、除雜、粉碎至10~60目; 超臨界二氧化碳萃取:將上述粉碎好的工業(yè)大麻原料投入超臨界二氧化碳萃取裝置中,控 制萃取溫度40~50°C,萃取時間30~90min,萃取壓力25~35Mpa,二氧化碳流量40kg/h,分 離釜出口收集萃取物;萃取物用〇. 2~10倍體積的95 %~100% (V/V)的乙醇洗脫,洗脫次數(shù) 為1~3次;收集洗脫液,減壓濃縮,真空干燥,粉碎后獲得工業(yè)大麻火麻素。
[0032] 取工業(yè)大麻火麻仁提取物40份,工業(yè)大麻火麻素60份,混勻,得本發(fā)明藥物B。
[0033] 實(shí)施例2
[0034] 重復(fù)實(shí)施例1,有以下不同點(diǎn):在用乙醇對工業(yè)大麻火麻仁進(jìn)行提取時,室溫下浸 提,每批物料浸提2次,每次7~10天。取工業(yè)大麻的花、葉、麻糠1: 1:1質(zhì)量比的混合物作為 工業(yè)大麻火麻素的提取原料。
[0035]取工業(yè)大麻火麻仁提取物0.3份,工業(yè)大麻火麻素99.7份,混勻,得本發(fā)明藥物A。
[0036] 實(shí)施例3
[0037]重復(fù)實(shí)施例1,有以下不同點(diǎn):在用乙醇對工業(yè)大麻火麻仁進(jìn)行提取時,采用超聲 波輔助提取,超聲波頻率30~60kHz,功率100~1000W,提取時間30~60min,浸提溫度25~ 50°C。取工業(yè)大麻的花、葉、麻糠3:2:1質(zhì)量比的混合物作為工業(yè)大麻火麻素的提取原料。 [0038]取工業(yè)大麻火麻仁提取物99.7份,工業(yè)大麻火麻素0.3份,混勻,得本發(fā)明藥物C。 [0039] 實(shí)施例4
[0040]取實(shí)施例1所得藥物100克(過80目篩),加入60克微晶纖維素,過80目篩三遍,混合 均勻,噴入95%乙醇溶液,制軟材,過40目篩制粒,60°C干燥半小時,分裝于3#膠囊中,錯塑 復(fù)合包裝,制得治療動脈粥樣硬化藥物膠囊劑。
[0041 ] 實(shí)施例5
[0042] 取實(shí)施例2所得藥物,加入物料量5~20 %的干淀粉及1~5 %的硬脂酸鎂等,經(jīng)混 合,制粒,干燥,壓片,制得治療動脈粥樣硬化藥物片劑。
[0043] 實(shí)施例6
[0044] 取實(shí)施例3所得藥物,加入蔗糖水及常規(guī)量的防腐劑,穩(wěn)定劑等輔料。過濾、滅菌, 分裝入IOmL瓶中,制成治療動脈粥樣硬化藥物口服液。
[0045] 實(shí)施例7
[0046] 取實(shí)施例1所得藥物,加入注射用水溶解,加入2.0%?;钚蕴浚瑪嚢?,過濾,繼以用 0.45μηι、0.22μηι微孔濾膜分級過濾,補(bǔ)充注射用水,分裝于西林瓶中,冷凍干燥,回充高純度 氮?dú)?,加塞,壓蓋,包裝,制得治療動脈粥樣硬化藥物注射液。
[0047] 應(yīng)用實(shí)施例1本發(fā)明對實(shí)驗性動脈粥樣硬化兔的影響
[0048] 取健康新西蘭兔,體重2.0-2.5kg,雌雄各半,顆粒飼料平衡喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)取10 只作為正常對照組,用普通飼料喂養(yǎng),其余為高脂造模組,給予高脂飼料喂養(yǎng)(按1%膽固 醇、5%豬油、10%蛋黃粉、84%普通飼料比例制作),各組每兔每天進(jìn)食總量相等,限制為 150g,自由飲水。12周后高脂造模組取2只實(shí)驗家兔處死,光鏡下觀察主動脈內(nèi)膜明顯增厚, 伴有大量泡沫細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞排列紊亂、不連續(xù),大量平滑肌細(xì)胞迀移內(nèi)膜,視為造模成功。
[0049] 將高脂造模組家兔隨機(jī)分為5組,每組10只,即正常對照組、模型組、大麻二酚組、 本發(fā)明A、B、C組。除正常對照組仍然喂養(yǎng)普通飼料外,其余各組喂養(yǎng)上述高脂飼料。本發(fā)明 組和大麻二酚組分別灌胃給予20mg/kg;其余組給予相應(yīng)量生理鹽水。所有動物自由飲水, 每天給藥1次給藥共8周。所有動物在給藥8周后空腹抽取耳靜脈血5mL,供檢測各組家兔血 清1'(:36、〇^、!101^、勵41'-1使用;抽血結(jié)束后以空氣栓塞法處死所有實(shí)驗動物,無菌取出主 動脈根部至主動脈穿膈肌處動脈段作為標(biāo)本,清除外膜附著組織,沿動脈長軸剪開,取斑塊 最顯著部位動脈段lcm,置于10%福爾馬林溶液中浸泡固定后修剪成約IcmXO . 15cmX 0 · 15cm的組織塊,用于病理組織學(xué)觀察。
[0050] 采用酶法測定血清TC、TG、LDL、HDL水平;NO測定采用硝酸還原酶法;ET-1采用放射 免疫分析法。測量斑塊面積:病理組織塊經(jīng)切片機(jī)按4μπι的厚度切割,采用HE染色制作病理 切片,計算斑塊面積占整條主動脈面積的百分比。
[0051]按以下規(guī)定進(jìn)行病變分級:①0級:無病變;②I級:病變占1~25%;③II級:病變占 26~50%;④III級:病變占51~75%;⑤IV級:病變占76~100%。記分方法:①0級:計0分; ②I級:計1分;③II級:計2分;④III級:計3分;⑤IV級:計4分。
[0052] 1、本發(fā)明對AS模型兔血脂的影響
[0053] 試驗結(jié)果見表1,結(jié)果表明,與空白組相比,模型組的TC、TG、LDL明顯升高(P< 0.01)、HDL明顯降低(P<0.01),表明造模成功。與模型組相比,本發(fā)明能顯著降低AS模型兔 血中TC、TG、LDL水平(P<0.01);升高AS模型兔血中HDL水平(P<0.01),效果優(yōu)于大麻二酚。 [0054] 表1本發(fā)明對AS模型兔血脂的影響(?士s,n = 10)
[0056] 注:與模型組比較:*P<0 · 05,林P<0 · 01。
[0057] 2、本發(fā)明對AS模型兔NO、ET-1的影響
[0058]試驗結(jié)果見表2,結(jié)果表明,與模型組相比,本發(fā)明能顯著降低AS模型兔血中ET-I 水平,提高NO水平,且均具有顯著性意義(P<0.01 ),效果優(yōu)于大麻二酚。
[0059] 表2本發(fā)明對AS模型兔NO、ET-I的影響(,n = 10)
[0062] 注:與模型組比較:*P<0 · 05,#P<0 · 01。
[0063] 3、本發(fā)明對AS模型兔動脈斑塊的影響
[0064] 試驗結(jié)果見表3,結(jié)果表明,與模型組相比,本發(fā)明能顯著降低AS模型兔斑塊面積 (P<0.01),效果優(yōu)于大麻二酚。
[0065] 表3本發(fā)明對AS模型兔動脈斑塊的影響(^士s,n = 10)
[0067] 注:與模型組比較:*P<0 · 05,林P<0 · 01。
[0068] 綜上所述,本發(fā)明能明顯降低血脂、提高血清NO含量、降低ET-I含量,并抑制斑塊 進(jìn)展,上述作用是其治療動脈粥樣硬化的藥理學(xué)基礎(chǔ)。
【主權(quán)項】
1. 一種治療動脈粥樣硬化的藥物,其特征在于,由下述重量份的原料混勻制成:工業(yè)大 麻火麻仁提取物0.3份~99.7份,工業(yè)大麻火麻素99.7份~0.3份。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療動脈粥樣硬化的藥物,其特征在于:所述藥物的原料組成 優(yōu)選為工業(yè)大麻火麻仁提取物40份和工業(yè)大麻火麻素60份。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療動脈粥樣硬化的藥物,其特征在于:所述的工業(yè)大麻火麻 仁提取物通過以下方法制備而成: (1) 取成熟的工業(yè)大麻火麻仁,經(jīng)烘干、除雜,粉碎后備用; (2) 在20~85°C條件下,用乙醇對粉碎火麻仁料進(jìn)行提取,乙醇濃度為95 %~100% (V/ V),料液比為1:5~1:20; (3) 濾出浸提液,減壓濃縮后即為工業(yè)大麻火麻仁提取物。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療動脈粥樣硬化的藥物,其特征在于:所述的工業(yè)大麻火麻 素通過以下方法制備而成: (1) 取工業(yè)大麻的花、葉、麻糠或三者的混合物,經(jīng)烘干、除雜、粉碎至10~60目; (2) 超臨界二氧化碳萃取:將上述粉碎好的工業(yè)大麻原料投入超臨界二氧化碳萃取裝 置中,控制萃取溫度40~50°C,萃取時間30~90min,萃取壓力25~35Mpa,二氧化碳流量 40kg/h,分離釜出口收集萃取物; (3) 萃取物用0.2~10倍體積的95 %~100 % (V/V)的乙醇洗脫,洗脫次數(shù)為1~3次; (4) 收集洗脫液,減壓濃縮,真空干燥,粉碎后即得工業(yè)大麻火麻素。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的治療動脈粥樣硬化的藥物,其特征在于:所述的工業(yè)大麻的 花、葉、麻糠三者混合物的優(yōu)選配比為1:3:2。6. 根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4或5所述的治療動脈粥樣硬化的藥物,其特征在于:所述的 工業(yè)大麻的品種優(yōu)選為〃云麻1號〃。
【文檔編號】A61P9/10GK105963357SQ201610415112
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年6月14日
【發(fā)明人】陳天睿, 胡瀞月
【申請人】云南瑞酚生物科技有限公司