堿含量為98.68%。經(jīng)HPLC測(cè)定，其重量百分比組成包括:原阿片堿:20.68%,延胡索乙素:32.16%，畢扣扣靈:8.84%，鹽酸巴馬汀:0.50%，夏無(wú)寧堿:28.71%，紫堇爾明:6.75%，其他堿 1.04%。
[0043]實(shí)施例5:夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法
[0044]取夏天無(wú)的干燥塊莖，打粉，得到粒度為30目?40目的夏天無(wú)藥材粉末；取夏天無(wú)藥材粉末8000g，加入體積比為10%氨水作為堿化劑(所述的體積比是指氨水試劑的體積占氨水溶液總體積的百分比，氨水試劑的質(zhì)量濃度為25%?28%，所述的質(zhì)量濃度是指氨氣的質(zhì)量占氨水試劑總質(zhì)量的百分比)，用量為夏天無(wú)藥材重量的70%，浸潤(rùn)24h ;將藥材投入超臨界C02萃取和膜耦合(采用孔徑為15納米反滲透膜)的萃取儀中，以質(zhì)量百分比為95%乙醇為夾帶劑(所述的質(zhì)量百分比是指乙醇的質(zhì)量占乙醇水溶液總質(zhì)量的百分比)，萃取時(shí)間lh，干燥，即得。再用質(zhì)量百分比為2%鹽酸水溶液300mL(所述的質(zhì)量百分比是指氯化氫的質(zhì)量占鹽酸水溶液總質(zhì)量的百分比)，超聲(超聲頻率80HZ)萃取0.5h，孔徑為0.1微米的濾膜濾過(guò)，加入質(zhì)量百分比為10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH9?10(所述的質(zhì)量百分比是指氫氧化鈉的質(zhì)量占?xì)溲趸c總質(zhì)量的百分比)，過(guò)濾得沉淀，用甲醇重結(jié)晶，高效液相色譜法測(cè)定總生物堿含量為99.88%。經(jīng)HPLC測(cè)定，其重量百分比組成包括:原阿片堿:29.28%，延胡索乙素:23.83%，畢扣扣靈:8.52%，鹽酸巴馬汀:1.90%，夏無(wú)寧堿:29.71%，紫堇爾明:4.62%，其他堿2.02%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種夏天無(wú)總生物堿精制物，其特征在于:總生物堿精制物中各組分的重量百分比分別為:原阿片堿:15%?40% ;延胡索乙素:10%?40% ;畢扣扣靈:0?10% (不包括0);鹽酸巴馬汀:0.01%?2% ;紫堇爾明:2%?10% ;夏無(wú)寧堿:15%?30% ;其他生物堿及提取物:1%?5%。2.如權(quán)利要求1所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法，其特征在于:步驟1:以夏天無(wú)的塊莖、粉碎、堿化，得到堿化后的夏天無(wú)，所述的堿與所述的夏天無(wú)的質(zhì)量比值為0.001 ?1 ; 步驟2:將步驟1得到的堿化后的夏天無(wú)，在超臨界C02萃取和膜分離相耦合的萃取儀中進(jìn)行萃取和分離，干燥，得到所述的夏天無(wú)總生物堿精制物。3.如權(quán)利要求2所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法，其特征在于:步驟1中，所述的粉碎，為粉碎至夏天無(wú)的粒徑為10目?60目； 和/或， 步驟1中，所述的堿化，采用無(wú)機(jī)堿進(jìn)行堿化； 和/或， 步驟1所述的堿化中，所述的堿與所述的夏天無(wú)的質(zhì)量比值為0.001?0.1。4.如權(quán)利要求3所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法，其特征在于:步驟1中，所述的無(wú)機(jī)堿為氨水溶液、氫氧化鈣、碳酸鈉和碳酸氫鈉中的一種或多種；當(dāng)采用氨水溶液進(jìn)行堿化時(shí)，所述的氨水溶液的質(zhì)量濃度為1%?10%，所述的質(zhì)量濃度是指氨氣的質(zhì)量占氨水溶液總質(zhì)量的百分比。5.如權(quán)利要求2所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法，其特征在于:步驟2中，所述的萃取和分離的時(shí)間為0.5?5h ; 和/或， 步驟2中，所述的萃取和分離時(shí)采用的夾帶劑為甲醇和/或乙醇； 和/或， 步驟2中，所述的“超臨界C02萃取和膜分離相耦合的萃取儀”中的膜為超濾膜、納濾膜、反滲透膜或中空纖維膜。6.如權(quán)利要求2所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法，其特征在于:所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法還包括步驟3，步驟3:將步驟2得到的夏天無(wú)總生物堿精制物調(diào)節(jié)pH至2?5，采用超聲波萃取，然后采用超濾或微濾膜過(guò)濾，得到純化后的夏天無(wú)總生物堿精制物的溶液。7.如權(quán)利要求6所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法，其特征在于:步驟3中，所述的超聲波萃取的頻率為30Hz?80Hz ； 和/或， 步驟3中，所述的超聲波萃取的時(shí)間為0.5小時(shí)?3小時(shí)； 和/或， 步驟3中，所述的超濾或微濾膜的孔徑為0.3微米?0.8微米； 和/或， 步驟3中，所述的調(diào)節(jié)pH用酸進(jìn)行調(diào)節(jié)，所述的酸為無(wú)機(jī)酸和/或有機(jī)酸。8.如權(quán)利要求7所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法，其特征在于:步驟3中，所述的無(wú)機(jī)酸為鹽酸； 和/或， 步驟3中，所述的有機(jī)酸為酒石酸； 和/或， 步驟3中，所述的酸以其水溶液的形式使用，當(dāng)所述的酸以其水溶液的形式使用時(shí)，所述的酸的水溶液的質(zhì)量百分濃度為1%?10% ;所述的質(zhì)量百分比是指酸的質(zhì)量占酸的水溶液總質(zhì)量的百分比；所述的酸的水溶液與所述的步驟2得到的夏天無(wú)總生物堿精制物的體積比值為5?10 ; 和/或， 步驟3包括干燥的步驟，將所述的純化后的夏天無(wú)總生物堿精制物的溶液干燥得到純化后的夏天無(wú)總生物堿精制物。9.如權(quán)利要求6所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法，其特征在于:所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法還包括步驟4，步驟4:將步驟3得到的夏天無(wú)總生物堿精制物的溶液調(diào)節(jié)pH為8?12，過(guò)濾，固相用水洗至中性，得到進(jìn)一步純化后的夏天無(wú)總生物堿精制物。10.如權(quán)利要求9所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法，其特征在于:步驟4中，所述的pH為9?11 ;和/或，步驟4中，所述的調(diào)節(jié)pH采用無(wú)機(jī)堿進(jìn)行調(diào)節(jié)。11.如權(quán)利要求10所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法，其特征在于:步驟4中，所述的無(wú)機(jī)堿為氣氧化鈉或氣氧化鉀； 和/或， 步驟4中，所述的無(wú)機(jī)堿以其水溶液的形式使用，當(dāng)所述的無(wú)機(jī)堿以其水溶液的形式使用時(shí)，所述的無(wú)機(jī)堿的水溶液的質(zhì)量濃度為3%?15%;所述的質(zhì)量濃度是指無(wú)機(jī)堿的質(zhì)量占無(wú)機(jī)堿水溶液總質(zhì)量的百分比； 和/或， 步驟4包括干燥的步驟。12.如權(quán)利要求9所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法，其特征在于:所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法還包括步驟5，步驟5:將步驟4得到的進(jìn)一步純化后的夏天無(wú)總生物堿精制物重結(jié)晶，得到重結(jié)晶后的夏天無(wú)總生物堿精制物。13.如權(quán)利要求12所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法，其特征在于:步驟5中，所述的重結(jié)晶采用的溶劑為醇類溶劑和/或鹵代烴類溶劑。14.如權(quán)利要求13所述的夏天無(wú)總生物堿精制物的制備方法，其特征在于:步驟5中，所述的醇類溶劑為甲醇和/或乙醇； 和/或， 步驟5中，所述的鹵代烴類溶劑為氯代烴類溶劑，優(yōu)選氯仿。15.一種藥物組合物，其特征在于:含有治療有效量的如權(quán)利要求1所述的夏天無(wú)總生物堿精制物和藥學(xué)上可接受的載體；所述的治療有效量?jī)?yōu)選質(zhì)量百分比為0.1%?99.9%，所述的質(zhì)量百分比是指所述的夏天無(wú)總生物堿的精制物占藥物組合物總質(zhì)量的百分比。16.如權(quán)利要求1所述的夏天無(wú)總生物堿精制物或者如權(quán)利要求15所述的藥物組合物，在制備治療和/或預(yù)防腦缺血或再灌注造成的神經(jīng)元細(xì)胞損傷的疾病的藥物中的應(yīng)用。17.如權(quán)利要求16所述的應(yīng)用，其特征在于:所述的腦缺血或再灌注造成的神經(jīng)元細(xì)胞損傷的疾病包括腦血栓和腦卒中。
【專利摘要】本發(fā)明公開了夏天無(wú)總生物堿精制物、制備方法、藥物組合物及應(yīng)用。本發(fā)明提供了夏天無(wú)總生物堿精制物，總生物堿精制物中各組分的重量百分比分別為：原阿片堿：15％～40％；延胡索乙素：10％～40％；畢扣扣靈：0～10％；鹽酸巴馬?。?.01％～2％；紫堇爾明：2％～10％；夏無(wú)寧堿：15％～30％；其他生物堿及提取物：1％～5％。本發(fā)明建立了更科學(xué)高效的高純度的夏天無(wú)總生物堿提取方法，該方法高效、簡(jiǎn)便易行，制備的夏天無(wú)總生物堿精制物的HPLC純度大于98％，能更安全有效的發(fā)揮夏天無(wú)總生物堿的藥理藥效。
【IPC分類】A61K36/66, A61P25/00, A61P9/10
【公開號(hào)】CN105311119
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410380316
【發(fā)明人】楊義芳, 黃春躍
【申請(qǐng)人】上海醫(yī)藥工業(yè)研究院, 中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)研究總院
【公開日】2016年2月10日
【申請(qǐng)日】2014年8月4日