一種蕓香草提取物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及植物提取物領(lǐng)域，具體涉及一種蕓香草提取物及其制備方法和醫(yī)藥用 途。
【背景技術(shù)】
[0002] 蕓香草為禾本科植物蕓香草的全草。夏末秋初割取地上部分，曬干或晾干。又名 諸葛草（《種子植物名稱》），香茅筋骨草、小香茅草（《四川中藥志》），茅草筋骨（《重慶 草藥》），香茅草、臭草、韭葉蕓香草、射香草、細(xì)葉茅草、野蕓香草（《云南中草藥》），石灰草 (《昆明民間常用草藥》）。
[0003] 原植物形態(tài)為多年生草本。桿較細(xì)弱，叢生，高40~160厘米，直立，近無(wú)毛，節(jié)部 膨大。葉鞘無(wú)毛，基部者多破裂，上部者短于節(jié)間；葉舌鈍圓，長(zhǎng)2~4毫米，膜質(zhì)，先端多 不規(guī)則的破裂；葉片狹線形；長(zhǎng)30~70厘米，寬1~6毫米，兩面近無(wú)毛，具白粉。偽圓錐 花序稀疏，狹窄，長(zhǎng)15~45厘米；總狀花序?qū)\生，成熟后極叉開或向后叉開，帶黑紫色，長(zhǎng) 15~30毫米，具3~5節(jié)，其下托以佛焰苞；穗軸節(jié)間長(zhǎng)約3毫米，邊緣被白色短柔毛；同 性對(duì)小穗有柄者完全退化，或僅存一發(fā)育不良的穎，其柄具白色柔毛；無(wú)柄小穗呈長(zhǎng)圓狀披 針形，基盤具白色短毛；第1穎端具2微齒；第2顆舟形，先端急尖或具小尖頭；第1外稃約 較穎短1/3,先端稍鈍；第2外稃長(zhǎng)約為穎之半，極狹，先端具2裂齒；芒從齒間伸出，長(zhǎng)約12 毫米，中部膝曲；內(nèi)稃缺如；雄蕊3,花藥長(zhǎng)2. 5毫米?；?、果期9~10月。生長(zhǎng)于山坡草地。 分布甘肅、陜西、四川、貴州、云南等地。產(chǎn)于四川。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種蕓香草提取物，該提取物的制備方法和液相分析方 法，含有該提取物的藥物制劑及利用該提取物制備降血脂藥物的用途。
[0005] 本發(fā)明的上述目的是通過(guò)下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0006] -種蕓香草提取物，該提取物由以下方法制備：
[0007] (a)以重量計(jì)，每100份藥材包含干燥的蕓香草80~90份和干燥的黃芪10~20 份，混合粉碎；(b)用乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液；（c)對(duì)步驟 (b)濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸 乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（d)正丁醇萃取物用大孔樹脂富集，先用15~25%乙醇沖洗 8~10個(gè)柱體積除去大極性雜質(zhì)，再用60~70%乙醇洗脫8~10個(gè)柱體積，收集60~ 70%乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。
[0008] 進(jìn)一步地，步驟（d)中所述大孔樹脂為AB-8型大孔樹脂。
[0009] 進(jìn)一步地，步驟（b)中所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為70~80%。
[0010] 進(jìn)一步地，步驟（b)中所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為75%。
[0011] 進(jìn)一步地，步驟（d)為用正丁醇萃取物用大孔樹脂富集，先用20%乙醇沖洗9個(gè)柱 體積除去大極性雜質(zhì)，再用65 %乙醇洗脫9個(gè)柱體積，收集65 %乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴 霧干燥。
[0012] 為了能夠通過(guò)建立HPLC指紋圖譜的方法控制不同批次藥材制備的蕓香草提取物 批間差異，所述提取物的液相分析方法為：
[0013] 色譜柱：Agilent Zorbax Extent C18 柱（4. 6mmX 250mm，5 μ m);
[0014] 流動(dòng)相：A為甲醇，B為0.1%甲酸水溶液；
[0015] 梯度洗脫程序

[0016]
[0017] 流動(dòng)相流速：1. OmL · min S
[0018] 檢測(cè)波長(zhǎng)：260nm;
[0019] 柱溫：30°C ;
[0020] 進(jìn)樣量：10 μ L。
[0021] 藥物制劑，含有治療有效量的所述蕓香草提取物和藥學(xué)上可接受的載體。
[0022] 所述的蕓香草提取物在制備降血脂的藥物中的應(yīng)用。
[0023] 所述的藥物制劑在制備降血脂的藥物中的應(yīng)用。
[0024] 本發(fā)明提取物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物制劑的形式使用。
[0025] 所述藥物制劑含有治療有效量的本發(fā)明蕓香草提取物，其余為藥物學(xué)上可接受 的、對(duì)人和動(dòng)物無(wú)毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0026] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物制劑以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明提取物可 通過(guò)口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無(wú)菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
[0027] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明通過(guò)對(duì)蕓香草藥材進(jìn)行提取、除雜、富集處理，能得到降血 脂的提取物；本發(fā)明提供的液相分析方法可以用于建立該提取物的指紋圖譜，用于控制不 同產(chǎn)地、批次藥材制備的提取物的批間差異。
【附圖說(shuō)明】
[0028] 圖1為蕓香草提取物HPLC液相圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0029] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0030] 實(shí)施例1 :蕓香草提取物制備（85份蕓香草，15份黃芪）
[0031] 藥材來(lái)源：蕓香草和黃芪購(gòu)自安徽亳州中藥材市場(chǎng)。經(jīng)鑒定，蕓香草為禾本科植物 蕓香草的全草。
[0032] 主要試劑：食品級(jí)乙醇購(gòu)自上海凌峰化學(xué)試劑有限公司；醫(yī)藥級(jí)ΑΒ-8大孔樹脂購(gòu) 自天津波鴻樹脂有限公司；甲醇為HPLC級(jí)，購(gòu)于TEDIA ;甲酸為HPLC級(jí)，購(gòu)于TEDIA ;色譜 用純凈水為哇哈哈純凈水。
[0033] 將8. 5kg干燥的蕓香草和1.5kg干燥黃芪混合粉碎，用75 %乙醇熱回流提取 (25LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液^L);對(duì)濃縮液依次用石油醚（6LX3 次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔樹脂 (2kg，柱體積1. 5L)富集，先用20%乙醇沖洗9個(gè)柱體積（12L)，再用65%乙醇洗脫9個(gè)柱 體積（15L)，收集65%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得蕓香草提取物浸膏粉約155g。
[0034] 實(shí)施例2 :蕓香草提取物②制備（80份蕓香草，20份黃芪）
[0035] 制備方法：將8. 0kg干燥的蕓香草和2. 0kg干燥黃芪混合粉碎，用75%乙醇熱回 流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液（6L);對(duì)濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔 樹脂（2kg，柱體積1. 5L)富集，先用20 %乙醇沖洗9個(gè)柱體積（12L)，再用65 %乙醇洗脫9 個(gè)柱體積（15L)，收集65%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得蕓香草提取物浸膏粉約155g。
[0036] 實(shí)施例3 :蕓香草提取物③制備（90份蕓香草，10份黃芪）
[0037] 制備方法：將9. 0kg干燥的蕓香草和1. 0kg干燥黃芪混合粉碎，用75%乙醇熱回 流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液（6L);對(duì)濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔 樹脂（2kg，柱體積1. 5L)富集，先用20 %乙醇沖洗9個(gè)柱體積（12L)，再用65 %乙醇洗脫9 個(gè)柱體積（15L)，收集65%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得蕓香草提取物浸膏粉約155g。
[0038] 實(shí)施例4 :蕓香草提取物④制備（75份蕓香草，25份黃芪）
[0039] 制備方法：將7. 5kg干燥的蕓香草和2. 5kg干燥黃芪混合粉碎，用75%乙醇熱回 流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液（6L);對(duì)濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔 樹脂（2kg，柱體積1. 5L)富集，先用20 %乙醇沖洗9個(gè)柱體積（12L)，再用65 %乙醇洗脫9 個(gè)柱體積（15L)，收集65%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得蕓香草提取物浸膏粉約155g。
[0040] 實(shí)施例5 :蕓香草提取物⑤制備（95份蕓香草，5份黃芪）
[0041] 制備方法：將9. 5kg干燥的蕓香草和0. 5kg干燥黃芪混合粉碎，用75%乙醇熱回 流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液（6L);對(duì)濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔 樹脂（2kg，柱體積1. 5L)富集，先用20 %乙醇沖洗9個(gè)柱體積（12L)，再用65 %乙醇洗脫9 個(gè)柱體積（15L)，收集65%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得蕓香草提取物浸膏粉約155g。
[0042] 實(shí)施例6 :液相色譜分析
[0043] 供試品溶液配制：取實(shí)施例1方法制得的提取物浸膏粉5mg至50mL棕色容量瓶 中，加30mL 25 %甲醇水溶液超聲溶解，冷卻至室溫后，繼續(xù)加25 %甲醇水溶液定容。
[0044] 分析方法：
[0045] 高效液相色譜儀：Agilent 1100,二元栗；
[0046] 色譜柱：Agilent Zorbax Extent C18 柱（4. 6mmX 250mm，5 μ m);
[0047] 流動(dòng)相：A為甲醇，B為0.1%甲酸水溶液；
[0048] 梯度洗脫程序

[0050] 流動(dòng)相流速：1. OmL · min S
[0051] 檢測(cè)波長(zhǎng)：260nm;
[0052] 柱溫：30°C ;進(jìn)樣量：10 μ L。
[0053] 對(duì)用10批不同批次蕓香草制備的提取物進(jìn)行分析，建立指紋圖譜進(jìn)行匹配，結(jié)果 1~10號(hào)峰在10批樣品色譜圖中均出現(xiàn)。因此標(biāo)定10個(gè)峰為共有指紋峰，據(jù)此建立該提 取物的HPLC指紋圖譜，結(jié)果見圖1。
[0054] 實(shí)施例7 :蕓香草提取物藥理試驗(yàn)
[0055] 一、材料
[0056] 1. 1受試物與試劑：蕓香草提取物①~⑤分別按照實(shí)施例1~5制得，試驗(yàn)前制成 混懸液，用時(shí)搖