物及其制劑的藥品質(zhì)量的目的。
[0018] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述高效液相色譜分析采用下列條件：采用甲醇-0.1%甲 酸體系進行梯度洗脫，色譜柱為WatersACQUITYBEH C18 (2. ImmX 100mm，1. 7微米），柱溫為 25攝氏度，流速為0. 2ml/min ;進樣量：1微升，檢測波長為330nm，洗脫條件：
[0019]
[0020] 在上述色譜條件下，色譜峰可以達到很好的分離效果，從而有效測定廣金錢草中 有效成分的含量。根據(jù)本發(fā)明的實施例，上述液相色譜分析條件下的測定廣金錢草中有效 成分的含量的方法具有高穩(wěn)定性和準確性的特點。
[0021] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述總黃酮提取物是以樣品溶液的形式提供的，所述樣品 溶液中，所述Vicenin-I在1. 220~61. 018微克/毫升的范圍內(nèi)，所述夏佛塔苷在4. 266~ 213. 305微克/毫升的范圍內(nèi)、所述Vicenin-3在3. 371~168. 559微克/毫升的范圍內(nèi)， 所述有效成分的濃度變化與峰面積呈線性關系。發(fā)明人經(jīng)過多次試驗摸索驚奇地發(fā)現(xiàn)，在 該濃度范圍內(nèi)，夏佛塔苷、Vicenin-I和Vicenin-3濃度的變化與響應信號的線性關系好， 測得的含量更接近實際值。
[0022] 綜上，本發(fā)明以廣金錢草總黃酮提取物或制劑中有效活性成分且含量較高、易得 的夏佛塔苷作為內(nèi)標物，計算夏佛塔苷與Vicenin-1、Vicenin-3的相對校正因子，將其作 為常數(shù)，同時測定廣金錢草總黃酮提取物或制劑中Vicenin-1、Vicenin-3和夏佛塔苷的含 量，實現(xiàn)科學、靈敏、快速地監(jiān)控工業(yè)生產(chǎn)中廣金錢草總黃酮提取物或制劑中的質(zhì)量，克服 了對照品短缺這一問題，即只測定某個代表性成分（易得、廉價、有效），同時可計算出其他 待測有效成分的含量。
【附圖說明】
[0023] 本發(fā)明的上述和/或附加的方面和優(yōu)點從結合下面附圖對實施例的描述中將變 得明顯和容易理解，其中：
[0024] 圖1是根據(jù)本發(fā)明實施例3的對照品紫外掃描圖；
[0025] 圖2顯示本發(fā)明的一個實施例中廣金錢草總黃酮提取物的供試品溶液在272nm和 330nm處的疊加色譜圖；
[0026] 圖3顯示根據(jù)本發(fā)明實施例4的廣金錢草總黃酮提取物的樣品色譜圖；
[0027] 圖4顯示根據(jù)本發(fā)明實施例7的Vicenin-I線性關系圖；
[0028] 圖5顯示根據(jù)本發(fā)明實施例7的夏佛塔苷線性關系圖；
[0029] 圖6顯示根據(jù)本發(fā)明實施例7的Vicenin-3線性關系圖；
[0030] 圖7顯示本發(fā)明的一個實施例中的廣金錢草總黃酮提取物在柱溫20°C下的色譜 行為；
[0031] 圖8顯示本發(fā)明的一個實施例中的廣金錢草總黃酮提取物在柱溫25°C下的色譜 行為；
[0032] 圖9顯示本發(fā)明的一個實施例中的廣金錢草總黃酮提取物在柱溫30°C下的色譜 行為；
[0033] 圖10顯示本發(fā)明的一個實施例中廣金錢草總黃酮提取物在甲醇-0.05%甲酸水 溶液的流動相中色譜行為；
[0034] 圖11顯示本發(fā)明的一個實施例中廣金錢草總黃酮提取物在甲醇-0. 1%甲酸水溶 液的流動相中色譜行為；
[0035] 圖12顯示本發(fā)明的一個實施例中廣金錢草總黃酮提取物在甲醇-0. 2%甲酸水溶 液的流動相中色譜行為；
[0036] 圖13顯示本發(fā)明的一個實施例中廣金錢草總黃酮提取物在Waters BEH C18 (2. ImmX 100mm，L 8微米）色譜柱中的色譜行為；
[0037] 圖14顯示本發(fā)明的一個實施例中廣金錢草總黃酮提取物在資生堂Capell core C18 (2. ImmX 100mm，2. 7微米）色譜柱中的色譜行為；以及
[0038] 圖15顯示本發(fā)明的一個實施例中廣金錢草總黃酮提取物在島津Shim-pack XR-ODS II (2. OmmX 75mm，2. 2微米）色譜柱中的色譜行為。
【具體實施方式】
[0039] 下面詳細描述本發(fā)明的實施例，所述實施例的示例在附圖中示出，其中自始至終 相同或類似的標號表示相同或類似的元件或具有相同或類似功能的元件。下面通過參考附 圖描述的實施例是示例性的，僅用于解釋本發(fā)明，而不能理解為對本發(fā)明的限制。
[0040] 需要說明的是，術語"第一"、"第二"僅用于描述目的，而不能理解為指示或暗示相 對重要性或者隱含指明所指示的技術特征的數(shù)量。由此，限定有"第一"、"第二"的特征可 以明示或者隱含地包括一個或者更多個該特征。進一步地，在本發(fā)明的描述中，除非另有說 明，"多個"的含義是兩個或兩個以上。
[0041] 下面將結合實施例對本發(fā)明的方案進行解釋。本領域技術人員將會理解，下面的 實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應視為限定本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體技術或條 件的，按照本領域內(nèi)的文獻所描述的技術或條件或者按照產(chǎn)品說明書進行。所用試劑或儀 器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
[0042] 實施例1儀器與試藥
[0043] Waters UPLC H-class 超高效液相色譜儀；Waters ACQUITYBEH 018(2.1111111\10〇111111，1.7微米）；資生堂〇&。611。〇代〇 18(2.1111111\10〇111111，2.7微米）；島津 Shim-pack XR-ODS 11(2. OmmX 75mm，2.2微米），CQ250超聲波儀（上海超聲波儀器廠）；梅 特勒-多倫多XP205型分析天平；梅特勒-多倫多XS204型分析天平；9個對照品如下表1 所示。
[0044] 表1對照品信息
[0045]
[0047] 所有自制對照品均為Waters制備液相獲得，使用前五氧化二磷減壓干燥12h ;甲 醇為色譜純，水為Millipore超純水，其余試劑均為分析純。
[0048] 實施例2樣品
[0049] 分別采集十個不同產(chǎn)地的廣金錢草藥材，制得十個批次的廣金錢草總黃酮提取 物，信息如下表2。
[0050] 表2十批次廣金錢草總黃酮提取物及其廣金錢草原藥材產(chǎn)地來源
[0051]
[0052] 實施例3色譜條件的考察
[0053] 3. 1檢測波長的選擇：取廣金錢草總黃酮提取物、夏佛塔苷及其余八種自制對照 品適量，分別于75 %乙醇中超聲溶解，在210~400nm進行全波長紫外掃描，在270nm和 330nm處有最大吸收，但通過比較這兩個波長下的供試品色譜圖，發(fā)現(xiàn)330nm處雜質(zhì)干擾較 小，故選擇330nm作為檢測波長。紫外掃描色譜圖見圖1，供試品溶液在272nm和330nm處 的疊加色譜圖見圖2。
[0054] 其中在圖1中，1為DS-I全波長掃描色譜圖，2為DS-3全波長掃描色譜圖，3為 DS-4全波長掃描色譜圖，4為DS-5全波長掃描色譜圖，5為DS-8全波長掃描色譜圖，6為 DS-Il全波長掃描色譜圖，7為DS-14全波長掃描色譜圖，8為DS-15全波長掃描色譜圖，9 為DS-2全波長掃描色譜圖。
[0055]3. 2 洗脫條件：采用 Waters ACQUITYBH1 C18 (2. ImmX 100mm，L 7 微米）色譜柱，通 過比較甲醇-0. 1 %甲酸水溶液、乙腈-0. 1 %甲酸水溶液、甲醇-乙腈-0. 1 %甲酸水溶液、 甲醇-0.1 %磷酸水溶液等體系發(fā)現(xiàn)，廣金錢草總黃酮提取物在甲醇-0.1%甲酸水溶液的 體系中，得到的色譜峰較多，分離度較好，因此選擇甲醇-〇. 1 %甲酸水溶液體系進行梯度洗 脫，柱溫：25°C ;流速：0. 2ml/min，進樣量：1 y L，檢測波長：330nm ;梯度條件見下表3 :
[0056] 表3 :廣金錢草總黃酮提取物梯度洗脫條件
[0057]

[0058] 實施例4 "一測多評"指標的確定
[0059] 通過UPLC-