兒茶素類化合物在制備治療高尿酸血癥藥物中的新用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于化學(xué)醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種兒茶素類化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽 在制備治療高尿酸血癥藥物中的應(yīng)用，以及一種可治療高尿酸血癥以及痛風(fēng)的藥物組合 物。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來，隨著人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，糖、脂肪、蛋白質(zhì)的攝入量 明顯增加，高尿酸血癥和痛風(fēng)的發(fā)病率日益增高，己成為一種常見病。
[0003] 一般認(rèn)為血尿酸416ymol/L時(shí)為高尿酸血癥，約5% -12%高尿酸血癥患者會(huì)發(fā) 展成為痛風(fēng)。臨床特點(diǎn)是：痛風(fēng)性急性關(guān)節(jié)炎反復(fù)發(fā)作、痛風(fēng)石沉積、特征性慢性關(guān)節(jié)炎和 關(guān)節(jié)畸形，常累及腎臟引起慢性間質(zhì)性腎炎和腎尿酸結(jié)石形成。痛風(fēng)的急性發(fā)作是尿酸鈉 (monosodiumuratecrystal，MSU)在關(guān)節(jié)及關(guān)節(jié)周圍組織以結(jié)晶形式沉積引起的急性炎 癥反應(yīng)。痛風(fēng)不僅可以侵犯骨和關(guān)節(jié)，而且還容易累及腎臟和心血管系統(tǒng)。高尿酸血癥及 原發(fā)性痛風(fēng)與肥胖癥、高脂血癥、高血壓病、糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病呈顯著正相關(guān)。因 此，高尿酸血癥是危害人類健康的一種嚴(yán)重的代謝性疾病。適當(dāng)控制血液中的尿酸值是預(yù) 防、改善以痛風(fēng)為代表的高尿酸血癥的根本。
[0004] 目前，對血液中尿酸的控制主要是通過以下兩種途徑實(shí)現(xiàn)的：（1)抑制尿酸的生 成。尿酸是由次黃嘌呤和黃嘌呤經(jīng)黃嘌呤氧化酶的作用而生成的，而黃嘌呤氧化酶是催化 上述反應(yīng)、進(jìn)而生成尿酸所必須的酶，因此，抑制黃噪呤氧化酶（xanthineoxidase,X0)活 性可有效的抑制尿酸的形成，進(jìn)而起到治療痛風(fēng)等癥狀的作用。目前常用的抑制尿酸生成 的藥物有別嘌呤醇、非布索坦等；（2)促進(jìn)尿酸的排泄。目前常用的促進(jìn)尿酸排泄的藥物有 丙磺舒、苯溴馬龍等。
[0005] 上述兩種方式均可起到降低血液中尿酸的作用，進(jìn)而對高尿酸血癥引發(fā)的痛風(fēng)、 關(guān)節(jié)炎、皮下痛風(fēng)結(jié)石、腎臟結(jié)石或痛風(fēng)性腎病等病癥產(chǎn)生療效，但是上述藥物毒副作用通 常較大，例如，別嘌呤醇可引發(fā)變態(tài)反應(yīng)（發(fā)病率10-15%)、超敏綜合癥、骨髓抑制等嚴(yán)重 的毒副作用；丙磺舒、苯溴馬隆則具有刺激胃腸道、引發(fā)腎絞痛、激發(fā)痛風(fēng)急性發(fā)作等副作 用，在一定程度上限制了這些藥物的臨床應(yīng)用。
[0006] 兒茶素是在植物中廣泛存在的一種化合物，根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道["Inhibition ofXanthineOxidasebyCatechinsfromTea(CameIliasinensis)'，， 1997,vol. 17,p. 4381-4385]，兒茶素具有一定的黃嘌呤氧化酶抑制活性，其結(jié)果顯示在 底物濃度設(shè)置為米氏常數(shù)Km時(shí)，實(shí)驗(yàn)中5種兒茶素和表兒茶素抑制常數(shù)Ki的值分別為 303. 95microM(兒茶素C)，20. 48microM(表兒茶素EC)，10. 66microM(表沒食子兒茶素 EGC)，2. 86micr〇M(表兒茶素沒食子酸酯ECG)，0. 76micr〇M(表沒食子兒茶素沒食子酸酯 EGCG)，而陽性對照別嘌呤醇的Ki值為0. 30microM。該結(jié)果表明除了兒茶素C的黃嘌呤氧 化酶活性不佳，其余幾種表兒茶素類均表現(xiàn)出較好的抑制活性，且EGCG為該5種化合物中 抑制活性最佳的化合物。本發(fā)明選擇對活性不佳的兒茶素進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，獲得了強(qiáng)于表兒 茶素類化合物的抑制效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種兒茶素類化合物及其藥學(xué)上可接受的 鹽用于制備治療高尿酸血癥藥物的用途，以及一種可治療高尿酸血癥和痛風(fēng)的藥物組合 物。
[0008] 本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
[0009] -種具有如式（I)所示結(jié)構(gòu)的沒食子兒茶素及其藥學(xué)上可接受的鹽在制備治療 高尿酸血癥藥物中的用途，
[0010]
[0011] 一種具有如式（II)所示結(jié)構(gòu)的兒茶素沒食子酸酯及其藥學(xué)上可接受的鹽在制備 治療高尿酸血癥藥物中的用途，
[0012]
[0013] -種具有如式（III)所示結(jié)構(gòu)的沒食子兒茶素沒食子酸酯及其藥學(xué)上可接受的 鹽在制備治療高尿酸血癥藥物中的用途，
[0014]
[0015] 本發(fā)明還提供一種用于治療高尿酸血癥的藥物組合物，所述藥物組合物中含有本 發(fā)明所述的沒食子兒茶素、兒茶素沒食子酸酯或沒食子兒茶素沒食子酸酯及其藥學(xué)上可接 受的鹽。
[0016] 所述藥物組合物還包括藥學(xué)上可以接受的載體。
[0017] 所述藥物組合物添加常規(guī)輔料、按照常規(guī)工藝制成臨床可接受的片劑、膠囊劑、軟 膠囊劑、口服液劑、散劑、滴丸劑、顆粒劑或注射劑。
[0018] 所述高尿酸血癥包括高尿酸血癥引起的痛風(fēng)及痛風(fēng)并發(fā)癥。
[0019] 所述痛風(fēng)并發(fā)癥包括痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)性腎病、尿路結(jié)石或心血管疾病。
[0020] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：
[0021] 本發(fā)明所述兒茶素類化合物GC、CG、GCG不僅對黃嘌呤氧化酶顯示出較強(qiáng)的體外 抑制作用，還可明顯降低患有高尿酸血癥小鼠的血清尿酸水平，且無毒副作用、安全性高， 因此可作為潛在的黃嘌呤氧化酶抑制劑和降尿酸藥物用于高尿酸血癥和高尿酸血癥引起 的痛風(fēng)或痛風(fēng)并發(fā)癥的治療。更為突出的是，本發(fā)明所述兒茶素類化合物沒食子兒茶素GC、 兒茶素沒食子酸酯CG及沒食子兒茶素沒食子酸酯GCG的體外和體內(nèi)活性作用均顯著優(yōu)于 文獻(xiàn)報(bào)道的幾種表兒茶素類化合物。
【具體實(shí)施方式】
[0022] 為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例，對本發(fā)明 進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限 定本發(fā)明。
[0023] 兒茶素C，表兒茶素EC，表沒食子兒茶素EGC，表兒茶素沒食子酸酯ECG，表沒食子 兒茶素沒食子酸酯EGCG均為純度大于98 %的合格產(chǎn)品。
[0024] 實(shí)施例1沒食子兒茶素GC的制備及表征
[0025] 取IOg表沒食子兒茶素（EGC)溶解于lOOOmLMcIlvaine緩沖液（pH5. 0)中，置 于高壓反應(yīng)釜中，120°C反應(yīng)30分鐘，反應(yīng)結(jié)束后取樣，高效液相色譜分析結(jié)果表明，轉(zhuǎn)化 率為62 % ;反應(yīng)液濃縮后，使用制備HPLC進(jìn)行分離純化（C18色譜柱5U，50*500mm)，用 10% -95%的乙醇梯度洗脫，收集純度高于94%的GC組分，濃縮除去部分乙醇，加3倍量的 后水繼續(xù)濃縮，待溶液變混濁時(shí)，停止?jié)饪s放置過夜析晶，過濾，晶體冷凍干燥后得到純度 為99. 3%的單體化合物沒食子兒茶素（GC)。對其進(jìn)行檢測及表征數(shù)據(jù)如下：
[0026]GCC15H1407m/z:305. 06[M_H]_
[0027] 1H-匪R(acetone-d6, 400MHz)S:4. 47 (1H，d，J= 7. 8Hz，H-2)，3. 96(1H，m，J =5. 3, 7. 8Hz，8. 1Hz，H-3)，2. 51 (1H，dd，J= 16. 0, 8. 1Hz，H-4a)，2. 89 (1H，dd，J =16. 0, 5. 3Hz,H-4b), 6. 02(1H,d,J= 2. 3Hz,H-6) , 5. 87(1H,d,J= 2. 3Hz,H-8)，6. 47 (2H,s,H-2'，6'）
[0028] 13C-NMR(acetone-d6, 100MHz) 8 ： 28. 0, 68. 7, 82. 7, 95. 5, 96. 2, 100. 7, 107.I, 131. 5, 133. 9, 146. 8, 156. 7, 157. 6.
[0029] 實(shí)施例2兒茶素沒食子酸酯CG的制備及表征
[0030] 取IOg表兒茶素沒食子酸酯（ECG)溶解于1000 mLMcIIvaine緩沖液（pH5. 0)中， 置于高壓反應(yīng)釜中，120°C反應(yīng)30分鐘，反應(yīng)結(jié)束后取樣，高效液相色譜分析結(jié)果表明，轉(zhuǎn) 化率為56%;反應(yīng)液濃縮后，使用制備HPLC進(jìn)行分離純化（C18色譜柱5U，50*500mm)，用 20% -95%的乙醇梯度洗脫，收集純度高于94%的CG組分，濃縮除去部分乙醇，加3倍量的 后水繼續(xù)濃縮，待溶液變混濁時(shí)，停止?jié)饪s放置過夜析晶，過濾，晶體冷凍干燥后得到純度 為98. 9%的單體化合物兒茶素沒食子酸酯（CG)。對其進(jìn)行檢測及表征數(shù)據(jù)如下：
[0031] CGC22Hls010m/z:441. 07[M-H]_
[0032] 1H-匪R(acetone-d6, 400MHz)S:5. 09 (1H，d，J= 6. 4Hz，H-2)，5. 35(1H，m，J =6. 4Hz,H-3) , 2. 73 (1H,dd,J=I6. 5, 6. 4Hz,H-4a) , 2. 9 4 (IH,dd,J= 16. 5, 5. 0Hz,H-4b),6. 07 (1H,d,J= 2. 3Hz,H-6),5. 98 (1H,d,J= 2. 3Hz,H-8),7. 04 (3H,s,H -2'，2"，6"），6.79(lH，s，H-5'），6.95(lH，s，H-6'）
[0033]13C-NMR(acetone-d6, 100MHz) 8 ： 24. 3, 71.I, 79. 2, 95. 6, 99. 6,HO. 2, 114. 4, 119. 2, 121. 3, 131. 4, 139. 8, 146. 2, 156. 4, 157. 6, 158. 0.
[0034] 實(shí)施例3沒食子兒茶素沒食子酸酯GCG的制備及表征
[0035] 取IOg表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG)溶解于lOOOmLMcIlvaine緩沖液 (pH5. 0)中，置于高壓反應(yīng)釜中，120°C反應(yīng)30分鐘，反應(yīng)結(jié)束后取樣，高效液相色譜分析 結(jié)果表明，轉(zhuǎn)化率為56. 5% ;反應(yīng)液濃縮后，使用制備HPLC進(jìn)行分離純化（C18色譜柱5U， 50*500mm)，用15 % -95 %的乙醇梯度洗脫，收集純度高于94 %的GCG組分，濃縮除去部分乙 醇，加3倍量的后水繼續(xù)濃縮，待溶液變混濁時(shí)，停止?jié)饪s放置過夜