口腔用組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種含有人防御素的口腔用組合物，該組合物對口腔內(nèi)細菌、特別是 作為牙周病原菌的牙齦卟啉單胞菌的殺菌效果和口腔內(nèi)的細胞損傷抑制效果優(yōu)異，可有效 預(yù)防、治療牙周病。
【背景技術(shù)】
[0002] 牙周病是以牙銀卟啉單胞菌（P. gingivalis)等厭氧革蘭氏陰性菌為主的細菌引 起的感染癥，由細菌產(chǎn)生的外毒素（白細胞毒素等）或內(nèi)毒素（脂多糖等）等誘發(fā)炎癥，損 傷組織。另一方面，在生物體內(nèi)，嗜中性粒細胞或淋巴細胞等浸潤到牙周袋或牙齦組織，在 吞噬細菌的同時，發(fā)生免疫應(yīng)答，通過產(chǎn)生特異性抗體來消除這些異物，但是近年來有人指 出，在吞噬時過多產(chǎn)生的活性氧進一步損傷生物組織。例如，如果構(gòu)成牙齦的成纖維細胞受 到活性氧損傷，則造成膠原蛋白纖維的破壞和細胞增殖能力的降低，因此牙齦萎縮，牙周病 進一步惡化。 因此，認為在牙周炎等牙周病的預(yù)防、治療中，在對口腔內(nèi)的牙周病原菌殺菌的同時， 抑制如上所述的口腔內(nèi)的細胞損傷是有效的，期望開發(fā)出一種提供兼?zhèn)溥@兩個效果的口腔 用組合物的技術(shù)。
[0003] 關(guān)于口腔內(nèi)的牙周病原性細菌的殺菌，已知作為來自宿主的多肽的人防御素 對各種口腔內(nèi)病原性細菌具有抗菌作用，對人體也是安全的。專利文獻1(日本專利特 開2001-288105號公報）中公開了人β防御素對作為牙周炎病原菌的伴放線放線桿菌 (Actinobacillus actinomycetemcomitans)具有很強的抗菌活性，對牙銀卟啉單胞菌 (Porphyromonas gingivalis)等牙周炎病原菌也具有抗菌活性，提出了一種含人β防御 素的牙膏劑。另外，專利文獻2(日本專利特開2009-155214號公報）提出了一種通過并用 人防御素和葡聚糖而提高了口腔內(nèi)生物膜抗菌效果的口腔用組合物。 然而，很難說人防御素對牙周病原性細菌具有充分的殺菌效果，所以提高殺菌力成為 課題。
[0004] 另一方面，關(guān)于口腔內(nèi)的細胞損傷抑制，已知抗壞血酸磷酸酯等抗壞血酸酯或其 鹽在消除生物體內(nèi)產(chǎn)生的過剩的活性氧而保護生物組織免受氧化應(yīng)激損傷的同時還抑制 炎癥，具有口腔內(nèi)細胞的損傷抑制效果，但其細胞損傷抑制效果還有改善的余地。另外，抗 壞血酸酯或其鹽對牙周病原菌不具有殺菌效果。 先行技術(shù)文獻 專利文獻
[0005] 專利文獻1 :日本專利特開2001-288105號公報 專利文獻2 :日本專利特開2009-155214號公報

【發(fā)明內(nèi)容】
發(fā)明所要解決的課題
[0006] 本發(fā)明鑒于上述情形而作，其目的在于提供一種口腔用組合物，其對口腔內(nèi)細菌、 特別是牙周病原菌的殺菌效果及口腔內(nèi)的細胞損傷抑制效果優(yōu)異，可有效預(yù)防、治療牙周 病。 解決課題的手段
[0007] 本發(fā)明人為了達到上述目的進行了深入研宄，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通過并用（A)人防御素 和（B)抗壞血酸酯或其鹽，對口腔內(nèi)細菌、特別是作為牙周病原菌的牙齦卟啉單胞菌（以下 縮寫為P.g.菌）的殺菌效果和口腔內(nèi)細胞損傷抑制效果顯著提高。
[0008] 即，雖然已知作為來自宿主的多肽的人防御素對牙周病原菌具有抗菌活性，對人 體是安全的成分，但本發(fā)明人對其殺菌效果進行研宄時發(fā)現(xiàn)存在其特別是對牙周病原菌 P.g.菌沒有充分的殺菌效果的問題。因此，為了解決該問題進行了進一步研宄，結(jié)果意外 地發(fā)現(xiàn)如果（A)人防御素與（B)抗壞血酸酯或其鹽、特別是與抗壞血酸磷酸酯、抗壞血酸硫 酸酯或其鹽組合，（A)、（B)成分特異且協(xié)同地發(fā)生作用，增強源于人防御素的口腔內(nèi)細菌殺 菌效果、特別是對上述牙周病原菌的殺菌效果，同時增強由來源于抗壞血酸酯或其鹽的氧 化應(yīng)激抑制產(chǎn)生的細胞損傷抑制效果，發(fā)揮優(yōu)異的口腔內(nèi)細菌殺菌效果及細胞損傷抑制效 果。進一步地，通過在口腔用組合物中混合（A)、（B)成分的混合系，可以發(fā)揮較高的口腔內(nèi) 細菌殺菌效果及細胞損傷抑制效果，獲得對牙周病的預(yù)防、治療有效的制劑。
[0009] 該情形下，如后述的比較例所示，人防御素的口腔內(nèi)細菌殺菌效果不充分，確認不 到細胞損傷抑制效果，此外抗壞血酸酯或其鹽的細胞損傷抑制效果不充分，確認不到口腔 內(nèi)細菌殺菌效果，但如實施例所示，本發(fā)明中，通過（A)、(B)成分的并用系，超越了（A)或者 (B)成分的單獨混合系的相加作用，增強了 口腔內(nèi)細菌殺菌效果及細胞損傷抑制效果。此 外，本發(fā)明的上述作用效果是（A)、（B)成分的并用系所特異具有的，是即使使用具有抗菌 作用的唾液蛋白質(zhì)組氨素代替（A)成分或者使用抗壞血酸鈉等抗壞血酸鹽代替（B)成分也 得不到的特別顯著的效果。
[0010] 因此，本發(fā)明提供下述口腔用組合物。 〔1〕一種口腔用組合物，其特征在于，含有（A)人防御素和（B)抗壞血酸酯或其鹽。 〔2〕如〔1〕所述的口腔用組合物，其中，（A)成分為人防御素 β-2或者人防御素 β-3。 〔3〕如〔1〕或者〔2〕所述的口腔用組合物，其中，（B)成分是選自抗壞血酸磷酸酯及其 鹽、抗壞血酸硫酸酯及其鹽中的1種以上。 〔4〕如〔3〕所述的口腔用組合物，其中，（B)成分為抗壞血酸磷酸酯鎂和/或抗壞血酸 磷酸酯鈉。 〔5〕如〔1〕~〔4〕的任一項所述的口腔用組合物，其含有0. 000005~0. 0005質(zhì)量％的 (A)成分和0. 1~2質(zhì)量％的⑶成分。 〔6〕如〔1〕~〔5〕的任一項所述的口腔用組合物，其中，（B)成分相對于（A)成分的質(zhì) 量比為200~400, 000倍量。 〔7〕如〔1〕~〔6〕的任一項所述的口腔用組合物，所述組合物為牙膏劑或者漱口劑。 〔8〕如〔1〕~〔7〕的任一項所述的口腔用組合物，所述組合物用于預(yù)防或者治療牙周 病。 發(fā)明的效果
[0011] 根據(jù)本發(fā)明，可以提供一種含有人防御素的口腔用組合物，其對口腔內(nèi)細菌、特別 是作為牙周病原菌的P. g.菌的殺菌效果和口腔內(nèi)的細胞損傷抑制效果優(yōu)異，且對人體是 安全的，可有效預(yù)防、治療牙周病。
【具體實施方式】
[0012] 以下對本發(fā)明進行進一步詳述。本發(fā)明的口腔用組合物的特征在于并用（A)人防 御素和（B)抗壞血酸酯或其鹽，通過這樣的并用系來特異并協(xié)同地提高口腔內(nèi)細菌殺菌效 果及細胞損傷抑制效果。
[0013] (A)人防御素中，有人防御素 α、作為人防御素 β的人防御素 β-l、人防御素 β -2、人防御素 β -3的種類，可以從其中選擇1種或者2種以上使用，特別從牙周病原菌的 殺菌效果方面考慮，優(yōu)選人防御素 β-2、人防御素 β-3。 人防御素可以使用市售品，例如可列舉多肽研宄所公司制的人防御素 β -2、Anygen公 司制的人防御素 β-3。
[0014] (A)人防御素的混合量優(yōu)選為整個組合物的0· 000005~0· 0005% (質(zhì)量％，下 同），特別是更優(yōu)選〇. 00005~0. 0005%。隨著混合量的增多，口腔內(nèi)細菌殺菌效果、細胞 損傷抑制效果提高，配入〇. 000005%以上適宜于表現(xiàn)出結(jié)果。此外，混合量過多時，不僅不 能預(yù)期最快的效果提高，有時還會出現(xiàn)異味，降低使用感，保持在〇. 0005%以下適宜于確保 良好的使用感。
[0015] (B)成分的抗壞血酸酯是抗壞血酸2、3、5、6位的任一個羥基中的1個或者2個以 上與磷酸、聚磷酸、硫酸、脂肪酸或者其他藥學(xué)上容許的化合物的酯。 作為抗壞血酸酯或其鹽，特別優(yōu)選抗壞血酸磷酸酯或其鹽、抗壞血酸硫酸酯或其鹽?？?壞血酸磷酸酯、抗壞血酸硫酸酯是抗壞血酸2、3、5、6位的任一個羥基中的1個或者2個以 上與磷酸、聚磷酸等磷酸化合物或者硫酸的酯，具體地，舉例有抗壞血酸-2-磷酸酯、抗壞 血酸-3-磷酸酯、抗壞血酸-6-磷酸酯、抗壞血酸-2-聚磷酸酯、抗壞血酸-2-硫酸酯。作 為其鹽，舉例有鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽等堿金屬鹽、堿土金屬鹽。作為（B)成分，可以使用選 自其中的1種或者2種以上，但從特別是作為口腔用物，對牙齦炎預(yù)防效果、尤其是細胞損 傷抑制效果方面出發(fā)，適宜使用抗壞血酸磷酸酯的鎂鹽、鈉鹽。
[0016] (B)抗壞血酸酯或其鹽的混合量優(yōu)選為整個組合物的0. 1~2%，更優(yōu)選0. 2~ 1%。隨著混合量的增多，口腔內(nèi)細菌殺菌效果、細胞損傷抑制效果提高，配入0. 1%以上適 宜于提高口腔內(nèi)細菌殺菌效果、細胞損傷抑制效果。此外，在2%以下適宜于提高口腔內(nèi)細 菌殺菌效果、確保良好的使用感?；旌线^多時，有時口腔內(nèi)細菌的殺菌效果下降。此外，有 時出現(xiàn)異味，使用感下降。
[0017] 本發(fā)明中，優(yōu)選（B)抗壞血酸酯或其鹽相對于（A)人防御素的質(zhì)量比在20倍量 以上，特別優(yōu)選200~400, 000倍量，更優(yōu)選400~200, 000倍量，進一步地優(yōu)選1，000~ 100, 000倍量，尤其優(yōu)選1，000~10, 000倍量的范圍，通過這樣的比例混合，可以更加提高 本發(fā)明的效果。
[0018] 本發(fā)明的口腔用組合物可以通過采用常規(guī)方法制成膏狀牙膏、液體牙膏、液狀牙 膏、半膏狀牙膏等牙膏劑、漱口劑等各種劑型，特別適宜于牙膏劑。此時根據(jù)組合物的目的、 劑型等，除了上述成分之外，可以在不妨礙本發(fā)明效果的范圍之內(nèi)配合各種適宜的公知成 分。例如牙膏劑中可以配入研磨劑、增稠劑、粘合劑、表面活性劑，進一步地根據(jù)需要配入香 料、甜味劑、著色劑、防腐劑、有效成分等。
[0019] 作為研磨劑，舉例有硅膠、沉淀二氧化硅、硅酸鋁、硅酸鋯等二氧化硅系研磨劑、磷 酸氫鈣二水合物及無水合物、磷酸三鈣、磷酸四鈣、焦磷酸鈣、碳酸鈣、氫氧化鋁、氧化鋁、碳 酸鎂、磷酸三鎂、沸石、羥基磷灰石、合成樹脂系研磨劑等。研磨劑的混合量根據(jù)劑型進行調(diào) 節(jié)，膏狀牙膏中為2~40%，特別優(yōu)選10~30%，液體牙膏中為0%。
[0020] 作為增稠劑，舉例有山梨糖醇、木糖醇、麥芽糖醇、乳糖醇等糖醇；甘油、丙二醇、聚 乙二醇等多元醇，混合量通常為5~50%，特別優(yōu)選20~45%。
[0021] 作為粘合劑，舉例有羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥乙