具有生物活性的外用敷料及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)學工程領域，具體涉及一種以絲素蛋白和成纖維細胞生長因子為原料制作的具有生物活性的外用敷料及其制備方法。
【背景技術】
[0002]人體體表開放性外傷一般涉及皮膚、皮下組織和肌肉等組織器官的損傷。如何促進人體體表開放性外傷傷口的愈合是日常生活中最常見的問題之一。對于這一問題的解決，在外科臨床上有很多的方案。然而，隨著社會的發(fā)展，人們對醫(yī)療健康的質量要求永無止境。對于經醫(yī)療機構如醫(yī)院處理的病例，外傷愈合基本都有保障。但是，對于一些比較輕微程度的外傷，出于節(jié)省治療費用等原因，人們一般選擇自行愈合的態(tài)度。所以，尋求更簡便、效果更好、成本更低的治療措施是永遠的發(fā)展方向。目前，生物活性物質如種子細胞和生長因子等的介入，是目前相關研宄的前沿熱點問題之一。
[0003]目前用于生物醫(yī)用領域的天然高分子主要包括多糖類和蛋白質類等，其中殼聚糖、絲素蛋白等在創(chuàng)面修復領域應用最為廣泛。近十年來，絲素蛋白在純化方面取得顯著成功，被廣泛應用到了生物材料，它們不僅具有很好的強度，而且展現出極佳的生物相容性。因此，基于絲素蛋白和殼聚糖的生物材料應用于創(chuàng)面修復和人造皮膚的理論依據已經得到證實，具備很好的前景，將成為未來培養(yǎng)人造皮膚最好的支架之一。絲素蛋白，是從蠶絲中提取的天然高分子纖維蛋白，含量約占蠶絲的70%-80%，含有18種氨基酸，其中甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)和絲氨酸(Ser)約占總組成的80%以上。絲素本身具有良好的機械性能和理化性質，如良好的柔韌性和抗拉伸強度、透氣透濕性、緩釋性等，而且經過不同處理可以得到不同的形態(tài)，如纖維、溶液、粉、膜以及凝膠等。
[0004]在人體傷口愈合的過程中，成纖維細胞分泌膠原是傷口皮膚愈合的根本原因。所以，凡是促進皮膚成纖維細胞生長和分泌作用的因素均為備選的有利因素。成纖維細胞生長因子(FGF)不但可以有力的促進成纖維細胞的生長和分泌作用，同時，對肌肉等組織也有很強的促損傷修復功能。目前，FGF已經獲我國I類新藥批文，這就為其在生物醫(yī)藥領域的廣泛應用鋪平了道路。
[0005]申請?zhí)枮?01310289812.8的發(fā)明專利公開了一種納米仿生緩釋型生物醫(yī)用敷料及其制備方法，該納米仿生緩釋型生物醫(yī)用敷料的原液，是含有絲素蛋白、人表皮細胞生長因子、成纖維細胞生長因子的水溶液，PH值為5-8，其中絲素蛋白的質量百分濃度為2%-30%，人表皮細胞生長因子和成纖維細胞生長因子的總濃度為0-200ppm ;或者采用質量百分濃度為1%_10%的殼聚糖替代所述絲素蛋白；采用靜電紡技術，使納米仿生緩釋型纖維膜敷料的原液形成噴射流噴射至收集器上，即得納米仿生緩釋型生物醫(yī)用敷料。
[0006]但FGF為生物活性物質，在水相介質中具有半衰期，生物活性保持時間較短。所以，承載了 FGF等生長因子類物質的水凝膠在應用過程中，如何較長時間地保持生物活性是亟待解決的主要問題之一。

【發(fā)明內容】

[0007]有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種具有生物活性的原液及其制備方法，該具有生物活性的原液免疫原性低，來源豐富，價格低廉，其制備方法簡單；本發(fā)明的目的之二在于提供一種保質期長的生物活性原料，該生物活性原料保存及運輸過程中是以干物質的形態(tài)存在，使得FGF生物活性長期保持；本發(fā)明的目的之三在于提供具有生物活性的外用敷料，該具有生物活性的外用敷料呈水凝膠狀，使用方便。
[0008]為實現上述目的，本發(fā)明的技術方案為:
具有生物活性的原液，所述具有生物活性的原液是含有絲素蛋白、成纖維細胞生長因子、鏈霉素和青霉素的水溶液。
[0009]進一步，所述的具有生物活性的原液，所述原液中絲素蛋白的濃度為0.1-0.25g/ml ο
[0010]進一步，所述的具有生物活性的原液，所述原液中成纖維細胞生長因子的濃度為0.01-0.05ug/ml。
[0011]進一步，所述的具有生物活性的原液，其特征在于，所述原液中，每10ml原液中含有鏈霉素和青霉素各2-3萬個活性單位。
[0012]進一步，所述的具有生物活性的原液，所述絲素蛋白為家蠶后部絲腺來源的絲素蛋白。家蠶后部絲腺來源絲素蛋白為FGF載體制作生物活性外用敷料的報道，與相近的其他研宄相比，具有免疫原性低、來源豐富、價格低廉、制備方法簡單等優(yōu)點。
[0013]本發(fā)明所述的具有生物活性的原液的制備方法，將絲素蛋白溶解于水中，然后加入鏈霉素、青霉素和成纖維細胞生長因子，混勻，0-8°C靜置30-120分鐘，即得具有生物活性的原液。
[0014]本發(fā)明的保質期長的生物活性原料，將本發(fā)明所述的具有生物活性的原液冷凍干燥即得。
[0015]本發(fā)明所述的保質期長的生物活性原料真空密封包裝，0_8°C保存。
本發(fā)明所述的具有生物活性的外用敷料呈水凝膠狀，其制備方法為:取本發(fā)明所述的生物活性原料，用生理鹽水溶解成水凝膠狀即得。
[0016]進一步，所述的具有生物活性的外用敷料，每3_5ml生理鹽水溶解Ig所述的生物活性原料。
[0017]本發(fā)明的有益效果在于:
本發(fā)明的具有生物活性的原液是含有絲素蛋白、成纖維細胞生長因子、鏈霉素和青霉素的水溶液，該具有生物活性的原液免疫原性低，來源豐富，價格低廉，其制備方法簡單；本發(fā)明的保質期長的生物活性原料，保存及運輸過程中是以干物質的形態(tài)存在，使得FGF生物活性長期保持；本發(fā)明的具有生物活性的外用敷料，該具有生物活性的外用敷料呈水凝膠狀，FGF的使用可以有效縮短患者傷口愈合進程，涂布于創(chuàng)面，可以有效的發(fā)揮FGF的促創(chuàng)傷修復功能，使用方便。
【具體實施方式】
[0018]下面將結合具體實施例，對本發(fā)明的優(yōu)選實施例進行詳細的描述。所舉實施例是為了更好地對本發(fā)明的內容進行說明，但并不是本發(fā)明的內容僅限于所舉實施例。所以熟悉本領域的技術人員根據上述
【發(fā)明內容】
對實施方案進行非本質的改進和調整，仍屬于本發(fā)明的保護范圍。實施例中未注明具體條件的實驗方法或按照制造廠商所建議的條件。
[0019]本發(fā)明的具有生物活性的原液、生物活性原料及具有生物活性的外用敷料中因含有青霉素，對青霉素過敏患者慎用。
[0020]實施例1
(I) FGF與絲素蛋白的混合
取10克家蠶后部絲腺來源的絲素蛋白，溶解于100毫升三蒸水中，加入鏈霉素和青霉素各2萬個活性單位，加入I微克成纖維細胞生長因子(FGF)，低溫(0-8°C)靜置I小時，即制成FGF與絲素蛋白的混合物。
[0021](2)混合物的脫水
將步驟(I)中所制備的FGF與絲素蛋白的混合物置于培養(yǎng)皿中，冷凍干燥成膜狀。即制得一種具有生物活性的外用敷料。
[0022](3)保存及運輸
取將步驟(2)中所制備的膜狀材料I克，真空密封包裝，低溫(0-8°C)保存及運輸，保質期6個月。
[0023](4)使用方法
本發(fā)明為醫(yī)學外用制品，是一種適用于輕微的體表創(chuàng)傷及外科手術傷口縫合后的敷料。在使用前，用5毫升生理鹽水溶解成水凝膠，涂布于創(chuàng)部。即配即用。對青霉素過敏患者慎用。
[0024]實施例2
本實施例中以非絲腺來源的絲素蛋白為原料。
[0025](I) FGF與絲素蛋白的混合
取10克絲素蛋白，溶解于100毫升三蒸水中，加入鏈霉素和青霉素各2萬個活性單位，加入I微克成纖維細胞生長因子(FGF)，低溫(0-8°C)靜置I小時，即制成FGF與絲素蛋白的混合物。
[0026](2)混合物的脫水
將步驟(I)中所制備的FGF與絲素蛋白的混合物置于培養(yǎng)皿中，冷凍干燥成膜狀。即制得一種具有生物活性的外用敷料。
[0027](3)保存及運輸
將步驟(2)中所制備的膜狀材料I克，真空密封包裝，低溫(0-8°C)保存及運輸，保質期6個月。
[0028](4)使用方法
本發(fā)明為醫(yī)學外用制品，是一種適用于輕微的體表創(chuàng)傷及外科手術傷口縫合后的敷料。在使用前，用5毫升生理鹽水溶解成水凝膠，涂布于創(chuàng)部。即配即用。對青霉素過敏患者慎用。
[0029]實施例3
(I) FGF與絲素蛋白的混合
取25克家蠶后部絲腺來源的絲素蛋白，溶解于100毫升三蒸水中，加入鏈霉素和青霉素各3萬個活性單位，加入5微克成纖維細胞生長因子(FGF)，低溫(0-8°C)靜置I小時，即制FGF與絲素蛋白的混合物。
[0030