訶子乙酰膽堿酯酶抑制活性提取物及其組合物的醫(yī)藥用途和制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種訶子乙酰膽堿酯酶抑制活性提取物及其組 合物的制備方法以及它在治療阿爾茨海默病（AD)等方面的醫(yī)藥用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 訶子出自《本草圖經(jīng)》。喬木，高達(dá)30m。枝近無毛，皮孔細(xì)長，白色或淡黃色，幼枝 黃褐色，被絨毛。生于海拔800-1840米的疏林中，常成片分部。喜高溫潤氣候。耐旱、耐霜。 喜陽光充足。多生于海拔950-1850m之間。年雨量在1000-1500mm左右。對土壤要求不甚 嚴(yán)格，但宜選疏松肥沃、排水良好的壤土栽培。產(chǎn)云南西部和西南部。廣東、廣西(南寧）有 栽培。分布于越南(南部)、老撾、柬埔寨、泰國、緬甸、馬來西亞、尼泊爾、印度。
[0003] 訶子對斂肺；澀腸；下氣；利咽；收斂、止瀉；解痙；久瀉；久痢；久咳失音具有一定 的功效，經(jīng)訶子水煎液處理之小鼠惡性腫瘤(腹水癌、梭形細(xì)胞肉瘤）細(xì)胞、接種于小鼠體 內(nèi)，將失其生活能力。訶子對小鼠艾氏腹水癌，中國小鼠腹水肉瘤，梭形細(xì)胞肉瘤的生長，具 有抑制作用。
[0004] 本發(fā)明通過大規(guī)模、系統(tǒng)地活性篩選，意外地發(fā)現(xiàn)維吾爾藥訶子提取物及其部分 化學(xué)組分，具有顯著地乙酰膽堿酯酶抑制活性，該活性提取物及其組合物有望應(yīng)用于治療 阿爾茨海默?。ˋD)等方面的醫(yī)藥用途。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是提供一種訶子提取物。
[0006] 本發(fā)明還提供了以訶子提取物為主要活性成分的組合物。
[0007] 本發(fā)明同時(shí)提供了訶子提取物及其組合物的制備和在制備乙酰膽堿酯酶抑制活 性藥物中的應(yīng)用。
[0008] 本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的： 維吾爾藥訶子經(jīng)甲醇超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠（SiO2)柱分離，上樣后的硅膠 柱，用石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫(石油醚-丙酮，比例見表1 )，各石油醚-丙酮比例混 合溶劑洗脫液，濃縮，干燥后，利用體外篩選體系測試其乙酰膽堿酯酶抑制活性，意外地發(fā) 現(xiàn)先用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:25,體積比）洗脫，繼用石油醚-丙酮混 合溶劑(石油醚-丙酮，100:50,體積比)洗脫得到的石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮， 100:50,體積比)洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，即為乙酰膽堿酯酶抑制活性提取物。而其他 比例的洗脫部位，沒有乙酰膽堿酯酶抑制活性的作用。特地，優(yōu)選為先用石油醚-丙酮混合 溶劑(石油醚-丙酮，100:25,體積比）洗脫15倍柱體積，繼用石油醚-丙酮混合溶劑(石油 醚-丙酮，100:50,體積比）洗脫25倍柱體積，洗脫液干燥后即為乙酰膽堿酯酶抑制活性的 提取物。乙酰膽堿酯酶抑制活性的提取物可以通過以上方法得到富集，從而與其他雜質(zhì)類 成分分離開。該訶子乙酰膽堿酯酶抑制活性提取物從未見文獻(xiàn)報(bào)道，其薄層譜色譜（TLC)分 析表征如圖1，TLC分析條件：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（1: 1:1)顯 色方法：香草醛-硫酸顯色。
[0009] 具體，發(fā)現(xiàn)過程如下： 1、訶子經(jīng)甲醇超聲提取物的制備 取維吾爾藥訶子20 g，經(jīng)100 mL甲醇超聲提取15 min，提取液濃縮后，得提取物 SN0269A ，留樣1.8106g 0. 9940g上樣量1.9985g，拌樣硅膠3. 0 g，空白硅膠10 g，石油醚-丙 酮系統(tǒng)洗脫。
[0010] 2、石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫方法和結(jié)果 取維吾爾藥訶子20 g，經(jīng)100 mL甲醇超聲提取15 min，提取液濃縮后，得提取物 SN0269A，上柱，甲醇溶解，共用甲醇15 mL。上硅膠柱色譜，拌樣硅膠3.0 g，空白硅膠10 g， 玻璃柱內(nèi)徑2. 0 cm，石油醚-丙酮系統(tǒng)梯度洗脫(條件見表1 )，柱體積25 mL，每個(gè)梯度洗 脫200 mL，得到，各個(gè)濃度提取洗脫液的洗脫物，回收溶劑，即得，石油醚：丙酮梯度洗脫提 取物，TLC分析結(jié)果見圖2,圖3，TLC分析條件：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：石油醚：乙酸乙酯： 丙酮（6:1:1)，石油醚：乙酸乙酯：丙酮（1:1:1)顯色方法：香草醛-硫酸顯色。
[0011] 表 1
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種訶子提取物，其特征為訶子經(jīng)溶劑超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上 樣后的硅膠柱，先用體積比100:25的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，繼用體積比100:50的石 油醚-丙酮混合溶劑洗脫，用100:50的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫的洗脫液經(jīng)回收溶劑， 干燥，即為該提取物。
2. 如權(quán)利要求1所述訶子提取物，其特征為，該提取物的提取用溶劑可以為甲醇、石油 醚、水、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶劑或乙醇水混合溶劑，優(yōu)選為甲醇和95%乙醇； 提取物提取用溶劑用量為藥材重量的2-50倍(重量/體積比)。
3. 如權(quán)利要求1所述訶子提取物，其特征為訶子經(jīng)溶劑超聲提取，提取液濃縮后，用硅 膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:25,體積比)洗 脫，洗脫2-50倍柱體積，繼用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:50,體積比)洗脫， 洗脫2-50倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:50,體積比)洗脫的洗脫 液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，即為該提取物。
4. 如權(quán)利要求1所述的維吾爾藥訶子提取物，其特征為，先用先用體積比100:25的石 油醚-丙酮混合溶劑2-50倍洗脫，繼用體積比100:50的石油醚-丙酮混合溶劑2-50倍洗 脫，先用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:25,體積比）洗脫15倍柱體積，繼用石 油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:50,體積比）洗脫25倍柱體積。
5. 權(quán)利要求1所述提取物的制備方法，其特征為：訶子經(jīng)溶劑超聲提取，提取液濃縮 后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:25,體 積比）洗脫2-50倍柱體積，繼用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:50,體積比）洗 脫2-50倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:50,體積比)洗脫的洗脫液 經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，即為該提取物；以上條件最優(yōu)為先用石油醚-丙酮混合溶劑(石油 醚-丙酮，100:25,體積比）洗脫15倍柱體積，繼用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮， 100:50，體積比）洗脫25倍柱體積。
6. -種藥物組合物，其特征在于，包含權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的提取物和藥學(xué)上 可接受的載體。
7. -種藥物制劑，其特征在于，包含權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的提取物或權(quán)利要求6 所述的藥物組合物。
8. 權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的訶子提取物或權(quán)利要求6所述的組合物或權(quán)利要求7 所述的藥物制劑在制備乙酰膽堿酯酶抑制活性藥物中的應(yīng)用。
9. 如權(quán)利要求8所述維吾爾藥廣棗提取物，其特征為，所述乙酰膽堿酯酶抑制活性， 可用于治療阿爾茨海默?。ˋD)等方面的醫(yī)藥用途。
10. 權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的一種維吾爾藥訶子提取物，其特征在于，用TLC法檢 測，其色譜條件為：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：石油醚：乙酸乙酯：丙酮=1:1:1，顯色方法：香 草醛濃硫酸顯色。
【專利摘要】本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種訶子乙酰膽堿酯酶抑制活性提取物及其組合物的制備方法以及它在治療阿爾茨海默病(AD)等方面的醫(yī)藥用途。所述的提取物通過如下方法獲得：先用石油醚-丙酮混合溶劑（石油醚-丙酮，100:25，體積比）洗脫，繼用石油醚-丙酮混合溶劑（石油醚-丙酮，100:50，體積比）洗脫，用石油醚-丙酮混合溶劑（石油醚-丙酮，100:50，體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收溶劑，干燥，即為該乙酰膽堿酯酶抑制活性提取物。
【IPC分類】A61P25-28, A61K36-185
【公開號】CN104825502
【申請?zhí)枴緾N201510058760
【發(fā)明人】熱娜·卡斯木, 王金輝, 黃健, 李國玉, 王雁麗, 王小青, 馬慶東, 張珂
【申請人】新疆醫(yī)科大學(xué)
【公開日】2015年8月12日
【申請日】2015年2月4日