一種具有肝癌細(xì)胞靶向性的二硫化鉬載藥納米片的制備方法
【專利說明】
法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明公開了一種具有肝癌靶向的二硫化鉬載藥納米片的制備方法。更具體地涉及選用水熱法制備出二硫化鉬納米片，通過表面修飾乳糖酸后進(jìn)行阿霉素等抗癌藥物的裝載，使其同時具有肝癌靶向性、光熱治療、CT成像和化療等多種功能，為肝癌的診斷和治療提供了一種新途徑。
【背景技術(shù)】
[0002]惡性腫瘤對人類的威脅日益突出，已成為目前死亡的重要原因。其中，肝癌是我國高發(fā)的惡性腫瘤之一。腫瘤的早期診斷和有效治療對人類的健康以及可持續(xù)發(fā)展極為重要。人類在過去的幾十年對腫瘤特性進(jìn)行了深入的探索，促進(jìn)了腫瘤診斷和治療的發(fā)展，但由于技術(shù)的限制，腫瘤的早期診斷依然是需要攻克的難關(guān)。目前較常用的臨床治療方法有手術(shù)治療、放射治療和化學(xué)治療等。手術(shù)治療通常無法根治已有腫瘤轉(zhuǎn)移的晚期病人，放射治療和化學(xué)治療對病人的二次傷害有時會大于癌癥本身?，F(xiàn)有的抗腫瘤藥物大多不僅毒性大并且缺乏靶向性，在殺傷肝腫瘤細(xì)胞的同時殺傷大量的正常細(xì)胞。此外，由于肝癌細(xì)胞所特有的生物特性，抗腫瘤藥物難以進(jìn)入腫瘤內(nèi)部的細(xì)胞，從而很難在目標(biāo)位置達(dá)到有效濃度。因此，單純依靠上述方法進(jìn)行腫瘤治療會存在相當(dāng)大的局限性。
[0003]近年來，隨著科學(xué)技術(shù)在納米科技、納米醫(yī)藥、生命科學(xué)等領(lǐng)域飛速發(fā)展，基于納米而發(fā)展起來的分子診斷學(xué)以及分子成像技術(shù)被越來越多地用于腫瘤早期診斷，同時納米材料為提高抗癌藥物的療效和生物利用度以及降低藥物毒副作用等提供了有效的手段。納米材料因其獨特的生物醫(yī)學(xué)優(yōu)勢有望解決傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)方法的生物醫(yī)學(xué)問題，引領(lǐng)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)診斷和治療方法的新變革。
[0004]納米載藥系統(tǒng)將納米技術(shù)、生物材料科學(xué)與現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)相結(jié)合，以納米級分子材料為基底，將藥物以溶解、吸附、包裹或鍵合的方式與基底相結(jié)合。納米載藥系統(tǒng)相對于傳統(tǒng)藥物傳輸系統(tǒng)具有以下特點:(I)較高的載藥量；(2)較高的包封率；(3)載體材料可生物降解，毒性較低或無毒性；(4)較長的體內(nèi)循環(huán)時間。在眾多的無機(jī)納米材料中，二硫化鉬具有獨特的尺寸和形狀依賴的光學(xué)和光熱性質(zhì)，可以裝載各種熒光分子和藥物，在腫瘤診斷成像、光熱治療和藥物輸運方面具有廣闊的應(yīng)用前景。因此，根據(jù)二硫化鉬的優(yōu)異特性，我們首次設(shè)計和制備出一種集多性能于一體的復(fù)合納米載藥光熱劑。其主體材料是二硫化鉬納米片，通過表面修飾乳糖酸分子可實現(xiàn)肝腫瘤主動靶向。載有抗癌藥物的納米片經(jīng)腫瘤細(xì)胞吞噬及胞內(nèi)PH值變化，使二硫化鉬載體逐步釋放藥物，可延長藥物血液循環(huán)時間，對腫瘤細(xì)胞起持續(xù)抑制或殺傷作用。二硫化鉬還具有獨特的光熱轉(zhuǎn)換性能，可將808nm的近紅外激光的光能轉(zhuǎn)換熱能，所產(chǎn)生的熱能可以用于癌癥的熱療，熱刺激下加速藥物的釋放以及熱成像。此外，二硫化鉬還可進(jìn)行CT造影。二硫化鉬納米載體不具免疫原性，無耐藥性，可多次給藥，熱療和化療的聯(lián)用對肝癌起到有效的治療作用。因此，二硫化鉬多功能的納米醫(yī)學(xué)平臺可為肝癌按的診斷和治療提供新的途徑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提出一種具有肝癌細(xì)胞靶向性的二硫化鉬載藥納米片的制備方法。
[0006]為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了一種具有肝癌細(xì)胞靶向性的二硫化鉬載藥納米片的制備方法，其特征在于，包括:
[0007]步驟1:水熱法合成二硫化鉬納米片；
[0008]步驟2:配制明膠溶液，將步驟I制備的二硫化鉬納米片加入到配好的明膠溶液中，攪拌6?24h，使其充分反應(yīng)，得到明膠化二硫化鉬納米片；
[0009]步驟3:分別稱取乳糖酸、1-乙基-3-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基丁二酰亞胺加入到步驟2制備的明膠化二硫化鉬納米片中，室溫攪拌10?24h，離心，洗滌，收集，制得乳糖酸修飾的二硫化鉬納米片；
[0010]步驟4:配制濃度為I?10mg/mL的阿霉素鹽酸鹽的水溶液，將步驟3得到的乳糖酸修飾的二硫化鉬納米片加入其中，在真空條件下，攪拌8?24h，離心，洗滌，收集得到具有肝癌細(xì)胞靶向性的二硫化鉬載藥納米片。
[0011]優(yōu)選地，所述的水熱法合成二硫化鉬納米片的具體步驟為:配制四硫代鉬酸銨水溶液，攪拌至透明后，加入反應(yīng)釜中，加熱到120?200°C，保持5?12h，冷卻至室溫后，離心收集，用去離子水洗滌，得到二硫化鉬納米片。
[0012]優(yōu)選地，所述的四硫代鉬酸錢水溶液的濃度為2?50mg/mL，所述的明膠溶液的濃度為30?200mg/mL，所述的四硫代鉬酸錢水溶液與明膠溶液的體積比為10?50: 5?
20 ο
[0013]優(yōu)選地，所述的乳糖酸、1-乙基-3-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽、N-羥基丁二酰亞胺與明膠化二硫化鉬納米片的質(zhì)量比為2?6: 1.5?3: I: 5?15。
[0014]優(yōu)選地，所述的阿霉素鹽酸鹽的水溶液與乳糖酸修飾的二硫化鉬納米片的質(zhì)量比為1: 5?20。
[0015]本發(fā)明以水熱法合成的二硫化鉬納米片作為主體，先選用明膠對其表面進(jìn)行修飾，增加二硫化鉬納米片的生物相容性和分散性，再通過與乳糖酸進(jìn)行連接，后進(jìn)行藥物裝載，得到粒徑為50?300納米的復(fù)合載藥納米片。
[0016]本發(fā)明制備的乳糖酸修飾的二硫化鉬載藥納米片具有生物相容性好、腫瘤靶向性強(qiáng)、成像效果好以及能夠長期受控等優(yōu)點，可用于人體或者其他哺乳動物肝癌的診斷、治療和病變分析。
[0017]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是:
[0018](I)本發(fā)明制備的肝癌靶向性乳糖酸修飾的二硫化鉬載藥納米片具有光熱治療和CT成像等特點，實現(xiàn)肝癌的診斷和治療的“一體化”；
[0019](2)本發(fā)明制備的乳糖酸修飾的二硫化鉬載藥納米片，主動靶向性強(qiáng)，靈敏度高，載藥量大，藥物受控釋放能有望提高肝臟腫瘤的治療效果；
[0020](3)本發(fā)明制備的乳糖酸修飾的二硫化鉬納米片具有無毒、生物相容性好等特點。
[0021](4)本發(fā)明涉及的制備方法簡單，生產(chǎn)周期快，成本低等特點，能夠?qū)崿F(xiàn)大批量生產(chǎn)；制備的靶向載藥納米片具有載藥量大，載藥效率高，分散性好，穩(wěn)定性強(qiáng)，粒徑大小可調(diào)，靶向性強(qiáng)和生物毒性小等特點。因此，該乳糖酸修飾的二硫化鉬載藥納米片可廣泛地應(yīng)用于肝癌的診斷和治療。
【附圖說明】
[0022]圖1a和Ib是實施例1所制備的二硫化鉬納米片的不同比例的掃描電鏡照片；
[0023]圖2a和2b是實施例1所制備的乳糖酸修飾的二硫化鉬載藥納米片不同比例的掃描電鏡照片，腫瘤細(xì)胞表面的受體可以和乳糖酸特異性結(jié)合，可實現(xiàn)對腫瘤的靶向治療；
[0024]圖3是實施例1所制備的乳糖酸修飾的二硫化鉬載藥納米片的CT成像效果圖，圖4是實施例1所制備的乳糖酸修飾的二硫化