小檗堿用于制備治療柯薩奇病毒b3所致病毒性心肌炎疾病的藥物的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，特別涉及一種小檗堿用于制備治療柯薩奇病毒B3所致病 毒性心肌炎疾病的藥物的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 病毒性心肌炎（viralmyocarditis)是指嗜心性病毒感染引起的以心肌炎性病變 為主的疾病，可引起急性心功能不全，且約有1/3的患者進(jìn)一步發(fā)展為慢性心肌炎和擴(kuò)張 型心肌病，是引發(fā)心力衰竭的常見(jiàn)病因之一。近年來(lái)該病發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，已成為危害 人類(lèi)健康的常見(jiàn)疾病之一。但迄今尚無(wú)特異性治療方法。因此，尋找新的有確切療效的藥 物來(lái)預(yù)防及治療病毒性心肌炎是當(dāng)前臨床迫切需求的。
[0003] 多種病毒感染均可引發(fā)病毒性心肌炎，目前所知的相關(guān)病毒主要為腸道病毒，包 括柯薩奇病毒、?？刹《?、脊髓灰質(zhì)炎病毒等，此外還有巨細(xì)胞病毒、皰瘆病毒、腺病毒、肝 炎病毒等也可能引發(fā)心肌炎。在這些病毒中，柯薩奇病毒B組（coxsackievirusB)具有 高度親心肌性和流行性，共包括6種血清型（CVB1-CVB6)，其中柯薩奇病毒B3被認(rèn)為是引 起心肌炎和擴(kuò)張型心肌病最為常見(jiàn)的病原體，回顧性研宄表明50%以上的病毒性心肌炎和 25%的心肌病與之有關(guān)。
[0004] 柯薩奇病毒B3(CVB3)屬于小RNA病毒科，腸道病毒屬。病毒顆粒為二十面體，立 方對(duì)稱(chēng)呈球形，無(wú)包膜，直徑約25-30nm，病毒衣殼包繞著一條單股正鏈RNA，基因組長(zhǎng)度為 7. 4kb〇
[0005] 目前對(duì)于病毒性心肌炎的臨床治療，還存在諸多不足?，F(xiàn)臨床主要采用抗病毒和 調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫功能療法。其中臨床抗病毒藥物包括阿昔洛韋、病毒唑和更昔洛韋等，在感 染早期，這些抗病毒藥物能有效抑制病毒復(fù)制，減輕心肌損傷，提高生存率，但是，在感染后 期，其療效有限，因此，目前臨床應(yīng)用的抗病毒藥物的療效均不夠滿(mǎn)意。在細(xì)胞免疫功能調(diào) 節(jié)方面，目前臨床上使用的藥物包括：丙種球蛋白、人白細(xì)胞干擾素等，雖然這些藥物能減 弱免疫反應(yīng)，清除病毒，改善左心室功能，提高生存率，但仍存在個(gè)體療效差異大，有一定副 作用，成本過(guò)高等問(wèn)題。因而，篩選和研制治療病毒性心肌炎的新藥具有重要意義。
[0006] 我國(guó)有著悠久的中醫(yī)藥傳統(tǒng)文化和豐富的藥用動(dòng)植物資源，從中藥中篩選出新的 抗病毒藥物不僅是可行的解決途徑，而且還具有篩選時(shí)間短、節(jié)省人力、物力和財(cái)力等優(yōu) 勢(shì)。與此同時(shí)，中藥普遍存在毒性低、副作用小等優(yōu)勢(shì)。
[0007] 小檗堿（Berberine，BBR)又名黃連素，是清熱解毒中藥黃連、黃柏、三顆針等植物 中提取的異喹啉生物堿，分子式為C20H18N04,其藥理作用廣泛，毒性和副作用較小，臨床廣 泛用于治療細(xì)菌性痢疾和腸炎等。除了傳統(tǒng)的抗腸道細(xì)菌感染的作用外，小檗堿還具有抑 制腫瘤轉(zhuǎn)移、降低血糖和改善心腦血管功能等藥效。近年來(lái)有關(guān)研宄表明小檗堿具有抗流 感病毒的活性，但其具體的抗病毒機(jī)制還未完全闡明。而小檗堿抗其它病毒的研宄還很鮮 見(jiàn)。尤其對(duì)于抗柯薩奇病毒B3活性還尚未見(jiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的是提供一種檗堿用于制備治療柯薩奇病毒B3所致病毒性心肌炎疾 病的藥物的用途。采用本發(fā)明所述藥物，治療柯薩奇病毒B3所致病毒性心肌炎疾病，具有 抗CVB3作用，抑制促炎因子和趨化因子的表達(dá)效果明顯，可用于制備治療病毒性心肌炎的 藥物，該副作用小，療效高，在目前臨床上治療CVB3所致病毒性心肌炎尤其是在感染后期， 治療的療效不夠滿(mǎn)意的情況下，應(yīng)用前景良好。
[0009] 本發(fā)明的技術(shù)方案是：
[0010] 小檗堿用于制備治療柯薩奇病毒B3所致病毒性心肌炎疾病的藥物的用途。
[0011] 我們是灌胃小鼠，對(duì)于人來(lái)說(shuō)是口服給藥量對(duì)成人而言為每公斤每天4. 5-8mg。
[0012] 本發(fā)明的有益效果是：
[0013] (1)藥理活性方面
[0014] 申請(qǐng)人的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，小檗堿顯著改善CVB3所致病毒性心肌炎小鼠生存率，心 臟組織實(shí)驗(yàn)方面，小檗堿能明顯的抑制炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和組織壞死，具有抗CVB3作用和抑制 其復(fù)制的作用以及明顯的抑制促炎因子和趨化因子的表達(dá)，血清樣本用全自動(dòng)生物分析 儀進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明，小檗堿具有抑制心肌酶活性的作用、保護(hù)心肌功能的作用，體外抗 CVB3活性作用表明小檗堿具有顯著的抑制VPl蛋白表達(dá)水平的作用。
[0015] ⑵藥學(xué)方面
[0016] 小檗堿是清熱解毒中藥黃連、黃柏、三顆針等植物中提取的異喹啉生物堿，其本身 理化性質(zhì)穩(wěn)定，藥理作用廣泛，毒性和副作用較小。
【附圖說(shuō)明】
[0017] 圖1為小檗堿改善CVB3所致病毒性心肌炎小鼠生存率的曲線(xiàn)；
[0018] 圖2為小檗堿抑制炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和組織壞死結(jié)果，圖中，A為正常對(duì)照組，B為小檗 堿組，C為CVB3感染組，D為CVB3+小檗堿治療組；
[0019] 圖3為小鼠心肌組織切片H&E染色評(píng)分結(jié)果，圖中，1:正常對(duì)照組，2:小檗堿組， 3 :CVB3感染組，4 :CVB3+小檗堿治療組（注：*P〈0. 05,CVB3感染組與正常對(duì)照組比較； #P〈0. 05,CVB3+小檗堿治療組與CVB3感染組比較）；
[0020] 圖4為小檗堿抗CVB3作用，圖中，A為dsRNA染色結(jié)果，B為CVB3染色結(jié)果。（1 : 正常對(duì)照組，2 :小檗堿組，3 :CVB3感染組，4 :CVB3+小檗堿治療組）；
[0021] 圖5為小檗堿抑制小鼠心肌組織中CVB3衣殼蛋白VPlmRNA表達(dá)量，圖中，1:正常 對(duì)照組，2 :CVB3感染組，3 :CVB3+小檗堿治療組（注：*P〈0. 001，CVB3感染組與正常對(duì)照組 比較；#P〈〇. 001，CVB3+小檗堿治療組與CVB3感染組比較）；
[0022] 圖6為ELISA檢測(cè)小檗堿抗炎作用，圖中，1 :正常對(duì)照組，2 :小檗堿組，3 :CVB3感 染組，4 :CVB3+小檗堿治療組；（注：*P〈0. 05,CVB3感染組與正常對(duì)照組比較；#P〈0. 05， CVB3+小檗堿治療組與CVB3感染組比較）；
[0023] 圖7為qRT-PCR檢測(cè)小檗堿抗炎作用，圖中1:正常對(duì)照組，2:小檗堿組，3 :CVB3 感染組，4 :CVB3+小檗堿治療組；（注：*P〈0. 05,CVB3感染組與正常對(duì)照組比較；#P〈0. 05， CVB3+小檗堿治療組與CVB3感染組比較）；
[0024] 圖8為qRT-PCR檢測(cè)小檗堿體外抗CVB3作用，圖中，I:正常對(duì)照組，2 :CVB3感染 組，3 :CVB3+小檗堿治療組；（注：*P〈0. 05，CVB3感染組與正常對(duì)照組比較；#P〈0. 05，CVB3+ 小檗堿治療組與CVB3感染組比較）
[0025] 圖9為Westernblot檢測(cè)小檗堿體外抗CVB3作用。
【具體實(shí)施方式】
[0026] - .材料和試劑
[0027] 1.動(dòng)物、病毒株
[0028] BALB/c小鼠，雄性，4-6周齡，購(gòu)買(mǎi)于第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院動(dòng)物中心；
[0029] 柯薩奇病毒B3(Nancy)購(gòu)買(mǎi)于中國(guó)科學(xué)院武漢病毒研宄所；
[0030] HeLa細(xì)胞株購(gòu)于中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研宄院細(xì)胞資源中心。
[0031] 2?主要試劑
[0032]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種小檗堿用于制備治療柯薩奇病毒B3所致病毒性心肌炎疾病的藥物的用途。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于：用小檗堿制備的藥物以注射劑或輸液劑 給藥。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于：用小檗堿制備的藥物用藥量為每公斤每 天 4. 5-8mg〇
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種小檗堿用于制備治療柯薩奇病毒B3所致病毒性心肌炎疾病的藥物的用途。采用本發(fā)明所述藥物治療柯薩奇病毒B3所致病毒性心肌炎疾病，具有抗CVB3作用，抑制促炎因子和趨化因子的表達(dá)效果明顯，可用于制備治療病毒性心肌炎的藥物，該藥物副作用小，療效高，在目前臨床上治療CVB3所致病毒性心肌炎尤其是在感染后期，治療的療效不夠滿(mǎn)意的情況下，其應(yīng)用前景良好。
【IPC分類(lèi)】A61P9-04, A61K31-4375, A61P9-00
【公開(kāi)號(hào)】CN104758282
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510117606
【發(fā)明人】張克斌, 代黔, 錢(qián)桂生, 周世文, 余華, 張迪, 何曉梅, 熊浚智, 辛榕, 謝瑋
【申請(qǐng)人】中國(guó)人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院
【公開(kāi)日】2015年7月8日
【申請(qǐng)日】2015年3月17日