用于降低n-氧化三甲胺水平的藥物組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物，也即涉及包含米屈肼（3-(2,2,2-三甲基肼）丙酸鹽二水合物） 或其藥物學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 一個醫(yī)學(xué)未解的問題是腎衰竭患者的治療，特別是疾病末期患者需要血液透析時 的治療。眾所周知，這樣的患者在主要疾病外通常還患有心血管疾?。–VD)。
[0003] 已知N-氧化三甲胺（TMANO)可能在這樣的患者體內(nèi)積聚（M. A. Bain、 R. Faull、G. Fornasini、R. W. Milne、 和 A. Μ· Evans. Accumulation of trimethylamine and trimethylamin-N-〇xide in end-stage renal disease patients undergoing haemodialysis ;Nephrol Dial Transplant (2006) 21:1300-1304) D 然而，僅僅在 2011 年 就發(fā)現(xiàn)患者的N-氧化三甲胺血液濃度與同時患有一種、兩種或三種CVD之間存在正相關(guān) 性(Z. Wang, E. KIipfellj B. J. Bennetj R. Koethj B. S. Levisonj B. DuGarj A. E. Feldsteinj E. A. Britt, Xiaoming Fuj Yoon-Mi Chung, Yuping Wuj P. Schauerj J. D. Smith, H. AIIeayeej W. H. Wilson Tang, J. A. DiDonatoj A. J. Lusisj S. L. Hazen. Gut flora metabolism of phosphatidylcholine promotes cardiovascular disease. Nature，472, 57-63，（2011))〇 因此，就變成了研發(fā)一種可降低人血液中TMNO水平的藥物的實際問題，由此防止不直接 與脂質(zhì)交換相關(guān)的CVD的發(fā)展。
[0004] 雖然已知可通過使用廣譜抗生素降低動物內(nèi)TMNO血液濃度，但是由于抗 生素抗藥性的問題和可能的不利副作用，以及由于并未證實該方案可減少CVD復(fù) 發(fā)，該療法并未廣泛用于慢性CVD患者（CM. 0' Connor等，Azithromycin for the secondary prevention of coronary heart disease events-the WIZARD study:a randomized controlled trial. J. Am. Med. Assoc.，290, 1459-1466 (2003)、C. P. Cannon 等,Antibiotic treatment of Chlamydia pneumonia after acute coronary syndrome. N. Engl. J. Med. 352，1646-1654 (2005)、和 R. Andraws，J. S. Berger，D. L. Brown. Effects of antibiotic therapy on outcomes of patients with coronary artery disease: a meta-analysis of randomized controlled trials.J. Am. Med Assoc. 293, 2641-2647(2005))。
[0005] -種替換方案包括益生微生物的引入（F. P. Martin等，Probiotic modulation symbiotic gut microbial-host metabolic interactions in humanized microbiome model. Mol Syst. Biol.，4, 157(2008))，然而，該方案還未被臨床批準(zhǔn)，并且由于人類腸道 菌群在成分上與嚙齒類腸道菌群實質(zhì)不同，而尤為重要。
[0006] 因此，迄今為止還沒有能夠降低人體內(nèi)N-氧化三甲胺水平、并用于大量攝入動物 來源食物人群的保健預(yù)防藥物的藥品。
[0007] 因此，實際問題是研發(fā)這樣一種藥物組合物：可提供穩(wěn)定的TMNO機(jī)體水平的大 幅下降，由此預(yù)防升高的CVD風(fēng)險、并且消除由諸如腎衰竭患者的其他疾病導(dǎo)致的升高的 TMNO水平的負(fù)面健康影響。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 我們意外地發(fā)現(xiàn)，已知其在能量代謝上的效果的心血管藥物米屈肼施以相應(yīng)低劑 量就可大幅降低人體內(nèi)N-氧化三甲胺水平。
[0009] 米屈肼作為心血管藥物廣泛應(yīng)用于前蘇聯(lián)國家中，其中CVD療法的作用機(jī)理 是基于血液和組織中γ 丁基甜菜堿羥化酶抑制并結(jié)合血液和組織中肉堿水平的變 化(Dambrova M. , Liepinsh E. , Kalvinsh I. ,Mildronate. Cardioprotective Action through Carnitine-Lowering Effect, Trends Cardiovasc. Med. , 2002:275-279)〇 肉 堿水平下降與缺血性組織中脂肪酸β -氧化率和氧氣含量的下降有關(guān)，其對諸如心臟衰 竭和心絞痛的缺血性相關(guān)疾病的治療產(chǎn)生積極影響。還有已知的研宄描述了米屈肼在 糖代謝上的作用（Liepinsh E，Vilskersts R，Zvejniece L，Svalbe B，Skapare Ε, Kuka J,Cirule H, Grinberga S, Kalvinsh I, Dambrova M. Protective effects of mildronate in an experimental model of type 2diabetes in Goto-Kakizaki rats. Br. J. Phar macol. 2009, 157(8)，1549-1556)。相似地，有跡象表明米屈肼可具有各種組織中氧化氮 合成的作用(Sjakste N, Gutcaits A, Kalvinsh I. Mildronate:an antiischemic drug for neurological indications. CNS Drug Rev. 2005 ;11(2) :151-68)。具有關(guān)于米屈 肼在前動脈粥樣硬化動物中降低動脈粥樣硬化斑塊的形成、并伴有米屈肼在脂肪酸代謝 上的效果的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)（Vilskersts R, Liepinsh E, Mateuszuk L, Grinberga S, Kalvinsh I, Chlopicki, Dambrova M. Mildronate, a regulator of energy metabolism, reduces atherosclerosis in apoE/LDLR-/_mice. Pharmacology, 2009, 83(5)，P. 287-293)〇
[0010] 然而，并未已知：米屈肼的應(yīng)用是否引起與能量代謝無關(guān)或人體中無調(diào)節(jié)過程的 人體中代謝物水平具有這樣的改變。
[0011] 我們驚喜地發(fā)現(xiàn)讓食用TMNO富集食物的人連續(xù)7天口服含有米屈肼的藥物組合 物（以 500mg 的劑量每天兩次）后（W.J. Dyer, Amines in Fish Muscle. VI. Trimethylamine Oxide Content of Fish and Marine Invertebrates, Journal of the Fisheries Research Board of Canada, 1952, 8c(5) :314-324, 10. 1139/f50-020)，與米屈肼使用前 的TMANO水平相比，導(dǎo)致統(tǒng)計學(xué)上顯著的47%的TMANO水平的降低。同時，我們已發(fā)現(xiàn) TMANO尿液排泄量的統(tǒng)計學(xué)上顯著的、并大幅（約25%)的升高。這意味著米屈肼提供 了 TMNO的升高排泄或該不利代謝產(chǎn)物的自清潔，其在體內(nèi)的濃度與同時患有多種CVD有 關(guān)(Z. Wang, E. KIipfell, B. J. Bennet, R. Koeth, B. S. Levison, B. DuGar, A. E. Feldstein, E. A. Britt, Xiaoming Fu, Yoon-Mi Chung, Yuping ffu, P. Schauer, J. D. Smith, H. AIIeayee, ff. H. Wilson Tang, J. A. DiDonato, A. J. Lusis, S. L. Hazen. Gut flora metabolism of phosphatidylcholine promotes cardiovascular disease. Nature, 472, 57-63, (2011))〇
[0012] 基于米屈肼在患者體內(nèi)非常低的毒性和低水平的不利副作用，我們的發(fā)現(xiàn)打開了 使用米屈肼以降低健康志愿者體內(nèi)、以及那些疾病發(fā)病機(jī)制可能與該代謝物升高的血液水 平有關(guān)的患者（例如在主要疾病治療期間進(jìn)行血液透析的腎衰竭患者）的TMNO水平的 方法。米屈肼可能作為患有多種CVD的患者的預(yù)防藥物特別有效。對于攝入卵磷脂-、甜 菜堿-和三甲胺-富集產(chǎn)品，以及其他代謝導(dǎo)致N-氧化三甲胺形