專利名稱：診斷組合物的制作方法
胃潰瘍病造成了嚴(yán)重的健康問題，并以藥品開支耗費(fèi)公眾大量的資金，和勞動(dòng)力損失?，F(xiàn)已完全查明，胃中幽門螺桿菌(Helicobacterpylori)的存在是引發(fā)胃潰瘍和/或十二指腸潰瘍的必要先決條件。如果胃是沒有幽門螺桿菌，則不會(huì)發(fā)生胃潰瘍。另外還發(fā)現(xiàn)借助抗生素治愈幽門螺桿菌感染之后，不會(huì)再?gòu)?fù)發(fā)胃潰瘍病。因此，目前胃潰瘍病被認(rèn)為是由細(xì)菌引起的疾病，它能夠也應(yīng)當(dāng)被治愈。
十分需要可靠而又簡(jiǎn)單的診斷方法，因?yàn)橛旋嫶蟮幕嘉改c疾病的患者群需要檢查幽門螺桿菌感染的存在。
本發(fā)明是基于這樣的知識(shí)，即幽門螺桿菌可以產(chǎn)生很大量的脲酶。正常情況下，這種酶不存在于人體內(nèi)，而這種酶在人胃中的存在則是存在幽門螺桿菌的明確表征。幽門螺桿菌已在人的胃中建立．起生態(tài)小環(huán)境。這種細(xì)菌在中性pH下生長(zhǎng)旺盛，發(fā)現(xiàn)其存在于胃的粘膜層之下。它能產(chǎn)生大量的脲酶，再由脲酶催化尿素分解成氨和碳酸氫鹽。這些碳酸氫鹽隨后又在胃中的酸性環(huán)境下分解成CO2和水。
在瑞典，每年大約有470,000患者在尋求用藥物治療類似胃潰瘍或與胃潰瘍相關(guān)的失調(diào)和疾病。因此，就健康的經(jīng)濟(jì)考慮和患者的關(guān)注而言，最重要的是能夠以簡(jiǎn)單而又可靠的方法診斷并治療幽門螺桿菌感染。
本發(fā)明涉及一種固體制劑，它能夠簡(jiǎn)單而又可靠地診斷出胃中正發(fā)生的與幽門螺桿菌感染相關(guān)的脲酶活性?？捎糜隍?yàn)證幽門螺桿菌存在的現(xiàn)有方法活組織檢查法這些方法(細(xì)菌培養(yǎng)、組織學(xué)檢查、快速尿素測(cè)試)的共同特征是，它們都是針對(duì)活組織檢查材料進(jìn)行的。這涉及到借助光學(xué)纖維對(duì)胃進(jìn)行胃鏡檢查，在此期間，取出胃粘膜的組織樣品。該方法費(fèi)用高昂而且會(huì)給患者造成痛苦。血清學(xué)方法這類方法的共同特征包括測(cè)定血液或胃分泌物中抗幽門螺桿菌的特異抗體的存在。這類方法的一個(gè)缺陷是，必須采集血樣或從胃中采集分泌物。血清學(xué)方法的另一個(gè)缺點(diǎn)是它不能表明在進(jìn)行檢查時(shí)存在細(xì)菌。
--以被感染幽門螺桿菌之時(shí)起到可以證實(shí)存在抗這種細(xì)菌的抗體止，大約需要20天時(shí)間。
--在成功地治愈所述細(xì)菌感染之后，在很長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)血液中都保持高濃度抗體，從而大大限制了進(jìn)行精確的后續(xù)檢查的可能性。尿素呼出試驗(yàn)該方法基于由幽門螺桿菌產(chǎn)生的脲酶。脲酶可催化尿素分解成氨和碳酸氫鹽。該碳酸氫鹽隨后又在胃的酸性環(huán)境中轉(zhuǎn)化成CO2和水。
目前，尿素呼出試驗(yàn)是以如下方式進(jìn)行的讓患者服含有同位素(11C、13C、14C)標(biāo)記的尿素水溶液。當(dāng)胃中含有產(chǎn)生脲酶的幽門螺桿菌和酸時(shí)，尿素被分解，而同位素標(biāo)記的碳原子轉(zhuǎn)化成CO2，它是通過呼出的空氣分泌的，然后測(cè)定呼出的空氣中同位素標(biāo)記的CO2濃度。
另一種加以改變的方法，是測(cè)定其它分解產(chǎn)物，即氨的濃度。在這種方法中，不需要對(duì)尿素中的碳進(jìn)行同位素標(biāo)記。盡管不是必需的，但可以對(duì)氮進(jìn)行同位素標(biāo)記，因?yàn)檎Ｇ闆r下呼出的空氣中不存在氨。這些氨是通過胃壁形成的，并進(jìn)入血液循環(huán)中，然后通過肝，并在經(jīng)過肺泡的呼出空氣中分泌。
該方法的優(yōu)點(diǎn)是，該檢查方法是非入侵性的，即患者不必忍受儀器(胃鏡)造成的不適，而且不必采集血樣或胃分泌樣品。另外，實(shí)際上該細(xì)菌是否具有真正局部的繁殖區(qū)無關(guān)緊要，因?yàn)樗玫哪蛩貢?huì)擴(kuò)散至胃的整個(gè)表面上。
申請(qǐng)日為1994年11月2日的瑞典專利申請(qǐng)9403755-3(相當(dāng)于國(guó)際專利申請(qǐng)PCT/SE 95/01212(WO 96/14091))披露了診斷藥物制劑，該制劑含有同位素標(biāo)記的尿素，它基本上不含水，并且優(yōu)選含有一種固態(tài)水溶性酸。該制劑被用于驗(yàn)證幽門螺桿菌在胃里的存在，方法是測(cè)定由該細(xì)菌的脲酶所產(chǎn)生的同位素標(biāo)記的CO2在呼出空氣中是否存在。該文獻(xiàn)未提及驗(yàn)證氨在呼出空氣中存在。
美國(guó)專利說明書US-A4,947,861披露了可以通過測(cè)定氨在呼出空氣中的存在驗(yàn)證胃中是否存在幽門彎曲桿菌(Campylobacter pylori)，這些氨是在由所述細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶的作用下產(chǎn)生的。該文獻(xiàn)僅提及患者應(yīng)當(dāng)攝入尿素，但未提及以何種形式攝入尿素。另外，在攝入尿素之后，能夠獲得檢驗(yàn)結(jié)果之前要花費(fèi)10-60分鐘(第三欄，第52-53行)。不同的是，在攝入本發(fā)明的無水制劑時(shí)，至多用10分鐘時(shí)間即可獲得檢驗(yàn)結(jié)果。
尿素呼出檢驗(yàn)的缺陷與很多實(shí)際情況相關(guān)1．以水溶液形式攝入尿素，這使得尿素能由患者口腔和咽中的產(chǎn)生脲酶菌分解，這有可能導(dǎo)致與幽門螺桿菌存在相關(guān)的假陽性結(jié)果。
2．在分析CO2時(shí)，為了檢驗(yàn)正確發(fā)揮功能，在胃中必需存在一定量的氫離子，以使所產(chǎn)生的碳酸氫鹽分解成CO2。很多患有胃潰瘍的患者都是用酸分泌抑制藥物進(jìn)行治療，在用現(xiàn)有的檢驗(yàn)方法檢查這類患者時(shí)會(huì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
3．在水浴中尿素只有短暫化學(xué)穩(wěn)定性，在將該檢驗(yàn)方法應(yīng)用于臨床實(shí)踐時(shí)會(huì)產(chǎn)生實(shí)際困難。而且，同位素標(biāo)記的尿素也比較昂貴。
4．同位素標(biāo)記的尿素的使用，需要用復(fù)雜而又昂貴的質(zhì)譜儀設(shè)備，以證明具體的碳同位素。不過同位素14C具有放射性，并可以通過閃爍測(cè)定法更方便地顯示。不過，不會(huì)有人推薦患者攝入放射性物質(zhì)，即使所攝入的劑量很小。
通過以上說明可以了解，有幾種已知的驗(yàn)證幽門螺桿菌在胃中是否存在的方法，而且，這些方法具有若干缺陷，例如，不能正確顯示細(xì)菌的存在，此外，還給患者帶來不適。
因此，迫切需要改進(jìn)的診斷方法，該方法可以在所有條件下提供更大的診斷可靠性，具有較高的實(shí)用價(jià)值。
本發(fā)明的一般性說明含有尿素的基本上無水的膠囊、片劑或某些其它很快可溶的固體制劑，在用于診斷胃潰瘍病而測(cè)定氨的存在時(shí)具有幾個(gè)顯著優(yōu)點(diǎn)1．服用固體制劑的尿素，可防止口腔和喉部產(chǎn)生的脲酶菌在其到達(dá)胃里之前將其分解。這顯著提高了這種檢查的可靠性，因?yàn)樗档土思訇栃越Y(jié)果的幾率。
2．有關(guān)氨的存在分析，使得尿素呼出試驗(yàn)可以在進(jìn)行酸分泌抑制處理的過程中進(jìn)行，因?yàn)榘钡漠a(chǎn)生不需要較高的氫離子濃度，這與CO2的產(chǎn)生不同。
這會(huì)產(chǎn)生明顯的優(yōu)勢(shì)，因?yàn)榻邮苣蛩睾舫鲈囼?yàn)的患者，是用有效的酸分泌抑制藥物進(jìn)行慢性治療的，從而明顯減少了假陰性結(jié)果的出現(xiàn)。
3．由于膠囊、片劑或其它固體制劑中的無水尿素在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)都很穩(wěn)定，從而避免了尿素在水溶液中有限的化學(xué)穩(wěn)定性帶來的相關(guān)問題。
對(duì)于尿素呼出試驗(yàn)的推廣和應(yīng)用來說，這具有顯著的實(shí)用優(yōu)點(diǎn)。
4．與已經(jīng)建立的水基檢驗(yàn)液體相比，固體制劑(例如，片劑)的使用還具有劑量準(zhǔn)確和節(jié)省時(shí)間的優(yōu)點(diǎn)。
5．在通過測(cè)定所產(chǎn)生的CO2濃度而驗(yàn)證幽門螺桿菌的存在時(shí)，必需使用昂貴的同位素標(biāo)記的尿素，和昂貴而又復(fù)雜的質(zhì)譜儀或放射學(xué)裝置，以區(qū)分由所述細(xì)菌產(chǎn)生的CO2和由該機(jī)體的代謝而正常產(chǎn)生的CO2。在驗(yàn)證所產(chǎn)生的氨的存在時(shí)沒有必要這樣做，因?yàn)樵谡Ｇ闆r下，機(jī)體的代謝不能產(chǎn)生氨。
為了能夠獲得上述顯著優(yōu)點(diǎn)，必需制備固體制劑，使其含量不受患者口腔和咽喉部位的脲酶影響，并使其可以在胃中很快地徹底崩解。
附圖
中給出了用本發(fā)明制劑按照以下實(shí)施例進(jìn)行的比較試驗(yàn)所取得的結(jié)果。
本發(fā)明的技術(shù)說明按照本發(fā)明，提供了一種固體制劑，該制劑主要含有尿素，并且基本上無水，該制劑意在經(jīng)口用于人體。
在一個(gè)適宜的實(shí)施方案中，所述制劑還含有固體水溶性堿，如碳酸氫鈉。加入堿有利于氨轉(zhuǎn)移到血中，并從血轉(zhuǎn)移到肺中，而且不會(huì)與胃酸反應(yīng)生成鹽。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，堿的加入量使得胃中的pH在4-8的范圍內(nèi)，尤其是與制劑接近。
本發(fā)明的藥用制劑是這樣組成的即當(dāng)該制劑到達(dá)胃里以后，尿素基本上可以瞬時(shí)釋放出來。該制劑可以為傳統(tǒng)片劑形式，可選擇性地帶有速溶包衣，不過，它也可以為膠囊形式。盡管軟明膠膠囊也可以使用，但首先考慮所謂“硬明膠膠囊”(有蓋膠囊)。該制劑的唯一條件是，其化學(xué)穩(wěn)定性應(yīng)當(dāng)足夠高，而且該制劑的活性物質(zhì)成分可以迅速釋出并溶解。作為一種原則，當(dāng)活性物質(zhì)和賦形劑以固體形式存在時(shí)，其化學(xué)穩(wěn)定性得以改善。如果將一種油溶液與軟明膠膠囊結(jié)合在一起使用時(shí)，其穩(wěn)定性通常足夠高。
也可以使用其它固體制劑。舉例來說，可以使用固溶體、固體分散劑和丸狀制劑，但并不局限于所列舉的這些可能的制劑。丸狀制劑包括通過造粒或擠壓/成團(tuán)所產(chǎn)生的較大或較小的顆粒。然后可將活性物質(zhì)摻入所述丸劑中，或附著在其表面。然后可將該活性丸劑壓縮成型為可以迅速崩解的片劑，或是將所述丸劑包在硬明膠膠囊中。
就片劑而言，它是本發(fā)明制劑的優(yōu)選實(shí)施方案，該片劑可以通過賦形劑和本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的加工步驟生產(chǎn)。因此，為了獲得最快速的釋放和溶解，優(yōu)選使用基本上為水溶性的成分，和能加速該片劑崩解的賦形劑。所使用的賦形劑可以是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的藥用崩解劑。在水中因?yàn)樗献饔枚黠@膨脹，且能比其干體積增加10-20倍的這類試劑特別適宜。這些試劑的例子有交聯(lián)聚合物形式的纖維素和淀粉衍生物，它們盡管不溶于水，但在水中會(huì)明顯膨脹。這些試劑的例子之一是聚乙烯吡咯烷酮衍生物。特別值得一提的適當(dāng)藥用崩解劑包括一種改性的纖維素膠，它在水中膨脹性很高，并且已由美國(guó)的FMC公司以Ac-Di-Sol為注冊(cè)商標(biāo)將其商品化。也可以使用其它類型的藥用崩解劑，而且，本領(lǐng)域技術(shù)人員在選擇適當(dāng)?shù)谋澜鈩r(shí)不會(huì)遇到任何困難。
在一種特別優(yōu)選的形式中，所述活性物質(zhì)尿素是以極細(xì)的顆粒形式使用。在這種形式中，其粒度優(yōu)選小于200μm，更優(yōu)選低于20μm。不過，這并不排除在制備該制劑時(shí)，若其它方面允許使用更粗一些的活性物質(zhì)顆粒。這種判斷和評(píng)價(jià)未超出技術(shù)人員的經(jīng)驗(yàn)范圍。
本領(lǐng)域技術(shù)人員已知幾種測(cè)定氣體混合物(本文為呼出的空氣)中氨是否存在的方法。就此而言，可以使用前面所提到的披露于專利說明書US-A4,947,861中的方法。
實(shí)施例為了試驗(yàn)并比較本發(fā)明與傳統(tǒng)技術(shù)(水溶液和測(cè)定呼出的空氣中的CO2濃度)，按照如下方法制備片劑在傳統(tǒng)旋轉(zhuǎn)混合器中混合以下組合物的成分。然后在裝配有12mm杯形沖頭的所謂外心機(jī)(excentermachine)上壓縮所述片劑。一個(gè)片劑的組成1．尿素 450mg2．甘露糖醇 63mg3．AvicelPh10160mg4．Ac-Di-Sol24mg5．硬脂酸鎂 3mg通常以顆粒形式將甘露糖醇用于所謂直接壓縮。
AvicelPh101是由美國(guó)FMC公司零售的一種微晶纖維素商品名稱。
Ac-Di-Sol是由美國(guó)FMC公司銷售的一種改性纖維素橡膠的商品名稱，它在水中會(huì)大幅度膨脹。在本發(fā)明中它起著藥用崩解劑的作用，以便迅速崩解所述片劑。
通過給患者服用兩片上述片劑(相當(dāng)于900mg尿素)或含有100mg13C標(biāo)記的尿素的水溶液2.5ml，對(duì)患者進(jìn)行治療。
在用典型的服用同位素標(biāo)記的尿素(水溶液和測(cè)定CO2含量)和本發(fā)明制劑所做的對(duì)比試驗(yàn)中，在攝取所述水溶液10分鐘之后發(fā)現(xiàn)在該試驗(yàn)中包括的10個(gè)陰性患者中，有5位其胃中本無細(xì)菌的患者呼出的氣體中證實(shí)有同位素標(biāo)記的CO2的存在。
在攝入了本發(fā)明尿素制劑形式的患者中，呼出的空氣中未發(fā)現(xiàn)氨。
對(duì)水溶液中的同位素標(biāo)記過的尿素和本發(fā)明固體制劑進(jìn)行了比較，給17位已知其胃中存在所述細(xì)菌的患者服用以上制劑，在攝入所述片劑之后，所呼出的空氣中出現(xiàn)明顯氨氣量升高。在患者服用水溶液的情況下，在可以肯定地認(rèn)為所檢測(cè)到的同位素標(biāo)記的CO2源自胃中的脲酶之前，必須讓患者中的三位再等待10分鐘。
表1分別用水溶液中的同位素標(biāo)記尿素和本發(fā)明固體制劑診斷幽門螺桿菌的結(jié)果匯總。
方法 假陽性假陰性 患者人數(shù)10min20min 10min 20min溶液-CO250 - - 27片劑-氨 0 0 - 27以上檢查結(jié)果同樣示于附圖中。附圖表示按照歐洲標(biāo)準(zhǔn)方法用13C尿素進(jìn)行的常規(guī)呼氣試驗(yàn)獲得的結(jié)果，和用本發(fā)明所發(fā)明的制劑所獲得的試驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)性示意圖。圖中的每一個(gè)點(diǎn)表示以短時(shí)間間隔通過常規(guī)方法用溶液中的尿素試驗(yàn)一位患者，并測(cè)定其所呼出空氣中的CO2，以及用本發(fā)明的無水試劑試驗(yàn)該患者，并測(cè)定其所呼出空氣中的氨。在兩種給藥形式中，均在10分鐘之后取樣。因此，理想情況是所有的點(diǎn)均應(yīng)位于45°線上。
那些位于45°線之下的點(diǎn)表示用傳統(tǒng)溶液方法獲得的檢驗(yàn)值或多或少確實(shí)有偏差，而且，顯而易見的是得到了大量的假陽性檢驗(yàn)值(那些接近X軸的點(diǎn))，另一方面，本發(fā)明的制劑產(chǎn)生正確的O值。它還表明，采用本發(fā)明制劑所取得的結(jié)果比使用傳統(tǒng)溶液所取得的結(jié)果更加可靠。其分析也更加簡(jiǎn)單，因?yàn)闊o需對(duì)特定的碳同位素進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)。這也大大降低了有關(guān)費(fèi)用。
因此，與用于現(xiàn)有技術(shù)中的傳統(tǒng)溶液相比，將本發(fā)明的無水制劑用于驗(yàn)證胃中幽門螺桿菌的存在具有多項(xiàng)優(yōu)點(diǎn)，這些優(yōu)點(diǎn)對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說不是顯而易見的。
權(quán)利要求
1．一種通過驗(yàn)證呼出空氣中有氨產(chǎn)生而證實(shí)胃中存在與幽門螺桿菌(Helicobacter pylori)感染相關(guān)的脲酶活性所用的藥物制劑，其特征在于該制劑是由一種固體、基本上無水的組合物組成，該組合物中含有尿素，尿素會(huì)受幽門螺桿菌活性作用而生成氨。
2．如權(quán)利要求1的制劑，其特征在于該制劑的配制要使之服用之后能在胃中迅速溶解。
3．如權(quán)利要求1或2的制劑，其特征在于該制劑含有一種固體水溶性堿。
4．如權(quán)利要求3的制劑，其特征在于所述固體水溶性堿的用量使得胃的pH最低為4，最高為8，尤其是與該制劑相近。
5．如權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的制劑，其特征在于所述尿素的粒度基本上低于200μm，優(yōu)選低于20μm。
全文摘要
本發(fā)明涉及以片劑形式、膠囊形式或某些其它固體形式施用尿素的基本上無水的制劑。該制劑在胃中很快溶解。該制劑被用于證實(shí)呼出的空氣中是否存在氨,所述氨是由于胃中與幽門螺桿菌感染相關(guān)的脲酶活性提高而產(chǎn)生的。
文檔編號(hào)A61K49/00GK1216924SQ97194249
公開日1999年5月19日 申請(qǐng)日期1997年4月18日 優(yōu)先權(quán)日1996年4月30日
發(fā)明者C·奈斯特倫, A·佩特爾森, T·倫德奎斯特 申請(qǐng)人:迪爾巴特公司