本發(fā)明屬于保健品的技術領域，具體是涉及將羥基酪醇作為功能因子，與透明質酸，精氨酸和瓜氨酸配伍，用于制備一種羥基酪醇組合物及其應用。
背景技術：
心腦血管疾病是中老年人群中的常見疾病，全世界每年有1500萬人死于心腦血管疾病。心腦血管疾病的致病機制主要是血液中的油脂和膽固醇沉積在血管壁上，造成血管直徑變小而阻塞血液通過，進而出現(xiàn)冠心病等心腦血管疾病。高密度脂蛋白膽固醇(hdl-c)是血管中的“清道夫”，可將血管中的膽固醇轉運到肝臟分解代謝成膽酸排出體外，所以提高血液中的hdl-c含量可降低血漿和血管壁中膽固醇水平，防止粥動脈硬化的發(fā)生。
地中海地區(qū)心腦血管疾病的發(fā)病率較低的主要原因是人們大量地食用橄欖油，而羥基酪醇作為橄欖油中的主要活性成分，發(fā)揮了重要作用。羥基酪醇(英文名hydroxytyrosol)，又稱為3,4-二羥基苯乙醇，是一種天然的多酚類化合物，主要以橄欖苦苷的形式存在于橄欖科橄欖屬的果實和樹葉中。2011年8月，歐洲食品安全局(europeanfoodsafetyauthority，efsa)批準橄欖提取的多酚類化合物羥基酪醇具有保健功效，能維持和升高血液中hdl-c的濃度，防止低密度脂蛋白(ldl)被氧化，適度降低低密度脂蛋白膽固醇(ldl-c)濃度，防止動脈內皮細胞受到過氧化損傷而引起動脈硬化，進一步預防高血壓、心臟病、腦溢血等疾病發(fā)生。
一氧化氮是體內的活性因子，可維持血管張力恒定和調節(jié)血壓穩(wěn)定，抑制血小板粘附和聚集。血管內一氧化氮含量不足，導致血管不能維持張力的恒定，體內血壓不平穩(wěn)，導致高血壓、心律不齊等疾病發(fā)生。因此，適量提高體內抗氧化物質和一氧化氮的含量，對預防和治療心腦血管疾病有積極的作用。羥基酪醇能夠防止氧自由基與體內的一氧化氮發(fā)生反應，可保持體內一氧化氮的活性；精氨酸是體內產(chǎn)生一氧化氮的唯一底物，被廣泛用在保健品和藥品中，可促進體內一氧化氮產(chǎn)生，從而達到調節(jié)心腦血管疾病的作用；瓜氨酸能使人的血管松弛，提高大腦清晰度，提高身體免疫力。另外，在本組合物中添加透明質酸，可以促進主動脈內皮細胞及毛細管細胞的增殖和移動，促進新血管的生成。
發(fā)明人經(jīng)大量的市場調研，發(fā)現(xiàn)目前市場上的羥基酪醇及其前體橄欖苦苷的保健產(chǎn)品品種繁多，但大多數(shù)均采用純度較低的羥基酪醇提取物為原料。例如市場上廣泛銷售的羥基酪醇凍干粉，其中，羥基酪醇的總含量在2.5％～20％，其它成分為橄欖苦苷和多種生物堿，它們的存在影響了產(chǎn)品的色澤及口感，使產(chǎn)品的質量監(jiān)控困難；另外羥基酪醇的含量低，要達到較好的保健效果，需服用大量的羥基酪醇低濃度產(chǎn)品，消費者的服用成本高。
針對上述困難和問題，發(fā)明者采用高純度的羥基酪醇為初始原料，并將高純度羥基酪醇與透明質酸，精氨酸和瓜氨酸合理配伍，該組合物實現(xiàn)了各組分相輔相成的作用方式，在藥效上實現(xiàn)了突破，從前期的實驗數(shù)據(jù)顯示，各組分搭配合理，該組合物能有效降低血脂，預防和治療心腦血管疾病的效果顯著。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是將高純度的羥基酪醇作為活性因子，制備一種具有降低血脂，對心腦血管疾病具有預防、輔助治療和愈后保健作用的組合物。
本發(fā)明的另一目的是提供含有羥基酪醇的降血脂組合物的應用。
為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術方案：一種含有羥基酪醇的降血脂組合物，主要由以下成分制成：按重量計，羥基酪醇1～10份，透明質酸3～20份，精氨酸40～160份，瓜氨酸5～30份。
所述的含有羥基酪醇的降血脂組合物，主要由以下成分制成：按重量計，羥基酪醇2～6份，透明質酸5～15份，精氨酸50～100份，瓜氨酸10～20份。
所述的含有羥基酪醇的降血脂組合物，主要由以下成分制成：按重量計，羥基酪醇4份，透明質酸8份，精氨酸75份，瓜氨酸15份。
所述的羥基酪醇的來源，包括化學合成或植物提取，純度>90％，化學合成羥基酪醇可采用zl201310199087.5提供的制備方法。
所述的透明質酸的來源，包括動物來源的提取的透明質酸和發(fā)酵法制備的透明質酸。
所述的精氨酸的來源，包括提取的精氨酸和發(fā)酵制備的精氨酸。
所述的瓜氨酸的來源，包括提取、發(fā)酵及合成的瓜氨酸。
所述的含有羥基酪醇的組合物還可含有輔料成分，所述輔料成分是指藥品和食品領域常規(guī)的賦形劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、抗氧劑、乳化劑、矯味劑、包衣劑等。
所述的含有羥基酪醇的組合物可通過常規(guī)方法制成各種口服制劑，包括片劑、膠囊劑、口服液、顆粒劑、功能性飲料等。
所述的含有羥基酪醇的組合物的制備方法：將所述的組合物的各成分精密稱量，順序添加，混勻，粉碎；根據(jù)對產(chǎn)品形狀要求，添加常規(guī)的制劑輔料適量，按藥典等載明的各種劑型的制備方法制成成品。
本發(fā)明所述的所有原料均符合藥用和食用國家標準，所有輔料是根據(jù)劑型需要的藥劑學所允許的藥用輔料。
所述的組合物用于制備具有降血脂或抗氧化功能的藥物和保健品的應用，并用于制備可輔助預防和治療冠心病、心絞痛、心肌梗死、腦梗死等心腦血管疾病的藥物和保健品的應用。
本發(fā)明的優(yōu)點在于：
(1)所述的含有羥基酪醇的組合物優(yōu)選采用純度>90％(高效液相色譜檢測)的高純度羥基酪醇，羥基酪醇的來源包括化學合成和植物提取，高純度羥基酪醇可明顯提高該組合物的降血脂功效和抗氧化功效。
(2)所述的含有羥基酪醇的組合物是羥基酪醇，透明質酸，精氨酸和瓜氨酸按照一定的比例組方制備而成。該處方作用機制是：羥基酪醇可穩(wěn)定和增加血液中高濃度脂蛋白膽固醇的濃度，還可作為一種抗氧化劑，不僅可防止氧自由基與一氧化氮反應生成具有損傷性的過氧化亞硝酸鹽，還可防止透明質酸在體內降解，延長透明質酸的作用時間，保證藥效。精氨酸作為一氧化氮補充劑，可防治心腦血管疾??；透明質酸可預防動脈壁再狹隘，促進新血管床的生成；瓜氨酸可起到藥效加強的效果，增強身體免疫力，保護心腦血管健康。
(3)所述的含有羥基酪醇的組合物綜合了四種成份的功效，合理配伍，作用全面，安全有效，在藥效體現(xiàn)上實現(xiàn)了重大突破。
(4)所述的含有羥基酪醇的組合物可以實現(xiàn)保護心腦血管系統(tǒng)，預防和治療高血脂、冠心病、心肌梗塞等疾病。
具體實施方式
結合實施例和對比例對本發(fā)明作進一步的說明，應該說明的是，下述說明僅是為了解釋本發(fā)明，并不對其內容進行限定。
實施例1
取透明質酸3g，精氨酸40g，瓜氨酸5g混合后粉碎機粉碎后過60目篩，取羥基酪醇1g溶于80％乙醇中作為潤濕劑制得軟材，制粒，干燥(50℃)，過30目篩整粒制得含有羥基酪醇的降血脂組合物。
實施例2
取透明質酸5g，精氨酸50g，瓜氨酸10g混合后粉碎機粉碎后過60目篩，取羥基酪醇2g溶于80％乙醇中作為潤濕劑制得軟材，制粒，干燥(50℃)，過30目篩整粒制得含有羥基酪醇的降血脂組合物。
實施例3
取透明質酸13g，精氨酸80g，瓜氨酸20g混合后粉碎機粉碎后過60目篩，取羥基酪醇3g溶于80％乙醇中作為潤濕劑制得軟材，制粒，干燥(50℃)30分鐘，過30目篩整粒制得含有羥基酪醇的降血脂組合物。
實施例4
取透明質酸8g，精氨酸75g，瓜氨酸15g混合后粉碎機粉碎后過60目篩，取羥基酪醇4g溶于80％乙醇中作為潤濕劑制得軟材，制粒，干燥(50℃)，過30目篩整粒制得含有羥基酪醇的降血脂組合物。
實施例5
取透明質酸15g，精氨酸130g，瓜氨酸25g混合后粉碎機粉碎后過60目篩，取羥基酪醇6g溶于80％乙醇中作為潤濕劑制得軟材，制粒，干燥(50℃)，過30目篩整粒制得含有羥基酪醇的降血脂組合物。
實施例6
取透明質酸20g，精氨酸160g，瓜氨酸30g混合后粉碎機粉碎后過60目篩，取羥基酪醇10g溶于80％乙醇中作為潤濕劑制得軟材，制粒，干燥(50℃)，過30目篩整粒制得含有羥基酪醇的降血脂組合物。
根據(jù)實施例1～6得到的含有羥基酪醇的降血脂組合物，用于制備降脂效果的藥物、抗氧化的藥物、提高血清sod活力的藥物和降低低密度脂蛋白含量的藥物，并用于制備具有降脂效果和具有抗氧化功能的保健食品，還可用于制備具有降脂效果和具有抗氧化功能的功能性飲料。
應用例
該組合物可以加工成片劑、膠囊、口服液、顆粒劑、功能性飲料等形式。
1.含有羥基酪醇降血脂組合物片劑的制備
按照實施例1～6得到的含有羥基酪醇的降血脂組合物，加入硬脂酸鎂適量，香精適量，壓片制得含有羥基酪醇降血脂組合物的片劑。
2.含有羥基酪醇降血脂組合物膠囊劑的制備
按照實施例1～6得到的含有羥基酪醇的降血脂組合物，加入微晶纖維素適量，硬脂酸鎂適量，裝入膠囊，制得含有羥基酪醇降血脂組合物的膠囊劑。
3.含有羥基酪醇降血脂組合物功能性飲料的制備
按照實施例1～6得到的含有羥基酪醇的降血脂組合物，加入阿斯巴甜、檸檬酸、護色劑vc及增稠劑羥甲基纖維素鈉等原料，按照料水比1:3制備含有羥基酪醇降血脂組合物的功能性飲料。
實驗例
藥品：羥基酪醇，山東省藥學科學院提供，批號：20160620；透明質酸，華熙福瑞達生物醫(yī)藥有限公司，批號：20160304；精氨酸，南通飛宇生物科技有限公司，批號：20160125；瓜氨酸，山東玖勝生物科技有限公司，批號：20160227。
試劑：總膽固醇(tc)檢測試劑盒由上海名典生物工程有限公司提供；高密度脂蛋白膽固醇(hdl-c)elisakit檢測試劑盒由上海高創(chuàng)化學科技有限公司提供；低密度脂蛋白膽固醇(ldl-c)檢測試劑盒由瑞士羅氏公司提供；sod、mda檢測試劑盒由南京建成生物研究所提供；其它試劑均為分析純。
儀器：synergyneo全功能酶標儀，美國bio-tek公司。7600-010型全自動生化分析儀，日本日立公司。
實驗用大鼠模型參照文獻(徐淑云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學[m].北京：人民衛(wèi)生出版社，第三版，2005：1203-1203)對spf級sd大鼠進行高脂飼料喂養(yǎng)。
試驗樣品：本發(fā)明實施例4的組合物。
試驗動物：wistar大鼠，體重180～200g，雄性。
高脂飼料的配制：76.5％基礎飼料，3.5％膽固醇，10％豬油，10％蛋黃粉，制成顆粒。
動物模型的建立：大鼠40只，隨機分成4組。(1)對照組10只，普通飼料喂養(yǎng)。(2)高脂組10只，高脂飼料喂養(yǎng)。(3)試驗組20只，分為試驗組ⅰ和試驗組ⅱ，各10只，以高脂飼料添加實施例4的組合物混合飼料喂養(yǎng)，其中組合物按167mg/kg.bw和334mg/kg.bw劑量添加。
飼養(yǎng)環(huán)境：溫度18～25℃，相對濕度50％～60％，所有試驗動物均為單籠飼養(yǎng)，自由飲水，每周稱取體重，試驗周期4周。
方法：第28天分別稱重，禁食16h后，取尾血，分析檢測。
統(tǒng)計學分析：數(shù)據(jù)用均值±標準差表示，以單因素方差分析法進行統(tǒng)計學檢驗。p<0.05為顯著差異。
試驗結果：
1.本發(fā)明組合物對大鼠體重的影響
表1大鼠體重變化
注：與對照組比較，#p<0.05，##p<0.01；與高脂飼料組比較，*p<0.05，**p<0.01。
由表1可見，在實驗的4周期間，對照組大鼠體重隨實驗時間延長逐步增加。高脂飼料喂養(yǎng)各組大鼠體質量也有增加，但增加幅度明顯低于對照組，試驗組i和試驗組ii第二周至第四周其體質量明顯低于空白對照組并有顯著性差異，與對照組比較，受試物各組大鼠體重均無顯著差異。說明該發(fā)明組合物不會額外增加實驗大鼠的體重，使大鼠處于一個相對的健康的狀態(tài)。
2.血脂濃度的變化
表2血脂濃度變化
注：與對照組比較，#p<0.05，##p<0.01；與高脂飼料組比較，*p<0.05，**p<0.01。
由表2可見，高脂飼料組大鼠血清的tc，ldl-c濃度均顯著高于正常飼料組(p<0.01)，hdl-c濃度低于正常飼料組，但在統(tǒng)計學上無顯著性差異(p<0.05)。試驗組ⅰ、ⅱ大鼠的血清tc和ldl-c濃度均明顯低于高脂飼料組；hdl-c的濃度明顯高于高脂飼料組(p<0.05)。
結果表明，高密度脂蛋白膽固醇hdl-c高于高脂組，低密度脂蛋白膽固醇ldl-c低于高脂組，且有明顯差異(p<0.01)。本組合物對大鼠具有調節(jié)血脂，預防心腦血管疾病的作用。
3.大鼠血清sod活性和mda含量
表3大鼠血清sod活性和mda含量
注：與對照組比較，#p<0.05，##p<0.01；與高脂飼料組比較，*p<0.05，**p<0.01。
采用比色法對各組大鼠血清總sod活性和mda含量檢測。與高脂飼料組對比，試驗組i和試驗組ii的血清sod活性明顯增加(#p<0.01，##p<0.01)。與高脂飼料組對比，試驗組i和試驗組ii的血清mda含量明顯下降，接近對照組(*p<0.01，**p<0.01)。由此可見，本發(fā)明的組合物可明顯提高血清sod活力，并降低血清mda含量，可減少自由基損傷，具有抗氧化作用。
綜上所述，本發(fā)明實施例的羥基酪醇組合物具有一定的降脂功能和抗氧化作用。
以上所描述的實施例是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例。本發(fā)明的實施例的詳細描述并非旨在限制要求保護的本發(fā)明的范圍，而是僅僅表示本發(fā)明的選定實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。