用于軟骨破壞的組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及關(guān)節(jié)健康，特別是本發(fā)明涉及用于預(yù)防或治療軟骨破壞或維護(hù)關(guān)節(jié)健 康的組合物的用途，所述組合物包含橄欖苦苷和/或羥基酪醇。
【背景技術(shù)】
[0002] 骨關(guān)節(jié)炎（0A)是一種高發(fā)病率疾病，其具有重要的社會經(jīng)濟(jì)影響。它是關(guān)節(jié)的關(guān) 節(jié)軟骨的變性疾病，是關(guān)節(jié)炎的最常見形式，影響成人人群的10%。0A是導(dǎo)致全世界中高 齡殘疾和保健開支的首要原因。
[0003] 關(guān)節(jié)軟骨的逐漸破壞和損失是主要的病理學(xué)特征，并伴有其他關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)的改變， 如滑膜增生、硬化和軟骨下骨的厚度、關(guān)節(jié)邊緣的骨贅形成、韌帶松弛和肌肉萎縮，所有這 些都導(dǎo)致了 0A的臨床癥狀。這些癥狀包括嚴(yán)重的疼痛、僵硬、關(guān)節(jié)運(yùn)動消失和殘疾。
[0004] 雖然患0A的個(gè)體增加了，但仍然沒有治愈手段，當(dāng)前藥物治療仍是緩和療法，著 力減輕癥狀。例如，使用止痛劑（如對乙酰氨基酚）和非類固醇抗炎藥（NSAID)治療疼痛 和炎癥。此外，這些藥物的使用通常與副作用相關(guān)，如胃腸道或心血管風(fēng)險(xiǎn)。
[0005] 因此，用于治療0A的改進(jìn)的組合物將是有利的，尤其是期待更有效和安全的組合 物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 之前已經(jīng)觀察到橄欖苦苷和羥基酪醇的抗炎和抗氧化性能。然而，本發(fā)明人令人 驚奇地證明這些化合物也具有對軟骨的抗分解代謝作用。
[0007] 因此，本發(fā)明的一個(gè)目的涉及提供用于改善關(guān)節(jié)健康的組合物。尤其是，本發(fā)明的 一個(gè)目的是提供一種通過預(yù)防或治療軟骨破壞來改善關(guān)節(jié)健康的組合物，并解決了上述現(xiàn) 有技術(shù)中副作用（如胃腸道和/或心血管風(fēng)險(xiǎn)）方面的問題。
[0008] 因此，本發(fā)明的一個(gè)方面涉及包含橄欖苦苷和/或羥基酪醇的組合物用于預(yù)防或 治療軟骨破壞。
[0009] 本發(fā)明的另一方面涉及制備根據(jù)本發(fā)明使用的組合物的方法。
【附圖說明】
[0010] 圖1A示出了在ILla不存在時(shí)（模擬細(xì)胞的正常狀態(tài)）ADAMTS-5 mRNA相對于 GAPDH的表達(dá)。各條件與CTL-進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較。
[0011] 圖1B示出了在ILla存在時(shí)（模擬細(xì)胞的疾病狀態(tài)）ADAMTS-5 mRNA相對于GAPDH 的表達(dá)。各條件與ILla進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，而ILla與CTL-進(jìn)行比較（驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)）。
[0012] 圖2A示出了在ILla不存在時(shí)（模擬細(xì)胞的正常狀態(tài)）COX-2 mRNA相對于GAPDH 的表達(dá)。各條件與CTL-進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較。
[0013] 圖2B示出了在ILla存在時(shí)（模擬細(xì)胞的疾病狀態(tài)）COX-2 mRNA相對于GAPDH的 表達(dá)。各條件與ILla進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，而ILla與CTL-進(jìn)行比較（驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)）。
[0014] 圖3A示出了在ILla不存在時(shí)（模擬細(xì)胞的正常狀態(tài)）MMP-13 mRNA相對于GAPDH 的表達(dá)。各條件與CTL-進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較。
[0015] 圖3B示出了在ILla存在時(shí)（模擬細(xì)胞的疾病狀態(tài)）MMP-13 mRNA相對于GAPDH 的表達(dá)。各條件與ILla進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，而ILla與CTL-進(jìn)行比較（驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)）。
[0016] 圖4示出了豚鼠膝的組織學(xué)切片（蘇木紫、快綠和番紅精0染色）。4A和4B顯示 A組（橄欖苦苷）；4C和4D顯示C組（蘆丁）；4E和4F顯示D組（蘆丁和姜黃素）；4G和 4H顯示B組（對照）。
[0017] 圖5示出了各組總的0A評分。
[0018] 圖6A示出了血漿中炎性PGE2生物標(biāo)志物的濃度。圖6B示出了在第4和第35周 血漿PGE2水平和相應(yīng)的0A評分之間的相關(guān)性。
[0019] 圖7示出了血漿中Coll 2-1 N02生物標(biāo)記物的濃度與2型膠原隨時(shí)間斷裂的關(guān) 聯(lián)。
[0020] 圖8A示出了血漿中Coll 2-1 N02生物標(biāo)記物與2型膠原分解的關(guān)聯(lián)。
[0021] 圖8B示出了在第4和第35周血漿Coll 2-1 N02生物標(biāo)記物濃度和相應(yīng)的0A評 分之間的相關(guān)性。
[0022] 圖9示出了血漿中纖蛋白3-1生物標(biāo)記物的濃度與0A患者中軟骨細(xì)胞的過度生 長作用的關(guān)聯(lián)。
[0023] 圖10A示出了血漿中纖蛋白3-1生物標(biāo)記物的濃度與0A患者中軟骨細(xì)胞的過度 生長作用的關(guān)聯(lián)。
[0024] 圖10B示出了在第4和第35周血漿纖蛋白3-1生物標(biāo)記物濃度和相應(yīng)的0A評分 之間的相關(guān)性。
[0025] 發(fā)明詳述
[0026] 定義
[0027] 在進(jìn)一步詳細(xì)地討論本發(fā)明之前，首先定義下列術(shù)語和常用語：
[0028] 在本發(fā)明的上下文中，提及的百分?jǐn)?shù)都是重量/重量百分比，除非另有說明。
[0029] 在"X和/或Y"的上下文中使用的術(shù)語"和/或"應(yīng)被解釋為"X"、或"Y"、或"X和 Y"。
[0030] 本文所用的數(shù)值范圍旨在包括在該范圍內(nèi)的每個(gè)數(shù)字和數(shù)字的子集，無論具體公 開與否。此外，這些數(shù)值范圍應(yīng)被理解為涉及該范圍內(nèi)的任何數(shù)字或數(shù)字子集的權(quán)利要求 提供支持。例如，公開了從1到10應(yīng)被解釋為支持從1至8、從3至7、從4至9、從3. 6至 4. 6、從3. 5至9. 9的范圍，等等。
[0031] 本發(fā)明所有引用的單數(shù)特征或限制應(yīng)當(dāng)包括相應(yīng)的復(fù)數(shù)特征或限制，反之亦然， 除非另有說明或提及該引用的上下文明顯地有相反的暗示。
[0032] 除非另有定義，本文使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有與本領(lǐng)域普通技術(shù)人員通常 所理解的相同的含義。
[0033] 伸用的組合物
[0034] 橄欖苦苷是一種多酚，先前已證明其對炎癥和骨代謝具有有益作用。羥基酪醇作 為橄欖苦苷的代謝物是一種相關(guān)化合物，已經(jīng)表明羥基酪醇也具有這些效果?，F(xiàn)在本發(fā)明 人令人驚奇地表明，橄欖苦苷和羥基酪醇各自也對軟骨破壞具有有益效果。
[0035] 關(guān)節(jié)疾病可伴隨較大或較小程度的炎癥。在一些疾病中，炎癥是主要的組成，諸如 例如在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA)中。在其他疾病，諸如例如0A，炎癥不占主導(dǎo)地位。然而，這兩 種疾病均有分解代謝組分，其中關(guān)節(jié)軟骨被破壞。
[0036] 本發(fā)明人已經(jīng)證明，在0A的動物模型中提供橄欖苦苷可以防止軟骨破壞。羥基酪 醇也已顯示在軟骨模型系統(tǒng)中抑制分解代謝的酶。
[0037] 因此，本發(fā)明在第一方面涉及包含橄欖苦苷和/或羥基酪醇的組合物，用于預(yù)防 或治療軟骨破壞。
[0038] 以另一種方式，本發(fā)明的該方面可被描述為橄欖苦苷和/或羥基酪醇在制備用于 預(yù)防或治療軟骨破壞的藥物中的用途。
[0039] 預(yù)防或治療軟骨破壞的用途與抑制或減少軟骨破壞的用途是同義的。
[0040] 因此，本發(fā)明的實(shí)施方案包括包含橄欖苦苷的組合物用于預(yù)防或治療軟骨破壞和 包含羥基酪醇的組合物用于預(yù)防或治療軟骨破壞。
[0041] 本發(fā)明的又一實(shí)施方案包括包含橄欖苦苷和羥基酪醇的組合物用于預(yù)防或治療 軟骨破壞。
[0042] 本發(fā)明進(jìn)一步的實(shí)施方案包括用于本發(fā)明的組合物，其中所述組合物還包含姜黃 素，以及用于本發(fā)明的組合物，其中所述組合物進(jìn)一步包含槲皮素。
[0043] 在本發(fā)明的實(shí)施方案中，用于本發(fā)明的組合物包含橄欖苦苷和/或羥基酪醇、以 及一種或多種其他多酸，例如選自姜黃素和槲皮素的一種或多種多酸。
[0044] 本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案涉及用于本發(fā)明的組合物，其中所述組合物包含橄欖苦苷 和/或羥基酪醇，并且還包含姜黃素。
[0045] 橄欖苦苷和姜黃素的組合，以及羥基酪醇和姜黃素的組合，都被證明在體外軟骨 模型中抑制分解代謝的酶（參見圖1和3,實(shí)施例1)。
[0046] 本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及用于本發(fā)明的組合物，其中所述組合物包含橄欖苦 苷和/或羥基酪醇，并且還包括槲皮素。
[0047] 橄欖苦苷和槲皮素的組合、以及羥基酪醇和槲皮素的組合，都被證明在體外軟骨 模型中抑制分解代謝的酶（參見圖1和3,實(shí)施例1)。
[0048] 在又一個(gè)實(shí)施方案中，用于本發(fā)明的組合物包含橄欖苦苷和/或羥基酪醇，并進(jìn) 一步包含姜黃素和槲皮素。
[0049] 橄欖苦苷+姜黃素+槲皮素的組合、或羥基酪醇+姜黃素+槲皮素的組合，已分別 被證明對軟骨破壞中分解代謝酶的活性具有協(xié)同和特異的效果（參見圖1和3,實(shí)施例1)。
[0050] 成分-主要的牛物活件化合物
[0051] 橄欖苦苷、羥基酪醇、姜黃素和槲皮素是本發(fā)明的主要生物活性分子。它們可以來 自任何合適的來源。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，橄欖苦苷、羥基酪醇、姜黃素和槲皮素從植物來 源獲得。橄欖苦苷和羥基酪醇例如可以從橄欖植物獲得。
[0052] 成分-講一步的牛物活件化合物
[0053] 用于本發(fā)明的組合物也可以包含至少一種其他生物活性化合物，如選自抗氧化 劑、抗炎化合物、糖胺聚糖、益生元、纖維、益生菌、脂肪酸、礦物質(zhì)、微量元素和/或維生素 的化合物。
[0054] 在本申請的上下文中，術(shù)語"生物活性"是指該化合物除滿足基本的營養(yǎng)需要之 外，其有助于個(gè)體健康、或?qū)θ梭w有效果。
[0055] 至少一個(gè)其他生物活性化合物可以來自天然來源。因此，這些化合物可以來自植 物、動物、魚類、真菌、藻類、微生物發(fā)酵物的提取物。認(rèn)為礦物質(zhì)來自天然來源，屬于此定 義。
[0056] 抗炎化合物和/或抗氣化劑
[0057] 與抗炎化合物組合
[0058] 在一個(gè)方面，本發(fā)明涉及組合物，其用于預(yù)防或治療軟骨破壞。
[0059] 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物可與至少一種抗炎化合物組合 使用。
[0060] 所述至少一種抗炎化合物可與本發(fā)明的組合物組合施用，例如相繼或同時(shí)施用。
[0061] 所述至少一種抗炎化合物可以與本發(fā)明的組合物在相同的組合物中提供，或者可 以在單獨(dú)的組合物中提供，例如在多部分試劑盒中提供，或以一系列相互作用的產(chǎn)品提供。 [0062] 如果用于本發(fā)明的組合物與至少一種抗炎化合物存在于一個(gè)或多個(gè)單獨(dú)的組合 物中，它們可以在使用之前混合，或可同時(shí)或相繼施用。
[0063] 在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，用于本發(fā)明的組合物包含作為至少一種其他生物活性化 合物的至少一種抗炎化合物。在其他優(yōu)選的實(shí)施方案中，用于本發(fā)明的組合物包含作為至 少一種其他生物活性化合物的至少一種抗氧化劑。
[0064] 所述至少一種抗炎和/或抗氧化劑化合物可以是任何具有抗炎和/或抗氧化作用 的合適的化合物。
[0065] 值得注意的是，一些抗炎化合物還具有抗氧化作用。可以根據(jù)其具有一種或兩種 特性選擇包含該化合物。
[0066] 可以包含在本發(fā)明組合物中的抗炎化合物的實(shí)例是天然來源的抗炎化合物。
[0067] 因此，本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案涉及用于本發(fā)明的組合物