含有8種甘油三酯的薏苡仁油、制劑及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種從薏苡仁中提取的薏苡仁油、制劑及其在抗腫瘤或治療炎癥藥物中的應(yīng)用。具體的，該薏苡仁油中含有如下質(zhì)量百分含量的8種甘油三酯類成分：三亞油酸甘油酯4.87～6.99％、1-油酸-2,3-二亞油酸甘油酯13.00～18.69％、1-棕櫚酸-2,3-二亞油酸甘油酯5.25～7.54％、1,3-二油酸-2-亞油酸甘油酯13.23～19.02％、1-棕櫚酸-2-亞油酸-3-油酸甘油酯10.26～14.75％、1,3-二棕櫚酸-2-亞油酸甘油酯2.28～3.28％、三油酸甘油酯14.44～20.76％和1-棕櫚酸-2,3-二油酸甘油酯8.06～11.58％。
【專利說明】含有8種甘油三酯的薏苡仁油、制劑及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及藥學(xué)領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及一種薏苡仁油、制劑、制備方法及其在制備抗腫瘤或治療炎癥藥物中的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]薏該仁是禾本科薏該屬植物薏該Coix lacryma-jobi L.var ma-yuen (Roman.)Stapf的成熟干燥種仁，為利水滲濕藥，很久以來為藥食兩用品種。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)薏苡仁具有鎮(zhèn)痛抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗?jié)?、降血脂和減肥等藥理作用。近年來，國內(nèi)外學(xué)者通過TLC、HPLC-MS、GC等方法對薏苡仁的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)其含有多種活性成分，主要包括薏苡仁酯、甘油三酯類、脂肪酸類、內(nèi)酰胺類、薏苡仁內(nèi)酯、糖類、留醇類、三萜類等化合物。其中，酯類是首先被發(fā)現(xiàn)的具有抗腫瘤活性的成分，也是報(bào)道最多最受關(guān)注的化學(xué)成分。雖然目前在中國臨床上以薏苡仁油為有效成分的康萊特注射劑已得到普遍應(yīng)用，但其使用的薏苡仁油成分較復(fù)雜，除含有甘油三酯成分外，還含有甘油一酯、甘油二酯以及脂肪酸酯等，這必然會使實(shí)際生產(chǎn)過程中的質(zhì)量控制和臨床用藥安全面臨很大的挑戰(zhàn)。
[0003]本發(fā)明以薏苡仁粉為原料，采用超臨界二氧化碳萃取、堿化、中性氧化鋁和高嶺土:活性炭=1:1的混合吸附劑純化等步驟，得到了一種薏苡仁油有效部位；通過對其活性成分的分離與鑒定，確定了其組成主要為八種甘油三酯成分；并進(jìn)一步對其進(jìn)行理化常數(shù)的檢測，確定了其最優(yōu)酸值、碘值、皂化值、折光率和相對密度等。采用本發(fā)明所述薏苡仁油用藥，成分及組成確定，保證了工業(yè)生產(chǎn)中各批次間的質(zhì)量穩(wěn)定性。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種從薏苡仁中提取的薏苡仁油，其特征在于:該薏苡仁油中含有如下質(zhì)量百分含量的8種甘油三酯類成分:三亞油酸甘油酯4.87?6.99%、1_油酸-2，3-二亞油酸甘油酯13.00?18.69%、1-棕櫚酸-2，3-二亞油酸甘油酯5.25?
7.54%U, 3- 二油酸-2-亞油酸甘油酯13.23?19.02%Λ~棕櫚酸_2_亞油酸-3-油酸甘油酯10.26?14.75%U, 3-二棕櫚酸_2_亞油酸甘油酯2.28?3.28%、三油酸甘油酯14.44?20.76%和1-棕櫚酸_2，3-二油酸甘油酯8.06?11.58%。
[0005]優(yōu)選的，上述8種甘油三酯成分的質(zhì)量百分含量為:三亞油酸甘油酯
5.47-6.69%、1-油酸-2，3- 二亞油酸甘油酯14.63?17.88%、1-棕櫚酸-2，3- 二亞油酸甘油酯5.9?7.21 %、1，3- 二油酸-2-亞油酸甘油酯14.88?18.19%、1-棕櫚酸-2-亞油酸-3-油酸甘油酯11.55?14.11 %、1，3-二棕櫚酸-2-亞油酸甘油酯2.57?3.14%,三油酸甘油酯16.25?19.86%和1-棕櫚酸-2，3- 二油酸甘油酯9.07?11.08% ;
[0006]更優(yōu)選的，上述8種甘油三酯成分的質(zhì)量百分含量為:三亞油酸甘油酯5.96?
6.20 %、1-油酸-2，3- 二亞油酸甘油酯15.93?16.58 %、1-棕櫚酸-2，3- 二亞油酸甘油酯6.43?6.69 %、1，3- 二油酸-2-亞油酸甘油酯16.20?16.87 %、1-棕櫚酸_2_亞油酸-3-油酸甘油酯12.57?13.09%、1，3- 二棕櫚酸_2_亞油酸甘油酯2.79?2.91 %、三油酸甘油酯17.69?18.42%和1-棕櫚酸-2，3- 二油酸甘油酯9.87?10.27%。
[0007]上述含量均指甘油三酯化合物在薏苡仁油中的質(zhì)量百分含量，以本發(fā)明所述方法制備得到的薏苡仁油為原料，經(jīng)過制備色譜分離得到8個甘油三酯單體化合物，稱重、計(jì)算而得。也可根據(jù)本領(lǐng)域常規(guī)分析方法得出。
[0008]其中，所述薏苡仁油按脂肪油檢測理化常數(shù)為:20°C時相對密度0.917?0.920，20°C時折光率1.471?1.474，酸值〈0.2，碘值102?106，皂化值188?195 ；
[0009]本發(fā)明所述的薏苡仁油是通過如下方法獲得的:
[0010]超臨界二氧化碳萃取:取薏苡仁粉碎成10目?50目，采用超臨界CO2萃取器萃取，將薏苡仁粉裝入萃取釜，用夾套循環(huán)熱水加熱CO2預(yù)熱器、萃取釜和分離柱，使萃取溫度和分離溫度分別達(dá)到33?45°C和30?45°C，保持一級解析釜和二級解析釜出口溫度分別為20?50°C和15?35°C ;液態(tài)CO2流量按所萃取薏苡仁粉末質(zhì)量計(jì)，以2.5kg?7.5kg/h -kg的流量經(jīng)高壓泵加壓進(jìn)入CO2預(yù)熱器，成為超臨界狀態(tài)下的流體，進(jìn)入萃取釜，保持壓力19?23Mpa，萃取薏苡仁油；溶有薏苡仁油的CO2流體進(jìn)入分離柱，控制分離柱壓力7?lOMpa，分離得到薏苡仁油；從分離柱出來的CO2氣體先后進(jìn)入一級、二級解析釜，分別保持壓力為5?7Mpa和4?6Mpa，棄去解析得到的水分等雜質(zhì)，CO2氣體經(jīng)冷凝器變成液態(tài)CO2,循環(huán)使用，連續(xù)萃取2?3h，得到薏苡仁油；
[0011]精制:取超臨界CO2萃取得到的薏苡仁油，加入油重量51%的60°C?90°C石油醚，再根據(jù)酸值，加入油重36 %?56 %的2 % NaOH溶液，攪拌1min后，靜置18?24h后，除去下層皂腳，取上層用純化水進(jìn)行水洗，靜置18?24h后，除去下層廢水，取上層進(jìn)行第二次水洗，靜置40?50h后，除去下層廢水；取上層加入油重70%?90%丙酮破乳，靜置2?4h后，除去下層廢丙酮；取上層油溶液，加入油重3?8%的經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌30min后，過濾；濾液加熱后，加入油重2?6%經(jīng)活化的高嶺土:活性炭=1:1的混合吸附劑，攪拌，在40?50°C下保溫30min，過濾；濾液減壓回收溶劑后，再加純化水進(jìn)行水洗，靜置I?2h后，除去下層廢水；上層油在充氮條件下，加熱減壓干燥，再加油重8?12%經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌，置冷處靜置，過濾，過濾后的油再經(jīng)160?170°C減壓干熱滅菌I?2h，冷卻后經(jīng)0.2 μ m微孔濾膜過濾，分裝于500ml玻璃輸液瓶中，密封，即得；
[0012]優(yōu)選地，所述精制步驟為:
[0013]取超臨界CO2萃取得到的薏苡仁油，加入油重量51%的60°C?90°C石油醚，再根據(jù)酸值，加入油重36%?56%的2% NaOH溶液，攪拌1min后，靜置20h后，除去下層皂腳，取上層用純化水進(jìn)行水洗，靜置22h后，除去下層廢水，取上層進(jìn)行第二次水洗，靜置46h后，除去下層廢水；取上層加入油重70%?90%丙酮破乳，靜置3h后，除去下層廢丙酮；取上層油溶液，加入油重5%的經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌30min后，過濾；濾液加熱后，加入油重4%經(jīng)活化的高嶺土:活性炭=1:1的混合吸附劑，攪拌，在40?50°C下保溫30min,過濾；濾液減壓回收溶劑后，再加純化水進(jìn)行水洗，靜置Ih后，除去下層廢水；上層油在充氮條件下，加熱減壓干燥，再加油重10 %經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌，置冷處靜置，過濾，過濾后的油再經(jīng)160?170°C減壓干熱滅菌2h，冷卻后經(jīng)0.2 μ m微孔濾膜過濾，分裝于500ml玻璃輸液瓶中，密封，即得。
[0014]本發(fā)明所述薏苡仁油為淡黃色的澄明液體，氣微、味淡；其在石油醚或三氯甲烷中極易溶解，在丙酮中易溶、在乙醇中微溶，在水中不溶。
[0015]按照本發(fā)明所述方法制備得到的薏苡仁油，依照《中國藥典》(2010年版)一部附錄方法進(jìn)行檢測，其理化常數(shù)均為:201:時相對密度0.917?0.920，20°C時折光率
1.471?1.474，酸值〈0.2，碘值102?106，皂化值188?195。其中，藥典所述酸值系指中和脂肪、脂肪油或其他類似物質(zhì)I克中含有的游離脂肪酸所需氫氧化鉀的重量(毫克數(shù))。在油脂類產(chǎn)品的質(zhì)量研究中，酸值是一個重要評價(jià)指標(biāo)，就本申請所述薏苡仁油而言，其酸值均小于0.2，即通過對制備工藝中超臨界萃取參數(shù)和堿化等純化工藝的優(yōu)化，制備得到的薏苡仁油具有如下優(yōu)點(diǎn):一方面作為雜質(zhì)的游離脂肪酸含量極低，成品質(zhì)量較好；另一方面富集了大量甘油三酯類活性成分,純度較高,并且其中甘油三酯類成分種類明確、含量穩(wěn)定。除此之外，其它理化常數(shù)，如皂化值、碘值等，多批次樣品測得該值變化范圍均較小，進(jìn)一步說明本發(fā)明所述薏苡仁油的質(zhì)量穩(wěn)定、臨床用藥更安全。本發(fā)明所述制備方法收率高、成本低、產(chǎn)品穩(wěn)定，適于工業(yè)化生產(chǎn)，安全可控。
[0016]本發(fā)明的又一目的在于提供一種含有薏苡仁油的藥物制劑，具體包括本發(fā)明所述薏苡仁油及一種或幾種藥學(xué)上可接受的載體。
[0017]其中，所述藥學(xué)上可接受的載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、乳化齊?、粘合劑、潤滑劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、崩解劑、潤滑劑或抗氧化劑，必要時還可以加入香味劑、甜味劑、防腐劑或著色劑。
[0018]所述藥學(xué)上可接受的載體可以選自:甘露醇、山梨醇、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、大豆磷脂、維生素C、維生素E、EDTA 二鈉、EDTA鈣鈉，一價(jià)堿金屬的碳酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、羥苯乙酯溶液、苯甲酸、山梨酸鉀、醋酸氯己定、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、吐溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β -環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣或硬脂酸鎂。
[0019]所述藥物制劑可以是口服固體制劑、口服液體制劑或注射劑。
[0020]優(yōu)選的，
[0021]所述口服固體制劑選自膠囊劑、片劑、滴丸、顆粒劑、濃縮丸中的一種；所述口服液體制劑選自水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑或酏劑，或是一種在使用前可用水或其它適宜的載體復(fù)配的干燥產(chǎn)品；所述注射劑選自納米混懸劑、脂質(zhì)體、乳劑、凍干粉針劑和水針劑中的一種。
[0022]更優(yōu)選的，
[0023]所述注射劑包括如下成分:本發(fā)明所述薏苡仁油50?350g，注射用大豆磷脂或可供注射用大豆磷脂10?40g，注射用甘油或可供注射用甘油15?50g，注射用水加至100ml0
[0024]其可通過如下方法制備:
[0025]稱取處方配制量的注射用大豆磷脂或可供注射用大豆磷脂，加適量的注射用水后，用高剪切分散乳化機(jī)分散至無塊狀及顆粒狀固體，加入按配方量稱取的注射用甘油或可供注射用甘油，并加注射用水至規(guī)定量，攪拌均勻備用；
[0026]另稱取薏苡仁油，將稱取的油酯與水相分別加熱至60?70°C后，置高壓均質(zhì)機(jī)進(jìn)行高壓乳化，乳化時均質(zhì)機(jī)低壓為5?12MPa,高壓為25?50MPa,再循環(huán)均質(zhì)3?6遍，至2 μ m以下顆粒應(yīng)不少于95 %，5 μ m以上顆粒不得檢出，必要時用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH至
4.8?8.5，優(yōu)選6.8?7.0，最優(yōu)選為6.8 ；
[0027]將制得均勻乳劑氮?dú)饧訅和ㄟ^小于等于3 μ m的微孔濾芯過濾器過濾，充氮灌裝滅菌，冷卻即得。
[0028]所述膠囊劑包括如下成分:薏苡仁油200?800g，抗氧化劑和/或乳化劑0.20?0.60g，制成 1000 粒。
[0029]其可通過如下方法制備:
[0030]膠液配制:按重量比為1:0.6?1.2:0.3?0.8:0.0001?0.01稱取適量明膠、純化水、甘油和防腐劑；依次將甘油、純化水、防腐劑(選自10%羥苯乙酯溶液、苯甲酸、山梨酸鉀和醋酸氯己定中的一種)加入化膠罐內(nèi)，加熱至70°C?90°C后，再加入明膠不斷攪拌、抽真空，直至明膠完全溶解，將膠液過濾，在56?62 °C下存放，備用；
[0031]藥液配制:將配方量的薏苡仁油、抗氧化劑和/或乳化劑(抗氧化劑為維生素E，乳化劑為吐溫80)加入配料罐內(nèi)，不斷攪拌，直至混合均勻；
[0032]壓膠囊:根據(jù)膠囊大小選擇合適的壓丸模具，在15?30°C、相對濕度小于35%條件下進(jìn)行壓丸定型后干燥，剔除大小丸，再用95%藥用乙醇洗丸后，繼續(xù)干燥至含水量小于12%,目檢剔除不合格膠囊，印字，包裝即得。
[0033]本發(fā)明通過藥效實(shí)驗(yàn)表明，所述薏苡仁油及其制劑在單獨(dú)或與順鉬、卡鉬、環(huán)磷酰胺、鹽酸吉西他濱、米托蒽醌、絲裂霉素、醋酸亮丙瑞林、多西他賽和/或紫杉醇的組合用藥時，對多種人腫瘤細(xì)胞株均有不同程度的抑制作用，可作為治療腫瘤疾病藥物。
[0034]因此，本發(fā)明的目的還在于提供一種上述薏苡仁油、藥物制劑單獨(dú)或與鉬類、烷化劑類、二氟核苷類、抗生素類、細(xì)胞毒類或激素類化學(xué)抗腫瘤藥物在制備抗腫瘤或炎癥藥物中的應(yīng)用。
[0035]其中，所述鉬類優(yōu)選為順鉬、卡鉬，烷化劑類優(yōu)選為環(huán)磷酰胺，二氟核苷類優(yōu)選為鹽酸吉西他濱，抗生素類優(yōu)選為米托蒽醌、絲裂霉素，細(xì)胞毒類優(yōu)選為多西他賽、紫杉醇，激素類優(yōu)選為醋酸亮丙瑞林；所述腫瘤是指早期、中期或晚期的肺癌、肝癌、胰腺癌、前列腺癌、卵巢癌、乳腺癌、肉瘤樣癌或癌肉瘤；所述炎癥是指前列腺增生。
[0036]以下通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說明本發(fā)明所述薏苡仁油及其制劑在抗腫瘤方面的有益效果。
[0037]—、體外MTT法測定薏苡仁油及其制劑對8種人腫瘤細(xì)胞株的抑制作用
[0038]1、實(shí)驗(yàn)材料及配制
[0039](I)細(xì)胞株=PANC-1 (人胰腺癌細(xì)胞)、SK0V3(人卵巢癌細(xì)胞)、MCF_7(人乳腺癌細(xì)胞)、Bcap-37 (人乳腺癌細(xì)胞)、SMMC-7721 (人肝癌細(xì)胞)>HepG-2 (人肝癌細(xì)胞)、A549 (人肺癌細(xì)胞)、H460 (人肺癌細(xì)胞)，上述細(xì)胞株由上海醫(yī)藥工業(yè)研究藥理評價(jià)研究中心保存，傳代維持。
[0040](2)DMEM完全培養(yǎng)基:添加10%新生牛血清(GIBCO BRL)、雙抗。
[0041]⑶0.25%胰蛋白酶溶液(Trypsin):購自Invitrogen公司，_20°C保存。
[0042](4)磷酸緩沖液(PBS):NaC18g, KC10.2g，Na2HPO4L 15g，KH2PO40.2g，溶于 IL 雙蒸水，121°C高壓消毒20min，4°C保存。
[0043](5) MTT (AMRESC0)溶液:用 PBS 配成 5mg/ml 溶液。
[0044](6)溶解液:每10ml去離子雙蒸水含SDSlOg，異丁醇5ml，濃鹽酸0.1ml。
[0045]2、實(shí)驗(yàn)方法
[0046]樣品對上述細(xì)胞株的抑制作用通過MTT法測得。
[0047]具體步驟如下:
[0048](I)細(xì)胞培養(yǎng):①將細(xì)胞從液氮中取出，在37°C水浴中迅速解凍，細(xì)胞在無菌操作臺中移入1ml無菌離心管中加6ml細(xì)胞培養(yǎng)基，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘。棄去上清液，沉淀中加入5?6ml細(xì)胞培養(yǎng)基，滴管吹打使其懸浮后移入細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，置37°C細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)。②次日，自培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞，棄去細(xì)胞瓶中細(xì)胞培養(yǎng)基，加入5?6ml細(xì)胞培養(yǎng)基，置37°C細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)。③隔日，自培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞，棄去細(xì)胞瓶中細(xì)胞培養(yǎng)基，加入PBS (pH7.4) 2?3ml晃動清洗，倒掉PBS溶液后再重復(fù)一次清洗。在培養(yǎng)瓶中加入3?5滴0.25%胰蛋白酶溶液晃動均勻,加蓋置于37°C細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)3分鐘左右，于顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞自培養(yǎng)瓶壁上脫離，加細(xì)胞培養(yǎng)基2ml，滴管吹打使細(xì)胞完全脫離瓶壁后，分別移入2個干凈培養(yǎng)瓶中，加入細(xì)胞培養(yǎng)基5?6ml吹打均勻，置于37°C細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)。④隔日，重復(fù)③步驟。在整個培養(yǎng)過程中，貼壁細(xì)胞不允許生長過密，懸浮細(xì)胞始終保持對數(shù)生長期。
[0049](2)樣品及對照品制備:稱取適量薏苡仁油樣品溶解于DMSO中，得到濃度為1mg/ml 的溶液。再用 PBS 作梯度稀釋，得到濃度 10mg/ml、5000 μ g/ml、2500 μ g/ml、1250 μ g/ml、625 μ g/ml、312.5 μ g/ml 的稀釋樣品。
[0050](3)將稀釋好的樣品加入平底96孔板中，每孔10 μ 1，每點(diǎn)作兩個平行測試。將DMSO相應(yīng)作梯度稀釋后加入板中，作為對照。
[0051](4)取處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，細(xì)胞經(jīng)胰酶消化并洗滌后懸浮于含10%小牛血清的培養(yǎng)基中，經(jīng)苔盼藍(lán)染色排除法計(jì)活細(xì)胞數(shù)，并調(diào)節(jié)細(xì)胞懸浮液密度至2 X 15個細(xì)胞/ml ο
[0052](5)將加入細(xì)胞的平底96孔板在37°C、5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時。
[0053](6)每孔中加入20 μ I的5mg/ml MTT溶液，繼續(xù)在培養(yǎng)箱中保溫3?4小時。
[0054](7)每孔加入100 μ I溶解液，繼續(xù)在培養(yǎng)箱中保溫過夜，使生成的甲臢晶體充分溶解。測定570nm光吸收值。
[0055](8)根據(jù)光吸收值計(jì)算各樣品濃度組的細(xì)胞生長抑制率。計(jì)算公式如下:
[0056](I 一實(shí)驗(yàn)孔平均光吸收值/對照孔平均光吸收值)X 100%
[0057]3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0058]表I不同濃度樣品對8種細(xì)胞株的生長抑制率)
[0059]

【權(quán)利要求】
1.一種薏苡仁油，其特征在于:該薏苡仁油中含有如下質(zhì)量百分含量的8種甘油三酯類成分:三亞油酸甘油酯4.87?6.99%、1-油酸-2，3-二亞油酸甘油酯13.0O?18.69%,1-棕櫚酸_2，3- 二亞油酸甘油酯5.25?7.54%、I, 3- 二油酸-2-亞油酸甘油酯13.23?19.02%、1-棕櫚酸-2-亞油酸-3-油酸甘油酯10.26?14.75%、1，3- 二棕櫚酸_2_亞油酸甘油酯2.28?3.28%、三油酸甘油酯14.44?20.76%和1-棕櫚酸-2，3- 二油酸甘油酯 8.06 ?11.58%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的薏苡仁油，其特征在于:所述薏苡仁油按脂肪油檢測理化常數(shù)為:20°C時相對密度0.917?0.920，20 °C時折光率1.471?1.474，酸值〈0.2，碘值102?106，皂化值188?195 ;所述甘油三酯成分的質(zhì)量百分含量為:三亞油酸甘油酯5.47?6.69%、1-油酸-2，3-二亞油酸甘油酯14.63?17.88%、1-棕櫚酸-2，3-二亞油酸甘油酯5.90?7.21 %、1，3-二油酸-2-亞油酸甘油酯14.88?18.19%、1-棕櫚酸-2-亞油酸-3-油酸甘油酯11.55?14.11 %、1，3-二棕櫚酸-2-亞油酸甘油酯2.57?3.14%,三油酸甘油酯16.25?19.86%和1-棕櫚酸-2，3- 二油酸甘油酯9.07?11.08% ; 優(yōu)選地,所述甘油三酯成分的質(zhì)量百分含量為:三亞油酸甘油酯5.96?6.20%、1-油酸-2，3-二亞油酸甘油酯15.93?16.58%、1_棕櫚酸-2，3-二亞油酸甘油酯6.43?6.69%, I, 3- 二油酸-2-亞油酸甘油酯16.20?16.87 %、1-棕櫚酸_2_亞油酸-3-油酸甘油酯12.57?13.09%、1，3- 二棕櫚酸_2_亞油酸甘油酯2.79?2.91 %、三油酸甘油酯17.69?18.42%和1-棕櫚酸_2，3-二油酸甘油酯9.87?10.27%。
3.—種權(quán)利要求1所述薏苡仁油的制備方法，具體包括如下步驟: 超臨界二氧化碳萃取:取薏苡仁粉碎成10目?50目，采用超臨界CO2萃取器萃取，將薏苡仁粉裝入萃取釜，用夾套循環(huán)熱水加熱CO2預(yù)熱器、萃取釜和分離柱，使萃取溫度和分離溫度分別達(dá)到33?45°C和30?45°C，保持一級解析釜和二級解析釜出口溫度分別為20?50°C和15?35°C ;液態(tài)CO2流量按所萃取薏苡仁粉末質(zhì)量計(jì)，以2.5kg?7.5kg/h.kg的流量經(jīng)高壓泵加壓進(jìn)入CO2預(yù)熱器，成為超臨界狀態(tài)下的流體，進(jìn)入萃取釜，保持壓力19?23Mpa，萃取薏苡仁油；溶有薏苡仁油的CO2流體進(jìn)入分離柱，控制分離柱壓力7?lOMpa，分離得到薏苡仁油；從分離柱出來的CO2氣體先后進(jìn)入一級、二級解析釜，分別保持壓力為5?7Mpa和4?6Mpa,棄去解析得到的水分等雜質(zhì),CO2氣體經(jīng)冷凝器變成液態(tài)CO2,循環(huán)使用，連續(xù)萃取2?3h，得到薏苡仁油； 精制:取超臨界CO2萃取得到的薏苡仁油，加入油重量51%的60°C?90°C石油醚，再根據(jù)酸值，加入油重36 %?56 %的2 % NaOH溶液，攪拌1min后，靜置18?24h后，除去下層皂腳，取上層用純化水進(jìn)行水洗，靜置18?24h后，除去下層廢水，取上層進(jìn)行第二次水洗，靜置40?50h后，除去下層廢水；取上層加入油重70%?90%丙酮破乳,靜置2?4h后，除去下層廢丙酮；取上層油溶液，加入油重3?8%的經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌30min后，過濾；濾液加熱后，加入油重2?6%經(jīng)活化的高嶺土:活性炭=1:1的混合吸附劑，攪拌，在40?50°C下保溫30min,過濾；濾液減壓回收溶劑后,再加純化水進(jìn)行水洗,靜置I?2h后，除去下層廢水；上層油在充氮條件下，加熱減壓干燥，再加油重8?12%經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌，置冷處靜置，過濾，過濾后的油再經(jīng)160?170°C減壓干熱滅菌I?2h，冷卻后經(jīng)0.2 μ m微孔濾膜過濾，分裝于500ml玻璃輸液瓶中，密封，即得； 優(yōu)選地，所述精制步驟為: 取超臨界CO2萃取得到的薏苡仁油，加入油重量51%的60°C?90°C石油醚，再根據(jù)酸值，加入油重36 %?56 %的2 % NaOH溶液，攪拌1min后，靜置20h后，除去下層皂腳，取上層用純化水進(jìn)行水洗，靜置22h后，除去下層廢水，取上層進(jìn)行第二次水洗，靜置46h后，除去下層廢水；取上層加入油重70%?90%丙酮破乳，靜置3h后，除去下層廢丙酮；取上層油溶液，加入油重5%的經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌30min后，過濾；濾液加熱后，加入油重4%經(jīng)活化的高嶺土:活性炭=1:1的混合吸附劑，攪拌，在40?50°C下保溫30min,過濾；濾液減壓回收溶劑后，再加純化水進(jìn)行水洗，靜置Ih后，除去下層廢水；上層油在充氮條件下，加熱減壓干燥，再加入油重10 %經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌，置冷處靜置，過濾，過濾后的油再經(jīng)160?170°C減壓干熱滅菌2h，冷卻后經(jīng)0.2 μ m微孔濾膜過濾，分裝于500ml玻璃輸液瓶中，密封，即得。
4.一種藥物制劑，其特征在于含有治療有效量的權(quán)利要求1?3任一所述的薏苡仁油及一種或幾種藥學(xué)上可接受的載體，其中所述藥學(xué)上可接受的載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、乳化劑、粘合劑、潤滑劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、崩解劑、潤滑劑或抗氧化劑，必要時還可以加入香味劑、甜味劑、防腐劑或著色劑； 其中，所述藥學(xué)上可接受的載體可以選自:甘露醇、山梨醇、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、大豆磷脂、維生素C、維生素E、EDTA 二鈉、EDTA鈣鈉，一價(jià)堿金屬的碳酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、羥苯乙酯溶液、苯甲酸、山梨酸鉀、醋酸氯己定、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、吐溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β -環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣或硬脂酸鎂。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述藥物制劑，其可以是口服固體制劑、口服液體制劑或注射劑； 其中， 所述口服固體制劑選自膠囊劑、片劑、滴丸、顆粒劑、濃縮丸中的任何一種； 所述口服液體制劑選自水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑或酏劑，或是一種在使用前可用水或其它適宜的載體復(fù)配的干燥產(chǎn)品； 所述注射劑選自納米混懸劑、脂質(zhì)體、乳劑、凍干粉針劑和水針劑中的任何一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述藥物制劑，其特征在于所述注射劑包含如下成分: 薏該仁油50?350g 注射用大豆磷脂或可供注射用大豆磷脂10?40g 注射用甘油或可供注射用甘油15?50g 注射用水加至1000ml。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述藥物制劑的制備方法，其特征在于包括如下步驟: 稱取處方配制量的注射用大豆磷脂或可供注射用大豆磷脂，加適量的注射用水后，用高剪切分散乳化機(jī)分散至無塊狀及顆粒狀固體，加入按配方量稱取的注射用甘油或可供注射用甘油，并加注射用水至規(guī)定量，攪拌均勻備用； 另稱取薏苡仁油，將稱取的油酯與水相分別加熱至60?70°C后，置高壓均質(zhì)機(jī)進(jìn)行高壓乳化，乳化時均質(zhì)機(jī)低壓為5?12MPa,高壓為25?50MPa,再循環(huán)均質(zhì)3?6遍,至2μηι以下顆粒應(yīng)不少于95%，5μπι以上顆粒不得檢出，必要時用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH至4.8?8.5，優(yōu)選6.8?7.0，最優(yōu)選為6.8 ； 將制得均勻乳劑氮?dú)饧訅和ㄟ^小于等于3 μ m的微孔濾芯過濾器過濾，充氮灌裝滅菌，冷卻即得。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述藥物制劑，其特征在于所述膠囊劑包含如下成分: 薏該仁油200?800g 抗氧化劑和/或乳化劑0.20?0.60g 制成1000粒。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述藥物制劑的制備方法，其特征在于包括如下步驟: 膠液配制:按重量比為1:0.6?1.2:0.3?0.8:0.0001?0.01稱取適量明膠、純化水、甘油和防腐劑；依次將甘油、純化水、防腐劑加入化膠罐內(nèi)，加熱至70°C?90°C后，再加入明膠不斷攪拌、抽真空，直至明膠完全溶解，將膠液過濾，在56?62°C下存放，備用； 藥液配制:將配方量的薏苡仁油、抗氧化劑和/或乳化劑加入配料罐內(nèi)，不斷攪拌，直至混合均勻； 壓膠囊:根據(jù)膠囊大小選擇合適的壓丸模具，在15?30°C、相對濕度小于35%條件下進(jìn)行壓丸定型后干燥，剔除大小丸，再用95%藥用乙醇洗丸后，繼續(xù)干燥至含水量小于12%,目檢剔除不合格膠囊，印字，包裝即得； 其中， 所述防腐劑選自10%羥苯乙酯溶液、苯甲酸、山梨酸鉀和醋酸氯己定中的一種； 所述抗氧化劑為維生素E，乳化劑為吐溫80。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述薏苡仁油在制備抗腫瘤或治療炎癥藥物中的應(yīng)用， 其中， 所述抗腫瘤藥物可以是薏苡仁油與鉬類、烷化劑類、二氟核苷類、抗生素類、細(xì)胞毒類和/或激素類化學(xué)藥物的組合；優(yōu)選為薏苡仁油與順鉬、卡鉬、環(huán)磷酰胺、鹽酸吉西他濱、米托蒽醌、絲裂霉素、醋酸亮丙瑞林、多西他賽和/或紫杉醇等化學(xué)藥物的組合； 所述腫瘤是指早期、中期或晚期的肺癌、肝癌、胰腺癌、前列腺癌、卵巢癌、乳腺癌、肉瘤樣癌或癌肉瘤；所述炎癥是指前列腺炎或前列腺增生。
【文檔編號】A61K45/00GK104173824SQ201410342417
【公開日】2014年12月3日 申請日期:2014年7月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月18日
【發(fā)明者】李大鵬 申請人:浙江康萊特集團(tuán)有限公司, 浙江康萊特藥業(yè)有限公司