專利名稱：兩色金雞菊精制提取物及其醫(yī)藥用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，特別是涉及一種中藥提取物及其醫(yī)藥用途。
背景技術(shù)：
兩色金雞菊(Corepsis tintoria Nutt)又名雪菊，系菊科(compositae)金雞菊屬(Coreopsis)的干燥頭狀花序，單瓣、重瓣或半重瓣，舌狀花黃色或金黃色，花期6 9月。兩色金雞菊屬于北溫帶植物，原產(chǎn)于北美，弗羅里達(dá)州及墨西哥州，我國1936年作為觀賞植物引種子至廬山、南岳等地栽培，目前各地除供觀賞外，還用全草入藥，而且從花中提取的食用色素，具有清熱解毒和降壓之功效。新疆金雞菊廣泛分布于和田地區(qū)海拔高3000米左右的昆侖山區(qū)，有較豐富的野生資源，在民間經(jīng)常將其干花用來泡茶。中國發(fā)明專利申請CN102641317A公開了一種具有降血糖作用的金雞菊水提物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的旨在提供一種兩色金雞菊提取物及其醫(yī)藥用途。具體地說，本發(fā)明提供了一種兩色金雞菊提取物，其可由如下方法制得:步驟一，取兩色金雞菊頭狀花序，用水蒸汽蒸餾收集揮發(fā)油或芳香水，備用；步驟二，將上述原料用水提取，過濾，得提取液A，備用；步驟三，將上述過濾后的殘 渣再用水提取，過濾，得提取液B，備用；步驟四，取經(jīng)步驟一收集的揮發(fā)油或芳香水與上述提取液A和B混合，減壓濃縮，冷卻，邊攪拌邊加入乙醇，靜置沉淀，過濾，濾液回收乙醇，得精制液；步驟五，將上述精制液過860021型大孔吸附樹脂，分別用30%乙醇和50%乙醇進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥。在一優(yōu)選例中，所述步驟一為:取兩色金雞菊頭狀花序，粉碎，加8 15倍量水，采用水蒸汽蒸餾收集揮發(fā)油或芳香水，備用。在另一優(yōu)選例中，所述步驟二為:將上述原料用8 15倍量水提取30 150min，溫度為80 100°C，過濾，得提取液A ;備用；在另一優(yōu)選例中，所述步驟三為:將上述過濾后的殘渣再用8 15倍量水提取30 150min，溫度為80 100°C，過濾，得提取液B，備用；在另一優(yōu)選例中，所述步驟四為:取經(jīng)步驟一收集的揮發(fā)油或芳香水與上述提取液A和B混合，減壓濃縮至比重為1.15 1.25，冷卻至20 30°C，邊攪拌邊加入90%乙醇至醇沉液的含醇量為70% 75%，靜置沉淀，過濾，濾液回收乙醇，得精制液。本發(fā)明的第二方面是提供了上述兩色金雞菊提取物在制備降血脂的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，它含有上述兩色金雞菊提取物。本發(fā)明還提供了一種保健品，它含有上述兩色金雞菊提取物。本發(fā)明各個方面的細(xì)節(jié)將在隨后的章節(jié)中得以詳盡描述。通過下文以及權(quán)利要求的描述，本發(fā)明的特點、目的和優(yōu)勢將更為明顯。


圖1本發(fā)明的兩色金雞菊30%乙醇洗脫部位在280nm波長下的HPLC圖譜。圖2本發(fā)明的兩色金雞菊50%乙醇洗脫部位在280nm波長下的HPLC圖譜。
具體實施例方式本發(fā)明的問世部分是基于這樣一個意外發(fā)現(xiàn):兩色金雞菊的提取物在動物試驗中可顯著降低高脂血癥小鼠血清膽固醇(CHO)和低密度脂蛋白(LDL)的水平，進(jìn)而降低其血月旨，因而其有望被開發(fā)成為一種降血脂的藥物和/或保健品。進(jìn)而，本發(fā)明提供了一種兩色金雞菊提取物，其可由如下方法制得:步驟一，取兩色金雞菊頭狀花序，用水蒸汽蒸餾收集揮發(fā)油或芳香水，備用；步驟二，將上述原料用水提取，過濾，得提取液A，備用；步驟三，將上述過濾后的殘渣再用水提取，過濾，得提取液B，備用；步驟四，取經(jīng)步驟一收集的揮發(fā)油或芳香水與上述提取液A和B混合，減壓濃縮，冷卻，邊攪拌邊加入 乙醇，靜置沉淀，過濾，濾液回收乙醇，得精制液；步驟五，將上述精制液過860021型大孔吸附樹脂，分別用30%乙醇和50%乙醇進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥。較優(yōu)選地,所述步驟一為:取兩色金雞菊頭狀花序,粉碎,加8 15倍量水，采用水蒸汽蒸餾收集揮發(fā)油或芳香水，備用。較優(yōu)選地，所述步驟二為:將上述原料用8 15倍量水提取30 150min，溫度為80 100°C，過濾，得提取液A;備用；較優(yōu)選地，所述步驟三為:將上述過濾后的殘渣再用8 15倍量水提取30 150min，溫度為80 100°C，過濾，得提取液B，備用；較優(yōu)選地，所述步驟四為:取經(jīng)步驟一收集的揮發(fā)油或芳香水與上述提取液A和B混合，減壓濃縮至比重為1.15 1.25，冷卻至20 30°C，邊攪拌邊加入90%乙醇至醇沉液的含醇量為70% 75%，靜置沉淀，過濾，濾液回收乙醇，得精制液。本發(fā)明還提供了上述兩色金雞菊提取物在制備降血脂的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，它含有上述兩色金雞菊提取物。本發(fā)明還提供了一種保健品，它含有上述兩色金雞菊提取物。本發(fā)明的兩色金雞菊提取物可以單獨使用或者進(jìn)一步加入其他藥用輔料制備成臨床上使用的各種藥物劑型，例如添加稀釋劑、崩解劑、粘合劑、潤濕劑、潤滑劑、親水性高分子材料、藥用油、矯味劑和緩釋材料中的一種或多種，制備成口服液、片劑、微丸、顆粒劑、膠囊、軟膠囊、滴丸、緩釋片、緩釋微丸或緩釋膠囊等劑型。其中稀釋劑選自淀粉、預(yù)膠化淀粉、糊精、糖粉、乳糖、甘露醇、微晶纖維素、硫酸鈣中的一種或多種；崩解劑選自交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)聚維酮、淀粉、羧甲基淀粉鈉、羧丙基淀粉、低取代羥丙基纖維素、海藻酸、皂土、膠體硅酸鎂鋁中的一種或多種；粘合劑選自羥丙甲纖維素、聚維酮、淀粉漿、糊精、糖漿、膠漿、乙基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉中的一種或多種；親水性高分子材料選自聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、泊洛沙姆188、聚氧乙烯單硬脂酸酯(S-40)、硬脂酸鈉、甘油明膠、尿素中的一種或多種；藥用油選自大豆油、中鏈甘油三酸酯、聚乙二醇-400、甘油、丙二醇、植物油、芳香油中的一種或多種；矯味劑選自糖粉、阿斯巴甜、甘油、山梨醇、甘露醇、糖精鈉中的一種或多種；潤濕劑選自水和/或乙醇；潤滑劑選自滑石粉、硬脂酸鎂、微粉硅膠、氫化植物油、十二烷基硫酸鎂、十二烷基硫酸鈉、硬脂酰富馬酸鈉中的一種或多種；緩釋材料選自羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素、羧乙基纖維素、聚氯乙烯、單硬脂酸甘油脂、醋酸乙烯、卡波姆、丙烯酸樹脂、阿拉伯膠、黃原膠中的一種或多種。含有本發(fā)明的兩色金雞菊提取物的制劑可按本領(lǐng)域常規(guī)方法制備，例如可將藥用輔料、兩色金雞菊提取物分別粉碎、過篩后，混合均勻即得。含有本發(fā)明的兩色金雞菊提取物的制劑可以通過腸道或非腸道或局部途徑給藥?？诜?腸道)制劑包括片劑、顆粒劑、懸浮液、膠囊、溶液等，非腸道給藥制劑包括注射液等。局部給藥制劑包括霜劑、貼劑、軟膏劑、噴霧劑等。本發(fā)明的兩色金雞菊提取物及其制劑的給藥途徑可以為口服、舌下、經(jīng)皮、經(jīng)肌肉或皮下、皮膚粘膜、靜脈、尿道、陰道等。本發(fā)明的兩色金雞菊提取物及其制劑的用量可根據(jù)給藥途徑、患者的年齡和體重、病癥嚴(yán)重程度的不同而不同，其日劑量可以是0.001 100mg/kg，可以一次或多次給藥。除了制成藥劑之外，亦可在本發(fā)明的兩色金雞菊提取物中加入抗氧化劑、色素、酶制劑等各種添加劑，按本領(lǐng)域的常規(guī)方法制成保健品。下面結(jié)合具體實施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則所有的百分?jǐn)?shù)、比率、比例、或份數(shù)按
重量計。

除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明方法中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示范之用。本發(fā)明提到的上述特征，或?qū)嵤├岬降奶卣骺梢匀我饨M合。本專利說明書所揭示的所有特征可與任何組合物形式并用，說明書中所揭示的各個特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特別說明，所揭示的特征僅為均等或相似特征的一般性例子。下面結(jié)合具體實施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則所有的百分?jǐn)?shù)、比率、比例、或份數(shù)按
重量計。除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明方法中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示范之用。本發(fā)明提到的上述特征，或?qū)嵤├岬降奶卣骺梢匀我饨M合。本專利說明書所揭示的所有特征可與任何組合物形式并用，說明書中所揭示的各個特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特別說明，所揭示的特征僅為均等或相似特征的一般性例子。一、制備兩色金雞菊提取物實施例1兩色金雞菊頭狀花序IOOg經(jīng)粉碎，加8倍量水，采用水蒸汽蒸餾萃取收集揮發(fā)油或芳香水，備用。將上述原料加8倍量水浸泡，100°C水煮兩次，每次60min，過濾，合并兩次濾液，得提取液，備用。取上述揮發(fā)油或芳香水與上述提取液混合，過濾，濾液減壓濃縮至比重為1.2，冷卻至20°C，邊攪拌邊加入90%乙醇至醇沉液的含醇量為70%，靜置沉淀，過濾，濾液回收乙醇，得精制液。將上述精制液過860021型大孔吸附樹脂，分別用30%乙醇和50%乙醇進(jìn)行梯度洗脫，收集各洗脫液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，恒溫干燥箱干燥，得到棕色粉末，其收率分別為:30%醇洗脫物(5.545%),50%醇洗脫物(1.428%)。 對上述兩種醇洗脫物進(jìn)行HPLC分析。1、分析條件色譜柱:DiamonsilC-18, 5 μ m, 4.6 X 250mm ;檢測波長:280nm ;柱溫:35°C ;流速:
1.0ml/min。2、流動相條件表I流動相梯度洗脫表
時間(mill)0.5%甲酸-水乙腈
O955208020 406040 60O1003、HPLC圖譜(見圖1和圖2)。實施例2兩色金雞菊頭狀花序IOOg經(jīng)粉碎，加12倍量水，采用水蒸汽蒸餾萃取收集揮發(fā)油或芳香水，備用。將上述原料加12倍量水浸泡，90°C水煮兩次，每次30min，過濾，合并兩次濾液，得提取液，備用。取上述揮發(fā)油或芳香水與上述提取液混合，過濾，濾液減壓濃縮至比重為1.1，冷卻至20°C，邊攪拌邊加入90%乙醇至醇沉液的含醇量為75%，靜置沉淀，過濾，濾液回收乙醇，得精制液。將上述精制液過860021型大孔吸附樹脂，分別用30%乙醇和50%乙醇進(jìn)行梯度洗脫，收集各洗脫液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，恒溫干燥箱干燥，得到棕色粉末。實施例3兩色金雞菊頭狀花序IOOg經(jīng)粉碎，加15倍量水，采用水蒸汽蒸餾萃取收集揮發(fā)油或芳香水兩次，合并兩次收集的揮發(fā)油及芳香水，備用。將上述原料加15倍量水浸泡，90°C水煮兩次，每次90min，過濾，合并兩次濾液，得提取液，備用。
取上述揮發(fā)油或芳香水與上述提取液混合，過濾，濾液減壓濃縮至比重為1.15，冷卻至30°C，邊攪拌邊加入90%乙醇至醇沉液的含醇量為75%，靜置沉淀，過濾，濾液回收乙醇，得精制液。將上述精制液過860021型大孔吸附樹脂，分別用30%乙醇和50%乙醇進(jìn)行梯度洗脫，收集各洗脫液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，恒溫干燥箱干燥，得到棕色粉末。實施例4兩色金雞菊頭狀花序IOOg經(jīng)粉碎，加10倍量水，采用水蒸汽蒸餾萃取收集揮發(fā)油或芳香水，備用。將上述原料加10倍量水浸泡，80°c水煮兩次，每次150min，過濾，合并兩次濾液，得提取液，備用。取上述揮發(fā)油或芳香水與上述提取液混合，過濾，濾液減壓濃縮至比重為1.25，冷卻至25°C，邊攪拌邊加入90%乙醇至醇沉液的含醇量為70%，靜置沉淀，過濾，濾液回收乙醇，得精制液。將上述精制液過860021型大孔吸附樹脂，分別用30%乙醇和50%乙醇進(jìn)行梯度洗脫，收集各洗脫液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，恒溫干燥箱干燥，得到棕色粉末。二、驗證兩色金雞菊提取物的降脂活性1、實驗動物:雄性ICR小鼠，體重29±10g。2、給藥劑量:本發(fā)明的兩色金雞菊提取物(按實施例1制備)分為高、低劑量兩組，高劑量組為相當(dāng)于生藥10g/kg,低劑量組為相當(dāng)于生藥5g/kg,按0.5ml/30g灌胃給藥。陽性藥為辛伐他丁，給藥量為10 mg/kg。3、乳劑配制:將豬油80g置于500ml燒杯中并在電爐上加熱融化，加入膽固醇40g并使之溶化，再加入膽酸鈉Sg和丙基硫氧嘧啶片4g，充分?jǐn)噭?，然后加入適量的蒸餾水及吐溫-80、丙二醇各80ml,不斷攪勻，再加雙蒸水至400ml并充分混勻，即成100g/l膽固醇、200g/l豬油、20g/l膽酸鈉和10g/l丙基硫氧嘧啶的脂肪乳劑。放入冰箱保存，用時需加熱融化。4、實驗方法:除正常對照組外，其余各組每天下午灌服乳劑(0.5ml), Ih后口服給藥，連續(xù)14d，最后一天眼眶動脈采血。離心取血清后，測高脂血癥小鼠血清膽固醇(CHO)、低密度脂蛋白(LDL)兩個生化指標(biāo)，結(jié)果見表2。表2兩色金雞菊提取物對高血脂小鼠CHO和LDL的影響
權(quán)利要求
1.一種兩色金雞菊提取物，其特征在于，其可由如下方法制得: 步驟一，取兩色金雞菊頭狀花序，用水蒸汽蒸餾收集揮發(fā)油或芳香水，備用； 步驟二，將上述原料用水提取，過濾，得提取液A，備用； 步驟三，將上述過濾后的殘渣再用水提取，過濾，得提取液B，備用； 步驟四，取經(jīng)步驟一收集的揮發(fā)油或芳香水與上述提取液A和B混合，減壓濃縮，冷卻，邊攪拌邊加入乙醇，靜置沉淀，過濾，濾液回收乙醇，得精制液； 步驟五，將上述精制液過860021型大孔吸附樹脂，分別用30%乙醇和50%乙醇進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的兩色金雞菊提取物，其特征在于， 所述步驟一為:取兩色金雞菊頭狀花序，粉碎，加8 15倍量水，采用水蒸汽蒸餾收集揮發(fā)油或芳香水，備用； 所述步驟二為:將上述原料用8 15倍量水提取30 150min，溫度為80 100°C，過濾，得提取液A ;備用； 所述步驟三為:將上述過濾后的殘渣再用8 15倍量水提取30 150min，溫度為80 100°C，過濾，得提取液B，備用； 所述步驟四為:取經(jīng)步驟一收集的揮發(fā)油或芳香水與上述提取液A和B混合，減壓濃縮至比重為1.15 1.25，冷卻至20 30°C，邊攪拌邊加入90%乙醇至醇沉液的含醇量為70 % 75 %，靜置沉淀，過濾，濾液回收乙醇，得精制液。
3.權(quán)利要求1或2所述的`兩色金雞菊提取物的應(yīng)用，其特征在于，用于制備降血脂的藥物。
4.一種藥物組合物，其特征在于，它含有如權(quán)利要求1所述的兩色金雞菊提取物。
5.一種保健品，其特征在于，它含有如權(quán)利要求1所述的兩色金雞菊提取物。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及一種兩色金雞菊精提物及其醫(yī)藥用途。所述兩色金雞菊提取物可由如下方法制得步驟一，取兩色金雞菊頭狀花序，用水蒸汽蒸餾收集揮發(fā)油或芳香水，備用；步驟二，將上述原料用水提取，過濾，得提取液A，備用；步驟三，將上述過濾后的殘渣再用水提取，過濾，得提取液B，備用；步驟四，取經(jīng)步驟一收集的揮發(fā)油或芳香水與上述提取液A和B混合，減壓濃縮，冷卻，邊攪拌邊加入乙醇，靜置沉淀，過濾，濾液回收乙醇，得精制液；步驟五，將上述精制液過860021型大孔吸附樹脂，分別用30%乙醇和50%乙醇進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥。本發(fā)明的兩色金雞菊提取物可用于降血脂。
文檔編號A61P3/06GK103222996SQ20131018040
公開日2013年7月31日 申請日期2013年5月15日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月15日
發(fā)明者于安偉 申請人:顧海, 于安偉