專利名稱：用于眼角膜移植的他克莫司眼用劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，更具體涉及一種用于眼角膜移植的他克莫司眼用前體囊泡劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
角膜疾病是目前主要的致盲角膜病，角膜移植手術(shù)是治療此類疾病最直接和有效的方法，而角膜移植手術(shù)后的免疫排斥反應(yīng)是失敗的主要原因。目前臨床采用皮質(zhì)類固醇、免疫抑制劑和環(huán)孢素A等一些藥物來降低免疫排斥反應(yīng)發(fā)生率。糖皮質(zhì)激素是防治術(shù)后移植排斥反應(yīng)的主要手段，但是其長期應(yīng)用不僅可以導(dǎo)致多種并發(fā)癥，而且往往不能有效的抑制高危角膜移植術(shù)后的排斥反應(yīng)。環(huán)孢素A在眼科的應(yīng)用越來越廣泛，但是環(huán)孢素滴眼液為油溶性溶劑，其滴入后患者順應(yīng)性不好，且易發(fā)生過敏。臨床試驗表明，他克莫司在心、肺、腸、骨髓等移植中的應(yīng)用有很好的療 效。同時其在治療自身免疫性疾病、眼過敏性疾患，以及角膜移植后的免疫排斥反應(yīng)均有良好的療效。他克莫司(Tacrolimus, FK506)是一種大環(huán)內(nèi)酯類新型免疫抑制劑，由一個半酮基，α、β雙酮基及23個環(huán)組成，其分子式為C44H69N012*H20，分子量為822.5。室溫下呈白色結(jié)晶或晶狀粉末，在固體狀態(tài)下相對穩(wěn)定，不溶于水，溶于甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、乙酸乙酯等非極性溶劑。呈親脂疏水性，其熔點為127 129° C。目前，他克莫司在臨床廣泛上應(yīng)用于器官移植的抗排斥反應(yīng)和治療自身免疫系統(tǒng)疾病，在眼科領(lǐng)域已用于角膜移植術(shù)后與免疫相關(guān)眼病的治療。他克莫司屬鈣調(diào)蛋白磷酸酶抑制劑，其免疫抑制作用機制與環(huán)孢素A相似，但抑制T細胞活性的能力比環(huán)孢素A強100倍。其作用機制是通過抑制相關(guān)細胞因子轉(zhuǎn)錄因子的活性來抑制淋巴細胞活化。他克莫司通過與細胞內(nèi)蛋白FKBP-12結(jié)合，形成由他克莫司-FKBP-12、鈣、鈣調(diào)蛋白和鈣調(diào)磷酸酶構(gòu)成的復(fù)合物，從而抑制鈣調(diào)磷酸酶的激活，阻止活化T細胞核轉(zhuǎn)錄因子(NF-AT)的去磷酸化和易位，NF-AT這種核成分會啟動基因轉(zhuǎn)錄形成淋巴因子。他克莫司還可以抑制編碼IL-3、IL-4、IL-5、GM-CSF和TNF-α的基因的轉(zhuǎn)錄，所有這些因子都參與早期階段的T細胞活化，細胞因而受到抑制，從而發(fā)揮強大的免疫抑制作用。經(jīng)FK506治療的角膜植片，排斥反應(yīng)的相關(guān)因子和細胞表達明顯降低。目前，藤澤藥品工業(yè)公司的他克莫司膠囊、注射液已廣泛用于治療肝、腎和骨髓移植的急性排斥治療，現(xiàn)已經(jīng)作為預(yù)防、治療排斥反應(yīng)以及自身免疫性疾病的一線藥物。他克莫司獲批準上市的外用制劑為他克莫司軟膏(tacrolimus ointment,商品名普特彼),其適應(yīng)癥是中至重度特應(yīng)性皮炎患者，作為短期或間歇性長期治療?；谘鄄拷o藥的敏感性和刺激性，未見有他克莫司軟膏直接眼部局部給藥用于治療移植后免疫排斥反應(yīng)的報道。他克莫司吸收的個體差異較大，廣泛分布于各組織中，入血后大部分通過膽汁排泄，對肝功能不全的患者需調(diào)整劑量。同時，他克莫司與其他免疫抑制劑一樣存在毒副作用:可引起腎功能損傷、高血壓、高血糖、白細胞增多及高鉀低鎂血癥；腎毒性、神經(jīng)毒性和消化道副作用較明顯。他克莫司的副作用與給藥途徑相關(guān)，靜脈給藥的副作用大于口服，文獻報道中動物實驗結(jié)果表明，眼局部給藥可明顯減少全身用藥時的副作用。目前他克莫司用于角膜移植免疫排斥反應(yīng)的臨床使用方式有兩種:全身用藥和局部用藥。其中，全身用藥包括腹腔內(nèi)注射和肌肉注射。目前我國尚無上市的他克莫司眼用制劑，據(jù)文獻“中國醫(yī)院藥學雜志2005，14
(11):715-716”報道了他克莫司滴眼液的制備及臨床應(yīng)用，其他克莫司滴眼液由他克莫司、羥丙甲纖維素、氯化鈉和硫柳汞等組成，在文獻“中國醫(yī)院藥學雜志2009，29 (22)1951-1952”報道了他克莫司滴眼液的質(zhì)量控制及穩(wěn)定性考察，這類滴眼液穩(wěn)定性很差，經(jīng)典恒溫加速試驗預(yù)測儲存有效期結(jié)果表明，他克莫司滴眼液在25。C的有效期僅為46.69天,在4° C忙存的有效期約為2.55年。由文獻報道結(jié)果可知,他克莫司水溶液穩(wěn)定性較差，不利于產(chǎn)品的運輸和貯存。另外，滴眼液用于局部滴眼時，易被快速清除，并且由于他克莫司具有分子量大和不溶于水的理化特點，使其局部應(yīng)用時的眼內(nèi)吸收差，不能產(chǎn)生有效的眼內(nèi)藥物濃度。隨著新劑型新技術(shù)的研究，文獻報道他克莫司眼用新劑型有脂質(zhì)體、環(huán)糊精包合物、納米粒和緩釋膠原藥膜等。他克莫司脂質(zhì)體制劑的主要缺點是滅菌消毒困難，制備復(fù)雜且成本較高，易氧化產(chǎn)生毒性，所以臨床應(yīng)用較為困難；他克莫司環(huán)糊精包合物滴眼液用于眼部局部給藥后，眼表藥物易被快速清除，藥物難維持較長時間藥效；他克莫司納米粒制劑可以延長藥物在角膜的滯留時間并且提高藥物進入角膜濃度，但是納米粒制劑在制備過程中易帶入有機溶劑，殘留溶劑不被臨床所接受；他克莫司緩釋膠原藥膜是外型類似角膜接觸鏡的半透明柔軟的薄膜，由豬或牛鞏膜提取而成，其不易實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，患者順應(yīng)性差。他克莫司的強疏水性和遇水不穩(wěn)定的特點決定了它在局部眼用時存在的問題:遇水易于異 構(gòu)化，眼內(nèi)通透性差，難于在眼內(nèi)達到有效治療水平，使其生物利用度較低。因此，為克服上述問題研制和開發(fā)一種良好的他克莫司眼部局部應(yīng)用的制劑:可以提高他克莫司的穩(wěn)定性，延長藥物作用時間；有效增強藥物在眼角膜移植術(shù)后治療和預(yù)防免疫排斥反應(yīng)的療效，減少眼睛局部用藥的刺激性、并且避免他克莫司全身應(yīng)用的毒副作用；易于實現(xiàn)工業(yè)化大生產(chǎn)，具有較強實用性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種用于眼角膜移植的眼局部用藥制劑及提供其制備方法。為達到本發(fā)明的目的，采用的技術(shù)方案是提供一種眼角膜移植的他克莫司眼用齊U，它是將他克莫司制成眼用前體囊泡劑，前體囊泡劑是由下列質(zhì)量百分比的原料組成，
他克莫司 0.04 0.8%
表面活性劑 24.(Γ41.0%
膽固醇1.6 8.0%
卵磷脂24.0 41.0%
醇1.2 30%
其余為水或體積百分濃度為0.1%的甘油水溶液或PH7.4的磷酸緩沖液，
所說的表面活性劑是為司盤20、司盤40、司盤60、司盤80、吐溫20、吐溫60、吐溫80、聚氧乙烯醚蓖麻油、泊洛沙姆中的一種，所說的醇為乙醇、異丙醇、丁醇、丙醇中的一種。為達到本發(fā)明的另一目的，本發(fā)明所提供的眼角膜移植的他克莫司眼用劑的制備方法是:
(1)按下列質(zhì)量百分比的原料配備 他克莫司 0.04 0.8%
表面活性劑 24.(Γ41.0%
膽固醇1.6 8.0%
卵磷脂24.0 41.0%
醇1.2 30%
其余為水或體積百分濃度為0.1%的甘油水溶液或PH7.4的磷酸緩沖液，
所說的表面活性劑是為司盤20、司盤40、司盤60、司盤80、吐溫20、吐溫60、吐溫80、聚氧乙烯醚蓖麻油、泊洛沙姆中的一種，
所說的醇為乙醇、異丙醇、丁醇、丙醇中的一種； (2)稱取表面活性劑、醇、卵磷脂、膽固醇、他克莫司于容器中，攪拌下加熱至65±5° C，攪拌均勻至各組分完全溶解，呈均一透明狀，作為溶液I ;
(3)攪拌下向溶液I中滴加水或體積百分濃度為0.1%的甘油水溶液或PH7.4的磷酸緩沖液，在65° ±5° C下繼續(xù)攪拌加熱至溶液混合均勻，將混合液取出繼續(xù)攪拌至室溫，呈黏稠凝膠態(tài)即得他克莫司前體囊泡劑。依照中國藥典2010版緩沖液項下規(guī)定配制PH7.4的磷酸緩沖液，配制方法為:甲液:取無水磷酸二氫鈉8g，加水溶解，并稀釋至IOOOml。乙液:取無水磷酸氫二鈉9.47g，加水溶解，并稀釋至1000ml。取上述甲液6ml與乙液400ul混合，搖勻，即得。成品制劑可另配有瓶裝的生理鹽水，根據(jù)成品制劑的不同規(guī)格，分別分裝至5ml、10ml,20ml滴眼液塑料瓶中，病人使用前將瓶裝生理鹽水全部加入他克莫司前體囊泡制劑中，振搖使前體囊泡制劑充分遇水水化為囊泡，最終為含他克莫司0.01°/Γι%囊泡滴眼液。本發(fā)明采用安全、無刺激性的表面活性劑作為主要組分，適合應(yīng)用到眼部敏感部位，具有無刺激性、生物相容性好、長期使用無毒副作用等優(yōu)點。他克莫司作為高疏水性的大環(huán)內(nèi)酯類藥物，遇水會不穩(wěn)定，易于異構(gòu)化。本發(fā)明將他克莫司制備成眼用前體囊泡制齊U，制劑體系含限量的水，既增強了藥物在載體中的溶解度，又避免藥物遇見水快速異構(gòu)化。前體囊泡制劑外觀呈現(xiàn)凝膠態(tài)，使用前加生理鹽水振搖即能迅速自組裝成囊泡而將藥物包載起來，囊泡滴眼液滴入眼睛具有增強治療，刺激性小的特性。該體系是一種有效的眼用新劑型，有廣闊的開發(fā)前景。本發(fā)明的優(yōu)點:
1、囊泡劑是繼脂質(zhì)體之后具有更多優(yōu)良特性的藥物載體，不僅可以增加藥物的角膜通透性，而且能起到緩釋、靶向、降低毒性等作用，在眼部給藥系統(tǒng)中顯示出了良好的開發(fā)潛能。前體囊泡劑具有限量的水分，提高了制劑貯存穩(wěn)定性，為難溶性藥物及穩(wěn)定性差的藥物研究提供了新的思路。2、本發(fā)明的產(chǎn)品將前體囊泡劑的優(yōu)點、眼部給藥系統(tǒng)的特點及他克莫司藥物的主治病癥有機結(jié)合，達到提高療效的目的，降低毒性，減少副作用，給藥方便、非侵入性、無痛等特點，可提高患者的順應(yīng)性；3、制備工藝簡便，適合工業(yè)化生產(chǎn)。下面通過實施例進一步闡述本發(fā)明的技術(shù)方案和進步。
制備得到的前體囊泡制劑穩(wěn)定性好，遇水水化后得到的囊泡平均粒徑約為lum，制備工藝簡單，重復(fù)性好。該體系具有相當好的熱力學穩(wěn)定性，不僅適合于實驗室研究，更易于實現(xiàn)工業(yè)化大生產(chǎn)?？傊?，該囊泡體系適合于他克莫司等難溶性藥物的傳遞及載體應(yīng)用。
具體實施例方式下面提供了本發(fā)明制劑有代表性的實施例，這些實施例僅僅用于說明本發(fā)明，而不對保護范圍造成限制。實施例1他克莫司眼用前體囊泡劑的制備
權(quán)利要求
1.一種用于眼角膜移植的他克莫司眼用劑，其特征在于將他克莫司制成前體囊泡劑，前體囊泡劑是由下列質(zhì)量百分比的原料組成: 他克莫司 0.04 0.8% 表面活性劑 24.(Γ41.0% 膽固醇1.6 8.0% 卵磷脂24.0 41.0% 醇1.2 30% 其余為水或體積比0.1%甘油水溶液或PH7.4磷酸緩沖液， 所說的表面活性劑是為司盤20、司盤40、司盤60、司盤80、吐溫20、吐溫60、吐溫80、聚氧乙烯醚蓖麻油、泊洛沙姆中的一種， 所說的醇為乙醇、異丙醇、丁醇、丙醇中的一種。
2.一種用于眼角膜移植的他克莫司眼用劑的制備方法是: (O按下列質(zhì)量百分比的原料配備: 他克莫司 0.04 0.8% 表面活性劑 24.(Γ41.0% 膽固醇1.6 8.0%` 卵磷脂24.0 41.0% 醇1.2 30% 其余為水或體積比0.1%甘油水溶液或PH7.4磷酸緩沖液， 所說的表面活性劑是為司盤20、司盤40、司盤60、司盤80、吐溫20、吐溫60、吐溫80、聚氧乙烯醚蓖麻油、泊洛沙姆中的一種， 所說的醇為乙醇、異丙醇、丁醇、丙醇中的一種； (2)稱取表面活性劑、醇、卵磷脂、膽固醇、他克莫司加熱至65±5°C，攪拌均勻至各組分完全溶解，呈均一透明狀，作為溶液I ; (3)攪拌下向溶液I中滴加水或體積百分濃度為0.1%的甘油水溶液或PH7.4的磷酸緩沖液，65° C繼續(xù)攪拌加熱至溶液混合均勻，將混合液取出繼續(xù)攪拌至室溫，呈黏稠凝膠態(tài)即得他克莫司前體囊泡劑。
全文摘要
用于眼角膜移植的他克莫司眼用劑及其制備方法，屬于藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及用于角膜移植的他克莫司眼用前體囊泡劑及其制備方法。前體囊泡劑是由下列質(zhì)量百分比的原料組成他克莫司0.04~0.8%，表面活性劑4.0~41.0%，膽固醇1.6~8.0%，卵磷脂4.0~41.0%，醇1.2~30%，其余為水或0.1%甘油水溶液或PH7.4磷酸緩沖液，表面活性劑是為司盤、吐溫、聚氧乙烯醚蓖麻油、泊洛沙姆中的一種，醇為乙醇、異丙醇、丁醇、丙醇中的一種。他克莫司前體囊泡劑具有限量的水分，提高了制劑貯存穩(wěn)定性；產(chǎn)品將前體囊泡劑的優(yōu)點、眼部給藥系統(tǒng)的特點及他克莫司藥物的主治病癥有機結(jié)合，達到提高療效，減少副作用，給方便等優(yōu)點；制備工藝簡便，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A61P37/06GK103142468SQ20131010229
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月28日
發(fā)明者徐月紅, 李琦 申請人:中山大學