專利名稱：布雷菲德菌素a的羥基磷酸氨基酸酯類衍生物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種真菌代謝產(chǎn)物，尤其是涉及一種布雷菲德菌素A的羥基磷酸氨基酸酯類衍生物及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
( 一)、(+) -Brefeldin A 的研究概括布雷菲徳菌素A(英文名(+)-Brefeldin A,簡稱BFA，中文名稱為布雷菲德 菌素A，也稱作斜臥菌素或藍菌素或殼二孢素)，是一種大環(huán)內(nèi)酯類真菌代謝產(chǎn)物，最早由Singleton等在1958年從Penicilliumdecumben中分離得到。雖然BFA的平面結(jié)構(gòu)早已被測定，但是其絕對構(gòu)型直到1971年才由Weber等用X射線晶體衍射法確立，其結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.布雷菲德菌素A的羥基磷酸氨基酸酯類衍生物，其特征在于， 所述布雷菲德菌素A的羥基磷酸氨基酸酯類衍生物的結(jié)構(gòu)式為
2.如權(quán)利要求I所述的布雷菲德菌素A的羥基磷酸氨基酸酯類衍生物，其特征在于， 所述布雷菲德菌素A的羥基磷酸氨基酸酯類衍生物包括(+)-Brefeldin A-4，7-二羥基磷酸氨基酸酯、(+)-Brefeldin A-4-輕基磷酸氨基酸酯和(+)-Brefeldin A-7-輕基磷酸氨基酸酯； 所述(+)-BrefeIdinA-4, 7-二輕基磷酸氨基酸酯的結(jié)構(gòu)式為
3.如權(quán)利要求2所述的(+)-BrefeldinA_4, 7-二輕基磷酸氨基酸酯的合成方法,其特征在于包括以下步驟 a)冰水浴，惰性氣體保護下，將(+)-Brefeldin A、磷?；被岷?_ 二甲氨基吡啶溶解于第一有機溶劑中，所述(+)-Brefeldin A、磷酰化氨基酸和4-二甲氨基吡啶的摩爾配比 I : 4 : 0. I ; b)在冰浴條件下，將二環(huán)己基碳二亞胺的有機溶劑加入步驟a)所得的混合物中，反應(yīng)后，得4，7- 二羥基磷酸氨基酸酯_(+)-Brefeldin A ； c)步驟b)反應(yīng)后，過濾掉不溶物，減壓，濃縮，除去有機溶劑，產(chǎn)物質(zhì)量用5%的第二有機溶劑溶解，進行硅膠柱層析分離，得到4，7- 二羥基磷酸氨基酸酯_(+)-Brefeldin A。
4.如權(quán)利要求3所述的(+)-BrefeldinA_4, 7-二輕基磷酸氨基酸酯的合成方法,其特征在于在步驟a)中，所述第一有機溶劑選自二氯甲烷、DMF中的一種；所述磷酰化氨基酸選自磷?；拾彼?、磷酰化丙氨酸、磷?；i氨酸、磷酰化苯丙氨酸中的一種； 在步驟b)中，所述二環(huán)己基碳二亞胺的有機溶劑可選自二氯甲烷、DMF中的一種； 在步驟c)中，所述第二有機溶劑可選自二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、氯仿中的一種。
5.如權(quán)利要求2所述的(+)-BrefeldinA-4-輕基磷酸氨基酸酯的合成方法,其特征在于包括以下步驟 a)將(+)_BrefeldinA、咪唑和叔丁基二甲基氯硅烷在第一有機溶劑中反應(yīng)后，再加入第二有機溶劑后，洗滌，有機相減壓濃縮，剩余物柱層析分離得到7-0-叔丁基二甲基硅(+)-Brefeldin A ； b)在惰性氣體保護下，將步驟a)得到的7-0-叔丁基二甲基娃(+)-Brefeldin A、磷酰化氨基酸和4-二甲氨基吡啶在第二有機溶劑中形成混合物，冰浴下，加入二環(huán)己基碳二亞胺的第三有機溶劑，反應(yīng)后，過濾除掉不溶物，減壓濃縮，柱層析分離得到純的7號位叔丁基二甲基硅保護的(+)-Brefeldin A_4_羥基磷酸氨基酸酯； c)將7-0-叔丁基二甲基硅-(+)-BrefeldinA-4-0-磷酸氨基酸酯溶解在第四有機溶劑中，再加入碘單質(zhì)，反應(yīng)后，再加入硫代硫酸鈉，直到溶液變?yōu)槌吻澹缓蠹尤氲谖逵袡C溶齊IJ，再洗滌，有機相減壓濃縮，剩余物柱層析分離得到(+)-Brefeldin A-4-羥基磷酸氨基酸酯。
6.如權(quán)利要求5所述的(+)-BrefeldinA-4-輕基磷酸氨基酸酯的合成方法,其特征在于在步驟a)中，所述(+)-Brefeldin A、咪唑和叔丁基二甲基氯硅烷的質(zhì)量配比為·280 126 204 165 ;所述的第一有機溶劑可選自DMF、DMS0中的一種；所述反應(yīng)可采用薄層層析板跟蹤監(jiān)測反應(yīng)，所述的第二有機溶劑加入量按(+)_Brefeldin A質(zhì)量10mg/mL,所述第二有機溶劑為乙酸乙酯，二氯甲烷，所述洗滌可采用加入水按(+)-Brefeldin A質(zhì)量·10mg/mL,洗 3 次； 在步驟b)中，所述在惰性氣體可采用気氣,所述(+)-Brefeldin A、磷?；被岷汀?-二甲氨基吡啶的摩爾配比可為I : 2 0. I ;所述第二有機溶劑可選自乙酸乙酯、二氯甲燒中的一種；所述的第二有機溶劑加入量按(+)_Brefeldin A質(zhì)量20mg/mL所述第三有機溶劑的加入量按(+)_Brefeldin A質(zhì)量10mg/mL,所述第三有機溶劑可選自二氯甲燒、氯仿、DMF中的一種；所述反應(yīng)可采用薄層層析板跟蹤監(jiān)測反應(yīng)；所述磷?；被峥蛇x自磷?；拾彼帷⒘柞；彼帷⒘柞；i氨酸、磷酰化苯丙氨酸中的一種； 在步驟c)中，所述7-0-叔丁基二甲基硅-(+)-Brefeldin A-4-羥基磷酸氨基酸酯、碘單質(zhì)、硫代硫酸鈉、第四有機溶劑、第五有機溶劑的配比可為(100 300)mg (30 ·100)mg : (10 60)mg : (3 5)mL : (10 30)mL ;所述第四有機溶劑可選自甲醇；所述第五有機溶劑可選自乙酸乙酯、二氯甲烷中的一種；所述洗滌可采用的水洗滌加入水按(+) -BrefeldinA 質(zhì)量 10mg/mL,洗 3 次。
7.如權(quán)利要求2所述的(+)-BrefeldinA-7-輕基磷酸氨基酸酯的合成方法,其特征在于包括以下步驟 a)將(+)_BrefeldinA、咪唑和叔丁基二甲基氯硅烷在第一有機溶劑中反應(yīng)后，再加入第二有機溶劑后，洗滌，有機相減壓濃縮，剩余物柱層析分離得到形成4，7-0-叔丁基二甲基娃(+) -Brefeldin A ； b)將4，7-雙叔丁基二甲基硅-(+)-Brefeldin A溶于THF中，加入醋酸及水，反應(yīng)后將反應(yīng)液減壓濃縮，加入第三有機溶劑后，洗滌，有機相減壓濃縮，剩余物柱層析分離得到4-0-叔丁基二甲基娃(+) -Brefeldin A ； c)在惰性氣體保護下，將4號位TBS保護的(+)-Brefeldin A、磷?；被岷?- 二甲氨基吡啶在第四有機溶劑中形成混合物，冰浴下，再加入二環(huán)己基碳二亞胺的第四有機溶劑，反應(yīng)后，過濾除掉不溶物，減壓濃縮，柱層析分離得到4號位叔丁基二甲基硅保護的(+) -Brefeldin A-7-輕基磷酸氨基酸酯； d)將4號位TBS保護的(+)-BrefeldinA-7-羥基磷酸氨基酸酯溶解在第五有機溶劑中，再加入碘，反應(yīng)后，冷卻至室溫，再加入硫代硫酸鈉，直到溶液變?yōu)槌吻?，然后加入水洗滌，有機相減壓濃縮，剩余物柱層析分離得到(+)-Brefeldin A-7-羥基磷酸氨基酸酯。
8.如權(quán)利要求7所述的(+)-BrefeldinA_7_輕基磷酸氨基酸酯的合成方法,其特征在于在步驟a)中，所述(+)-Brefeldin A、咪唑和叔丁基二甲基氯硅烷的摩爾配比為1:3: 6;所述第一有機溶劑可選自DMF、DMSO中的一種；所述第二有機溶劑可選自乙酸乙酯、二氯甲烷中的一種；所述反應(yīng)可采用薄層層析板跟蹤監(jiān)測反應(yīng)，所述的第二有機溶劑加入量按(+)-Brefeldin A質(zhì)量10mg/mL，所述第二有機溶劑為乙酸乙酯，二氯甲烷，所述洗漆可采用加入水按(+)-Brefeldin A質(zhì)量10mg/mL,洗3次； 在步驟b)中，所述4，7號位TBS雙保護的(+)-Brefeldin A、四氫呋喃、醋酸、水、第三有機溶劑的配比ImL: lmL:2mL ;所述反應(yīng)的條件可為在5(T60°C攪拌反應(yīng)24h ;所述第三有機溶劑可選自乙酸乙酯、二氯甲烷中的一種；所述洗滌可依次用水、碳酸氫鈉，和水洗滌； 在步驟c)中，所述惰性氣體可采用氬氣、氮氣；所述4號位叔丁基二甲基硅保護的(+)-Brefeldin A、磷?；被岷?-二甲氨基吡啶的摩爾配比可為I : 2 0. I ;所述第四有機溶劑可選自二氯甲烷、氯仿、DMF中的一種；所述反應(yīng)可采用薄層層析板跟蹤監(jiān)測反應(yīng)；所述磷?；被峥蛇x自磷酰化甘氨酸、磷酰化丙氨酸、磷?；i氨酸、磷?；奖彼嶂械囊环N； 在步驟d)中,所述4號位叔丁基二甲基娃保護的(+)-Brefeldin A_7_輕基磷酸氨基酸酯、碘、硫代硫酸鈉、第五有機溶劑、水的配比可為(100 300)mg (30 100)mg (10 60)mg (3 5)mL (10 30)mL ;所述反應(yīng)的條件可為50 80°C下反應(yīng)10 30h ;所述洗滌可采用與原料10%配比水洗滌3次；所述第五有機溶劑可選自乙酸乙酯、二氯甲烷中的一種。
9.如權(quán)利要求I所述的布雷菲德菌素A的羥基磷酸氨基酸酯類衍生物在制備抗癌藥品中的應(yīng)用。
全文摘要
布雷菲德菌素A的羥基磷酸氨基酸酯類衍生物及其制備方法和應(yīng)用，涉及一種真菌代謝產(chǎn)物。所述衍生物包括(+)-Brefeldin A-4,7-二羥基磷酸氨基酸酯、(+)-Brefeldin A-4-羥基磷酸氨基酸酯和(+)-Brefeldin A-7-羥基磷酸氨基酸酯。合成了具有高度生物活性、較好溶解性及好的生物利用度的布雷菲德菌素A的羥基磷酸氨基酸酯類衍生物，簡單、低成本。結(jié)構(gòu)新穎、結(jié)構(gòu)相對穩(wěn)定，且對腫瘤細胞的增殖具有顯著的抑制活性。相對原藥(+)-BrefeldinA具有溶解性好，半衰期長等優(yōu)點，布雷菲德菌素A的羥基磷酸氨基酸酯類衍生物可在制備抗癌藥品中應(yīng)用。
文檔編號A61K31/665GK102731573SQ20121022210
公開日2012年10月17日 申請日期2012年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月28日
發(fā)明者唐果, 莊榮強, 方美娟, 程宏明, 趙玉芬 申請人:天津林美科技有限公司