專利名稱：一種白藜蘆醇四聚體化合物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種白藜蘆醇四聚體化合物(Vaticaffinol)及其制備方法，以及白藜蘆醇四聚體化合物(Vaticaffinol)在預(yù)防和治療高尿酸血癥和痛風(fēng)中的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
白藜蘆醇(resveratrol，簡(jiǎn)稱Res )是非黃酮類的多酚化合物，日本人 Tokaoka 1940年首次從毛葉藜蘆(Veratrum grangifIorurri)的根部分離得到。1963年 Nonomura等提出白藜蘆醇是某些草藥治療炎癥、脂類代謝紊亂和心血管疾病等的有效成分。隨著對(duì)白藜蘆醇的深入研究，顯示白藜蘆醇具有抗癌、抗氧化、抗菌、抗炎等作用， 可廣泛地應(yīng)用于醫(yī)藥、保健品、食品、化妝品等領(lǐng)域。白藜蘆醇有二聚體、三聚體和四聚體形式，白藜蘆醇四聚體化合物及其藥理功效已有所報(bào)道。如，從龍腦香科植物Kaiica rassak的莖皮中分離得到的白藜蘆醇四聚體Vaticanol-C能夠強(qiáng)力誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡[Ito T, Akao Y, Yi H, et al. (2003) Antitumor effect of resveratrol oligomers against human cancer cell lines and the molecular mechanism of apoptosis induced by vaticanol C. Carcinogenesis 24:1489 - 1497] ο Vaticanol-C還能通過(guò)活化PPAR α和PPAR^/δ來(lái)抑制心血管疾病發(fā)生發(fā)展(Tomoko Tsukamoto, Rieko Nakata, Emi Tamura, et al. Vaticanol C, a resveratrol tetramer, activates PPAR α and PPAR β / δ in vitro and in vivo. Nutrition & Metabolism 2010, 7:46)；從北部非洲的葡萄酒中首次分離得到的白藜蘆醇四聚體Hopeaphenol具有顯著的抗菌、抗炎、抗真菌及對(duì)HIV病毒的抑制效應(yīng)(HABIBA AMIRA GUEBAILIA, KLEOPATRA CHIRA, TRISTAN RICHARD, et al. Hopeaphenol: The First Resveratrol Tetramer in Wines from North Africa. J. Agric. Food Chem. 2006，54，9559 9564)，Hopeaphenol還可用于預(yù)防和治療神經(jīng)退行性疾病、心血管疾病、糖尿病、高膽固醇血癥和肥胖癥(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所.作為肝X受體調(diào)節(jié)劑的化合物中國(guó)，200810102538. 8[P]. 2009-09-30) ； Vaficaffinol 是由斯里蘭卡人M. Uvais S. Sultanbawa等，于1980年首次從龍腦香科瀕危植物版納青梅 (Kaiica穿^？/？識(shí)/徹幻·^·)中分離至Ij的一禾中白薬聲醇四聚體[M. Uvais S. Sultanbawa, Sivaguanasundram Surendrakumar, and Mohamed I. Μ. WAZEER, Novel Resveratrol Tetramer, Vaticaff inol, from Vatica affinis Thw. (Dipterocarpaceae), J. C. S. CHEM. COMM. , 1981，1204 1206],但本專利從具翼龍腦香(々i/^erocar/WAs a/atos TPo功) 中分離到該化合物乃屬初次，且其具有預(yù)防或治療高尿酸血癥和痛風(fēng)之功效從未報(bào)道。痛風(fēng)是由于嘌呤類物質(zhì)代謝紊亂，尿酸產(chǎn)生過(guò)多或排泄減少，血清尿酸濃度持續(xù)增高導(dǎo)致尿酸鹽結(jié)晶沉淀軟組織所致的一組代謝性疾病。其臨床表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作的關(guān)節(jié)炎，痛風(fēng)石形成和關(guān)節(jié)畸形，嚴(yán)重者可導(dǎo)致關(guān)節(jié)活動(dòng)障礙，累及腎臟時(shí)可引起慢性間質(zhì)炎和尿酸性腎石病。尿酸水平升高是痛風(fēng)的生化基礎(chǔ)，無(wú)癥狀性高尿酸血癥是痛風(fēng)發(fā)生的前期狀態(tài)，痛風(fēng)必伴有高尿酸血癥。近年來(lái)，痛風(fēng)和高尿酸血癥的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，發(fā)病年齡呈現(xiàn)低齡化，給社會(huì)帶來(lái)巨大的負(fù)擔(dān)，并與高血壓、高脂血癥、動(dòng)脈粥樣硬化、肥胖、胰島素抵抗的發(fā)生密切相關(guān)，已成為識(shí)別代謝綜合征的早期標(biāo)志。痛風(fēng)癥狀以反復(fù)下肢關(guān)節(jié)紅腫熱痛為主，在中醫(yī)辨證上多屬濕熱病范疇。其病機(jī)或因先天稟賦不足，或因后天飲食不節(jié)， 臟腑功能失調(diào)，分清別濁失常，于是濕、熱、瘀、濁諸病隨之產(chǎn)生。目前對(duì)痛風(fēng)和高尿酸血癥的治療主要有阻止內(nèi)源性嘌呤合成的藥物(如別嘌呤醇)及促尿酸排泄(丙磺舒、苯溴馬龍)的藥物，而天然產(chǎn)物白藜蘆醇四聚體(Vaticaffinol) 用于預(yù)防或治療高尿酸血癥和痛風(fēng)尚未報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種白藜蘆醇四聚體化合物及其制備方法，以及提供一種白藜蘆醇四聚體化合物在制備預(yù)防或治療高尿酸血癥和痛風(fēng)的藥物或保健食品組合物中的應(yīng)用。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明是通過(guò)以下的技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的
一種白藜蘆醇四聚體化合物，其特征在于，所述的白藜蘆醇四聚體化合物具有如式(I) 所述的結(jié)構(gòu)式
(I)。 一種權(quán)利要求1所述的化合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟
(1)醇制備浸膏將具翼龍腦香的細(xì)枝部分粉碎、過(guò)40 80目篩，然后用濃度為 95-50%的乙醇連續(xù)浸泡具翼龍腦香的細(xì)枝粉末，并進(jìn)行提取，提取的次數(shù)為3 5次，每次的時(shí)間為12 M小時(shí)；過(guò)濾收集提取后的提取液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干，即得浸膏；
(2)干法上樣將步驟(1)制備的浸膏通過(guò)有機(jī)溶劑溶解，然后用200 300目硅膠與其混勻，硅膠與浸膏的干重比為1 2 1，室溫下自然風(fēng)干后上硅膠柱，硅膠柱中的硅膠顆粒為300 400目，且硅膠柱中的硅膠與浸膏的干重比為10 12 1 ；
(3)利用流動(dòng)相洗脫液進(jìn)行洗脫利用氯仿-甲醇溶劑系統(tǒng)進(jìn)行洗脫，所述的氯仿甲醇溶劑系統(tǒng)中氯仿與甲醇的體積比分別具有100 OUOO 5、100 10、100 20、100 50、 100 100和0 100多個(gè)極性段，洗脫液每30(T500ml收集一瓶，且每一極性段洗脫至無(wú)色；
(4)凝膠柱層析根據(jù)步驟(3)所述的氯仿與甲醇的體積比為100:20極性段的各組分的薄層色譜圖，合并具有相同熒光點(diǎn)的組分，然后將后流出的若干瓶具有相同熒光點(diǎn)的組分合并后上凝膠柱細(xì)分，以甲醇為流動(dòng)相，然后再根據(jù)各組分的薄層色譜圖，合并有相同熒
權(quán)利要求
1. 一種白藜蘆醇四聚體化合物，其特征在于，所述的白藜蘆醇四聚體化合物具有如式 (I)所述的結(jié)構(gòu)式
2.—種權(quán)利要求1所述的化合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1)醇提制備浸膏將具翼龍腦香的細(xì)枝部分粉碎、過(guò)40 80目篩，然后用濃度為 95 50%的乙醇連續(xù)浸泡具翼龍腦香的細(xì)枝粉末，并進(jìn)行提取，提取的次數(shù)為3 5次，每次的時(shí)間為12 M小時(shí)；過(guò)濾收集提取后的提取液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干，即得浸膏；(2)干法上樣將步驟(1)制備的浸膏通過(guò)有機(jī)溶劑溶解，然后用20(Γ300目硅膠與其混勻，硅膠與浸膏的干重比為1 2 1，室溫下自然風(fēng)干后上硅膠柱，硅膠柱中的硅膠顆粒為300 400目，且硅膠柱中的硅膠與浸膏的干重比為10 12 1 ；(3)利用流動(dòng)相洗脫液進(jìn)行洗脫利用氯仿-甲醇溶劑系統(tǒng)進(jìn)行洗脫，所述的氯仿甲醇溶劑系統(tǒng)中氯仿與甲醇的體積比分別具有100 OUOO 5、100 10、100 20、100 50、 100 100和0 100多個(gè)極性段，洗脫液每30(T500ml收集一瓶，且每一極性段洗脫至無(wú)色；(4)凝膠柱層析根據(jù)步驟(3)所述的氯仿與甲醇的體積比為100:20極性段的各組分的薄層色譜圖，合并先流出的具有相同熒光點(diǎn)的組分，然后將后流出的若干瓶具有相同熒光點(diǎn)的組分合并后上凝膠柱細(xì)分，以甲醇為流動(dòng)相，然后再根據(jù)各組分的薄層色譜圖，合并有相同熒光點(diǎn)的餾分，將后流出的若干瓶有相同熒光點(diǎn)的餾分合并，室溫下置通風(fēng)櫥內(nèi)抽干溶劑即得固體白藜蘆醇四聚體。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種權(quán)利要求1所述的化合物的制備方法，其特征在于步驟 (4)中所述的凝膠柱中的填料為葡聚糖LH-20。
4.一種權(quán)利要求1所述的具有式(I)結(jié)構(gòu)的白藜蘆醇四聚體化合物在預(yù)防或治療高尿酸血癥和痛風(fēng)藥物或在保健食品中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種白藜蘆醇四聚體化合物及其制備方法，所述的制備方法包括(1)將具翼龍腦香的細(xì)枝部分經(jīng)過(guò)醇提制備浸膏、(2)干法上樣、(3)利用流動(dòng)相洗脫液進(jìn)行洗脫和(4)凝膠柱層析，本發(fā)明還涉及一種白藜蘆醇四聚體化合物在預(yù)防或治療高尿酸血癥和痛風(fēng)藥物或在保健食品中的應(yīng)用。本發(fā)明所述的白藜蘆醇四聚體化合物在其提取和純化過(guò)程中，未用反相柱和半制備柱，使得其工藝簡(jiǎn)單、得率高；此外，與針對(duì)痛風(fēng)和高尿酸血癥的發(fā)明相比，本發(fā)明所述的白藜蘆醇四聚體化合物為單體化合物，作為一個(gè)天然的降尿酸劑，藥效成分明確，降尿酸作用顯著，可以作為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，方便可靠，為其臨床應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)。
文檔編號(hào)A61K31/343GK102432620SQ201110266508
公開(kāi)日2012年5月2日 申請(qǐng)日期2011年9月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月9日
發(fā)明者丁曉琴, 孔令東, 戈惠明, 陳玉勝 申請(qǐng)人:南京大學(xué)