專(zhuān)利名稱(chēng)：一種牙基質(zhì)海綿劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種牙基質(zhì)海綿劑及制備方法。該海綿劑能對(duì)牙基質(zhì)很好的塑形，使牙基質(zhì)更好地填充到骨缺損、骨不連、骨組織萎縮、骨折、骨愈合不良等病部位，并以有效劑量長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)地發(fā)揮其誘導(dǎo)骨生成、促進(jìn)骨修復(fù)、促進(jìn)傷口收斂的作用。
背景技術(shù)：
美國(guó)的Urist博士發(fā)現(xiàn)脫鈣的骨基質(zhì)能夠誘導(dǎo)骨和軟骨的形成，并在1965年創(chuàng)立了以骨質(zhì)中BMP的骨組織形成誘導(dǎo)作用為核心的骨誘導(dǎo)修復(fù)理論。此后，國(guó)內(nèi)外各學(xué)者針對(duì)骨修復(fù)理論進(jìn)行了大量的研究，開(kāi)發(fā)出一系列來(lái)源于生物體的成骨材料，主要有自體骨材料和冷凍異體骨。但自體骨的移植除了給患者帶來(lái)二次創(chuàng)傷外，往往還會(huì)導(dǎo)致供骨區(qū)的功能缺失，另外利用自體骨治療骨缺損不僅對(duì)較大范圍的缺損治療有局限性，同時(shí)還受到患者體質(zhì)和年齡的限制；而冷凍異體骨雖然使用方便，但較容易引起排異反應(yīng)從而導(dǎo)致治療失敗。隨著對(duì)BMP研究的進(jìn)展，發(fā)現(xiàn)BMP可以誘導(dǎo)異位成骨。學(xué)者嘗試用基因工程等方法大量合成BMP并用于骨修復(fù)，發(fā)現(xiàn)其雖然有提高成骨的作用，但易于在體內(nèi)擴(kuò)散稀釋和被蛋白酶降解，難以長(zhǎng)期在體內(nèi)發(fā)揮成骨作用，而需要有合適的載體控制緩釋?zhuān)拍苁蛊涓L(zhǎng)時(shí)間的發(fā)揮作用。牙材料就是一種含有BMP和膠原蛋白的生物材料，我通過(guò)科學(xué)的方法適當(dāng)?shù)奶幚?，得到了能夠誘導(dǎo)骨生成、促進(jìn)骨組織形成與修復(fù)一種新型的骨誘導(dǎo)材料。該材料對(duì)骨不連、骨組織萎縮吸收、骨折愈合不良及大面積的骨缺損等病癥的治療具有良好的效果。海綿劑作為藥劑的一個(gè)劑型，在臨床應(yīng)用中越來(lái)越顯現(xiàn)出了重要作用。海綿劑系由親水膠體溶液經(jīng)發(fā)泡、固化、凍干和滅菌而制成的一種海綿狀固體制劑。海綿劑基質(zhì)共分兩類(lèi)一是用蛋白質(zhì)為原料制成的，如膠原海綿、明膠海綿；二是用淀粉為材料制成的淀粉海綿。淀粉海綿質(zhì)地松脆易碎；而膠原海綿和明膠海綿質(zhì)柔軟，臨床應(yīng)用較多。海綿劑在臨床上多用作外科輔助止血。由于海綿劑具有生物相容性好、無(wú)毒副作用，在體內(nèi)可徹底降解等優(yōu)點(diǎn)，而且蛋白膠原類(lèi)海綿本身具有誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞及上皮細(xì)胞再生，促進(jìn)創(chuàng)面修復(fù)的功能，因此海綿劑，在組織再生修復(fù)中發(fā)揮了越來(lái)越重要的作用。本牙基質(zhì)海綿劑具有海綿狀結(jié)構(gòu)且有吸水溶脹作用，可以提高牙基質(zhì)在骨缺損局部的劑量并為細(xì)胞和新生組織的生長(zhǎng)提供臨時(shí)支架，更好地誘導(dǎo)細(xì)胞實(shí)現(xiàn)局部的定向分化和組織再生。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提出一種牙基質(zhì)海綿劑，使牙基質(zhì)填充到骨缺損、骨不連、骨組織萎縮、骨折、骨愈合不良等病部位，發(fā)揮其誘導(dǎo)骨生成、促進(jìn)骨修復(fù)、促進(jìn)傷口收斂的作用。本發(fā)明的目的之二是提出上述牙基質(zhì)海綿劑的制備方法。
本發(fā)明的發(fā)明目的之一是通過(guò)選用一種牙基質(zhì)海綿劑實(shí)現(xiàn)的。該海綿劑包括 80 99%所述海綿劑重量百分含量的的牙基質(zhì)及1 20%膠原海綿，所述牙基質(zhì)經(jīng)醛類(lèi)交聯(lián)劑交聯(lián)固定在膠原海綿基質(zhì)上。所述牙基質(zhì)為用廢棄的哺乳動(dòng)物原牙制備的骨基質(zhì)材料，為采用以下方法制備的(1)用加熱至40°C的50%次氯酸鈉消毒液浸泡哺乳動(dòng)物原牙原料并攪拌消化30 分鐘，以去除軟組織及消毒；(2)將已消毒的哺乳動(dòng)物原牙原料經(jīng)機(jī)械方法去除牙釉質(zhì)、牙骨質(zhì)及齲壞牙體等， 保留牙本質(zhì)；(3)機(jī)械粉碎牙本質(zhì)，使之成為10-100目的顆粒；(4)將粉碎后的顆粒狀牙本質(zhì)按步驟(1)再次去除其軟組織及消毒；(5)放入5倍體積的1 1氯仿甲醛中浸泡30分鐘；(6)清潔流水漂洗4小時(shí)后放入5倍體積的0. 6 0. 65M HCl中浸泡18 M小時(shí)；(7)無(wú)菌去離子水反復(fù)漂洗漂洗后獲得牙基質(zhì)。所述膠原蛋白為市售醫(yī)用膠原蛋白。所述醛類(lèi)為甲醛或多聚甲醛本發(fā)明的發(fā)明目的之二是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，一種制備上述牙基質(zhì)海綿劑的制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟(1)將膠原蛋白溶于0. 乙酸溶液中，制成0. 1 3%膠原蛋白溶液，于 0. 2 2mM磷酸鹽緩沖液(pH7. 4 8. 0)中透析至中性；(2)在上述膠原蛋白溶液中，加入牙基質(zhì)，攪拌均勻；(3)邊攪拌邊加入一定量4% 6%的甲醛溶液，攪拌至產(chǎn)生大量均勻細(xì)致的氣泡為止；(4)于-80 -20°C冷凍2 5天，凍干得到海綿狀材料；(5)切割，真空包裝，滅菌、滅病毒，制得牙基質(zhì)海綿劑成品。本發(fā)明巧妙地利用醛類(lèi)交聯(lián)將牙基質(zhì)交聯(lián)固定在膠原海綿基質(zhì)上，利用膠原海綿基質(zhì)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，吸水膨脹且可生物降解的特性，增強(qiáng)哺乳動(dòng)物原牙基質(zhì)的可塑性，增加牙基質(zhì)在骨組織損傷局部的劑量并為細(xì)胞和新生組織的生長(zhǎng)提供臨時(shí)支撐，更好地誘導(dǎo)細(xì)胞實(shí)現(xiàn)局部的定向分化和組織再生。本發(fā)明所述的牙基質(zhì)海綿劑具有以下優(yōu)勢(shì)1、該海綿劑是由牙基質(zhì)和膠原蛋白共同作用與受損部位，牙基質(zhì)有促進(jìn)成骨細(xì)胞和軟骨細(xì)胞分化的功能，膠原蛋白能誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞和上皮細(xì)胞的再生，這樣牙基質(zhì)和膠原蛋白聯(lián)合作用，能更快的修復(fù)受損部位。2、應(yīng)用于骨組織損傷時(shí)，海綿基質(zhì)與組織液或血液接觸并吸附組織液或血液，迅速黏附在損傷組織上，使牙基質(zhì)相對(duì)局限于受損部位，有效提高損傷局部骨基質(zhì)劑量。3、牙基質(zhì)經(jīng)交聯(lián)固定在海綿基質(zhì)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)表面和其中，使該海綿網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)類(lèi)似于一支架和貯藥庫(kù)，最大限度的將哺乳動(dòng)物原牙基質(zhì)材料固定于骨組織損傷局部。4、牙基質(zhì)本身具有緩釋功能，經(jīng)交聯(lián)固定在膠原海綿網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中后，將進(jìn)一步形成二級(jí)緩釋?zhuān)S著海綿基質(zhì)材料被機(jī)體降解而逐步緩慢釋放一些牙基質(zhì)，能更小范圍，更長(zhǎng)時(shí)間維持有效牙基質(zhì)劑量。5、該海綿劑設(shè)計(jì)了多個(gè)系列不同牙基質(zhì)和膠原蛋白比例的劑型，更精細(xì)地調(diào)控牙基質(zhì)的緩釋?zhuān)寡阑|(zhì)海綿釋放能夠跟組織修復(fù)更加協(xié)調(diào)，牙基質(zhì)的劑量能夠更準(zhǔn)確地適配骨的受損程度。6、該海綿劑生物相容性好，無(wú)毒副作用，在體內(nèi)可徹底降解，并且降解材料可被組織吸收利用，同時(shí)海綿基質(zhì)本身具有的促創(chuàng)傷愈合和組織修復(fù)作用也有利于損傷組織的修
Μ. ο7、該制劑拆開(kāi)包裝即可使用，方便臨床應(yīng)用；該制劑生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，原材料來(lái)源豐
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具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 牙基質(zhì)的制備(1)用加熱至40°C的50%次氯酸鈉消毒液浸泡哺乳動(dòng)物原牙原料并攪拌消化30 分鐘，以去除軟組織及消毒；(2)將已消毒的哺乳動(dòng)物原牙原料經(jīng)機(jī)械方法去除牙釉質(zhì)、牙骨質(zhì)等，保留牙本質(zhì)；(3)機(jī)械粉碎牙本質(zhì)，使之成為10-100目的顆粒；(4)將粉碎后的顆粒狀牙本質(zhì)按步驟(1)再次去除其軟組織及消毒；(5)放入5倍體積的1 1氯仿甲醛中浸泡30分鐘；(6)清潔流水漂洗4小時(shí)后放入5倍體積的0. 6M HCl中浸泡18小時(shí)；(7)無(wú)菌去離子水反復(fù)漂洗漂洗后獲得牙基質(zhì)。實(shí)施例2 牙基質(zhì)的制備(1)用加熱至40°C的50%次氯酸鈉消毒液浸泡哺乳動(dòng)物原牙原料并攪拌消化45 分鐘，以去除軟組織及消毒；(2)將已消毒的哺乳動(dòng)物原牙原料經(jīng)機(jī)械方法去除牙釉質(zhì)、牙骨質(zhì)及齲壞牙體等， 保留牙本質(zhì)；(3)機(jī)械粉碎牙本質(zhì)，使之成為10-100目的顆粒；(4)將粉碎后的顆粒狀牙本質(zhì)按步驟(1)再次去除其軟組織及消毒；(5)放入5倍體積的1 1氯仿甲醛中浸泡30分鐘；(6)清潔流水漂洗4小時(shí)后放入5倍體積的0. 6M HCl中浸泡M小時(shí)；(7)無(wú)菌去離子水反復(fù)漂洗漂洗后獲得牙基質(zhì)。實(shí)施例3 牙基質(zhì)的制備(1)用加熱至40°C的50%次氯酸鈉消毒液浸泡哺乳動(dòng)物原牙原料并攪拌消化45 分鐘，以去除軟組織及消毒；(2)將已消毒的哺乳動(dòng)物原牙原料經(jīng)機(jī)械方法去除牙釉質(zhì)、牙骨質(zhì)及齲壞牙體等， 保留牙本質(zhì)；(3)機(jī)械粉碎牙本質(zhì)，使之成為10-100目的顆粒；(4)將粉碎后的顆粒狀牙本質(zhì)按步驟(1)再次去除其軟組織及消毒；(5)放入5倍體積的1 1氯仿甲醛中浸泡30分鐘；
(6)清潔流水漂洗4小時(shí)后放入5倍體積的0. 65M HCl中浸泡M小時(shí)；(7)無(wú)菌去離子水反復(fù)漂洗漂洗后獲得牙基質(zhì)。實(shí)施例4 牙基質(zhì)海綿劑的制備(1)將膠原蛋白溶于0. 乙酸溶液中，制成0. 1 3%膠原蛋白溶液，于 0. 2 2mM磷酸鹽緩沖液(pH7. 4 8. 0)中透析至中性；(2)在上述膠原蛋白溶液中，加入牙基質(zhì)，攪拌均勻；(3)邊攪拌邊加入一定量4% 6%的甲醛溶液，攪拌至產(chǎn)生大量均勻細(xì)致的氣泡為止；(4)于_80°C冷凍2天，凍干得到海綿狀材料；(5)切割，真空包裝，滅菌、滅病毒，制得牙基質(zhì)海綿劑成品。實(shí)施例5 牙基質(zhì)海綿劑的制備(1)將膠原蛋白溶于0. 乙酸溶液中，制成0. 1 3%膠原蛋白溶液，于 0. 2 2mM磷酸鹽緩沖液(pH7. 4 8. 0)中透析至中性；(2)在上述膠原蛋白溶液中，加入牙基質(zhì)，攪拌均勻；(3)邊攪拌邊加入一定量4% 6%的甲醛溶液，攪拌至產(chǎn)生大量均勻細(xì)致的氣泡為止；(4)于-20°C冷凍5天，凍干得到海綿狀材料；(5)切割，真空包裝，滅菌、滅病毒，制得牙基質(zhì)海綿劑成品。
權(quán)利要求
1.一種牙基質(zhì)海綿劑，其特征在于，該海綿劑包括80 99%所述海綿劑重量百分含量的的牙基質(zhì)，所述牙基質(zhì)交聯(lián)固定在膠原海綿基質(zhì)上。
2.如權(quán)利要求1所述一種牙基質(zhì)海綿劑，其特征在于，所述牙基質(zhì)為用哺乳動(dòng)物牙制備的牙基質(zhì)材料。
3.如權(quán)利要求1所述一種牙基質(zhì)海綿劑，其特征在于，所述牙基質(zhì)顆粒的目數(shù)為 10-100 目。
4.如權(quán)利要求1所述一種牙基質(zhì)海綿劑，其特征在于，所述膠原海綿基質(zhì)中含有1 8%所述海綿劑重量百分含量的膠原蛋白，所述膠原海綿基質(zhì)中所含牙基質(zhì)的目數(shù)為10-30 目。
5.如權(quán)利要求1所述一種牙基質(zhì)海綿劑，其特征在于，所述膠原海綿基質(zhì)中含有1 8%所述海綿劑重量百分含量的膠原蛋白，所述膠原海綿基質(zhì)中所含牙基質(zhì)的目數(shù)為30-60 目。
6.如權(quán)利要求1所述一種牙基質(zhì)海綿劑，其特征在于，所述膠原海綿基質(zhì)中含有 1 8%所述海綿劑重量百分含量的膠原蛋白，所述膠原海綿基質(zhì)中所含牙基質(zhì)的目數(shù)為 60-100 目。
7.如權(quán)利要求1所述一種牙基質(zhì)海綿劑，其特征在于，所述膠原海綿基質(zhì)中含有5 15%所述海綿劑重量百分含量的膠原蛋白；所述膠原海綿基質(zhì)中所含牙基質(zhì)的目數(shù)為 10-30 目。
8.如權(quán)利要求1所述一種牙基質(zhì)海綿劑，其特征在于，所述膠原海綿基質(zhì)中含有5 15%所述海綿劑重量百分含量的膠原蛋白；所述膠原海綿基質(zhì)中所含牙基質(zhì)的目數(shù)為 30-60 目。
9.如權(quán)利要求1所述一種牙基質(zhì)海綿劑，其特征在于，所述膠原海綿基質(zhì)中含有5 15%所述海綿劑重量百分含量的膠原蛋白；所述膠原海綿基質(zhì)中所含牙基質(zhì)的目數(shù)為 60-100 目。
10.如權(quán)利要求1所述一種牙基質(zhì)海綿劑，其特征在于，所述膠原海綿基質(zhì)中含有膠原蛋白10 20% ；所述膠原海綿基質(zhì)中所含牙基質(zhì)的目數(shù)為10-30目。
11.如權(quán)利要求1所述一種牙基質(zhì)海綿劑，其特征在于，所述膠原海綿基質(zhì)中含有膠原蛋白10 20% ；所述膠原海綿基質(zhì)中所含牙基質(zhì)的目數(shù)為30-60目。
12.如權(quán)利要求1所述一種牙基質(zhì)海綿劑，其特征在于，所述膠原海綿基質(zhì)中含有膠原蛋白10 20% ；所述膠原海綿基質(zhì)中所含牙基質(zhì)的目數(shù)為60-100目。
13.如權(quán)利要求1所述一種牙基質(zhì)海綿劑，其特征在于，所述牙基質(zhì)海綿中含有一種或多種促骨生長(zhǎng)因子。
14.一種牙基質(zhì)海綿劑，其制備方法為將膠原蛋白溶于0. 1 % 1 %的乙酸中，制成1 % 20 %的膠原蛋白溶液，加入80 % 99%的牙基質(zhì)材料，攪拌均勻，然后攪拌的同時(shí)加入4% 6%的甲醛或多聚甲醛溶液，當(dāng)產(chǎn)生大量均勻細(xì)致的氣泡是，于_80°C _20°C凍干，切割、真空包裝、滅菌，制的牙基質(zhì)材料海綿劑成品。
15.如權(quán)利要求14所述膠原蛋白，其特征在于，所用膠原蛋白為市售醫(yī)用膠原蛋白。
16.如權(quán)利要求14所述醛類(lèi)交聯(lián)劑為甲醛或多聚甲醛。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種牙基質(zhì)海綿劑及其制備方法。該海綿劑包括80～99％重量百分含量的牙基質(zhì)和1～20％膠原海綿基質(zhì)，所述牙骨基質(zhì)按照不同的含量比例經(jīng)交聯(lián)固定在膠原海綿上。該海綿劑能使骨基質(zhì)填充到骨缺損、骨不連、骨組織萎縮、骨折、骨愈合不良等病部位，從而發(fā)揮其誘導(dǎo)骨生成、促進(jìn)骨修復(fù)、促進(jìn)傷口收斂的作用。
文檔編號(hào)A61K38/39GK102309523SQ20111012945
公開(kāi)日2012年1月11日 申請(qǐng)日期2011年5月18日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月18日
發(fā)明者李佳楠 申請(qǐng)人:深圳市光明創(chuàng)博生物制品發(fā)展有限公司