專利名稱：太子參多糖在潤肺鎮(zhèn)咳中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于中藥領域，更具體涉及太子參多糖提取物在潤肺鎮(zhèn)咳中的應用。
背景技術：
由于社會的老齡化以及環(huán)境污染的加劇，呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)病率不斷上升?？人?是呼吸道感染、哮喘、慢性肺阻塞性疾病(COPD)、嗜酸粒細胞性支氣管炎(EB)和肺癌等疾 病的常見癥狀，每年全世界用于治療咳嗽的藥物社會經(jīng)濟開支高達幾十億美元，當前應用 最多的鎮(zhèn)咳藥物大部分是西藥，如磷酸可待因、右美沙芬、咳必清等。西藥止咳大多作用于 中樞神經(jīng)，鎮(zhèn)靜，便秘，惡心嘔吐等容易產(chǎn)生副作用；且臨床對病因不清的非特異性咳嗽治 療效果較差?？人苑滞飧锌人耘c內(nèi)傷咳嗽，均是病邪引起肺氣不清失于宣肅，迫氣上逆而作咳， 風寒襲肺、風熱犯肺、風燥傷肺、痰濕蘊肺、肝火犯肺、肺陰虧耗。中醫(yī)對咳嗽的治療，除直接 治肺外，從整體出發(fā)注意治脾、治肝、治腎等。外感咳嗽一般均忌斂澀留邪，當因勢利導，俟 肺氣宣暢則咳嗽自止；內(nèi)傷咳嗽應防宣散傷正，注意調(diào)理臟腑，顧護正氣?？人允侨梭w祛邪 外達的一種病理表現(xiàn)，治療決不能單純見咳止咳，必須按照不同的病因分別處理。中醫(yī)藥治療咳嗽有悠久的歷史，許多預防和治療咳嗽的中草藥和復方已經(jīng)應用了 幾千年，實踐表明在預防和治療咳嗽方面具有很好的臨床療效，這為我們從中尋找具有良 好藥效，副作用小，安全穩(wěn)定的藥物奠定了很好的臨床基礎。當今隨著天然藥物在全球應用 的不斷興起，從天然藥物中獲取活性化合物是當前新藥研究的重要方向。太子參為石竹科植物孩兒參/^ewiZo1SieBaria heterophylla (Miq. )Pax ex Pax et Hoffm.的干燥塊根。2010版《中國藥典》太子參味甘、微苦，性平；歸脾、肺經(jīng)。具有 益氣健脾，生津潤肺之功效；用于脾虛體倦，食欲不振，病后虛弱，氣陰不足，自汗口渴，肺燥 干咳；《本草再新》味甘，性溫，無毒；治氣虛肺燥，補脾土，消水腫，化痰止渴。《中藥志》甘 苦，微寒?！比敕巍⑵⒔?jīng)；治肺虛咳嗽，脾虛泄瀉?！蛾兾髦胁菟帯?補氣益血，健脾生津；治病后 體虛，肺虛咳嗽，脾虛腹瀉等。用藥配伍太子參配麥冬，補肺并潤肺養(yǎng)陰，用治肺陰虧虛的 肺虛咳嗽最宜。

發(fā)明內(nèi)容
基于太子參生津潤肺、治療肺燥干咳之功效，本發(fā)明的目的在于提供一種太子 參提取物在潤肺鎮(zhèn)咳中的應用，該方法提取的太子參多糖可潤肺鎮(zhèn)咳，因此闡明了太子參 生津潤肺、治療肺燥干咳之功效的物質(zhì)基礎。—種具有潤肺鎮(zhèn)咳作用的太子參提取物，是以由太子參中提取到的太子參多糖 為有效成分，具有潤肺鎮(zhèn)咳作用。所述提取、分離方法的具體步驟在于
1)太子參干燥藥材，加入8-10倍量的70-95%乙醇浸泡2h，置于加壓連續(xù)回流提取罐 中，提取罐油液溫度90-130°C，提取液溫度70-90°C，灌內(nèi)壓力0. 03 -0. 06MPa,回流提取3次，每次2小時；
2)上述乙醇提取后，藥材殘渣揮干乙醇再用7-10倍量蒸餾水提取3次，每次2小時，合 并提取液，濃縮濃縮至原體積的1/5—1/10，得到太子參粗多糖提取物。根據(jù)Sevag法將太 子參粗多糖提取物用適量的蒸餾水稀釋溶解，加入乙醇沉淀粗多糖，使乙醇濃度在65-85% 范圍內(nèi)，靜置過夜，離心，得到粗多糖沉淀物，將沉淀物用蒸餾水溶解，加入1/4一 1/6蒸餾 水體積的氯仿、與氯仿等體積的正丁醇，充分振搖5-10 min，靜置，離心出去中間的乳化層 (即蛋白沉淀物)，重復操作5次至無白色沉淀物，分離合并上層溶液，加入乙醇使其濃度在 在65-85%范圍內(nèi)，低溫靜置過夜，離心，得到太子參多糖提取物，將多糖提取物冷凍干燥， 稱重得到太子參多糖提取物。所述的潤肺鎮(zhèn)咳藥是以太子參多糖為該藥物的主要有效成分，在制備治療潤肺鎮(zhèn) 咳藥的應用。本發(fā)明的優(yōu)點在于
通過對太子參潤肺止咳活性的研究，制備具有潤肺止咳功效的多糖提取物，為其臨床 應用提供科學依據(jù)；其提取，分離技術的推廣及應用，為太子參深加工產(chǎn)品的研發(fā)奠定了基 石出。


圖1枸櫞酸噴霧誘導咳嗽模型中Medlab生物信號采集處理系統(tǒng)通過呼吸流量計記錄 不同給藥組豚鼠灌胃給藥后，在噴霧誘導咳嗽開始后60 120 s內(nèi)咳嗽變化情況一模型對 照組。曲線類型潮氣量(容積法)。圖2枸櫞酸噴霧誘導咳嗽模型中Medlab生物信號采集處理系統(tǒng)通過呼吸流量計 記錄不同給藥組豚鼠灌胃給藥后，在噴霧誘導咳嗽開始后60 120 s內(nèi)咳嗽變化情況一陽 性對照組磷酸可待因。曲線類型潮氣量(容積法)。圖3枸櫞酸噴霧誘導咳嗽模型中Medlab生物信號采集處理系統(tǒng)通過呼吸流量計 記錄不同給藥組豚鼠灌胃給藥后，在噴霧誘導咳嗽開始后60 120 s內(nèi)咳嗽變化情況一多 糖提取部位組。曲線類型潮氣量(容積法)。圖4空白模型對照(Vehicle control)，陽性對照磷酸可待因10 mg/kg(Codeine phosphate)，太子參多糖提取部位高、中、低劑量(100-400 mg/kg polysaccharides)，給藥 后45，90，120，150 min對枸櫞酸誘導的豚鼠咳嗽頻率變化的作用效果。統(tǒng)計數(shù)據(jù)以平均值 士標準偏差表示，*P<0.05，**p<0.01，*#p<0.001表示給藥后咳嗽次數(shù)變化同模型對照 組的比較(n=10)。
具體實施例方式一種太子參有效成分的提取、分離的具體步驟在于
1)太子參干燥藥材，加入8-10倍量的70-95%乙醇浸泡2h，置于加壓連續(xù)回流提取罐 中，提取罐油液溫度90-130°C，提取液溫度70-90°C，灌內(nèi)壓力0. 03 -0. 06MPa,回流提取 3次，每次2小時；
2)上述乙醇提取后，藥材殘渣揮干乙醇再用7-10倍量蒸餾水提取3次，每次2小時，合 并提取液，濃縮濃縮至原體積的1/5—1/10，得到太子參粗多糖提取物。根據(jù)Sevag法將太 子參粗多糖提取物用適量的蒸餾水稀釋溶解，加入乙醇沉淀粗多糖，使乙醇濃度在65-85%范圍內(nèi)，靜置過夜，離心，得到粗多糖沉淀物，將沉淀物用蒸餾水溶解，加入1/4一 1/6蒸餾 水體積的氯仿、與氯仿等體積的正丁醇，充分振搖5-10 min，靜置，離心出去中間的乳化層 (即蛋白沉淀物)，重復操作5次至無白色沉淀物，分離合并上層溶液，加入乙醇使其濃度在 在65-85%范圍內(nèi)，低溫靜置過夜，離心，得到太子參多糖提取物，將多糖提取物冷凍干燥， 稱重得到太子參多糖提取物。太子參提取物鎮(zhèn)咳藥效實驗 豚鼠咳嗽模型的復制
將體重250 300 g的豚鼠(批號skxk (滬)2007-0011,由上海市松江區(qū)松聯(lián)實驗動 物場提供)，雌雄兼用，于實驗前2天置于20 cm XlO cm XlO cm的透明有機密閉箱，適 應1 min后，用超聲霧化器噴霧17. 5%枸櫞酸2 min (霧化的顆粒大小為0. 9 μ m，霧化流 速0.6 ml/min)引咳，通過呼吸流量計連接到Meblab生理信號儀記錄豚鼠在7 min (從枸 櫞酸噴霧引咳開始計時)內(nèi)的咳嗽次數(shù)變化(豚鼠咳嗽和噴嚏的信號波形可以在生理儀上 明顯的區(qū)別開)，經(jīng)過訓練的實驗記錄人員同時以豚鼠咳嗽時的軀體伸縮運動變化和咳嗽 聲音為標準記錄豚鼠7 min咳嗽次數(shù)，每只豚鼠對應的咳嗽次數(shù)作為對照數(shù)據(jù)Ce?？人源?數(shù)在10至35次的豚鼠可用于下述實驗。數(shù)據(jù)記錄與統(tǒng)計分析
豚鼠在第一次誘導咳嗽初篩結束后第二天灌胃給藥，給藥后45 min分別誘導咳嗽采用 Medlab生物信號采集處理系統(tǒng)記錄，測試豚鼠給藥后的咳嗽次數(shù)變化，藥效評價指標以咳 嗽的百分抑制率表示，咳嗽百分抑制率= [(Cc-Ct)/Cc]X100%。實驗數(shù)據(jù)以統(tǒng)計平均數(shù)士 標準偏差表示，SPSS 16. 0軟件進行統(tǒng)計數(shù)據(jù)處理。1.太子參多糖提取物給藥前后藥效比較
豚鼠吸入枸櫞酸誘導咳嗽及給藥效果如圖1一3所示，咳嗽和呼氣反應被觀察記錄，同 時可以根據(jù)記錄的咳嗽波形大小變化來區(qū)分咳嗽和呼氣反應； 2.太子參多糖提取物鎮(zhèn)咳量效、時效關系研究
選取合格豚鼠50只，隨機分為5組，每組10只。太子參多糖活性部位高、中、低劑量3 組；陽性對照組(磷酸可待因10 mg/kg),模型對照組(給予同體積生理鹽水)，在第二次引 咳實驗前45 min分別灌胃給藥，分別測試記錄給藥后45，90，120，150 min豚鼠的咳嗽次數(shù) 變化情況；太子參粗多糖低劑量給藥，給藥后45，90，120，150 min的咳嗽％抑制率分 別為9. 01%, 1. 938%，20. 623%，12. 629% ；太子參粗多糖提取物中劑量給藥，給藥后45，90， 120，150 min的咳嗽%抑制率分別為18. 293%, 24. 707%, 30. 016%, 17. 693% ；太子參粗多糖 高劑量給藥，給藥后45，90，120，150 min的咳嗽％抑制率分別為25. 414%，31. 876%， 37. 515%，21. 934%。太子參多糖在給藥后120 min的鎮(zhèn)咳效果最強，高劑量給藥的咳嗽抑制 率％在給藥后120 min時達到37. 51 %，咳嗽抑制率％呈現(xiàn)明顯的劑量、時間依賴性。見 圖4
實施例1
一種太子參多糖提取的具體步驟在于
1)加入8倍量的95%乙醇，提取罐油液溫度90°C，提取液溫度70°C，灌內(nèi)壓力0.03 -MPa ；
2)上述乙醇提取后，藥材殘渣揮干乙醇再用7倍量蒸餾水提取3次，每次2小時，合并提取液，濃縮濃縮至原體積的1/5，得到太子參粗多糖提取物。3)加入乙醇沉淀粗多糖，使乙醇濃度為65%，靜置過夜，離心，得到粗多糖沉淀物， 將沉淀物用蒸餾水溶解，加入1/4蒸餾水體積的氯仿、與氯仿等體積的正丁醇，充分振搖5 min，靜置，除去蛋白沉淀物，重復操作5次至無白色沉淀物，分離合并上層溶液，加入乙醇 使其濃度為65%，低溫靜置過夜，離心，得到太子參多糖提取物。其余步驟同具體實施例中太子參多糖提取的具體步驟。實施例2
一種太子參多糖提取的具體步驟在于 1)加入10倍量的70%乙醇，提取罐油液溫度130°C，提取液溫度90°C，灌內(nèi)壓力 0.06MPa ；
2 )上述乙醇提取后，藥材殘渣揮干乙醇再用10倍量蒸餾水提取3次，每次2小時，合并 提取液，濃縮濃縮至原體積的1/10，得到太子參粗多糖提取物。3)加入乙醇沉淀粗多糖，使乙醇濃度為85%，靜置過夜，離心，得到粗多糖沉淀物， 將沉淀物用蒸餾水溶解，加入1/6蒸餾水體積的氯仿、與氯仿等體積的正丁醇，充分振搖10 min，靜置，除去蛋白沉淀物，重復操作5次至無白色沉淀物，分離合并上層溶液，加入乙醇 使其濃度為85%，低溫靜置過夜，離心，得到太子參多糖提取物。其余步驟同具體實施例中太子參多糖提取的具體步驟。實施例3
一種太子參多糖提取的具體步驟在于 1)加入9倍量的85%乙醇，提取罐油液溫度105°C，提取液溫度80°C，灌內(nèi)壓力 0.04MPa ；
2)上述乙醇提取后，藥材殘渣揮干乙醇再用8倍量蒸餾水提取3次，每次2小時，合并 提取液，濃縮濃縮至原體積的1/8，得到太子參粗多糖提取物。3)加入乙醇沉淀粗多糖，使乙醇濃度為80%，靜置過夜，離心，得到粗多糖沉淀物， 將沉淀物用蒸餾水溶解，加入1/5蒸餾水體積的氯仿、與氯仿等體積的正丁醇，充分振搖8 min，靜置，除去蛋白沉淀物，重復操作5次至無白色沉淀物，分離合并上層溶液，加入乙醇 使其濃度為80%，低溫靜置過夜，離心，得到太子參多糖提取物。其余步驟同具體實施例中太子參多糖提取的具體步驟。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例，凡依本發(fā)明申請專利范圍所做的均等變化與 修飾，皆應屬本發(fā)明的涵蓋范圍。
權利要求
一種具有潤肺鎮(zhèn)咳作用的太子參提取物，其特征在于以由太子參中提取到的太子參多糖為有效成分，具有潤肺鎮(zhèn)咳作用。
2.一種如權利要求1所述的太子參多糖，其主要特征在于提取、分離方法的具體步驟 在于1)太子參干燥藥材，加入8-10倍量的70-95%乙醇浸泡2h，置于加壓連續(xù)回流提取罐 中，提取罐油液溫度90-130°C，提取液溫度70-90°C，灌內(nèi)壓力0. 03 -0. 06MPa,回流提取 3次，每次2小時；2)上述乙醇提取后，藥材殘渣揮干乙醇再用7-10倍量蒸餾水提取3次，每次2小時，合 并提取液，濃縮濃縮至原體積的1/5—1/10，得到太子參粗多糖提取物。根據(jù)Sevag法將太 子參粗多糖提取物用適量的蒸餾水稀釋溶解，加入乙醇沉淀粗多糖，使乙醇濃度在65-85% 范圍內(nèi)，靜置過夜，離心，得到粗多糖沉淀物，將沉淀物用蒸餾水溶解，加入1/4一 1/6蒸餾 水體積的氯仿、與氯仿等體積的正丁醇，充分振搖5-10 min，靜置，離心除去蛋白沉淀物，重 復操作5次至無白色沉淀物，分離合并上層溶液，加入乙醇使其濃度在65-85%范圍內(nèi)，低溫 靜置過夜，離心，得到太子參多糖提取物，將多糖提取物冷凍干燥，稱重得到太子參多糖提 取物。
3.一種太子參多糖提取物在潤肺鎮(zhèn)咳中的應用，其主要特征在于所述的潤肺鎮(zhèn)咳藥 是以太子參多糖為該藥物的主要有效成分，在制備治療潤肺鎮(zhèn)咳藥的應用。
4.一種如權利要求3所述的太子參多糖提取物在潤肺鎮(zhèn)咳中的應用，其主要特征在 于該太子參提取物為權利要求2制備而得。全文摘要
太子參多糖在潤肺鎮(zhèn)咳中的應用。太子參藥材，用乙醇提取后的藥渣，再經(jīng)水提取、乙醇沉淀，氯仿和正丁醇除去蛋白類物質(zhì)，得太子參多糖提取物，具有潤肺鎮(zhèn)咳活性。
文檔編號A61K31/715GK101967204SQ20101052157
公開日2011年2月9日 申請日期2010年10月27日 優(yōu)先權日2010年10月27日
發(fā)明者龐文生, 林泗定, 林津晶, 胡娟, 陳建洪 申請人:福建中醫(yī)藥大學