專利名稱：：一種治療慢性前列腺炎的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：慢性前列腺炎屬中醫(yī)"淋證"、"勞淋"、"尿濁"范疇。歷代醫(yī)家對本病多有論述。1、中醫(yī)對病因病機的認(rèn)識淋證多由腎虛，膀胱濕熱，氣化失司，水道不利所致，是以小便頻急，淋漓不盡，尿道澀痛，小腹拘急，痛引腰腹為主要臨床表現(xiàn)的病證。歷代醫(yī)家對本病多有論述。淋之名始見于《內(nèi)經(jīng)》，《素問"六元正紀(jì)大論篇》稱之為"淋悶"。?！秲?nèi)經(jīng)》云"諸淋所發(fā)皆腎虛、膀胱濕熱。"指出了本病腎虛為本，膀胱濕熱為標(biāo)?！督饏T要略，消渴小便不利淋病脈證并治》曰"淋之為病，小便如粟狀，小腹弦急，痛引臍中。"是對淋證臨床表現(xiàn)的早期描述?！吨胁亟?jīng)》根據(jù)淋證臨床表現(xiàn)不同，提出了淋有冷、熱、氣、勞、膏、砂、虛、實八種，乃為淋證臨床分類的雛形。《諸病源候論》分為石、勞、氣、血、膏、寒、熱七種，而以"諸淋"統(tǒng)之。唐宋時期，淋證的分類更趨完美。唐代《千金方》、《外臺秘要》歸納為石、氣、膏、勞、熱五淋，宋代《濟生方》又分為氣、石、血、膏、勞淋五種。上述兩種五淋所指的內(nèi)容，其差異在于血淋與熱淋的有無，根據(jù)臨床實際，目前大多分為氣淋、血淋、熱淋、膏淋、石淋六種?！吨T病源候論淋病諸候》將本病的病位及發(fā)病機制概括為"諸淋者，由腎虛而膀胱熱故也。"張景岳在認(rèn)同"淋之初病，則無不由乎熱劇"的同時，提出"久服寒涼"，"淋久不止"有"中氣下陷和命門不固之證"，從而奠定了"凡熱者宜清，澀者宜利，下陷者宜升提，虛者宜補，陽氣不固者宜溫補命門"的施治原則。近代中醫(yī)藥研究，早期中醫(yī)對前列腺炎的病因多從濕熱論，治療也以清熱解毒利濕為主，但對于慢性前列腺炎，單純清利之法總體療效并不理想。隨著中醫(yī)學(xué)對病因病機認(rèn)識的深入，眾醫(yī)家逐漸重視血瘀在本病發(fā)病和病程中的作用。前列腺屬肝經(jīng)循行部位，濕熱蘊結(jié)，經(jīng)絡(luò)阻滯，則肝經(jīng)氣血瘀滯；又久病成瘀，因虛致瘀，亦致精室血脈瘀滯。2、中醫(yī)藥療法清利濕熱、活血化瘀法在慢性前列腺炎治療中廣為應(yīng)用，據(jù)統(tǒng)計其應(yīng)用率在78.59%以上。此外，還有以補腎溫陽法、滋補肝腎法、健脾益氣法為主結(jié)合清利濕熱之品、活血化瘀之藥。多以中醫(yī)辨證施治為基礎(chǔ)。中成藥主要有以前列回春膠囊、治療慢性前列腺炎，均取得一定的療效。3、中西醫(yī)結(jié)合治療多采用中醫(yī)藥治療，并結(jié)合常規(guī)西藥配合治療，如抗生素選用喹諾酮類或磺胺類藥物常規(guī)口服，同時口服谷維素，會陰部及小腹部疼痛者加服消炎痛片，尿頻者睡前口服普魯苯辛，尿急或尿不盡者配服鹽酸特拉唑嗪膠囊。結(jié)果顯示中西藥有良好的協(xié)同作用，療效滿意，無明顯毒副作用。4、其他療法采用針灸、推拿、氣功、理療、坐浴、敷臍療法。經(jīng)尿道注藥法、中藥湯劑保留灌腸和中藥栓劑塞肛療法等也取得較好的療效。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供一種治療慢性前列腺炎的藥物組合物，能清熱利濕，化瘀通絡(luò)，用于濕熱瘀阻之慢性前列腺炎，癥見小便淋漓澀痛等?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)所稱之慢性前列腺炎，祖國醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)中雖然無此名稱，但就其臨床所見癥狀和體征，近似于中醫(yī)學(xué)"淋證"、"尿濁"等的范疇。淋證多由腎虛，膀胱濕熱，氣化失司，水道不利所致，是以小便頻急，淋漓不盡，尿道澀痛，小腹拘急，痛引腰腹為主要臨床表現(xiàn)的病證。本研究針對其濕熱瘀絡(luò)證而設(shè)，本證病因病機，大都為素體先天不足，腎精不充；或老年腎虧，或久病傷腎，或房勞過度等，導(dǎo)致腎虛的病因，本證病因病機，大凡為以濕熱瘀絡(luò)為其病機核心。其病機特點為一方面飲食不節(jié)，醇酒厚味，助濕生熱，濕熱蘊結(jié)，流注下焦，此病之基礎(chǔ)；另一方面由于病久不愈，"久病入絡(luò)"、"久痛入絡(luò)"，且濕熱下注，易引發(fā)了氣血津液的不正常運行和輸布，濕熱瘀血交結(jié)，從而出現(xiàn)程度不同的虛實相兼的情況。還有一方面，勞欲過度，腎氣內(nèi)傷，正所謂"腎虛而膀胱熱也"的病理變化。因而以清熱利濕，化瘀通絡(luò)為基本治法。慢性前列腺炎屬中醫(yī)"淋證"、"勞淋"、"尿濁"范疇。常因感受濕熱之邪，日久不愈，反復(fù)發(fā)作，"久病入絡(luò)"，瘀阻絡(luò)脈，致濕熱淤血互結(jié)，發(fā)為本病。該方針對此病機而設(shè)。君用黃柏。黃柏，味苦、性寒、為清熱瀉火之佳品。即可解毒、又能利濕熱、養(yǎng)陰、降火，如《本草綱目》載其"清熱燥濕、瀉火除蒸、解毒療瘡"，善治熱淋、濕疹、瘙癢，現(xiàn)代研究證明有治療前列腺炎的作用，故為主藥。臣用苦參、王不留行?？鄥⑶鍩嵩餄瘛⑾x利尿，《本草正義》曰"苦參，大苦大寒，退熱泄降，蕩滌濕火，其功效與芩、連、龍膽皆相近，而苦參之苦愈甚，其燥尤烈，故能殺濕熱所生之蟲，較之芩、連力量益烈"。王不留行，性苦，味平。歸肝，胃經(jīng)。有活血通經(jīng)，利尿通淋的療效。主治多種淋證?！侗静菡x》曰"王不留行，惟熱結(jié)者為宜，《本經(jīng)》主金瘡止血，逐痛出剌；《別錄》止心煩鼻衄，癰疽惡瘡，皆清火活血之用。"由此可見，王不留行更適于濕熱日久，血絡(luò)瘀阻之病證。此二味清濕熱而化瘀濁，共為臣藥，助君藥清熱解毒，并能化瘀通淋。佐以茯苓、車前草、黃芪、金櫻子、牛膝。方中茯苓利水滲濕，健脾寧心。茯苓功能利水滲濕，而藥性平和，利水而不傷正氣，為利水滲濕要藥。凡小便不利、水濕停滯的癥候，不論偏于寒濕，或偏于濕熱，或?qū)儆谄⑻摑窬?，均可配合?yīng)用?！端幮哉摗分^之可治療"婦人熱淋。"車前草性味甘寒，具有利水、清熱、明目、祛痰的功效。主治淋病、尿血、小便不通等。《草性論》載曰"治尿血，能補五臟，明目，利小便，通五淋"。二藥與黃柏、苦參合用，可強化其清利濕熱之功效。金櫻子，性味酸澀平，具有固精縮尿的功效。《蜀本草》載"治脾泄下痢，止小便利，澀精氣。"方中用此意在固澀腎氣，乃固本之法，腎氣不固是濕熱下注的發(fā)病基礎(chǔ)，如中醫(yī)對淋證病機的認(rèn)識"腎虛而膀胱熱也。"黃芪味甘，氣微溫，有補氣固表利尿托毒的作用，乃補氣之圣藥，黃芪和金櫻子配伍，使脾氣充足而腎氣固縮，正氣存內(nèi)邪不可干也。且黃芪與王不留行配伍，可加強化瘀之力，蓋氣愈虛則血愈凝是也。此五味共為佐藥，佐助君臣滋補脾腎，解毒利尿。佐使牛膝。方中用此有二層意思，一者，補肝腎，強筋骨，活血通經(jīng)，與王不留行、黃芪配伍，重在活血化瘀。正如《藥性論》所言"治陰痿，補腎填精，逐惡血流結(jié)，助十二經(jīng)脈"。二者，能引諸藥下行，利尿通淋。如《本草衍義補遺》曰之"能引諸藥下行。"《綱目》曰"治五淋尿血。"《本草經(jīng)疏》也道之"牛膝，走而能補，性善下行。"一藥多能，故為佐使之要藥。諸藥合用，收清熱利濕，化瘀通絡(luò)之效。全方清熱之中兼以養(yǎng)正氣，顧脾腎，濕熱得清而無耗血之慮；化瘀而通絡(luò)，無傷正氣，使血脈和而無留瘀之弊；扶正以利于祛邪，祛邪而不傷正，標(biāo)本兼顧，以達(dá)治愈前列腺炎之目的。本發(fā)明藥物級分的用量也是經(jīng)過發(fā)明人經(jīng)過大量摸索總結(jié)得出的，各組分用量為在下述重量范圍內(nèi)都具有較好療效。黃柏1525份，苦參1323份，王不留行2535份，茯苳1020份，車前草1020份，黃芪1020份，金櫻子1020份，牛膝1020份。優(yōu)選為黃柏20份，苦參18份，王不留行30份，茯苓15份，車前草15份，黃芪15份，金櫻子15份，牛膝15份。本發(fā)明藥物可以采用中藥制劑的常規(guī)方法制備成任何常規(guī)內(nèi)服制劑。本發(fā)明藥物活性組分的制備方法如下(—)以上八味藥材去雜，其中茯苓及苦參兩味藥材粉碎成10目粗粉，其余六味藥材粉碎成直徑小于lcm的粗粒，備用；(二)取黃柏，牛膝加57倍量6070%乙醇提取23次，每次12小時，合并醇提液，濾過，藥渣備用，醇濾液減壓回收乙醇至無醇味，備用；(三)藥渣與黃芪，車前草，金櫻子，王不留行四味藥材加水煎煮23次，每次12小時，每次加水量為藥材量的79倍，合并煎液，濾過，濾液與上述醇提浸膏液合并，濃縮至6(TC時測、相對密度1.251.30，加入粉碎為粗粉的茯苓及苦參藥材，拌勻，以607(TC，0.09MPa減壓干燥，粉碎成120目細(xì)粉。優(yōu)選為(—)以上八味藥材去雜，其中茯苓及苦參兩味藥材粉碎成IO目粗粉，其余六味藥材粉碎成直徑小于lcm的粗粒，備用；(二)取黃柏，牛膝加6倍量65%乙醇提取三次，每次1.5小時，合并醇提液，濾過，藥渣備用，醇濾液減壓回收乙醇至無醇味，備用；(三)藥渣與黃芪，車前草，金櫻子，王不留行四味藥材加水煎煮三次，每次1小時，每次加水量為藥材量的8倍，合并煎液，濾過，濾液與上述醇提浸膏液合并，濃縮至60°C時測、相對密度1.251.30，加入粉碎為粗粉的茯苓及苦參藥材，拌勻，以6070°C，0.09MPa減壓干燥，粉碎成120目細(xì)粉。本發(fā)明藥物的活性組分可以加入制備不同劑型時所需的各種常規(guī)輔料，如崩解齊U、潤滑齊U、粘合劑等以常規(guī)的中藥制劑方法制備成任何一種常用口服劑型，如顆粒齊U、丸劑、散劑、片劑、膠囊劑、口服液等。本發(fā)明是根據(jù)中醫(yī)民間驗方，并根據(jù)20多年的臨床實踐經(jīng)驗，綜合古今文獻(xiàn)報道，精心發(fā)掘的，所選劑型濃縮丸、顆粒劑、片劑、膠囊等，既體現(xiàn)了現(xiàn)代制藥技術(shù)的先進性，又保持了傳統(tǒng)湯劑的優(yōu)點。與傳統(tǒng)劑型相比，體積小、服用量小、攜帶方便，不添加任何防腐劑，保持中藥的天然特色，同時由于其在胃腸道內(nèi)緩慢崩解，逐漸釋放藥物，符合慢病緩治的原則。具有清熱化濕，化瘀通絡(luò)作用的方劑。用藥方法本制劑，每次15丸，每日3次，口服給藥。具體實施例方式以下通過實驗例來進一步闡述本發(fā)明藥物的有益效果。這些實驗例包括本發(fā)明的藥效學(xué)實驗。1.試驗材料1.1動物Wistar大鼠，體重160_260g(每次實驗動物體重±15g)，雄性，由吉林大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號SCXK-(吉)2003-0007;昆明種小鼠，體重18-22g，雄性，購自長春生物制品研究所，許可證號SCXK(吉)-2006-0001。自由攝食飲水。1.2藥物慢性前列腺炎的藥物組合物，由長春中醫(yī)藥大學(xué)提供，批號070803;前列泰膠囊，陜西東泰制藥有限公司，規(guī)格0.44g/粒，批號070503、8D01。其他所用試劑均為市售。2.試驗方法及結(jié)果2.1抗炎作用2.1.1對大鼠角叉菜膠性足腫脹的影響取雄性大鼠50只，隨機分為五組對照組，1.5g/kg陽性藥組，2、1、0.5g/kg慢性前列腺炎的藥物組合物三個給藥組，共五組。連續(xù)給藥10天，于末次給藥1小時后于大鼠右后足腱膜下注入O.05%角叉菜膠0.15ml/只，然后于注射后1、2、3、4、5、6小時測其足腫脹(先于注射前測正常大鼠足周長)，以于正常足值之差作為腫脹度。結(jié)果見表1。表l.對大鼠角叉菜膠性組腫脹的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>與對照組比較氺p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。x±SD以下各表同。從表1可知，慢性前列腺炎的藥物組合物對大鼠角叉膠性足腫脹有非常明顯的抑制作用，2g/kg、lg/kg、0.5g/kg慢性前列腺炎的藥物組合物的抑制作用分別可持續(xù)4、3、1小時。2.1.2對小鼠瓊脂肉芽腫形成的影響取雄性小鼠50只，隨機分為五組對照組，2.2g/kg陽性藥組，3、1.5、0.75g/kg慢性前列腺炎的藥物組合物三個給藥組，共五組。實驗前將小鼠固定、用特制鋼圈套在背部皮膚上，皮下注射2%瓊脂0.2ml/只，注射同時開始灌胃藥物或等體積水，連續(xù)10天，末次給藥1小時后處死小鼠、仔細(xì)剝離肉芽腫稱濕重(mg)。結(jié)果見表2。表2.對小鼠瓊脂肉芽腫的影響組另lj劑量(g/kg)肉芽濕重(g)抑制率(％)對照組0.171±0.032前列泰2.20.142±0.026*16.96組合物3.00.136±0.020**20.47組合物1.50.140±0.021*18.13組合物0.750.149±0.02512.86從表2知，慢性前列腺炎的藥物組合物高中劑量可明顯抑制小鼠瓊脂肉芽腫的形成。2.1.3對二甲苯所致小鼠耳水腫的影響取雄性小鼠50只，隨機分為對照組，2.2g/kg陽性藥組，3、1.5、0.75g/kg慢性前列腺炎的藥物組合物三個給藥組，共五組，每組10只，每天給藥1次，連續(xù)10d，于末次給藥40min后，與小鼠左耳涂二甲苯20iil，20min后處死小鼠，利用9mm鐵沖下動物左右耳，以動物左右耳差作為腫脹度，進行"t"檢驗。結(jié)果見表3。表3.對二甲苯所致小鼠耳水腫的影響組另IJ劑量(g/kg)耳片腫脹度(mg)抑制率(％)對照組15.30±2.75前歹!J泰2.24.80±1.31*68.63組合物3.03.10±1.28*79.74組合物1.53.80±1.55*75.16組合物0.753.90±2.23*74.51結(jié)果表明，慢性前列腺炎的藥物組合物對二甲苯所致小鼠耳水腫均有明顯的抑制作用。2.2對大鼠急慢性前列腺炎的影響2.2.1對角叉菜膠所致大鼠非菌性前列腺炎的影響取健康雄性大鼠60只，體重為220-240g，隨機分為空白組、模型組、2.2g/kg陽性藥組、2g/kg慢性前列腺炎的藥物組合物丸組、lg/kg慢性前列腺炎的藥物組合物組、0.5g/kg慢性前列腺炎的藥物組合物組，共六組。正常對照組和模型組灌服等容積日常用水，共給予IO天，第九天給藥后1小時，動物用30mg/kg、10ml/kg戊巴比妥鈉麻醉后，無菌條件下開腹，于前列腺腹葉內(nèi)注入1%角叉菜膠生理鹽水溶液0.lml/葉，正常對照組注射等量生理鹽水，縫合后常規(guī)消毒。給予角叉菜膠24小時后(末次給藥后lh)，處死動物，取出前列腺稱重，計算臟器指數(shù)。另外，取一葉前列腺浸于lml生理鹽水中并用剪刀將其剪破，用以檢測白細(xì)胞數(shù)及卵磷脂小體密度；另一葉前列腺浸于10%福爾馬林中進行組織學(xué)檢查。見表4、5及附錄1。表4.對角叉菜膠所致前列腺炎大鼠組織學(xué)改變的影響(x士s，n=10)7間質(zhì)內(nèi)炎細(xì)胞纖維蛋白滲出間質(zhì)水腫組別正常組模型組陽性藥組高劑量組中劑量組小劑量組03.0±0.02.3±0.8*2.1±0.8*2.5±0.5*2.5±0.7*03.0±0.02.5±0.7*2.2±0.8**2.4±0.7*2.5±0.7*03.0±0.02.4±0.7*2.1±0.9**2.3±0.8*2.6±0.5*注①腔內(nèi)或間質(zhì)內(nèi)充滿大量炎細(xì)胞為3級，腔內(nèi)或間質(zhì)內(nèi)少部分炎細(xì)胞為2級，腔內(nèi)或間質(zhì)內(nèi)散在少許炎細(xì)胞為1級。腔內(nèi)或間質(zhì)內(nèi)無或偶見炎細(xì)胞為0級。②間質(zhì)內(nèi)成纖維細(xì)胞較多為3級，間質(zhì)內(nèi)成纖維細(xì)胞少量為2級，間質(zhì)內(nèi)成纖維細(xì)胞偶見為1級，未見間質(zhì)內(nèi)成纖維細(xì)胞未見為0級。③間質(zhì)水腫明顯為3級，間質(zhì)水腫中度為2級，間質(zhì)水腫輕度為1級。間質(zhì)無水腫為0級。④表示X士SD，結(jié)果統(tǒng)計為秩核檢驗。大體解剖觀察對照組大鼠前列腺組織柔軟、紅潤有光澤。模型組大鼠前列腺組織與周圍組織有不同程度的粘連、光澤暗淡。陽性藥組及慢性前列腺炎的藥物組合物組前列腺組織與周圍組織的粘連減輕，組織表面光澤基本正常。表5.對角叉菜膠所致大鼠非菌性前列腺炎的影響組別劑量(g/kg)白細(xì)胞總數(shù)(10Vml)卵磷脂小體(/ml)前列腺臟器指數(shù)(g/00g體重)對照組66.6±23.44***232.4±43.0***0.117±0.028**模型組152.6±28.3169.1±35.90.170±0.042前列泰1.5127.1±21.3*195.7±34.40.136±0.026*組合物2.072.8±37.4*林207.5±23.3*0.118±0.023**組合物1.088.5±25.9***197.1±19.7*0.135±0.036*組合物0.5118.2±27.9175.8±29.20.143±0.023表5提示，與模型組比較，組合物低、中、高3個劑量組與陽性對照組均可明顯減少前列腺液中的白細(xì)胞總數(shù)，增加卵磷脂小體密度，以2、lg/kg劑量組作用最強。2.2.2對角叉菜膠所致小鼠非菌性前列腺炎的影響取健康雄性小鼠60只，體重為19-22g，隨機分為空白組、模型組、2.2g/kg陽性藥組、3g/kg慢性前列腺炎的藥物組合物組、1.5g/kg慢性前列腺炎的藥物組合物組、0.7g/kg慢性前列腺炎的藥物組合物，共六組。正常對照組和模型組灌服等常水，共給予10天，末次給藥后1小時，動物用50mg/kg、10ml/kg戊巴比妥鈉麻醉后，無菌條件下開腹，于前列腺腹葉內(nèi)注入1%角叉菜膠生理鹽水溶液0.02m1/只，正常對照組注射等量生理鹽水，縫合后常規(guī)消毒。給予角叉菜膠3小時后處死動物，取出前列腺稱重，計算臟器系數(shù)。從表6可知，本品對角叉菜膠引起小鼠非菌性前列腺炎的前列腺腫大有明顯的抑制作用。表6對角叉菜膠所致小鼠前列腺炎的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>2.2.3對消痔靈所致大鼠纖維增生性前列腺炎的影響取SD雄性大鼠60只，分組見表7，隨機分為6組，每組10只。30mg/kg、10ml/kg戊巴比妥鈉麻醉后，在無菌條件下取下腹部正中切口約1cm直達(dá)腹腔，提出膀胱及兩側(cè)精囊，暴露附屬于精囊內(nèi)側(cè)的前列腺背葉，再將25%消痔靈注射液0.2mL分別注入前列腺雙側(cè)背葉(0.lml/葉)，然后縫合肌肉，皮膚。手術(shù)7天后開始給藥(連續(xù)28d)，第27天給藥后收取大鼠6小時的尿液，記錄體積，末次給藥后lh，斷頭處死大鼠，解剖，肉眼觀察前列腺病變狀態(tài)，取出前列腺稱重，計算臟器系數(shù)。前列腺組織浸于10%福爾馬林中進行組織學(xué)檢查。見表7、8及附錄2。表7.對水負(fù)荷消痔靈所致纖維增生性前列腺炎大鼠尿量的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表8.對消痔靈所致大鼠前列腺纖維增生性炎癥的影響組別劑量(g/kg)纖維母細(xì)胞增生慢性炎細(xì)胞浸潤前列腺臟器指數(shù)(級)(級)(g/00g體重)對照組0*0*0.131±0.029*模型組2.80±0.422.30±0.820.183±0.065前列泰1.52.40±0.521.40±0.49*0.143±0.026組合物2.01.20±0.42氺*承0.90±0.57**0.135±0.017*組合物1.01.70±0.74氺*1.00±0.52承*.0.138±0.015組合物0.52.00±0.82*1.60±0.700.141±0.017注①間質(zhì)內(nèi)炎細(xì)胞浸潤較多為3級，間質(zhì)內(nèi)炎細(xì)胞多為2級，間質(zhì)內(nèi)炎細(xì)胞浸潤較少為1級。間質(zhì)內(nèi)無或偶見炎細(xì)胞浸潤為0級。②間質(zhì)纖維組織增生較多為3級，間質(zhì)纖維組織增生多為2級，間質(zhì)纖維組織增生較少為1級，間質(zhì)纖維組織無增生為0級。③表示X士SD，結(jié)果統(tǒng)計為秩核檢驗。2.2.4對大腸桿菌所致大鼠細(xì)菌性前列腺炎的影響雄性SD大鼠，體重230-260g，隨機分為6組，正常組與模型組灌胃給予常水，陽性藥組灌胃給予前列泰膠囊1.5g/kg，受試藥組給予慢性前列腺炎的藥物組合物2、1、0.5g/kg，連續(xù)IO天，在第7天給藥后1小時，戊巴比妥鈉30mg/kg、10ml/kg麻醉后，在無菌條件下，除正常組外，各鼠前列腺背葉內(nèi)注入5X107個/ml大腸桿菌生理鹽水溶液0.lml/葉，正常組大鼠前列腺背葉內(nèi)注入無菌生理鹽水，縫合。72小時后，處死大鼠，同角叉菜膠試驗方法稱取前列腺濕重，檢測前列腺液中白細(xì)胞數(shù)和卵磷脂小體密度，并取部分大鼠前列腺組織進行組織學(xué)檢查。結(jié)果見表9、10及附錄3。從表8及附錄3見，模型組前列腺組織出現(xiàn)明顯的化膿性炎癥，腺體結(jié)構(gòu)出現(xiàn)較明顯的破壞，間質(zhì)炎癥反應(yīng)也較明顯，并可見成纖維細(xì)胞增生，模型成功。陽性藥物組及各給藥組前列腺炎癥程度均有不同程度的減輕，其中以高劑量組效果最明顯，中劑量組病變程度與陽性藥物組相近，而低劑量組的作用效果不甚明顯。結(jié)果說明該藥物對大腸桿菌所致的前列腺炎有一定的保護作用。表9.對大腸桿菌所致前列腺炎大鼠組織學(xué)改變的影響x±s，n=10)10<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注①腔內(nèi)或間質(zhì)內(nèi)充滿大量炎細(xì)胞用3級表示，腔內(nèi)或間質(zhì)內(nèi)少部分炎細(xì)胞用2級表示，腔內(nèi)或間質(zhì)內(nèi)散在少許炎細(xì)胞用l級表示。腔內(nèi)或間質(zhì)內(nèi)無或偶見炎細(xì)胞用o級表示。②間質(zhì)內(nèi)成纖維細(xì)胞較多用3級表示，間質(zhì)內(nèi)成纖維細(xì)胞少量用2級表示，間質(zhì)內(nèi)成纖維細(xì)胞偶見用1級表示，未見間質(zhì)內(nèi)成纖維細(xì)胞未見用0級表示。③間質(zhì)水腫明顯用3級表示，間質(zhì)水腫中度用2級表示，間質(zhì)水腫輕度用1級表示。間質(zhì)無水腫用o級表示。④表示X士SD，結(jié)果統(tǒng)計為秩核檢驗。表10對大腸桿菌所致大鼠細(xì)菌性前列腺炎的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表9的數(shù)據(jù)充分顯示了，慢性前列腺炎的藥物組合物對細(xì)菌性前列腺炎有明顯的預(yù)防及治療作用，2g/kg組尤為明顯。3.對免疫功能的影響3.1小鼠單核細(xì)胞巨噬系統(tǒng)吞噬功能的影響取雄性小鼠50只，隨機分為對照組，2.2g/kg陽性藥組，3、1.5、0.75g/kg慢性前列腺炎的藥物組合物三個給藥組，共五組。每天灌胃給藥一次，連續(xù)給藥10d，末次給藥lh后，于小鼠尾靜脈注射墨汁(10ml/kg，中華墨汁生理鹽水=1:5)，分別于2，15min由眼眶靜脈取血0.05ml，加入5ml0.1%NaHC03溶液中，利用750型分光光度計于650nm處比色，并剖取肝及脾稱重，計算a值。結(jié)果見表ll。3.2小鼠溶血素含量的影響取小鼠50只，按表9分組，連續(xù)給藥10d，參照文獻(xiàn)[1]法，給藥第四天每鼠腹腔注射0.5%雞紅細(xì)胞0.2ml，免疫后第7d眼眶取血，離心得血清，取生理鹽水稀釋100倍血清lml與0.5ml5%雞紅細(xì)胞混合，在冰水中加入1%豚鼠血清0.5ml，37t:保溫30min，(TC終止反應(yīng)，上清液于750型分光光度計540nm比色，結(jié)果見表11。表11表明，慢性前列腺炎的藥物組合物對小鼠單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬功能有明顯的改善作用，并可提高小鼠溶血素的含量，但無統(tǒng)計意義。表11對小鼠免疫功能的影響組別劑量(g/kg)吞噬指數(shù)(a)溶血素含量(OD)對照組3.53±0.490.29±0.12前列泰2.24.04±0.54*0.37±0.06組合物3.04.41±0.88*0.40±0.10*組合物1.54.03±0.52*0.38±0.06*組合物0.753.67±0.310.33±0.064.對血瘀大鼠血液流變學(xué)的影響取180210g雄性大鼠60只，隨機分為假手術(shù)組、模型組、1.5g/kg陽性藥組、2、1、0.5g/kg慢性前列腺炎的藥物組合物三個給藥組(共六組)，每組10只，每天給藥1次，連續(xù)10天。dl2給藥后30min皮下注射(S.C)O.1%鹽酸腎上腺素0.lml/只，30min后讓大鼠冰浴5min，dl3給藥lh后再讓大鼠冰浴5min，dl4給藥后30min皮下注射(S.C)O.1%鹽酸腎上腺素0.lml/只，d15給藥lh后處死大鼠。由腹主動脈取血利用全自動血液流變快速測定儀檢查其血流變。結(jié)果見表12。12<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>由表12知，對冰浴結(jié)合皮下注射鹽酸腎上腺素造成血瘀的大鼠的血液流變學(xué)指標(biāo)有一定的改善作用，2g/kg慢性前列腺炎的藥物組合物可有效的改善血瘀大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)。5.對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響取雄性小鼠50只，隨機分為對照組，2.2g/kg陽性藥組，3、1.5、0.75g/kg慢性前列腺炎的藥物組合物三個給藥組，共五組。每天灌胃給藥一次，連續(xù)給藥10d，末次給藥45min后，腹腔注射(ip)O.9%醋酸0.2ml/只，記錄其15min內(nèi)小鼠扭體次數(shù)。結(jié)果見表13。由表13可見，3、1.5g/kg本品即可可明顯減少小白鼠扭體次數(shù)。表13對小鼠醋酸扭體反應(yīng)的影響組另lj劑量(g/kg)扭體次數(shù)對照組15.7±2.7前列泰2.213.0±2,4*組合物3.012.8±2.5*組合物1.513.3±2.3*組合物0.7514.2±2.7結(jié)論本發(fā)明具有清利濕熱、行氣導(dǎo)滯、行瘀散結(jié)、溫陽固攝、滋腎養(yǎng)陰之功效，用于治療急慢性前列腺炎。結(jié)合前列腺炎的臨床表現(xiàn)，我們從本發(fā)明對非菌性、細(xì)菌性、纖維增生性前列腺炎動物模型的預(yù)防及治療作用進行了研究，試驗結(jié)果顯示，本發(fā)明(2、1、0.5g/kg)，對角叉菜膠及大腸桿菌所致前列腺炎大鼠前列腺液中白細(xì)胞數(shù)目升高及卵磷脂小體密度的降低均有明顯的抑制作用，并能減輕大鼠前列腺腔大小不一、炎細(xì)胞浸潤和間質(zhì)水腫的程度沐發(fā)明(2、lg/kg)作用顯著。本發(fā)明(2、1、0.5g/kg)，可抑制消痔靈所致慢性前列腺炎大鼠腺體的增生和肥大，明顯減輕慢性炎細(xì)胞浸潤，對纖維組織增生呈抑制趨勢，也可明顯增加慢性前列腺大鼠的尿量。建立大鼠角叉菜膠性足腫脹、小鼠瓊脂肉芽腫形成及小鼠耳水腫三個炎癥模型，用來研究本發(fā)明對炎癥的紅、腫、肉芽組織增生的影響。試驗結(jié)果有力地闡明了本發(fā)明對炎癥不同階段均有顯著的抑制作用，而且抗炎作用優(yōu)于陽性藥癃閉舒膠囊。試驗結(jié)果還證明了，本發(fā)明(2g/kg)，對冰浴結(jié)合皮下注射鹽酸腎上腺素造成血瘀的大鼠的血液流變學(xué)指標(biāo)有一定的改善作用，對全血粘度的作用尤為明顯，同時對小鼠的體液免疫功能有明顯的改善作用。此外本發(fā)明(3、1.5g/kg)，對醋酸引起的小鼠扭體也有一定的抑制作用.本試驗結(jié)果充分證明了本品對試驗性菌性及非菌性急慢性前列腺炎具有預(yù)防及治療作用。2.急性毒性試驗2.1按20g/kg(0.5g/ml、50X)最大給藥劑量40ml/kg，24h內(nèi)灌胃給予空腹小鼠本制劑三次，終劑量為60g/kg。2.2相當(dāng)于臨床成人每日用量的400倍(成人均體重為60kg)。2.3—日內(nèi)最大給藥劑量為60g/kg2.4本品對動物體重?zé)o明顯的影響2.5表明灌胃給藥未產(chǎn)生急性毒性，臨床用藥安全。143.長期毒性試驗按30ml/kg每天l次連續(xù)灌胃給予雄性大鼠10.8、5.4、2.7g/kg本制劑26周。觀察大鼠外觀、行為、分泌物、糞便、攝食、飲水狀況及體重增長情況，分別于給藥后12、26周及恢復(fù)期，對照組及給藥組各取10只大鼠斷頭處死，取血檢查血液學(xué)、血液生化學(xué)、凝血功能等各項指標(biāo)，并進行尸檢，對主要臟器稱濕重及多種臟器組織病理學(xué)檢查。經(jīng)與對照組比較，灌胃給藥后，各劑量組大鼠毛發(fā)有光澤、活動活潑、外觀正常、攝食、飲水、糞便、分泌物等均未見異常，大鼠體重增長與對照組比較也無差異；血液學(xué)、血液生化學(xué)、凝血功能及臟器組織病理學(xué)檢查等均未見改變。大鼠10.8g/kg/日本制劑約相當(dāng)于人每日用量的72倍(按人均體重60公斤計算)、藥效學(xué)有效劑量的10.8倍。通過對各組織器官的病理形態(tài)學(xué)觀察，3個月給藥組、6個月給藥組、恢復(fù)期組大鼠所檢組織器官形態(tài)結(jié)構(gòu)與正常對照組無差別，未見明顯的規(guī)律性的病理性改變，說明該藥對大鼠各臟器沒有明顯毒性作用。本試驗結(jié)果顯示本品與對照組比較在大劑量長期用藥的情況下對動物未見不良影響。實施例1本發(fā)明藥物片劑的制備黃柏300g，苦參260g，王不留行500g，茯苳200g，車前草200g，黃芪200g，金櫻子200g，牛膝200g。本發(fā)明藥物活性組分的制備方法如下(—)以上八味藥材去雜，其中茯苓及苦參兩味藥材粉碎成IO目粗粉，其余六味藥材粉碎成直徑小于lcm的粗粒，備用；(二)取黃柏，牛膝加5倍量60%乙醇提取3次，每次1小時，合并醇提液，濾過，藥渣備用，醇濾液減壓回收乙醇至無醇味，備用；(三)藥渣與黃芪，車前草，金櫻子，王不留行四味藥材加水煎煮3次，每次1小時，每次加水量為藥材量的7倍，合并煎液，濾過，濾液與上述醇提浸膏液合并，濃縮至6(TC時測相對密度1.251.30，加入粉碎為粗粉的茯苓及苦參藥材，拌勻，以60°C，0.09MPa減壓干燥，粉碎成120目細(xì)粉。(四)加入制備片劑的常規(guī)輔料，壓片。實施例2本發(fā)明藥物濃縮丸的制備黃柏400g，苦參360g，王不留行600g，茯苓300g，車前草300g，黃芪300g，金櫻子300g，牛膝300g。(—)以上八味藥材去雜，其中茯苓及苦參兩味藥材粉碎成IO目粗粉，其余六味藥材粉碎成直徑小于lcm的粗粒，備用；(二)取黃柏，牛膝加6倍量65%乙醇提取3次，每次1.5小時，合并醇提液，濾過，藥渣備用，醇濾液減壓回收乙醇至無醇味，備用；(三)藥渣與黃芪，車前草，金櫻子，王不留行四味藥材加水煎煮3次，每次1小時，每次加水量為藥材量的8倍，合并煎液，濾過，濾液與上述醇提浸膏液合并，濃縮至6(TC時測相對密度1.251.30，加入粉碎為粗粉的茯苓及苦參藥材，拌勻，以65°C，0.09MPa減壓干燥，粉碎成120目細(xì)粉，(四)以水泛丸，制得濃縮丸lOOOg，每丸O.2g。實施例3本發(fā)明膠囊劑的制備黃柏500g，苦參460g，王不留行700g，茯苳400g，車前草400g，黃芪400g，金櫻子400g，牛膝400g。(—)以上八味藥材去雜，其中茯苓及苦參兩味藥材粉碎成IO目粗粉，其余六味藥材粉碎成直徑小于1cm的粗粒，備用；(二)取黃柏，牛膝加7倍量70%乙醇提取2次，每次2小時，合并醇提液，濾過，藥渣備用，醇濾液減壓回收乙醇至無醇味，備用；(三)藥渣與黃芪，車前草，金櫻子，王不留行四味藥材加水煎煮2次，每次2小時，每次加水量為藥材量的9倍，合并煎液，濾過，濾液與上述醇提浸膏液合并，濃縮至6(TC時測、相對密度1.251.30，加入粉碎為粗粉的茯苓及苦參藥材，拌勻，以7(TC，0.09MPa減壓干燥，粉碎成120目細(xì)粉。(四)加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料，裝膠囊。權(quán)利要求一種治療慢性前列腺炎的藥物組合物，其特征在于它是由下列重量份數(shù)比的原料藥制成的黃柏15～25份，苦參13～23份，王不留行25～35份，茯苓10～20份，車前草10～20份，黃芪10～20份，金櫻子10～20份，牛膝10～20份。2.—種治療慢性前列腺炎的藥物組合物，其特征在于它是由下列重量份數(shù)比的原料藥制成的黃柏20份，苦參18份，王不留行30份，茯苓15份，車前草15份，黃芪15份，金櫻子15份，牛膝15份。3.如權(quán)利要求1或2所述的治療慢性前列腺炎的藥物組合物的制備方法，其特征在于包括下列步驟(一)以上八味藥材去雜，其中茯苓及苦參兩味藥材粉碎成IO目粗粉，其余六味藥材粉碎成直徑小于lcm的粗粒，備用；(二)取黃柏，牛膝加57倍量6070%乙醇提取23次，每次12小時，合并醇提液，濾過，藥渣備用，醇濾液減壓回收乙醇至無醇味，備用；(三)藥渣與黃芪，車前草，金櫻子，王不留行四味藥材加水煎煮23次，每次12小時，每次加水量為藥材量的79倍，合并煎液，濾過，濾液與上述醇提浸膏液合并，濃縮至6(TC時測、相對密度1.251.30，加入粉碎為粗粉的茯苓及苦參藥材，拌勻，以6070°C，0.09MPa減壓干燥，粉碎成120目細(xì)粉。4.如權(quán)利要求3所述的治療慢性前列腺炎的藥物組合物的制備方法，其特征在于包括下列步驟(一)以上八味藥材去雜，其中茯苓及苦參兩味藥材粉碎成IO目粗粉，其余六味藥材粉碎成直徑小于lcm的粗粒，備用；(二)取黃柏，牛膝加6倍量65%乙醇提取3次，每次1.5小時，合并醇提液，濾過，藥渣備用，醇濾液減壓回收乙醇至無醇味，備用；(三)藥渣與黃芪，車前草，金櫻子，王不留行四味藥材加水煎煮3次，每次1.0小時，每次加水量為藥材量的8倍，合并煎液，濾過，濾液與上述醇提浸膏液合并，濃縮至6(TC測、相對密度1.251.30，加入粉碎為粗粉的茯苓及苦參藥材，拌勻，以65°C，0.09MPa減壓干燥，粉碎成120目細(xì)粉。全文摘要本發(fā)明涉及一種治療慢性前列腺炎的藥物組合物，屬于中藥領(lǐng)域。它是由下列重量份數(shù)比的原料藥制成的黃柏15～25份，苦參13～23份，王不留行25～35份，茯苓10～20份，車前草10～20份，黃芪10～20份，金櫻子10～20份，牛膝10～20份。本發(fā)明根據(jù)20多年的臨床實踐經(jīng)驗，綜合古今文獻(xiàn)報道，精心發(fā)掘的，具有清熱化濕，化瘀通絡(luò)作用的方劑。文檔編號A61P13/08GK101721528SQ20091021816公開日2010年6月9日申請日期2009年12月30日優(yōu)先權(quán)日2009年12月30日發(fā)明者嚴(yán)銘銘,劉威,張銀玲,田雨,趙大慶,趙爽,鄧悅申請人:長春中醫(yī)藥大學(xué)