專利名稱：具有抗癌活性的生物堿及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從蘿摩科(Ascl印iadaceae)鵝絨藤屬多年生草本植物老瓜頭 (Cynanchum komarrovii)中分離到的具有抗癌活性的生物堿，尤其是具有抗癌活性的生物 堿及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
腫瘤是以細(xì)胞分裂、細(xì)胞死亡和細(xì)胞與細(xì)胞及細(xì)胞與機(jī)制相互作用嚴(yán)重失調(diào)為特 征的一類疾病，嚴(yán)重威脅著人類的健康和生命，因惡性腫瘤而引起的死亡是僅次于心腦血 管疾病的人類第二大死因。腫瘤的治療方法有手術(shù)治療、放射治療和藥物治療(通常稱為化療或化學(xué)治療) 等，但是很大程度上仍以化學(xué)治療為主。化療能治愈一部分腫瘤或延長(zhǎng)病人的生命，所以抗 腫瘤藥物在腫瘤的治療中占有越來(lái)越重要的地位。但是，傳統(tǒng)的抗腫瘤藥物缺乏對(duì)癌癥細(xì) 胞和正常細(xì)胞的選擇性，因而產(chǎn)生許多嚴(yán)重的毒副反應(yīng)，所以腫瘤的化療遠(yuǎn)不夠理想。隨著生活水平的提高，人們對(duì)于癌癥的治療預(yù)期有所提高，希望在治愈癌癥的同 時(shí)，人的健康不受到很大的影響。因此，開(kāi)發(fā)新型的、能選擇性地作用于腫瘤細(xì)胞而對(duì)正常 細(xì)胞沒(méi)有毒性的抗腫瘤藥物顯得尤為迫切。以天然產(chǎn)物研究為基礎(chǔ)，同時(shí)結(jié)合活性篩選從天然產(chǎn)物，尤其是中草藥中發(fā)現(xiàn)活 性良好的先導(dǎo)化合物是創(chuàng)制新藥的源泉，也是世界醫(yī)藥界關(guān)注的熱點(diǎn)。老瓜頭(Cynanchumkomarrovii)，又稱牛心樸子，蘿摩科(Asclepiadaceae)鵝絨 藤屬多年生草本植物，在我國(guó)分布于寧夏、內(nèi)蒙古、陜西、甘肅、青海等地，主要生長(zhǎng)在荒漠 和半荒漠草場(chǎng)、沙質(zhì)平原、半固定沙丘、干河床等沙漠與黃土丘陵的過(guò)渡地帶，常大量散生 或聚生成叢，是退化草場(chǎng)的主要標(biāo)志。在民間，老瓜頭有活血、抗炎、止痛的藥用記載；現(xiàn)代 藥理研究已證明，老瓜頭具有鎮(zhèn)痛、抗炎和抑菌作用，對(duì)呼吸系統(tǒng)常見(jiàn)病的咳、痰、喘癥狀可 有緩解治療作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供三種具有抗癌活性的生物堿，其具有明顯的抗肝、肺、或 血液腫瘤作用。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種生物堿活性部位的制備方法。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種上述生物堿在制備抗肝、肺、或血液腫瘤藥物中 的應(yīng)用。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是
4Antofine,淡黃色方晶，分子式為C23H25N03。 一種具有抗癌活性的生物堿，其結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
一種具有抗癌活性的生物堿，其結(jié)構(gòu)式如下F200910117383XC0000011.tif
2.如權(quán)利要求1所述的具有抗癌活性的生物堿，其特征在于其為Antofine，淡黃色方晶，分子式為C23H25NO315
3.一種具有抗癌活性的生物堿，其結(jié)構(gòu)式如下
4.如權(quán)利要求3所述的具有抗癌活性的生物堿，其特征在于其為 14-hydroxyantofine,淡黃色無(wú)定型粉末，分子式為C23H25N04。
5.一種具有抗癌活性的生物堿，其結(jié)構(gòu)式如下
6.如權(quán)利要求5所述的具有抗癌活性的生物堿，其特征在于其為A^-antofine，淡 黃色無(wú)定型粉末，分子式為C23H23NO315
7.一種具有抗癌活性的生物堿活性部位的制備方法，包括如下步驟a、取老瓜頭(Cynanchumkomarrovii)植物地上部分切段，用有機(jī)溶劑浸泡后，提取液 待用；b、將提取液在20-70°C下減壓濃縮至密度為1.20-1. 30g/mL，用體積百分比濃度為 1-2%稀無(wú)機(jī)酸洗滌，洗液用有機(jī)溶劑萃取至無(wú)生物堿陽(yáng)性反應(yīng)，萃取液在20-70°C下減壓 濃縮至密度為1. 20-1. 30g/mL，濃縮液沉淀24-96小時(shí)，沉淀部分即為生物堿活性部位；c、或?qū)⑻崛∫涸?0-70°C下減壓濃縮至密度為1.20-1. 30g/mL后，用硅膠柱層析分離， 氯仿-甲醇10 O到5 5，合并氯仿-甲醇9 1到6 4部分，即為生物堿活性部位；或者用弱極性大孔吸附樹脂分離精制，其所用大孔吸附樹脂為GDX系列、XAD系列、 Diaion系列、HPD系列、D系列、或AB系列中各型號(hào)中的任意一種，即將提取液通過(guò)弱極性大 孔吸附樹脂，用2-8倍柱體積量的蒸餾水洗脫，再用體積百分比濃度為50-95%乙醇洗脫， 洗脫部分即為生物堿活性部位；或者用弱酸性陽(yáng)離子樹脂分離精制，其所用弱酸性陽(yáng)離子樹脂為羧甲基型或磷酸基型 中各型號(hào)中的任意一種，即將提取液在20-70°C下減壓濃縮至密度為1. 20-1. 30g/mL后，將 濃縮液通過(guò)弱酸性陽(yáng)離子樹脂柱，用體積百分比濃度為1-5%的氨水洗脫，即為生物堿活性 部位。
8.如權(quán)利要求7所述的具有抗癌活性的生物堿活性部位的制備方法，其特征在于其 中步驟a中切段的寬度為0. 5-1厘米，浸泡溫度為20-100°C，浸泡時(shí)間為1-240小時(shí)，有機(jī) 溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、和氯仿中的任意一種，或任意幾種以任意比例的混合。
9.如權(quán)利要求7所述的具有抗癌活性的生物堿活性部位的制備方法，其特征在于其 中步驟b中稀無(wú)機(jī)酸是鹽酸或硫酸，有機(jī)溶劑是氯代烷烴、乙酸乙酯、或甲苯。
10.權(quán)利要求1、3、或5所述生物堿在制備抗肝、肺、或血液腫瘤藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及從蘿摩科(Asclepiadaceae)鵝絨藤屬多年生草本植物老瓜頭(Cynanchum komarrovii)中分離到的具有抗癌活性的生物堿，尤其是具有抗癌活性的生物堿及其制備方法和應(yīng)用，其主要為3個(gè)化合物Antofine、14-hydroxyantofine、Δ11，12-antofine，這三種生物堿在生物堿活性部位中的比例為65-80％，三種生物堿之間的比例為35-45％∶30-45％∶10-25％。本發(fā)明提供了一種具有抗癌活性的含菲駢吲哚里西定類生物堿，運(yùn)用體外抗腫瘤活性篩選體系進(jìn)行活性評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明所提供的含菲駢吲哚里西定類生物堿能有效地抑制BEL-7402人肝癌細(xì)胞、A549人肺癌細(xì)胞、MOLT-4人白血病細(xì)胞的生長(zhǎng)。老瓜頭作為一種野生植物資源，利用時(shí)可以不影響其防風(fēng)固沙。
文檔編號(hào)A61K36/27GK101962381SQ20091011738
公開(kāi)日2011年2月2日 申請(qǐng)日期2009年7月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月24日
發(fā)明者楊晉, 祁利民 申請(qǐng)人:北方民族大學(xué)