專利名稱：：一種手性苯并喹嗪-2-羧酸精氨酸鹽組合物、其制備方法及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬藥物制劑領(lǐng)域，涉及一種穩(wěn)定而刺激性低的手性苯并喹嗪-2-羧酸精氨酸鹽組合物，含有作為活性成分的精那沙星及L-精氨酸，并含有至少一種選自藥學(xué)上可接受的金屬絡(luò)合劑。本發(fā)明同時(shí)涉及該組合物的制備方法及其用途。
背景技術(shù)：
：喹諾酮類藥物現(xiàn)在已發(fā)展到四代，第一代以萘啶酸為代表，第二代以吡哌酸為代表，僅對(duì)革蘭氏陰性菌有效，第三代是此類藥物發(fā)展的高峰期，出現(xiàn)了大量新藥，并且是廣譜抗菌，這其中以諾氟沙星，環(huán)丙沙星等為代表。第四代喹諾酮類抗生素則是在第三代廣譜的基礎(chǔ)上又進(jìn)一步擴(kuò)大了抗菌譜，使之可對(duì)抗支原體和衣原體感染。國(guó)內(nèi)抗生素研發(fā)一直比較熱門，目前市場(chǎng)上應(yīng)用最多的是第三代喹諾酮類藥物。那氟沙星由日本大冢公司開(kāi)發(fā)，屬于第三代喹諾酮抗菌藥，外用治療痤瘡和毛囊炎。1993年首次在日本上市(商品名Acuatim)，2004年在德國(guó)上市(商品名Nadixa)，2005年在中國(guó)上市(商品名依尤寧，軟膏)。那氟沙星由于其吸收和血管刺激性等問(wèn)題，僅能制成外用制劑，用于體外瘡皰丙酸桿菌(propionibacteriumacnes)引起的痤瘡。其中S-(-)-那氟沙星是主要起作用的異構(gòu)體，其抗菌活性是R型異構(gòu)體的64256倍，是消旋體的2倍。精那沙星是在S-(-)_那氟沙星的基礎(chǔ)上成鹽而制得。顯著改善了那氟沙星的溶解度以及體內(nèi)吸收利用，因此它保留了那氟沙星抗菌譜廣，抗菌活性強(qiáng)，尤其對(duì)甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌和甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌有效的特點(diǎn)(AntimicrobialAgentsandChemotherapy,2004，318831920;J.Med.Chem.2005(48)，52325242)。臨床前試驗(yàn)證明，本品與市場(chǎng)上抗甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌抗生素比較有更好的療效，包括萬(wàn)古霉素、曲伐沙星、奎奴普丁+達(dá)福普汀、利奈唑胺等。精那沙星分子結(jié)構(gòu)式如下式所示<image>imageseeoriginaldocumentpage3</image>S-(-)_那氟沙星與L-精氨酸成鹽后，進(jìn)一步提高了起主要抗菌作用的S-(-)_那氟沙星異構(gòu)體的含量，并且提高了口服生物利用度，使其能夠開(kāi)發(fā)為口服或注射制劑。國(guó)際申請(qǐng)W02004058303公開(kāi)了L-精氨酸具有使精那沙星溶解性增加的數(shù)據(jù)。精那沙星的水溶解性雖然較那氟沙星有了顯著性增加，血管刺激性也有所降低，但是，藥物水溶液在光照下不穩(wěn)定，也依然存在一定的刺激性，因此不能用簡(jiǎn)單的制劑處方來(lái)制備其注射劑。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明人意外的發(fā)現(xiàn)，在精那沙星制劑中加入金屬絡(luò)合劑和L-精氨酸，可以顯著的提高精那沙星溶液的溶解性和穩(wěn)定性。所制備的溶液在高溫滅菌時(shí)也能保持穩(wěn)定。并且可以極大的降低其血管刺激性。本發(fā)明的目的在于提供一種穩(wěn)定的、低血管刺激性的藥物組合物，該組合物含有作為活性成分的精那沙星，并含有L-精氨酸和至少一種選自藥學(xué)上可接受的金屬絡(luò)合劑。所述的精那沙星，包括精那沙星無(wú)水物、精那沙星一水物、精那沙星四水合物以及其他各種形式存在的精那沙星，其劑量均以無(wú)水物計(jì)。精那沙星可依照文獻(xiàn)方法(J.Med.Chem.，2005，48，52325242)制備得到。所述的藥物組合物，每個(gè)劑量單位所含活性成分精那沙星的量為50lOOOmg。所述的金屬絡(luò)合劑，選自乙二胺四乙酸二鈉或乙二胺四乙酸二鈉鈣。本發(fā)明人在研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，精那沙星水溶液在光照條件下顏色容易發(fā)生變化，性質(zhì)不穩(wěn)定，本發(fā)明人進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，在制劑中加入L-精氨酸和金屬絡(luò)合劑乙二胺四乙酸二鈉或乙二胺四乙酸二鈉鈣能達(dá)到良好的穩(wěn)定本品的作用。下表對(duì)比了采用同一批次精那沙星(有關(guān)物質(zhì)99.80%)制備的無(wú)L-精氨酸和金屬絡(luò)合劑存在的精那沙星溶液(樣品A、樣品B)和有L-精氨酸和金屬絡(luò)合劑存在的精那沙星溶液(樣品C、樣品D)在高溫(60°C)、高濕(RH75%)和強(qiáng)光(4000Lx)的條件下放置10天后監(jiān)測(cè)指標(biāo)的變化<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>另外，對(duì)比了采用同一批次精那沙星制備的無(wú)L-精氨酸和金屬絡(luò)合劑存在的精那沙星溶液和有L-精氨酸和金屬絡(luò)合劑存在的精那沙星溶液的刺激性試驗(yàn)的結(jié)果，對(duì)比結(jié)果表明，加入L-精氨酸和金屬絡(luò)合劑后，其局部刺激性顯著性降低。對(duì)比試驗(yàn)表明，加入有L-精氨酸和金屬絡(luò)合劑后的精那沙星溶液穩(wěn)定性更好，刺激性更低，更適合于工業(yè)上制備成藥品。所述的組合物，可以注射給藥，例如可以是注射液，或者進(jìn)一步制備成注射用凍干粉針的劑型。在本發(fā)明的注射液中或凍干粉針冷凍干燥前的溶液中精那沙星的濃度為Img40mg/ml，優(yōu)選為2mg30mg/mlo所述的金屬絡(luò)合劑中，由于乙二胺四乙酸二鈉可與鈣離子結(jié)合成可溶的絡(luò)合物引起鈣的減少，靜脈制劑中使用乙二胺四乙酸二鈉會(huì)導(dǎo)致血鈣下降，因此，需密切關(guān)注和嚴(yán)格控制靜脈給藥制劑中乙二胺四乙酸二鈉的用量。一般藥品使用的范圍為0.011.0%，據(jù)此，本發(fā)明組合物中，精那沙星與金屬絡(luò)合劑的重量比為500.151，優(yōu)選為400.1101。所述的藥物組合物中L-精氨酸用量為那氟沙星精氨酸鹽L-精氨酸重量比為10.215，優(yōu)選為10.2512。所述的藥物組合物，按照制劑的一般要求，還可以包括用于注射液或注射用凍干粉針的其他藥學(xué)上可接受的常規(guī)輔料。這些常規(guī)的輔料包括但不限于冷凍干燥賦形劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、PH調(diào)節(jié)劑、等滲劑。其中賦形劑可選自但不限于甘露醇、乳糖、葡萄糖、山梨醇、氯化鈉、水解明膠、右旋糖酐、蔗糖、甘氨酸、聚乙烯吡咯烷酮等中的一種或幾種，優(yōu)選為甘露醇或葡萄糖。防腐劑可以選自但不限于苯酚、甲酚、三叔丁醇、苯甲醇、尼泊金中的一種或幾種。穩(wěn)定劑可以選自但不限于焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫脲、維生素C、叔丁基對(duì)羥基茴香醚、二丁基苯酚、沒(méi)食子酸丙酯、生育酚、甲硫氨酸、鹽酸半胱氨酸、乙酰半胱氨酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、乙二胺四乙酸的一種或幾種。pH調(diào)節(jié)劑包括但不限于鹽酸、馬來(lái)酸、枸櫞酸、酒食酸、磷酸、偏磷酸、聚偏磷酸、碳酸、氫氧化鈉、氫氧化鉀、枸櫞酸鈉、枸櫞酸鉀、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、碳酸胺、磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、碳酸鈉、酒石酸鈉鉀、偏磷酸鉀中的一種或幾種。等滲劑可以選自但不限于氯化鈉、葡萄糖、氯化鉀、乳酸鈉、甘露醇或山梨醇。本發(fā)明的藥物組合物中，精那沙星的用量沒(méi)有特別的限制，可以是在注射液中通常使用的任何劑量。一般地，在上述的注射劑型中，每個(gè)制劑單位含有效成分50lOOOmg。所說(shuō)的每個(gè)制劑單位，是指水針或粉針的每支、輸液的每瓶等。本發(fā)明的精那沙星的藥用組合物可以是澄明的可注射的水溶液形式，或?yàn)樽⑸溆脙龈煞坩樀男问??？梢杂米⑸溆盟?%葡萄糖溶液或0.9%氯化鈉直接溶解凍干粉針，得到澄明的注射液。本發(fā)明的精那沙星組合物具有以下特點(diǎn)不需要專用溶媒，穩(wěn)定性好，便于臨床使用，刺激性小。本發(fā)明的精那沙星注射液或注射用凍干粉針適合于皮下注射、肌內(nèi)注射、靜脈注射或靜脈滴注。另一方面，本發(fā)明提供了一種改善精那沙星穩(wěn)定性和刺激性組合物的制備的方法，包括將(S)-那氟沙星精氨酸鹽和金屬絡(luò)合劑混合于水性溶媒(水溶液、甘露醇水溶液或含有其他任意輔料的水溶液)的步驟，混合后加入活性炭攪拌，經(jīng)過(guò)0.8μm濾膜粗濾炭后，再用0.22μm濾膜除菌，分裝。另外該方法還可以再進(jìn)一步包括將上述注射液冷凍干燥制成凍干粉針的步驟，其中冷凍干燥采用藥劑領(lǐng)域中冷凍干燥注射劑的常規(guī)凍干技術(shù)，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)以及教科書中的技術(shù)教導(dǎo)不需要?jiǎng)?chuàng)造性勞動(dòng)即可完成。本發(fā)明的第三個(gè)方面是將本發(fā)明的精那沙星組合物用于抗生素藥物的制備中。所述組合物可用于治療革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌導(dǎo)致的各種疾病，包括膿毒血癥、尿路感染、呼吸道感染。本發(fā)明的各種改進(jìn)和變化對(duì)本
技術(shù)領(lǐng)域：
技術(shù)人員是顯而易見(jiàn)的，以下具體優(yōu)選實(shí)施方式描述了本發(fā)明，但應(yīng)理解要求保護(hù)的本發(fā)明不應(yīng)限制于以下具體實(shí)施方案。具體實(shí)施例方式以下通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不作為對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例IlOml規(guī)格注射液配方精那沙星10.OgL-精氨酸5.Og氯化鈉8.Og乙二胺四乙酸二鈉鈣O.lg注射用水至IOOOml制成100支實(shí)施例210ml規(guī)格注射液配方精那沙星20.OgL-精氨酸7.Og硫代硫酸鈉0.2g氯化鈉9.Og乙二胺四乙酸二鈉鈣0.3g注射用水至IOOOml制成100支實(shí)施例320ml規(guī)格注射液配方精那沙星25.OgL-精氨酸20.Og葡萄糖70.Og亞硫酸氫鈉2.Og乙二胺四乙酸二鈉0.4g注射用水至2000ml制成100支上述實(shí)施例樣品制備工藝如下(1)取精那沙星和L-精氨酸，加入4060°C注射用水中，調(diào)pH9.010.0，加入其他添加劑，再補(bǔ)充注射用水至規(guī)定量；(2)加入適量活性碳攪拌1520min，趁熱脫炭，放冷，過(guò)濾至澄明，分裝于IOml或20ml西林瓶中，同時(shí)充入氮?dú)猓?3)加塞，軋蓋，121°C滅菌15min，并檢漏；(4)燈檢，包裝，全檢后即得成品。實(shí)施例4:凍干粉針劑精那沙星25.OgL-精氨酸10.Og甘露醇150.Ogβ-環(huán)糊精20.Og乙二胺四乙酸二鈉0.2g注射用水至2500ml制成1000支實(shí)施例5凍干粉針劑精那沙星25.OgL-精氨酸7.Og乳糖120.Og乙二胺四乙酸二鈉0.2g甘露醇50.Og注射用水至5000ml制成1000支上述實(shí)施例樣品制備工藝如下(1)取精那沙星和L-精氨酸，加入40060°C注射用水中，調(diào)pH9.010.0，加入其他添加劑，再補(bǔ)充注射用水至規(guī)定量；(2)加入適量活性碳攪拌1520min，趁熱脫炭，放冷，過(guò)濾至澄明，(3)測(cè)定中間體，分裝于IOml或20ml西林瓶中，半加膠塞，(4)預(yù)凍，將樣品冷凍至-30°C以下，保持4小時(shí)左右。抽真空，干燥，直至水分在5%以下，取出，壓塞，軋蓋。實(shí)施例6250ml規(guī)格輸液配方精那沙星50.OgL-精氨酸100.Og氯化鈉225g乙二胺四乙酸二鈉鈣5g苯甲酸鈉20g注射用水至25000ml制成100支實(shí)施例7250mL規(guī)格輸液配方精那沙星IOOgL-精氨酸70g葡萄糖700g氯化鈉200g乙二胺四乙酸二鈉鈣2.5g注射用水至25000ml制成100支實(shí)施例8500mL規(guī)格輸液配方精那沙星75gL-精氨酸50g葡萄糖2500g乳酸適量乙二胺四乙酸二鈉8g注射用水至50000ml制成100支實(shí)施例9500mL規(guī)格輸液配方精那沙星IOOgL-精氨酸90g葡萄糖2000g乙二胺四乙酸二鈉9g注射用水至50000ml制成100支上述實(shí)施例樣品制備工藝如下(1)取精那沙星、L-精氨酸，加入40_60°C注射用水中，調(diào)節(jié)ρΗ9·010.0，加入其他添加劑，再補(bǔ)充注射用水至規(guī)定量；(2)加入適量活性碳攪拌15-20min，趁熱脫炭，放冷，過(guò)濾至澄明，分裝于250或500ml輸液瓶中，同時(shí)充入氮?dú)猓?3)加塞，軋蓋，121°C滅菌15min，并檢漏；(4)燈檢，包裝，全檢后即得成品。實(shí)施例10刺激性試驗(yàn)藥物配制精那沙星L-精氨酸乙二胺四乙酸二鈉重量比為210.2為樣品A；精那沙星L-精氨酸重量比乙二胺四乙酸二鈉為120.15為樣品B;精那沙星L-精氨酸乙二胺四乙酸二鈉重量比為10.250.2為樣品C；精那沙星氫氧化鈉重量比為201為樣品D；精那沙星L-半胱氨酸重量比為2.51的藥物組合物為樣品E；精那沙星為樣品F。六種樣品的濃度均為20mg/mL。臨用前，用生理鹽水(NS)配成4mg/mL。試驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)采用單盲、平行法進(jìn)行，待實(shí)驗(yàn)結(jié)束后揭盲。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較不同那氟沙星精氨酸鹽注射組合物所引起的動(dòng)物刺激性。1.扭體試驗(yàn)選取清潔級(jí)健康雄性小鼠64只，體重為1820g，按體重隨機(jī)分為8組，每組8只。分為空白對(duì)照組(空白處方)、陽(yáng)性對(duì)照組(0.7%醋酸)、及6個(gè)不同樣品組。采用單盲法平行給藥，每只動(dòng)物腹腔注射0.2mL藥液，立即計(jì)時(shí)，觀察注射后IOmin內(nèi)發(fā)生扭體反應(yīng)的動(dòng)物數(shù)、扭體次數(shù)。采用T-Test或卡方檢驗(yàn)，與空白對(duì)照組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。2.舔足反射試驗(yàn)上述動(dòng)物經(jīng)3天清洗期后，保持原分組，動(dòng)物體重均小于22g。每只動(dòng)物右后肢足底皮下注射20uL藥液，立即計(jì)時(shí)，放入大燒杯中，采用單盲法、平行觀察。陽(yáng)性對(duì)照組給予同體積的甲醛。觀察注射后5min內(nèi)和1530min內(nèi)動(dòng)物發(fā)生自發(fā)性縮足、舔足反射次數(shù)和舔足時(shí)間，并在不同時(shí)間段對(duì)疼痛進(jìn)行分級(jí)。采用T-Test或卡方檢驗(yàn)，與空白對(duì)照組比較進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)0=注射足承擔(dān)正常重量；1=運(yùn)動(dòng)時(shí)跛行、休息時(shí)足輕觸地面；2=注射足抬高，最多用指甲觸地；3=出現(xiàn)針對(duì)注射足的舔、咬和理毛行為。實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.扭體試驗(yàn)結(jié)果當(dāng)給藥濃度為4mg/mL時(shí)，樣品D、E、F有少數(shù)動(dòng)物在注射后Imin內(nèi)發(fā)生1或2次扭體(詳見(jiàn)表1)。提示在該實(shí)驗(yàn)條件下，樣品A、B、C在4mg/mL濃度下注射對(duì)小鼠腹腔的刺激性小。表1那氟沙星不同樣品4mg/ml注射后致小鼠扭體比較表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>與空白組比較，*p<0.05，**p<0.01。2.舔足反射試驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性對(duì)照組甲醛引起的疼痛反應(yīng)如文獻(xiàn)報(bào)道，分為兩相1相反應(yīng)(05min)是甲醛對(duì)足底感受器的直接刺激性所致；II相反應(yīng)(1530min)主要是繼發(fā)性炎癥刺激反應(yīng)。各樣品以4mg/ml足底皮下注射后，前5min內(nèi)動(dòng)物疼痛反應(yīng)明顯，評(píng)分為23級(jí)，5個(gè)不同樣品組的舔足次數(shù)和縮足、舔足累積時(shí)間均明顯大于空白對(duì)照組的，其中以樣品D的最為顯著(詳見(jiàn)表2、3)。結(jié)果表明，在4mg/ml濃度下，注射各樣品對(duì)小鼠足底有一定的刺激性，引起的急性刺激性反應(yīng)程度依次為甲醛>樣品D>樣品E樣品F>樣品C樣品B>樣品A>空白組。實(shí)驗(yàn)觀察30min后，各樣品組動(dòng)物的注射足紅腫現(xiàn)象明顯消退，故不再做其它觀察。表2精那沙星不同樣品4mg/ml注射后動(dòng)物舔足反射評(píng)分比較表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表3精那沙星不同樣品4mg/ml注射后動(dòng)物舔足時(shí)間比較表(η=8)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>與空白組比較，*ρ<0.05，**ρ<0.01。我們利用小鼠的鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，比較五種不同精那沙星組合物樣品誘導(dǎo)的小鼠扭體反應(yīng)、舔足反射情況。結(jié)果顯示，在4mg/ml的注射濃度下，6個(gè)組合物樣品引發(fā)的主要為I相疼痛反應(yīng)，即對(duì)疼痛感受器的直接刺激性，且紅腫、疼痛反應(yīng)在注射30min后基本緩解。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，引起的急性刺激性反應(yīng)程度依次為陽(yáng)性藥>樣品D>樣品E樣品F>樣品C樣品B>樣品A>空白組。根據(jù)以上試驗(yàn)，可得出結(jié)論，精那沙星加入了金屬絡(luò)合劑和L-精氨酸的藥物組合物在刺激性試驗(yàn)中顯示出較好的優(yōu)勢(shì)，與氫氧化鈉和那氟沙星精氨酸鹽的藥物組合物及其它氨基酸和那氟沙星精氨酸鹽的藥物組合物比較，顯著降低了其刺激性。權(quán)利要求一種手性苯并喹嗪-2-羧酸精氨酸鹽組合物，含有作為活性成分的精那沙星，并含有L-精氨酸和至少一種選自金屬絡(luò)合劑的藥學(xué)上可接受的添加劑。2.權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于金屬絡(luò)合劑選自乙二胺四乙酸二鈉或乙二胺四乙酸二鈉鈣。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的組合物，其特征在于精那沙星與金屬絡(luò)合劑的重量比為500.151。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物，其特征在于精那沙星與金屬絡(luò)合劑的重量比為400.1101。5.權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于那氟沙星精氨酸鹽與L-精氨酸重量比為10.215。6.權(quán)利要求5所述的組合物，其特征在于那氟沙星精氨酸鹽與L-精氨酸重量比為10.2512。7.權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于那氟沙星精氨酸鹽與L-精氨酸及金屬絡(luò)合劑的重量比為210.2。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中組合物為注射液或凍干粉針。9.要求1所述的組合物，其特征在于每個(gè)劑量單位所含活性成分精那沙星的量為50IOOOmg010.根據(jù)權(quán)利要求8所述的組合物，其中組合物中還進(jìn)一步包括藥學(xué)上可接受的注射劑輔料。全文摘要本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，主要涉及一種手性苯并喹嗪-2-羧酸精氨酸鹽的藥物組合物，包括作為活性成分的精那沙星、L-精氨酸和金屬絡(luò)合劑。該組合物可以是注射液，也可以是凍干粉針。本發(fā)明降低了S-(-)-那氟沙星L-精氨酸鹽水溶液穩(wěn)定性低，存在一定刺激性的現(xiàn)有技術(shù)不足，提供了一種穩(wěn)定而刺激性低的精那沙星藥物組合物。本發(fā)明同時(shí)還提供了該藥物組合物在制備抗生素藥物中的應(yīng)用。文檔編號(hào)A61K47/18GK101804053SQ20091002501公開(kāi)日2010年8月18日申請(qǐng)日期2009年2月16日優(yōu)先權(quán)日2009年2月16日發(fā)明者何紅燕,葉海,張自強(qiáng),熊雅婷,謝小燕,車曉明,陳義朗,黃海燕申請(qǐng)人:南京長(zhǎng)澳醫(yī)藥科技有限公司;上海陽(yáng)帆醫(yī)藥科技有限公司