專(zhuān)利名稱(chēng)：阿魏酸鈉在制備擴(kuò)血管藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥提取物阿魏酸鈉的應(yīng)用，主要涉及阿魏酸鈉在制備擴(kuò)血管 藥物中的應(yīng)用。適合制備降血壓藥物的場(chǎng)合，也適合制備抗心絞痛藥物的場(chǎng)合。
背景技術(shù)：
高血壓是嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的常見(jiàn)病、多發(fā)病。在我國(guó)，高血壓是心血管
疾病中發(fā)生率最高的疾病。據(jù)2002年中國(guó)居民營(yíng)養(yǎng)與健康調(diào)查和3次國(guó)家衛(wèi) 生服務(wù)調(diào)查結(jié)果，我國(guó)己有1. 74億高血壓患者，每年大約有22萬(wàn)人死于高血 壓。另?yè)?jù)2003年浙江省第三次抽樣調(diào)查顯示，浙江省高血壓患病率13年內(nèi)增 長(zhǎng)了 275%。高血壓作為心血管事件的重要危險(xiǎn)因素，若得不到合理有效的治療， 任其發(fā)展，必將對(duì)心、腦、腎、血管等重要器官造成損害，引發(fā)心腦血管事件。 目前，高血壓及其相關(guān)的血管并發(fā)癥和/或合并癥的治療主要依賴(lài)西藥，而在 利用中藥為主進(jìn)行高血壓治療方面，尚未有突破性進(jìn)展。因此，如何發(fā)展祖國(guó) 傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)，利用我國(guó)特有資源，開(kāi)發(fā)中醫(yī)藥進(jìn)行高血壓等心腦血管疾病的治療， 己經(jīng)勢(shì)在必行。
阿魏酸鈉是當(dāng)歸、川芎等中藥材水溶性提取物中主要單體活性成分，化學(xué) 名稱(chēng)為3—甲氧基一4一羥基桂皮酸鈉鹽二水合物，屬酚酸類(lèi)化合物，分子式 d。H904Na'2H20。既往實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，阿魏酸鈉具有抗血小板聚集、抗炎、抗氧 化等藥理作用"'2]。目前，臨床上常用其治療心腦血管疾病。但是，迄今為止，
并不清楚阿魏酸鈉是否可以作為一種血管調(diào)節(jié)藥物單獨(dú)用于心、腦、腎、四肢 等血管性并發(fā)癥和/或合并癥的治療。因此，在現(xiàn)有基礎(chǔ)上，有待對(duì)中藥提取物 阿魏酸鈉進(jìn)行二次開(kāi)發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供中藥提取物阿魏酸鈉在制備擴(kuò)血管藥物中的應(yīng)用，尤 其在制備治療高血壓、心絞痛等的藥物中的應(yīng)用。
外周小動(dòng)脈痙攣導(dǎo)致周?chē)枇υ黾邮茄獕荷叩闹匾蛩?，冠狀?dòng)脈痙攣 則是心絞痛的主要原因。為觀(guān)察阿魏酸鈉對(duì)動(dòng)脈的直接調(diào)節(jié)作用，本發(fā)明采用 主動(dòng)脈離體灌流技術(shù)，以排除活體實(shí)驗(yàn)中各種神經(jīng)、體液因素對(duì)阿魏酸鈉擴(kuò)血 管作用的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)阿魏酸鈉對(duì)離體主動(dòng)脈具有濃度依賴(lài)性舒張作用，且能完全舒張由縮血管藥物(苯腎上腺素，KC1和佛波酯)誘發(fā)的血管收縮。進(jìn)
一步研究發(fā)現(xiàn)，阿魏酸鈉可能通過(guò)以下三種機(jī)制發(fā)揮舒血管作用(1)阻斷血
管平滑肌細(xì)胞膜上的電壓敏感性C^+通道和受體操縱性(^2+通道從而抑制細(xì)
胞外鈣內(nèi)流；(2)阻斷肌漿網(wǎng)上的三磷酸肌醇敏感的(^2+通道和ryanodine受
體02+通道抑制內(nèi)鈣釋放；(3)阻斷蛋白肌酶C介導(dǎo)的血管收縮機(jī)制。
根據(jù)上述研究結(jié)果，發(fā)現(xiàn)中藥提取物阿魏酸鈉具有直接擴(kuò)張動(dòng)脈的新的藥
理作用，可松弛血管平滑肌，適用于降低血壓、抗心絞痛等血管性疾病。 本發(fā)明所述的阿魏酸鈉可與藥效學(xué)允許的藥用賦形劑組合制備成制劑。 本發(fā)明所述的阿魏酸鈉與藥用賦形劑制備的制劑形式主要包括液體制劑
和固體制劑。固體制劑主要包括片劑、膠囊劑(含軟膠囊)、滴丸劑。液體制
劑主要包括口服液體制劑和注射液體制劑。
所述制劑的給藥形式主要包括口服給藥或非腸道給藥，優(yōu)選口服給藥。 本發(fā)明的有益效果是(1)對(duì)傳統(tǒng)中藥提取物阿魏酸鈉的藥理作用進(jìn)行二
次開(kāi)發(fā)，拓展了阿魏酸鈉的藥用范圍；(2)利用阿魏酸鈉的直接擴(kuò)張血管作用，
可將阿魏酸鈉用于制備治療各類(lèi)相關(guān)血管性疾病的藥物。


圖1是阿魏酸鈉對(duì)苯腎上腺素預(yù)收縮，內(nèi)皮完整及內(nèi)皮去除主動(dòng)脈環(huán)張力 的影響。
圖2是阿魏酸鈉對(duì)氯化鉀預(yù)收縮，內(nèi)皮完整及內(nèi)皮去除主動(dòng)脈環(huán)張力的影響。
圖3是無(wú)鈣液中阿魏酸鈉對(duì)佛波酯預(yù)收縮，內(nèi)皮去除主動(dòng)脈環(huán)張力的影響。
圖4是無(wú)鈣液中苯腎上腺素激活受體操縱性(^2+通道后，阿魏酸鈉對(duì)CaCl2 所致主動(dòng)脈收縮的抑制作用。
圖5是無(wú)鈣液中高濃度氯化鉀激活電壓敏感性(^2+通道后，阿魏酸鈉對(duì) CaCl2所致主動(dòng)脈收縮的抑制作用。
圖6是無(wú)鈣液中阿魏酸鈉對(duì)苯腎上腺素和咖啡因所致主動(dòng)脈收縮的影響。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明結(jié)合實(shí)施例和附圖作進(jìn)一步說(shuō)明。
實(shí)施例l大鼠離體主動(dòng)脈環(huán)的制備
1.實(shí)驗(yàn)藥物
阿魏酸鈉由杭州中香化學(xué)有限公司提供，其性狀為白色粉末，無(wú)臭，純度 為99.54% 。臨用前用Krebs-Henseleit (K-H)液溶解。2.實(shí)驗(yàn)步驟
清潔級(jí)雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠，體重250~300 g。 迅速游離SD大鼠胸主動(dòng)脈，置于4 'C含95% 02和5% C02混合氣體預(yù)飽 和的K-H液中，剔除周?chē)Y(jié)締組織，剪成3 4mm的血管環(huán)，期間注意保護(hù)血 管環(huán)內(nèi)膜不受破壞。據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，采用棉簽?zāi)ゲ裂墉h(huán)內(nèi)表面的方法，將部分 血管環(huán)制備成去除內(nèi)皮的模型。而后將血管環(huán)懸掛于預(yù)置5 mLK-H液的浴槽 內(nèi)， 一端固定， 一端通過(guò)張力換能器連接Medlab生物信號(hào)采集系統(tǒng)。在持續(xù) 通95%02和5%032的混合氣體的狀態(tài)下，調(diào)節(jié)其基礎(chǔ)張力至2.0g，并在37 。C下穩(wěn)定60min。用KC1 (60 mmol七")重復(fù)刺激3次，以誘發(fā)血管的最大收縮 幅度。待血管環(huán)重新穩(wěn)定后，用苯腎上腺素(phenylephrine, PE) (1 pmoH/1) 收縮血管環(huán)達(dá)峰值，加入乙酰膽堿(acetylcholine, ACh) (10 inmol'I/1)檢驗(yàn)血 管內(nèi)皮完整性。若加ACh后使PE預(yù)收縮的血管環(huán)舒張80。/。以上，可認(rèn)為內(nèi)皮 完整；若該舒張作用小于205^，則認(rèn)為內(nèi)皮去除。以PE (lpmol'L-1)或KC1 (60mmol丄")誘發(fā)最大收縮幅度為100%，以加入藥物后的血管張力幅度與 PE或KC1誘發(fā)最大收縮幅度之間的比率反映血管張力的變化。
實(shí)施例2阿魏酸鈉對(duì)離體主動(dòng)脈環(huán)舒縮功能的作用 根據(jù)實(shí)施例1的方法，血管環(huán)穩(wěn)定后觀(guān)察
(1) 阿魏酸鈉對(duì)PE或KC1預(yù)收縮血管環(huán)張力的影響
以60 mmol丄-1 KC1或1拜ol丄"PE預(yù)收縮大鼠主動(dòng)脈環(huán)，采用累積加藥 法，每10 min加入阿魏酸鈉1次，觀(guān)察累積給予阿魏酸鈉0.1 30 mmohL"對(duì) 內(nèi)皮完整和內(nèi)皮去除血管環(huán)的作用；對(duì)照組以K-H液代替阿魏酸鈉等容加入。
(2) 阿魏酸鈉對(duì)佛波酯預(yù)收縮血管環(huán)張力的影響
在無(wú)鈣液中，以1 pmol丄"佛波酯預(yù)收縮內(nèi)皮去除主動(dòng)脈環(huán)，每10 min 1 次累積加入阿魏酸鈉0.1 30mmoH/1，觀(guān)察其對(duì)血管張力的影響；對(duì)照組以 K-H液代替阿魏酸鈉等容加入。
(3) 結(jié)果
阿魏酸鈉均能濃度依賴(lài)性的使PE和KC1誘導(dǎo)收縮的內(nèi)皮完整或內(nèi)皮去除 的血管環(huán)顯著舒張，且該舒張作用在內(nèi)皮完整和內(nèi)皮去除組無(wú)明顯差異，參見(jiàn) 圖1、圖2。同時(shí)，在無(wú)鈣液中，阿魏酸鈉亦能濃度依賴(lài)性的舒張佛波酯(蛋 白激酶C激動(dòng)劑，其縮血管作用不依賴(lài)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的升高[3])誘導(dǎo)的內(nèi) 皮去除血管的收縮作用，參見(jiàn)圖3。阿魏酸鈉能完全舒張由上述PE、 KC1和佛波酯預(yù)收縮的主動(dòng)脈。其中*戶(hù)<0.05,**尸<0.01與對(duì)照組比較。
實(shí)施例3阿魏酸鈉對(duì)細(xì)胞外鈣離子內(nèi)流所致血管平滑肌收縮的影響
根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，發(fā)現(xiàn)當(dāng)阿魏酸鈉濃度累積到1， 3和10mmol丄"時(shí)， 其血管張力變化較為明顯，故選擇這三個(gè)濃度進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。且根據(jù)實(shí)施例 1的方法，血管環(huán)穩(wěn)定后觀(guān)察
(1) 阿魏酸鈉對(duì)高濃度KCl誘導(dǎo)激活的電壓敏感性C^+通道的影響 在無(wú)鈣液中，以高濃度KC1 (60mmoH/1)孵育內(nèi)皮去除主動(dòng)脈環(huán)，而后
用l， 3或10mmol丄"阿魏酸鈉預(yù)處理血管環(huán)10min，觀(guān)察不同濃度阿魏酸鈉對(duì) 累積加入CaCl2 (O.Ol-lOmmol.U1)所致血管收縮作用的影響。
(2) 阿魏酸鈉對(duì)PE誘導(dǎo)激活的受體操縱性C^+通道的影響 無(wú)鈣液中，以PE (1 ^irnoH/1)孵育內(nèi)皮去除主動(dòng)脈環(huán)，后以l， 3或10
mmol丄"阿魏酸鈉孵育血管環(huán)10 min，觀(guān)察不同濃度阿魏酸鈉對(duì)累積加入CaCl2 (0.01 10mmoH/1)所致血管收縮作用的影響。
(3) 結(jié)果
PE (1 pmol丄")能誘導(dǎo)激活受體操縱性Ca^通道，而高濃度KC1 (60 mmoH;1)能誘導(dǎo)激活電壓敏感性(^2+通道[4]。在無(wú)鈣液中，阿魏酸鈉(1， 3 或10mmol'L")能濃度依賴(lài)性的抑制PE誘導(dǎo)，細(xì)胞外鈣內(nèi)流所致血管收縮，參 見(jiàn)圖4;同時(shí)，阿魏酸鈉也能濃度依賴(lài)性的抑制高鉀誘導(dǎo)，細(xì)胞外鈣內(nèi)流所致 平滑肌收縮，參見(jiàn)圖5，其中*尸<0.05，**尸<0.01與對(duì)照組比較。
實(shí)施例4阿魏酸鈉對(duì)細(xì)胞內(nèi)鈣離子釋放所致血管平滑肌收縮的影響
且根據(jù)實(shí)施例l的方法，內(nèi)皮去除血管環(huán)穩(wěn)定后，首先在無(wú)鈣液中穩(wěn)定 15min，而后加入l拜ol丄"PE或20 mmol七"咖啡因誘導(dǎo)血管環(huán)產(chǎn)生第一次短暫 性收縮(T》。然后先用K-H液沖洗穩(wěn)定40 min (恢復(fù)肌漿網(wǎng)內(nèi)鈣存儲(chǔ))，再次 換無(wú)鈣液穩(wěn)定15min。加入阿魏酸鈉(1， 3或10 mmol'I/1)孵育IO min，而后 以l pmol七"PE或20mmol丄"咖啡因第二次誘導(dǎo)血管環(huán)產(chǎn)生短暫性收縮(T2)。 比較不同濃度阿魏酸鈉對(duì)T/T,比值的影響。
阿魏酸鈉能濃度依賴(lài)性的抑制T/^比值，使PE和咖啡因誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)鈣離 子釋放引起的收縮顯著下降，參見(jiàn)圖6，其中*尸<0.05,**尸<0.01與對(duì)照組比較。 無(wú)需進(jìn)一步詳細(xì)闡明，相信采用前面所公開(kāi)的內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員可最 大限度地應(yīng)用。因此，前面的優(yōu)選具體實(shí)施方案應(yīng)被理解為僅是舉例說(shuō)明，而非以任何方式限制本發(fā)明的范圍。 本發(fā)明涉及的部分參考文獻(xiàn)[1] Wang BH， Ou誦Yang JP: Pharmacological actions of sodium ferulate in cardiovascular system. Cardiovasc Drug Rev 2005; 23: 161-172.[2]林迎暉，陳文為阿魏酸鈉的藥理作用及分子改造前景。藥學(xué)學(xué)報(bào)1994;29: 717—720.[3] Walsh MP, Horowitz A， C16ment-Chomienne O, Andrea JE， Allen BG, Morgan KG: Protein kinase C mediation of Ca2+-independent contractions of vascular smooth muscle. Biochem Cell Biol 1996; 74: 485-502.[4] Karaki H, Ozaki H, Hori M, et al: Calcium movements, distribution, and functions in smooth muscle. Pharmacol Rev 1997; 49: 157-230.
權(quán)利要求
1.中藥提取物阿魏酸鈉在制備擴(kuò)血管藥物中的應(yīng)用，其特征是所述的阿魏酸鈉與藥用賦形劑組合制備成制劑。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥提取物阿魏酸鈉在制備降低血壓藥物中的 應(yīng)用。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥提取物阿魏酸鈉在制備抗心絞痛藥物中的 應(yīng)用。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥提取物阿魏酸鈉與藥用賦形劑組合制備的制劑，其特征是制劑形式包括液體制劑和固體制劑。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的中藥提取物阿魏酸鈉與藥用賦形劑組合制備的 制劑，其特征是固體制劑為片劑、膠囊劑、滴丸劑或軟膠囊中任一種。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的中藥提取物阿魏酸鈉與藥用賦形劑組合制備的 制劑，其特征是膠囊劑為軟膠囊。
7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的中藥提取物阿魏酸鈉與藥用賦形劑組合制備的 制劑，其特征是液體制劑為口服液體制劑或注射液體制劑。
全文摘要
本發(fā)明提供中藥提取物阿魏酸鈉在制備擴(kuò)血管藥物中的應(yīng)用，尤其在制備治療高血壓、心絞痛等的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的阿魏酸鈉可與藥效學(xué)允許的藥用賦形劑組合制備成制劑，制劑形式主要為液體制劑或固體制劑。固體制劑主要包括片劑、膠囊劑(含軟膠囊)、滴丸劑。液體制劑主要包括口服液體制劑和注射液體制劑。本發(fā)明具有直接擴(kuò)張動(dòng)脈的新的藥理作用，可松弛血管平滑肌，是對(duì)傳統(tǒng)中藥提取物阿魏酸鈉的二次開(kāi)發(fā)，拓展了阿魏酸鈉的藥用范圍；可用于制備治療各類(lèi)相關(guān)血管性疾病的藥物。
文檔編號(hào)A61K31/192GK101219129SQ20081005918
公開(kāi)日2008年7月16日 申請(qǐng)日期2008年1月16日 優(yōu)先權(quán)日2008年1月16日
發(fā)明者胡申江, 陳國(guó)萍 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)