專利名稱：一種烏頭類水解單酯型生物堿的制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于天然藥物化學領域，具體涉及一種烏頭類水解單酯型生物堿的 制備方法。
背景技術：
毛茛科烏頭屬植物如草烏、川烏、附子，是中醫(yī)臨床常用藥。研究表明， 這些屮藥發(fā)揮藥效作用的主要化學成分是其中的生物堿類成分，按化學結構可 將生物堿類成分分為雙酯型、單酯型、胺醇型和脂型。其中的單酯型和胺醇型 為雙酯型生物堿的一級和二級分解產(chǎn)物[1]。由于烏頭屬生藥中的生物堿以雙酯型 為主，而雙酯型生物堿對心臟和神經(jīng)系統(tǒng)有強烈的毒性，由于其有效劑量與中 毒劑量非常接近，稍有不慎，即造成中毒乃至致死事故[2'3]，給臨床用藥帶來了 極大的不便，因此臨床應用時主要采用上述中藥的炮制品。對炮制品的化學成 分及藥理作用研究表明炮制品中雙酯型生物堿的含量遠低于生品，而單酯型 生物堿的含量有所增加，并且毒性大大降低[4]。但如果雙酯型生物堿的含量控制 不當，在臨床上仍然會有中毒情況發(fā)生。如果可以得到僅含有單酯型生物堿的 提取物，并且將這種提取物應用于臨床，即可以保證臨床用藥的安全性、有效 性。由于單酯類生物堿又分為水解型和熱解型兩種，并且藥理研究表明，二者
的藥效并不完全相同[5]，有必要建立僅含有單一類型單酯生物堿的提取方法。 (參考文獻[l]馬鴻雁，李楠，楊明.烏頭堿水解實驗和熱力學研究.成都中醫(yī)
藥大學學報 [J],2005，28(3):57 59;[2]郭俊玲.烏頭堿中毒致惡性心律失常.藥物不良反應雜志[J],2003(6); [3]張宏.附子、川烏、草烏、草烏葉煎煮時間、劑量與藥效的相關性研究 [D]，2005:14;楚春蓮，王萍.生品、制品草烏毒性成分變化分析.Journal of Qiqihar College[J],2004，25(5):546;許慶軒.附子及烏頭屬植物中二萜類生物堿的電噴霧質(zhì)譜研究 [D],2004:18。)

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種烏頭類水解單酯型生物堿的制備方法。其步驟和條件如
下
以烏頭屬中藥為原料，加入原料藥的20倍水浸泡，置于高壓容器內(nèi)，在壓 力為0.05 0.17MP，溫度為110 130。C，時間為10min 6h提取，將提取液濃縮， 調(diào)pH二9，用乙酸乙酯、乙醚或三氯甲烷萃取，得到的有機溶劑層濃縮，干燥，得 到一種烏頭類水解單酯型生物堿。
有益效果通過電噴霧質(zhì)譜檢測，用有機溶劑萃取后得到的水解型生物堿 較純凈，用滴定法測得含量可達50%以上并且無脂類生物堿干擾。此方法方便、 高效、易于操作，可用于新藥開發(fā)。


圖la是生草烏未經(jīng)高壓煎煮的電噴霧質(zhì)譜圖。
圖lb是生草烏經(jīng)高壓提取后總生物堿的電噴霧質(zhì)譜圖。
圖2a是制草烏未經(jīng)高壓煎煮的電噴霧質(zhì)譜圖。
圖2b是制草烏經(jīng)高壓提取后總生物堿的電噴霧質(zhì)譜圖。
具體實施方式
實施例1
將生草烏35g，加水700ml，置于高壓容器內(nèi)，在11(TC、 0.05MP下煎煮3次， 每次2h,合并3次提取液，濃縮，調(diào)pH^9，用乙醚、乙酸乙酯或氯仿萃取，得到 的有機溶劑層濃縮干燥，即得較純凈的水解型單酯生物堿，用滴定法測得總堿含 量為57.98%。圖la是生草烏未經(jīng)高壓煎煮的電噴霧質(zhì)譜圖?？梢钥闯錾轂踔?含有的雙酯型生物堿包括烏頭堿(m/z646)、 3-去氧烏頭堿(m/z630)，單酯型 生物堿為去乙酰烏頭堿(m/z586)，脂型生物堿包括8-亞油酰-苯甲酰烏頭原堿 (m/z866)， 8-棕櫚酰-苯甲酰烏頭原堿(m/z842)。圖lb是生草烏經(jīng)高壓提取后 總生物堿的電噴霧質(zhì)譜圖，未檢測到雙酯型及脂型生物堿，而主要含有水解型 生物堿-苯甲酰烏頭原堿(m/z604)和苯甲酰中烏頭原堿(m/z590)。 實施例2
將制草烏35g，加水700ml，置于高壓容器內(nèi)，在115。C、 0.07MP下煎煮3 次，每次1.5h，合并3次提取液，濃縮，調(diào)pH:9,用乙醚、乙酸乙酯或氯仿萃取， 得到的有機溶劑層濃縮干燥,即得較純凈的水解型單酯生物堿，用滴定法測得總 堿含量為74.42%。圖2a是制草烏未經(jīng)高壓煎煮的電噴霧質(zhì)譜圖，含有的雙酯型 生物堿包括烏頭堿(m/z646)、 3-去氧烏頭堿(m/z630);以及烏頭堿的熱解產(chǎn)物 -去乙酰烏頭堿(m/z586);分子離子峰出現(xiàn)在m/z800 1000區(qū)域的為脂型生物 堿，其中包括8-亞油酰-苯甲酰烏頭原堿(m/z866)、 8-棕櫚酰-苯甲酰烏頭原堿 (m/z842)。圖2b是制草烏經(jīng)高壓提取后總生物堿的電噴霧質(zhì)譜圖，主要為水 解型單酯型生物堿-苯甲酰烏頭原堿(m/z604)、苯甲酰中烏頭原堿(m/z5卯)、 苯甲酰次烏頭原堿(m/z574)。實施例3
將生川烏35g，加水700ml，置于高壓容器內(nèi)，在12(TC、 0. 1MP下煎煮3次， 每次lh，合并3次提取液，濃縮，調(diào)pH:9，用乙醚、乙酸乙酯或氯仿萃取，得到 的有機溶劑層濃縮干燥，即得較純凈的水觶型單酯生物堿，用滴定法測得總堿含 量為76. 11%。 實施例4
將生附子35g，力卩700ml，置于高壓容器內(nèi)，在125'C、 0.14MP下煎煮3次， 每次40min，合并3次提取液，濃縮，調(diào)pl^9，用乙醚、乙酸乙酯或氯仿萃取，得 到的有機溶劑層濃縮干燥，即得較純凈的水解型單酯生物堿，用滴定法測得總堿 含量為96.27%。 實施例5
將黑順片30g，加水600ml，置于高壓容器內(nèi)，在120。C、 0.1MP下煎煮3次， 每次lh，合并3次提取液，濃縮，調(diào)pH-9,用乙醚、乙酸乙酯或氯仿萃取，得到的 有機溶劑層濃縮干燥，即得較純凈的水解型單酯生物堿，用滴定法測得總堿含量 為89.58%。
權利要求
1. 一種烏頭類水解單酯型生物堿的制備方法，其步驟和條件如下以烏頭屬中藥為原料，加入原料藥的20倍水浸泡，置于高壓容器內(nèi)，在壓力為0.05～0.17MP，溫度為110～130℃，時間為10min～6h提取，將提取液濃縮，調(diào)pH＝9，用乙酸乙酯、乙醚或三氯甲烷萃取，得到的有機溶劑層濃縮，干燥，得到一種烏頭類水解單酯型生物堿。
全文摘要
本發(fā)明提供一種烏頭類水解單酯型生物堿的制備方法。以烏頭屬中藥為原料，加20倍水浸泡，置于高壓容器內(nèi)，提取壓力為0.05～0.17MPa，在提取溫度為110～130℃，提取時間為10min～6h的范圍內(nèi)進行提取，將提取液濃縮，調(diào)pH＝9，用乙酸乙酯、乙醚或三氯甲烷萃取，得到的有機溶劑層濃縮，干燥，得到一種烏頭類水解單酯型生物堿。通過電噴霧質(zhì)譜檢測，用有機溶劑萃取后得到的水解型生物堿較純凈，用滴定法測得含量可達50％以上并且無脂類生物堿干擾。此方法方便、高效、易于操作，可用于新藥開發(fā)。
文檔編號A61K36/185GK101423495SQ20081005160
公開日2009年5月6日 申請日期2008年12月16日 優(yōu)先權日2008年12月16日
發(fā)明者劉志強, 劉淑瑩, 宋鳳瑞, 張語遲, 王淑敏, 楊 辛 申請人:中國科學院長春應用化學研究所