專利名稱：：海洋骨原肽作為制備預(yù)防骨質(zhì)疏松藥物、保健食品或食品的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種海洋生物活性寡肽的用途，具體來說是從海洋魚類中提取的海洋骨原肽作為制備預(yù)防骨質(zhì)疏松藥物、預(yù)防骨質(zhì)疏松保健食品或預(yù)防骨質(zhì)疏松食品的用途，屬醫(yī)藥和食品保健領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：骨質(zhì)疏松癥(osteoporosis,0P)是Pommer在1885年提出來的，但直到1990年在丹麥舉行的第三屆國際骨質(zhì)疏松研討會以及1993年在香港舉行的第四屆國際骨質(zhì)疏松研討會上，骨質(zhì)疏松癥才有一個明確的定義，并得到世界的公認。骨質(zhì)疏松癥定義為以骨強度下降、骨折風(fēng)險性增加為特征的骨骼系統(tǒng)的疾病。隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展和生活水平的提高，已漸進入老齡化社會，骨質(zhì)疏松的患病率逐年增加，我國老年人骨質(zhì)疏松的患病率女性為90%,男性為61%,在全世界居常見病第六位。骨質(zhì)疏松癥所致的疼痛可使患者生活質(zhì)量明顯下降，因骨質(zhì)疏松而發(fā)生骨折，所帶來的危害則更為嚴重。如前臂骨折時，雖不增加近期死亡率，但患者疼痛，限制活動，并有骨折錯位及不愈合的可能；脊椎骨折也不增加近期死亡率，但易患呼吸道及消化道疾病或并發(fā)感染而縮短壽命；髖骨骨折則在l年內(nèi)有12%40%死于各種合并癥，存活者有50%行動不便。骨質(zhì)疏松癥可分為三大類一類為原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥，是隨著年齡的增長必然發(fā)生的一種生理性退行性病變。第二類為繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥，是由其他疾病或藥物等一些因素所誘發(fā)的骨質(zhì)疏松癥。第三類為特發(fā)性骨質(zhì)疏松癥，多見于814歲的青少年或成人，多伴有遺傳家庭史。原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥分為兩型。I型即為絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥，為高轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松癥，以松質(zhì)骨變化為主，故常見脊椎和腕部骨折。II型為老年性骨質(zhì)疏松癥，為低轉(zhuǎn)換型，皮質(zhì)骨及松質(zhì)骨均有變化，易發(fā)生髖部骨折，一般發(fā)生在65歲以上的老年人。其中，絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松是全身骨量減少，骨組織顯微結(jié)構(gòu)破壞，骨密度降低，引起骨折危險性增加的一種疾病。常發(fā)生在絕經(jīng)后510年左右，5565歲1/3絕經(jīng)后婦女患有骨質(zhì)疏松癥。1993年世界銀行全球發(fā)展報道中估計，從19902030年全世界50歲以上的婦女將從4.67億增加到12億。在中國，占總?cè)丝诘谋壤龑?%上升到17%，今后患絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的人數(shù)將大大增加。澳大利亞60歲以上婦女發(fā)生骨質(zhì)疏松癥的危險率為58%，男性為28%。英國及多數(shù)歐洲國家的白人婦女在50歲以后，髖骨骨折的發(fā)生率約為17.5%，其他部位的骨質(zhì)疏松性骨折率更高。其原因是女性的骨峰值較男性低，而且婦女除了發(fā)生與年齡相關(guān)的骨丟失過程外，還有絕經(jīng)后骨吸收加速的過程，骨丟失率較男性高。絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的主要發(fā)病機制是雌激素缺乏導(dǎo)致破骨細胞增殖分化，破骨細胞功能活躍，同時抑制破骨細胞凋亡，從而使骨吸收速度超過骨形成速度，造成骨質(zhì)有機物和無機物成比例地減少。另外，雌激素受體(ER)、維生素D受體(VDR)、I型膠原和轉(zhuǎn)化因子-e(TGF-P)等基因多態(tài)性與骨質(zhì)疏松關(guān)系密切。絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病率顯著高于同年齡段的男性。骨質(zhì)疏松是以骨量減少為特征的，而反映骨量的主要指標(biāo)是骨礦密度(BoneMineralDensity,BMD)，通常稱骨密度。骨密度的測量是評價骨質(zhì)丟失，診斷骨質(zhì)疏松的重要手段之一。世界衛(wèi)生組織曾發(fā)布過有關(guān)文件，推薦人體骨密度測量度與骨質(zhì)疏松相關(guān)的診斷標(biāo)準。毫無疑問，骨密度測量已得到當(dāng)代醫(yī)學(xué)界的普遍重視。BMD與骨強度密切相關(guān)，是人群研究的一種有效的骨折危險預(yù)測指標(biāo)。BMD預(yù)測骨折的能力與高血壓預(yù)測腦卒中或血清膽固醇預(yù)測心臟病發(fā)作的能力相當(dāng)或更強。BMD每減少1個標(biāo)準差，骨折危險就增加1.52倍。骨質(zhì)疏松癥女性患者，其骨折危險性比同齡人高3倍左右。就BMD而言，人與人之間的骨折危險至少相差1030倍。因此，BMD是最好的骨折危險預(yù)測指標(biāo)，而且所提供的信息遠勝于由骨折所得到的信息。所以盡早的預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松癥，增加骨量，是減少骨折危險性的主要措施，骨量檢測對于骨質(zhì)疏松癥的診斷和防治有重要的指導(dǎo)意義。通過骨密度的測量，對骨質(zhì)疏松性骨折發(fā)生的危險性進行預(yù)測，是骨密度檢測的主要目的之一。目前，對于骨質(zhì)疏松的預(yù)防基本上只有補充外源性鈣與雌激素療法兩種途徑，由于外源性鈣人體不易吸收，因此單純補鈣預(yù)防骨質(zhì)疏松的效果并不理想;而雌激素療法雖然會緩解骨質(zhì)疏松，可與此同時會對身體產(chǎn)生較大的毒副作用。生物活性肽是指具有特殊生理功能的肽類物質(zhì)。1902年倫敦大學(xué)醫(yī)學(xué)院的Bayliss和Startling從動物的胃腸中發(fā)現(xiàn)了一種能引起胰腺分泌活動的物質(zhì)，稱為分泌素，這是人類第一次發(fā)現(xiàn)生物活性肽類物質(zhì)。此后，伴隨著生物化學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，肽的研究取得了驚人的進展，已成為目前研究的新熱點。肽與蛋白質(zhì)都是氨基酸以酰胺鍵互相連接在一起形成的化合物，不同的是肽的氨基酸聚合度小，蛋白質(zhì)的聚合度大。在結(jié)構(gòu)上，肽處于氨基酸和蛋白質(zhì)的中間位置，但它具有氨基酸與蛋白質(zhì)所不能替代的功能。長期以來，人們僅僅把食物蛋白質(zhì)當(dāng)作一種營養(yǎng)豐富的成分，認為蛋白質(zhì)只有水解成游離氨基酸后才能被吸收。但是近年來的研究發(fā)現(xiàn)，蛋白質(zhì)經(jīng)消化道酶促水解后，主要以10個或10個以下氨基酸組成的寡肽形式被吸收。寡肽比單個氨基酸的吸收更有效，并能直接參與蛋白質(zhì)的合成，因此提高了機體對蛋白質(zhì)的利用率。在氨基酸運輸系統(tǒng)功能出現(xiàn)障礙的情況下，攝入寡肽卻能獲得很好的吸收效果。生物體內(nèi)已發(fā)現(xiàn)幾百種肽，是機體完成各種復(fù)雜的生理活性必不可少的參與者。自然界中存在著大量的生物活性肽，它們在生物活動中起著非常重要的作用，分別具有改善和提高礦物質(zhì)吸收、抗氧化、抗菌、抗腫瘤、保護心血管、免疫調(diào)節(jié)、抗衰老等作用。應(yīng)用這些活性肽可以作為藥物、疫苗以及保健品等。大量研究證明，當(dāng)人體內(nèi)缺乏一些調(diào)節(jié)生理功能的肽時，會導(dǎo)致人體機能的改變。因此從營養(yǎng)學(xué)的角度出發(fā)，在食物結(jié)構(gòu)調(diào)整以滿足人體必需氨基酸需要的同時，適當(dāng)補充某些生物活性肽對增強防病、抗病能力以及延緩衰老都具有深遠意義。目前，開發(fā)和研究生物活性肽類食品在國際保健品行業(yè)中己成為一個焦點。許多天然的生物活性肽具有改善和提高礦物質(zhì)吸收的特性，它們有特異、安全和較高的活性，這類生物制劑具有重要的應(yīng)用價值。海洋是地球上資源最豐富的領(lǐng)域，由于海洋生物物種的生態(tài)環(huán)境比陸生生物復(fù)雜得多，其賦予海洋生物的某些特異的化學(xué)結(jié)構(gòu)是陸地生物體內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)的，這使得海洋成為創(chuàng)新藥物與功能性保健食品的資源寶庫。自20世紀70年代以來，人們已經(jīng)從海洋生物中分離出數(shù)十萬種化學(xué)結(jié)構(gòu)新穎及特異的高活性、高藥效的生物活性物質(zhì)，包括肽類、蛋白質(zhì)類、多糖類、生物堿類、萜類、大環(huán)聚酯類等。海洋生物活性物質(zhì)中肽類是數(shù)量最龐大的一類化合物，達數(shù)萬種之多，浙江海氏生物科技有限公司生產(chǎn)的海洋骨原肽(企業(yè)標(biāo)準號為Q/HSBS2-2006，浙江舟山市技術(shù)監(jiān)督局備案號為Q330900.X20.il22—2006，衛(wèi)生許可證是浙衛(wèi)食證字2006第33090310003號)就是其中之一。海洋骨原肽是以來源廣泛的海洋魚類(三文魚、大馬哈魚、羅非魚等)的魚骨為原料，經(jīng)酶水解產(chǎn)生的一組分子量分布在2003000的寡肽混合物，具有易吸收、吸收快、低粘度、水溶性好等特點。目前只作為補充蛋白質(zhì)的食品營養(yǎng)添加劑。迄今為止，還沒有關(guān)于海洋骨原肽在制備預(yù)防骨質(zhì)疏松藥物、預(yù)防骨質(zhì)疏松保健食品或預(yù)防骨質(zhì)疏松食品中應(yīng)用的任何報導(dǎo)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明是為了解決現(xiàn)有技術(shù)所存在的吸收效果差、副作用大等缺點，提供一種容易吸收、吸收快、低粘度、水溶性好的低分子量海洋骨原肽作為制備預(yù)防骨質(zhì)疏松藥物、預(yù)防骨質(zhì)疏松保健食品或預(yù)防骨質(zhì)疏松食品的用途。本發(fā)明的技術(shù)解決方案是海洋骨原肽作為制備預(yù)防骨質(zhì)疏松藥物或預(yù)防骨質(zhì)疏松食品的用途。所述預(yù)防骨質(zhì)疏松藥物、保健食品為粉劑、顆粒劑、膠囊、片劑、丸劑或口服液等。所述預(yù)防骨質(zhì)疏松食品為淀粉制品、乳及乳制品、豆制品或烘焙制品等。本發(fā)明是發(fā)現(xiàn)了現(xiàn)有物質(zhì)一海洋骨原肽具有預(yù)防骨質(zhì)疏松的功能，發(fā)明了海洋骨原肽作為制備預(yù)防骨質(zhì)疏松藥物或預(yù)防骨質(zhì)疏松食品的用途，具有易吸收、吸收快、低粘度、水溶性好等特點。實驗證實，補充海洋骨原肽可顯著提高去卵巢大鼠的骨礦含量(BMC)和骨礦密度(BMD)，對骨質(zhì)疏松有緩解作用，具有預(yù)防骨質(zhì)疏松的功效。具體實施例方式下面結(jié)合具體實施方案對本發(fā)明作進一步的說明。以浙江海氏生物科技有限公司生產(chǎn)的海洋骨原肽(企業(yè)標(biāo)準號為Q/HSBS2-2006，浙江舟山市技術(shù)監(jiān)督局備案號為Q330900.X20.1122—2006)為原料，可在制備預(yù)防骨質(zhì)疏松藥物、預(yù)防骨質(zhì)疏松保健食品或預(yù)防骨質(zhì)疏松食品中應(yīng)用。海洋骨原肽與其他藥用或食用輔料制成預(yù)防骨質(zhì)疏松藥物或預(yù)防骨質(zhì)疏松保健食品，可為粉劑、顆粒劑、膠囊、片劑、丸劑、口服液等；普通預(yù)防骨質(zhì)疏松食品是將海洋骨原肽添加在淀粉制品、乳及乳制品、豆制品、烘焙制品中等。本發(fā)明制劑對去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松的預(yù)防作用1.實驗方法清潔級健康成年雌性未交配SD大鼠98只，體重300g，北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實驗動物部提供。將大鼠按體重隨機分為6組，每組14只，以標(biāo)準飼料適應(yīng)性飼養(yǎng)一周。用卵巢切除術(shù)建立骨質(zhì)疏松模型。一組進行雙側(cè)卵巢摘除假手術(shù)(0組正常對照)以30mg/kg戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后，俯位固定，在脊柱兩側(cè)切口，無菌消毒處理，切除一小塊脂肪。另6組行雙側(cè)卵巢摘除術(shù)(ovarectomized，OVX):在背部脊柱兩側(cè)切口，切除雙側(cè)卵巢制造骨質(zhì)疏松模型組大鼠。將OVX大鼠隨機分為1、2、3、4、5四組。5組為去卵巢模型組(摘除雙側(cè)卵巢，OVX)。1、2、3、4組為海洋骨原肽低、中、次高、高劑量組，劑量分別為1.125g/kg'd、2.25g/kg'd、4.5g/kg'd、9g/kg'd，分別相當(dāng)于人每天用量的25、50、100和200倍。3d后迸入實驗，假手術(shù)組、去卵巢模型組每天灌胃蒸餾水，去卵巢加受試物組每天灌胃給海洋骨原肽，灌胃量按0.1ml/10g體重計。各組給予正常詞料(由本院動物試驗中心提供)，自由飲水，每周稱重一次。90天后處死動物，留取血清，取肝、脾、腎、子宮稱重，并取雙側(cè)股骨、脛骨、全部椎骨，應(yīng)用HologicQDR24500A型雙能X線骨密度儀(Hologic公司,美國)及小動物專用軟件測量分析，測量參數(shù)為41R，100kVp，掃描窗寬18cm，掃描速率418s/cm測定離體骨密度。2.結(jié)果2.1處死時測定子宮重量驗證去卵巢手術(shù)是否成功由表l可知假手數(shù)組(0組)子宮重量明顯高于其它去卵巢組(PO.Ol)，說明去卵巢手術(shù)是成功的，骨質(zhì)疏松模型建立。表l實驗期末大鼠子宮重量<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>*與假手數(shù)組(o組)比較，p<0.01。2.2本發(fā)明制劑對大鼠體重、臟器體重比的影響由表2可見，實驗期末各組大鼠體重?zé)o顯著性差異(p>0.05)，即海洋骨源肽對大鼠體重?zé)o明顯影響。由表3可見，實驗期末各組大鼠肝臟、脾臟和腎臟體重比無顯著性差異(p>0.05)，即海洋骨原肽對大鼠臟器體重比無明顯影響。表2實驗期末各組大鼠體重<table>complextableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>表3實驗期末大鼠的臟器體重比值<table>complextableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>2.3本發(fā)明制劑對大鼠股骨頭、膝關(guān)節(jié)以及股骨中段骨礦含量(BMC)和骨礦密度(BMD)的影響由表4可見，與骨質(zhì)疏松組(5組)比較，海洋骨原肽低、高劑量組的股骨頭骨礦含量(BMC)和骨礦密度(BMD)有顯著提高(p<0.05)，中、次高劑量組BMC和BMD也有所提高，但差異無顯著性(p>0.05)。由表5可見，與骨質(zhì)疏松組(5組)比較，海洋骨原肽各劑量組的膝關(guān)節(jié)骨礦含量(BMC)和骨礦密度(BMD)均有所提高，但差異無顯著性(p〉0.05)。由表6可見，與骨質(zhì)疏松組(5組)比較，海洋骨原肽低、高劑量組的股骨中段骨礦含量(BMC)和骨礦密度(BMD)有顯著提高(p<0.05)，中、次高劑量組BMC和BMD也有所提高，但差異無顯著性(p>0.05)。表4海洋骨原肽對大鼠股骨頭骨骨礦含量(BMC)、骨礦密度(BMD)的影響組nBMD(g/cm2)BMC(g)別0160.228±0.019*0.073±0.0060*1120.206±0.016*0.066±0.0051*2130.203±0.0120.065±0.0037150.202±0.0230.065±0.00754100.210±0.013*0.067±0.0033*5100.192±0.0150.062土0.0048*表示與骨質(zhì)疏松組(5組)比較差異有顯著性，PO.05表5海洋骨原肽對大鼠膝關(guān)節(jié)骨礦含量(BMC)、骨礦密度(BMD)的影響組別nBMD(g/cm2)BMC(g)0160.261±0.021*0.0652±0.0053*1120.222±0.03700.0554±0.00922130.216±0.0140.0540±0.00363150.225±0.0290.0550±0.00514100.229±0.0150.0551±0.0029100.211±0.0150.0528±0.0036*表示與骨質(zhì)疏松組(5組)比較差異有顯著性，PO.05表6股骨中段骨礦含量(BMC)、骨礦密度(BMD)檢測結(jié)果組nBMD(g/cm2)BMC(g)別0160.168±0.010*0.0536±0.0033*1120.161±0.015*0.0515±0.0048*2130.153±0.0090.0490±0.00293150.156±0,0140.0500±0,00454100.161±0.001*0.0517±0.0037*100.150±0.0070.0478±0.0025*表示與骨質(zhì)疏松組(5組)比較差異有顯著性，P<0.053.結(jié)論結(jié)果顯示，本發(fā)明制劑海洋骨原肽，對去卵巢大鼠的骨礦含量(BMC)和骨礦密度(BMD)均有所提高，對骨質(zhì)疏松有緩解作用，具有預(yù)防骨質(zhì)疏松的功效。權(quán)利要求1.海洋骨原肽作為制備預(yù)防骨質(zhì)疏松藥物、預(yù)防骨質(zhì)疏松保健食品或預(yù)防骨質(zhì)疏松食品的用途。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海洋骨原肽作為制備預(yù)防骨質(zhì)疏松藥物、預(yù)防骨質(zhì)疏松保健食品或預(yù)防骨質(zhì)疏松食品的用途，其特征在于所述預(yù)防骨質(zhì)疏松藥物、預(yù)防骨質(zhì)疏松保健食品為粉劑、顆粒劑、膠囊、片劑、丸劑或口服液。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海洋骨原肽作為制備預(yù)防骨質(zhì)疏松藥物、預(yù)防骨質(zhì)疏松保健食品或預(yù)防骨質(zhì)疏松食品的用途，其特征在于所述預(yù)防骨質(zhì)疏松食品為淀粉制品、乳或乳制品、豆制品或烘焙制品。全文摘要本發(fā)明公開一種海洋骨原肽作為制備預(yù)防骨質(zhì)疏松藥物、預(yù)防骨質(zhì)疏松保健食品或預(yù)防骨質(zhì)疏松食品的用途。具有易吸收、吸收快、低粘度、水溶性好等特點。實驗證實，補充海洋骨原肽可顯著提高去卵巢大鼠的骨礦含量(BMC)和骨礦密度(BMD)，對骨質(zhì)疏松有緩解作用，具有預(yù)防骨質(zhì)疏松的功效。文檔編號A61K35/60GK101167754SQ20071015764公開日2008年4月30日申請日期2007年10月24日優(yōu)先權(quán)日2007年10月24日發(fā)明者勇李,楊睿悅,王軍波,蔡木易,許雅君,韓曉龍申請人:珍奧集團股份有限公司