專利名稱：：西藏綠蘿花及其提取物在制備糖尿病藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及西藏綠蘿花(又名黃金葛、藤芋、石柑子、馬蹄金)及其提取物在抑制葡萄糖苷酶及制備糖尿病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：cc-葡萄糖苷酶(EC3.2.1.20)是一種存在于小腸黏膜細(xì)胞刷狀緣的糖苷代謝酶，該酶針對(duì)雙糖發(fā)揮水解作用，使進(jìn)入小腸的碳水化合物最終形成單糖，被機(jī)體吸收。研究表明，該酶抑制劑有很好的防治糖尿病的功效。糖尿病是目前嚴(yán)重危害人類健康的主要疾病之一，可分為胰島素依賴型(l型，即IDDM)和非胰島素依賴型(2型，即NIDDM)，2型糖尿病占糖尿病患者的95%以上，其治療是以降低血糖水平及減輕癥狀為主要目標(biāo)。糖尿病以高血糖為主要特征，高血糖有兩種情況:一為餐后高血糖，指食物消化吸收過(guò)程中的血糖高峰超越正常范圍；另一為空腹血糖，指食物消化吸收完畢后的基礎(chǔ)血糖高于正常。一直以來(lái)，對(duì)糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)及糖尿病治療需達(dá)到的目標(biāo)，多以空腹血糖為主。近年來(lái)，餐后高血糖在糖尿病的診斷、治療目標(biāo)及慢性并發(fā)癥發(fā)病機(jī)制上的重要性受到愈來(lái)愈多的關(guān)注。一是由于餐后血糖過(guò)高，會(huì)通過(guò)"葡萄糖毒性作用"，加重胰島素的分泌缺陷，機(jī)體處理餐后高血糖的能力進(jìn)一步下降，基礎(chǔ)狀態(tài)下的血糖亦升高，即形成或加重2型糖尿病。二是餐后高血糖也會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)的非酶糖化，從而引起進(jìn)行性的大血管及微血管的病變,導(dǎo)致糖尿病并發(fā)癥心腦血管甚至非糖尿病患者的心腦血管疾病，因此降低餐后高血糖的藥物在治療2型糖尿病及早期的糖耐量減低(IGT)狀態(tài)非常重要?，F(xiàn)在臨床上使用的治療糖尿病藥物主要有4類，即作用于胰島P_細(xì)胞、刺激胰島素分泌的磺酰脲類;促進(jìn)糖代謝的胍類;增強(qiáng)胰島素作用、促進(jìn)外周組織中葡萄糖利用的胰島素增敏劑及a-葡萄糖苷酶抑制劑，前3類都只能降低空腹血糖，僅有a-葡萄糖苷酶抑制劑能降低餐后血糖。同時(shí)降低餐后高胰島素血癥，以達(dá)到減低葡萄糖毒性，減少并發(fā)癥的發(fā)生。阿卡波糖作為廣泛應(yīng)用于臨床的a-葡萄糖苷酶抑制劑，在治療糖耐量減低、減少心腦血管并發(fā)癥方面有明顯療效。研究發(fā)現(xiàn)西藏綠蘿花提取物的石油醚、乙酸乙酯萃取部分有很強(qiáng)抑制oc-葡萄糖苷酶的作用。
發(fā)明內(nèi)容綠蘿花又名黃金葛、藤芋、石柑子、馬蹄金(5"ci/c/a/^i/sawrews(Zi77ofe77ex^7rfr^^7^)為天南星科"Mceae)植物，屬西藏特有珍貴植物。產(chǎn)于西藏寒冷地帶，喜馬拉雅山脈，每年七至八月開花，花期三十天左右，性微寒。本發(fā)明提供一種西藏綠蘿花及從西藏綠蘿花提取的各種提取物或有效成分作為葡萄糖苷酶的抑制劑，及制備治療糖尿病藥物。西藏綠蘿花提取的各種提取物的制備方法是先稱取西藏綠蘿花全草，用乙醇浸泡856h，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后得到水溶液，然后分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取水溶液，萃取液經(jīng)減壓蒸餾并真空干燥后得到西藏綠蘿花提取物膏體。一種用于抑制葡萄糖苷酶的藥物，其中含有西藏綠蘿花及從西藏綠蘿花提取的各種提取物或有效成分，以及藥學(xué)上可接受的輔助劑。一種用于治療糖尿病的藥物，其中含有西藏綠蘿花及從西藏綠蘿花提取的各種提取物或有效成分，以及藥學(xué)上可接受的輔助劑。所述藥物是制成片劑、丸劑、膠囊劑、懸浮劑或乳劑。西藏綠蘿花的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇以及水等溶劑的提取部分，其中石油醚及乙酸乙酯提取部分具有很強(qiáng)抑制cc-葡萄糖苷酶的作用。本發(fā)明的有益效果是西藏綠蘿花及其提取物對(duì)a-葡萄糖苷酶的抑制作用明顯，西藏綠蘿花及其提取物可以降低血糖促進(jìn)胰島素的分泌，用來(lái)制備治療糖尿病藥物。具體實(shí)施例方式本發(fā)明是通過(guò)以下方案實(shí)現(xiàn)實(shí)施例l提取準(zhǔn)確稱取50g干燥的全草，用4090%的乙醇(體積比)浸泡856h,經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后得到水溶液，分別用石油醚，乙酸乙酯，正丁醇依次萃取水溶液(等體積分三次萃取)。萃取液經(jīng)減壓蒸餾并真空干燥后得到膏體。實(shí)施例2"-葡萄糖苷酶活性測(cè)試1.-葡萄糖苷酶活性測(cè)試原理a-葡萄糖苷酶活力的測(cè)定是基于PNPG的酶催化氧化產(chǎn)物——硝基苯(PNP)在400nm處有最大吸收，通過(guò)測(cè)定酶催化反應(yīng)體系在一定時(shí)間后的々oo的數(shù)值，可求得酶活力。以PNPG為底物，在2mL0.05mol/L的磷酸鹽緩沖液(pH為6.8)中，加待測(cè)樣品溶液50//丄與PNPG(終濃度為0.1328mmol/L)，然后加a-葡萄糖苷酶(終濃度為30g/mL)，水浴37°C反應(yīng)10min后，加入0.1mol/LNa2C03溶液4mL終止反應(yīng)，在波長(zhǎng)400nm處測(cè)定釋放出的對(duì)硝基苯(PNP)的吸光度值，計(jì)算抑制率。酶抑制實(shí)驗(yàn)平行做三次。酶活性抑制率=[(AAE-AA)/AAE]X100%式中AAE為酶與底物反應(yīng)后的吸光度值(扣除相應(yīng)空白)，AA為加入抑制劑后酶反應(yīng)的吸光度值(扣除相應(yīng)空白)。2.實(shí)施例1中各部分對(duì)《-葡萄糖苷酶的抑制取不同質(zhì)量的各部分加到ct-葡萄糖苷酶活力的測(cè)定體系中，測(cè)定其吸光度，從而求得樣品對(duì)a-葡萄糖苷酶的抑制率。3.結(jié)果判斷各部分對(duì)cc-葡萄糖苷酶的抑制與陽(yáng)性物阿卡波糖對(duì)cc-葡萄糖苷酶的抑制對(duì)比及ICso(見表l)可知0.25mg/mL的石油醚部分、乙酸乙酯部分對(duì)a-葡萄糖苷酶的抑制作用與40mg/mL的阿卡波糖對(duì)ot-葡萄糖苷酶的抑制作用相差不多。表1綠蘿花各提取物對(duì)a-葡萄糖苷酶的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>實(shí)施例3動(dòng)物實(shí)驗(yàn)綠蘿花對(duì)正常小鼠血糖、血清胰島素、胰高血糖素、肝糖原、肌糖原的影響:正常小鼠50只,隨機(jī)均分為對(duì)照組，綠蘿花0.75,1.50,3.00g/kg3個(gè)劑量組，每天1次,連續(xù)14d，末次給藥后2h,眼眶靜脈取血用葡萄糖氧化酶法測(cè)血糖、用放射免疫法按試劑盒說(shuō)明書測(cè)定血清胰島素、胰高血糖素，并取肝臟、膈肌用改良的蒽酮法測(cè)定糖原含量。結(jié)果:百草降糖片1.5，3.00g/kg兩個(gè)劑量組能顯著降低正常小鼠血糖,增加肝糖原和減少胰高血糖素的含量,促進(jìn)胰島素的分泌(表2)。表2綠蘿花對(duì)工E常小鼠血糖、血清胰島素、膀高血糖素、肝糖原、肌糖原的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>權(quán)利要求1.西藏綠蘿花(Scindapsusaureus(LindenexAndre)Engl)及從西藏綠蘿花提取的各種提取物或有效成分作為α-葡萄糖苷酶的抑制劑。2.西藏綠蘿花"c/w必;mya匿z^(XzWewe""(ire」五"g7J及從西藏綠蘿花提取的各種提取物或有效成分在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。3.西藏綠蘿花提取的各種提取物的制備方法是先稱取西藏綠蘿花全草，用乙醇浸泡856h，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后得到水溶液，然后分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取水溶液，萃取液經(jīng)減壓蒸餾并真空干燥后得到西藏綠蘿花提取物膏體。4.一種用于抑制"-葡萄糖苷酶的藥物，其中含有西藏綠蘿花及從西藏綠蘿花提取的各種提取物或有效成分，以及藥學(xué)上可接受的輔助劑。5.—種用于治療糖尿病的藥物，其中含有西藏綠蘿花及從西藏綠蘿花提取的各種提取物或有效成分，以及藥學(xué)上可接受的輔助劑。6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的藥物，其特征是所述藥物是制成片劑、丸劑全文摘要本發(fā)明公開了一種西藏綠蘿花及其提取物在制備糖尿病藥物中的應(yīng)用，西藏植物綠蘿花(Scindapsusaureus(LindenexAndre)Engl)及其提取部分具有對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制作用及治療糖尿病的功效，特別是西藏綠蘿花的石油醚提取物、乙酸乙酯提取物具有很強(qiáng)的α-葡萄糖苷酶的抑制作用，可作為α-葡萄糖苷酶抑制劑及制備治療糖尿病藥物。文檔編號(hào)A61K36/88GK101181446SQ200710031638公開日2008年5月21日申請(qǐng)日期2007年11月23日優(yōu)先權(quán)日2007年11月23日發(fā)明者焜張,徐學(xué)濤,方巖雄,杜志云,芬程,琴竺,趙肅清,黃寶華申請(qǐng)人:廣東工業(yè)大學(xué)