專利名稱：一種重組人促紅細(xì)胞生成素的藥物注射劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種不含人血白蛋白的重組人促紅細(xì)胞生成素的藥物注射劑及用途。其以一定量的聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯的衍生物做穩(wěn)定劑，不含人血白蛋白，具有長期儲存的穩(wěn)定性，而無病毒污染及人血白蛋白過敏的危險，屬于生物藥品制劑領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
重組人促紅細(xì)胞生成素(Erythropoietin，紅細(xì)胞生成素)是一種糖蛋白，分子量約為30～39KD.依據(jù)其糖型結(jié)構(gòu)的差異可分為a、b兩種。它的生理作用是剌激骨髓中血紅蛋白或紅細(xì)胞的形成，主要由腎臟生成并通過循環(huán)血進(jìn)入骨髓而發(fā)揮作用，重組人紅細(xì)胞生成素具有與天然的促紅細(xì)胞生成素紅細(xì)胞生成素相同的結(jié)構(gòu)及生理作用，臨床上已廣泛應(yīng)用于腎性貧血、外科圍手術(shù)期的紅細(xì)胞動員、腫瘤化療引起的貧血等。
已知在重組人促紅細(xì)胞生成素注射液中，人血白蛋白是一種常見和有效的穩(wěn)定劑(見專利US 4,703,008)。但由于人血白蛋白為血液制品，不可避免的存在著潛在的血源性污染問題(如傳染肝炎病毒、愛滋病毒等)。而且臨床上已經(jīng)觀察到偶然的皮膚疹和尋麻疹，顯示對這種紅細(xì)胞生成素制劑的一些成分過敏，有可能為人血白蛋白，所以臨床上規(guī)定對人血白蛋白過敏者禁用。
為了解決這個問題，人們致力于開發(fā)一種不采用血液衍生成分就能穩(wěn)定作為蛋白類藥物重組人促紅細(xì)胞生成素的方法。例如，美國專利號4,992,419公開了一種具有生物相容性和儲存穩(wěn)定性的紅細(xì)胞生成素制劑，其包括紅細(xì)胞生成素；生理上相容的磷酸鹽緩沖劑；5-50g/L脲；1-50g/L氨基酸；以及0.05-5g/L非離子表面活性劑，所述的非離子表面活性劑是多聚乙二醇類。
中國專利CN1247257C公開了一種穩(wěn)定的重組人促紅細(xì)胞生成素制劑，其包括蛋白保護(hù)劑甘露醇、L-組氨酸鹽酸鹽，金屬離子螯和劑，維持一定pH值的生理上可相溶的緩沖液、等滲劑氯化鈉。
已有發(fā)明為了穩(wěn)定重組人促紅細(xì)胞生成素溶液，采用了多種性質(zhì)的輔料，生產(chǎn)工藝復(fù)雜，而且由于輔料質(zhì)量問題造成的藥品質(zhì)量問題，越來越引起人們的重視。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種新的重組人促紅細(xì)胞生成素藥物注射劑，其配方合理，生產(chǎn)工藝簡單，具有長期儲存的穩(wěn)定性，而無病毒污染及人血白蛋白過敏的危險，特別是減少了由于藥品輔助成分的增加，可能造成的臨床藥物不良反應(yīng)的增加，使藥品的使用更加安全可靠。
本發(fā)明重組人促紅細(xì)胞生成素藥物注射劑，組成如下(a)pH緩沖劑；(b)穩(wěn)定量的聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯的衍生物；(c)滲透壓調(diào)節(jié)劑；(d)藥用量的促紅細(xì)胞生成素。
本發(fā)明pH緩沖劑選自磷酸二氫鈉/磷酸氫二鈉或檸檬酸鈉/檸檬酸其中的一組。pH緩沖劑的濃度范圍是5mM至100mM，pH值的范圍是5至8。
本發(fā)明聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯的衍生物選自聚山梨酯80和聚山梨酯20，其濃度范圍是0.001-0.009％(g/ml)。
本發(fā)明滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉，其濃度范圍是0.1-1.0％(g/ml)。
本發(fā)明促紅細(xì)胞生成素為重組人促紅細(xì)胞生成素、長效重組人促紅細(xì)胞生成素，含量為1000-40000國際單位/毫升。
本發(fā)明藥物注射液配方優(yōu)選聚山梨醇酯80和磷酸二氫鈉/磷酸氫二鈉pH緩沖劑的組合。
本發(fā)明重組人促紅細(xì)胞生成素藥物注射劑，在制備重組人促紅細(xì)胞生成素藥物中的應(yīng)用。
根據(jù)我們多次實驗，在重組人促紅細(xì)胞生成素溶液中只加入聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯的衍生物，維持一定pH值的生理上可相溶的緩沖液，等滲劑氯化鈉，使用經(jīng)過硅化的藥用玻璃容器，既可以保持重組人促紅細(xì)胞生成素注射液的穩(wěn)定性，也可以有效防止其被吸附在玻璃容器的內(nèi)壁上。此發(fā)明與已有發(fā)明相比最大的特點是配方簡單，生產(chǎn)成本降低，藥品輔助成分明顯減少，減少了由于藥品輔助成分的增加，可能造成的臨床藥物不良反應(yīng)的增加，使藥品的使用更加安全可靠。而且非離子型表面活性劑聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯衍生物，作為穩(wěn)定劑，由于其在化學(xué)上的不解離性，不易受電解質(zhì)和溶液PH值的影響，能與大多數(shù)藥物配伍，在藥物注射液中廣泛應(yīng)用。
優(yōu)選配方如下第一種重組人促紅細(xì)胞生成素藥用量聚山梨醇脂800.03mg磷酸二氫鈉二水合物 2.22mg磷酸氫二鈉十二水合物6.45mg氯化鈉 8.7mg注射用水至1ml第二種重組人促紅細(xì)胞生成素藥用量聚山梨醇脂80 0.03mg磷酸二氫鈉一水合物1.68mg磷酸氫二鈉2.56mg氯化鈉8.7mg注射用水 至1ml具體實施方式
實施例一配制3000支3000IU/ml/支的重組人促紅細(xì)胞生成素注射液1、配方組成重組人促紅細(xì)胞生成素3000IU/ml聚山梨脂80 0.03mg/ml磷酸二氫鈉二水合物 2.22mg/ml磷酸氫二鈉十二水合物6.45mg/ml氯化鈉 8.7mg/ml注射用水至3000ml2、配制量取藥用量重組人促紅細(xì)胞生成素原液，90mg聚山梨脂80，加18mM的磷酸二氫鈉/磷酸氫二鈉緩沖液，內(nèi)含26.1g氯化鈉至3000ml，搖勻。
3、分裝；將配制好的溶液無菌過濾到滅菌的容器中。然后分裝至藥用玻璃容器中，每瓶加入1毫升，灌裝制成3000IU/ml的重組人促紅細(xì)胞生成素注射液。
實施例二配制3000支6000IU/ml/支的重組人促紅細(xì)胞生成素注射液
1、配方組成重組人促紅細(xì)胞生成素6000IU/ml聚山梨脂80 0.03mg/ml磷酸二氫鈉一水合物 1.68mg/ml磷酸氫二鈉 2.56mg/ml氯化鈉 8.7mg/ml注射用水至3000ml2、配制量取藥用量重組人促紅細(xì)胞生成素原液，90mg聚山梨脂80，加18mM的磷酸二氫鈉/磷酸氫二鈉緩沖液，內(nèi)含26.1g氯化鈉至3000ml，搖勻。
3、分裝；將配制好的溶液無菌過濾到滅菌的容器中。然后分裝至藥用玻璃容器中，每瓶加入1毫升，灌裝制成6000IU/ml的重組人促紅細(xì)胞生成素注射液。
本發(fā)明的注射液顯示類似于目前藥物產(chǎn)品的藥物動力學(xué)性質(zhì)，例如吸收和分布的EPO濃度水平類似于目前市售含人血白蛋白的重組人促紅細(xì)胞生成素的藥物注射液。通過交叉實驗法對家兔皮下注射目前市售含人血白蛋白的重組人促紅細(xì)胞生成素的注射液及本發(fā)明的注射液，應(yīng)用放射免疫分析方法測定動物體內(nèi)的重組促人紅細(xì)胞生成素的濃度，通過對達(dá)峰濃度(Cmax)、達(dá)峰時間(Tmax)、曲線下面積(AUC)的測定結(jié)果表明，注射兩種制劑后，其藥代動力學(xué)特征相似，特別是達(dá)峰濃度(Cmax)和達(dá)峰時間(Tmax)的測定，兩種制劑均無顯著差異。(詳見表1及表2)
表1；兩種注射劑的達(dá)峰濃度(ng/ml)對比

表1；兩種注射劑的達(dá)峰時間(h)對比


穩(wěn)定性實驗結(jié)果顯示，應(yīng)用本發(fā)明提供的配方及方法，生產(chǎn)不含人血白蛋白的重組人促紅細(xì)胞生成素注射液在2-8℃條件下，2年內(nèi)質(zhì)量穩(wěn)定。
(詳見表3)表3批號20020901貯存2℃～8℃避光保存

權(quán)利要求
1.一種新的重組人促紅細(xì)胞生成素藥物注射劑，其特征在于其組成如下(a)pH緩沖劑；(b)穩(wěn)定量的聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯的衍生物；(c)滲透壓調(diào)節(jié)劑；(d)藥用量的促紅細(xì)胞生成素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的的藥物注射劑，其特征在于pH緩沖劑選自磷酸二氫鈉/磷酸氫二鈉、檸檬酸鈉/檸檬酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的的藥物注射劑，其特征在于聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯的衍生物選自聚山梨酯80和聚山梨酯20，其濃度范圍是0.001-0.009％(g/ml)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的的藥物注射劑，其特征在于滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉，其濃度范圍是0.1-1.0％(g/ml)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的的藥物注射劑，其特征在于權(quán)利要求1的制劑，其中的促紅細(xì)胞生成素為重組人促紅細(xì)胞生成素、長效重組人促紅細(xì)胞生成素，含量為1000-40000國際單位/毫升。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的的藥物注射劑，其特征在于pH緩沖劑的濃度范圍是5mM至100mM，pH值的范圍是5至8。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的的藥物注射劑，其特征在于在制備重組人促紅細(xì)胞生成素藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供一種重組人促紅細(xì)胞生成素的藥物注射劑，它不含人血白蛋白，以一定量的聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯的衍生物做穩(wěn)定劑，其配方合理，生產(chǎn)工藝簡單，制備成具有長期儲存穩(wěn)定性的注射劑，無病毒污染及人血白蛋白過敏的危險，特別是減少了由于藥品輔助成分的增加，可能造成的臨床藥物不良反應(yīng)的增加，更加安全地用于治療或預(yù)防促紅細(xì)胞生成素適用的病癥。
文檔編號A61K47/34GK1977969SQ20061014620
公開日2007年6月13日 申請日期2006年12月12日 優(yōu)先權(quán)日2006年12月12日
發(fā)明者于萍, 李慶河, 蘇煥然, 趙先亮, 郗遵波 申請人:山東科興生物制品有限公司