專利名稱：六味地黃湯的中藥生物制劑及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥制劑，特別是涉及一種六味地黃湯的中藥生物制劑及制備方法。

背景技術(shù)：
植根于中國(guó)傳統(tǒng)文化的中藥，已經(jīng)有了幾千年的發(fā)展歷史，而西藥的歷史只有一百多年，可是在現(xiàn)代醫(yī)療體系中，占主要地位的還是西藥。究其原因，西藥是單體藥，分子量小，易于進(jìn)入人體細(xì)胞，因此對(duì)病灶的治療更為直接、見效快；而中藥是復(fù)方(群體)藥，分子量大，是各種化學(xué)成分的混合物，至今尚未明了其中各成分在細(xì)胞及分子水平上的功能及作用機(jī)理，因此它在疾病的治療中見效慢。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服純中藥制劑的上述缺點(diǎn)，提供一種具有中藥小分子活性成分，分子量小，易于進(jìn)入人體細(xì)胞，見效快的六味地黃中藥生物制劑。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供上述六味地黃湯中藥生物制劑的制備方法。
傳統(tǒng)中藥主要依靠大分子發(fā)揮療效，本發(fā)明將現(xiàn)代生物技術(shù)與傳統(tǒng)中藥方劑有機(jī)結(jié)合起來(lái)，將微生物引入到六味地黃湯中進(jìn)行發(fā)酵代謝，通過微生物的生物轉(zhuǎn)化功能和自身營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的利用，以強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合的方式，制備六味地黃湯的中藥生物制劑。
上述六味地黃湯，包括如下組分和重量份數(shù) 熟地20-80 制山萸20-60 山藥20-60 澤瀉10-50 牡丹皮10-50 茯苓20-60。
上述本發(fā)明所用的微生物優(yōu)選光合細(xì)菌，所述光合細(xì)菌優(yōu)選紫色非硫細(xì)菌科細(xì)菌。
上述中藥生物制劑的制備方法，包括如下步驟 (1)將上述六味地黃湯藥材水煎煮并濃縮至濃度為0.2～2g/ml； (2)取豆?jié){4～8份，發(fā)酵，過濾得到豆?jié){發(fā)酵液； (3)將上述豆?jié){發(fā)酵液加到六味地黃湯水煎液中，調(diào)pH至6～10； (4)將光合細(xì)菌接種到六味地黃湯中，在10～30℃溫度和光照條件下發(fā)酵1～5個(gè)月，所得藥液進(jìn)行分離，提取，精制，滅菌，制成口服制劑、噴霧干燥或冷凍干燥制成顆粒裝膠囊或固體制劑。
本發(fā)明的主要原料為熟地、制山萸、山藥、澤瀉、牡丹皮、茯苓，通過光合細(xì)菌發(fā)酵，使藥效更充分的發(fā)揮。熟地滋腎填精，為主藥；輔以山藥補(bǔ)脾固精，制山萸肉養(yǎng)肝澀精，稱為三補(bǔ)。又用澤瀉清瀉腎火，并防熟地黃之滋膩；茯苓淡滲脾濕，以助山藥之健運(yùn)，丹皮清泄肝火，并制山萸肉之溫，共為佐使藥，謂之三瀉。六藥合用，補(bǔ)中有瀉，寓瀉于補(bǔ)，相輔相成，補(bǔ)大于瀉，共湊滋補(bǔ)肝腎之效。
與已有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)及效果 1.傳統(tǒng)的六味地黃制劑存在的農(nóng)藥、重金屬等雜質(zhì)殘留。中藥材中的重金屬、農(nóng)藥、致癌物等有害物質(zhì)殘留超標(biāo)問題一直未得到解決，影響六味地黃制劑的長(zhǎng)期服用。本發(fā)明將光合細(xì)菌引入到六味地黃湯中進(jìn)行發(fā)酵代謝，通過光合細(xì)菌的生物轉(zhuǎn)化功能將藥材中的重金屬，農(nóng)藥，致癌物質(zhì)降低或去除，這對(duì)于需長(zhǎng)期服用六味地黃制劑作為保健用途的消費(fèi)者尤為重要。
2.由于生產(chǎn)工藝的原因，傳統(tǒng)制劑需加大量輔料才能成型，所以服用量大，生物利用度低。本發(fā)明的制備方法經(jīng)微生物發(fā)酵處理，將大分子物質(zhì)代謝為小分子活性物質(zhì)，提高了生物利用度，吸收迅速，完全，并降低了服用量。
3.六味地黃湯經(jīng)光合細(xì)菌代謝后制備的中藥生物制劑，在增強(qiáng)免疫、抗衰老和治療腎陰虛證模型小鼠等方面的作用明顯增強(qiáng)，優(yōu)于傳統(tǒng)的六味地黃湯。

具體實(shí)施例方式 實(shí)施例1六味地黃湯中藥生物制劑的制備 將熟地20g，制山萸30g，山藥55g，澤瀉15g，牡丹皮50g，茯苓30g，用水煎煮并濃縮至濃度為0.5g/ml；取豆?jié){4份，發(fā)酵，過濾得到豆?jié){發(fā)酵液；將豆?jié){發(fā)酵液加到六味地黃湯水煎液中，調(diào)pH至中性；將紫色非硫細(xì)菌科細(xì)菌(紅螺菌)接種到六味地黃湯中，在30℃溫度和光照條件下發(fā)酵2個(gè)月，所得藥液進(jìn)行分離，提取，精制，滅菌，制成口服制劑。
實(shí)施例2六味地黃湯中藥生物制劑的制備 將熟地70g，制山萸50g，山藥25g，澤瀉45g，牡丹皮12g，茯苓50g，用水煎煮并濃縮至濃度為1.5g/ml；取豆?jié){7份，發(fā)酵，過濾得到豆?jié){發(fā)酵液；將豆?jié){發(fā)酵液加到六味地黃湯水煎液中，調(diào)pH至10；將紫色非硫細(xì)菌科細(xì)菌(紅細(xì)菌)接種到六味地黃湯中，在28℃溫度和光照條件下發(fā)酵5個(gè)月，所得藥液進(jìn)行分離，提取，精制，滅菌，噴霧干燥膠囊或冷凍干燥制成固體片劑。
實(shí)施例3治療腎陰虛證實(shí)驗(yàn) 采用NIH小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分組，即正常組、模型組、六味地黃湯組、光合細(xì)菌組、光合細(xì)菌加六味地黃湯組。除正常對(duì)照組外，其余各組動(dòng)物每天灌胃給予甲狀腺素3mg、利血平0.02mg/只，每日一次，連續(xù)7天，與此同時(shí)，各組動(dòng)物灌胃給予相應(yīng)的藥物，每日一次，連續(xù)7天，每天觀察動(dòng)物癥狀、體重、7天內(nèi)存活動(dòng)物數(shù)，末次給藥后1h脫臼處死動(dòng)物，稱取脾、胸腺重量，計(jì)算臟器指數(shù)。結(jié)果見表1，表明六味地黃湯，光合細(xì)菌加六味地黃湯組均能明顯改善陰虛模型的體征(閉眼、靜臥、行動(dòng)遲緩等虛象)，增加陰虛動(dòng)物的體重，提高動(dòng)物的存活率，并能顯著增加脾指數(shù)、胸腺指數(shù)，且相比之下光合細(xì)菌加六味地黃湯組更有優(yōu)勢(shì)。
表1光合細(xì)菌加六味地黃湯對(duì)腎陰虛小鼠的影響
注與正常組比較*P＜0.05 **P＜0.01 與模型組比較★P＜0.05，★★P＜0.01 實(shí)施例4增強(qiáng)免疫力實(shí)驗(yàn) 采用NIH小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分組，即正常組、模型組、六味地黃湯組、光合細(xì)菌組、光合細(xì)菌加六味地黃湯組。各組動(dòng)物每天灌胃給予相應(yīng)的藥物0.2ml/10g，正常組予以同容量的蒸餾水，每日1次。與此同時(shí)，除正常對(duì)照組外，其余各組動(dòng)物均同時(shí)皮下注射氫化可的松40mg/kg以造成免疫力低下模型，每日1次。給藥后第10d，腹部去毛約3cm×3cm，在去毛部位涂1％二硝基氟苯50μl，于給藥后第14d以1％二硝基氟苯10μl涂右耳，24h后處死小鼠，用8MM打孔器打取兩耳相同部位的耳片，稱重量，以左右耳片重量之差為腫脹度，觀察對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的影響。結(jié)果見表2，表明光合細(xì)菌加六味地黃湯對(duì)免疫功能低下小鼠有明顯的免疫增強(qiáng)作用，而六味地黃湯在該劑量下無(wú)此作用。
表2光合細(xì)菌加六味地黃湯對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的影響
注與模型組比較，*P＜0.05 實(shí)施例5抗衰老實(shí)驗(yàn) 采用SD大鼠，以D-半乳糖腹腔注射(50mg/kg，0.5ml/100g，1次/日)。造模6周，給中藥4周(開始造模后第3周給中藥)。末次給藥24h后，取血和腦，制備腦組織勻漿液和血清，進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)。結(jié)果見表3，表明六味地黃湯，光合細(xì)菌加六味地黃湯均有顯著的抗衰老的作用，其中光合細(xì)菌加六味地黃湯的抗衰老的作用明顯增強(qiáng)。
表3光合細(xì)菌加六味地黃湯對(duì)衰老大鼠SOD，MDA，GSH-PX的影響 #與生理鹽水組比較，p＜0.05；*與模型組比較，p＜0.05； &與六味地黃湯組比較，p＜0.05 實(shí)施例6化學(xué)成分研究 對(duì)六味地黃湯加光合細(xì)菌前后進(jìn)行掃描，得到質(zhì)譜圖，發(fā)現(xiàn)(m/z)50～1000范圍內(nèi)，六味地黃湯加光合細(xì)菌前與后的碎片離子數(shù)量及母離子大小發(fā)生了明顯的變化。六味地黃湯加光合細(xì)菌前母離子分散在(m/z)50～900范圍內(nèi)，母離子比較多及碎片離子數(shù)量較多；六味地黃湯加光合細(xì)菌后母離子分散在(m/z)50～500的范圍內(nèi)，母離子比較多及碎片離子數(shù)量較少，并且(m/z)500～1000范圍內(nèi)幾乎無(wú)m/z大的母離子。初步說明六味地黃湯加光合細(xì)菌后，由于光合細(xì)菌的代謝作用使大分子物質(zhì)變成小分子活性物質(zhì)。
權(quán)利要求
1.一種六味地黃湯的中藥生物制劑，其特征是將微生物接種到六味地黃湯中進(jìn)行發(fā)酵制備而成。
2.如權(quán)利要求1所述的六味地黃湯的中藥生物制劑，其特征在于所述六味地黃湯包括如下組分和重量份數(shù)
熟地20-80 制山萸20-60 山藥20-60
澤瀉10-50 牡丹皮10-50 茯苓20-60。
3.如權(quán)利要求1或2所述的六味地黃湯的中藥生物制劑，其特征在于所述微生物為光合細(xì)菌。
4.如權(quán)利要求3所述的六味地黃湯的中藥生物制劑，其特征在于所述光合細(xì)菌為紫色非硫細(xì)菌科細(xì)菌。
5.權(quán)利要求3所述中藥生物制劑的制備方法，其特征在于包括如下步驟
(1)將上述藥材水煎煮并濃縮至濃度為0.2～2g/ml；
(2)取豆?jié){4～8份，發(fā)酵，過濾得到豆?jié){發(fā)酵液；
(3)將上述豆?jié){發(fā)酵液加到六味地黃湯水煎液中，調(diào)pH至6～10；
(4)將光合細(xì)菌接種到六味地黃湯中，在10～30℃溫度和光照條件下發(fā)酵1～5個(gè)月，所得藥液進(jìn)行分離，提取，精制，滅菌，制成口服制劑、噴霧干燥或冷凍干燥制成顆粒裝膠囊或固體制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種六味地黃湯的中藥生物制劑及其制備方法。本發(fā)明將生物技術(shù)與傳統(tǒng)中藥方劑結(jié)合起來(lái)，將光合細(xì)菌引入到六味地黃湯中進(jìn)行發(fā)酵代謝，通過光合細(xì)菌的生物代謝轉(zhuǎn)化功能和自身營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的利用，制備出六味地黃湯的中藥生物制劑。它將六味地黃湯藥材水煎煮并濃縮至濃度為0.2～2g/ml；另取豆?jié){4～8份，發(fā)酵，過濾。將豆?jié){發(fā)酵液加到六味地黃湯水煎液中，調(diào)pH至6～10。將光合細(xì)菌接種到六味地黃湯中，在10～30℃溫度和光照條件下發(fā)酵1～5個(gè)月，所得藥液進(jìn)行分離，提取，精制，滅菌，制成各種劑型。六味地黃湯經(jīng)光合細(xì)菌代謝后制備的中藥生物制劑，在增強(qiáng)免疫、抗衰老和治療腎陰虛證模型小鼠等方面的作用增強(qiáng)，明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的六味地黃湯。
文檔編號(hào)A61P1/14GK1970025SQ200610123868
公開日2007年5月30日 申請(qǐng)日期2006年11月29日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月29日
發(fā)明者趙越 申請(qǐng)人:廣東藥學(xué)院