六味地黃湯提取物在治療癡呆或認(rèn)知功能障礙中的用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及六味地黃湯提取物的用途，具體涉及六味地黃湯提取物在制備預(yù)防和/或治療癡呆或認(rèn)知功能障礙的藥物中的用途。本發(fā)明的六味地黃湯提取物能夠明顯改善癡呆模型小鼠的物體識(shí)別記憶能力、空間學(xué)習(xí)記憶能力、被動(dòng)回避反應(yīng)能力和主動(dòng)回避反應(yīng)能力，可用于預(yù)防和/或治療癡呆或認(rèn)知功能障礙，具有很好的應(yīng)用前景。
【專利說明】六味地黃湯提取物在治療癡呆或認(rèn)知功能障礙中的用途

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及六味地黃湯提取物的用途，具體涉及六味地黃湯提取物在制備預(yù)防和 /或治療癡呆或認(rèn)知功能障礙的藥物中的用途。

【背景技術(shù)】
[0002] 癡呆是腦部疾病所致的綜合征，它通常具有慢性進(jìn)行性的性質(zhì)，并在意識(shí)清楚的 情況下，出現(xiàn)多種高級(jí)皮層功能奈亂，通常伴有認(rèn)知功能的損傷，偶爾W情緒控制和社會(huì)行 為或動(dòng)機(jī)的衰退為前驅(qū)癥狀。它不同于先天精神發(fā)育遲滯，并且通常要求認(rèn)知功能障礙持 續(xù)存在至少6個(gè)月。輕度認(rèn)知障礙（mild CO即itive impairment,MCI)特指那些記憶或認(rèn) 知功能下降但未達(dá)到癡呆標(biāo)準(zhǔn)的人，MCI發(fā)展成癡呆的危險(xiǎn)性高于正常人群，向阿爾茨海默 ?。ˋlzheimer's Disease, AD)的年轉(zhuǎn)化率是正常人群的10倍，MCI被認(rèn)為是正常衰老向 癡呆的過渡階段。
[0003] 目前國(guó)際上對(duì)癡呆的分類主要有3類；①老年性癡呆也稱阿爾茨海默病 (Alzheimer's Disease, AD)，是發(fā)生在老年期及老年前期的一種慢性進(jìn)行性退化性腦變性 疾病，W進(jìn)行性記憶減退、認(rèn)知障礙、人格改變?yōu)橹饕卣鳌７譃榧易暹z傳性老年性癡呆和 散發(fā)性兩種，而家族遺傳性老年性癡呆又分為早發(fā)型和晚發(fā)型。②血管性癡呆（Vascular Dementia, VaD)，是由于腦血管疾病的原因，造成缺血性、出血性及急慢性缺血缺氧性腦血 管疾病引起的腦組織損害基礎(chǔ)上產(chǎn)生的W高級(jí)神經(jīng)認(rèn)知功能障礙為主的一組臨床綜合征。 主要包括多發(fā)梗死性癡呆、多發(fā)性腔隙性癡呆、腦淀粉樣血管病變、腦低灌注性癡呆W及出 血性癡呆等。③混合性癡呆，指既有老年性癡呆又有血管性癡呆或其他類型癡呆，其他類 型癡呆主要包括額顯葉癡呆（F'ronto-Temproal Dementia, FTD)、路易體癡呆值ementia of Lewy Body, DLB)、帕金森病性癡呆（Parkinson Disease Dementia)、亨廷頓病伴癡呆 (Huntington Disease Dementia)、皮質(zhì)基底節(jié)變性（Corticobasal Degeneration)等癡呆 類型。其中阿爾茨海默病占癡呆癥50 %?60 %，位于第一，而第二位便是血管性癡呆。
[0004] 對(duì)于癡呆的治療藥物主要包括；①抗精神病藥，其適應(yīng)癥為癡呆伴發(fā)的幻覺和妄 想等精神病性癥狀，還有嚴(yán)重的激越和興奮情況下也可用，在擔(dān)妄也可W應(yīng)用。臨床研究 資料表明，所有傳統(tǒng)抗精神病藥物在用于癡呆的治療中都有一定療效，但療效相當(dāng)，并且在 使用傳統(tǒng)抗精神病藥物治療癡呆患者伴發(fā)的激越中，只有18%的患者能從中獲益，而且傳 統(tǒng)藥物很容易產(chǎn)生難W耐受的副反應(yīng)。由于傳統(tǒng)抗精神病藥物的副反應(yīng)，近年來開始使用 非傳統(tǒng)抗精神病藥物：氯氮平、利培麗、奧氮平、奎的平。雖然非傳統(tǒng)抗精神藥物的療效和 安全性較傳統(tǒng)抗精神藥物有一定的提高，但也會(huì)出現(xiàn)錐體外系、嗜睡、過度鎮(zhèn)靜和粒細(xì)胞 缺乏等副反應(yīng)，同時(shí)氯氮平有明顯的抗膽堿能的作用，因此也不適用于癡呆患者。②情感 調(diào)節(jié)藥物，其適應(yīng)癥為癡呆伴發(fā)的激越和攻擊性，但會(huì)產(chǎn)生皮疹、鎮(zhèn)靜、運(yùn)動(dòng)不能、肝損傷 等副作用，并且對(duì)于患者的認(rèn)知功能改善效果較差。③抗抑郁藥，其適應(yīng)癥為癡呆患者伴 隨激越或攻擊性而發(fā)生的抑郁表現(xiàn)，它雖然可W有效的抗抑郁，改善患者的感情淡漠、抑 郁、易激惹、意識(shí)混濁、焦慮、恐懼及坐立不安。但其副作用也較為明顯，主要包括；鎮(zhèn)靜、 體位性低血壓W及擔(dān)妄。④己醜膽堿醋酶抑制劑，越來越多的臨床試驗(yàn)證明己醜膽堿醋 酶抑制劑不但能改善認(rèn)知功能，而且對(duì)于輕度和中度AD患者伴發(fā)的行為與精神癥狀也有 效，但其只能延緩病程而不能從根本上改善癡呆患者認(rèn)知功能。⑥N-甲基-D-天冬氨酸 (N-methyl-D-aspartic acid, NMDA)受體枯抗劑，NMDA受體在涉及學(xué)習(xí)和記憶的各種形式 的突觸可塑性方面起重要作用，NMDA受體被明顯激活而產(chǎn)生興奮性毒性。但是完全阻斷 NMDA受體也損害正常突觸傳遞。
[0005] 目前對(duì)于MCI的治療尚無統(tǒng)一方案，沒有通過FDA批準(zhǔn)的預(yù)防和/或治療的藥物， 一般的治療是應(yīng)用神經(jīng)保護(hù)藥和促智藥，如維生素E、維生素C和化拉西坦，葉酸、維生素 B12低于正常水平者進(jìn)行補(bǔ)充，但療效還在研究。
[0006] 實(shí)際中，仍需要更為有效且副作用小的治療癡呆或認(rèn)知功能障礙的藥物。
[0007] 傳統(tǒng)中藥因其副作用小且標(biāo)本兼治廣受患者信賴，六味地黃方作為其中的代表名 方經(jīng)過千年傳承，具有顯著的滋陰補(bǔ)腎、增強(qiáng)免疫、抗衰老等功效，但尚無嚴(yán)格的臨床研究 證明其對(duì)癡呆或認(rèn)知功能障礙有治療作用。而對(duì)于六味地黃湯提取物，更無證明其對(duì)癡呆 或認(rèn)知功能障礙有改善或治療作用。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的發(fā)明人經(jīng)過大量創(chuàng)造性研究，發(fā)現(xiàn)傳統(tǒng)中藥名方六味地黃湯經(jīng)過科學(xué)處 理和提取后，能夠明顯改善癡呆模型小鼠的物體識(shí)別記憶能力、被動(dòng)回避反應(yīng)能力、主動(dòng)回 避反應(yīng)能力及空間學(xué)習(xí)記憶能力。本發(fā)明即基于W上發(fā)現(xiàn)而完成。
[0009] 本發(fā)明提供了六味地黃湯提取物在制備預(yù)防和/或治療癡呆或認(rèn)知功能障礙的 藥物中的用途。
[0010] 根據(jù)本發(fā)明任一項(xiàng)所述的用途，其中六味地黃湯的原料藥由熟地黃、山萊英、 山藥、澤瀉、牡丹皮和巧冬六味中藥配伍組成，優(yōu)選地，按照巧.8?7. 3) :(4.4?3.6): (4. 4?3. 6) : (3. 3?2. 7) : (3. 3?2. 7) : (3. 3?2. 7)的重量比例配伍組成，特別優(yōu)選地， 按照8 ;4 ;4 ;3 ;3 ;3的重量比例配伍組成。
[0011] 根據(jù)本發(fā)明任一項(xiàng)所述的用途，其中六味地黃湯提取物包括11. 4-17. 0重量％的 多糖，1. 85-2. 27重量％的糖巧（糖式）W及23. 5-35. 5重量％的寡糖。
[0012] 在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述六味地黃湯提取物包括14. 2重量％的多糖。
[0013] 在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述六味地黃湯提取物包括2. 06重量％的糖巧（糖式）。
[0014] 在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述六味地黃湯提取物包括29. 5重量％的寡糖。
[0015] 在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，所述六味地黃湯提取物含有14. 2重量％的多糖， 2. 06重量％的糖巧（糖式）W及29. 5重量％的寡糖。
[0016] 根據(jù)本發(fā)明任一項(xiàng)所述的用途，其中所述的多糖含有鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、 半乳糖和半乳糖酵酸。
[0017] 根據(jù)本發(fā)明任一項(xiàng)所述的用途，所述糖巧含有莫諾巧、馬錢素和巧藥巧。
[001引在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述莫諾巧、馬錢素和巧藥巧的含量分別為 0. 92-1. 12%、0. 48-0. 60%和 0. 44-0. 53%。
[0019] 根據(jù)本發(fā)明任一項(xiàng)所述的用途，其中所述的寡糖為甘露H糖。
[0020] 根據(jù)本發(fā)明任一項(xiàng)所述的用途，其中六味地黃湯提取物的制備方法包括W下步 驟：
[0021] i )將由熟地黃、山萊英、山藥、澤瀉、丹皮和巧冬按巧.8?7.:3) :(4.4?3.6): (4. 4?3. 6) : (3. 3?2. 7) : (3. 3?2. 7) : (3. 3?2. 7)的重量比例組成的混合物，優(yōu)選地， 按8 ;4 ;4 ;3 ;3 ;3組成的混合物用水蒸煮一次或多次（例如兩次或H次），然后濃縮至浸 膏；
[0022] ii )伴隨攬拌往浸膏中加入C1-4焼基醇至濃度10-40% (v/v)(例如25-35% v/ V，例如30% v/v)，放置，離也，W及任選的沖洗的步驟，將離也所得上清液與任選的洗液合 并為上清液；
[002引址）濃縮上清液，伴隨攬拌往濃縮液中加C1-4焼基醇至濃度50-95 % (v/v)(例如 55-80% v/v，例如60% v/v)，放置，分離得部位A和上清液；
[0024] iv )將化）中上清液進(jìn)行大孔吸附樹脂柱層析，用水和極性有機(jī)溶劑依次洗脫，極 性有機(jī)溶劑洗脫液濃縮后得部位B ;
[0025] V )將iv )中水洗脫液濃縮后上活性炭柱，用水和極性有機(jī)溶劑依次洗脫，極性有 機(jī)溶劑洗脫液濃縮后得部位C ;
[0026] Vi)將化）中部位A，iv )中部位B和V )中部位C合并即得所述六味地黃湯提取 物。
[0027] 在本發(fā)明的實(shí)施方案中，其中六味地黃湯提取物的制備方法包括W下（1)-(3)項(xiàng) 中的一項(xiàng)或多項(xiàng)：
[002引 （1)步驟iv )中的大孔吸附樹脂可W為所有型號(hào)的弱極性大孔吸附樹脂，例如為 HP-20 ；
[0029] (2)其中Cw焼基醇選自甲醇、己醇中的一種或兩種；
[0030] (3)其中所述極性有機(jī)溶劑選自甲醇、己醇、丙醇和丙麗中的一種或多種，其濃度 范圍為10-95%，例如為20-60%，例如為30%。
[0031] 根據(jù)本發(fā)明任一項(xiàng)所述的用途，其中所述藥物還包括藥學(xué)上可接受的載體或賦形 劑。
[0032] 根據(jù)本發(fā)明任一項(xiàng)所述的用途，所述癡呆或認(rèn)知功能障礙疾病選自(1)中樞神經(jīng)系 統(tǒng)變性疾?。话柎暮Ｄ?、輕度認(rèn)知障礙、額-顯葉癡呆、Prion病、路易體癡呆、帕金森 病、亨廷頓?。豢?非變性病癡呆：①血管性癡呆；②占位性病變引起的癡呆；腫瘤、慢性硬膜 下血腫、慢性腦賊腫引起的癡呆；③感染引起的癡呆：腦膜腦炎、神經(jīng)梅毒、艾滋病、阮蛋白 病引起的癡呆；④腦外傷性癡呆；⑥正常頗壓性腦積水引起的癡呆；⑧內(nèi)分泌代謝障礙引 起的癡呆；內(nèi)分泌障礙、庫(kù)欣綜合征、高膜島素血癥、甲狀腺功能低下、垂體功能減退、低血 糖、肝功能衰竭、腎衰竭、肺功能衰竭、慢性電解質(zhì)奈亂、血撲晰病、維生素炬1、煙酸、葉酸、 維生素B12等）缺乏引起的癡呆；⑦中毒、缺氧（酒精、重金屬、一氧化碳、藥物、缺氧等）引 起的癡呆；⑨副腫瘤綜合征引起的癡呆。
[0033] 下面對(duì)本發(fā)明的各個(gè)方面和特點(diǎn)作進(jìn)一步的描述。
[0034] 本發(fā)明使用的各種術(shù)語和短語具有本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般含義，即便如此， 本發(fā)明仍然希望再次對(duì)該些術(shù)語和短語更詳盡的說明和解釋，提及的術(shù)語和短語如有與公 知含義不一致的，W本發(fā)明所表述的含義為準(zhǔn)。
[00巧]本發(fā)明所述"六味地黃湯"為中藥湯劑，是由熟地黃、山萊英、山藥、澤瀉、牡丹皮和 巧冬六味中藥按照一定的重量比例配伍組成而制作的水煎劑。
[0036] 本發(fā)明所述"六味地黃湯提取物"，是W熟地黃、山萊英、山藥、澤瀉、牡丹皮和巧冬 為原料，按照一定配比，經(jīng)過物理化學(xué)提取分離過程，定向獲取和濃集其中的某一種或多種 有效成分而形成的混合物產(chǎn)品。在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述六味地黃湯提取物的制備方 法和各組分含量測(cè)定方法參照中國(guó)發(fā)明專利CN1626228A。在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，所 述六味地黃湯提取物參照中國(guó)發(fā)明專利CN1626228A中實(shí)施例1的方法制備，也稱為六味地 黃巧糖。
[0037] 在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述"六味地黃巧糖"是指包括14. 2重量％的多糖，2. 06 重量％的糖巧（莫諾巧、馬錢素和巧藥巧）和29. 5重量％的甘露H糖的六味地黃湯提取 物，其中六味地黃湯的原料藥由熟地黃、山萊英、山藥、澤瀉、牡丹皮和巧冬六味中藥W 8: 4 ;4 ;3 ;3 ;3的重量比例配伍組成。
[0038] 本文所用術(shù)語"治療"具有其一般含義，并且在本文特別地是指對(duì)已經(jīng)罹患癡呆或 認(rèn)知功能障礙的哺乳動(dòng)物采用本發(fā)明的聯(lián)合用藥物或藥盒產(chǎn)品進(jìn)行處理，W期對(duì)所述癡呆 或認(rèn)知功能障礙產(chǎn)生治療、治愈、緩解、減輕等作用。
[0039] 類似地，本文所用術(shù)語"預(yù)防"具有其一般含義，并且在本文特別地是指對(duì)可能罹 患癡呆或認(rèn)知功能障礙或者對(duì)本發(fā)明所述癡呆或認(rèn)知功能障礙具有罹患風(fēng)險(xiǎn)的哺乳動(dòng)物 采用本發(fā)明的聯(lián)合用藥物或藥盒產(chǎn)品進(jìn)行處理，W期對(duì)所述癡呆或認(rèn)知功能障礙產(chǎn)生防 止、預(yù)防、阻止、隔斷等作用。
[0040] 本文所用術(shù)語"藥學(xué)可接受的"通常是指制藥領(lǐng)域可使用，對(duì)產(chǎn)品或者對(duì)哺乳動(dòng)物 無害，或具有合理的或可接受的利益/風(fēng)險(xiǎn)比。
[0041] 本文所用術(shù)語"載體"或"賦形劑"可W是制藥領(lǐng)域中任何常規(guī)的載體和賦形劑。 具體的載體和賦形劑的選擇將取決于用于治療特定患者的給藥方式或疾病類型和狀態(tài)。用 于特定給藥模式的合適藥物組合物的制備方法完全在藥物領(lǐng)域技術(shù)人員的知識(shí)范圍內(nèi)。例 女口，可W作為藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的載體、賦形劑、稀釋劑、填 充劑、溶劑、支持劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體和潤(rùn)滑劑 等。必要時(shí)，還可W包括香味劑、防腐劑和甜味劑等。
[0042] 根據(jù)本發(fā)明，所述的藥物劑型包括但不限于；片劑、膠囊劑、顆粒劑、粉劑、注射液、 注射用粉劑、透皮貼劑、軟膏劑、凝膠劑、栓劑、口服溶液、口服混息液、注射用乳劑、口服乳 劑等、緩釋片劑、控釋片劑等。上述各種劑型的藥物均可W按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。
[0043] 本發(fā)明所述的六味地黃湯提取物能明顯改善癡呆模型小鼠的物體識(shí)別記憶能力、 空間學(xué)習(xí)記憶能力、被動(dòng)回避反應(yīng)能力和主動(dòng)回避反應(yīng)能力，可用于癡呆或認(rèn)知功能障礙 的預(yù)防和/或治療。
[0044] 尤其地，在家族遺傳性癡呆模型小鼠試驗(yàn)中，本發(fā)明的六味地黃湯提取物在各實(shí) 驗(yàn)中的治療作用普遍優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照藥物。

【具體實(shí)施方式】
[0045] 下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì) 理解，下列實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體 條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為 可W通過市購(gòu)獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
[0046] 本發(fā)明的癡呆模型小鼠分為兩類，一類屬于散發(fā)或自發(fā)型癡呆模型，為快速老化 模型小鼠 P 系（Senescence Accelerated Mouse-Prone)中 SAMP8 亞系，10 月齡，對(duì)照小鼠 為抗快速老化模型小鼠 R 系（Senescence Accelerated Mouse-Resistant)中 SAMRl 亞系， 10月齡，本實(shí)驗(yàn)自繁殖；一類屬于家族或遺傳型癡呆模型，為APPswe/PSldcg雙轉(zhuǎn)基因小鼠， 12月齡。野生型為巧7BL/6J小鼠，12月齡，購(gòu)自北京華阜康生物科技有限公司（SCXK北京 2009-0004)。
[0047] 本發(fā)明分別選取鹽酸美金剛和鹽酸多奈脈齊作為陽(yáng)性藥對(duì)照組，采用灌胃給藥。
[0048] 鹽酸多奈脈齊（北京偶合科技有限公司，120014-06-4)，分子式；C24肥9N03 ?肥1， 分子量;416 ;
[0049] 鹽酸美金剛。（北京偶合科技有限公司，41100-52-1)，分子式；C12肥IN,分子量： 216。
[0050] 本發(fā)明W六味地黃巧糖作為供試藥物，采用灌胃給藥，
[005。 該藥物參照中國(guó)發(fā)明專利CN1626228A中實(shí)施例1的方法制備得到。
[0052] 本發(fā)明的六味地黃巧糖進(jìn)行了 3批動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，連續(xù)給藥4個(gè)月。
[0053] 下述實(shí)施例中所用的藥物劑量如下：
[0054] 鹽酸多奈脈齊10毫克Ag體重，鹽酸美金剛30毫克Ag體重，六味地黃巧糖160 毫克Ag體重。
[00巧]連施例1.本發(fā)明的六味化黃巧糖對(duì)于快諫老化樽巧小鼠的物體識(shí)別巧能力的 燃
[0056] 1.材料
[0057] 1. 1動(dòng)物；快速老化模型小鼠SAMP8 (清潔級(jí)）和抗快速老化模型小鼠SAMRl (清 潔級(jí)），體重29?33g。
[0058] 1. 2試劑藥品：鹽酸多奈脈齊；鹽酸美金剛；六味地黃巧糖。
[0059] 1. 3實(shí)驗(yàn)儀器；訂制測(cè)試箱尺寸為30X30X30cm(寬X長(zhǎng)X高），箱體為黑色不 透明有機(jī)玻璃，箱底為透明有機(jī)玻璃。通過Anymaze軟件對(duì)小鼠探究物體視頻的采集。
[0060] 2.方法
[0061] 2.1給藥方法
[0062] 根據(jù)小鼠的體重，采取隨機(jī)分組的方法將小鼠分為五組；正常對(duì)照組（SAMR1型正 常小鼠），模型對(duì)照組（SAMP8型散發(fā)自發(fā)型癡呆模型小鼠），陽(yáng)性藥對(duì)照組（鹽酸多奈脈齊 組和鹽酸美金剛組），六味地黃巧糖組，每組10只。用藥劑量參照成人臨床劑量，鹽酸多奈 脈齊10毫克Ag體重，鹽酸美金剛30毫克Ag體重，六味地黃巧糖160毫克Ag體重，均 W去離子水為溶劑配成溶液對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃，每日1次，每次按小鼠體重0. Olml/g，正常溶 劑對(duì)照組和模型溶劑對(duì)照組則W等體積去離子水灌胃，其中正常溶劑對(duì)照組是指正常小鼠 給予去離子水為溶劑作為對(duì)照，模型溶劑對(duì)照組是指模型小鼠給予去離子水為溶劑作為對(duì) 照。
[0063] 2. 2新異物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)
[0064] 實(shí)驗(yàn)開始前對(duì)Anymaze軟件進(jìn)行設(shè)置，并檢測(cè)其工作狀態(tài)是否正常。
[0065] 適應(yīng)期；將每只小鼠放入不含測(cè)試物體的測(cè)試箱內(nèi)20min，小鼠自由活動(dòng)，W適應(yīng) 新環(huán)境。兩小鼠之間需對(duì)箱體內(nèi)的環(huán)境進(jìn)行必要的清理，除去異味，供識(shí)別物體使用5%酒 精擦拭，箱體使用自來水清潔。
[0066] 學(xué)習(xí)期：將兩個(gè)相同的物體分別標(biāo)記為a和b，放入箱體兩端一側(cè)，分別將每 一組小鼠放入測(cè)試箱體另一側(cè)中央。分別累計(jì)16min內(nèi)小鼠探查兩個(gè)物體各自總時(shí)間 巧xploratcxry Time) ;Tal和化。判斷標(biāo)準(zhǔn)為；小鼠面向物體，鼻子觸碰或者貼近物體距離 小于1cm。任何非正面身體與物體接觸，或者越過、爬上物體眺望均不計(jì)入小鼠探查物體時(shí) 間。
[0067] 測(cè)試期：分為短時(shí)記憶與長(zhǎng)期記憶兩階段考察。短時(shí)記憶于訓(xùn)練期后1虹，長(zhǎng)時(shí)記 憶則于訓(xùn)練期2化r或者更長(zhǎng)時(shí)間（根據(jù)具體情況選擇時(shí)間的長(zhǎng)短，短期記憶或者長(zhǎng)期記 憶也可根據(jù)情況進(jìn)行選擇）。將兩個(gè)相同物體之一 b替換為新物體（Novel object)c，其 他條件不變。依次將小鼠放入測(cè)試箱內(nèi)，分別累計(jì)4min內(nèi)小鼠探查新舊物體各自總時(shí)間 巧xploratoiT Time) ;Ta2和TcdW優(yōu)先指數(shù)Preferential index(P. I) = (T c/(Ta2+Tc)) 作為小鼠認(rèn)知功能的指標(biāo)。該指標(biāo)越高代表小鼠的記憶能力越高。正常小鼠優(yōu)先指數(shù)在 70% 社。
[0068] 2. 3統(tǒng)計(jì)方法
[0069] 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理；數(shù)據(jù)W均數(shù)+標(biāo)準(zhǔn)差（玉±S )表示，采用GraphPad 5. 03軟件進(jìn)行統(tǒng) 計(jì)分析。
[0070] 3.結(jié)果
[0071] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果詳見表1。
[0072] 表1各給藥組對(duì)癡呆模型小鼠（SAMP8和SAMR1)新異物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)中優(yōu)先指數(shù)的 影響（免tS，n = 10)
[0073]

【權(quán)利要求】
1. 六味地黃湯提取物在制備預(yù)防和/或治療癡呆或認(rèn)知功能障礙的藥物中的用途。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述六味地黃湯的原料藥由熟地黃、山茱萸、 山藥、澤瀉、牡丹皮和茯苓六味中藥配伍組成，優(yōu)選地，按照（8. 8?7. 3) :(4. 4?3.6): (4. 4?3. 6) : (3. 3?2. 7) : (3. 3?2. 7) : (3. 3?2. 7)的重量比例配伍組成，特別優(yōu)選地， 按照8 :4 :4 :3 :3 :3的重量比例配伍組成。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用途，其中所述六味地黃湯提取物包括11. 4-17. 0重 量％的多糖，1. 85-2. 27重量％的糖苷以及23. 5-35. 5重量％的寡糖。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其中所述的多糖含有鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳 糖和半乳糖醛酸。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其中所述的糖苷含有莫諾苷、馬錢素和芍藥苷。
6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其中所述的寡糖為甘露三糖。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的用途，其中所述六味地黃湯提取物的制備方法包括 以下步驟： i )將由熟地黃、山茱萸、山藥、澤瀉、丹皮和茯苓按（8.8?7. 3) :(4.4?3.6): (4. 4?3. 6) : (3. 3?2. 7) : (3. 3?2. 7) : (3. 3?2. 7)的重量比例組成的混合物，優(yōu)選地， 按8 :4 :4 :3 :3 :3組成的混合物用水蒸煮一次或多次（例如兩次或三次），然后濃縮至浸 膏； ? )伴隨攪拌往浸膏中加入(；_4烷基醇至濃度10-40% (v/v)(例如25-35% v/v，例如 30% v/v)，放置，離心，以及任選的沖洗的步驟，將離心所得上清液與任選的洗液合并為上 清液； iii )濃縮上清液，伴隨攪拌往濃縮液中加入(V4烷基醇至濃度50-95 % (v/v)(例如 55-80% v/v，例如60 % v/v)，放置，分離得部位A和上清液； iv)將iii)中上清液進(jìn)行大孔吸附樹脂柱層析，用水和極性有機(jī)溶劑依次洗脫，極性有 機(jī)溶劑洗脫液濃縮后得部位B ; v )將iv)中水洗脫液濃縮后上活性炭柱，用水和極性有機(jī)溶劑依次洗脫，極性有機(jī)溶 劑洗脫液濃縮后得部位C ; vi )將iii )中部位A，iv )中部位B和v )中部位C合并即得到所述六味地黃湯提取 物。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的用途，其中所述藥物還含有藥學(xué)上可接受的載體或 賦形劑。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的用途，所述癡呆和/或認(rèn)知功能障礙選自⑴中樞神 經(jīng)系統(tǒng)變性疾?。喊柎暮Ｄ　⑤p度認(rèn)知障礙、額-顳葉癡呆、Prion病、路易體癡呆、帕 金森病、亨廷頓??；⑵非變性病癡呆：①血管性癡呆；②占位性病變引起的癡呆：腫瘤、慢性 硬膜下血腫、慢性腦膿腫引起的癡呆；③感染引起的癡呆：腦膜腦炎、神經(jīng)梅毒、艾滋病、阮 蛋白病引起的癡呆；④腦外傷性癡呆；⑤正常顱壓性腦積水引起的癡呆；⑥內(nèi)分泌代謝障 礙引起的癡呆：內(nèi)分泌障礙、庫(kù)欣綜合征、高胰島素血癥、甲狀腺功能低下、垂體功能減退、 低血糖、肝功能衰竭、腎衰竭、肺功能衰竭、慢性電解質(zhì)紊亂、血卟啉病、維生素（B1、煙酸、葉 酸、維生素 B12等）缺乏引起的癡呆；⑦中毒、缺氧（酒精、重金屬、一氧化碳、藥物、缺氧等） 引起的癡呆；⑧副腫瘤綜合征引起的癡呆。
【文檔編號(hào)】A61K36/8945GK104225167SQ201410551142
【公開日】2014年12月24日 申請(qǐng)日期:2014年10月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月17日
【發(fā)明者】張永祥, 周文霞, 程肖蕊, 王健輝, 曾菊, 徐一冉, 張小銳, 劉港, 程軍平 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所