專利名稱：抗乙肝復方制劑及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及復方中草藥制劑，特別涉及一種抗乙肝復方制劑及其制備方法和應用。
背景技術：
病毒性乙型肝炎是一種發(fā)病率高、傳染性強、難治療的一種疾病，常規(guī)的藥物難以徹底治愈，主要是因為乙肝病毒具有極強的生存能力和復制速度，目前尚未有一種特效藥可完全阻斷其復制。治療肝炎的藥物主要有三類護肝藥、調節(jié)免疫機能藥和抗病毒藥。護肝片、拉米夫定和干擾素是臨床上用于乙肝疾病治療的常用藥物，可保護肝臟、抑制乙肝病毒的復制和進行免疫調節(jié)，但總體療效不佳，乙肝病毒抑制率僅30～40％，導致疾病遷延不愈，并出現(xiàn)停藥后的反跳現(xiàn)象。從天然植物中尋求抗乙肝病毒藥物成為研究熱點。
葉下珠(Phyllanthus urinaria L)是近年來發(fā)現(xiàn)的具有較強抑制乙肝病毒復制的中草藥。葉下珠為大戟科油柑屬植物葉下珠的地上部分，含有山茶素、槲皮素、沒食子酸、鞣花酸等多種化合物(姚慶強，藥學學報，1993，28(11)829～835)。Thyag arjan SP，etal在Effect of Phyllanthus amarus on carriers ofHepatitis B virus，Lancet，1988，1764～766中報道了葉下珠具有顯著抗乙肝病毒效果。專利CN1088105A、CN1079258C、CN1238211A、CN1457797A、CN1608665A、CN1709451A中均報道了葉下珠單味藥經乙醇、甲醇或樹脂純化具有更佳的抗乙肝病毒效果。但是由于乙肝病人同時伴有免疫力低下，單一抗病毒藥物不能達到徹底治愈和防止復發(fā)的目的。專利CN1069195A、CN1194849A、CN1273852A、CN1281701A、CN1319411A、CN1321480A、CN1371726A、CN1373832A、CN1375325A、CN1425417A、CN1430991A、CN1593472A、CN1682814A、CN1698812A、CN1730023A、CN1814049A等以葉下珠與虎杖、茵陳、柴胡、丹參、苦參、白花蛇舌草、旱蓮草、白術、甘草、黃芪等組成復方制劑，雖然兼顧了扶正祛邪，但藥味過多，藥量過大，也相對降低了治療效果。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術存在的缺陷，提供一種抗乙肝復方制劑，由葉下珠和人參兩味制成制劑。簡化復方，提取復方有效部位作為制劑，可大大減少用藥劑量，提高療效。
本發(fā)明的另一目的是提供所述制劑的制備方法。
本發(fā)明的再一目的是提供所述制劑在制備藥物中的應用。
本發(fā)明的一種抗乙肝復方制劑，由下述按重量份計的原料制成葉下珠15～30；人參1～5。
所述的抗乙肝復方制劑的制備方法包括以下步驟(1)將葉下珠、人參中藥材或粉碎物混合，用熱水浸提，水溫80～100℃，提取時間1～2小時，過濾或離心分離去藥渣，保留提取液；熱水浸提重復提取2～3次，合并提取液；(2)調節(jié)pH值為2～5，靜置沉淀，過濾或離心分離去沉淀，得到上清液；(3)上清液經大孔樹脂吸附后，用有機溶劑洗脫得洗脫液；(4)將洗脫液減壓濃縮、干燥后，粉碎成細粉；(5)將所得細粉添加輔型劑后，制成制劑。
本發(fā)明的優(yōu)選方案如下步驟(1)中所述的熱水浸提時，葉下珠、人參中藥材或粉碎物混合物與水的重量比第一次為1∶8～12，第二次為1∶4～6，第三次為1∶4～6。
步驟(2)中調節(jié)pH值所用試劑為鹽酸或醋酸。
步驟(3)中所述的大孔樹脂為非極性或弱極性的大孔樹脂；所用有機溶劑是乙醇水溶液或丙酮水溶液。
步驟(4)中的干燥為真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥。
所述的制劑可以用于制備治療或預防乙肝大小三陽的藥物。
本發(fā)明的制劑，由葉下珠和人參兩味主藥制成，方中利用葉下珠的極強的抑制病毒活性和人參的增強免疫性，使乙肝病毒患者攜帶的乙肝病毒及時得到清除，并同時提高了機體的免疫力。
通過步驟(5)可以制成任何一種藥劑學上包括的劑型。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比具有如下優(yōu)點(1)采用80～100℃浸提2～3次，每次1～2小時，可以盡可能提高藥材中有效成分的轉移率；(2)采用調酸法，除去酸不溶物，提高大孔樹脂的吸附效果；(3)采用大孔樹脂對提取液中活性成分的精制，可以有效地純化葉下珠、人參的有效部位(葉下珠多酚和人參皂甙總含量達60％以上)，便于工業(yè)化生產；(4)將虎杖根、藤梨根、水楊梅根的有效部位按一定比例混合制成制劑，可有效提高生物利用率，提高藥效；(5)填補了葉下珠復方有效部位分離提取及制劑的缺乏，開發(fā)出一種新型的抗腫瘤有效部位或有效成分制劑。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發(fā)明作進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不限于此。
實施例1葉下珠3Kg、人參100g，粉碎成粗粉，加入100℃沸水36L，計時浸提90分鐘，期間保持加熱，維持微沸狀態(tài)。過濾，濾渣再加入100℃沸水18L，計時浸提60分鐘，期間保持加熱，維持微沸狀態(tài)。過濾，棄濾渣，合并兩次的濾液，濾液經常壓濃縮至熱比重1.05，用10％HCl調pH至2，靜置，離心去沉淀(3000轉/分鐘，10分鐘)，上清液經過大孔樹脂HPD100，以70％乙醇水溶液洗脫被吸附的藥材有效成分，洗脫液減壓回收乙醇(真空度大于0.04Mpa)，殘留物真空干燥(真空度大于0.01Mpa)，干燥時間3小時。共制得干燥品436g。此干燥品中多酚化合物含量68％，皂甙含量2.5％。
實施例2葉下珠3Kg、人參1Kg，粉碎成粗粉，加入100℃沸水32L，計時浸提120分鐘，期間保持加熱，維持微沸狀態(tài)。離心(3000轉/分鐘，10分鐘)，濾渣再加入100℃沸水16L，計時浸提120分鐘，期間保持加熱，維持微沸狀態(tài)。離心(3000轉/分鐘，15分鐘)，棄濾渣，合并兩次的離心液，用5％HCl調pH至5，靜置，過濾去沉淀，上清液經過大孔樹脂HPD300，以80％丙酮水溶液洗脫被吸附的藥材有效成分，洗脫液減壓回收乙醇(真空度大于0.04Mpa)，殘留物冷凍干燥，溫度-50℃，干燥時間24小時。共制得干燥品528g。此干燥品中多酚化合物含量56％，皂甙含量23％。
實例3葉下珠3Kg、人參500g，經粉碎成粗粉，加入100℃沸水35L，計時浸提60分鐘，期間保持加熱，維持微沸狀態(tài)。過濾，濾渣再加入100℃沸水14L，計時浸提60分鐘，期間保持加熱，維持微沸狀態(tài)。過濾，濾渣再加入100℃沸水14L，計時浸提60分鐘，期間保持加熱，維持微沸狀態(tài)。過濾，棄濾渣，合并三次的濾液，濾液經減壓濃縮至熱比重1.05(真空度大于0.04Mpa)，用20％醋酸1調pH至3，靜置，離心去沉淀(3000轉/分鐘，10分鐘)，上清液經過大孔樹脂HPD600，以60％乙醇水溶液洗脫被吸附的藥材有效成分，洗脫液減壓回收乙醇(真空度大于0.04Mpa)，殘留物噴霧干燥，進風溫度180℃，出口溫度90℃。共制得干燥品479g。此干燥品中多酚化合物含量62％，皂甙含量11％。
實施例4葉下珠3Kg、人參200g，粉碎成粗粉，加入80℃水32L，計時浸提90分鐘，期間保持加熱，維持80℃。過濾，濾渣再加入80℃水16L，計時浸提60分鐘，期間保持加熱，維持80℃。過濾，棄濾渣，合并兩次的濾液，濾液經常壓濃縮至熱比重1.05，用10％HCl調pH至2，靜置，離心去沉淀(3000轉/分鐘，10分鐘)，上清液經過大孔樹脂D101，以80％乙醇水溶液洗脫被吸附的藥材有效成分，洗脫液減壓回收乙醇(真空度大于0.04Mpa)，殘留物真空干燥(真空度大于0.01Mpa)，干燥時間4小時。共制得干燥品450g。此干燥品中多酚化合物含量65％，皂甙含量5.2％。
實施例5稱取實施例1制得的有效部位干燥品300g，加入藥用淀粉、糖粉和糊精質量比7∶2∶1混合物600g，混合均勻，濕法制粒，用水調節(jié)，制得顆粒松散，便于壓片狀態(tài)，過20目篩，晾干。加4.5g硬脂酸鎂，壓片，即得復方葉下珠和人參有效部位的片劑。
實施例6稱取實施例2制得的有效部位干燥品300g，加入藥用微晶纖維素600g，混合均勻，濕法制粒，用水調節(jié)，制得顆粒松散過20目篩，晾干。干燥后填充膠囊。即得復方葉下珠和人參有效部位膠囊劑。
實施例7稱取實施例3制得的有效部位干燥品300g，加入1.8Kg PEG6000，加熱至60℃熔化后混合均勻，置于滴丸機內，用液體石蠟致冷，滴丸。冷卻即得復方葉下珠和人參有效部位的滴丸劑。
實施例8稱取實施例4制得的有效部位干燥品300g，加入600g甘露醇，用滅菌水溶解后，過0.3μm微孔濾膜，罐裝入安培瓶中，-50℃冷凍干燥24小時，即得復方葉下珠和人參有效部位的凍干粉針劑。
實施例制備得到的制劑用于藥效實驗實驗1鴨體內乙肝病毒抑制效果方法用HBV-DNA陽性血清注射雛鴨造模，將其分為5組，每組10只。分別口服給藥實施例1制備的干燥品100、200、400mg/kg，陽性組阿昔洛韋100mg/kg，生理鹽水為陰性對照組。用藥30天，分別于藥前，藥后15天、30天及停藥后7天，靜脈采血，分離血清-20℃保存。生化測定ALT，AST，HBV-DNA滴度。
結果用藥后15天各劑量組血清ALT，AST及HBV-DNA滴度顯著降低(P＜0.05)，且隨用藥劑量增大，降低效果顯著。當劑量大于200mg/kg，或用藥時間30天，以上指標降低極顯著(P＜0.01)。停藥7天未有顯著性升高。
實驗2小鼠免疫球蛋白的增強效果方法昆明種小鼠40只，雌雄各半，隨機分成4組，每組10只。分別灌胃給藥實施例8制備的凍干粉針劑100、200、400mg/kg，以生理鹽水為陰性對照。給藥15天，摘眼球取血，分離血清，測定IgG、IgA、IgM含量。
結果與對照組相比，給藥組IgG、IgA、IgM含量均有顯著性升高，并隨劑量增加而升高。
實驗3乙肝大小三陽患者用藥效果方法大三陽患者30，小三陽患者50例，服用實施例6制備的膠囊制劑，每膠囊含提取物100mg，每日2次，每次2粒，持續(xù)服用180天。于服藥前、服藥后3，6，9個月分別取靜脈血測定乙肝三系。
結果有效率85％，均在服藥3個月后出現(xiàn)HBsAg滴度下降。45％患者服藥6個月后HBsAg陰轉，30％患者服藥9個月后抗HBs陽性。
權利要求
1.一種抗乙肝復方制劑，其特征在于由下述按重量份計的原料制成葉下珠15～30；人參1～5。
2.權利要求1所述的抗乙肝復方制劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)將葉下珠、人參中藥材或粉碎物混合，用熱水浸提，水溫80～100℃，提取時間1～2小時，過濾或離心分離去藥渣，保留提取液；熱水浸提重復提取2～3次，合并提取液；(2)調節(jié)pH值為2～5，靜置沉淀，過濾或離心分離去沉淀，得到上清液；(3)上清液經大孔樹脂吸附后，用有機溶劑洗脫得洗脫液；(4)將洗脫液減壓濃縮、干燥后，粉碎成細粉；(5)將所得細粉添加輔型劑后，制成制劑。
3.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于步驟(1)中所述的熱水浸提時，葉下珠、人參中藥材或粉碎物混合物與水的重量比第一次為1∶8～12，第二次為1∶4～6，第三次為1∶4～6。
4.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于所述步驟(2)中調節(jié)pH值所用試劑為鹽酸或醋酸。
5.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于所述步驟(3)中所述的大孔樹脂為非極性或弱極性的大孔樹脂；所用有機溶劑是乙醇水溶液或丙酮水溶液。
6.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于所述步驟(4)中的干燥為真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥。
7.權利要求1所述的制劑在制備治療或預防乙肝大小三陽的藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種抗乙肝復方制劑，由下述按重量份計的原料制成葉下珠15～30；人參1～5。本發(fā)明還提供一種上述制劑的制備方法，包括將葉下珠、人參中藥材或粉碎物混合，用熱水浸提，得到提取液；調節(jié)pH值，得到上清液；將上清液經大孔樹脂吸附后，用有機溶劑洗脫；將洗脫液減壓濃縮、干燥后，粉碎成細粉；將所得細粉添加輔型劑后，制成片劑、膠囊劑或凍干粉；本發(fā)明制劑可以用于制備治療或預防乙肝大、小三陽的藥劑，應用于治療或預防乙肝疾病。
文檔編號A61P31/00GK1965883SQ20061012367
公開日2007年5月23日 申請日期2006年11月21日 優(yōu)先權日2006年11月21日
發(fā)明者葉勇 申請人:華南理工大學