專利名稱：非索非那定的外用制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥制劑技術(shù)。
背景技術(shù)：
近年來，由于氣候和環(huán)境的變化，各種有害氣體、粉塵及其他污染源的大量涌現(xiàn)，使其成為導(dǎo)致人們產(chǎn)生各種過敏反應(yīng)的致敏原。季節(jié)的變遷，野外作業(yè)，花粉過敏，吸入有害氣體及塵粒等，造成越來越多的人群患有各種不同類型的過敏性疾病，如過敏性鼻炎，蕁麻疹，皮膚紅腫、瘙癢、起紅點及過敏原引起的哮喘等極為常見。因此，注意環(huán)境變化，加強自身護(hù)理，開發(fā)治療過敏性藥物都是非常重要的。
非索非那定由(德)Hoechst Marion Roussel公司開發(fā)，1996年首次在美國上市，1997年3月在英國上市，它為一口服有效的第三代抗組胺藥，具有選擇性抑制外周H1受體的作用，非索非那定作為一種強效抗過敏藥，具有以下優(yōu)點1)臨床療效好，作用選擇性強，從長遠(yuǎn)考慮，非索非那定比氯雷他定能更好地改善病人的生活質(zhì)量。
2)作用迅速，作用時間持久，一天只需服用一次，提高了病人的依從性。
3)副作用小，無心臟毒性作用，無鎮(zhèn)靜作用，在美國為飛行員推薦使用的藥物。而另一個第三代抗組胺藥物-西替利嗪則有較弱的鎮(zhèn)靜作用。
4)非索非那定是特非那定在人體肝臟的代謝產(chǎn)物，直接使用前者，可減輕藥物對肝臟的損傷，因而它適用于肝衰患者。
雖然非索非那定有著上述優(yōu)良的特點，但現(xiàn)今臨床上對一些比較頑固的皮膚過敏性疾病、皮炎尚沒有很理想的治療藥物。越來越多的化學(xué)物質(zhì)導(dǎo)致的環(huán)境污染，使得現(xiàn)代工業(yè)社會中皮膚過敏和皮炎的發(fā)病率居高不下，多少年來，人們一直在努力開發(fā)療效強大的抗過敏和抗炎藥物，以便對現(xiàn)代工業(yè)社會中經(jīng)常出現(xiàn)的皮膚過敏和皮膚炎癥進(jìn)行有效的治療，非索非那定經(jīng)胃腸道吸收后，經(jīng)血液循環(huán)到達(dá)皮膚，雖然能夠達(dá)到一定的治療效果，但服藥后抗組胺作用起效慢，皮膚表層組織中的濃度相對較低。
非索非那定可以長效、強力特異性地競爭外周H1受體，阻斷組胺的作用。但在皮膚表層組織中的濃度相對較低。組胺是變態(tài)反應(yīng)的主要介質(zhì)，組胺主要由肥大細(xì)胞和嗜堿細(xì)胞等釋出組氨酸，后者經(jīng)酶脫羧變?yōu)榻M胺。在很多皮膚變態(tài)反應(yīng)均涉及到的皮膚風(fēng)團(tuán)和紅斑反應(yīng)中，組胺起到很重要的作用，它具有對血管的直接效應(yīng)，舒張血管和增強微血管的通透性以及導(dǎo)致廣范圍的神經(jīng)原性的紅斑反應(yīng)。組胺H1受體拮抗劑能與組胺競爭效應(yīng)細(xì)胞上的組胺H1受體，使組胺不能同H1受體結(jié)合，從而抑制其引起的過敏反應(yīng)。非索非那定為第三代抗組胺藥，具有較強極性，不易通過血腦屏障，因而沒有早期強親脂性抗組胺藥的明顯嗜睡作用，非索非那定對周圍器官細(xì)胞表面的H1受體比中樞H1受體的親和力高，即對外周H1受體具有高度選擇性，優(yōu)點為中樞鎮(zhèn)靜作用大大降低。由于非索非那定在血流相對較少的皮膚表層組織中的濃度分布相對較低，這對于變態(tài)反應(yīng)性皮膚病的治療是十分不利的。
非索非那定是具有選擇性拮抗外周H1受體作用的抗組胺劑，其對映異構(gòu)體都顯示出大約均等的抗組胺作用。非索非那定可抑制從大鼠腹膜桿細(xì)胞中釋放的組胺，同時對抗膽堿能、α-腎上腺素能或β-腎上腺素能受體無阻滯作用，用放射性同位素給組織分布示蹤的研究顯示非索非那定不能穿過血-腦屏障。
非索非那定自上市以來，臨床上多用于治療過敏性鼻炎。對于緩解與過敏性鼻炎有關(guān)的癥狀如噴嚏、流涕及鼻癢、鼻塞以及眼部癢及燒灼感，臨床效果好?？诜o藥后，鼻和眼部癥狀及體征得以迅速緩解，亦適用于緩解慢性蕁麻疹，瘙癢性皮膚病及其他過敏性皮膚病的癥狀及體征。非索非那定顯示了很好的臨床治療效果，目前被批準(zhǔn)用于治療季節(jié)性過敏性鼻炎和慢性特發(fā)性蕁麻疹，該藥成為治療上述疾病的一線藥物。國外臨床試驗顯示在緩解季節(jié)性過敏性鼻炎的療效評價中，非索非那定60mg/次(2次/日)或120mg/次(1次/日)的療效同10mg/次(1次/日)的氯雷他定相當(dāng)；120mg/次(1次/日)的療效同10mg/次(1次/日)的西替利嗪相當(dāng)。從長遠(yuǎn)考慮，非索非那定比氯雷他定能更好地改善病人的生活質(zhì)量。

發(fā)明內(nèi)容
對于非索非那定的口服制劑，主要是通過胃腸道吸收后，再通過血液循環(huán)分布于皮膚的真皮組織中，從而拮抗炎癥介質(zhì)組胺的作用。達(dá)到對全身皮膚過敏性炎癥的治療作用。皮膚組織的血流分布相對較少，這使得非索非那定的組織分布很不利于它對皮膚過敏性疾病和皮炎的治療，口服途徑大劑量應(yīng)用對皮膚疾病而言可能存在嚴(yán)重的全身不良反應(yīng)的危險，是一種十分不理想的給藥方式。而對于臨床上常見的皮膚過敏和皮膚炎癥，其發(fā)病機理也很復(fù)雜，并不單單是由組胺介導(dǎo)的，因而現(xiàn)有的臨床治療藥物中，對皮膚過敏和皮膚炎癥的治療效果都不是十分理想。對皮膚過敏性疾病尋找一種理想的治療藥物或者藥物劑型，是廣大皮膚病患者所急需的。本發(fā)明提供了幾種非索非那定外用制劑，動物實驗發(fā)現(xiàn)，和非索非那定口服途徑給藥相比較，非索非那定的外用制劑對幾種皮膚過敏模型有著意想不到的效果。
將非索非那定制備成局部外用制劑，通過透皮吸收，增加機體過敏炎癥部位皮膚的局部組織游離藥物濃度，可有效拮抗組胺的致敏作用，更好發(fā)揮其局部抗過敏和抗炎療效，降低不良反應(yīng)。但非索非那定很難通過皮膚的角質(zhì)層，只能夠停留在皮膚的表面，現(xiàn)有技術(shù)認(rèn)為它外用不可能透過皮膚角質(zhì)層，不能在皮膚組織中達(dá)到有效的組織濃度，因而無法發(fā)揮其抗過敏和抗炎的療效。因此非索非那定1996年首次在美國上市后的近十年來，卻一直未見外用制劑上市。我們克服了現(xiàn)有技術(shù)中認(rèn)為它外用不可能透過皮膚角質(zhì)層，不能在皮膚組織中達(dá)到有效的組織濃度的技術(shù)偏見，將非索非那定制備成為可以外用的搽劑、軟膏劑等劑型，并進(jìn)一步通過大量的藥理學(xué)實驗證實了非索非那定皮膚表面的局部應(yīng)用，能夠更為有效的發(fā)揮非索非那定的抗組胺活性，尤其值得關(guān)注的是我們在藥效學(xué)實驗中意外的發(fā)現(xiàn)，非索非那定的外用制劑不僅對組胺誘導(dǎo)的皮膚過敏有著強大的拮抗作用，而且對以二硝基氟苯為代表的化學(xué)物質(zhì)導(dǎo)致的皮膚遲發(fā)性超敏反應(yīng)也有相當(dāng)理想的效果，對二甲苯所致的小鼠耳急性炎癥效果也相當(dāng)理想，而這在全身給藥途徑中，沒有任何的跡象能夠提示非索非那定具有此種藥理學(xué)活性。非索非那定的外用途徑給藥方式能夠?qū)ζつw的遲發(fā)性超敏反應(yīng)有著良好的治療作用，這意味著非索非那定外用制劑對臨床常見的各種化學(xué)物質(zhì)導(dǎo)致的慢性皮膚炎癥有著很好的應(yīng)用前景，解決了多年來臨床對皮膚炎癥沒有理想治療藥物的問題，符合廣大患者的利益。而這種非索非那定新的藥理活性的發(fā)現(xiàn)，對于非索非那定的藥理作用機制研究也具有重要的啟示意義。
我們根據(jù)鹽酸非索非那定的理化性質(zhì)，在實驗過程中篩選到合適的輔料，發(fā)明制備了鹽酸非索非那定的搽劑和軟膏劑兩種非索非那定的外用制劑。在搽劑的處方中選擇了乙醇、丙二醇和蒸餾水、磷酸鹽緩沖液作為搽劑的基本成分，我們在實驗中選擇了羧甲基纖維素、甘油、尼泊金乙酯、尿素、卡波普940、吐溫80、三乙醇胺和蒸餾水用來制備軟膏劑。
具體實施例方式
1.非索非那定外用制劑抗過敏炎癥作用研究實驗?zāi)康臑榱蓑炞C非索非那定搽劑和軟膏劑對大鼠同種被動皮膚過敏反應(yīng)(Rat PCA)模型的抗過敏作用、對小鼠耳二甲苯致炎模型的抗炎作用以及對二硝基氟苯誘導(dǎo)的遲發(fā)性超敏反應(yīng)的影響。
受試藥物采用上述處方制備的非索非那定搽劑和軟膏劑。
組別設(shè)置設(shè)立正常對照組、模型對照組和灌胃給藥對照組，對非索非那定的兩種外用制劑，即搽劑和軟膏劑分別設(shè)高、低劑量組。外用制劑高、低劑量組的濃度分別為60mg/ml和18mg/ml，灌胃對照組的給藥劑量為，大鼠7.2mg/kg，小鼠9.0mg/kg。
操作步驟1.非索非那定外用制劑對大鼠同種被動皮膚過敏反應(yīng)(PCA)的影響將致敏大鼠的血清(內(nèi)含豐富的IgE抗體)皮內(nèi)注射于正常大鼠腹壁或背部，每點形成一皮丘。IgE與局部皮膚肥大細(xì)胞的Fc受體結(jié)合，使之被動致敏。當(dāng)抗原攻擊時，引起局部肥大細(xì)胞釋放過敏介質(zhì)，從而使局部血管的通透性增加，注入伊文思藍(lán)，可滲出于皮丘內(nèi)，形成一個籃斑。根據(jù)籃斑范圍或深淺程度，判定血管通透性變化，以反映皮膚過敏反應(yīng)的程度。
抗血清的制備 取體重90-100g的健康大鼠8只，后大腿兩側(cè)肌肉注射經(jīng)Na2SO4重結(jié)晶3-5次的卵白蛋白(10mg/kg)，同時腹腔注射百日咳三聯(lián)疫苗2×1010/只。致敏后10-14天，處死動物采血，經(jīng)低速離心，分離血清，置-40℃冰箱備用。
被動皮膚致敏及抗原攻擊 另取體重150-200g健康大鼠90只，按體重隨機分為正常對照組、模型組、搽劑高劑量組、搽劑低劑量組、軟膏劑高劑量組、軟膏劑低劑量組和灌胃對照組。將大鼠在麻醉狀態(tài)下剪去背部的毛，將稀釋的抗血清(稀釋度為1∶6)皮內(nèi)注射于鼠背部致敏，共注射四點，每點0.1ml。48小時后進(jìn)行抗原攻擊，靜脈注射1ml0.5％伊文思藍(lán)溶液，內(nèi)含卵白蛋白1mg。外用制劑各劑量組于攻擊前30分鐘在致敏皮膚部位涂抹非索非那定外用制劑適量。灌胃對照組在攻擊前30分鐘灌胃1.2mg/kg。攻擊30分鐘后斷頭處死動物，收集血樣1.0ml，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液50μl，混合后加入1mol·L-1氫氧化鈉溶液0.1ml，加入甲基叔丁基醚-正己烷(1∶1)3ml，漩渦混合5min，離心4000r·min-110min，取上清液(有機層)，水層用甲基叔丁基醚-正己烷(1∶1)2ml同上再提取一次，合并有機層，置離心管中加入1.0mol·L-1鹽酸溶液3ml，漩渦混合、離心取水層，加入10mol·L-1氫氧化鈉溶液0.5ml，搖勻，加入甲基叔丁基醚-正己烷(1∶1)3ml，振搖3min，離心10min，取上清液，60℃水浴中氮氣吹干。殘渣加流動相50μl，漩渦振搖1min，高速離心12000r·min-110min，取上清夜20μl用高效液相色譜儀進(jìn)樣分析，測定非索非那定的血藥濃度。將皮膚籃斑剪下置于試管內(nèi)，加1mol/L KOH 1ml，37℃消化15小時，然后加磷酸丙酮混合液3.75ml，經(jīng)震蕩提取后，2500r/min離心10分鐘，取上清液用分光光度計在640nm處測定吸收度。
用下式計算PCA抑制百分率抑制百分率＝(模型組吸收度值一各用藥組吸收度值)/模型組吸收度值比較各組血藥濃度的差異。
2.非索非那定外用制劑對二甲苯致小鼠耳炎癥的影響取體重26-30g雄性小鼠80只，隨機分為模型組、搽劑高劑量組、搽劑低劑量組、軟膏劑高劑量組、軟膏劑低劑量組和灌胃對照組，每組10只。將二甲苯0.03-0.05ml滴于鼠右耳致炎，左耳作為對照。外用制劑各組分別在致炎后30分鐘涂抹相應(yīng)的非索非那定外用制劑適量，灌胃對照組在致炎30分鐘后經(jīng)灌胃給與非索非那定1.5mg/kg。2小時后將小鼠脫臼處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑8mm的打孔器分別在左、右耳同一部位打下圓耳片，稱重，求左、右耳片重量之差，作為腫脹度，比較組間差異顯著性。
3.非索非那定外用制劑對二硝基氟苯誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)性超敏反應(yīng)(PTH)的影響取體重18-22g小鼠60只，按體重隨機分為正常對照組、模型對照組、搽劑高劑量組、搽劑低劑量組、軟膏劑高劑量組、軟膏劑低劑量組和灌胃對照組，每組10只。剪去小鼠腹毛，腹部涂抹1％二硝基氟苯(DNFB)50μl致敏，致敏后第5天每只小鼠左耳廓涂抹1％DNFB5μl發(fā)敏，正常對照組同樣涂耳，但未致敏。外用制劑各劑量組分別在發(fā)敏后30分鐘涂抹相應(yīng)的非索非那定外用制劑適量，灌胃對照組在發(fā)敏30分鐘后經(jīng)灌胃給與非索非那定1.5mg/kg。24h后將小鼠脫臼處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑8mm的打孔器分別在左、右耳同一部位打下圓耳片，稱重，求左、右耳片重量之差，作為腫脹度，比較組間差異顯著性。
實驗結(jié)果1.非索非那定外用制劑對大鼠同種被動皮膚過敏反應(yīng)(PCA)的影響實驗結(jié)果表明，非索非那定的搽劑和軟膏劑對大鼠同種被動皮膚過敏反應(yīng)有著顯著的抑制作用，其效果顯著優(yōu)于灌胃對照組，而其血藥濃度卻顯著低于灌胃對照組。結(jié)果見表1。
表1，非索非那定的外用制劑與灌胃給藥對大鼠同種被動皮膚過敏反應(yīng)抑制作用和血藥濃度比較。

*與非索非那定的外用制劑各組相比較，P＜0.05。
注.各外用制劑的高劑量濃度為60mg/ml，低劑量濃度為18mg/ml。
2.非索非那定外用制劑對二甲苯致小鼠耳炎癥的影響實驗結(jié)果表明，非索非那定的搽劑和軟膏劑對二甲苯所致的小鼠耳炎癥有著很好的抑制作用，而灌胃給藥未見此抑制作用。結(jié)果見表2。
表2，非索非那定外用制劑和灌胃給藥對二甲苯所致的小鼠耳炎癥抑制作用的比較。


**與模型對照組比較，P＜0.01*與模型對照組比較，P＜0.05注.各外用制劑的高劑量濃度為60mg/ml，低劑量濃度為18mg/ml。
3.非索非那定外用制劑對二硝基氟苯誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)性超敏反應(yīng)(PTH)影響實驗結(jié)果表明，非索非那定的搽劑和軟膏劑對二硝基氟苯誘導(dǎo)的小鼠耳遲發(fā)性超敏反應(yīng)有著很好的抑制作用，而灌胃給藥未見此抑制作用。結(jié)果見表3。
表3，非索非那定外用制劑和灌胃給藥對二硝基氟苯誘導(dǎo)的小鼠耳遲發(fā)性超敏反應(yīng)抑制作用的比較。

**與模型對照組比較，P＜0.01*與模型對照組比較，P＜0.05注.各外用制劑的高劑量濃度為60mg/ml，低劑量濃度為18mg/ml。
討論我們通過采用大鼠同種被動皮膚過敏反應(yīng)(PCA)，二甲苯致小鼠耳炎癥和二硝基氟苯誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)性超敏反應(yīng)(PTH)三種模型對非索非那定外用制劑的藥效學(xué)進(jìn)行了實驗研究，發(fā)現(xiàn)非索非那定的外用制劑不僅對組胺誘導(dǎo)的皮膚過敏有著強大的拮抗作用，而且對以二硝基氟苯為代表的化學(xué)物質(zhì)導(dǎo)致的皮膚遲發(fā)性超敏反應(yīng)也有相當(dāng)理想的效果，對二甲苯所致的小鼠耳急性炎癥效果也相當(dāng)理想，而這在全身給藥途徑中，沒有任何的跡象能夠提示非索非那定具有此種藥理學(xué)活性。非索非那定的外用途徑給藥方式能夠?qū)ζつw的遲發(fā)性超敏反應(yīng)有著良好的治療作用，這意味著非索非那定外用制劑對臨床常見的各種化學(xué)物質(zhì)導(dǎo)致的慢性皮膚炎癥有著很好的應(yīng)用前景，解決了多年來臨床對皮膚炎癥沒有理想治療藥物的問題，符合廣大患者的利益。而這種非索非那定新的藥理活性的發(fā)現(xiàn)，對于非索非那定的藥理作用機制研究也具有重要的啟示意義。最近的基礎(chǔ)研究表明，皮膚角質(zhì)細(xì)胞在皮膚過敏性反應(yīng)和皮膚炎癥過程中扮演者重要的角色，但經(jīng)口服途徑給藥的非索非那定卻無法接觸到皮膚的角質(zhì)細(xì)胞，我們的研究結(jié)果提示，高劑量的非索非那定對角質(zhì)細(xì)胞活化可能具有抑制作用；二硝基氟苯誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)性超敏反應(yīng)(PTH)主要是由Th1細(xì)胞介導(dǎo)的，此次研究結(jié)果提示我們，局部高劑量的非索非那定對皮膚中Th1細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)可能具有重要的調(diào)節(jié)作用。這值得進(jìn)行進(jìn)一步的研究，對深入研究非索非那定等組胺受體拮抗劑的藥理活性和藥物作用機制具有重要的啟發(fā)意義。我們的實驗研究結(jié)果預(yù)示著非索非那定外用對以遲發(fā)性超敏反應(yīng)為主的慢性皮膚炎癥具有很好的治療效果，具有良好的臨床應(yīng)用前景。
2.非索非那定外用制劑的制備實施例1非索非那定搽劑非索非那定120g乙醇 35ml丙二醇180ml吐溫802g磷酸鹽緩沖液(PBS) 加至 1000ml制備工藝先將非索非那定溶于處方量的乙醇、丙二醇和吐溫80中，加入處方量的磷酸鹽緩沖液(PBS)即可。
實施例2
非索非那定搽劑非索非那定 60g乙醇 200ml丙二醇 500ml蒸餾水加至 1000ml制備工藝先將非索非那定溶于處方量的乙醇和丙二醇中，再用蒸餾水加至1000ml即可。
實施例1和實施例2所制備的搽劑裝入特定的容器(噴霧器或霧化器)內(nèi)，可以作為噴霧劑使用。
實施例3非索非那定的軟膏劑非索非那定 48g羧甲基纖維素 50g甘油 400g尼泊金乙酯 2g蒸餾水加至 1000g制備工藝將羧甲基纖維素與甘油混勻，然后加入溶解有處方量非索非那定的熱蒸餾水，放置待溶脹成凝膠后，再加入含有尼泊金乙酯的水溶液，加水至足量即可。
實施例4非索非那定的軟膏劑非索非那定 30g卡波普940 1g甘油65g吐溫80 2g尼泊金乙酯 0.5g三乙醇胺4g
蒸餾水加至 1000g制備工藝將處方量的卡波普加入到含有非索非那定的水溶液中，形成低粘度的酸性溶液，攪拌使非索非那定完全溶解，加入處方量的甘油、吐溫80和尼泊金乙酯后，用三乙醇胺調(diào)節(jié)PH值至7.0即可。
實施例5非索非那定的軟膏劑非索非那定 18g羧甲基纖維素 50g甘油 200g尼泊金乙酯 5g尿素 12g蒸餾水 加至 1000g制備工藝將羧甲基纖維素與甘油混勻，然后加入含有處方量非索非那定的熱蒸餾水，放置待溶脹成凝膠后，再加入含有尿素和尼泊金乙酯的水溶液，加水至足量即可。
實施例6非索非那定的氣霧劑非索非那定 60g乙醇 50ml二氯二氟甲烷 150g維生素C 7.5g無菌蒸餾水 加至 1000ml制備工藝將處方量的非索非那定、維生素C溶于無菌蒸餾水和乙醇的混合液中，砂芯漏斗過濾，用無菌蒸餾水加至1000ml，分劑量灌裝，封接劑量閥門系統(tǒng)，分別再加壓注入二氯二氟甲烷，即得。
權(quán)利要求
1.一種非索非那定的藥物應(yīng)用制劑，其特征在于它是一種用于皮膚過敏性疾病或皮膚慢性炎癥治療的局部外用制劑。
2.如權(quán)利要求1所述非索非那定的局部外用制劑，其特征在于它是搽劑、軟膏劑、噴霧劑或氣霧劑。
3.如權(quán)利要求2所述的軟膏劑，其特征在于它含有羧甲基纖維素、甘油和尼泊金乙酯。
4.如權(quán)利要求2所述的軟膏劑，其特征在于它含有卡波普940、甘油、尼泊金乙酯、吐溫80和三乙醇胺。
全文摘要
對各種皮膚過敏性疾病，目前尚沒有很好的治療藥物，我們克服了現(xiàn)有技術(shù)中認(rèn)為非索非那定外用不可能透過皮膚角質(zhì)層，不能在皮膚組織中達(dá)到有效的組織濃度的技術(shù)偏見，通過藥理學(xué)試驗證實非索非那定的外用制劑對大鼠同種被動皮膚過敏反應(yīng)(Rat PCA)模型和二甲苯致小鼠耳炎癥模型有著很好的抗過敏和抗炎作用，并能夠有效避免全身給藥引起的中樞系統(tǒng)不良反應(yīng)心臟毒性。本發(fā)明提供的非索非那定外用制劑均有著很好的藥物療效。
文檔編號A61K9/06GK1813732SQ20051012920
公開日2006年8月9日 申請日期2005年11月29日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月29日
發(fā)明者趙志全 申請人:魯南制藥集團(tuán)股份有限公司